Quim. Nova, Vol. 26, No.

5, 726-737, 2003

CARACTERIZAO E ESTABILIDADE FSICO-QUMICA DE SISTEMAS POLIMRICOS

NANOPARTICULADOS PARA ADMINISTRAO DE FRMACOS
Reviso

Scheila Rezende Schaffazick e Slvia Stanisuaski Guterres*

Faculdade de Farmcia, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Av. Ipiranga 2752, 90610-000 Porto Alegre - RS
Liane de Lucca Freitas e Adriana Raffin Pohlmann
Instituto de Qumica, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Av. Bento Gonalves, 9500, 91501-970 Porto Alegre - RS

Recebido em 28/10/02; aceito em 27/2/03

PHYSICOCHEMICAL CHARACTERIZATION AND STABILITY OF THE POLYMERIC NANOPARTICLE SYSTEMS FOR

DRUG ADMINISTRATION. Polymeric nanoparticle systems such as nanocapsules and nanospheres present potential applications
for the administration of therapeutic molecules. The physico-chemical characteristics of nanoparticle suspensions are important
pre-requisites of the success of any dosage form development. The purpose of this review is to present the state of the art regarding
the physico-chemical characterization of these drug carriers, in terms of the particle size distribution, the morphology, the polymer
molecular weight, the surface charge, the drug content and the in vitro drug release profiles. Part of the review is devoted to the
description of the techniques to improve the stability of colloidal systems.

Keywords: nanoparticles; polymers; characterization.

INTRODUO
O controle da liberao de frmacos em stios de ao especfi-
cos, atravs da utilizao de vetores, capazes de permitir a otimizao
da velocidade de cedncia e do regime de dosagem das substncias,
tem sido uma rea de intensa pesquisa nos ltimos dez anos. Dentre
os vetores, incluem-se as micropartculas e os sistemas coloidais
(lipossomas e nanopartculas). As nanopartculas, constitudas por
polmeros biodegradveis, tm atrado maior ateno dos pesquisa-
dores em relao aos lipossomas, devido s suas potencialidades te-
raputicas, maior estabilidade nos fludos biolgicos e durante o
armazenamento1-3.
As nanopartculas polimricas so sistemas carreadores de
frmacos que apresentam dimetro inferior a 1 m. O termo nano-
partcula inclui as nanocpsulas e as nanoesferas, as quais diferem
entre si segundo a composio e organizao estrutural (Figura 1).
As nanocpsulas so constitudas por um invlucro polimrico dis-
posto ao redor de um ncleo oleoso, podendo o frmaco estar dissol-
vido neste ncleo e/ou adsorvido parede polimrica. Por outro lado,
as nanoesferas, que no apresentam leo em sua composio, so
Figura 1. Representao esquemtica de nanocpsulas e nanoesferas
polimricas: a) frmaco dissolvido no ncleo oleoso das nanocpsulas; b)
frmaco adsorvido parede polimrica das nanocpsulas; c) frmaco retido
na matriz polimrica das nanoesferas; d) frmaco adsorvido ou disperso
molecularmente na matriz polimrica das nanoesferas)
*e-mail: nanoc@farmacia.ufrgs.br
formadas por uma matriz polimrica, onde o frmaco pode ficar re-
tido ou adsorvido2,4,5.
Estes sistemas tm sido desenvolvidos visando inmeras aplica-
es teraputicas, sendo planejados, principalmente, para adminis-
trao parenteral, oral ou oftlmica. Uma das reas mais promisso-
ras na utilizao das nanopartculas a vetorizao de frmacos
anticancergenos2,6-8 e de antibiticos2,9,10, principalmente atravs de
administrao parenteral, almejando uma distribuio mais seletiva
dos mesmos e, assim, um aumento do ndice teraputico. Com rela-
o administrao oral de nanopartculas, as pesquisas tm sido
direcionadas especialmente : a) diminuio dos efeitos colaterais
de certos frmacos, destacando-se os antiinflamatrios no-esterides
(diclofenaco11,12, indometacina13-15), os quais causam freqentemente
irritao mucosa gastrintestinal e b) proteo de frmacos
degradveis no trato gastrintestinal, como peptdeos16,17, protenas8,18
e/ou hormnios19, aumentando a biodisponibilidade dos mesmos.
Outro grande interesse nas nanopartculas sua administrao oftl-
mica20-23, visando o controle da liberao, o aumento da biodispo-
nibilidade ocular e/ou a diminuio dos efeitos colaterais devido
absoro sistmica de certos frmacos.
Existem vrios mtodos relatados na literatura para a preparao
de nanopartculas polimricas, os quais podem ser, de uma forma
geral, classificados em mtodos baseados na polimerizao in situ
de monmeros dispersos (cianoacrilato de alquila)24-28 ou na precipi-
tao de polmeros pr-formados11,29-33, tais como poli(cido ltico)
(PLA), poli(cido ltico-co-cido gliclico) (PLGA), poli(-capro-
lactona) (PCL) e, ainda, os copolmeros do cido metacrlico e de
um ster acrlico ou metacrlico. A Figura 2 apresenta as principais
etapas dos diferentes mtodos de preparao de nanopartculas34-36.
Independentemente do mtodo de preparao os produtos so obti-
dos como suspenses coloidais aquosas. Entretanto, durante o tem-
po de armazenamento, pode ocorrer a agregao das nanopartculas
no meio, resultando na formao de precipitados37,38. Alm disso,
problemas de estabilidade qumica do polmero ou das demais mat-
rias-primas, incluindo o frmaco, podem ocorrer39-41. A conseqn-
cia de uma estabilidade fsico-qumica limitada, em funo do tem-
po, constitui um obstculo para a aplicabilidade industrial das sus-
Vol. 26, No. 5 Caracterizao e Estabilidade Fsico-qumica de Sistemas Polimricos
Figura 2. Mtodos usuais, empregados na preparao de nanopartculas
polimricas, baseados na utilizao de monmeros dispersos (A34; B35) ou
na precipitao de polmeros pr-formados (C36)
penses aquosas de nanopartculas. Neste sentido, o interesse pelo
desenvolvimento de formas farmacuticas slidas de nanopartculas
um ponto de convergncia das pesquisas. Os problemas de estabi-
lidade limitada podem ser minimizados atravs da secagem das sus-
penses42,43. A sublimao (liofilizao) tem sido bastante utilizada
para a desidratao de sistemas coloidais, principalmente lipos-
somas44-47 e nanoesferas38,41,48, empregando-se um crioprotetor ou
lioprotetor, geralmente um carboidrato, para evitar a agregao das
partculas durante o congelamento das suspenses. Recentemente, o
nosso grupo de pesquisa desenvolveu um mtodo de secagem por
asperso (nebulizao) para a obteno de ps nebulizados conten-
do nanopartculas polimricas49,50, utilizando como adjuvante o
dixido de silcio (Aerosil 200). Os produtos secos podem ser uti-
lizados na obteno de formas farmacuticas slidas, tais como cp-
sulas e comprimidos, o que interessante sob o ponto de vista tecnol-
gico e industrial.
Em funo de sua natureza coloidal, dificuldades tcnicas so
encontradas na caracterizao fsico-qumica das nanopartculas. A
caracterizao das suspenses engloba a avaliao morfolgica, a
distribuio de tamanho de partcula, a distribuio de massa molar
do polmero, a determinao do potencial zeta e do pH, a determina-
o da quantidade de frmaco associado s nanoestruturas, a cintica
de liberao do frmaco e, ainda, a avaliao da estabilidade em fun-
o do tempo de armazenamento51,52. O conjunto de informaes
obtidas pela caracterizao destes sistemas pode conduzir proposi-
o de modelos que descrevam a organizao das nanopartculas em
nvel molecular, que ser dependente da composio quali-quantita-
tiva das formulaes.
Na literatura, esto disponveis alguns artigos de reviso refe-
rentes a nanopartculas, os quais so direcionados principalmente
aos diferentes mtodos de preparao1,2,4,5,8,29,53 e s potencialidades
teraputicas destes sistemas1,2,8,9,17,52,54. Um artigo de reviso consis-
tente sobre caracterizao de nanopartculas foi publicado por
Maghenhein e Benita51 e outros artigos de reviso1,52,55 abordam al-
guns aspectos da caracterizao fsico-qumica, embora estes no
sejam o foco principal dos mesmos. Desta forma, artigos de reviso
atualizados, direcionados especificamente caracterizao fsico-
qumica e, principalmente, voltados proposio das formas de as-
sociao de frmacos a nanocpsulas e a nanoesferas polimricas
no so encontrados na literatura.
727
Este artigo tem como objetivo revisar as principais metodologias
empregadas para a caracterizao fsico-qumica de nanopartculas
polimricas, visando a compreenso do comportamento fsico-qu-
mico destes sistemas. As proposies das formas de associao e os
perfis de liberao do frmaco, a partir das estruturas coloidais
polimricas, sero enfocados. Alm disto, tambm sero abordados
estudos referentes secagem das suspenses de nanopartculas, em-
pregando-se liofilizao ou nebulizao, como estratgia para au-
mentar a estabilidade fsico-qumica destes sistemas.
CARACTERIZAO FSICO-QUMICA
Avaliao morfolgica
As microscopias eletrnicas de varredura56-60 (MEV) ou de trans-
misso59,61,62 (MET) tm sido muito empregadas na obteno de in-
formaes relativas forma e ao tamanho das nanopartculas. A MET
pode permitir tambm a diferenciao entre nanocpsulas e
nanoesferas, possibilitando, inclusive, a determinao da espessura
da parede das nanocpsulas63,64. A tcnica de criofratura tambm tem
sido empregada para auxiliar a anlise morfolgica destes siste-
mas10,60,63,65-67.
Um trabalho que exemplifica a utilizao da MET, associada
tcnica de criofratura, o realizado por Rollot e colaboradores63, o
qual demonstrou que nanoesferas apresentam forma esfrica, com
estrutura polimrica slida, ao passo que, as nanocpsulas so for-
madas por um fino (cerca de 5 nm) invlucro polimrico ao redor do
ncleo oleoso. A utilizao de microscopia eletrnica, tambm asso-
ciada tcnica de criofratura, permitiu evidenciar a organizao
morfolgica de nanocpsulas de poli(cianoacrilato de etila), nas quais
o leo, um triacilglicerol (Miglyol 812), est circundado por uma
parede polimrica65.
Gouvender e colaboradores68, atravs de MET, mostraram que a
incorporao de quantidades baixas ou elevadas de frmaco no al-
terou a morfologia de nanopartculas formadas por PLA-bloco-
poli(xido de etileno). Santos-Magalhes e colaboradores33, atravs
de MEV, verificaram a presena de uma segunda populao de part-
culas, com cerca de 2 m de dimetro, em uma suspenso de
nanocpsulas de PLGA, aps 3 meses da preparao, a qual apre-
sentava dimetro inicial de 180 52 nm.
Outra tcnica que tem sido empregada para caracterizar a
morfologia de superfcie das nanopartculas a microscopia de for-
a atmica69-72, a qual fornece informaes com alta resoluo em
trs dimenses, em escala nanomtrica, sendo capaz ainda de resol-
ver detalhes de superfcie em nvel atmico72. Feng e colaborado-
res69 empregaram esta tcnica visando um estudo morfolgico mais
detalhado de nanoesferas de PLGA, preparadas empregando-se di-
ferentes emulsificantes. Atravs do estudo, foi verificada uma topo-
grafia complexa na superfcie das partculas e, mediante a anlise
seccional das amostras, foi revelada a presena de pequenas cavida-
des e de poros.
Distribuio de tamanho de partcula
De uma forma geral, as nanopartculas obtidas atravs de dife-
rentes mtodos, aps a preparao, apresentam uma distribuio
unimodal, com um baixo ndice de polidisperso22,73,74. Os mtodos
usuais para a determinao da distribuio de tamanho das
nanopartculas consistem em espectroscopia de correlao de ftons
e MEV ou MET52. Dependendo da formulao, podem ser verificadas
diferenas de tamanho de partculas conforme o mtodo empregado
na sua determinao, uma vez que a microscopia eletrnica fornece
uma imagem da partcula isolada do meio, enquanto a espectroscopia
728 Schaffazick et al. Quim. Nova

de correlao de ftons possibilita a determinao do raio
hidrodinmico das partculas em suspenso75.
Vrios estudos10,23,39,57,63,76-78 (Tabela 1) tm sido desenvolvidos
para a avaliao dos principais fatores que afetam o dimetro das
partculas de sistemas nanoestruturados. Geralmente, as nanopart-
culas, mesmo preparadas atravs de diferentes mtodos, apresentam
dimetros mdios entre 100 e 300 nm37,50,75-81, no entanto, partculas
com dimetros em torno de 60 a 70 nm68 ou mesmo inferiores a 50
nm podem ser obtidas77. A composio quali-quantitativa57 e o m-
todo de preparao das nanopartculas so fatores determinantes do
dimetro mdio e da polidisperso das partculas. No caso das nano-
cpsulas, um fator importante, que influencia o dimetro das part-
culas, a natureza do leo utilizado como ncleo. Os resultados so
atribudos s diferenas de viscosidade82, hidrofobicidade23 ou ten-
so interfacial64 das substncias empregadas.
Outra observao relevante que a adio de monmero
emulso63 (mtodo de polimerizao interfacial) ou, ainda, a presen-
a do polmero23 (mtodo de deposio de polmero pr-formado)
podem conduzir diminuio de tamanho de partcula em relao
emulso devido, provavelmente, reduo da energia livre interfacial
do sistema, no primeiro caso, ou mediante um efeito estabilizador
do polmero ao redor das gotculas, no segundo.
Empregando-se o mtodo de polimerizao in situ, a presena
do frmaco no meio pode alterar10 ou no77 o dimetro mdio das
partculas, uma vez que esse, assim como o tipo de tensoativo em-
pregado, podem interferir ou no na sntese e deposio das cadeias
oligomricas formadas78. A presena do frmaco no meio reacional
influencia o processo de nucleao, conduzindo a partculas maiores
com ampla distribuio de tamanho10. Em alguns estudos7,10,76,78, quan-
do o frmaco foi adicionado aps o trmino da polimerizao, o
tamanho destas no foi alterado pela sua associao. Utilizando-se o
mtodo de precipitao de polmeros pr-formados, a presena do
frmaco na fase orgnica, antes da precipitao do polmero em meio
aquoso, tambm pode73 ou no39,37 influenciar o dimetro mdio de
partculas.
importante mencionar que a tendncia agregao e sedimen-
tao das nanopartculas dispersas, em funo do tempo, pode ser
monitorada pela determinao de mudanas na distribuio de tama-
nho de partculas22,38,39.
Massa molar e distribuio de massa molar do polmero
A determinao da distribuio de massa molar do polmero,
aps preparao, pode fornecer informaes em relao influncia
de componentes da formulao sobre o processo de polimerizao10,
sobre a ocorrncia de reaes qumicas entre o frmaco e o polmero77
e, ainda, sobre a degradao do polmero, em funo do tempo39. A
tcnica comumente utilizada para a determinao da distribuio de
massa molar do polmero a cromatografia de excluso de tama-
nho39,83,84. Outra tcnica que pode ser empregada o espalhamento

Tabela 1. Parmetros que influenciam o dimetro mdio de nanocpsulas e de nanoesferas preparadas atravs de diferentes mtodos
Frmaco Polmero* Mtodo de preparao Resultados Ref.
Mesilato de pefloxacino PECA polimerizao - a presena do ofloxacino no meio de polimerizao 10
ou Ofloxacino em emulso aumentou o dimetro das NS em comparao s
formulaes sem frmaco, preparadas com
Triton X10, Tween 80 ou Pluronic F68
como tensoativos
- a presena do pefloxacino no meio de polimerizao
aumentou o dimetro das NS apenas no caso da
formulao preparada com Pluronic F68
Metipranolol PCL precipitao de polmero - para ambos os mtodos, as NC preparadas 23
pr-formado com Labrafil apresentaram dimetro menor que as
PIBCA polimerizao interfacial preparadas com Miglyol 840 e a concentrao
de leo no influenciou o dimetro das partculas
Diclofenaco PLA precipitao de polmero - as concentraes de leo e de frmaco no 39
pr-formado influenciaram o dimetro das NC
- PLA emulsificao-difuso - aumento da concentrao do polmero ocasionou 57
aumento do dimetro das NS - o aumento da
velocidade de agitao e aumento da concentrao
do tensoativo ocasionaram reduo do dimetro
das partculas
- PIBCA polimerizao interfacial - dimetro das NC menor que o dimetro das 63
gotculas da nanoemulso correspondente
Cloridrato de betoxolol PIBCA polimerizao em emulso - adio do frmaco aps a formao das NS no 76
alterou o dimetro
- PIBCA polimerizao em emulso - o aumento da concentrao de HCl ou do 77
PIHCA tensoativo diminuiu o dimetro das NS
- aumento da concentrao de monmero
ocasionou o aumento do dimetro das NS
Sulfato de amicacina PIBCA polimerizao em emulso - o aumento da concentrao do frmaco ocasionou 78
o aumento do dimetro das NS
*PIBCA: poli(cianoacrilato de iso-butila); PECA: poli(cianoacrilato de etila); PIHCA: poli(cianoacrilato de iso-hexila); PLA: poli(cido
ltico); PCL: poli(-caprolactona); NC: nanocpsulas; NS: nanoesferas.
Vol. 26, No. 5 Caracterizao e Estabilidade Fsico-qumica de Sistemas Polimricos 729
730 Schaffazick et al.
de luz esttico, mediante a anlise da intensidade de luz espalhada
pelas partculas10,85.
Atravs da comparao da distribuio de massa molar entre
nanoesferas de poli(cianoacrilato de iso-butila) contendo ou no
ampicilina, um antibitico -lactmico, no foram observadas mu-
danas significativas neste parmetro, aps a adio do frmaco no
meio reacional, levando os autores a concluir que no houve interaes
qumicas entre a ampicilina e a macromolcula em formao77. Por
outro lado, Alonso e colaboradores78 verificaram que a presena de
sulfato de amicacina, um antibitico aminoglicosdeo, no meio de
polimerizao, conduziu obteno de cadeias de poli(cianoacrilato
de butila) com maior massa molar, em relao quelas preparadas
sem o frmaco. Fresta e colaboradores10 verificaram que ofloxacino,
um antibitico fluorquinolnico, funciona como um iniciador da
polimerizao, conduzindo a cadeias polimricas com menor massa
molar, enquanto que o mesilato de pefloxacino foi capaz de levar
formao de cadeias polimricas de maior massa molar, em relao
s partculas obtidas na ausncia destes frmacos.
Reich86 verificou, atravs de estudos de distribuio de massa
molar, que a estabilidade qumica das nanopartculas de PLA, em
fluidos gstrico e intestinal artificiais, foi dependente das caracters-
ticas do polmero e do pH do meio. E, ainda, que a distribuio de
massa molar foi levemente influenciada pela presena de enzimas e/
ou do tensoativo (poloxamer 188) adsorvido.
Potencial zeta
O potencial zeta reflete o potencial de superfcie das partculas,
o qual influenciado pelas mudanas na interface com o meio
dispersante, em razo da dissociao de grupos funcionais na super-
fcie da partcula ou da adsoro de espcies inicas presentes no
meio aquoso de disperso51,64. Este parmetro determinado utili-
zando-se tcnicas de eletroforese75,78,87.
Os fosfolipdeos (lecitinas), os poloxamers (copolmeros dos
xidos de etileno e de propileno) e os polmeros constituintes das
nanopartculas so os principais componentes presentes nas formu-
laes capazes de influenciar o potencial zeta. Especialmente os po-
listeres, como o PLA, e as lecitinas fornecem um potencial negati-
vo interface, enquanto que, os poloxamers (tensoativos no-inicos)
tendem a reduzir o valor absoluto deste parmetro52. Em mdulo,
um valor de potencial zeta relativamente alto importante para uma
boa estabilidade fsico-qumica da suspenso coloidal, pois grandes
foras repulsivas tendem a evitar a agregao em funo das colises
ocasionais de nanopartculas adjacentes.
As caractersticas de superfcie das partculas tambm podem
alterar a resposta biolgica do frmaco associado. Quando se admi-
nistram intravenosamente sistemas de nanopartculas convencionais,
estes so rapidamente removidos da circulao sangunea pela ao
de clulas do sistema fagocitrio mononuclear, dificultando a chega-
da do frmaco ao stio de ao. Diferentes estratgias tm sido pro-
postas para modificar a distribuio in vivo das nanopartculas, basea-
das principalmente na reduo da hidrofobicidade da superfcie das
partculas atravs da adsoro fsica de um polmero hidroflico
[poli(etilenoglicol)]1,88,89.
Calvo e colaboradores87 prepararam nanoemulses e nanocp-
sulas de PCL, nas quais quitosana (um polissacardeo catinico) foi
incorporada s formulaes para fornecer potencial de superfcie
positivo s partculas ( = +37 mV a = +61 mV), objetivando faci-
litar a interao destas com as membranas biolgicas fosfolipdicas,
alm de prevenir a desestabilizao das nanoestruturas de polister
devido adsoro de ctions e protenas catinicas presentes nos
fluidos biolgicos.
A determinao do potencial zeta tambm pode ser til na
Quim. Nova
elucidao do mecanismo de associao de frmacos s nanopar-
tculas40,78. Um exemplo desta abordagem o trabalho de Alonso e
colaboradores 78 , em que o potencial zeta de nanoesferas de
poli(cianoacrilato de butila) foi determinado para se inferir sobre o
mecanismo pelo qual o frmaco, sulfato de amicacina, e este polmero
interagem. Desta forma, foi verificado que, quando o frmaco foi
adicionado s nanopartculas em quantidades crescentes, a reduo,
em mdulo, do potencial zeta foi concordante com o aumento da
taxa de associao do frmaco. Os autores sugeriram que ocorre uma
interao eletrosttica entre o frmaco e o polmero.
Estudos comparativos entre nanocpsulas, nanoesferas e
nanoemulso foram realizados para a proposio de modelos descri-
tivos da organizao destas nanopartculas. Calvo e colaboradores22
observaram os efeitos da composio das diferentes formulaes
sobre os valores do potencial zeta. Foi verificado que a presena da
fase oleosa, nas nanocpsulas e nanoemulses, conferiu a estas um
potencial zeta mais negativo ( = -41,94 mV e = -42,32 mV, res-
pectivamente) em relao s nanoesferas ( = -16,33 mV). Tendo em
vista a semelhana dos resultados obtidos para nanocpsulas e
nanoemulses, os autores sugeriram que a camada polimrica ao re-
dor das gotculas de leo seria um delgado filme polimrico. Com o
mesmo objetivo, Losa e colaboradores23 determinaram valores de
potencial zeta similares para nanocpsulas e nanoemulses, conclu-
indo que a camada polimrica ao redor das gotculas de leo poderia
no ser contnua. Por outro lado, Mosqueira e colaboradores64 no
observaram alterao do valor do potencial zeta em funo da natu-
reza do ncleo oleoso (triglicerdeo dos cidos cprico e caprlico,
succinato de diglicerila dos cidos cprico e caprlico, dicaprilato/
dicaprato de propilenoglicol, oleato de etila, leo mineral, dodecano,
leo de soja) utilizado para a preparao de nanocpsulas de PLA,
concluindo que o leo deveria estar completamente encapsulado pelo
polmero. Alm disto, sugeriram, atravs de comparaes dos valo-
res de potencial zeta de diferentes formulaes, que a lecitina, utili-
zada como tensoativo, poderia estar localizada na superfcie externa
do polmero ou misturada com o filme polimrico ao redor do n-
cleo oleoso.
pH das suspenses
Informaes relevantes sobre a estabilidade de suspenses
nanoparticuladas podem ser obtidas mediante o monitoramento do
pH, em funo do tempo. Por exemplo, a alterao do pH pode ser
indcio de degradao do polmero39,90. Em um trabalho realizado
por Calvo e colaboradores22 foi verificada uma diminuio da massa
molar da PCL em suspenses de nanocpsulas e de nanoesferas, aps
6 meses de armazenamento, com conseqente diminuio do pH
destas formulaes.
No entanto, a diminuio dos valores de pH de suspenses
coloidais polimricas, em um curto perodo de tempo, pode ser
atribuda tanto ionizao de grupos carboxlicos presentes no
polmero, quanto hidrlise, dependendo da hidrofobicidade do
polister. Suspenses de nanopartculas preparadas com PCL
apresentaram reduo dos valores de pH, num perodo de 3,5 meses37.
Este fato foi atribudo exposio de maior nmero de grupos cidos
carboxlicos terminais, em funo do tempo, promovida pela
relaxao das cadeias polimricas. Em outro trabalho do nosso grupo
de pesquisa91, a diminuio do pH de suspenses de nanocpsulas
de poli(cido metacrlico-co-metacrilato de metila) (Eudragit S90),
monitorado durante os primeiros 45 dias aps a preparao, foi
tambm atribuda dissociao dos grupos carboxlicos, presentes
como grupos pendentes no polmero, que, em funo do tempo, se
posicionam na interface partcula/gua devido relaxao das cadeias
polimricas.
Vol. 26, No. 5 Caracterizao e Estabilidade Fsico-qumica de Sistemas Polimricos
Determinao da taxa de associao e da forma de associao
do frmaco
A determinao da quantidade de frmaco associada s
nanopartculas especialmente complexa devido ao tamanho redu-
zido destas, que dificulta a separao da frao de frmaco livre da
frao associada1,51. Uma tcnica de separao bastante utilizada a
ultracentrifugao33,76,78,92, na qual a concentrao de frmaco livre,
presente na suspenso, determinada no sobrenadante, aps a
centrifugao. A concentrao total de frmaco, por sua vez, geral-
mente determinada pela completa dissoluo das nanopartculas em
um solvente adequado. Por conseguinte, a concentrao de frmaco
associada s nanoestruturas calculada pela diferena entre as con-
centraes de frmaco total e livre. Outra tcnica que tambm tem
sido empregada a ultrafiltrao-centrifugao23,39,37,52, na qual uma
membrana (10 kDa) empregada para separar parte da fase aquosa
dispersante da suspenso coloidal. A concentrao livre do frmaco
determinada no ultrafiltrado e a frao de frmaco associada s
nanoestruturas calculada tambm pela subtrao das concentra-
es total e livre.
A Tabela 2 exemplifica alguns valores de taxas de associao de
diversos frmacos22,37-39,50,77,87,90,91,93,94 a nanocpsulas ou a nanoesferas
preparadas com diferentes polmeros. De acordo com os estudos pu-
blicados, diversos fatores so capazes de influenciar a quantidade de
frmaco associada aos sistemas nanoestruturados, dentre os quais des-
tacam-se as caractersticas fsico-qumicas do frmaco22,39, o pH do
meio7,73,93,94, as caractersticas da superfcie das partculas ou a nature-
za do polmero18, a quantidade de frmaco adicionada formulao7, a
ordem de adio do frmaco na formulao, ou seja, antes (incorpora-
o) ou aps (incubao) formao das nanoestruturas10,95, a nature-
za do leo utilizado23 (no caso das nanocpsulas) e o tipo de tensoativo
adsorvido superfcie polimrica76,96.
Modificando-se as caractersticas de superfcie das partculas,
possvel obter diferentes taxas de associao do frmaco por adsoro,
para uma mesma concentrao inicial do mesmo. Este parmetro
provavelmente muito importante para determinar a capacidade de
prolongar o tempo de ao do frmaco76. Portanto, relevante deter-
minar a isoterma de adsoro de frmacos superfcie das
nanopartculas, uma vez que a mesma fornece informaes de como
o frmaco est distribudo na superfcie das partculas e, ainda, sobre
a capacidade de associao do mesmo. Experimentalmente76, em uma
dada temperatura, diferentes quantidades de frmaco so adiciona-
das a um determinado volume de suspenso. Aps estabelecido o
equilbrio, pela distribuio do frmaco entre a fase fluida e o
adsorvente (nanopartculas), uma alquota de cada mistura
ultracentrifugada e a concentrao do frmaco determinada no
Tabela 2. Taxas de associao de alguns frmacos a nanopartculas polimricas
Frmaco Polmero* Sistema
Indometacina PCL, PLA NC, NS
Diclofenaco PLA, PCL, NC, NS
Eudragit S90
Ciclosporina A PCL NS
Ampicilina PIBCA NS
Diazepam PCL NC
Pentamidina PLA NS
Etionamida Eudragit S90 NC, NS
Insulina Quitosana NS
*PIBCA: poli(cianoacrilato de iso-butila); PLA: poli(cido ltico); PCL: poli(-caprolactona); NC: nanocpsulas; NS: nanoesferas.
731
sobrenadante. A isoterma de adsoro, que expressa a variao da
concentrao de equilbrio no adsorvente, obtida plotando-se os
valores de concentrao de equilbrio contra os valores de frmaco
adsorvido. Alm disso, uma pequena variao nas quantidades
adsorvidas pode induzir a grandes diferenas no perfil de liberao
do frmaco, principalmente para aqueles fracamente ligados s
nanopartculas1,95,97.
Em relao s nanoesferas, diferentes formas de associao do
frmaco so descritas, sendo relatado que este pode estar dissolvido ou
disperso dentro da matriz polimrica, ou ainda que pode estar adsorvido
ao polmero4,5. No entanto, at o presente momento, no est clara a
diferena entre a adsoro do frmaco matriz polimrica e a sua dis-
perso molecular na partcula. Por outro lado, nas nanocpsulas, as quais
foram desenvolvidas para aumentar a eficincia de associao de frmacos
lipoflicos, estes deveriam estar encapsulados pela membrana polimrica,
ou seja, dissolvidos no ncleo oleoso. Entretanto, alguns artigos relatam
a possibilidade da adsoro do frmaco parede polimrica das
nanocpsulas4,5,52,53,98,99. Segundo Fresta e colaboradores10, os frmacos,
quando associados pelo processo de incorporao, estariam dissolvi-
dos, dispersos, adsorvidos ou quimicamente ligados matriz polimrica.
Por outro lado, utilizando-se o mtodo de incubao, dependendo da
natureza qumica do frmaco e do polmero, esse poderia estar adsorvido
s nanoestruturas91.
Em vista disto, outro ponto que merece destaque, a proposio
da forma de associao do frmaco s nanopartculas, a qual bastan-
te complexa, uma vez que os mtodos disponveis apenas determinam
a concentrao de frmaco associada aos sistemas, ou seja, no so
capazes de diferenciar se o frmaco est adsorvido ou retido na matriz
polimrica das nanoesferas, ou se est dissolvido no leo das
nanocpsulas e/ou adsorvido parede polimrica. Neste contexto, os
pesquisadores tm feito inferncias a respeito da associao do frmaco
s nanopartculas atravs de estudos comparativos de potencial zeta40,78,
de perfis de liberao91,94, de distribuio de massa molar do polmero77,
de estudos de adsoro e/ou de taxa de associao do frmaco s
nanoestruturas7,10,76,94,95,100, ou, ainda, atravs do uso de sondas fluores-
centes28. A Tabela 3 apresenta alguns exemplos de trabalhos nos quais
foram obtidas algumas informaes a respeito da provvel forma de
associao de frmacos7,28,77,91,94,95,100 s nanoestruturas, incluindo
oligonucleotdeos ou peptdeos como a insulina.
Outro interessante trabalho, que objetivou a quantificao de uma
frao de frmaco adsorvida superfcie das nanopartculas, foi de-
senvolvido por Gref e colaboradores101. Neste estudo, atravs da uti-
lizao de espectroscopia eletrnica para anlise qumica, foi poss-
vel determinar a quantidade de ciclosporina A, um imunossupressor,
presente na superfcie de nanopartculas de PLA (16%) e de PLA-
bloco-poli(etilenoglicol) (8%).
Mtodo de anlise Taxa de associao (%) Ref.
ultrafiltrao 94-100 22, 93
ultrafiltrao 100 37, 39, 50
ultracentrifugao 90-98 38
ultracentrifugao 75 77
ultracentrifugao 92-94 87
ultrafiltrao 48-75 90
ultrafiltrao 39-62 91
ultracentrifugao 87-96 94
732 Schaffazick et al. Quim. Nova

Tabela 3. Forma de associao de diferentes frmacos a nanocpsulas ou a nanoesferas polimricas

Frmaco Polmero* Mtodo de preparao Mtodo de anlise Forma de associao Ref.
Hematoporfirina PIBCA polimerizao em isotermas de adsoro - adsoro do frmaco na 7
PIHCA emulso - ultracentrifugao superfcie das NS
Oligonucleotdeo PIBCA polimerizao sonda fluorescente - dissoluo do frmaco no 28
interfacial ncleo aquoso das NC
Ampicilina PIBCA polimerizao em liberao - - reteno do frmaco pela 77
emulso ultracentrifugao matriz polimrica das NS
Etionamida Eudragit precipitao de liberao - - interao eletrosttica do 91
S90 polmero pr-formado ultrafiltrao frmaco com as NC e NS
Insulina Quitosana geleificao ionotrpica incubao - liberao - - interao eletrosttica do 94
ultrafiltrao frmaco com as NS
Doxorrubicina PIBCA polimerizao isotermas de adsoro - - forte adsoro do frmaco 95
em emulso centrifugao nas NS
Oligonucleotdeo MMA/EMA polimerizao radicalar incubao - - interao do frmaco por 100
quantificao pares inicos com as NS
*PIBCA: poli(cianoacrilato de iso-butila); PIHCA: poli(cianoacrilato de iso-hexila); MMA/EMA: copolmero de metacrilato de metila e
metacrilato de monometilaminoetila; NC: nanocpsulas; NS: nanoesferas.

Calorimetria exploratria diferencial, difrao de raios X e
espectroscopia no infravermelho
Outras tcnicas empregadas para a determinao da forma de
associao do frmaco a nanopartculas incluem a calorimetria
exploratria diferencial, a difrao de raios X e/ou a espectroscopia
no infravermelho. A seguir, sero descritos alguns exemplos do em-
prego destas tcnicas.
Os mtodos termo-analticos, tais como calorimetria exploratria
diferencial (DSC), so de grande utilidade para a anlise de
polmeros102, e tm sido utilizados tambm para investigar interaes
entre os polmeros e os frmacos em diversas formulaes de
microesferas103 e nanopartculas22,79. Deste modo, informaes teis
podem ser obtidas a respeito da morfologia do polmero cristalino e
sobre o estado de disperso slida ou molecular do frmaco associa-
do a estes sistemas polimricos51,103. Anlises atravs de DSC tm
sido utilizadas tambm para estudar as interaes intermoleculares
entre frmacos e adjuvantes, sendo de grande utilidade em estudos
de pr-formulao, na medida em que podem ser obtidas informa-
es sobre potenciais incompatibilidades fsicas ou qumicas entre o
frmaco e os adjuvantes104. Tambm possvel investigar reaes
qumicas, como polimerizao, depolimerizao e degradao102.
A caracterizao do estado fsico de indometacina associada a
nanocpsulas e a nanoesferas de PCL, realizada por DSC e difrao
de raios X, indicou que o frmaco est disperso molecularmente na
matriz polimrica22. Adicionalmente, atravs do uso de espectroscopia
no infravermelho, foi verificada a ausncia de reaes qumicas en-
tre a indometacina e o polmero. Empregando-se DSC, raios X e
espectroscopia no infravermelho tambm foi verificado que o diclo-
fenaco sdico estaria disperso molecularmente em nanoestruturas
preparadas com uria-formaldedo105. Ainda, atravs de DSC e raios
X106, foi verificado que um frmaco anti-hipertensivo diidropiridnico
estaria molecularmente disperso na matriz de nanoesferas, prepara-
das com PCL, PLA ou PLGA.
Alm do emprego de DSC na elucidao da forma de associao
dos frmacos s nanoestruturas, esta tcnica tambm pode ser apli-
cada na obteno de informaes a respeito da organizao de ou-
tros componentes das formulaes nestes sistemas. Assim, anlises
por DSC107 permitiram propor que o monoestearato de sorbitano,
um tensoativo, estaria dissolvido no ncleo oleoso (triglicerdeo dos
cidos cprico e caprlico) das nanocpsulas de PCL. No caso das
nanoesferas, foi proposto um sistema bifsico polmero-tensoativo,
onde o monoestearato de sorbitano estaria disperso na matriz poli-
mrica.
CINTICA DE LIBERAO IN VITRO DO FRMACO
Segundo Soppimath e colaboradores1, a liberao dos frmacos
a partir de sistemas nanoparticulados polimricos depende de dife-
rentes fatores: a) da dessoro do frmaco da superfcie das partcu-
las; b) da difuso do frmaco atravs da matriz das nanoesferas; c)
da difuso atravs da parede polimrica das nanocpsulas; d) da ero-
so da matriz polimrica ou e) da combinao dos processos de difu-
so e eroso. Mtodos como a difuso em sacos de dilise22,23,76 e a
separao baseada na ultracentrifugao77,96,101, na filtrao a baixa
presso108 ou na ultrafiltrao-centrifugao91,95 tm sido utilizados
para este fim.
Li e colaboradores109 verificaram que a albumina, utilizada como
protena modelo, associada a nanopartculas de PLGA ou de PLGA-
bloco-poli(etilenoglicol) apresentou uma rpida liberao inicial, a
qual pode estar relacionada com uma frao da protena adsorvida
superfcie das partculas. Numa segunda etapa, o perfil de liberao
apresentou forma sustentada, atribuda difuso da protena atravs
da matriz polimrica e eroso desta. De forma semelhante, Fresta e
colaboradores10 verificaram uma liberao bifsica de mesilato de
pefloxacino ou ofloxacino a partir de nanoesferas de poli(cianoacrilato
de etila), com uma liberao rpida inicial, seguida por uma fase de
liberao muito lenta, com uma cintica de primeira ordem. A velo-
cidade de liberao de cisplatina, um anticancergeno, a qual tam-
bm apresentou-se bifsica, foi afetada pela composio das
nanopartculas. A diminuio da razo PLGA/poli(etilenoglicol)
aumentou a velocidade de liberao do frmaco74.
Bapat e Boroujerdi95 sugeriram que a liberao de doxorrubicina,
uma antraciclina antineoplsica, incorporada a nanopartculas de
poli(cianoacrilato de iso-butila), pode ser controlada e dependente
da taxa de eroso da partcula. Em outro estudo, a cintica de libera-
o de doxorrubicina conjugada quimicamente ao grupo carboxlico
Vol. 26, No. 5 Caracterizao e Estabilidade Fsico-qumica de Sistemas Polimricos
terminal do PLGA, atravs de uma ligao ster, foi sustentada, po-
dendo ser controlada pela massa molar do polmero6.
A liberao de clonazepam, utilizado como frmaco modelo,
associado a nanoesferas, constitudas pelo tribloco PCL-bloco-
poli(etilenoglicol)-bloco-PCL seguiu aproximadamente uma cintica
de pseudo ordem zero110. Quanto maior a massa molar do tribloco,
mais lenta foi a cintica de liberao do frmaco, sendo esta contro-
lada predominantemente por um mecanismo de difuso do que pela
degradao do copolmero.
Em um trabalho realizado em nosso laboratrio91, suspenses de
nanocpsulas ou de nanoesferas de Eudragit S90 contendo
etionamida, um tuberculosttico, preparadas pela adio do frmaco
antes (incorporao) ou depois (incubao) da formao das
nanopartculas, tiveram seus perfis de liberao avaliados para se
determinar o mecanismo de associao do frmaco aos colides. Foi
observada a liberao rpida e total do frmaco a partir das formula-
es obtidas por incubao e liberao de 80% e de 90% a partir das
nanopartculas preparadas por incorporao. Desta forma, esta com-
parao levou proposio de que o frmaco estaria majoritaria-
mente adsorvido superfcie das partculas. Esta adsoro seria de-
corrncia da formao de um sal entre o cido conjugado da
etionamida e os nions carboxilatos do polmero.
Tendo em vista os estudos realizados, a cintica de liberao de
frmacos a partir de nanoesferas apresenta-se, geralmente, na forma
de uma exponencial (primeira ordem), provavelmente devido difu-
so do frmaco da matriz polimrica para o meio e/ou eroso da
matriz polimrica, liberando o frmaco1,10,108,109,111.
No caso das nanocpsulas, o frmaco, teoricamente dissolvido
no ncleo oleoso, seria liberado desta estrutura vesicular mediante a
sua difuso atravs da parede polimrica, podendo apresentar cintica
de ordem zero1. Neste sentido, Fresta e colaboradores66 verificaram
que os perfis de liberao de carbamazepina, etosuximida e fenitona
(anticonvulsivantes), associadas a nanocpsulas de poli(cianoacrilato
de etila), seguiram aproximadamente uma cintica de ordem zero.
Desta forma, o mecanismo de liberao destes frmacos corres-
ponderia, principalmente, difuso dos mesmos a partir do ncleo
oleoso em direo parede polimrica. Alm disto, a rpida libera-
o inicial dos frmacos poderia, segundo os autores, ser atribuda a
uma pequena quantidade destes adsorvida superfcie das partcu-
las. Watnasirichaikul e colaboradores112 tambm estimaram que a
cintica de liberao de insulina a partir de nanocpsulas de
poli(cianoacrilato de etila) segue uma cintica de ordem zero.
Por outro lado, Calvo e colaboradores22, com base na similaridade
entre os perfis de liberao de indometacina, associada a nanocpsulas
de PCL e nanoemulso, sugeriram que a parede polimrica das
nanocpsulas no influencia o processo de liberao, sendo este afeta-
do somente pela partio do frmaco entre as gotculas de leo e o
meio aquoso externo. Comparando estes resultados com o perfil de
liberao da indometacina a partir de nanoesferas, a rpida liberao
deste frmaco foi interpretada pelos autores como decorrente da difu-
so desta atravs da matriz polimrica. Losa e colaboradores23, estu-
dando a liberao de metipranolol, um -bloqueador antiglaucoma, a
partir de nanocpsulas e nanoemulso, verificaram que no houve in-
fluncia significativa da parede polimrica na liberao do frmaco,
sugerindo que o passo limitante do processo de liberao do frmaco
a partio do mesmo entre as fases oleosa e aquosa. Por outro lado,
Valero e colaboradores113 verificaram diferenas significativas entre a
suspenso de nanocpsulas de poli(cianoacrilato de iso-butila) e a
emulso controle, quanto aos perfis de liberao da triancinolona, prin-
cipalmente durante as primeiras 10 h. Alm disto, a liberao de
triancinolona a partir das nanocpsulas apresentou-se bifsica, com
uma rpida liberao inicial, seguida por uma fase de liberao muito
lenta de primeira ordem.
733
ESTABILIDADE DAS SUSPENSES DE
NANOPARTCULAS POLIMRICAS
As suspenses coloidais normalmente no possuem tendncia
separao de fases, at alguns meses aps a preparao, pois o pro-
cesso de sedimentao lento para partculas submicromtricas, sendo
minimizado pelo movimento Browniano. No entanto, com o tempo,
pode ocorrer a aglomerao das partculas e, conseqentemente, a
sedimentao. Vrios fatores influenciam a estabilidade das suspen-
ses coloidais como, por exemplo, a adsoro de molculas ativas
superfcie das nanopartculas e a presena de tensoativos adsorvidos.
Alm disto, a avaliao da estabilidade qumica dos polmeros for-
madores dos colides, sob diferentes condies de armazenagem,
de fundamental importncia38,51. O tamanho de partcula, o potencial
zeta, a distribuio da massa molar do polmero, o teor de frmaco e
o pH so geralmente os parmetros fsico-qumicos que podem ser
utilizados para monitorar a estabilidade das suspenses coloidais
polimricas22,23,36,39,114. Poucos estudos referentes estabilidade de
nanopartculas contendo diferentes frmacos so encontrados na li-
teratura22,23,37,38,114,115 (Tabela 4).
A aplicabilidade industrial de nanopartculas dispersas em meio
aquoso pode ser limitada, devido aos problemas de baixa estabilida-
de fsico-qumica, em perodos de armazenamento prolongados. As
principais limitaes so a agregao das partculas, a estabilidade
qumica do polmero, do frmaco ou de outras matrias-primas e,
ainda, a liberao prematura da substncia ativa37,39-41,51. Alm disto,
importante enfatizar que formas farmacuticas lquidas so pro-
pensas proliferao microbiana, havendo a necessidade de adio
de conservantes116. Apesar disto, poucos trabalhos, relacionados a
suspenses de nanopartculas, tm se preocupado em avaliar a adi-
o de tais componentes s formulaes117,118.
Tendo em vista que estes problemas fsico-qumicos e micro-
biolgicos possam ser retardados ou evitados atravs de uma operao
de secagem42, vm crescendo o interesse pelo desenvolvimento de for-
mas farmacuticas slidas de nanopartculas, ampliando as perspecti-
vas para a utilizao clnica destes sistemas carreadores de frma-
cos43,50,107,119,120. A desidratao das suspenses de nanopartculas tem
sido realizada atravs das operaes de sublimao (liofilizao)40,41
ou de asperso (spray-drying ou nebulizao)50,107.
Liofilizados de nanopartculas
A liofilizao consiste na remoo da gua (gelo) atravs de su-
blimao121-123 e tem sido amplamente empregada para a secagem de
suspenses de nanoesferas38,40,41,89,124-126. Entretanto, no caso das sus-
penses de nanocpsulas, poucos trabalhos, utilizando esta opera-
o, tm sido desenvolvidos87,99,127,128.
Este mtodo foi empregado para a secagem de suspenses de
nanocpsulas, contendo indometacina, preparadas com PLA e
benzoato de benzila como ncleo das vesculas127,128. Entretanto, aps
a re-hidratao dos produtos liofilizados, armazenados temperatu-
ra ambiente, mais de 50% do frmaco associado foi liberado. Grsoy
e colaboradores128 atriburam estes resultados a mudanas na estru-
tura da parede das nanocpsulas, e Chasteigner e colaboradores127
sugeriram que, durante o estgio de congelamento, as tenses
provocadas pela cristalizao da gua poderiam quebrar as nano-
cpsulas, ocasionando a perda do contedo das mesmas para a fase
aquosa.
Em trabalho realizado pelo nosso grupo de pesquisa129, experi-
mentos de inchamento/dissoluo mostraram que filmes polimricos
de PCL ou de PLA foram rapidamente dissolvidos pelo benzoato de
benzila, sugerindo que, quando so empregadas estas matrias-pri-
mas, as nanopartculas formadas seriam micelas e no nanocpsulas.
734 Schaffazick et al. Quim. Nova

Tabela 4. Estudos de estabilidade de suspenses de nanopartculas polimricas, em funo do tempo de armazenamento

Frmaco Polmero* Sistema Condies de armazenagem Resultados Ref.
Indometacina PCL NC, NS t.a. 6 meses - taxa de associao inalterada 22
- diminuio do pH
- discreta reduo do potencial zeta (NC)
Metipranolol PIBCA NC 4 C 3 meses - potencial zeta inalterado 23
PCL - aumento do dimetro mdio
- diminuio da taxa de associao
Diclofenaco PCL NC, NS t.a. 3,5 meses - reduo do teor do frmaco 37
Eudragit S90 - reduo do pH
- precipitao
Ciclosporina A PCL NS 8 / 25 C 3 meses - taxa de associao inalterada 38
- aps 4 meses formao de agregados
Flurbiprofeno PCL NS 4 / 25 / 40 C 6 meses - agregao aps 60 dias das 114
formulaes de pH 2,67
- reduo do pH e do teor de
frmaco aps 60 dias das
formulaes de pH 7,0
Indometacina PCL PLA NC, NS t.a. / 50 C 3 meses - discreta reduo do teor do 115
frmaco t.a.
- acentuada reduo do teor do
frmaco 50 C
*PIBCA: poli(cianoacrilato de iso-butila); PCL: poli(-caprolactona); PLA: poli(cido ltico); NC: nanocpsulas; NS: nanoesferas; t.a.:
temperatura ambiente.

Portanto, as mudanas na estrutura da parede polimrica das
nanocpsulas, propostas por Grsoy e colaboradores128, ocorreriam
antes da etapa de congelamento, devido dissoluo do polmero
pelo benzoato de benzila e as tenses provocadas pela cristalizao
da gua, propostas por Chasteigner e colaboradores127, ocorreriam
em estruturas micelares, no ocasionando a quebra de nanocpsulas.
Conseqentemente, a operao de liofilizao no pode ser rejeitada
para a secagem de suspenses de nanocpsulas, quando o leo no
dissolve o polmero e a estrutura das partculas corresponde a uma
vescula.
A caracterizao dos liofilizados de nanopartculas geralmente
feita aps a ressuspenso do produto em gua e pode envolver a
observao visual do efeito Tyndall e da presena de grumos, a de-
terminao do dimetro de partcula, da taxa de associao do frmaco
e do pH38,40,41,48,87,124-126. Alm disto, alguns trabalhos empregam DSC41
e microscopia eletrnica99 para caracterizar estes sistemas.
Em artigos recentes, tm sido relatado que a presena de um
crioprotetor fundamental para a desidratao de suspenses de
nanopartculas atravs de liofilizao. Os crioprotetores mais comuns,
citados na literatura so os carboidratos (glicose, sacarose, manitol,
frutose), sendo os mono- e dissacardeos os mais efetivos na manu-
teno das caractersticas iniciais de tamanho das partcu-
las38,40,41,48,87,124-126. Este efeito crioprotetor ou lioprotetor dos aca-
res atribudo formao de uma matriz amorfa ao redor das
nanopartculas, promovendo um espaamento entre as mesmas, evi-
tando, assim, a agregao durante o congelamento, tornando-as
ressuspendveis41,48.
A seleo dos carboidratos mais adequados para atuarem como
crioprotetores, na liofilizao de nanopartculas, tem sido feita pelo
ndice de redisperso, o qual obtido pela relao entre os dimetros
mdios de partcula aps a ressuspenso dos liofilizados e antes da
secagem. Para um adequado efeito protetor, geralmente, necess-
rio adicionar quantidades elevadas de carboidrato. O produto apre-
senta um aspecto de slido aglomerado38,40,41,48,87,124-126. Cabe ressal-
tar que, quando estas formulaes so planejadas para a administra-
o parenteral, a manuteno do tamanho mdio das partculas um
fator crtico.
Em um de nossos trabalhos99 foram obtidos ps liofilizados de
micropartculas contendo nanocpsulas ou nanoesferas, destinados
administrao oral, empregando-se o dixido de silcio coloidal
(3% m/v) como adjuvante. Anlises atravs de MEV dos ps liofili-
zados evidenciaram micropartculas no esfricas, as quais, em au-
mentos maiores, apresentaram-se nanorrevestidas (Figura 3). A ope-
rao de retirada da gua das suspenses causa a formao das micro-
partculas pela deposio das nanopartculas orgnicas sobre as
nanopartculas do dixido de silcio.
Nebulizados de nanopartculas
A operao de secagem por nebulizao consiste na passagem
da soluo ou da suspenso, atravs de um orifcio atomizador, para
a cmara de secagem sob a forma de gotculas, em co-corrente,
contracorrente ou fluxo misto de ar quente, que promove a rpida
secagem das gotculas. As partculas slidas secas so, ento, sepa-
radas e recolhidas, podendo apresentar-se sob a forma de ps finos,
granulados ou aglomerados123,130.
Freitas e Mller131 empregaram a nebulizao como uma alter-
nativa liofilizao, objetivando aumentar a estabilidade de
nanopartculas formadas por lipdeos slidos, utilizando como
adjuvante carboidratos (manitol, lactose, trealose, sorbitol, glicose e
manose). Recentemente, nosso grupo de pesquisa49 descreveu, pela
primeira vez, o uso da nebulizao para a secagem de suspenses de
nanopartculas polimricas, com intuito de implementar a estabili-
dade destes sistemas. Utilizando esta metodologia, a partir de sus-
penses aquosas de nanopartculas pode-se obter produtos
pulverulentos. Esta caracterstica torna estes produtos interessantes
como intermedirios no desenvolvimento de formas farmacuticas
compartimentadas como cpsulas e comprimidos50,107,129 de ampla
Vol. 26, No. 5 Caracterizao e Estabilidade Fsico-qumica de Sistemas Polimricos
Figura 3. Fotomicrografias: comparao do liofilizado da disperso aquosa do dixido de silcio puro (a e b) com o liofilizado de nanocpsulas de poli(-
caprolactona) preparado na presena de dixido de silcio (c e d)
aplicao industrial. Os ps nebulizados tm sido caracterizados atra-
vs de MEV, da determinao do teor de frmaco, do rendimento da
nebulizao, da umidade residual15,50,107,129, da liberao in vitro dos
frmacos associados15 e, ainda, mediante anlises atravs de DSC107.
Alm da caracterizao fsico-qumica, estudos farmacocinticos12 e
avaliao da tolerncia gastrintestinal12,15, em ratos, de antiinfla-
matrios no-esterides associados a nanopartculas nebulizadas, tm
sido realizados. A MEV tem sido empregada para a observao de
nanopartculas adsorvidas superfcie do adjuvante de secagem
(dixido de silcio coloidal), aps a secagem das suspenses atravs
de nebulizao (spray-drying)50,107,129. Foi possvel evidenciar a pre-
sena de micropartculas de dixido de silcio revestidas por nano-
cpsulas, preparadas com PCL ou Eudragit S90 e Miglyol 810
(leo), cujos dimetros apresentavam-se semelhantes aos das part-
culas em suspenso aquosa, antes da secagem50. Por outro lado, para
ps nebulizados de nanoesferas de PCL no foram observadas
nanopartculas, com tamanho semelhante s suspenses de origem,
adsorvidas superfcie do dixido de silcio, sugerindo que a opera-
o de secagem por spray-drying causou uma alterao na organi-
zao das nanoesferas de PCL107,115. Estes estudos mostram a possi-
bilidade de preparao de forma controlada de ps microparticulados
nanorrevestidos49.
CONCLUSO
A compreenso do comportamento fsico-qumico das
nanopartculas polimricas objeto de inmeras pesquisas, sendo
que as principais dificuldades encontradas, para a caracterizao dos
735
mesmos, so conseqncias do tamanho reduzido destas partculas.
A caracterizao fsico-qumica desses sistemas s possvel medi-
ante a combinao de diversas tcnicas de anlise. Um dos maiores
desafios, que ainda persiste, a elucidao da forma de associao
dos frmacos a estas nanopartculas, visando a otimizao da taxa de
associao e a compreenso dos fatores que influenciam o perfil de
liberao dos frmacos. Entretanto, algumas generalizaes podem
ser assumidas com base na anlise dos resultados especficos, pro-
duzidos pela ampla gama de trabalhos publicados empregando dife-
rentes frmacos, composio de adjuvantes e tipos de sistemas
coloidais. Ainda que, de uma forma geral, as nanopartculas polim-
ricas apresentem uma distribuio unimodal com baixo ndice de
polidisperso, seus dimetros mdios podem ser fundamentalmente
dependentes da composio quali-quantitativa dos sistemas, bem
como do mtodo e condies operacionais de preparao. Estes
mesmos fatores, somados solubilidade e partio do frmaco nos
sistemas, influenciam os teores e as taxas de associao. As formas
de associao dos frmacos dependem do tipo de interaes destes
com o polmero e o leo, no caso de nanocpsulas, no sendo estri-
tamente dependente do coeficiente de partio do frmaco entre a
fase oleosa e a aquosa. Quando interaes inicas entre o frmaco e
o polmero podem se estabelecer, mesmo que o primeiro seja
lipoflico, a adsoro parece ser a forma de associao preferencial.
Diversos avanos tm sido alcanados, tanto no acmulo de infor-
maes relativas aos fenmenos fsico-qumicos envolvidos, quanto
em relao ao desenvolvimento de formulaes de nanopartculas
mais estveis, o que tm ampliado as perspectivas de emprego clni-
co destes sistemas.
736 Schaffazick et al. Quim. Nova

AGRADECIMENTOS 37. Schaffazick, S. R.; Pohlmann, A. R.; De Lucca Freitas, L; Guterres, S. S.;
Acta Farm. Bonaerense 2002, 21, 99.
38. Molpeceres, J.; Aberturas, M. R.; Chacon, M.; Berges, L.; Guzman, M.; J.
Os autores agradecem FAPERGS, PROPESQ-UFRGS e ao Microencapsulation 1997, 14, 777.
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