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DESIDROGENASE LCTICA

11.004.00
FINALIDADE A atividade da LDH na amostra calculada pela multiplicao do A/minuto pelo
Kit destinado determinao quantitativa da atividade da Desidrogenase Lctica fator correspondente:
(LDH) no soro e plasma pelo mtodo DGKC.
PRINCPIO DO MTODO Desidrogenase Lctica (U/L) = A/min x 8095
A lactato desidrogenase (LDH) catalisa a reduo do piruvato por NADH,
obtendo-se lactato e NAD+. A concentrao cataltica determinada a partir da Exemplo:
velocidade de desaparecimento do NADH, medido a 340nm.
A0 = 1,310 A1 = 1,265
LDH A2 = 1,220 A3 = 1,175
+ +
Piruvato + NADH + H L-lactato + NAD
A/min.= (1,310 - 1,265) + (1,265 - 1,220) + (1,220 - 1,175)
COMPOSIO DOS REAGENTES 3
A/min.= 0,045
Tampo TRIS 50 mmol/L pH 7,5; Piruvato 0,6 mmol/L;
LDH (U/L) = 0,045 x 8095 = 364 U/L
azida sdica 0,09% p/v.
OBS: Para clculo de Fator nas adaptaes em analisadores automticos utilizar
NADH 0,18 mmol/L; azida sdica 0,09% p/v. coeficiente de absortividade do NADH = 6,3.
SENSIBILIDADE E LINEARIDADE
CONDIES DE ARMAZENAMENTO E ESTABILIDADE
- Sensibilidade: 8 U/L.
Estabilidade: Estvel at a data de validade do kit que est impressa no
rtulo da embalagem. - Linearidade: 2000 U/L.
No usar reagentes cuja data de validade tenha expirado. Para valores superiores, diluir a amostra com NaCl 150 mM (0,9%), realizar nova
Conservar de 2 a 8 C. dosagem e multiplicar o resultado obtido pelo fator de diluio.
Os reagentes devem permanecer fora da temperatura especificada somente LIMITAES DA TCNICA
o tempo necessrio para a realizao dos testes. Anticoagulantes
No congelar e manter ao abrigo da luz. Citrato, EDTA, Fluoreto e Oxalato no devem ser usados, pois interferem na
MATERIAL NECESSRIO NO FORNECIDO dosagem.
 Espectrofotmetro ou fotmetro para leitura em 340 nm.
 Banho de gua, termostatizado a 37 C. Hemlise, Ictercia e Lipemia
 Pipetas de vidro e/ou automticas. Bilirrubina > 20 mg/dL
 Relgio ou Cronmetro. Triglicrides > 1000 mg/dL
Tubos de ensaio. CONTROLE DA QUALIDADE
CUIDADOS E PRECAUES Todo laboratrio clnico deve manter um programa de controle interno da
O kit destina-se somente para uso diagnstico in vitro. qualidade que defina claramente os objetivos, procedimentos, normas e critrios
 As amostras a serem analisadas devem ser tratadas como material para limites de tolerncia, aes corretivas e registro das atividades. Ao mesmo
potencialmente infectante. tempo, deve ser mantido um sistema definido para monitorar a variabilidade
analtica que ocorre em todo sistema de medio.
Utilizar os EPIs de acordo com as Boas Prticas de Laboratrio Clnico.
O uso de controles para avaliar a impreciso das determinaes deve ser prtica
Descartar as sobras das reaes de acordo com as Boas Prticas de
rotineira no laboratrio. Sugere-se usar um controle na faixa de referncia ou no
Laboratrio Clnico (BPLC) e Programa de Gerenciamento de Resduos de
nvel de deciso e outro controle com valor em outra faixa de significncia clnica.
Servio de Sade (PGRSS).
A aplicao do sistema de regras mltiplas de Westgard para avaliao do
As informaes de Descarte, Segurana e Primeiros Socorros esto estado de controle tambm recomendvel.
descritas na Ficha Individual de Segurana de Produtos Qumicos (FISPQ) O laboratrio deve participar de programas de controle externo de qualidade a
deste produto, disponvel em www.biotecnica.ind.br ou pelo telefone (35)- fim de verificar a exatido de seus resultados. Tm-se como exemplo os
3214-4646. programas oferecidos pela SBAC (Sociedade Brasileira de Anlises Clnicas) e
No misturar reagentes de lotes diferentes. SBPC (Sociedade Brasileira de Patologia Clnica).
No trocar as tampas dos frascos dos reagentes, a fim de evitar Para Controle Interno de Qualidade Laboratorial recomenda-se o uso do soro
contaminao cruzada. calibrador e dos soros controle abaixo:
No usar o reagente quando este apresentar caracterstica visual em Soro Calibrador - Autocal H 13.002.00
desacordo com o especificado na FISPQ do produto. Soro Controle Normal - Quantinorm 13.003.00
Evitar deixar os reagentes fora das condies de armazenamento Soro Controle Patolgico - Quantialt 13.004.00
especificadas, quando os mesmos no estiverem em uso. VALORES DE REFERNCIA
Usar pipetas de vidro e ponteiras descartveis especficas para cada
amostra, controle, padro/calibrador e reagente. 37 C
O nvel de gua do banho-maria deve ser superior ao dos tubos de ensaio Adulto 225 - 450 U/L
que contm as reaes. Crianas at 12 meses At 500 U/L
AMOSTRA - PREPARO E ESTABILIDADE
Soro e Plasma (heparina). Estes valores so unicamente para orientao sendo recomendvel que
A desidrogenase lctica estvel por 1 dia se conservada em temperatura de laboratrio estabelea seus prprios intervalos de referncia.
2 a 8 C.
Converso para Unidade do Sistema Internacional (SI): Kat/L
Obs: A demora na separao do soro, ocasiona resultados alterados. SEPARAR LDH (U/L) x 0,017 = LDH (Kat/L)
IMEDIATAMENTE. CARACTERSTICAS DE DESEMPENHO
PROCEDIMENTO TCNICO Repetibilidade
A) PREPARAO DOS REAGENTES
A realizao de 20 determinaes de uma mesma amostra em um mesmo dia,
com valores dentro da faixa de referncia mostrou um Coeficiente de Variao de
Reagente de Trabalho: preparar na proporo: 4 partes de R1 + 1 parte do R2.
2,96%.
Agitar suavemente. Estvel por 30 dias de 2 a 8 C.
Reprodutibilidade
B) PROCEDIMENTO
A realizao de 10 determinaes de uma mesma amostra, analisada em dias
1. Pr-aquecer o Reagente de Trabalho durante trs minutos a 37 C.
diferentes mostrou um Coeficiente de Variao de 0,52%.
2. Pipetar em um tubo de ensaio:
Volume Especificidade Analtica
Reagente de Trabalho 1,0 mL
Amostra 20 L A comparao com um mtodo similar, j validado, mostrou um coeficiente de
3. Homogeneizar e inserir nas porta-cubetas termostatizadas a 37C. correlao, r, igual a 0,999 a partir de amostras obtidas de pacientes de
Acionar o cronmetro. ambulatrio. A equao de regresso obtida foi Y = 0,9947 X + 4,794.
4. Aps 60 segundos, anotar a absorbncia inicial (A0) e efetuar novas leituras a SIGNIFICADO CLNICO
cada minuto, durante 3 minutos, (A1, A2 e A3 respectivamente). A desidrogenase lctica (LDH) a enzima responsvel pela converso de lactato
PROCEDIMENTO DE CALIBRAO/CLCULOS a piruvato e possui ampla distribuio nos rgos e tecidos. Est localizada no
Usando as leituras das absorbncias, calcular a mdia da variao da citoplasma e as maiores concentraes so encontradas no fgado, corao, rim,
absorbncia por minuto (A/min.). msculo esqueltico, eritrcitos, pulmo, bao, plaquetas, leuccitos e crebro.
As concentraes de LDH dentro das clulas cerca de 500 vezes maiores do
A/min. = (A0 - A1) + (A1 - A2) + (A2 - A3) que no sangue, sendo que qualquer aumento na atividade da LDH no soro
3 sugere leso tissular.
Sua dosagem especialmente indicada nas neoplasias, miocardites, infarto do
BIOTCNICA IND.COM. LTDA. Rua Igncio Alvarenga n 96, Vila Vernica,
Varginha MG BRASIL CEP: 37026-470 Tel/fax: +55 35 3214 4646 Reviso: 01 - JULHO/2011
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miocrdio, distrofia muscular, mononucleose infecciosa, hepatopatias, TABELA DE SMBOLOS INTERNACIONAIS
pneumopatias, etilismo, pancreatite e falncia renal.
Devido a sua alta concentrao intraeritrocitria qualquer hemlise pode levar a SMBOLO IDIOMA DEFINIO
resultados falsamente elevados. Portugus Consultar Instrues de Uso
OBSERVAES English Consult instructions for use
Espaol Consultar la metdica
1. O laboratrio deve estabelecer os requisitos qumicos, microbiolgicos e de Portugus Cdigo
partculas para a gua antes do seu uso para cada uma das suas aplicaes e English Code
deve definir as especificaes ou tipos de gua que os atenda. Uma vez que a Espaol Cdigo
pureza necessria tenha sido definida, o sistema de purificao deve ser Portugus Nmero de lote
validado e importante garantir que a gua obtida continue a atender s English Batch code
especificaes por meio de verificaes peridicas. Espaol Denominacin de lote
2. A limpeza e secagem adequadas do material usado so fatores fundamentais Portugus Para uso diagnstico in vitro
English For in vitro diagnostic medical device
para a estabilidade dos reagentes e obteno de resultados corretos. Espaol Para uso em diagnostico in vitro
APRESENTAES Portugus Contedo do kit
R1 1 x 40 mL 50 testes English Contents of kit
Apresentao 1 Espaol Contenido del estuche
R2 1 x 10 mL de 1 mL
Portugus Contedo suficiente para <n> testes
GARANTIA DE QUALIDADE English Contains sufficient for <n> tests
Espaol Contenido suficiente para <n> ensayos
Antes de serem liberados para o consumo, todos os reagentes Biotcnica so
Portugus Calibrador
testados pelo Departamento de Controle de Qualidade. A qualidade dos English Calibrator
reagentes assegurada at a data de validade mencionada na embalagem de Espaol Calibrador
apresentao, desde que armazenados e transportados nas condies Portugus Controle
especificadas. Os dados relativos ao Controle de Qualidade deste produto (lote English Control
impresso nas etiquetas dos frascos de reagentes) podem ser solicitados em: Espaol Control
sac@biotecnicaltda.com.br Portugus Padro
AUTOMAO English Standard
Espaol Patrn
Este procedimento automatizvel na maioria dos analisadores. Portugus Reagente e seu nmero/abreviao
Os protocolos esto disponveis em www.biotecnica.ind.br English Reagent and its number/abbreviation
SAC - SERVIO DE ATENDIMENTO AO CONSUMIDOR Espaol Reactivo e su nmero/abreviacin
Qualquer dvida na utilizao deste kit, entrar em contato com a Assessoria Portugus Limite de temperatura
Cientfica da Biotcnica Ltda, atravs do telefone +55 35 3214 4646 ou pelo English Temperature limitation
Espaol Temperatura lmite
email sac@biotecnicaltda.com.br
Portugus Data limite de utilizao (ltimo dia do ms)
REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS English Use by (last day of the month)
SCIENTIFIC DIVISION, WORKING GROUP ON ENZYMES. International Espaol Estable hasta (ultimo da del mes)
Federation of Clinical Chemistry IFCC methods for measurement of Portugus Fabricado por
catalytic concentration of enzymes. Clin. Chim. Acta. v. 281, v.1-2, p.S5- English Manufactured by
S39, 1999. Espaol Elaborado por
Portugus Risco biolgico
KREUTZER, H. H.; FENNIS, W. H. S. Lactic dehydrogenase isoenzymes in English Biological risk
blood serum after storage at different temperatures. Clin. Chim. Acta v.9, Espaol Riesgo biolgico
p.64-68, 1964. Portugus Corrosivo
YOUNG, D.S. Effects of drugs on clinical laboratory tests - vol. 2, 5 ed. English Corrosive
Washington DC: AACC Press, 2000. Espaol Corrosivo
WESTGARD, J. O. et al. A multi-rule shewhart chart quality control in Portugus Txico
English Toxic
clinical chemistry. Clin. Chem. v.27 p.493-501, 1981. Espaol Txico
RESPONSABILIDADE TCNICA Portugus Inflamvel
Dr. Gilson Srio Pizzo - CRF MG - 5310 English Flammable
MS Espaol Inflamable
80027310191 Portugus Nocivo / Irritante
English Harmful / Irritant
Espaol Nocivo / Irritante
Portugus Material reciclvel
English Recyclable material
Espaol Material reciclable
Portugus No descartar diretamente no ambiente
English Dispose properly
Espaol Desechar adecuadamente