DERMATOLOGIA VENEZOLANA, Vol. 25-Nov.

1-2,1987

LA CITOESTRUCTURA
DEL Mycobacterium Ieprae EN PELLET
Y VACUOLAS FAGOCITICAS
DEL NODULO HANSENIANO ACTIVO
* Jefe del Laboratorio de Histoqumica
** Director del Instituto de Biomedicina
Dra. I. Campo-Aasen* *** Profesor Asistente de Dermatologa
Dr. J. Convit**
Instituto de Biomedicina, Facultad de Medicina
Dra. N. Aranzazu*** Universidad Central de Venezuela

RESUMEN ABSTRACT

Se hace estudio ultraestructural del bacilo de
Hansen a 20.000 x en pellet y en vacuola del
ndulo hanseniano activo.
Se observa su pared celular, membrana plasmtica
mesosoma y nucleoide. En su citoestructura
no se diferencia de otras bacterias ya sean
stas Gram positivas o Gram negativas. Slo las
diferencia su cido resistencia la cual le da sus
caractersticas tintoriales especiales
A structural study of Mycobacterium Ieprae is made
at a magnification of 20.000 x. We make the observation
of the cell wall, the plasmatic membrane, the mesosome
and the nuclear body, similar to other bacteria.
Only the tintorial characteristic due to alcohol acid
resistance defines the difference with Gram positive
or Gram negative bacteria.

PALABRAS CLAVES: Mycobacterium Ieprae. Ultraestructura bacilar hanseniana.

INTRODUCCION toplasma de la clula husped no hi- mio al 1% x 1 hora, se lava por 2 veces
persensible. 6,7 en agua destilada, se deshidrata en
El Mycobacterium Leprae (ML)
En este trabajo se hace estudio ul- alcoholes y en xido de propileno x 15
agente causal de la infeccin hansenia-
traestructural del bacilo obtenido de m. cada vez. El pellet obtenido se
na ha sido estudiado por sus caracters-
pellet de ndulo de paciente y de "glo- polimeriza e impregna en Epon. Se ha-
ticas de oxidacin del 3-4-dihydroxi-
bis" en el interior de clulas hansenia- cen cortes del pellet y se observan a
phenylalanine 1 tcnica que ha sido cri-
nas en pacientes de lepra lepromatosa. 20.000 x. El mismo procedimiento se
ticada con respecto a su especificidad2
utiliz para el tejido obtenido del n-
y tambin por resultados negativos en
MATERIAL Y METODOS dulo.
nuestro laboratorio. 3 Hemos utilizado el
procedimiento de Baker para fosfo-
Se obtiene ndulo, 0,5 cm. de ta-
lpidos, 4 mtodo fcil para la identifi- DISCUSION
mao, de paciente de lepra lepromato-
cacin y diferenciacin de dos mico-
sa (LL), sin tratamiento. Se divide en
bacterias no cultivables, Mycobacte- La ultraestructura del ML refleja
dos partes, una para el "pellet" de ba-
rium leprae y Mycobacterium Ieprae- exactamente la estructura bacteriana
cilos y la otra para el estudio del bacilo
murium, siendo el ML la nica mico- caracterizada por una envoltura celular
en el tejido. El pellet se obtuvo rom-
bacteria no cultivable que produce una constituida por una pared celular, una
piendo previamente la parte del ndulo
coloracin definida con este mtodo. Se membrana plasmtica y un mesosoma y
con bistur" y tijeras y luego centri-
ha utilizado la hxtraccin con piridinas estructuras cromosmicas fibrilares o
fugando a 1500 g. x 10 m. en centrfuga
la cual elimina la cido resistencia y por cuerpo nuclear o nucleoide. A la
de Fisher modelo 57. Se deshecha el
ltimo se fa utilizado el estudio magnificacin de 20.000 x no observa-
sobrenadante y se utiliza el macerado
ultraestructural del ML en su iden- mos otras caractersticas de la estruc-
para la obtencin del pellet, el cual se
tificacin y reconocimiento en el interior tura bacteriana tales como inclusiones
procesa para M.E. siguiendo los proce-
de vacuolas fagocticas y en el ci- o grnulos de almacenamiento o volu-
dimientos habituales. Se postfija en os
tina, ribosomas, etc. Si observamos el

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 mesosoma en divisin y la presencia de
"globis" que indican crecimiento activo en
el citoplasma del husped as como
$ 9
plasmolisis bacilar. '

Hemos hecho la observacin de ML

del pellet y de un ndulo de paciente con
enfermedad activa no tratada. Creemos
que se trata de un estado activo, debido
a la actividad de la membrana plasmtica
y de los mesosomas en los cuales se
8 9
produce la divisin celular. ' Adems
hemos observado crecimiento bacteriano
dentro de la vacuola fagoctica y bacilos
libres en contacto directo con el
citoplasma del husped y por lo tanto
activacin del crecimiento posiblemente
despus de la ruptura de la membrana
fagoctica del citoplasma, hechos que
nos indican actividad de la infeccin
hanseniana en el momento del estudio.
Podemos concluir que la ML del pellet y
del tejido del ndulo corresponden a la
actividad clnica observada en el
paciente.

Otras caractersticas bioqumicas, la

actividad serolgica antignica, la tipi-
ficacin con bacterifagos, la patogeni-
cidad para animales de laboratorio, la
caracterizacin gentica, la sensibilidad
a los antibiticos o sea las mltiples
propiedades generales que se estudian
en la identificacin de bacterias no se
realizaron en este trabajo, habindose
limitado slo a la citoestructura de la
micobacteria, la cual se presenta similar
a la de otras bacterias.

Podemos llegar a la conclusin que

por el hecho de ser lipfilas y por poseer
caractersticas de cido resistencia
producidas por la naturaleza qumica de
la estructura de la envoltura celular,
estos caracteres siguen dando al ML la
nica distincin caracterstica diferencial
con otras bacterias ya sean stas Gram
9
Fig. 1. Pellet. ML. 20.000x. Corte de bacilo en seccin longitudinal. Muestra pared celular positivas o Gram negativas.
(pc) en extenso complejo de membrana plasmtica (MP) en su citoplasma, esbozo de
mesosoma (m), espacio claro atravesado por fibrillas longitudinales en su parte superior AGRADECIMIENTO
y relacionado al cuerpo nuclear (cn).
Este trabajo fue parcialmente
financiado por el Consejo Nacional de
Investigaciones Cientficas y Tecnol-
gicas (CONICIT) Proyecto S1-15.82 y por
el Consejo de Desarrollo Cientfico y
Humanstico de la U.C.V., Proyecto M-09-
16.82. Se agradece tambin la asistencia
tcnica de Z. Cova y N. Ghersi.

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 Fig. 3. Pellet. ML. Corte transversal. 20.000x. Se
observa en la parte superior de la fotografa
un bacilo con su membrana plasmtica (MP),
mesosoma (m). En la parte inferior se
observa un bacilo en plasmolisis (PL).

Fig. 2. Pellet. ML. 20.000x. Corte transversal de 3 micobacterias. Los sistemas de membranas
desarrollados a partir de la membrana plasmtica (MP), se observan claramente en la fotografa
izquierda. En la fotografa del lado derecho se observa el mesosoma (m).

Fig. 4. Pellet. M L. 20. 000x. Com posici n

fotogrfica. Se observan fibras conjuntivas
desintegradas (c), restos celulares granulosos y
fibrilares (rc), MI ntegros y plasmolisis (pl)
con membrana plasmtica, mesosoma y
pared celular. Se observa tambin plasmolisis
de bacilos (pl), mitocondria (m) del tejido, Fig. 5. Corte de ndulo, ML 20.000x donde se observa el ncleo de (a clula (n), un globi (gI)
nucleoide (nc). y bacilos aislados ML en el citoplasma celular, mitocondria (m).

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Fig. 6. Corte de ndulo. ML. 20.000x. Se observa ncleo (n) globi (91) y bacilos libres en el
citoplasma (ML). Se observan tambin bacilos en plasmolisis (pl), mitocondria del tejido (m).

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