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Monografa 507766
Convocatoria 2017
Resumen
El ajo es una hierba que se ha usado como hierba medicinal por ms de 5000 aos segn Wu
(2014). Es una planta que se ha demostrado que tiene poder bactericida, se ha descrito en ms de
4400 publicaciones cientficas, incluso el mismo Louis Pasteur la describi junto con sus
propiedades mdicas. Pero lo que se busca aqu es ver qu poder bactericida tiene y ver qu
propsito se le puede designar a dicha propiedad. El objetivo de esta monografa es comparar
contra un antibitico de patente (el ciprofloxacino) y se buscar inhibir crecimiento de
Escherichia Coli dentro de un agar nutritivo.
Las conclusiones que se encontraron fueron que hubo una diferencia significativa entre el
ajo y el Ciproflox siendo el ajo un mayor inhibidor (a esas concentraciones de cada
antibitico). Esto puede aplicarse de manera prctica para que el ajo sea usado como antibitico
tpico (dado que se ha demostrado su eficacia bactericida) y como auxiliar en la prevencin de
enfermedades gastrointestinales al ingerir ajo.
Nmero de palabras:264
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ndice
Introduccin
Captulo I
Captulo II
Hiptesis pg.7
Materiales pg.9
Metodologa pg.10
Conclusiones pg.16
Bibliografa pg.17
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Introduccin
si esta es efectiva. Para contestar a esa pregunta se desarroll dicho experimento que buscar
(generalmente conocido como ajo). Adems de ser una planta utilizada en la medicina tradicional
es una que ha sido ampliamente investigada por muchos cientficos (como el mismo Louis
(Johanna Fink-Gremmels et al. 2014). El ajo es tambin una planta que se usa como condimento
e ingrediente en la mayora de la gastronoma alrededor del mundo desde hace ms de 5000 aos
(Amgase 2006; Borlinghaus et al. 2014). El Allium sativum se ha usado tambin como
conservativos natural en carne animal, esto es porque tiene propiedades antioxidantes lo que
incrementa la vida de los productos animales debido a su efecto bactericida contra patgenos
zoonoticos producidos por bacteria como las siguientes (pero no limitado a): Staphylococci,
Salmonella y Escherichia Coli. Dicho lo anterior se pretende encontrar usos prcticos de las
Dado que el ciprofloxacino es un antibitico de espectro medio, dado que se usa para
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Captulo I
Marco Terico
El Allium sativum es una planta medicinal que ha sido utilizada extensamente para remediar
para muchos cientficos a travs de los aos (desde el mismo Louis Pasteur, hasta la modernidad)
derivados (Aguirrezbal et al. 2000; De Moura Olivera et al. 2005; Cao et al. 2013). Al tener, el
que no se encuentra en el ajo fresco. Este se obtiene cuando se masera el dicho; la aliina forma la
alicina cuando esto sucede (este proceso tambin ocurre cuando se mastica dicho alimento)
(Ankri and Mirelman, 1999). La CMI (Concentracin mnima inhibitoria) del ajo segn
El Ciproflox es un antibitico de patente que se utiliza para curar varias enfermedades, entre
bacterias que causen infecciones (Medline Plus, 2016). El ingrediente activo es ciprofloxacino,
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La Escherichia coli, de acuerdo al Centro para Control y Prevencin de Enfermedades
(CDC, 2015, por sus siglas en ingls), es una bacteria gram negativa que infecta el tracto
digestivo de los seres humanos al producir una toxina llamada shiga (es producida slo por
ciertas variantes de la bacteria a los que se les llama STEC por sus siglas en ingls shiga toxin-
producing E. coli) que causa malestar estomacal. Los principales sntomas son calambres en el
La bacteria de la E. coli (especficamente las cepas que son clasificadas como STEC) es
sumamente peligrosa puesto que la gente de cualquier edad se puede enfermar al entrar en
contacto con heces humanas o animales o incluso ingiriendo algn alimento/agua que est
contaminada por las anteriores y no haya sido tratada propiamente. Esta bacteria tambin puede
causar el sndrome urmico hemoltico que tiene como sntomas: orinar con menos frecuencia,
cachetes y prpados de los infectados de acuerdo con el Centro para Control y Prevencin de
Enfermedades (CDC, 2015). La gente que padezca dicha enfermedad debe ser hospitalizada de
inmediato para recibir tratamiento, de lo contrario pudieran sufrir de parlisis renal que puede
Estados Unidos, se enferman por ingerir comida contaminada (Center for Disease Control
and Prevention,2014)
Dado lo anterior, se busca obtener resultados favorables por parte del Ajo en donde este inhiba el
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Captulo II
Objetivo
El objetivo de este proyecto es ver las aplicaciones prcticas del Ajo y sus propiedades mdicas,
en este caso su poder bactericida y ver de qu forma puede si no puede resolver la problemtica,
Pregunta de Investigacin
Habr diferencia significativa entre el dimetro del halo de inhibicin producido por el Allium
Variables
Variables controladas: Temperatura, tiempo de incubacin medido con un cronmetro digital (+1
minuto), material nutritivo (agar Mueller Hinton), tipo de papel para el antibiograma (papel filtro
watman #2)
Variable Dependiente: Medida del halo de inhibicin del antibiograma en mm (+1 mm) medido
Hiptesis
Las predicciones para este experimento se plantearn de la siguiente manera. Hay dos hiptesis,
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Ho: No hay diferencia significativa entre el dimetro del halo de inhibicin producido por el
H1: S hay diferencia significativa entre el dimetro del halo de inhibicin producido por el
experimentacin, si habr o no diferencia significativa entre los dos antibiticos y como estos
Experimentos Preliminares
nutritivos Mueller Hinton. A estos agares se les coloc un antibiograma impregnado de extracto
de jengibre. El extracto estaba a diferentes concentraciones tomando una solucin madre como el
100%, dicha solucin madre contena 2 partes de agua y 1 parte de jengibre orgnico (300 ml de
agua destilada para 150 g de jengibre). Las concentraciones se hicieron con el propsito de ver
cul era la concentracin ptima para inhibir crecimiento bacteriano por parte del jengibre, dadas
sus propiedades (similares al ajo) de ser bactericida y antioxidante. Los resultados no fueron los
esperados, puesto que no hubo inhibicin alguna por parte de ninguna de las concentraciones
(vase Anexo 1), ni si quiera la concentracin del 100% siendo esta la ms potente. Se procedi a
buscar diferentes antibiticos para dicho experimento, y se utilizar en este caso el Ajo, pero para
Para buscar la concentracin apropiada que se usara del Ciproflox, se hizo un preliminar
usando diferentes concentraciones de este. Por el otro lado, del ajo se tomara el extracto puro y
se usara como inhibidor. Los preliminares que se hicieron con el Ciproflox fueron los
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siguientes: ciprofloxacino al 100% (tomando la botella de antibitico como la solucin madre),
es decir 2 mg/ml. Y la otra concentracin se usara una al 50%, es decir 1mg/ml. Los resultados
los esperado, pues estos inhibieron casi enteramente el crecimiento en el agar entero. Eso no es
lo que se busca para el experimento dado que la diferencia entre ambos en cuanto a la inhibicin
experimento.
Experimento Final
Para el experimento final se decidi usar el ajo (por las propiedades bactericida que le atribuyen
la alicina, de ser bactericida), este ser comparado con el Ciproflox (el cual se diluir para
Material
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Autoclave Cloro
Metodologa
1. Lavar las manos vigorosamente con jabn antibacterial y colocar guantes de ltex
inmediatamente despus de secar las manos, colocarse el cubre boca y asegurarse de que
la bata de laboratorio que se est portando est completamente limpia (aplica para el
2. Rociar solucin de etanol al 70% al rea de trabajo (campana de extraccin), con una
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3. Desinfectar2 completamente el mortero y pistilo que se usar (dejarse remojando un da
previo al experimento).
utilizar para la experimentacin (esto comprende las pipetas de vidrio, las pinzas, la caja
*De aqu en adelante todos los procesos sern realizados dentro de la campana de
extraccin que ha sido desinfectada, por lo que a continuacin se mete todo el material
requerido a la campana.
1. Tomar 5 dientes de ajo y pesarlos en una balanza digital (en el caso de dicha
3. Moler con el pistilo y mortero hasta conseguir que salga lquido amarillo de los dientes
4. Una vez obtenido el extracto mantenerlo dentro del ambiente desinfectado previamente
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Para diluir el antibitico se tomar 0.5 ml de ciprofloxacino y se diluir en 999.5 ml de
agua estril.
1. Tomar una jeringa estril, con esta se extrae 0.5 ml de agua del envase de 1000ml de agua
antibitico.
3. Colocar los 0.5 ml de ciprofloxacino en el bote con el agua estril restante, y agitar
vigorosamente.
indeleble en la parte posterior de este para delimitar las distintas repeticiones del
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Previamente hay que dividir y marcar los agares por antibitico para no confundirlos en
la posteridad (ntese que la imagen muestra la leyenda A6 lo cual significa que es del
b. Flamear el asa bacteriolgica para matar cualquier forma de vida que pudiera haber en
esta.
c. Tomar el hisopo estril y sembrar en el agar (del caldo nutritivo en el cual ya crecieron
bacterias de la misma cepa de E. coli al agar) la bacteria a travs del mtodo de estriado (.
d. Colocar los discos de papel (antibiograma) en cada divisin de los agares (24 discos de
e. Aplicar 1 gota del antibitico de ajo con un gotero sobre cada disco de papel.
f. Aplicar 1 gota del antibitico Ciprofloxacino con un gotero sobre cada disco de papel.
g. Hacer esto en los 6 agares, 4 veces en cada agar: 1 para cada disco antibiograma.
1. Despus de las 24 horas, sacar los agares de la estufa de incubacin e identificar por
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2. Tomar la regla vernier y medir los halos de inhibicin de cada a antibiograma (cada
Despus de haber sembrado las bacterias en sus respectivos agares nutritivos, despus de
a cabo todos los pasos previos se saca las cajas de Petri (con el agar nutritivo) y se
procede a medir los halos de inhibicin con una regla vernier, esta medir el dimetro de
Tabla 1.- Registro de Datos Brutos- Medicin del halo de inhibicin en cepas de E. Coli
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7 19 10
8 18 10
9 14 8
10 21 9
11 12 7
12 15 6
13 14 13
14 15 12
15 20 9
16 18 13
17 13 9
18 18 6
19 17 8
20 19 10
21 18 6
22 18 6
23 19 6
24 16 6
Media 1.663 0.848
Desviacin Estndar 0.271 0.203
Comentario de tabla 1:
baja fue de 6mm (hubo 7 muestras con este valor para dicho antibitico). Mientras que
pare el extracto de ajo hubo una mayor inhibicin, el valor de la muestra ms bajo fue de
importante mencionar que el dimetro del antibiograma en si es de 6mm, por lo que las
Escherichia Coli
Anlisis de Datos
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Medias
Ajo
Dimetro del halo de inhibicin medido en mm con regla vernier (+1mm)
Ciprofloxacino
Ingrediente Activo
Grfica
1.- Medias del halo de inhibicin en cepas de E. Coli con Ajo y Ciprofloxacino como
antibiticos
Comentario Grafica 1: las medias del ajo y del ciprofloxacino son 1.663 y 0.848
estndar) no se solapan.
Dado que las barras de error no se solapan no se procede a hacer prueba t puesto que s
hay diferencia significativa entre los dos antibiticos. La prueba T no es pertinente por lo
anterior, pues no hay una desviacin estndar. Dicho esto, se rechaza la hiptesis nula,
por ende; s hay diferencia significativa entre el dimetro del halo de inhibicin
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Conclusiones
El experimento nos dice que no se puede hacer una prueba t. No se solapan las barras de
error en la grfica de medias, lo que significa que no hay una distribucin estndar entre
los valores obtenidos, esto significa que la realizacin de la prueba t no es pertinente. Por
ende, se ha rechazado la hiptesis nula, esto quiere decir que s hay diferencia
g/ml era muy elevada si se estara comparando con el ajo. Esta reduccin en
concentracin (la que es recomendada) podra ser la causa de que se haya tenido halos de
Estos resultados, nos dicen que el Ajo puede ser una buena alternativa (a niveles
menores) que el antibitico que se receta cuando se enferma uno y va con el doctor
demostrado poder inhibir efectivamente la Escherichia coli. Tambin pudiera ser una
buena manera de prevencin la ingesta de dicha planta puesto que hay endobacterias que
llegan a ser patgenas para el cuerpo humano y termina habiendo una infeccin. Es por
esto que este experimento tiene valor, validez y una aplicacin en el mundo real.
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Bibliografa
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antibacterial effects of food ingredients: model experiments with allicin and garlic
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Center for Disease Control and Prevention (2014) E. coli (Escherichia Coli). Recuperado
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Soussy, C., Varon, E.& Weber, P., (2015). Comite de lantibiogramme de la Societe
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Barcelona.
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