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REACCIN ANTGENO-ANTICUERPO

Cuando un Ac entra en contacto con un Ag contra el que est dirigido, se unen formando el
complejo Ag-Ac.
Reversible, depende:
- Del grado de adaptacin entre ambas molculas (llave-cerradura), que permite que ambas
molculas se mantengan unidas.
- Fuerza y estabilidad de los enlaces que las unen, mediante qu forma est armado ste
complejo Ag-Ac.
- No es una situacin fija no dinmica, tiene movimiento, por la estructura molecular del
anticuerpo, y la estructura del antgeno y la zona o no de exposicin que en algn minuto
estn ms prximos o como el medio va a incidir en que esa situacin se mantenga con un
cierto nivel de estabilidad o de movimiento de la estructura. Hay puntos en los cuales se
encuentran y se produce sta unin.

Afinidad del Ac.


- Es la fuerza de unin entre el Anticuerpo con su antgeno
- Determina que exista una atraccin entre ellos.
- Esa fuerza es la suma de las fuerzas de los enlaces que intervienen en la unin
- No cualquier cosa se une con cualquier cosa.

Complementariedad de eptope y anticuerpo


- Eptope y Ac han de tener estructuras complementarias que encajan entre s
- Se forman varios enlaces no covalentes simultneamente
- La distancia unin entre el Ag y el Ac es muy pequea entre el punto de unin, lo que
incrementa la fuerza de unin.

Avidez del Anticuerpo


- Medida de la fuerza de unin y estabilidad del complejo Ag multivalente-Ac multivalente.
- Ac multivalentes: tienen mas de 1 punto unin para Ags
- Ag multivalentes: varios determinantes antignicos(mas de 1 pto de unin para Ac)
- La fuerza de uniones mayor que la suma de las afinidades de cada uno de los puntos de
unin.

Especificidad del Anticuerpo


- Si un Ac reacciona solo con un Antgeno: muy especfico
- Si un Ac reacciona con varios antgenos: Reactividad cruzada
- Esto ocurre porque varios Ags tienen uno o ms determinantes antignicos iguales o
similares, por lo tanto capaces de unirse al anticuerpo.

Principios que rigen la reaccin Ag-Ac


- Especificidad (Ac-epitope)
- Reaccionan molculas enteras
- La unin Ag-Ac es firme pero reversible (condiciones fsico-qumicas)
- Es un fenmeno de superficie
- Las partes reaccionantes se combinan en proporciones variables.
- El tiempo es que se produce es variable.
In vivo:
- Generalmente invasin en organismo por Ags. Extraos: Ej. R.H transfusional
- Transferencia Pasiva : E.H.R.N
- Estados de autoinmunidad: A.H.A.I, prpura trombocitopenica autoinmune, neutropenia
autoinmune.

In vitro:
- Es de particular importancia en Bco. de sangre porque:
o A. Permite determinar Ags. Y Acs.
o B. Ser estudiado en laboratorio
- Naturaleza especifica de Rx: dependen de variables relacionado con clase de Acs,
condiciones de Rx y caracteristicas del Ag.

Reacciones Ag-Ac:
Ocurren en 2 fases (la mayora):
- 1era fase: se combina el Ag. Con el Ac.
- 2da fase: A travs de cambios electroqumicos de la atraccin de fuerzas moleculares con
cargas (+) y (-) se produce el complejo Ag-Ac. Estas fases se sobreponen, pero a medida
que se formen complejos, la rx se hace visible.

Condiciones Rx; formacin de complejos


- Tamao del Ag.
- Tamao molecular del Ac. (menor importancia)
- Los Ag pueden ser pequeos o grandes o ser parte de estructuras ms complejas ( GR,
leucocitos, clulas titulares o bacterias)
- Tamao del Ag. Es importante para determinar la naturaleza fsica del complejo Ag Ac.

Complejo Ag-Ac:
- Unin no depende de formacin con enlaces covalentes
- Naturaleza estructural permite contacto epitope y sitio de combinacin del Ac.
- Combinacin se mantiene mediante uniones intermoleculares dbiles
- Grupos Inicos H, uniones hidrofbicas (interactan para mantener el complejo formado)

Tipos de reaccin
- Aglutinacin
- Inhibicin
- Precipitacin
- Radioinmunoensayo
- Enzimainminoensayo
- Hemlisis
- Absorcin
- Fijacin de complemento
- Fluorescencia
- Otros
Rx en el Laboratorio:
- Aglutinacin Hemlisis: Grupo Sanguneo
- Inhibicin, absorcin, elusin: Identificacin Acs.
- Precipitacin; Fijacin de complemento y RIA: Deteccin de Ag. De Hepatitis viral y estudio
de otras enfermedades
- Fluorescencia: Demostracin Ag. GR Sangre, en tejidos y de Igs en clulas y otros tejidos.
- Enzimainmunoensayo: Ag y Acs en plaquetas, leucocitos, hepatitis b enfermedades
parasitarias.

Aglutinacin:
- Rx ms importante en Bco. de Sangre
- Ag + Ac = Aglutinacin
- Ocurre en 2 fases:
1. Rx Inmunoquimica especifica: sensibilizacin
2. Proceso fsico de aglutinacin: Uniones de GR por puentes de Ac.

Ag + Ac AgAc K1/K2 K

Factores que afectan la K:


1. Relacin entre concentracin de Ag y Ac (prozona)
2. Temperatura (cold, warm)
3. pH optimo react GR sanguneos: 6,5 7,5
Anti D: 6,5 7 (cambios reactivos 5,5 8,5)
4. Tiempo incubacin: corto anti A y G.R. A1 (Stroup y Mc llroy) incuban 15 min.
5. Fuerza inica del medio

Aglutinacin:
- Acs IgM Completos
- Acs IgG incompletos
- - N y localizacin de Ags. Membrana GR: Determinado para cada grupo sanguneo,
algunos con mayor capacidad antignica ABO en la membrana que otras.
- Caractersticas moleculares del Ac
- Potencial Z
- Centrifugacin: 3400 x 15 seg: 1000 x 1 min
- Medio de Rx: salino, albmina, liss, enzimas proteolticas

N de sitios en la membrana:
- Mayor nmero de sitios antignicos: clulas del grupo A: 1x106
- Menor para el kell: 2x103
- Se ha estimado el nmero para algunos grupos.

Factores que pueden favorecer o influenciar en la aglutinacin:


- Grado hasta donde puede proyectarse el Ag sobre la Mb eritrocitaria, Ej. Ag A puede
proyectarse ms que el Ag Rh. Por la estructura molecular de Ac por cmo se proyecta la
protena antignica hacia el medio o hacia el exterior de la clula para que pueda fijarse el
anticuerpo.
- La proximidad de los sitios Ag depende de N de sitios Ags de cada clula, mayor densidad,
mayor proximidad y viceversa.
- No hay localizaciones en polos o en sectores de la clula, solo est dado por el nmero.
- La distribucin normal de las zonas de concentracin del Ag y su capacidad para
movilizarse y formar grumos despus de combinarse con el Ac.

Caractersticas moleculares del Ac:


- IgG distancia de 150 , 2 sitios de unin a Ag
- IgM, circular, 10 sitios de unin, ms distancia 300
- Los Ac IgM aglutinan los glbulos rojos en salino, en cambio la gran mayora de los IgG no
lo hacen, dado el tamao de la molcula y el N de sitios de unin al Ag.
- Los IgM reaccionan mejor a bajas T, especificidad antiA, H1,Lea, Leb y P1 no causan
aglutinacin a T mayor de 20-25C stos Ac de amplio rango trmico, fijan C.
- Los IgG no aglutinan en salino, salvo que se agreguen potenciales que incrementen la
constante dielctrica disminuye el potencial Z, Ej: Albmina bovina.

Potencial Z y Ac:
- Potencial Z para aglutinacin de los Ac IgM es de 18 mV.
- Potencial Z para los mismos efectos en caso de IgG es de 6,5 mV.
- Los Acs IgM por ser de mayor tamao pueden cubrir distancias mayores entre los
eritrocitos que los IgG.

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