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3 Volume 2

Mrcia Attias
Narcisa Cunha e Silva

Biologia Celular I
Biologia Celular I
Volume 2 - Mdulo 3 Mrcia Attias
Narcisa Cunha e Silva

Apoio:
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Mrcia Attias
Narcisa Cunha e Silva EDITORA PROGRAMAO VISUAL
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E REVISO Carmen Irene Correia de
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eletrnico, mecnico, por fotocpia e outros, sem a prvia autorizao, por escrito, da Fundao.

A885b
Attias, Mrcia
Biologia celular 1: v.2. / Mrcia Attias Rio de Janeiro:
Fundao CECIERJ, 2010.
130p.; 19 x 26,5 cm.

ISBN: 85-89200-63-9

1. Biologia celular. 2. Membrana celular. 3. Organelas celulares.


4. Endocitose. I.Silva, Narcisa Cunha e. II. Ttulo.
CDD: 571.6
2010/1
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Biologia Celular I Volume 2 - Mdulo 3

SUMRIO Aula 13 Receptores de membrana e princpios de sinalizao celular I ____ 7


Mrcia Attias / Narcisa Cunha e Silva

Aula 14 Receptores de membrana


e princpios de sinalizao celular II _____________________ 19
Mrcia Attias / Narcisa Cunha e Silva

Aula 15 Introduo s organelas celulares_______________________ 33


Mrcia Attias / Narcisa Cunha e Silva

Aula 16 Retculo endoplasmtico _____________________________ 43


Mrcia Attias / Narcisa Cunha e Silva

Aula 17 Complexo de Golgi _________________________________ 59


Mrcia Attias

Aula 18 Controle de qualidade da sntese protica ________________ 77


Mrcia Attias

Aula 19 Endocitose ________________________________________ 89


Mrcia Attias / Narcisa Cunha e Silva

Aula 20 Compartimentos endocticos _________________________ 103


Mrcia Attias

Gabarito _______________________________________121
Receptores de membrana

13
AULA
e princpios de
sinalizao celular I
objetivos

Ao final desta aula, voc dever ser capaz de :


Entender como e por que as clulas se comunicam.
Reconhecer os principais tipos de sinalizao entre clulas.
Conceituar ligante e receptor.
Entender como molculas hidrofbicas atuam na
sinalizao.
Entender como molculas que no atravessam
a membrana podem transmitir informao para o
ambiente intracelular.
Biologia Celular I | Receptores de membrana e princpios de sinalizao celular I

INTRODUO Em organismos multicelulares, essencial que as clulas se comuniquem,


possibilitando aes coordenadas. Essa comunicao se d atravs de molculas
que uma determinada clula produz e coloca no meio extracelular para serem
ento percebidas pelas outras clulas.
Se compararmos a comunicao entre clulas com a comunicao
entre as pessoas, o assunto fica mais claro: a forma mais fcil de duas pessoas
se comunicarem pela linguagem verbal. Algum diz uma frase que contm
certa informao. Para que outra pessoa receba essa informao corretamente,
preciso primeiro que essa pessoa possa ouvir. Depois preciso que ela entenda
o idioma usado pela pessoa que disse a frase, s a partir da o sentido da frase
passa a valer.
Entre clulas, dizer uma frase no significa emitir um som, mas
liberar no meio extracelular uma ou mais molculas. Para que a informao
seja transmitida, preciso que as outras clulas possam ouvir, ou seja,
preciso que as outras clulas tenham receptores capazes de perceber a
presena daquela molcula no meio extracelular. Alm disso, necessrio
que as clulas que apresentam os receptores tenham condies de
decodificar a informao recebida, ou seja, entendam o idioma. Vamos
chamar a clula que lanou a molcula de clula sinalizadora, a molcula
que leva a informao de ligante e a clula que percebeu a presena do
ligante no meio de clula-alvo (Figura 13.1).
Nem sempre o ligante lanado no meio, ele pode permanecer
exposto na membrana da clula sinalizadora, que precisa estar prxima o
suficiente da clula-alvo para que haja contato com o receptor (Figura 13.1).
Um sinal pode, portanto, alcanar apenas clulas vizinhas, se ele permanece
ligado membrana da clula sinalizadora. Mas se ele for secretado (isto
, lanado no meio extracelular), poder se difundir e alcanar clulas
prximas ou mesmo outras muito distantes, se ele for transportado pela
corrente sangunea.

Figura 13.1: A clula sinalizadora


e a clula-alvo podem, ou no,
entrar em contato.

8 CEDERJ
13 MDULO 3
Tipos de sinalizao

De acordo com a meia vida (veja o boxe) da molcula sinalizadora e de quais clulas

AULA
possuem receptores para aquele sinal, podemos classificar os tipos de sinalizao como:
a) Parcrina a molcula sinalizadora tem vida curta e os receptores esto nas clulas
prximas (Figura 13.2.a). Nesse caso, a molcula sinalizadora chamada de mediador local.
b) Autcrina a molcula sinalizadora tem vida curta e o receptor est na prpria clula que
emitiu o sinal. Para voc entender melhor, compare a sinalizao autcrina com algumas coisas
que ns fazemos, como colocar um bilhete para ns mesmos a fim de no esquecer de fazer alguma
coisa, ou anotar um compromisso na agenda, ou colocar o despertador para tocar na hora que queremos
acordar. Todos esses exemplos so sinais que colocamos e ns prprios percebemos; somos, assim,
tanto emissores como alvos dos mesmos sinais, que so, portanto, autcrinos (Figura 13.2.b).
c) Dependente de contato a molcula sinalizadora no secretada, ficando exposta na
superfcie da clula sinalizadora, e a clula-alvo precisa fazer contato para que o receptor possa se
ligar (Figura 13.1).
d) Endcrina a molcula sinalizadora tem vida longa, lanada na corrente sangunea
e vai atingir clulas-alvo em locais distantes. Nesse caso, a molcula sinalizadora chamada de
hormnio (Figura 13.2.d).
e) Neuronal um caso
especial de sinalizao entre clulas
que poderia ser classificado como
parcrino ou endcrino. Nessa
situao, a molcula sinalizadora,
chamada neurotransmissor, viaja
grandes distncias, mas no no
sangue ou no meio extracelular
e sim dentro de prolongamentos
celulares dos neurnios, os
axnios, indo atingir a clula-
alvo longe do corpo celular do
neurnio que emitiu o sinal,
mas prximo do axnio onde
a molcula sinalizadora foi
secretada (Figura 13.2.c).

Figura 13.2: Tipos de sinalizao entre


clulas: parcrina (a), autcrina (b),
neuronal (c) e endcrina (d).

CEDERJ 9
Biologia Celular I | Receptores de membrana e princpios de sinalizao celular I

A meia-vida de uma substncia o tempo que leva para que uma


determinada quantidade dela perca metade de sua atividade. Esta medida
da atividade muito utilizada para compostos radioativos, mas tambm se
aplica a hormnios, drogas e outras molculas com atividade em sistemas
bioqumicos. Algumas substncias sinalizadoras, como o neurotransmissor
acetilcolina, se degradam alguns milissegundos aps serem secretadas. J
alguns hormnios permanecem ativos na circulao por vrias semanas,
antes de serem degradados.

Um sinal pode gerar muitas respostas diferentes

Quando a molcula sinalizadora secretada no meio extracelular,


ela entrar em contato com vrias clulas, mas apenas um pequeno
nmero restrito delas responder ao sinal, porque apenas algumas
expressam o receptor capaz de reconhecer a molcula sinalizadora
(Figura 13.3.a).
a

Vrias clulas sinalizador as

ue
ng
Sa
Figura 13.3: (a) Na corrente sangunea circulam
muitos hormnios, secretados por diferentes
clulas, que atingiro vrias clulas, mas s
Hormnios Vrias clulas-al vo algumas expem o receptor adequado. (b) Do
Vrias clulas sinalizadoras mesmo modo, um neurnio possui diferentes
b prolongamentos para alcanar as clulas que
possuem os receptores capazes de reconhecer
o neurotransmissor.

Vrias clulas-alvo

Um exemplo disso novamente o neurotransmissor acetilcolina,


que serve de sinalizador para clulas-alvo diversas, que reagem de modo
diferente ao mesmo sinal: uma clula muscular esqueltica vai se contrair
quando seu receptor de acetilcolina reconhecer esse neurotransmissor no
meio; j no msculo cardaco, a freqncia de contrao da clula muscular
cardaca at diminui na presena dessa molcula. Se a acetilcolina atingir
uma clula da glndula salivar, que expressa o mesmo receptor da clula
cardaca, vai provocar uma resposta diferente: a secreo de saliva
(Figura 13.4). Os receptores que essas clulas apresentam em sua superfcie
so diferentes, apesar de reconhecerem a mesma molcula sinalizadora.

10 CEDERJ
13 MDULO 3
Clula muscular esqueltica
Figura 13.4: Diferentes
clulas podem responder
de modo diferente
mesma molcula sinali-

AULA
zadora, por apresentarem

Acetilcolina
diferentes receptores,
como as clulas muscula-
Contrao
res esqueltica e cardaca,
ou mesmo apresentando
receptores iguais, como as
clulas cardaca e secretria.

Clula muscular cardaca

Diminuio
de freqncia
Clula que no se comunica
se trumbica
Clula secretria

Cada clula recebe ao mes-


mo tempo vrios sinais trazidos por
diferentes molculas sinalizadoras e
Secreo
ela os reconhece porque possui em
sua superfcie muitos receptores di-
ferentes. Uma importante mudana
de comportamento dessa clula
pode depender da interao de vrios sinais (Figura 13.5). Veja nessa figura
que, se no recebesse nenhum sinal, essa clula morreria. S para sobre-
viver ela precisa receber vrias informaes do meio externo, como por
exemplo: sobre a disponibilidade de nutrientes, sobre o nmero total de
clulas do rgo de que ela faz parte etc. Para se dividir, alm dos sinais
de sobrevivncia, tambm so necessrios sinais de proliferao. Para
que ela se diferencie em clula especializada, preciso que os sinais de
proliferao no estejam presentes (ou que a clula no os reconhea mais
porque deixou de expor os receptores para eles) ao mesmo tempo em
que sinais de diferenciao apaream. Alguns desses sinais so molculas
conhecidas, outros ainda no. Assim, quando clulas so mantidas in
vitro, acrescentamos soro ao meio de cultura. O soro contm os sinais
de proliferao conhecidos e tambm os que ainda no conhecemos.
O recente uso teraputico de clulas-tronco (veja a Aula 4, de Cultura
de clulas) conseqncia natural desses conceitos e da melhoria das tcnicas
de obteno de clulas-tronco dos tecidos de adulto (voc vai saber mais
numa aula especfica sobre clulas-tronco em Biologia Celular II).

CEDERJ 11
Biologia Celular I | Receptores de membrana e princpios de sinalizao celular I

Morte celular

Figura 13.5: Diferentes sinais recebidos por


C uma clula-alvo podem modular seu
B comportamento. A clula que no
recebe nenhum sinal acaba morrendo.
A simples manuteno da vida celular j
depende de vrias informaes sinalizadas
A Sobrevivncia pelas molculas A, B e C. Comportamentos
mais complexos, como a proliferao e a
diferenciao, requerem sinalizadores
especficos, representados por D, E, F e G.
D
C
E

B
Proliferao
A

F
C G

B
Diferenciao
A

Tipos de receptores

Qual o tipo de receptor mais adequado para receber um determinado sinal? Isso depende
de que tipo de molcula esse sinal for (Figura 13.6):
a) se a molcula sinalizadora for pequena e/ou hidrofbica o suficiente para atravessar a
membrana, o receptor deve ser intracelular;
b) se a molcula sinalizadora no puder atravessar a membrana, o receptor ter de estar
obrigatoriamente na membrana plasmtica, exposto na superfcie celular.
Essas caractersticas de afinidade, isto , permeabilidade entre as molculas sinalizadoras e as
membranas celulares, mais especificamente a bicamada lipdica, j foram abordadas na Aula 8.

Figura 13.6: Os receptores para molculas hidroflicas ficam voltados para o meio extracelular (a) enquanto os
receptores para sinalizadores pequenos e hidrofbicos so intracelulares (b).

12 CEDERJ
13 MDULO 3
Sinalizao por ligantes hidrofbicos

O exemplo mais notvel desse tipo de sinalizao o do xido

AULA
ntrico (NO). Essa pequena molcula age sobre as clulas musculares
lisas que envolvem os vasos sanguneos, provocando vasodilatao local.
Promovendo o relaxamento dessas clulas musculares, o NO faz com
que o vaso aumente de calibre, deixando o sangue fluir mais facilmente.
O NO produzido nas clulas endoteliais que revestem os vasos, isto
, bem perto das clulas sobre as quais ele age. Quando um impulso
nervoso chega a essas clulas, elas ativam uma enzima, a xido ntrico
sintase (NOS), que produz NO a partir do aminocido arginina. O NO
um gs e, assim como o O2 e o CO2, ele atravessa as membranas por
difuso simples (a Aula 8), saindo da clula na qual foi produzido e se
espalhando rapidamente pelas clulas vizinhas. Nas clulas musculares
lisas, o NO ativa outras enzimas, o que leva vasodilatao. O NO um
mediador local, fazendo sinalizao parcrina.

VIAGRA NO. VOC SABIA?


Muitas clulas nervosas tambm usam o xido ntrico como mediador local.
No pnis, por exemplo, a liberao de NO pela inervao autnoma local age
sobre a musculatura lisa, ativando enzimas cujos produtos dilatam os vasos que
se enchem de sangue, causando a ereo.
A sinalizao mediada por xido ntrico dura pouco porque o NO rapidamente
degradado e vira nitrito. O produto das enzimas que ele ativa tambm dura
pouco porque tambm degradado rpido. O mecanismo de ao de alguns
medicamentos, como o Viagra, impedir a degradao do produto das enzimas
ativadas por NO, fazendo, assim, a vasodilatao durar mais tempo.

O que chamamos de hormnios no passam de sinalizadores

Como vimos, o NO age sobre uma enzima que j est pronta na


clula, precisando apenas ser ativada. Nem sempre assim com outras
molculas sinalizadoras. O NO difunde-se rpido porque gasoso, mas
tem vida curta. Outras molculas sinalizadoras hidrofbicas tambm
so capazes de atravessar membranas e tm vida muito mais longa
(so molculas muito mais estveis). Elas so produzidas e secretadas
por clulas glandulares, viajando grandes distncias pela corrente
sangunea at achar clulas-alvo. Essas molculas sinalizadoras so
chamadas hormnios. Como so hidrofbicas, tm problemas para
viajar pela corrente sangunea e o meio extracelular, que so aquosos.

CEDERJ 13
Biologia Celular I | Receptores de membrana e princpios de sinalizao celular I

Por isso, precisam associar-se a molculas hidroflicas que tenham um stio capaz de acomod-la.
Essa molcula hidroflica, que chamamos carreadora (Figura 13.6.b), freqentemente a albumina
do soro. Ao chegar bem perto da membrana de uma clula, a molcula sinalizadora (ligante) se
solta da carreadora e se difunde pela bicamada lipdica, entrando na clula. O receptor para este
ligante deve estar no citoplasma e, com a chegada deste, fica ativo, desempenhando suas funes.
muito freqente, porm, que o receptor seja um fator de transcrio, isto , uma molcula
que, com a chegada do ligante, forma um complexo que entra no ncleo e vai ativar a transcrio
de um gen (Figura 13.7).

Figura 13.7: O cortisol, produzido


pelas glndulas supra-renais, um
sinalizador hidrofbico que forma
um complexo receptor ligante,
entrando no ncleo, onde vai ativar a
transcrio de um gen.

Claro que essa resposta demora muito mais para aparecer do que aquela que depende
apenas da ativao de uma molcula que j estava pronta. Mas tambm permanece mais tempo,
j que o gen ativado produzir uma protena que no ser degradada de imediato. Alguns
dos hormnios mais conhecidos agem assim, como por exemplo os hormnios esterides
(testosterona, estrognio, cortisol e outros) e os tireoidianos.

Sinalizao por ligantes hidroflicos

Mas e se o ligante no consegue atravessar a membrana? O que voc faria para passar
uma informao para algum que est num lugar onde voc no pode entrar? No vale
telefonar! Acho que o jeito seria mandar um recado por algum que estivesse na porta (ou na
janela!). E recomendar muita ateno para que o recado chegue direitinho.
Quando a molcula sinalizadora hidroflica e/ou grande, no podendo, portanto, atravessar a
bicamada lipdica, o receptor vai ter de funcionar como um verdadeiro garoto de recados, mas sem sair

14 CEDERJ
13 MDULO 3
da membrana onde tem de estar obrigatoriamente exposto (Figura 13.6.a).
Quando o receptor recebe a molcula sinalizadora, ele invariavelmente muda

AULA
de conformao. A mudana conformacional passa a informao adiante
porque muda o comportamento do receptor. Vamos ver quais so as principais
classes de receptores para ligantes hidroflicos e o que acontece depois da
chegada do ligante a cada um deles, passando a informao adiante.
Existem trs tipos de receptor de sinalizao na membrana
plasmtica: a) os receptores do tipo canal; b) os associados protena
G e c) os receptores enzimticos. Em comum eles possuem o fato de
serem protenas transmembrana e de no entrarem na clula (a no
ser que devam ser degradados), o que os diferencia dos receptores de
endocitose (voc vai conhec-los na Aula 19), que entram na clula
junto com o ligante. Vamos ver as caractersticas bsicas de cada um.
a) Receptores do tipo canal
Esses voc j conhece das Aulas 10 e 11, de transporte. So os
canais controlados por ligante. Esses receptores podem ser os canais
eles prprios ou estar associados a um canal inico, de modo que a
mudana conformacional induzida pelo ligante ativa o canal associado,
que se abre (Figura 13.8). Um bom exemplo o receptor de acetilcolina
em clulas musculares esquelticas.

Figura 13.8: Os canais inicos


ativados por ligante possuem
stios receptores para o ligante
que mudam sua conformao,
abrindo o canal inico.

b) Receptores ligados protena G


So protenas transmembrana multipasso (lembra? da aula 10!)
que atravessam a membrana sete vezes e cuja mudana conformacional
ao receberem o ligante os faz ativar uma segunda protena, que tambm
muda de conformao, passando o sinal adiante. Esses receptores so
bastante variados, mas a segunda protena que ativada no varia muito.
Ela chamada protena G porque pertence a uma famlia de protenas
que ligam GTP, ficando ativadas, e depois hidrolisam o GTP a GDP + Pi,
voltando ao estado inativo (Figura 13.9). As protenas G funcionam como
interruptores: com GTP esto ligadas e com GDP esto desligadas.

CEDERJ 15
Biologia Celular I | Receptores de membrana e princpios de sinalizao celular I

Tamanho documento?

Existem protenas G de vrios tamanhos,


podendo ter apenas uma cadeia protica
(monomricas, como as da superfamlia Ras
que voc vai conhecer na prxima aula),
duas (heterodimricas, como a tubulina que
forma os microtbulos, Aula 23) ou trs
(heterotrimricas, que voc ver na aula
seguinte a essa, funcionando em sinalizao
celular). Das trs subunidades da protena G,
a a que liga e hidrolisa GTP, enquanto a
dupla responsvel pelo ancoramento ao
folheto citoplasmtico da membrana.
As protenas G, ao serem ativadas, podem
funcionar ativando outras protenas, quando
Figura 13.9: Quando chega um sinal, a protena G solta
o GDP que estava ligado a ela. Um GTP, abundante no so chamadas protenas G estimulatrias
citoplasma das clulas, logo o substitui, ativando a
protena G, que passa o sinal adiante. Logo aps, a (Gs), ou inibilas, sendo chamadas protenas G
protena G hidrolisa o GTP e libera o Pi, voltando ao
estado de repouso. inibitrias (Gi).

Protena G estimulatria: o efeito


domin (ou cascata) de sinalizao
Receptor Enzima
Protena inativa
Um receptor que recebeu o ligante ativa
G
a protena G, que vai por sua vez ativar uma
terceira protena, geralmente uma enzima
Ligante
(Figura 13.10).

Figura 13.10: Sinalizao por receptor associado


protena G. A enzima pode ser a adenilciclase ou
a fosfolipase C.

Enzima
ativa

16 CEDERJ
13 MDULO 3
As enzimas ativadas por protena G devem funcionar de modo a
passar o sinal adiante. As enzimas que fazem isso so principalmente

AULA
a adenilciclase e a fosfolipase C. Elas tm em comum, alm de serem
ativadas por protena G, claro, o fato de sua ao enzimtica gerar
produtos pequenos e de curta durao, os mensageiros secundrios. Vamos
estudar uma de cada vez na aula seguinte.

RESUMO

Receptores para ligantes hidrofbicos ou muito pequenos esto no citoplasma


ou no ncleo.

Ligantes que entram na clula podem ter vida muito curta e provocar
respostas rpidas, como o xido ntrico, ou ter vida longa e provocar resposta
lenta e duradoura, como os hormnios esterides.

Receptores de ligantes hidroflicos esto na membrana plasmtica. Ligantes


hidroflicos no entram na clula, mas passam a informao para o ambiente
intracelular.

Receptores de ligantes hidroflicos podem ser de trs tipos: canal, associados


protena G ou enzimticos.

Receptores mudam de conformao com a chegada do ligante.

EXERCCIOS
1. Conceitue:

a. Receptor:

b. Ligante:

c. Molcula sinalizadora:

d. Clula-alvo:

2. Compare e diferencie sinalizao parcrina de sinalizao autcrina.

3. Compare e diferencie sinalizao endcrina de sinalizao neuronal.

CEDERJ 17
Biologia Celular I | Receptores de membrana e princpios de sinalizao celular I

4. Avalie se as frases abaixo esto certas ou erradas:

Uma molcula sinalizadora pode ser reconhecida por vrios tipos celulares
diferentes. ( )

Um tipo celular possui vrios receptores de um mesmo tipo. ( )

Um tipo celular possui receptores de tipos diferentes. ( )

Uma mesma molcula sinalizadora tem efeitos diferentes em diferentes tipos


celulares. ( )

5. Que caractersticas deve ter um sinalizador que reconhecido por um receptor


intracelular?

6. Por que os efeitos da administrao de um hormnio esteride podem demorar


muito para aparecer?

7. De que maneiras pode atuar um ligante hidroflico?

8. D um exemplo de ligante e receptor do tipo canal, especificando em que


clulas esto presentes.

9. O que so protenas G?

10. O que voc entende por protena G inibitria? E protena G estimulatria?

18 CEDERJ
Receptores de

14
AULA
membrana e princpios
de sinalizao celular II
objetivos

Ao final desta aula, voc dever ser capaz de:


Entender os mecanismos de gerao de mensageiros
secundrios.
Entender a dinmica de uma cascata de sinalizao.
Entender as principais vias de sinalizao
por receptores enzimticos.
Associar fenmenos como a resposta inflamatria
e o cncer a fenmenos de sinalizao.
Biologia Celular I | Receptores de membrana e princpios de sinalizao celular II

INTRODUO Na aula anterior, vimos que a comunicao entre as clulas se baseia


no reconhecimento de uma molcula sinalizadora (tambm chamada ligante)
por uma protena receptora. Vimos tambm que um sinalizador que seja
uma molcula pequena e hidrofbica pode atravessar a bicamada lipdica
e ser reconhecido no citoplasma, ou mesmo chegar ao ncleo da clula. J
os ligantes hidroflicos so reconhecidos por protenas expostas na superfcie
da clula-alvo, desencadeando uma cascata de sinalizao no citossol.
Das trs vias de sinalizao desencadeadas por ligantes hidroflicos, j
foram estudadas na Aula 13 os canais ativados por ligantes e os princpios
de sinalizao via protena G. O que estudaremos a partir de agora so os
eventos que a protena G dispara no meio intracelular. A seguir, abordaremos
o funcionamento das vias enzimticas de sinalizao de receptores.

Adenilciclase

Volte Figura 13.10. Note que as protenas ali esquematizadas


parecem estar brincando de telefone sem fio, aquela brincadeira em
que o primeiro da fila diz uma frase para o segundo, que repete para
o terceiro e assim por diante at o ltimo da fila repetir a frase inicial.
Na brincadeira, o engraado a distoro da mensagem inicial; j na
vida celular, a mensagem deve ser encaminhada sem erros para que
o resultado final seja o esperado. A adenilciclase, uma vez ativada
por protena G, hidrolisa ATP de um modo especial, retirando dois
fosfatos de uma vez s (Figura 14.1). O que sobra, o AMP (adenosina
monofosfato), torna-se uma molcula cclica, sendo chamado AMP
cclico (AMPc).

Figura 14.1: A protena G ativa a adenilciclase, levando-a


a formar AMPc a partir de ATP.

20 CEDERJ
14 MDULO 3
O AMPc, como todo mensageiro secundrio, normalmente est presente em concentraes
muito baixas no citoplasma das clulas. Assim, quando uma mensagem chega e reconhecida

AULA
por um receptor que ativa protena G, que por sua vez ativa adenilciclase, que produz AMPc,
a elevao sbita da concentrao desse mensageiro prontamente percebida pela clula. Muitas
enzimas citoplasmticas so ativadas por AMPc e reagem a esse pico de concentrao. Para esse
mecanismo funcionar bem, preciso que a concentrao de AMPc baixe to rpido quanto
subiu, assim, a clula poder perceber o prximo sinal. A enzima responsvel por isso a AMPc-
fosfodiesterase, que faz com que a molcula fique linear (passando a se chamar AMP-5monofosfato),
perdendo a funo. Mas ela no vira lixo, no! Pode mais tarde receber outros fosfatos, voltando
a ser o precioso ATP.

E o AMPc? Faz o qu?

O AMPc dispara uma enorme diversidade de eventos, ativando enzimas, abrindo canais
inicos etc. com muitas conseqncias em termos da atividade celular. Uma das enzimas mais
importantes ativadas por AMPc a protena quinase A (PKA). Uma protena quinase uma
enzima que fosforila outras protenas. A protena quinase A ganhou esse nome por causa de seu
modo de ativao, o A de AMPc.

D uma paradinha!
Esse negcio est ficando confuso, no? Tudo aconteceu por causa de um ligante que nem mesmo
entrou na clula! Vamos resumir a seqncia de eventos para que fique mais claro:

CEDERJ 21
Biologia Celular I | Receptores de membrana e princpios de sinalizao celular II

E que diferena faz uma protena ser fosforilada?

Muita! Protenas que podem ser fosforiladas alternam entre


um estado ativado e outro inativo, um deles com fosfato e outro sem.
o mesmo mecanismo liga/desliga da protena G em relao ao GTP,
lembra (Figura 13.9)? Essa mudana de estado das protenas que vai
mudar finalmente o comportamento da clula, em resposta quela
mensagem que ela recebeu do ligante l na membrana. A PKA tambm
pode entrar no ncleo e ativar genes que passaro a ser transcritos,
o que tambm vai mudar o comportamento celular, s que mais
lentamente, j que depende de mudanas de expresso gnica.
A seqncia de eventos entre o receptor e a mudana de compor-
tamento da clula chamada cascata de sinalizao (Figura 14.2).

Figura 14.2: Cascata de eventos entre


o reconhecimento pelo receptor de
superfcie e a resposta final.

Bonita e cheirosa? Depende da protena G.


Uma das funes mais interessantes do AMPc servir de mensageiro em neurnios olfativos. Esses
neurnios possuem centenas de receptores acoplados protena G (cada neurnio tem receptores para
apenas um tipo de odor). Quando as molculas odorficas se ligam aos receptores, eles ativam uma
protena G especial, que ativa adenilciclase, que produz AMPc (at aqui, tudo igual). Esse mensageiro
abre canais de sdio especiais desses neurnios, despolarizando-os e levando o impulso nervoso adiante
at que o cheiro atinja o crebro.
Os impulsos nervosos do sistema visual tambm so gerados por fotorreceptores acoplados protena
G em neurnios especiais da retina, mas ao invs de ativar adenilciclase ela interfere com a atividade de
guanilil ciclase (que forma GMP cclico, GMPc) e a fosfodiesterase correspondente. Os bastes, neurnios
responsveis pela viso na penumbra, tm canais de sdio ligados GMPc permanentemente abertos
no escuro. Quando os fotorreceptores (que tm o nome especial de rodopsina) recebem um fton,
a protena G acoplada ativa a GMPc fosfodiesterase, que lineariza o GMPc, soltando-o dos canais de sdio,
que se fecham. Com isso, o neurnio hiperpolariza, transmitindo o impulso. Quantos GMPcs ser que sua
retina produziu enquanto voc lia isto aqui?

22 CEDERJ
14 MDULO 3
Fosfolipase C, outra enzima ativada por protena G

Outra enzima freqentemente ativada por protena G a fosfolipase C. Como seu nome

AULA
est dizendo, essa enzima hidrolisa um fosfolipdio. Uma fosfolipase classificada como A, C ou
D de acordo com o local onde ela corta o fosfolipdio. A fosfolipase C corta entre o fosfato e o
glicerol (para lembrar a estrutura do fosfolipdio, veja a Aula 7). No qualquer fosfolipdio que pode
ser clivado pela fosfolipase C. O alvo da fosfolipase C ativada por protena G um fosfolipdio
da face interna da membrana plasmtica, o fosfatidilinositol 4,5 bifosfato, mais conhecido pela
sigla PIP2. A clivagem gera duas molculas: 1) o diacilglicerol, tambm conhecido como DAG,
um glicerol com duas caudas de cido graxo, que permanece na membrana; e 2) o inositol
trifosfato (IP3), que liberado para o citoplasma (Figura 14.3).

Figura 14.3: Modo de ao


da fosfolipase C ativada por
protena G.

DAG e IP3, separados, mas trabalhando em conjunto

As duas molculas produzidas, DAG e IP3, tero funes diferentes em locais diferentes.
O DAG permanece na bicamada interna da membrana plasmtica, onde se movimenta com
grande velocidade e vai recrutar do citoplasma uma protena quinase ainda no estado inativo.
Ela s ser ativada por clcio depois de recrutada, por isso se chama protena quinase C (PKC).
E de onde vem o clcio que vai ativ-la? Isso funo da outra molcula produzida pela fosfolipase,
o IP3. Ele difunde rpido pelo citoplasma e vai encontrar seu receptor na membrana do retculo
endoplasmtico. Esse receptor do tipo canal, e quando o IP3 se liga ele abre um canal que deixa
vazar clcio para o citoplasma, ativando a PKC e vrias outras protenas (Figura 14.3).
Nesse tipo de cascata de sinalizao, o clcio o mensageiro secundrio e pode afetar
diretamente componentes do citoesqueleto, como os microtbulos, disparar mecanismos de
secreo ou prosseguir a cascata, ativando diretamente enzimas como protena quinase C, que
vai fosforilar outras protenas passando o sinal adiante.

CEDERJ 23
Biologia Celular I | Receptores de membrana e princpios de sinalizao celular II

Favorea-me com sua ausncia!


Todo mensageiro secundrio que se preza normalmente est presente em
baixssimas concentraes no citoplasma. Quando ocorre uma sinalizao,
a sbita elevao de concentrao (um pico de concentrao) prontamente
percebida e provoca modificaes no comportamento celular.

O clcio pode ser apenas um intermedirio na cascata

Nem sempre o efeito do clcio direto, ele tambm modifica o


comportamento de vrias outras protenas depois de se complexar com
protenas ligadoras de clcio. A mais importante delas a calmodulina:
uma vez ligada ao clcio, ela modifica o comportamento de muitas
enzimas, inclusive quinases.
Como todo mensageiro de verdade, a concentrao do clcio tem
de baixar rpido para que a clula esteja pronta a perceber o prximo
sinal. Voc sabe como o on clcio rapidamente expulso do citossol?
um verdadeiro "salve-se quem puder" com vrias vias de escape
distribudas na clula. Veja na Figura 14.4 como o clcio tanto pode
ser expulso para fora da clula como pode ficar escondido no retculo
endoplasmtico e na mitocndria ou mesmo desaparecer ao associar-se
a uma protena citoslica.

Figura 14.4: A concentrao intracelular de clcio mantida baixa por vrios


mecanismos, como trocadores inicos e ATPases clcio dependentes presentes
na membrana plasmtica (MP) e na membrana do retculo endoplasmtico, ou
tambm por transporte ativo da membrana mitocondrial interna ou protenas que
se ligam ao clcio no citossol.

24 CEDERJ
14 MDULO 3
A concentrao de clcio de cerca de 10-7M no citoplasma e
da ordem de 10-3M no meio extracelular. Uma diferena de 10.000

AULA
vezes! Para manter essa diferena, vrios mecanismos funcionam
permanentemente. Na membrana plasmtica, h uma protena
trocadora de clcio por sdio que usa a energia do gradiente de sdio
gerado pela bomba de sdio e potssio para, sem gasto suplementar
de energia, botar clcio para fora. Alm dela, h uma outra bomba de
clcio na membrana plasmtica que hidrolisa ATP para obter a energia
necessria (a sim, transporte ativo) e protenas ligadoras de clcio no
citoplasma que tornam o on indisponvel para outras reaes.
Quando ocorre um pico de clcio proveniente de sinalizao,
a concentrao normal aumenta 100 vezes, chegando a 10-5M. Nessa
situao, alm das bombas na membrana plasmtica, entra em
funcionamento a bomba de clcio do retculo endoplasmtico, que
recolhe de volta o clcio liberado, mas se surgir algum problema,
como uma leso na membrana plasmtica (que logo ser selada), e
a concentrao subir mais, chegando a 10-3M, a mitocndria passa a
bombear clcio para dentro usando a energia do gradiente de prtons,
deixando temporariamente de produzir ATP. Isso um mecanismo de
emergncia, que raramente ocorre.

Mitocndrias e clcio, uma relao questionada


Durante muito tempo se pensou que as mitocndrias eram as principais (seno as nicas) responsveis
pela manuteno da baixa concentrao citoplasmtica de clcio, j que essas organelas deixavam
at de fazer ATP para seqestrar clcio. Essa idia estava baseada em experimentos em que
mitocndrias isoladas eram colocadas em solues com concentrao fisiolgica de clcio, ou seja, os
mesmos nveis do plasma sanguneo, 5x10-3M. Como resultado, as mitocndrias bombeavam clcio
para dentro, formando precipitados de fosfato de clcio. O detalhe que essa situao experimental
est muito longe da fisiolgica. O que podemos concluir desse exemplo que a biologia da clula
est muito longe de ter todos os seus mistrios solucionados, o que mais um estmulo para seu
estudo: h sempre novidades surgindo nesta rea!

Resumimos na Figura 14.5 as duas principais vias de sinalizao


ativadas por protena G: a da adenilciclase e a da fosfolipase C. Repare
que, apesar dos nomes diferentes, h muita analogia entre os dois
processos.

CEDERJ 25
Biologia Celular I | Receptores de membrana e princpios de sinalizao celular II

Figura 14.5: Uma vez acoplados ao


ligante, receptores ativam diferentes
protenas G, que ativam adenilciclase,
que gera AMPc, ou fosfolipase C que
gera IP3 e libera clcio do retculo
endoplasmtico.

Protenas-alvo

Receptores enzimticos

Um receptor desse tipo passa a informao recebida por meio de


atividade enzimtica, e para faz-lo tem de ter dois domnios especiais:
o que reconhece o ligante, exposto na superfcie da clula, e o stio
cataltico, voltado para o citoplasma (Figura 14.6). Quando o ligante
reconhecido pela parte exposta do receptor, a mudana conformacional
resultante torna ativo o stio cataltico intracelular. como o ferro de
passar: liga em cima e esquenta embaixo...

Figura 14.6: Esquema de operao de um receptor enzimtico.

Tirosinas quinase, receptores enzimticos da maior importncia

O principal tipo de receptor enzimtico so os receptores tirosina


quinase. Estes so enzimas que fosforilam (adicionam um radical fosfato)
ao aminocido tirosina em cadeias laterais de protenas. Curiosamente,
seu primeiro substrato uma molcula igual a ela: os receptores
tirosina quinase formam dmeros em que uma molcula fosforila a

26 CEDERJ
14 MDULO 3
outra, reciprocamente (Figura 14.7). Depois que um receptor fosforila o
outro, vrias protenas so recrutadas do citoplasma pelas fosfotirosinas dos

AULA
receptores. Esse fenmeno dura apenas alguns segundos, j que a fosforilao
pelas tirosina quinases logo revertida por protenas tirosina fosfatases.
As protenas recrutadas passam a estar ativas e vo, assim, passar o sinal adiante.

Figura 14.7: Funcionamento dos receptores tirosina quinase.

Um exemplo de sinalizao por tirosina quinase: a protena Ras

Algumas das protenas recrutadas pelas tirosinas fosforiladas no


tm atividade enzimtica, so apenas adaptadoras que vo permitir o
encaixe com outras protenas. A mais importante dessas protenas a
Ras, uma protena associada ao folheto interno da membrana capaz de
hidrolisar uma molcula de GTP a GDP (Figura 14.8). Quando certos
receptores tirosina quinase so fosforilados, eles recrutam protenas
adaptadoras e uma ativadora de Ras, que vai fazer com que ela libere o
GDP, que logo ser substitudo por um GTP. A Ras-GTP fica ativa e vai
propagar um sinal em cascata que terminar por promover, na maioria
das vezes, a proliferao ou a diferenciao celular.
Os receptores que ativam essa via so os receptores de fatores
de crescimento, como o EGF (fator de crescimento epidrmico),
NGF (fator de crescimento neuronal), o PDGF (fator de crescimento
derivado de plaquetas), o VEGF (fator de crescimento vascular, que
estimula a angiognese).

CEDERJ 27
Biologia Celular I | Receptores de membrana e princpios de sinalizao celular II

Figura 14.8: Ativao


de Ras por receptores
tirosina quinase.

Entretanto, a Ras no permanece muito tempo no estado ativo. Logo


ela hidrolisa o GTP, voltando ao seu estado ligado a GDP, que inativo.

Ras defeituosa? Desastre vista

Justamente por induzir mudanas celulares to importantes, quando


as vias de sinalizao mediadas por Ras tm defeitos, as conseqncias so
muito graves. Se esses defeitos impedirem a atividade GTPsica, a Ras
permanecer no estado ativado, fazendo com que as clulas portadoras da
molcula defeituosa no parem de proliferar, o que pode gerar um cncer.
De fato, cerca de 30% dos tumores possuem clulas com Ras defeituosa.
Defeitos em outros componentes dessa cascata de sinalizao tambm
levam tumorizao.

A fosforilao de outros aminocidos tambm sinalizadora

Alm dos receptores com atividade tirosina quinase, h os que


tm atividade de fosforilao dos aminocidos serina ou treonina
(receptores serina/treonina quinases). A ativao desses receptores leva
ativao de protenas reguladoras de expresso gnica.
Em algumas vias importantes, os mecanismos de fosforilao
em tirosina esto fortemente associados aos de fosforilao em serina/
treonina, que so mais duradouros. Assim, receptores de fatores de
crescimento com atividade tirosina quinase ativam serina/treonina
quinases citoplasmticas, que formam uma cascata de sinalizao com
vrios passos at chegar ao ncleo e modificar a expresso gnica.

28 CEDERJ
14 MDULO 3
A reao a uma infeco por vrus disparada por tirosina quinases
Existem, porm, mecanismos mediados por receptores enzimticos que modificam a expresso
gnica mais rapidamente. Um dos mais notveis o mecanismo disparado por -interferon (citocina

AULA
secretada por glbulos brancos em resposta infeco viral, principalmente). O -interferon
produzido por clulas infectadas reconhecido por receptores de -interferon que ativam uma via
de tirosina quinases citoplasmticas chamadas Janus quinases (Jaks), em referncia ao deus romano
de duas faces. As Jaks fosforilam uma srie de protenas reguladoras de expresso gnica (as STATS),
que rapidamente entram no ncleo e ativam a transcrio de vrios gens que codificam protenas
que aumentam a resistncia infeco viral. Alm do -interferon, tambm os receptores para -
interferon (que ativa macrfagos), eritropoeitina (que estimula a produo de hemcias), prolactina
(que estimula a produo de leite) e hormnio do crescimento usam a via de Jaks e STATS.

Receptores enzimticos na resposta inflamatria: a poderosa NF-B


Fatores que induzem inflamao em resposta a infeces ou leses tambm usam receptores enzimticos.
O fator de necrose tumoral (TNF-) produzido por macrfagos reconhecido por receptores em muitas
clulas e ativa uma protena citoplasmtica, a NF-B, que se desloca para o ncleo e liga mais de 60 gens
que participam da resposta inflamatria.

Amplificao de sinais

Pensando bem, qual a vantagem de existirem cascatas de sinalizao intracelular? Elas


parecem to complicadas, com tantos componentes, tantas passagens de informao, que devem
ser altamente suscetveis a erro! Mas se esse mecanismo se manteve evolutivamente conservado,
estando presente tanto
em leveduras como no
homem, deve haver
uma grande vantagem!
Examinando todo
o processo, sem dvida
alguma essa vantagem
a enorme amplificao do
sinal inicial, como pode-
mos ver na Figura 14.9.

Figura 14.9: Amplificao


de sinais nas cascatas de
sinalizao.

CEDERJ 29
Biologia Celular I | Receptores de membrana e princpios de sinalizao celular II

Integrao de sinais

Como voc j deve ter imaginado, freqentemente as cascatas de sinalizao iniciadas por
diferentes receptores se cruzam na clula, isto , tm componentes em comum. Dois exemplos
bem simples esto esquematizados na Figura 14.10. preciso que estejam presentes os dois
ligantes, A e B, reconhecidos por seus respectivos receptores, para que a sinalizao possa
prosseguir numa via comum.

Figura 14.10: Alguns processos


dependem da ativao inicial
de duas cascatas de sinalizao
que convergem para um mesmo
processo.

Figura 14.11: O mecanismo da propagao


de sinais por receptores de superfcie pode
ser resumido nesse esquema: a partir do
reconhecimento entre um receptor e um
ligante, uma cascata de eventos se propaga
e se amplifica.

30 CEDERJ
14 MDULO 3
RESUMO

AULA
A ativao da protena G ativa por sua vez adenilciclase ou fosfolipase C.

Ambas geram mensageiros secundrios: AMPc, no caso da adenilciclase, e


IP3, que libera estoques intracelulares de clcio, no caso da fosfolipase C.

Ambos, clcio e AMPc, so mensageiros secundrios ou mediadores


intracelulares.

Mensageiros secundrios ou mediadores intracelulares so sempre molculas


muito pequenas e presentes normalmente em baixssima concentrao, sendo
degradados ou recolhidos imediatamente aps o pico de sinalizao.

Receptores enzimticos tm o stio de reconhecimento voltado para o meio


extracelular e o stio cataltico voltado para o citoplasma. Na sua maioria so
tirosina quinases que se fosforilam reciprocamente e depois atraem muitas
outras protenas que passam a informao adiante.

Depois de receber o ligante, receptores disparam uma cascata de sinalizao


celular que amplifica o sinal e acaba por modificar o comportamento celular
(Figura 14.11).

EXERCCIOS

1. Onde esto os receptores de ligantes pequenos e/ou hidrofbicos?

2. E os de ligantes hidroflicos?

3. Quais os tipos de receptores de superfcie?

4. Cite exemplos de cada um desses receptores.

5. O que uma protena quinase?

6. Como age a adenilciclase? E a fosfolipase C?

7. O que so mensageiros secundrios?

8. Como regulada a concentrao citoplasmtica de clcio?

9. O que uma cascata de sinalizao?

10. Qual a vantagem da sinalizao em cascata?

CEDERJ 31
Biologia Celular I | Receptores de membrana e princpios de sinalizao celular II

32 CEDERJ
15
AULA
Introduo s organelas
celulares

Ao final desta aula, voc dever ser capaz de :


objetivos

Comparar a organizao celular de procariontes


e eucariontes.
Enumerar os compartimentos e organelas da clula
eucarionte, associando-os s suas funes.
Estabelecer as principais vias de comunicao entre
os compartimentos celulares.
Biologia Celular I | Introduo s organelas celulares

INTRODUO Voc est iniciando uma nova unidade na disciplina Biologia Celular.
At agora, vimos os principais mtodos que permitiram o descobrimento
e o estudo das clulas e a estrutura e principais funes desempenhadas
pelas membranas celulares. A partir de agora, vamos tratar dos principais
compartimentos delimitados por algumas membranas celulares e as
funes desempenhadas por eles.

O que um compartimento celular?


Chamamos compartimentos os espaos delimitados por membranas onde
ocorrem funes celulares dependentes de protenas especficas que para l
so endereadas.
Uma organela um compartimento?
Sim, as organelas so envolvidas por membranas e nelas ocorrem processos
celulares especficos; isso as qualifica como um compartimento.

Tamanho e complexidade celular

Das primeiras formas de vida at os seres que hoje habitam nosso


planeta, muito tempo se passou e muita coisa mudou. As condies
climticas e atmosfricas da Terra primitiva foram essenciais para que
as primeiras formas de vida surgissem. Essas, acreditamos, seriam seres
muito simples cujas principais caractersticas seriam o fato de serem
limitados por uma membrana e conterem material gentico (DNA)
capaz de se autoduplicar, perpetuando as caractersticas daquele
organismo por mais uma gerao. Erros nesse processo de duplicao
resultaram em mutaes que respondem pela enorme diversidade de
formas vivas que habitam nosso planeta. O detalhamento do processo
de duplicao do DNA, e das falhas que podem ocorrer no mesmo,
sero estudadas com maiores detalhes nas disciplinas de Gentica e
Evoluo, embora alguns aspectos j tenham sido comentados em
Grandes Temas.
Chamamos procariontes (pro = antes, karyon = ncleo) s formas
de vida mais simples que conhecemos. So seres cujo tamanho varia entre
1 e 2 micrmetros e cujo DNA no se encontra num compartimento
parte, o envoltrio nuclear, encontrado apenas nos eucariontes (eu = bem).
As clulas eucariontes so tambm muito maiores do que as procariontes,
medem em geral entre 10 e 50 micrmetros.

34 CEDERJ
15 MDULO 3
Os procariontes continuam a existir; so, portanto, um sucesso evolutivo inegvel.
So procariontes as bactrias e os micoplasmas. Os ltimos so seres ainda mais simples que as

AULA
bactrias e, em geral, parasitam outras clulas. As bactrias esto presentes em praticamente todos
os pontos do planeta e em todos os nveis da cadeia alimentar. Existem bactrias fotossintetizantes e
fixadoras de nitrognio (produtores primrios), outras so parasitas, simbiontes ou decompositoras
(ltimo nvel da cadeia alimentar).
Vimos que todas as clulas, inclusive as bactrias, so limitadas por uma bicamada
lipdica na qual se inserem protenas, a membrana plasmtica. Cabe membrana plasmtica
definir os meios intra e extracelular e permitir a troca de informaes e molculas entre eles.
No caso das bactrias (e tambm dos fungos e dos vegetais), alm da membrana plasmtica
existe uma estrutura mais externa, a parede celular. Esta formada por molculas de natureza
glicdica e, entre outras funes, sustenta e define a forma que essas clulas tero (Figura 15.1).

Figura 15.1: Variedade de formas e tamanhos relativos de vrios procariontes.

Com sua forma e tamanho to simplificados, a reproduo das bactrias extremamente


rpida. Em poucas horas, uma colnia bacteriana capaz de recobrir a superfcie de uma placa
de agar nutritivo (ou algum alimento que voc tenha deixado fora da geladeira). Outra vantagem
do modelo procarionte que, com dimenses to diminutas, todos os pontos da clula esto
sempre prximos entre si, com fcil acesso ao material gentico (DNA) e superfcie; assim, o
metabolismo e o equilbrio celular so facilmente mantidos.
Em relao a essas qualidades todas, podem surgir as perguntas: com todas essas vantagens,
por que a Terra no toda dominada apenas por bactrias? Por que surgiram e foram to
bem-sucedidos evolutivamente os seres eucariontes unicelulares e, mais adiante, os pluricelulares?

CEDERJ 35
Biologia Celular I | Introduo s organelas celulares

Comparada rea de superfcie dos procariontes, a das clulas eucariontes pode ser mais
de 30 vezes maior (Figura 15.2). Se compararmos o volume, essa diferena pode ser at 10.000
vezes maior! Entretanto, enquanto a vida de um procarionte praticamente se resume em crescer
e multiplicar-se, o aumento de tamanho permitiu a incorporao de uma srie de funes aos
seres eucariontes.

Figura 15.2: Tamanho de uma bactria em relao a uma clula eucarionte.

Relacionadas a essas funes estavam protenas associadas membrana. Se todas as


membranas e protenas a elas associadas estivessem na membrana plasmtica das nossas clulas,
elas precisariam ter uma superfcie ainda maior (veja o boxe).

Organizar uma clula como arrumar uma mala ou dobrar um pra-quedas: se as peas estiverem
bem dobradas, vai caber muito mais coisas na sua mala. Quanto ao pra-quedas, ele pode ser comparado
a uma clula em que todas as membranas foram unificadas numa s superfcie. Enquanto estiver dobrado,
ser fcil transport-lo; depois de aberto, aquela enorme superfcie de tecido ser bem difcil de levar.

As figuras A e B ocupam o mesmo volume, mas a B possui uma rea de membrana bem
maior. Se fosse esticada ocuparia o volume da figura C.

36 CEDERJ
15 MDULO 3
O que fazer com tanta membrana? No caso do pra-quedas, claro que o mais prtico
dobr-lo e t-lo acomodado numa bolsa ou mochila prpria. Na evoluo celular deu-se o

AULA
mesmo. A soluo foi a internalizao da maior parte das membranas celulares, dando origem s
organelas e aos compartimentos celulares. A membrana plasmtica corresponde a apenas uma
pequena frao (2 a 5%) do total de membranas de uma clula. Somente ficaram na membrana
plasmtica aquelas protenas necessrias s funes de transporte, comunicao e adeso.
A maior parte das membranas celulares (cerca de 50%) pertence ao retculo endoplasmtico.
Tambm existem evidncias de que, no decorrer do processo evolutivo, algumas das bactrias
ingeridas, em vez de serem digeridas, estabeleceram uma relao simbitica com a clula
predadora (Figura 15.3). Acredita-se que as mitocndrias e os cloroplastos resultam de uma
relao dessa natureza.

Figura 15.3: Duas formas possveis de origem de compartimentos e organelas celulares.

Organizao geral das clulas eucariontes

Em todas as clulas, podem ser definidos dois compartimentos: o meio intracelular e o meio
extracelular. Na Figura 15.4, esses dois compartimentos esto representados em cores diferentes.
Talvez seja uma surpresa para voc verificar que os espaos internos do retculo endoplasmtico,
do complexo de Golgi e das vesculas que a clula secreta ou ingere so correspondentes ao meio
extracelular. O meio intracelular se restringe quilo que chamamos de citossol.

CEDERJ 37
Biologia Celular I | Introduo s organelas celulares

Figura 15.4: Esquema de uma clula onde esto coloridos em branco o meio extracelular e em cinza o meio
intracelular.

Diferentes compartimentos, diferentes funes

Numa clula eucarionte moderna, as funes de sntese, captura de alimento, digesto,


produo de energia e outras se distribuem por diferentes compartimentos, aos quais chamamos
organelas celulares. Os principais compartimentos intracelulares de uma clula eucarionte so:
ncleo;
citossol;
retculo endoplasmtico (com as regies lisa e rugosa);
complexo de Golgi;
mitocndrias;
plastdeos (cloroplastos);
lisossomas;
endossomas;
peroxissomas.
Essas organelas esto apontadas na clula animal representada na Figura 15.5. Naturalmente,
os plastdeos no esto representados, uma vez que so exclusivos das clulas vegetais.

38 CEDERJ
15 MDULO 3
AULA
Figura 15.5: As clulas do epitlio intestinal possuem todas as organelas tpicas de uma clula eucarionte.

Os diversos compartimentos celulares esto sempre enviando e recebendo informaes


uns para os outros. Essas informaes so passadas por molculas que tanto podem ser solveis
quanto inseridas em membranas. Essas molculas so transferidas entre compartimentos por
trs mecanismos bsicos:
1. Transporte atravs de comportas.
2. Transporte transmembrana.
3. Transporte vesicular.
Em seguida, faremos uma breve abordagem das principais caractersticas dos compartimentos
celulares e sua interao com os demais.

O ncleo
o compartimento que contm o genoma e o principal local de sntese de cidos nuclicos
(DNA e RNA). O envoltrio nuclear duplo e a comunicao entre o ncleo e o citoplasma
feita atravs de complexos do poro, complexos proticos que funcionam como comportas,
regulando a passagem de molculas para dentro e para fora do ncleo. As protenas atravessam
o complexo de poro j na sua forma enovelada. Isso quer dizer que a passagem pelo complexo
de poro no depende apenas do tamanho da molcula, mas da existncia de mecanismos de
reconhecimento que funcionam como um passaporte para a entrada no ncleo. Esse um
transporte do tipo 1, atravs de comportas.

CEDERJ 39
Biologia Celular I | Introduo s organelas celulares

Figura 15.6: O envoltrio nuclear formado


por duas membranas que so trespassadas por
complexos de poro que atuam como comportas,
selecionando o que entra ou sai do ncleo.

O citoplasma
O citoplasma o maior compartimento celular. Corresponde a uma parte lquida, o
citossol, e s organelas que nele se distribuem. No citossol, ocorrem tanto a sntese quanto
a degradao de protenas. A sntese de protenas, voc j sabe, ocorre nos ribossomas. J a
degradao ocorre nos proteassomas, os quais estudaremos nas prximas aulas. Muitas reaes
metablicas (como a gliclise) tambm ocorrem nesse compartimento.

O retculo endoplasmtico
Quase a metade do total de membranas de uma clula pertence ao retculo endoplasmtico.
O retculo forma uma rede contnua de membranas. Na superfcie da membrana do retculo
voltada para o citoplasma, aderem-se os ribossomos que participam da sntese de protenas. Essas
protenas podem ser secretadas pelas clulas ou destinar-se s diversas organelas, e tanto podem ser
solveis quanto inseridas em membranas. Alm das protenas, tambm os lipdeos so sintetizados
no retculo. As regies do retculo nas quais ocorre a sntese de lipdeos so chamadas de retculo
liso. As regies onde os ribossomos podem se ancorar formam o retculo rugoso.
A protena em formao passa para o interior do retculo endoplasmtico por meio de
protenas translocadoras, caractersticas do transporte atravs de membrana. Esse processo
tambm ser detalhado nas aulas seguintes.

O complexo de Golgi
A maioria das protenas precisa passar do retculo para o complexo de Golgi, onde ser
finalizada. Essa passagem feita por vesculas que brotam das cisternas do retculo e se fundem
ao complexo de Golgi. No complexo de Golgi, resduos de acar so incorporados s cadeias
proticas, dando protena uma identidade que equivale a um endereo. Do Golgi, as protenas
partem em vesculas que se fundem membrana das organelas s quais se destinam. Este o tipo
de transporte que chamamos vesicular.
O endereo de uma protena , na verdade, uma determinada seqncia de aminocidos
chamada seqncia sinal. As protenas caractersticas de cada membrana ou compartimento
celular possuem seqncias sinal especficas que garantem o correto direcionamento das
inmeras protenas sintetizadas pela clula.

40 CEDERJ
15 MDULO 3
Na Figura 15.7, esto
representadas as principais vias

AULA
de transporte entre os diversos
compartimentos celulares. Nela,
voc pode observar que vrias
organelas (ncleo, mitocndrias,
peroxissomas, plastos) recebem
protenas sintetizadas no citossol,
isto , protenas que so sinte-
tizadas em ribossomos livres no

citoplasma e que so transferidas


diretamente para a organela,
sem passar por processos de
modificao ou endereamento
no interior do retculo ou das
cisternas do complexo de Golgi.

Figura 15.7: Mapa ilustrativo das vias de comunicao entre


os compartimentos celulares.

RESUMO

A maior parte das membranas de uma clula eucarionte se encontra


internalizada, formando compartimentos.

O ncleo, o retculo endoplasmtico, o complexo de Golgi, os endossomas


e vesculas de secreo, alm de lisossomas, mitocndrias, peroxissomas e
os plastdeos das clulas vegetais contm, cada um, protenas especficas,
relacionadas s suas funes.

Os diferentes compartimentos se comunicam, trocando molculas e informaes.


As vias de comunicao de trs tipos:

1- atravs de comportas, como os complexos de poro do ncleo;

2- atravs de protenas transportadoras, como as existentes na membrana do


retculo endoplasmtico e das mitocndrias;

3- atravs de vesculas que brotam de um compartimento e se fundem a outro,


o que ocorre entre as cisternas do retculo e do complexo de Golgi e a super-
fcie celular.

CEDERJ 41
Biologia Celular I | Introduo s organelas celulares

Todas as protenas comeam a ser sintetizadas nos ribossomos livres


do citossol.
De acordo com a seqncia sinal de aminocidos de cada uma, o ribossomo
vai aderir, ou no, membrana do retculo endoplasmtico.
A partir da prxima aula, esses processos sero abordados com maiores
detalhes.

EXERCCIOS
1. Quais os dois mtodos pelos quais acredita-se que tenham se formado as organelas
celulares?

2. Quais so os compartimentos de uma clula eucarionte?

3. A figura abaixo representa as dimenses lineares de uma bactria. A partir dela


calcule a rea e o volume da mesma.

4. Agora considere uma clula de dimenses lineares dez vezes maior (15, 20
e 10 m) e repita os clculos. Qual a relao entre a rea e o volume das duas
clulas?

5. Considerando que a clula da questo 3 uma bactria e a da questo 4 um


eucarionte, como o impacto desse aumento de volume pode ser minimizado?

6. Como entram no ncleo as molculas que para l se destinam?

7. Como feito o transporte de protenas sintetizadas no citoplasma e destinadas


a organelas como mitocndrias ou cloroplastos?

8. Como feito o transporte de protenas do retculo endoplasmtico para o


complexo de Golgi e da para a superfcie celular?

9. Existe diferena entre ribossomas aderidos ao retculo e livres no citoplasma?

10. O que voc entende por seqncia sinal?

42 CEDERJ
16
AULA
Retculo endoplasmtico

Ao final desta aula, voc dever ser capaz de:


objetivos

Conhecer a morfologia do retculo endoplasmtico,


em seus domnios liso e rugoso.
Entender as funes do retculo endoplasmtico,
correlacionando-as com os diferentes domnios.
Entender o mecanismo da sntese de protenas
solveis para secreo e protenas transmembrana.
Entender o mecanismo de biognese da bicamada
lipdica que constitui as membranas celulares.

Pr-requisitos
Bioqumica I: conceito de aminocido,
peptdeo, protena.
Biologia Celular I: estrutura de
membrana, transporte ativo.
Biologia Celular I | Retculo endoplasmtico

INTRODUO Na aula anterior, vimos que aproximadamente metade do total de


membranas totais de uma clula pertence ao retculo endoplasmtico.
O retculo forma uma rede contnua de membranas que ocupa boa parte
do citoplasma na maioria das clulas. Se um corante fluorescente, que
no atravessa as membranas (portanto no vaza), for injetado com
uma agulha bem fina no lmen do retculo, vai se espalhar por todo
o espao do lmen, j que este contnuo. Na Figura 16.1 esto as
fotos dessa experincia, e a a gente passa a achar que o retculo merece
mesmo esse nome!

Figura 16.1: Uma clula de mamfero cujo retculo endoplasmtico teve seu lmen
totalmente preenchido por um corante fluorescente. Na foto da direita, uma regio
da periferia da clula mostrada em maior ampliao.
Foto: Hugh Pelham

A funo mais conhecida do retculo a sntese de protenas de


membrana e protenas para secreo; entretanto, esta no sua nica
funo importante: a bicamada lipdica que constitui as membranas
celulares tambm montada por ele. Nas regies do retculo que esto
realizando sntese protica (veja o boxe), ribossomos aderem superfcie
voltada para o citossol. Esta regio chamada de retculo rugoso (Figura
16.3). J a biognese (montagem a partir de molculas precursoras) de
membranas ocorre em regies desprovidas de ribossomos; esta regio do
retculo chamada de retculo liso. Alm dessas funes, o retculo tambm
desempenha outras muito importantes, como o controle da homeostase de
clcio (voc viu na Aula 14) e alguns processos de detoxificao.

44 CEDERJ
16 MDULO 3
O retculo e sua sade
Na membrana do retculo endoplasmtico liso de algumas clulas existem enzimas capazes de catalisar
importantes processos de detoxificao. Elas modificam toxinas lipossolveis, que podem, portanto,

AULA
atravessar membranas, tornando-as solveis em meio aquoso. Elas podem ser ento excretadas pelas
clulas e depois filtradas no rim. As enzimas mais importantes que fazem esse trabalho so as da famlia
do citocromo P450.

Apenas recordando
Sabemos que todas as protenas celulares so sintetizadas a partir de informaes contidas no DNA. Para
cada protena produzido, a partir do DNA, um filamento de RNA-mensageiro (RNAm), que lido pelos
ribossomos (Figura 16.2). Os ribossomos tambm so formados por RNA, mas do tipo ribossomal (RNAr).
Conforme a fita de RNAm passa pelo ribossomo, aminocidos trazidos por RNAt, ou transportador, so
acoplados uns aos outros, formando a cadeia peptdica. A figura a seguir esquematiza as etapas do que
conhecido como Dogma central da biologia molecular.

Figura 16.2: A informao contida no DNA transmitida ao RNA na transcrio, que por sua vez serve de
molde para a sntese de protenas na traduo.

Morfologia e distribuio do retculo endoplasmtico

As membranas do retculo formam um labirinto de tbulos e cisternas que se distribui por


todo o citoplasma (Figura16.3). A membrana externa do envoltrio nuclear tambm parte do
retculo, como voc estudar em Biologia Celular II.
O retculo muito dinmico e suas membranas esto constantemente se reorganizando.
A rede de microtbulos do citoesqueleto (voc ver na Aula 23) contribui para o espalhamento
e sustentao dessas membranas.

CEDERJ 45
Biologia Celular I | Retculo endoplasmtico

Figura16.3: As membranas do domnio rugoso do


retculo endoplasmtico (A) possuem ribossomos
aderidos ao seu lado voltado para o citoplasma.
J no domnio liso do retculo (B), as membranas
so desprovidas de ribossomos. Os dois domnios
formam um nico compartimento (C) com reas
lisas e rugosas, de acordo com a atividade de
sntese da clula.
Fotos: (A) Lelio Orei, (B) Daniel Friend

Todas as protenas so sintetizadas no retculo?

Aprendemos, e aceitamos sem maiores questionamentos, que as protenas que permane-


cero solveis no citossol e as que sero direcionadas para organelas como ncleo, mitocndrias
ou cloroplastos so sintetizadas em ribossomos livres, enquanto as protenas da membrana
plasmtica, do prprio retculo e do complexo de Golgi, alm daquelas que sero secretadas pela
clula ou estocadas em compartimentos como os lisossomos, so sintetizadas em ribossomos
aderidos ao retculo, formando o retculo rugoso. Cabe, ento, perguntar: Sero os ribossomos
aderidos ao retculo diferentes daqueles livres no citossol? No! Todos os ribossomos de uma
clula so idnticos e formados, como voc sabe, por duas subunidades que se unem em torno
do filamento de RNAm (Figura 16.4).

46 CEDERJ
16 MDULO 3
AULA
Figura 16.4: Os aminocidos que compem as protenas so adicionados de acordo com a leitura (traduo)
que os ribossomos fazem ao longo de uma fita de RNA mensageiro. A uma mesma fita podem associar-se
muitos ribossomos (polirribossomo ou polissomo) que vo produzindo vrias cpias da mesma protena.
Ao final da leitura, as subunidades ribossomais se separam e se incorporam ao conjunto de subunidades
ribossomais livres no citossol.

Quando a sntese de uma protena que precisa passar pelo retculo se inicia, os primeiros
aminocidos expostos fora do ribossomo constituem uma seqncia sinal. Essa seqncia ento
se liga a uma partcula reconhecedora do sinal ou SRP (do ingls Signal Recognition Particle). A
membrana do retculo, por sua vez, possui um receptor para o conjunto seqncia de sinal (SRP)
(Figura 16.5). A membrana do retculo possui tambm um receptor que forma uma ncora para
adeso do ribossomo. A SRP interrompe a sntese das protenas endereadas ao retculo at
que o ribossomo esteja acoplado sua membrana. A partir do acoplamento, a cadeia protica
continuar sendo sintetizada para dentro do lmen do retculo.
Como voc sabe, uma cadeia protica, mesmo ainda no enovelada, no pode atravessar
diretamente uma bicamada lipdica. Quando o ribossomo vai se acoplar ao retculo, forma-se um
canal hidroflico transmembrana por onde a protena nascente vai passar. Esse canal formado por
protenas transmembrana que se agrupam apenas quando o ribossomo vai se acoplar. Esse canal
hidroflico recebe o nome de translocon. O ribossomo se ajusta no translocon, de modo que nada
mais atravesse o canal alm da cadeia protica e nada vaze do lmen do retculo para o citossol.
O ribossomo permanecer aderido at terminar de sintetizar a seqncia primria de aminocidos
da protena. No final da sntese, a seqncia sinal cortada por uma enzima especfica. Concluindo,
o que define se um ribossomo ficar livre ou aderido ao retculo o tipo de protena (com ou sem
seqncia de sinal) que ele estiver sintetizando naquele momento.

CEDERJ 47
Biologia Celular I | Retculo endoplasmtico

Figura 16.5: Quando uma protena endereada ao retculo comea a ser sintetizada, ela expe uma seqncia
sinal que ser reconhecida pela SRP. A SRP interrompe a sntese da protena at ligar-se a uma protena
receptora na membrana do retculo. Assim, o ribossomo pode ligar-se ao complexo de translocao, por onde
a cadeia polipeptdica penetrar. Ao fim da sntese da cadeia protica, as duas subunidades do ribossomo se
soltam da membrana do retculo e se separam, voltando ao estoque citoplasmtico de ribossomos.

48 CEDERJ
16 MDULO 3
Que tipos de protena so sintetizadas no retculo?

So sintetizadas no retculo protenas transmembrana, isto , aquelas que ficam inseridas

AULA
na membrana plasmtica, na membrana do complexo de Golgi, de organelas como os lisossomos
ou do prprio retculo. Protenas que ficaro solveis em compartimentos, como as enzimas
lisossomais, e protenas que sero secretadas, como hormnios ou enzimas digestivas tambm
so sintetizadas em ribossomos aderidos ao retculo endoplasmtico.

Como uma protena que est sendo sintetizada chega luz do retculo?

Uma das principais caractersticas da seqncia sinal ser rica em aminocidos hidrof-
bicos, assim como a regio da SRP qual ela se liga. Uma vez que o ribossomo esteja aderido
membrana do retculo (atravs do receptor para SRP), a cadeia polipeptdica em formao se
alinha ao translocon (Figura 16.6). Assim, conforme a protena vai crescendo, vai penetrando
diretamente na luz do retculo. A seqncia sinal hidrofbica, j livre da ligao SRP, mantm
a cadeia protica ancorada parte interna do translocon. Terminada a sntese da protena, a
seqncia sinal cortada enzimaticamente e a protena fica livre no lmen do retculo, a partir
de onde ter incio um processo de acabamento e endereamento ao seu destino final.

Figura 16.6: Mecanismo de translocao de uma protena para o lmen do retculo endoplasmtico.
Para que o esquema fique mais claro, os ribossomos e o RNAm foram omitidos, mas eles esto l!

CEDERJ 49
Biologia Celular I | Retculo endoplasmtico

Problemas e solues:
Como obrigar a cadeia polipeptdica a passar pelo complexo translocador?
A ligao da SRP seqncia sinal de transferncia leva o ribossomo a se ancorar
na membrana, apontando a cadeia polipeptdica na direo do poro do complexo
translocador. Certamente, isso ajuda a direcionar a cadeia para dentro do retculo, mas
o que obriga a cadeia nascente a passar pelo translocon o seu prprio crescimento:
medida que o peptdio vai sendo sintetizado junto ao ribossomo, a outra extremidade vai
sendo translocada pelo poro.

Como as protenas transmembrana atravessam a bicamada


lipdica?

As protenas que atravessam a bicamada lipdica possuem


seqncias ricas em aminocidos hidrofbicos no meio da cadeia primria
de aminocidos. Assim, alm da seqncia sinal inicial, que prende a
protena nascente ao translocon, uma segunda seqncia hidrofbica
impedir que a cadeia penetre integralmente atravs do poro aquoso,
fazendo com que uma parte da protena se projete para o citossol (Figura
16.7). Da mesma forma que no caso anterior, a seqncia sinal inicial
clivada enzimaticamente ao fim do processo. interessante notar que a
seqncia sinal inicial atua como um marco que sinaliza a transferncia
da cadeia protica nascente para o lmen do retculo, enquanto a segunda
seqncia hidrofbica atua como um sinal de parada dessa transferncia.
O complexo translocador, por sua vez, abre-se, permitindo que essas
seqncias hidrofbicas de incio e interrupo da transferncia fiquem
em contato com a bicamada lipdica. Assim se insere na membrana uma
protena unipasso (Figura 16.7).

Figura 16.7: As protenas transmembrana unipasso possuem, alm da seqncia sinal,


um segmento da cadeia rico em aminocidos hidrofbicos que ficar em contato
com a bicapa lipdica. O restante da cadeia primria de aminocidos ficar exposto
do lado da membrana voltado para o citossol. Ao final da sntese, a seqncia sinal
clivada por uma enzima.

50 CEDERJ
16 MDULO 3
E as protenas multipasso?

Entendido o processo de insero de uma protena unipasso, fica

AULA
fcil imaginar como uma cadeia peptdica pode atravessar muitas vezes
a bicamada lipdica, como fazem as protenas multipasso (veja na Aula 8).
Essas possuem seqncias de incio e interrupo da transferncia que se
alternam ao longo da cadeia em crescimento (Figura 16.8).

Figura 16.8: As protenas multipasso alteram seqncia de incio (start) e interrupo (stop) da transferncia
que resultam em muitas passagens pela membrana.

Detalhe importante:
Os processos de sntese e insero de protenas no retculo descritos at agora
resultam em insero da protena pela extremidade NH2 (amino), ficando
a terminao COOH (carboxila) sempre voltada para o citossol. No fique
pensando que todas as protenas so assim. Muitas tm a extremidade COOH
voltada para o exterior e outras possuem as duas extremidades da cadeia
voltadas para o mesmo lado da membrana. Isso acontece quando a seqncia
de transferncia est inserida no meio da cadeia peptdica, deixando de fora
do retculo justo a extremidade NH2. A posio em que as seqncias de incio
e interrupo da transferncia ocupam na cadeia em formao far toda a
diferena (Figura16.9).

Figura 16.9: Formao de uma protena duplo passo. Repare que, neste exemplo, a seqncia de iniciao (sinal
inicial) no est na ponta da protena, fazendo com que as duas extremidades da cadeia (amino e carboxila)
fiquem voltadas para o mesmo lado da membrana, no caso, o citossol. O sinal de interromper a transferncia
a segunda seqncia de ancoragem membrana.
CEDERJ 51
Biologia Celular I | Retculo endoplasmtico

Terminada a sntese da cadeia polipeptdica primria, a protena


ainda no pode ser considerada pronta. As seqncias sinal, por exemplo,
so clivadas e eliminadas da protena final. Esse processo de finalizao
da protena envolve vrias protenas auxiliares, responsveis pelo correto
dobramento da cadeia, a adio de acares e outros processos que sero
detalhados na prxima aula.

O retculo liso e a biognese da bicamada lipdica

Embora na maioria das clulas a superfcie do retculo esteja quase


todo o tempo associada a ribossomos, sendo, portanto, chamada de
retculo rugoso, todos os lipdeos de todas as membranas celulares so
associados no retculo endoplasmtico liso (Figura 16.3 B, C).

Os termos liso e rugoso se referem a estados funcionais transit-


rios das membranas do retculo. O compartimento delimitado por essas
membranas nico. Assim, podemos dizer que um retculo no rugoso,
ele est rugoso (a mesma coisa se aplica ao estado liso).

Figura 16.10: A fosfatidilcolina formada por um conjunto de reaes que rene


a colina, o glicerol fosfato e dois cidos graxos numa nica molcula.

52 CEDERJ
16 MDULO 3
Todas as enzimas responsveis por catalisar a sntese de
fosfolipdeos se localizam na membrana do retculo do lado voltado

AULA
para o citossol, onde esto as molculas precursoras colina, glicerol
fosfato e cidos graxos (Figura 16.10). Com isso, todos os lipdeos
sintetizados sero inicialmente adicionados ao lado da bicamada
voltados para o citossol. Se lembrarmos que uma membrana uma
bicamada lipdica em que as quantidades de lipdeo em cada camada
equivalente, assim como as reas ocupadas por eles, no retculo liso
deveria haver um desequilbrio entre as duas camadas (Figura 16.11).

Figura 16.11: Desequilbrio de rea hipottica das camadas do retculo endoplas-


mtico liso quando da montagem da membrana (se voc j leu O Pequeno
Prncipe, de Antoine Saint-Exupry, certamente lembrou da cobra que engoliu o
elefante...).

Esse desequilbrio de rea que teoricamente deveria existir nunca


foi realmente observado. Assim, acredita-se que ele muito rpido, sendo
imediatamente corrigido por uma enzima chamada scramblase (veja o
boxe), capaz de flipar um fosfolipdeo, translocando-o para a face da
membrana voltada para a luz do retculo (Figura 16.12).
O fosfolipdeo sintetizado em maior quantidade a fosfatidilcolina
(Figura 16.10). Essa produzida pela adio de colina a duas cadeias de
cido graxo e uma molcula de glicerol fosfato.

Humor e cincia
Quem acha que os cientistas so pessoas sisudas, que encaram a cincia
como coisa muito sria, com a qual no se brinca, est muito enganado. Um
exemplo de como se pode fazer cincia sria sem perder o senso de humor
a enzima scramblase. Ao ser batizada, seus descobridores compararam sua
atividade do cozinheiro que vira um ovo na chapa para que frite dos dois
lados. So o que chamamos de ovos mexidos, para os pesquisadores de lngua
inglesa: scrambled eggs.

CEDERJ 53
Biologia Celular I | Retculo endoplasmtico

Figura 16.12: Novos lipdeos so adicionados sempre


do lado da membrana do retculo voltado para o
citossol. Com isso, s esse folheto tenderia a crescer.
A distribuio de lipdeos entre os dois folhetos
equilibrada pela enzima scramblase, que os distribui
pelos dois folhetos da bicamada lipdica.

Outros lipdeos, como a fosfatidiletanolamina, a fosfatidilserina e o fosfatidilinositol, so


sintetizados e acrescentados membrana dessa mesma forma.
A ao da scramblase tende a equilibrar o nmero de molculas em cada folheto da
bicamada e a homogeneizar os dois lados da bicamada, flipando os diversos tipos de fosfolipdeos
aleatoriamente. Entretanto, conforme comentamos na Aula 7, a bicamada lipdica da membrana
plasmtica assimtrica, isto , alguns tipos de lipdeos s so encontrados na face voltada para o
citossol, enquanto outros s existem no folheto voltado para o meio extracelular (Figura 16.13).

Figura 16.13: Assimetria da bicamada lipdica: a fosfatidilserina (negativa) s existe no lado voltado para o
citossol, e os glicolipdeos (hexgonos), s no lado externo.

54 CEDERJ
16 MDULO 3
Essa assimetria resulta de uma outra classe de enzimas, as flipases. As flipases atuam na
membrana plasmtica e, seletivamente, viram fosfatidilserina e fosfatidiletanolamina do folheto

AULA
externo para o folheto voltado para o citossol. Enquanto as flipases gastam energia para realizar
a transferncia de fosfolipdeos entre os folhetos da bicamada, as scramblases se valem da prpria
energia da sntese.
A incorporao de colesterol membrana tambm ocorre no retculo liso. A maioria do
colesterol vem pronto na dieta e s precisa ser disponibilizado (aguarde a Aula 20). Ele sintetizado
em apenas algumas clulas animais, principalmente hepatcitos. Apenas uma pequena parte
inserida na membrana do retculo liso. A maior parte secretada em associao com molculas
hidroflicas, servindo de precursor para vrios outros esteris. Nessas clulas, o domnio liso do
retculo muito mais abundante.
O retculo tambm responsvel pela sntese de outros lipdeos. Entre os mais importantes
temos as ceramidas, que so depois enviadas para o complexo de Golgi (prxima aula), onde
servem de precursoras de glicoesfingolipdeos e a esfingomielina.
A membrana plasmtica, a dos lisossomos, do complexo de Golgi, dos endossomas e a
prpria membrana do retculo so todas sintetizadas por ele. Alm disso, mitocndrias
e peroxissomos tambm dependem de lipdeos que so inicialmente sintetizados no retculo e
transferidos por protenas transportadoras especficas para as membranas dessas organelas (Figura
16.14). A partir dessa incorporao essas organelas crescem, podendo depois se dividir.

Figura 16.14: Mecanismo


de importao de fosfoli-
pdeos para a membrana
mitocondrial.

Como o material sintetizado sai do retculo endoplasmtico?

As novas protenas, solveis no lmen do retculo ou as transmembrana, inseridas na


membrana do retculo, saem dessa organela em vesculas. Essas vesculas no partem de qualquer
lugar do retculo. Parece haver uma regio de sada, os elementos transicionais, uma rea do retculo
onde se misturam os domnios liso e rugoso, capaz de fazer brotamento de vesculas, que se dirigem
ento ao complexo de Golgi e da para outros compartimentos. Ns vamos junto com elas!

CEDERJ 55
Biologia Celular I | Retculo endoplasmtico

RESUMO

O retculo endoplasmtico uma rede contnua de membranas, ocupando


a maior parte do citoplasma, e tem domnios liso e rugoso.

Dentre as mais importantes funes do retculo endoplasmtico esto a


sntese de protenas de membrana e para secreo, no domnio rugoso; a
biognese da membrana, no domnio liso, e a manuteno da homeostase
de clcio.

Os ribossomos que fazem a sntese de protenas no citoplasma e os que


fazem a sntese associados ao retculo so os mesmos, o que muda so as
caractersticas da cadeia protica que est sendo sintetizada.

Os primeiros aminocidos da cadeia peptdica das protenas que devem


ser sintetizadas para dentro do retculo formam uma seqncia sinal que
reconhecida por um receptor citoplasmtico (SRP) que dirige o ribossomo
para o retculo.

No final da sntese, a seqncia sinal cortada da cadeia protica, que fica


solta no lmen do retculo.

Protenas transmembrana, alm da seqncia de sinal que as dirige ao


retculo, tm uma seqncia hidrofbica de ancoragem que as prende
bicamada lipdica.

As membranas plasmtica e dos compartimentos que se comunicam,


como retculo, complexo de Golgi, endossomos e lisossomos, so montadas
no retculo endoplasmtico liso. Nesse processo, a membrana preexistente
aumenta de extenso porque a elas so acrescentados novos fosfolipdeos,
sintetizados a partir de precur-sores citoplasmticos.

Como os novos fosfolipdeos so todos acrescentados ao lado citoslico da


membrana do retculo liso, metade dos fosfolipdeos translocada para o
outro lado por scramblases.

J na membrana plasmtica, enzimas mais especficas, as flipases, translocam


seletivamente fosfatidilserina e fosfatidiletanolamina para o folheto
citoslico.

Os fosfolipdeos das membranas de mitocndrias e peroxissomos so


transportados um a um, a partir do retculo liso para a organela a que se
destinam.

56 CEDERJ
16 MDULO 3
EXERCCIOS

1. Quais as funes do retculo endoplasmtico?

AULA
2. Por que dizemos que o retculo no rugoso e, sim, que est rugoso?

3. Qual a diferena entre ribossomos aderidos ao retculo e livres no citoplasma?

4. Como a seqncia de endereamento reconhecida?

5. Se os ribossomos aderem ao lado citoplasmtico da membrana do retculo como


a protena vai separar dele?

6. Como as protenas transmembrana atravessam a bicamada lipdica?

7. Qual o destino da seqncia sinal que direciona a protena para o retculo?

8. Como se formam as protenas multipasso?

9. Como so sintetizadas as bicamadas lipdicas?

10. Como feita a importao de lipdeos para a membrana mitocondrial?

CEDERJ 57
17
AULA
Complexo de Golgi
objetivos

Ao final desta aula, voc dever ser capaz de:


Identificar os principais aspectos morfolgicos
do complexo de Golgi.
Listar as funes do complexo de Golgi.
Diferenciar os processos de glicosilao do tipo N
e do tipo O.
Explicar como o processo de glicosilao ordenado
atravs das diferentes lamelas do Golgi.
Biologia Celular I | Complexo de Golgi

INTRODUO Na ltima aula, vimos como uma membrana nova produzida no


retculo endoplasmtico, pela montagem da bicamada lipdica no domnio
liso e insero de protenas no domnio rugoso, novas membranas so
produzidas no retculo endoplasmtico. No retculo tambm so sintetizadas
protenas solveis destinadas ao meio extracelular. Mas, alm de lipdeos e
protenas, uma membrana tambm possui acares ligados a protenas ou
lipdeos. Onde so acrescentados esses componentes? O que faz com que na
membrana plasmtica eles estejam voltados apenas para o meio extracelular?
Como as novas membranas saem do retculo endoplasmtico?
Comeando a responder tantas perguntas: no fim da ltima aula,
vimos que o material que sai do retculo, protenas solveis ou transmembrana
e a prpria membrana, transportado por vesculas e tbulos que brotam
da regio do retculo conhecida como elementos transicionais. Tais vesculas
e tbulos se dirigem ao complexo de Golgi sem, no entanto, formar com ele
uma conexo permanente.

Um pouco de Histria
O complexo de Golgi foi descrito pela primeira vez por Camillo Golgi em 1898, graas
a um novo tipo de colorao histolgica para neurnios usando metais pesados que ele
havia criado. No trabalho original, o complexo de Golgi est esquematizado como uma
rede dentro de um terminal nervoso. Camillo Golgi e Ramn-Cajal, dois neuroanatomistas,
ganharam o prmio Nobel em 1906 pela criao desse mtodo de colorao, conhecido como
mtodo de Cajal, que permitiu mostrar que o sistema nervoso central formado por clulas
individualizadas e no por uma rede contnua. A prpria existncia do complexo de Golgi
foi considerada duvidosa at 1954, quando sua organizao foi descrita por microscopia
eletrnica. Alguns detalhes desta organizao so desconhecidos at hoje.

Camillo Golgi, ( esquerda), Ramn-Cajal (no centro) e um dos esquemas originais do aparato reticolare
observado por Golgi ( direita).

60 CEDERJ
17 MDULO 3
Organizao morfolgica

Assim como o retculo endoplasmtico, geralmente existe apenas um complexo de Golgi

AULA
por clula. Diferente do retculo endoplasmtico, com sua rede contnua de tbulos, o complexo
de Golgi formado por lamelas (ou cisternas) que no so contnuas (Figura 17.1). No conjunto,
elas se arranjam como uma pilha de pratos ou, comparao ainda melhor, como vrios pes rabes
empilhados. Olhando mais atentamente, h perfuraes nas lamelas, como se os pes tivessem
buracos no alinhados. De cada lado da pilha h uma rede de tbulos. Todas essas informaes
decorrem da observao em microscopia eletrnica de transmisso de muitos cortes da organela
e reconstruo tridimensional a partir desses cortes (relembre a Figura 3.2).

Figura 17.1: Esquema da organizao tridimensional do complexo de Golgi.

As vesculas que trazem material do retculo se incorporam primeira rede de tbulos


do Golgi e da atingem a primeira lamela. O complexo de Golgi muito polarizado, isto , tem
uma face diferente da outra. As vesculas que vm do retculo sempre se incorporam ao Golgi
pelo mesmo lado. Esse lado de entrada do Golgi, que recebe material do retculo, chamado
lado (ou face) Cis, enquanto a outra extremidade, mais distante do retculo, o lado de sada
do Golgi, o lado (ou face) Trans. O nmero de lamelas entre uma extremidade e outra varia de
clula para clula, mas obedece a uma configurao mnima formada por:
rede cis do Golgi, ou CGN,
lamela cis,
lamela medial,
lamela trans e
rede trans do Golgi, ou TGN.
Olhando fotos (Figura 17.2) e desenhos (Figura 17.1) do complexo de Golgi, a gente fica
intrigado imaginando como aquelas lamelas permanecem to arrumadinhas! Ainda no h res-
posta bastante convincente para essa pergunta, mas os pesquisadores apostam na existncia de
protenas que formem pontes entre as lamelas, mantendo-as prximas umas das outras.

CEDERJ 61
Biologia Celular I | Complexo de Golgi

(B)

(A)
Figura 17.2: Micrografias de complexo de Golgi em uma clula animal (A) e na Euglena
(B). As lamelas esto empilhadas e podemos ver a rede de tbulos cis e trans.
Fotos: Mrcia Attias

Alm disso, o complexo de Golgi no fica em qualquer lugar


do citoplasma, mas sempre na regio central da clula, prximo ao
envoltrio nuclear (Figura 17.3). O que ser que o prende l? A
resposta tem a ver com o citoesqueleto. Essa curiosidade voc vai ter de
segurar at a Aula 23!

Figura 17.3: Foto de mi-


croscopia ptica mostrando um
fibroblasto em contraste de fase
e o complexo de Golgi marcado
por um anticorpo que reconhece
uma protena residente do Golgi.
N, ncleo.
Foto: John Henley e Mark McNiven

As lamelas do Golgi esto organizadas, mas certamente no por


razes estticas! Depois de conhecer um pouco sobre as funes dessa
organela, voc vai perceber que se no fosse to ordenada ela no ia
funcionar direito.

Funes

O complexo de Golgi tem trs funes principais:


a) realizar a glicosilao, isto , adicionar acares a protenas
e lipdeos que foram sintetizados no retculo endoplasmtico, assim
modificando-os;

62 CEDERJ
17 MDULO 3
b) adicionar grupamentos sulfato a protenas, participando da
sntese de proteoglicanas;

AULA
c) distribuir as macromolculas provenientes do retculo endo-
plasmtico e que percorreram o complexo de Golgi entre trs possveis
destinos:
1. a membrana plasmtica, onde tais molculas se
incorporaro ou sero secretadas;
2. vesculas de secreo que se acumulam no citoplasma
esperando um sinal para exocitarem seu contedo;
3. lisossomos, onde formaro a prpria membrana da
organela ou tero papel na digesto intracelular.
Voc vai saber mais sobre a funo de distribuio de macro-
molculas nas Aulas 20 e 21, ainda neste mdulo. Nesta aula vamos
nos deter mais na funo de adio de acares.

Glicosilao

Chamamos de glicosilao ao processo de acrescentar monmeros


de acar a protenas e lipdeos, formando glicoprotenas e glicolipdeos,
apesar de os monmeros adicionados no serem apenas glicoses.

Muito cuidado tambm quando for falar ou escrever glicoSILAo, porque


fcil confundir com glicoLISAo, uma maneira rara de denominar a gliclise,
que a via metablica citoplasmtica de produo de ATP a partir de glicose.

O objetivo desta disciplina no ensinar bioqumica de acares;


assim, vamos nos deter apenas no processo de glicosilao de protenas,
que permite demonstrar como a organizao do complexo de Golgi
importante para o funcionamento da organela e da clula.
Existem dois tipos de glicosilao de protenas, o tipo N e o tipo O.
Dentre os dois tipos, vamos conhecer melhor a glicosilao do tipo N.
Veja na Tabela 17.1 o quadro comparativo das principais semelhanas
e diferenas entre os dois tipos.

CEDERJ 63
Biologia Celular I | Complexo de Golgi

Tabela 17.1: Tipos de Glicosilao de protenas.

Tipo de glicosilao N O

Local de incio Retculo endoplasmtico Complexo de Golgi


(co-traducional)* (ps-traducional)**

Local de finalizao TGN TGN

Aminocido a que adi- Asparagina Serina ou treonina


cionado o primeiro acar (no nitrognio, da o nome) (no oxignio, da o nome)

ltimo acar da cadeia cido silico cido silico

* Os acares so adicionados enquanto a cadeia de aminocidos que forma a protena ainda est
sendo montada.
** Os acares so adicionados cadeia de aminocidos j completamente montada.

Por que adicionar acares a protenas?

Como voc pode ver na Tabela 17.1, os acares comeam a ser


adicionados cadeia protica quando ela ainda est sendo sintetizada,
o que, sem dvida, interfere muito na conformao final da protena.
Uma cadeia de acares bastante mais polar e mais rgida que uma
cadeia de aminocidos. Depois de receber uma cadeia de acares, a
asparagina jamais ficar voltada para dentro da cadeia na conformao
final. Assim, a adio de uma cadeia de acar, mesmo pequena, obriga
a protena a assumir determinada conformao. Alm disso, uma gli-
coprotena, seja do tipo N ou do tipo O, estar mais protegida da ao
de proteases do que uma protena no glicosilada, por uma questo de
acesso das enzimas proteolticas cadeia protica. Muitas das protenas
que ficam expostas na superfcie da clula so glicosiladas, o que protege
a membrana plasmtica como um todo.
interessante comparar a montagem de uma cadeia de acares com
a montagem de uma cadeia de protena ou mesmo com cadeias de DNA
e RNA. Todas so polmeros montados a partir de monmeros e quase
todos, menos os acares, seguem um mecanismo de cpia quando so
montados. Na replicao, a cadeia nova de DNA sintetizada seguindo a
complementaridade de bases nitrogenadas A-T e C-G em relao cadeia
preexistente; na transcrio, o mesmo pareamento, A-U e C-G, faz do RNA
cpia fiel do segmento de DNA; na traduo, a vez de o RNA servir de
receita para a sntese da cadeia protica (veja o boxe).

64 CEDERJ
17 MDULO 3
AULA
Figura 17.4: O DNA serve de molde para sua prpria duplicao, assim como para a sntese do RNA.
Este RNA, por sua vez, servir de molde para a adio ordenada de aminocidos numa cadeia protica.
Voc j viu esse esquema na Aula 16.

Como voc notou, ento, os processos de sntese das macromolculas mais importantes seguem
um molde, com o objetivo de conservar a informao, diminuindo ao mximo a ocorrncia de erros.
J na glicosilao, em que uma cadeia ramificada de pelo menos 14 acares (que costumamos chamar
de rvore de acar, por causa das ramificaes) montada, no existem moldes a seguir! Ser que no
to importante evitar a ocorrncia de erros? Se considerarmos que a poro glicdica de glicoprotenas
e glicolipdeos serve de receptor especfico a muitos ligantes importantes, atua na adeso das clulas e
no reconhecimento celular, certamente temos de admitir que importante que essas rvores de acar
estejam montadas sem erros.

Glicosilao do tipo N

Qual ser o mecanismo que garante que a rvore glicdica seja corretamente montada? Para
comear, se a cada vez que uma asparagina aparecer na cadeia protica nascente no lmen do
retculo endoplasmtico, os 14 acares fossem acrescentados um de cada vez, seria uma correria
de enzimas! Da para a ocorrncia de erro um pulo! O que ocorre que a rvore pr-montada
e fica pendurada, como em um cabide, num fosfolipdeo da membrana do retculo, esperando
a asparagina aparecer (Figura 17.5). A pr-montagem da rvore no retculo endoplasmtico
funciona como uma linha de montagem de fbrica: a enzima que acrescenta o primeiro acar
reconhece o fosfolipdeo, a que coloca o segundo acar reconhece o fosfolipdeo mais o primeiro
acar, a enzima que coloca o terceiro s reconhece como substrato o conjunto fosfolipdeo mais
o primeiro e o segundo acares e assim por diante. Dizendo de uma maneira mais elegante, o
mecanismo de copiar um molde usado na replicao, na transcrio e na traduo, nesse caso,
substitudo pelo mecanismo da glicosilao, em que cada enzima s reconhece como substrato
o produto da enzima anterior.

CEDERJ 65
Biologia Celular I | Complexo de Golgi

Figura 17.5: Pr-montagem da rvore de acares no retculo endoplasmtico.


Observe que os acares so adicionados, passo a passo, a um fosfolipdeo. Os dois
primeiros so N-acetilglucosamina, depois so colocadas 5 manoses, uma de cada
vez. Em seguida, j voltada para o lmen do retculo (ningum sabe como que
vira tudo isso, passando pela bicamada lipdica!), a rvore recebe mais 4 manoses e
3 glicoses, sempre uma por vez.

Quando aparece uma asparagina na cadeia protica nascente, a


rvore inteirinha transferida para a protena em apenas uma reao
enzimtica (Figura 17.6). Como voc aprendeu em Bioqumica I, Asn
a sigla da asparagina.

Figura 17.6: Transferncia


da rvore glicdica para
a asparagina (Asn) numa
cadeia protica nascente.
O ribossomo e o RNAm
foram omitidos.

Ateno para um detalhe: ns ainda no samos do retculo


endoplasmtico! Claro que para isso preciso que a protena seja
terminada e corretamente enovelada. Nesta altura, ela talvez j tenha
vrias rvores glicdicas adicionadas a asparaginas expostas. Se estiver
tudo correto com as cadeias protica e glicdica, a sim, a protena poder
passar ao complexo de Golgi.

66 CEDERJ
17 MDULO 3
O processamento da glicoprotena continua no Golgi

Imediatamente antes de sair do retculo, a rvore de acares, que

AULA
deu tanto trabalho para fazer, vai ser podada! Para que a protena saia do
complexo de Golgi, as trs glicoses terminais sero sucessivamente cortadas
por enzimas, e alm delas uma das manoses tambm ser retirada. Veja na
Figura 17.7 o que acontece com a rvore glicdica. Parece um absurdo?
Durante anos muitos pesquisadores acharam que isso era mesmo um passo
bioqumico intil, mas outros pesquisadores (movidos pela idia de que se a
seleo natural manteve esse mecanismo por milhes de anos, em todos os
eucariotos, desde fungos at mamferos, porque deve haver uma vantagem
importante) resolveram procurar essa razo. E no que acharam h pouco
tempo? Tem a ver com o controle de qualidade da sntese da protena e da
prpria montagem da rvore de acares.

Figura 17.7: Depois que a rvore de acares


previamente montada j foi transferida para
a protena, mas antes de sair do retculo
endoplasmtico, a glicose da ponta cortada
por uma enzima, as duas glicoses restantes
so retiradas por outra enzima e ainda uma
manose cortada por uma terceira enzima
independente, mas que s age depois das
outras duas. Nesse processo de poda da
rvore tambm vale o mecanismo de cada
enzima reconhecer como substrato o produto
da enzima anterior. Repare ainda que a
cadeia protica no foi desenhada, sendo
visvel apenas o aminocido asparagina ao
qual o acar est ligado.

Para passar ao complexo de Golgi, as glicoprotenas (e todas as


molculas que sejam transportadas entre retculo e Golgi) so colocadas
em vesculas que brotam da regio dos elementos de transio do retculo
e seguiro em direo rede cis do Golgi.

A quem pertencem as vesculas?


As vesculas que brotam do retculo em direo ao Golgi ficam muito prximas, entremeadas mesmo, das
vesculas e tbulos que compem a prpria rede cis. difcil, portanto, apenas pelo aspecto e localizao na
clula, dizer se cada uma delas pertence ao retculo endoplasmtico ou ao Golgi. Para definir isso, preciso
buscar marcadores moleculares, isto , a presena de molculas tpicas de cada organela. No atual estgio
do conhecimento de Biologia Celular, em que tantas molculas de cada compartimento so conhecidas,
at isso ficou difcil. Assim, a maioria dos pesquisadores aceita que as vesculas e tbulos entre retculo
endoplasmtico e Golgi formam um compartimento especial de direcionamento de molculas recm-
sintetizadas ou recicladas que merece o nome de Endoplasmic Reticulum Golgi Intermediate Compartment,
resumido na sigla ERGIC. Outra denominao cada vez mais usada Vesicular Tubular Cluster ou VTC,
j que essas vesculas e tbulos ficam muito prximos uns dos outros, lembrando um grande agregado
vesicular. O importante saber que esse compartimento est direcionando ao Golgi material que vem do
retculo. Seja qual for o nome que vai pegar, voc j ouviu falar nele um dia.

CEDERJ 67
Biologia Celular I | Complexo de Golgi

Acares: uns so cortados, outros adicionados

Chegando rede cis do Golgi, a glicoprotena j tem pronta a


cadeia protica, claro, mas a poro glicdica ainda est em construo.
Essa construo ocorre em vrias etapas e , como voc poder notar,
bastante complexa. No esperamos que voc decore a seqncia de
eventos de glicosilao, mas que tenha aqui uma fonte de consulta para
aprofundar seus conhecimentos. Nessa altura, o acar final da rvore
glicdica do tipo N manose, como est na Figura 17.7. Antes de continuar
acrescentando acares, as enzimas da rede cis e da lamela cis ainda retiraro
mais manoses (Figura 17.8).

Figura 17.8: Na regio cis do


Golgi, manoses so retiradas,
deixando a rvore glicdica
com apenas 7 acares.

A glicoprotena sair, assim, da lamela cis e, contida numa


vescula, ser levada lamela medial. L, vai encontrar enzimas que
faro um balano entre colocar e retirar acares, de modo que a cadeia
ainda no vai crescer, mas vai ficar diferente (Figura 17.9). Isso feito,
a glicoprotena sair da lamela medial, mais uma vez a bordo de uma
vescula, e chegar lamela trans.

Figura 17.9: Retirada de manoses e adio de novas N-actilglucosaminas que ocorrem


nas glicoprotenas ao passarem pela lamela medial do complexo de Golgi.

68 CEDERJ
17 MDULO 3
Na lamela trans, mais acares sero acrescentados, e a a rvore glicdica vai finalmente
crescer de novo. Alm de outra N-acetilglucosamina, sero adicionadas galactoses. A glicoprotena

AULA
continuar percorrendo a lamela trans e atingir a rede trans, onde o ltimo acar da rvore
ser adicionado: o cido silico (ou cido N-acetil-neuramnico, conhecido pela sigla do ingls
NANA). O cido silico tem enorme importncia porque, alm de ser um monmero polar, como
os outros acares, ele tem carga negativa. Assim, ao terminar em cido silico, uma glicoprote-
na passa a ser uma molcula negativa em pH fisiolgico, independente da sua poro protica.
Na Figura 17.10, temos um panorama passo a passo da glicosilao do tipo N.

Figura 17.10: Funcionamento geral da glicosilao do tipo de N. Depois de a rvore pr-montada ser transferida
para o aminocido asparagina, ainda no retculo, trs acares so cortados (passo 1). J no complexo de
Golgi, na rede cis e lamela cis, mais acares so retirados (passo 2). Na lamela medial, mais cortes e o primeiro
acrscimo (passos 3 e 4). Pouco antes de sair do Golgi, so adicionados o penltimo (lamela trans) e depois o
ltimo (na rede trans) acares (passo 5).

Ao chegar membrana plasmtica, os cidos silicos ligados a protenas e tambm a lipdeos


contribuiro muito para a carga negativa que uma clula apresenta ao ambiente.
Agora que voc j sabe como a poro glicdica de uma glicoprotena, importante
reforar alguns pontos:
A rvore glicdica que acabamos de ver no mostra todos os acares de uma glicoprotena.
At porque, se fosse assim, voc chegaria concluso (incorreta) de que todas as glicoprotenas tm
a poro glicdica igual. Ainda comparando com uma rvore, a cadeia de acares cuja montagem
acompanhamos, voc conheceu a formao do ramo principal, ou tronco. Cada glicoprotena do
tipo N tem esse ramo principal e muitos ramos laterais, em que outros acares so adicionados
ao ramo principal. Nesses galhos, os acares podem ser iguais aos do ramo principal ou no,
havendo glicoprotenas com monmeros como fucose, rafinose ou outros nos ramos laterais.
Assim resulta numa grande diversidade de rvores.
Apesar das variaes nos ramos laterais, no ramo principal, os dois ltimos acares so
sempre os mesmos: galactose e cido silico. Isso muito importante porque alguns mecanismos
da fisiologia celular esto baseados nesse arranjo.

CEDERJ 69
Biologia Celular I | Complexo de Golgi

Exemplos da importncia de os ltimos acares serem sempre os mesmos


Exemplo 1
As hemcias, ou glbulos vermelhos, circulam pelo sangue por cerca de 120 dias, sendo depois destrudas
por macrfagos do bao. Como o organismo sabe a idade de uma hemcia? Quando uma hemcia fica
velha, perde o acar terminal de suas glicoprotenas, o cido silico, passando a expor galactose. Ao
passar pelo bao, ser reconhecida pelos receptores de galactose dos macrfagos que l residem. Assim,
ela ser fagocitada e destruda.
Exemplo 2
Alguns parasitos como, por exemplo, o Plasmodium falciparum, causador da malria, podem controlar
a expresso da enzima que corta o cido silico, a sialidase. Quando o sistema imune reconhece o
Plasmodium, uma das primeiras coisas que ele faz secretar sialidase, que corta seus prprios cidos
silicos, expondo galactose, modificando, assim, a topologia das glicoprotenas de superfcie e
confundindo o sistema imune do hospedeiro. Essa estratgia eficiente por um tempo limitado, mas d
tempo para que esse bandido unicelular ative outros recursos de evaso.
Exemplo 3
O Trypanossoma cruzi, causador da doena de Chagas, no tem no Golgi a enzima que adiciona cido
silico. Em compensao, o parasito expe na sua superfcie uma outra enzima capaz de reconhecer os
acares terminais galactose e cido silico das glicoprotenas do hospedeiro. Essa enzima, ento, retira
o cido silico das molculas do hospedeiro e o coloca nas prprias glicoprotenas de superfcie, que
terminam em galactose. Por isso, ela recebe o nome de transialidase, j que retira e transfere o cido
silico. O parasito, assim, fica todo disfarado com os cidos silicos do hospedeiro. No esperto?
Concluso: nos trs exemplos fica evidente que uma clula vista por outra, principalmente pelos
acares que expe na superfcie.

Nem todas as glicoprotenas do tipo N tm a rvore glicdica


completa. Por razes inerentes prpria protena, algumas delas terminam
em manose, tendo para sempre a configurao de entrada no complexo
de Golgi chamada high manose. Para diferenciar, as glicoprotenas que
tm a rvore toda so chamadas complexas (muito adequadamente,
voc no acha?).
A estrutura bsica da rvore glicdica de glicoprotenas formadas
pelo outro tipo de glicosilao (o tipo O, em que os acares comeam a
ser adicionados quando a protena j est no Golgi) um pouco diferente,
mas os acares terminais, galactose e cido silico, so os mesmos.

As proteoglicanas
Alm de sintetizar glicoprotenas, o complexo de Golgi tambm o local de formao das proteoglicanas.
Essas molculas tambm tm uma poro protica e uma poro glicdica, mas a proporo entre as duas
diferente: elas tm muito mais acar do que protena (veja Aula 7). Uma de suas caractersticas marcantes
que, diferente das glicoprotenas, a poro glicdica das proteoglicanas no lembra uma rvore
ramificada. Dmeros de acar se repetem, formando molculas muito longas. Muitas proteoglicanas
so sulfatadas, e a adio dos grupamentos sulfato tambm feita por enzimas do complexo de Golgi.
As proteoglicanas so encontradas na superfcie das clulas, onde protegem bastante a membrana
plasmtica e a matriz extracelular, onde formam grandes polmeros que sustentam e conectam as clulas,
como voc vai ver em Biologia Celular II.

Figura 17.11:
Conformao bsica de
uma proteoglicana.

70 CEDERJ
17 MDULO 3
Como se descobriu que a glicosilao funciona assim?

No foi nada fcil! Depois de saber quais enzimas eram responsveis por cada etapa

AULA
em experimentos de Bioqumica, experimentos de fracionamento celular mostraram que tais
enzimas no eram citosslicas, estando confinadas em algum compartimento. O refinamento
desses experimentos mostrou que as primeiras enzimas estavam no retculo e as ltimas no
complexo de Golgi, porque iam parar nas mesmas fraes que enzimas marcadoras dessas
organelas j conhecidas. Depois, adaptando os ensaios bioqumicos de cada uma destas enzimas
para microscopia eletrnica (formando um produto eletrodenso e no colorido, como no
espectrofotmetro usado em Bioqumica), foi possvel demonstrar que as enzimas estavam dentro
de diferentes lamelas do complexo de Golgi (Figura 17.12).

Figura 17.12: Na micrografia A, o complexo de Golgi no est submetido a nenhum tratamento especial.
Na micrografia B, foi feita impregnao com metal pesado (a colorao de Golgi e Cajal), no caso, o smio, que
se acumula preferencialmente na rede e lamela cis. Nas micrografias C e D, ensaios de citoqumica mostraram o
produto final de enzimas de glicosilao na lamela trans (C) e na rede trans (D). Fotos de Daniel Friend.

CEDERJ 71
Biologia Celular I | Complexo de Golgi

CONCLUSO

Como chamamos a ateno no comeo desta aula, o mecanismo


de sntese de polmeros de acar difere do mecanismo de montagem de
outros polmeros porque no usa o sistema de cpia. No entanto, a chance
de haver erro na montagem minimizada por outro mecanismo, o da
linha de montagem, em que cada enzima usa como substrato o produto
da enzima anterior. Ao deixar o retculo endoplasmtico e chegar ao
complexo de Golgi, alm da linha de montagem, a chance de haver erro
ainda mais diminuda pelo fato de as diferentes enzimas que montam
a rvore glicdica estarem em diferentes lamelas do Golgi, que no se
comunicam entre si. Assim, ao final de cada etapa, a glicoprotena em
construo muda de compartimento. fcil perceber que se as lamelas do
Golgi fossem embaralhadas, ou se as vesculas que transportam o material
de lamela em lamela se perdessem e fundissem com a lamela errada,
a glicoprotena simplesmente no ficaria pronta. muito importante,
portanto, que a organizao do complexo de Golgi seja mantida.
O nico perodo em que o complexo de Golgi no est organizado como
lamelas empilhadas o da diviso celular. Mas, logo aps a citocinese,
a organela se reorganiza e volta a funcionar perfeitamente, produzindo
glicoprotenas em perfeito estado.
Explicar por que as vesculas transportadoras no se fundem com
o compartimento errado um pouco mais difcil, mas na Aula 21 vamos
examinar essa questo com cuidado.
Depois de prontas, as molculas que percorrem o complexo de
Golgi sero distribudas para seu destino final. Essa distribuio ocorre
na rede trans e pode ter a ajuda de receptores ou de outros recursos que
tambm sero vistos na Aula 21. As funes do complexo de Golgi esto
resumidas na Figura 17.13.

72 CEDERJ
Figura 17.13: Esquema geral do funcionamento do complexo de Golgi.
17 MDULO 3
AULA

CEDERJ 73
Biologia Celular I | Complexo de Golgi

RESUMO

O complexo de Golgi uma organela localizada nas proximidades do envoltrio


nuclear e formada por um sistema de cisternas ordenadas em pilha.

Protenas sintetizadas no retculo endoplasmtico so transportadas em


vesculas para o complexo de Golgi. Essas vesculas se fundem s cisternas da
face cis do Golgi.

No complexo de Golgi, as protenas vindas do retculo so modificadas


(glicosiladas ou sulfatadas) e despachadas para a membrana plasmtica,
lisossomas ou vesculas de secreo.

As protenas so transportadas de uma cisterna do Golgi para outra cisterna


adjacente sempre atravs de vesculas que brotam em uma cisterna e se fundem
seguinte.

Em cada cisterna do complexo de Golgi, as protenas so modificadas


pela adio ou supresso de molculas de acar da sua cadeia primria de
aminocidos. Esse processo se chama glicosilao.

A glicosilao pode ser de dois tipos: N e O.

A glicosilao do tipo N tem incio ainda no retculo endoplasmtico e os


acares se ligam ao aminocido asparagina na cadeia polipeptdica.

A glicosilao do tipo O tem incio no Golgi e os acares se ligam a um


aminocido serina ou treonina.

Cada cisterna do Golgi tem um conjunto diferente de enzimas que participam


da glicosilao.

As cadeias de acar das glicoprotenas ficam sempre expostas para o meio


extracelular e so as principais molculas no reconhecimento entre clulas.

74 CEDERJ
17 MDULO 3
EXERCCIOS
1. Como o complexo de Golgi pode ser localizado em microscopia ptica? E em

AULA
microscopia eletrnica?

2. O que se entende por face cis e trans do complexo de Golgi?

3. Por que as lamelas do complexo de Golgi precisam ser arrumadinhas?

4. Liste as principais funes do complexo de Golgi, explicando sucintamente o


que so.

5. Diferencie a glicosilao do tipo N da do tipo O.

CEDERJ 75
18
AULA
Controle de qualidade da
sntese protica

Ao final desta aula, voc dever ser capaz de:


objetivos

Conhecer os mecanismos ps-traducionais


de controle de qualidade da sntese de protenas.
Entender o funcionamento das chaperonas.
Conhecer o sistema citoplasmtico de degradao
de protenas: proteassomas.
Biologia Celular I | Controle de qualidade da sntese protica

INTRODUO Ao longo da evoluo, as clulas incorporaram mecanismos bastante


eficientes para evitar que erros na transmisso da informao gentica se
propaguem na replicao, na transcrio e na traduo. Ainda assim, com
todo esse cuidado de assegurar que a seqncia de aminocidos esteja
correta, ainda possvel que uma protena no consiga desempenhar suas
funes por erro no enovelamento. Na verdade, uma quantidade significativa
de protenas precisa de ajuda para atingir a configurao terciria correta.
Essa ajuda fornecida por uma famlia de protenas que, alm de auxiliar o
enovelamento protico, encaminha a protena destruio, caso no seja
possvel atingir a configurao correta.
Essas protenas so chamadas de chaperonas (chaperons so aqueles
meninos que ajudavam os nobres renascentistas a vestir as roupas
complicadssimas e colocar as perucas enormes) e constituem uma famlia
de muitas protenas diferentes com funo semelhante: elas usam energia
da hidrlise de ATP para desenovelar protenas, possibilitando novo
enovelamento, dessa vez na forma correta ou no lugar correto. Vamos ver
a seguir alguns exemplos desse mecanismo.

Protenas auxiliares: as chaperonas

As protenas auxiliares foram descobertas em experimentos em que


clulas eram submetidas a altas temperaturas, cerca de 42oC para clulas
que vivem a 37oC, na presena de um aminocido marcado radioativamente
(metionina-35S) e depois tinham o perfil de protenas analisado por
eletroforese e auto-radiografia (veja boxe). Em temperaturas mais altas,
a quantidade total de protenas sintetizada era maior do que na temperatura
normal, no mesmo perodo, o que j era esperado. Mas a surpresa que
havia um grupo de protenas que antes nem era perceptvel, mas depois
do choque trmico aparecia em quantidade maior. Essas protenas foram
identificadas, analisadas e tiveram sua funo determinada. Eram protenas
que hidrolisavam ATP e estavam sempre associadas a outras protenas,
algumas tambm recm-sintetizadas, ajudando no enovelamento delas.
Elas ficaram conhecidas como protenas de choque trmico ou hsp (do
ingls heat shock proteins). Depois de conhecer sua funo, ficou fcil
compreender porque aumentavam tanto de quantidade no choque trmico:
se mais protenas estavam sendo sintetizadas e mais depressa, provvel
que precisassem de mais ajuda.

78 CEDERJ
18 MDULO 3
Auto-radiografia uma tcnica em que se separam protenas por eletroforese e depois, para distinguir
quais das protenas esto marcadas radioativamente, coloca-se o gel em contato com um filme de raios X. S as

AULA
protenas marcadas impressionam o filme. O caso citado no texto chamado incorporao metablica:
fornecemos para a clula um precursor radioativo da molcula que queremos detectar. Se queremos
detectar protenas sintetizadas num dado perodo, fornecemos um aminocido marcado, como a
metionina, que tem o tomo de enxofre radioativo (35S).

Depois que a famlia de protenas hsp foi caracterizada, muitos de


seus componentes foram identificados com base na presena de seqncias
peptdicas conservadas. Assim, foram encontradas protenas de choque
trmico no citossol, nas mitocndrias, no retculo endoplasmtico.
Comparando as diferentes protenas de choque trmico, ou chaperonas,
elas puderam ser classificadas em dois grupos: o das hsp60 e o das hsp70,
com modos de ao ligeiramente diferentes.

hsp70 ajuda no enovelamento das protenas

As hsp70 (Figura 18.1) so protenas menores, que se ligam em


seqncias hidrofbicas expostas e mantm a cadeia peptdica desenovelada
at que ela possa assumir a conformao tridimensional correta.
Essa chaperona tem duas tarefas importantes: ajudar o enovela-
mento e impedir que vrias protenas malformadas, com seqncias
hidrofbicas expostas, formem agregados, que alm de inteis podem
ser muito nocivos (veja boxe no final da aula). Ela ajuda protenas
que estejam sendo sintetizadas em ribossomos livres no citoplasma ou
protenas que foram transferidas atravs do translocon (mencionado
na Aula 16) para o retculo endoplasmtico. Nesse caso, entra em ao
outro conjunto de chaperonas do grupo hsp70, que mora dentro do
retculo; a mais conhecida delas a BIP, que considerada marcadora
do retculo endoplasmtico.

Figura 18.1: O modo de ao da chaperona hsp70: ela impede que a cadeia protica
enovele erradamente.

CEDERJ 79
Biologia Celular I | Controle de qualidade da sntese protica

Nem sempre esse tipo de chaperona age em cadeias proticas que


esto sendo sintetizadas. Um bom exemplo a transferncia de protenas
que so feitas no citossol, l ficam prontas, mas devem funcionar na
mitocndria. Para entrar na mitocndria, ela precisa ser desenovelada,
transportada e depois reenovelada dentro da mitocndria. Certamente,
as chaperonas ajudam a direcionar a cadeia para dentro da mitocndria,
o que equivale a tentar guardar um novelo de l dentro de um armrio
fechado, passando-o pelo buraco da fechadura: quanto mais longa a
protena, mais complicado fica passar toda a sua extenso para dentro.
O que poderia facilitar esta tarefa seria se anezinhos puxassem o fio pelo
lado de dentro (Figura 18.2). Quem executa a tarefa de tais anezinhos
so chaperonas que residem na mitocndria. Voc vai saber mais sobre
esse transporte na aula de mitocndria.

Figura 18.2: Como passar um novelo pelo buraco da fechadura?

As hsp60 e o controle de qualidade

As chaperonas do grupo hsp60 agem sempre sobre uma protena


j pronta que tenha um erro na configurao terciria. O erro aparece
sempre como uma seqncia de aminocidos hidrofbicos que ficam
expostos e so reconhecidos pelas chaperonas (alis, todas as chaperonas
reconhecem e se ligam a seqncias hidrofbicas de aminocidos). Uma
vez detectado o erro, as hsp60 se ligam protena, aprisionando-a dentro
de uma reentrncia da prpria chaperona, formando um ambiente
separado do citossol, propcio para que a energia do ATP, que a chaperona
hidrolisou, consiga modificar o enovelamento da protena. As chaperonas
do grupo das hsp60 parecem um barrilzinho (Figura 18.3).

80 CEDERJ
18 MDULO 3
AULA
Figura 18.3: Modo de ao das chaperonas do grupo das hsp60.

Proteassomas: trituradores de protenas

E se as chaperonas no conseguirem consertar as protenas mal


enoveladas? Na verdade, elas tentam vrias vezes, mas, ainda assim,
nem sempre conseguem. Se no for possvel consertar a protena, as
chaperonas encaminham essa protena para degradao. Se voc acha
que a degradao de protenas dentro de uma clula s pode ocorrer
dentro dos lisossomos, saiba que durante muitos anos essa era a idia
em vigor. Depois, atravs de experimentos de fracionamento celular e,
mais tarde, de Biologia Molecular, descobriu-se que existem enzimas
que degradam protenas (enzimas proteolticas) no citossol tambm.
Eram enzimas que funcionavam muito bem em pH 7,0. A descoberta
surpreendeu muito, j que se achava que as enzimas proteolticas no
saam degradando tudo porque estavam presas aos lisossomos. Mas o
fato que elas no saem degradando tudo! Como explicar? A resposta
veio do fato de as enzimas proteolticas citosslicas no estarem dispersas,
e sim arranjadas em conjuntos enzimticos chamados proteassomas.
Esse arranjo de enzimas parece um pequeno triturador de papel, ou um
apontador de lpis automtico, que tem as lminas voltadas para dentro
(Figura 18.4).

Para voc ter uma idia do tamanho, um proteassoma pouco menor que um ribossomo; seu tamanho
tambm medido em s (svedbergs, unidade de sedimentao: expressa a velocidade com que uma
macromolcula vai para o pellet em uma ultracentrifugao em condies padronizadas). As subunidades
do ribossomo tm 40s a menor e 60s a maior, enquanto a poro mediana do proteassoma, que contm as
enzimas, mede 26s, e as pores de reconhecimento, 19s cada uma.

CEDERJ 81
Biologia Celular I | Controle de qualidade da sntese protica

Figura 18.4: Proteassomas vistos por contrastao negativa no microscpio eletrnico (A). Em B, a imagem de um proteassoma
trabalhada em computador, mostrando que cada proteassoma possui uma regio mediana, que o stio de degradao
onde esto as proteases com o stio ativo voltado para dentro e, em cada extremidade, um stio de reconhecimento. Em C,
um desenho esquemtico de um proteassoma onde se v o seu interior.
Fonte: Molecular Biology of the Cell, 3- ed.

Assim, o proteassoma s vai digerir as protenas que entrarem


nele, chegando ao alcance do stio ativo das enzimas. E uma protena
no entra no proteassoma por acaso. Ela precisa ser reconhecida nas
bordas do proteassoma. O que ser que o proteassoma reconhece?
Talvez, de novo, as seqncias hidrofbicas expostas em protenas
mal enoveladas. No entanto, descobriu-se que os proteassomas tambm
degradam protenas em perfeito estado, se elas estiverem sobrando na
clula. Protenas em excesso devem mesmo ser degradadas, para que seu
armazenamento no ocupe espao e os aminocidos resultantes da
degradao sejam reaproveitados. O sistema de degradao citosslica
em proteassomas est acoplado a um sistema de marcao de quem
deve ser degradado. como se a protena que vai ser destruda recebesse
uma etiqueta que pudesse ser lida pelo proteassoma, que, mediante a
identificao, vai pux-la para dentro. Essa etiqueta uma pequena
protena que recebeu o nome de ubiquitina (veja o boxe). Protenas
destinadas degradao recebem vrias ubiquitinas. O stio de
reconhecimento do proteassoma tem receptores para ubiquitina.

Ubiquitina, a protena que est em toda parte


Ao identificar uma nova protena, os cientistas procuram batiz-la com um nome
que evidencie uma caracterstica marcante, facilitando o seu reconhecimento.
Assim, a ubiquitina recebeu este nome por ser uma protena ubqua (onipresente),
isto , ser encontrada em todas as clulas; afinal, qual a clula que no precisa
estar constantemente controlando a qualidade das protenas que produz?

82 CEDERJ
18 MDULO 3
Controle de qualidade no retculo endoplasmtico

Agora voc j conhece vrios novos personagens celulares e, assim,

AULA
podemos responder a uma pergunta que ficou em suspenso na Aula 17:
por que as glicoprotenas do tipo N tm as glicoses da ponta da rvore
de acares cortadas antes de sair do retculo endoplasmtico? Como
j adiantamos na aula passada, esse corte funciona como um sinal de
que a glicoprotena est corretamente sintetizada e enovelada, podendo
prosseguir para o complexo de Golgi. Mas e se ela no estiver perfeita?
As glicoses no so cortadas e ela no sai. O que acontece com ela? Essa
glicoprotena vai ser reconhecida por chaperonas do retculo que vo
hidrolisar ATP para conseguir energia e tentar consert-la. As chaperonas
mais conhecidas que fazem esse trabalho so a calnexina e a calreticulina.
Essas chaperonas so tambm lectinas, j que reconhecem um acar
especfico: uma glicose na ponta de uma rvore N-ligada (Figura 18.5).

Figura 18.5: Uma glicoprotena


com apenas uma glicose no fim
da cadeia reconhecida pela
chaperona calnexina, que ajuda
no correto enovelamento. Se
a glicose for cortada antes de
a protena ficar correta, outra
enzima recoloca apenas uma
glicose para que a protena
volte a ser reconhecida pela
chaperona, at consertar!

Quando a rvore de acares transferida para a protena, ela


tem trs glicoses terminais. Duas delas so retiradas e a terceira s ser
cortada se tanto a poro glicdica quanto a protica estiverem perfeitas.
Caso contrrio, calnexina e/ou calreticulina se ligam protena e tentam
consert-la. Enquanto no conseguirem, no soltam. Se a ltima glicose
for retirada e a protena ainda no estiver enovelada corretamente, uma
enzima recoloca apenas uma glicose, para que as chaperonas voltem a
reconhec-la e consert-la (Figura 18.5).
Voc deve ter percebido que as chaperonas so mesmo insistentes
e tentam muito consertar uma glicoprotena antes de desistir.

CEDERJ 83
Biologia Celular I | Controle de qualidade da sntese protica

Isso, s vezes, no possvel. Quando isso acontece, as prprias chaperonas


se encarregam de encaminhar a protena para degradao. Em primeiro
lugar, essa protena no vai para o Golgi, porque a chaperona no solta. A
chaperona uma protena residente do retculo endoplasmtico. Isso quer
dizer que ela tem uma seqncia de aminocidos caracterstica de retculo
endoplasmtico, como uma seqncia de sinal que funciona para reteno
no retculo. Se uma protena residente do retculo escapar, por engano, para o
complexo de Golgi, ao chegar l na rede cis ser reconhecida por um receptor
para a seqncia tpica de retculo e colocada numa vescula que retornar
ao retculo endoplasmtico. Quando isso acontece com uma chaperona que
estava ligada numa protena tentando consert-la, a protena voltar para o
retculo junto com a chaperona, impedindo que ela atinja outras regies da
clula ou do meio extracelular, onde poderia causar grandes prejuzos.
No retculo endoplasmtico, as protenas que no tm mais jeito se-
ro mandadas para a degradao no citoplasma e, para chegar l, precisam
atravessar a membrana do retculo! Essa protena j fez isso antes, quando
estava sendo sintetizada e saindo do ribossomo, ainda no enovelada.
Agora, para passar de volta para o citoplasma, ela tambm precisa estar
desenovelada, e providenciar o desenovelamento funo da chaperona.
Para voltar para o citoplasma, a protena ser transportada atravs do
translocon, s que agora na contramo (alguns pesquisadores chamam de
retrotranslocon). Para abrir o translocon, e evitar que molculas indevidas
entrem ou saiam, existem protenas auxiliares que ainda no foram iden-
tificadas. Uma vez no citoplasma, essas protenas tero a poro glicdica
cortada de uma s vez por uma enzima (glicanase), sero ubiquitinadas,
reconhecidas e degradadas por um proteassoma (Figura 18.6).

Figura 18.6: Transporte de uma


glicoprotena malformada no
retculo para o citoplasma,
onde ser degradada em
proteassomas.

84 CEDERJ
18 MDULO 3
Proteassomas e chaperonas mantm a clula com todas
as protenas em ordem

AULA
Alm da vantagem bvia de evitar o acmulo de protenas malfor-
madas e, portanto, inteis, a importncia do trabalho das chaperonas e dos
proteassomas fica mais evidente quando examinamos as conseqncias
do acmulo de protenas malformadas.
comum que protenas malformadas tenham seqncias hidrof-
bicas indevidamente expostas. Esta exposio leva a uma tendncia de
agregao. Os agregados proticos s se formam se o sistema de degra-
dao no funcionar, mas, uma vez iniciada a agregao, a atividade das
proteases fica difcil porque as proteases no tm acesso s protenas e
eles (os agregados) tambm no entram nos proteassomas. Um agregado
protico que cresa muito pode levar a clula morte, ou, se a clula
conseguir expeli-lo, causar enorme prejuzo ao tecido, acumulando-se no
meio extracelular. Um tipo particular de agregado protico formado
quando regies -pregueadas anormalmente expostas em vrias protenas
provocam o empilhamento dessas protenas, formando o que se chama
placa amilide (Figura 18.7). As placas -amilides so marcantes
em algumas doenas neurodegenerativas, como o mal de Alzheimer e a
doena de Huntington, embora no se possa atribuir a essas placas a causa
das doenas.

Figura 18.7: Uma protena globular (A), quando mal enovelada, pode assumir uma
conformao planar (B) que expe folhas -pregueadas. Muitas protenas com essa
configurao formam um agregado conhecido como -amilide (C), altamente
resistente a proteases e muito prejudicial aos tecidos.

CEDERJ 85
Biologia Celular I | Controle de qualidade da sntese protica

Agregados de protenas mal enoveladas tambm esto presentes na doena humana de Creutzfeld-Jacob
e na encefalopatia espongiforme bovina, conhecidas como mal da vaca louca. Nesse caso, a presena da
protena mal enovelada pode induzir a modificao da protena correta, que est presente na superfcie
de clulas nervosas de indivduos normais, e cuja funo ainda no conhecida (Figura 18.8). A protena
defeituosa resistente degradao por proteases e pode ser adquirida quando um indvduo ingere o
tecido que contm a protena defeituosa de outro indivduo, mesmo de outra espcie. Assim, a protena
defeituosa foi considerada infecciosa, j que sozinha era capaz de transmitir uma doena, e ficou
conhecida como prion (encurtamento de protein only).

Figura 18.8: Se uma protena normal (A) se associar a uma protena igual a ela, mas mal enovelada (B), ser
formado um heterodmero (C). A protena defeituosa vai induzir a modificao da protena normal, formando
um homodmero (D). Quando novas protenas normais forem produzidas (E) elas se associaro s defeituosas,
formando um agregado (F), que crescer medida que novas protenas se associarem.

RESUMO

Tanto as protenas sintetizadas no citoplasma quanto no retculo esto sujeitas a


ter defeitos em sua conformao. Os mecanismos de deteco e reparo desses defeitos
esto esquematizados a seguir. As protenas cujos defeitos no podem ser reparados
so marcadas e encaminhadas para destruio nos proteassomas.
1) Protena em processo de sntese no citoplasma

Protena correta Protena defeituosa

Chaperonas (tipo hsp 70) + ATP

Protena correta Protena defeituosa


Chaperonas (tipo hsp 60) + ATP

Protena correta Protena defeituosa

Ubiquitinas

Proteassomas

86 CEDERJ
18 MDULO 3
2) Glicoprotena em processo de sntese no retculo endoplasmtico

AULA
Protena correta Protena defeituosa
Chaperonas (tipo hsp 70) + ATP

Protena correta Protena defeituosa

Glicosilao Glicosilao Glicosilao


-3 glicoses -2 glicoses
Chaperona (tipo calnexina)
Complexo de Golgi

Protena defeituosa Protena correta

+1 glicose
Chaperona (tipo calnexina)

Protena defeituosa Protena correta

Retrotranslocon Complexo de Golgi

Citoplasma

Glicosidase
Ubiquitinas

Proteassomas

EXERCCIOS

1. Que tipo de erro pode ocorrer durante a sntese de uma protena?

2. O que so chaperonas? Por que tambm so chamadas protenas de choque


trmico?

3. Diferencie as chaperonas hsp70 das hsp60.

4. O que so proteassomas?

5. Como so encaminhadas para destruio nos proteassomas as protenas


malformadas?

6. O que so placas amilides?

CEDERJ 87
19
AULA
Endocitose
objetivos

Ao final desta aula, voc dever ser capaz de:


Saber por que as clulas endocitam.
Conceituar e diferenciar:
endocitose de fase fluida e endocitose mediada
por receptor;
fagocitose imunolgica e no-imunolgica.
Biologia Celular I | Endocitose

INTRODUO Voc sabe como as clulas se alimentam? Elas captam nutrientes no


meio externo. Numa cultura de clulas (Aula 4), o meio a fonte de nutrientes.
In vivo, os nutrientes so obtidos do meio extracelular.
Como ser que as clulas fazem isso?
J vimos que molculas pequenas e hidrofbicas passam por difuso
simples pela bicamada lipdica (Figura 19.1.a). Molculas hidroflicas
relativamente pequenas e simples, como: ons e monossacardeos, passam
pela membrana atravs de protenas transportadoras especficas como canais
ou carreadores (Figura 19.1.b), chegando ao citoplasma (veja a aula de
Transporte).

Figura 19.1: (a) Uma molcula pequena e hidrofbica pode


simplesmente atravessar a bicamada lipdica; (b) j molculas
hidroflicas, mesmo pequenas, s atravessam atravs de pro-
tenas transportadoras especficas; (c) molculas maiores, como
protenas, so muito grandes para passar atravs de protenas
ou da bicamada lipdica.

90 CEDERJ
19 MDULO 3
E se o nutriente for uma partcula ou molcula grande, como uma prote-
na, por exemplo? As molculas grandes no conseguem atravessar a bicamada

AULA
lipdica da membrana plasmtica (Figura 19.1.c). Tambm no existem transpor-
tadores para molculas muito grandes ou bactrias. Para conseguir capt-las, a
clula faz uma invaginao, ou fossa, na sua membrana, e termina por englobar
a partcula numa vescula (Figura 19.2).

Figura 19.2: Para englobar uma


partcula grande, como uma bactria,
a membrana se deforma, criando
uma depresso que se aprofunda e
se fecha, formando uma vescula.

Essa invaginao vai se aprofundando at que sua abertura para o


meio externo se fecha, formando o que chamamos vescula; essa estrutura
vai conter lquido extracelular e as molculas dispersas nele (Figura 19.2).
Captar meio extracelular e seus solutos o princpio bsico da endocitose
(endo = dentro, cytos = clula), assunto desta aula.

CEDERJ 91
Biologia Celular I | Endocitose

Para onde vai a vescula e seu contedo?

Da mesma forma que nosso alimento passa por um processo de


digesto antes de ser absorvido pelo organismo, tambm os nutrientes
que so internalizados nessa vescula no vo diretamente para o
citossol. A vescula que o contm vai se encarregar de entreg-lo para
outros compartimentos intracelulares. Na Aula 15, definimos o que so
compartimentos intracelulares e voc deve lembrar que, assim como a
vescula que se formou em torno da partcula, eles tambm so limitados
por uma membrana que os separa do citoplasma. A transferncia do
material contido na vescula para um compartimento intracelular depende
da fuso entre as membranas desses dois compartimentos (Figura 19.3).
Para que isso acontea, preciso que os compartimentos se aproximem
muito, a ponto de toda a gua ser excluda da regio de contato entre suas
membranas, permitindo que elas se fundam (lembre que as membranas
so essencialmente bicamadas lipdicas).

Figura 19.3: A vescula que se forma na membrana


plasmtica funde-se mais adiante com a membrana de
um compartimento intracelular, liberando a partcula
internalizada nesse novo espao. Para se fundir, as
membranas desses dois compartimentos se aproximam
tanto que nenhuma molcula de gua citoplasmtica
fica entre elas.

Nesses compartimentos, os nutrientes sero processados. Esse


processamento equivale digesto, resultando em molculas menores e
mais simples, que sero transportadas para o citossol e at mesmo para
outras organelas.

92 CEDERJ
19 MDULO 3
Por que endocitar?

As clulas endocitam principalmente para captar molculas grandes,

AULA
que no podem ser internalizadas por protenas transportadoras. Algumas
clulas so capazes de endocitar partculas bastante grandes, inclusive
outras clulas, como uma bactria, por exemplo (Figura 19.4).

Figura 19.4: As clulas endocitam


tanto partculas relativamente
grandes, como bactrias (a),
quanto macromolculas, como
uma protena globular (b).

A endocitose pode ser visualizada?

A internalizao de uma bactria por um macrfago pode ser


observada ao microscpio ptico (Figura 19.4.a). J a endocitose de
macromolculas s observvel ao microscpio eletrnico (Figura 19.4.b).
A entrada de molculas muito pequenas (Figura 19.1), como um on, no
pode ser observada por microscopia, s por mtodos indiretos.
Quando uma clula endocita algo grande, como uma bactria,
ao invs de invaginar sua membrana plasmtica, ela emite projees em
direo bactria que acabaro por englob-la (Figura 19.5).

Figura 19.5: A endocitose de uma bactria resulta da emisso de prolongamentos


da membrana plasmtica que a abraam e terminam por se fechar em torno
dela, englobando-a.

CEDERJ 93
Biologia Celular I | Endocitose

Essas projees so chamadas pseudpodos, e voltaremos a falar


delas nas aulas sobre citoesqueleto (22 a 25). Quando os pseudpodos j
envolveram a bactria, formam um compartimento fechado contendo, alm
dela, um pouco do lquido extracelular. Por ser maior do que uma vescula
endoctica, chamamos esse compartimento de vacolo (Figura 19.5).

Tamanho documento (pelo menos para endocitose!)

Podemos classificar os mecanismos de endocitose em funo do


tamanho do material endocitado. A endocitose de lquido extracelular
e seus solutos chamada de pinocitose (o radical pinos significa beber),
ou de endocitose de fase fluida. A vescula formada geralmente menor
que 150 nm e chamada vescula endoctica.
Quando a clula endocita materiais maiores, ao invs de invaginar,
a membrana emite pseudpodos; ela est fazendo fagocitose (o radical
fagos significa comer). O vacolo formado tem tamanho maior e
chamado vacolo fagoctico ou fagossomo.

Endocitar nem sempre comer


Muitas vezes, uma clula fagocita outra com objetivo de defesa, e no de nutrio. o que acon-
tece com as clulas de defesa do sistema imune, principalmente macrfagos e neutrfilos (so tipos
de leuccitos ou glbulos brancos). So clulas que tm a funo de fagocitar agentes invasores
do organismo, identificar suas particularidades e repassar essas informaes s outras clulas do
sistema imune (voc vai saber como elas fazem isso em Biologia Celular II). Como macrfagos e
neutrfilos fazem isso com muita freqncia e eficincia, so chamados fagcitos profissionais.
Alguns protozorios, como as amebas, tambm fagocitam com muita eficincia e so consideradas
fagcitos profissionais. Exercendo essa atividade de defender o organismo, macrfagos e neutr-
filos fagocitam parasitos (bactrias, protozorios etc.). Nesse caso, o vacolo formado chamado
de vacolo parasitforo.
Cultura de clulas na qual se observa um vacolo
parasitforo (seta) contando vrios parasitas da
espcie Toxoplasma gondii (t). N- ncleo da clula,
m- mitocndrias.
Foto: Mrcia Attias

94 CEDERJ
19 MDULO 3
Tamanho no tudo: endocitose especfica e no especfica

Se uma molcula estiver dispersa no fluido extracelular em quantidades

AULA
muito pequenas, a clula pode lidar com ela de duas formas:
a) endocitar junto com o lquido, de maneira no especfica, de modo
que as quantidades captadas sero muito pequenas, quase desprezveis;
b) endocitar de modo especfico, isto , antes de endocitar,
concentrar e separar das demais as molculas de interesse. As clulas
fazem isso expondo para o meio extracelular receptores que reconhecem
e ligam as molculas que a clula precisa endocitar.
a) o mesmo princpio de reconhecimento entre receptor e ligante
que estudamos na Aula 13.
Temos assim dois tipos de endocitose: do tipo (a), chamada
endocitose de fase fluida que inespecfica; e a do tipo (b), que especfica
e foi denominada endocitose mediada por receptor.

Receptores de endocitose e de sinalizao: semelhanas e diferenas

Os receptores de superfcie para endocitose e sinalizao compartilham


muitas caractersticas: ao se conectarem a seus ligantes, ambos mudam
de conformao, mas as conseqncias disso so muito diferentes em
cada caso. Enquanto os receptores para sinalizao permanecem na
membrana plasmtica e desencadeiam uma cascata de reaes no
ambiente citoplasmtico, os receptores de endocitose vo ser inter-
nalizados junto com seu ligante na vescula endoctica.

CEDERJ 95
Biologia Celular I | Endocitose

O mesmo conceito se aplica fagocitose. Os fagcitos profissionais


(veja o texto "Endocitar nem sempre comer") tm capacidade de
reconhecer e fagocitar com eficincia muitos invasores do organismo
sem terem tido contato anterior com eles. Por exemplo, macrfagos e
neutrfilos tm receptores que se ligam manose e galactose, acares
presentes na parede da maioria das bactrias (Figura 19.6.a). Quando o
organismo j teve contato com o agente invasor (porque no o primeiro
evento, ou porque houve uma vacinao prvia), e j fez anticorpos
contra ele, os prprios anticorpos que se ligam na superfcie da bactria
ou do protozorio invasor serviro como ligantes para receptores na
superfcie dos fagcitos (Figura 19.6.b). Depois que os anticorpos se
ligam nos antgenos do invasor, as pores Fc dos anticorpos (veja o
box a seguir sobre os anticorpos) ficam expostas e so reconhecidas por
um receptor para Fc que macrfagos e neutrfilos tm, o que faz com
que eles fagocitem o invasor com mais eficincia. A fagocitose especfica
mediada por anticorpos chamada fagocitose imunolgica.

Anticorpos so protenas em forma


de Y. Os braoscorrespondem
poro Fab e se ligam ao antgeno,
enquanto a cauda, ou poro Fc ,
fica exposta, sendo reconhecida
pelo receptor do fagcito.

96 CEDERJ
19 MDULO 3
AULA
Figura 19.6: Um fagcito profissional pode reconhecer e fagocitar uma bactria tanto
ligando-se a acares especficos da parece celular (a) quanto ligando-se a anticorpos
secretados que se ligaram superfcie bacteriana (b).

Fagocitose especfica

O fagossomo assim formado bastante justo ao redor da bactria


ou protozorio que est sendo fagocitado, porque medida que os com-
plexos receptores (no fagcito) e seus ligantes (na bactria ou protozorio)
vo se formando, os pseudpodos vo progredindo ao redor do invasor
(Figura 19.7), lembrando o fechamento de um zper. Por isso, a fagocitose
especfica tambm dita fagocitose do tipo zper.

Macropinocitose
Bactria

Pseudpodo
Figura 19.7: Micrografia
eletrnica mostrando uma
bactria sendo fagoci-
tada por um neutrfilo. Membrana
A membrana do fagcito plasmtica
se ajusta em torno da bac-
tria medida que ela
internalizada, lembrando
o fechamento de um zper.
Foto: Dorothy Bainton.

Clula fagoctica
1m

CEDERJ 97
Biologia Celular I | Endocitose

Como escapar de uma fagocitose

Depois que uma clula reconhecida pelo fagcito e comeam a se formar os


complexos receptor-ligante (o zper comea a se fechar), ela ainda pode escapar se
conseguir concentrar seus ligantes numa s regio da sua membrana (fenmeno
chamado capping veja aula de Membrana); a formao dos complexos receptor-
ligante no prossegue e os pseudpodos no conseguem envolver a vtima com
eficcia, dando oportunidade para ela escapar (Figura 19.8). Muitas vezes, antes de
escapar, a clula que ia ser fagocitada solta a pequena poro de sua membrana
que contm os complexos ligante-receptor (fenmeno chamado shedding). Esse
pedacinho de membrana internalizado pelo fagcito e a clula escapa. Numa
comparao simples, como se um tubaro agarrasse voc pela roupa e voc fugisse,
nu, mas ileso. Afinal, roupa, sempre se pode comprar outra...

Figura 19.8: Na fagocitose do


tipo zper, se a clula-alvo (a que
est sendo fagocitada) conseguir
concentrar todos os ligantes de
superfcie numa rea restrita, a
clula fagoctica no ser capaz
de formar o vacolo endoctico em
torno dela.

98 CEDERJ
19 MDULO 3
Existe um outro tipo de fagocitose, de descoberta mais recente,
que bastante caracterstico dos fagcitos profissionais. Essas clulas se

AULA
deslocam sempre aderidas ao substrato (a matriz extracelular, in vivo, e
vidro ou plstico, in vitro). Para fazer isso, emitem grandes projees de
membrana plasmtica, que vo estabelecendo conexes com o substrato
(esse assunto ser tratado tambm na aula de Junes, em Biologia
Celular II) e depois puxam o resto da clula, como faz um alpinista.
Quando a clula, por alguma razo (o ambiente no est favorvel, ou
h alguma atrao em outro lugar), decide no seguir naquela direo,
as projees j emitidas so lanadas para o dorso da clula, dando um
aspecto ondulado (ruffles). Eventualmente, as pontas dessas projees
podem se fundir com a membrana dorsal da clula, formando assim
um vacolo de dimenses e caractersticas semelhantes a um vacolo
fagoctico (Figura 19.9).

Figura 19.9: Clulas que se deslocam num


substrato (1, 2) podem emitir projees de
membrana para o dorso da clula (3, 4),
vindo a englobar grande quantidade de
fluido extracelular (5).

No entanto, esse vacolo no contm material slido. Assim, nesse


processo, a clula s est captando o lquido extracelular e seus solutos,
como numa pinocitose. Como as dimenses do vacolo so muito
maiores que as de uma vescula endoctica e, alm disso, ele formado
por projees de membrana e no por invaginaes, esse mecanismo
recebeu o nome de macropinocitose. Acredita-se que ela torne mais eficaz
o trabalho de vigilncia imunolgica, j que os fagcitos podem captar e
testar pores do lquido extracelular internalizando menos membrana
do que se o mesmo volume fosse captado em pequenas vesculas.

CEDERJ 99
Biologia Celular I | Endocitose

RESUMO

Molculas ou partculas muito grandes para atravessar a membrana plasmtica


podem ser internalizadas em vesculas limitadas por membrana. Este processo se
chama endocitose.

A endocitose uma forma de obteno de alimento para clulas em geral, inclusive


seres unicelulares.
Resumo
A endocitose tambm tem por objetivo capturar e destruir organismos invasores,
Molculas
como ou partculas
bactrias. muito
Nesste caso, ela grandes
feita porpara
clulasatravessar
do sistemaaimune
membrana
chamadas
genericamente de fagcitos profissionais.
plasmtica podem ser internalizadas em vesculas limitadas por membrana. Esste
Os fagcitos profissionais reconhecem tanto molculas estranhas, como acares
processo se chama endocitose.
da parede bacteriana, como anticorpos que tenham se ligado superfcie do
organismo invasor.
A endocitose uma forma de obteno de alimento para clulas em geral,
A seguir a classificao dos tipos de endocitose e suas caractersticas bsicas:
inclusive seres unicelulares.

A endocitose tambm tem por objetivo capturar e destruir organismos


Especfica (mediada por receptor)
invasores, como bactrias. Nesste caso, ela feita por clulas do sistema imune
Endocitose
(Pinocitose)
No-especfica (de fase fluida)
chamadas genericamente de fagcitos profissionais.

Os fagcitos profissionais reconhecem tanto molculas estranhas, como

acares da parede bacteriana, como anticorpos que tenham se ligado superfcie


Imunolgica

do organismo invasor. (mediada por anticorpos)


Especfica
(macropinocitose) (tipo zper) No-imunolgica
(mediada por outros receptores)
Fagocitose

No-especfica (macropinocitose)

100 CEDERJ
19 MDULO 3
EXERCCIOS

AULA
1. Que tipos de partcula:

a. Atravessam a bicamada lipdica?

b. Passam por complexos proticos na membrana?

c. So englobados por endocitose?

2. Quais os objetivos da endocitose?

3. Que tipos de clula endocitam?

4. Como podemos distinguir pinocitose de fagocitose?

5. Na endocitose mediada por receptor, que tipos de molcula atuam como ligante
na clula-alvo?

6. O que macropinocitose? Qual sua utilidade para a clula?

CEDERJ 101
20
AULA
Compartimentos endocticos

Ao final desta aula, voc dever ser capaz de:


objetivos

Enumerar os diferentes compartimentos endossomais


e suas principais caractersticas.
Explicar o mecanismo de acidificao
dos endossomas e sua relevncia.
Explicar a origem e principais caractersticas funcio-
nais dos lisossomas.
Associar a digesto lisossomal nutrio, defesa
e adaptao celular a diferentes condies.
Citar exemplos das conseqncias do mau funciona-
mento do sistema endoctico.
Biologia Celular I | Compartimentos endocticos

INTRODUO Na ltima aula voc aprendeu que a clula usa a endocitose para captar do meio
extracelular molculas que no atravessam a membrana. A atividade endoctica
sempre envolve a formao de uma vescula que contm o fluido extracelular
e as molculas nele dispersas. Se a endocitose for especfica, isto , mediada
por um receptor, o ligante ser endocitado com muito mais eficincia. bom
relembrar que aqui os termos ligante e receptor tm o mesmo significado que
na Aula 13, com a diferena de que a associao dos dois provoca a endocitose
de ambos e no uma cascata de sinalizao.

O que significa endocitar com mais eficincia?

Uma endocitose ser mais eficiente quando o ligante estiver em


concentrao muito maior dentro da vescula endoctica do que no
meio extracelular.
Como uma grande quantidade de complexos receptor-ligante
pode entrar de uma vez se as vesculas tm sempre o mesmo tamanho?
Isso resultado do melhor aproveitamento da rea de membrana
endocitada. Se todos os receptores se aproximarem, ficando bem
pertinho, vai caber um monte de receptores numa pequena rea de
membrana e, se os receptores trouxerem com eles os ligantes, tambm
vo caber muito mais ligantes na vescula.
Como os receptores fazem para se aproximar tanto? Isso o
resultado do trabalho de um conjunto de molculas que se prendem
ao domnio citoplasmtico dos receptores, agrupando-os e formando
um revestimento protico sob a regio da membrana que vai formar a
vescula. O revestimento constitudo principalmente por molculas de
uma protena, a clatrina, dispersas no citoplasma, pois so atradas pela
formao do complexo receptor-ligante. Na verdade, alm da clatrina,
so atradas vrias outras molculas que formam uma ponte entre ela
e o receptor, de modo que eles no se ligam diretamente. As principais
molculas que formam a ponte so, muito apropriadamente, chamadas
adaptinas (Figura 20.1).

104 CEDERJ
20 MDULO 3
Figura 20.1: A formao

AULA
dos complexos receptor-
ligante atrai protenas do
citoplasma, que, em con-
seqncia, polimerizam.

Clatrina e a formao da vescula endoctica

Cada molcula de clatrina formada por trs pernas (cada


uma formada por duas subunidades) arranjadas de tal maneira que,
ao se aproximarem, se associam formando um polmero peculiar por
ser tridimensional, sempre do mesmo tamanho e lembrando uma casa
de abelhas (Figura 20.2). Pelo seu aspecto de estrela de trs pontas, a
molcula de clatrina muitas vezes chamada de triskelion.
O polmero de clatrina no plano; medida que novas
molculas vo se incorporando, o conjunto vai adquirindo curvatura
at formar uma esfera que contm a poro da membrana que est
formando uma vescula (Figura 20.2.B).

Figura 20.2: Molculas de clatrina isoladas (vistas por microscopia eletrnica: em


(A) tm trs pernas arranjadas num ngulo tal que, ao se associarem, formam
um polmero globular; no esquema B, h duas molculas de clatrina e o tracejado
marca a posio que as prximas molculas vo ocupar no polmero. Em (C), foto
de uma rplica da face citoplasmtica da membrana de uma clula que estava
endocitando. As vesculas que vo brotar revestidas por clatrina lembram muito
casas de abelha! (Micrografias: Molecular Biology of the Cell 3a ed)

CEDERJ 105
Biologia Celular I | Compartimentos endocticos

Endocitose e futebol possuem mais semelhanas do que voc imaginava...

Observe na Figura 20.3.A um modelo tridimensional do revestimento de clatrina. A trama formada


pelas molculas de clatrina em torno da vescula endoctica no lembra uma bola de futebol daquelas
oficiais (Figura 20.3.B)? porque, assim como as bolas de futebol, o polmero formado por pentgonos
e hexgonos alternados, o que matematicamente garante que o polmero seja esfrico. Esses modelos
matemticos no so raros na natureza.

(A) Vescula revestida (B) Bola de futebol


por clatrina

Figura 20.3

O mais importante com relao ao revestimento de clatrina que


ele aumenta a eficincia da endocitose mediada por receptor porque:
agrupa o maior nmero possvel de complexos receptor-ligante
na pequena regio da membrana que vai formar a vescula;
exclui dessa regio molculas que no devem ser endocitadas,
como por exemplo as que devem permanecer na membrana plasmtica
sempre (voc conhece vrias: canais inicos, bomba de sdio e potssio
etc.) ou receptores que ainda no receberam o ligante e, portanto,
perderiam a funo se fossem endocitados.

Qual o papel da clatrina na formao da vescula endoctica?

At hoje permanece a dvida se a formao da rede de clatrina que puxa a membrana,


provocando a invaginao que se aprofunda e forma a vescula. H argumentos a favor e contra
essa idia. A favor poderamos dizer que, de fato, o polmero se forma espontaneamente se as
subunidades de clatrina se aproximarem o suficiente, e o polmero formado vai assumindo uma
forma de esfera. O argumento contra que na endocitose de fase fluida, portanto no mediada,
no h nem a participao de receptor nem a formao do revestimento de clatrina; no entanto,
a membrana forma uma invaginao que se aprofunda at se destacar numa vescula. Nesse caso,
o que provocaria a deformao da membrana?

106 CEDERJ
20 MDULO 3
A vescula endoctica se solta da membrana

Quando o polmero de clatrina est completo e a rea de

AULA
membrana que ele contm j formou uma invaginao profunda, o
estrangulamento da invaginao formar uma vescula revestida por
clatrina. J se conhece o mecanismo molecular responsvel por esse
estrangulamento: uma protena chamada dinamina, que um tipo de
protena G porque liga GTP, forma um colarinho ao redor do pescoo
da invaginao. Quando o revestimento de clatrina est completo,
a dinamina hidrolisa o GTP, o que diminui o tamanho do filamento e
provoca o estrangulamento (Figura 20.4).
A maior importncia do revestimento de clatrina a formao da
vescula com altas concentraes de complexos receptor-ligante. Assim
que a vescula revestida se destaca, por ao da dinamina, o revestimento
de clatrina se desfaz. O resultado uma vescula no revestida, cheia
de complexos receptor-ligante. A nica diferena entre essa vescula e
uma outra resultante de endocitose de fase fluida a concentrao do
contedo, que na vescula formada por fase fluida igual quela em que
as molculas se encontram no meio extracelular.

Figura 20.4: Depois que a invaginao revestida por clatrina se aprofunda, a dinamina
estrangula o seu pescoo, destacando-a da membrana. Por ao de enzimas, assim que
a vescula se destaca o revestimento desmanchado, e seus componentes ficam dispersos
no citossol.

CEDERJ 107
Biologia Celular I | Compartimentos endocticos

Um pouco de histria

O mecanismo de endocitose mediada por receptor com participao do


revestimento de clatrina foi descoberto e estudado ainda na dcada de
1970 por dois mdicos, Michael S.Brown e Joseph L. Goldstein, que por isso
ganharam o Nobel de Medicina em 1985. Eles estudavam uma doena heredi-
tria, a hipercolesterolemia familiar aguda. As pessoas afetadas pela doena
tinham grande acmulo de colesterol nos vasos sanguneos, formando placas
de ateroma que obstruem os vasos, causando enfartos e isquemias muito
precoces, antes dos dois anos de idade. Outros pacientes pareciam ter uma
forma mais branda da doena, j que viviam at a idade adulta, mas ainda
assim morriam jovens. Os pesquisadores descobriram que os doentes mais
graves no conseguiam retirar o colesterol do sangue porque no possuam
o receptor para o transportador sanguneo de colesterol, a lipoprotena de
baixa densidade ou LDL (Figura 20.5).

Figura 20.5: Uma partcula de LDL


formada por uma cadeia protica,
molculas anfipticas, como colesterol e
fosfolipdios, na superfcie, e molculas
totalmente hidrofbicas, como colesterol
esterificado e triglicerdeos, no centro da
partcula. Com esse arranjo, as molculas
hidrofbicas podem ser transportadas
pela corrente sangunea.

Figura 20.6: O receptor de LDL


defeituoso (B) no consegue
se associar ao revestimento de
clatrina da mesma maneira que
o receptor normal (A).

108 CEDERJ
20 MDULO 3
Os pacientes menos graves possuam um receptor defeituoso, que ligava LDL em
sua poro extracelular, mas no conseguia interagir com o revestimento de cla-

AULA
trina porque no tinha a poro citoplasmtica (Figura 20.6). Assim, a eficincia
da endocitose era muito menor do que com receptores normais (Figura 20.7).

Figura 20.7: Micrografia eletrnica da formao de uma vescula revestida por


clatrina contendo complexos de LDL e seu receptor.

As vesculas endocticas se fundem

Uma vez desfeito o revestimento de clatrina, ou mesmo se a


vescula nunca teve revestimento porque resultou de endocitose no
mediada, o prximo passo a fuso da vescula com um compartimento
que, por ser o primeiro compartimento que recebe as macromolculas
endocitadas, chamado endossoma inicial (Figura 20.8). O endossoma
inicial um compartimento bastante ramificado e as vesculas endocticas
descarregam nele seu contedo pouco tempo depois (cerca de 5 a 10 min
a 37oC) de t-lo adquirido do meio extracelular.

Entrando e saindo sem ser incomodado


Em clulas polarizadas existe um mecanismo de transporte de macromolculas que mistura endocitose
com secreo (exocitose). Um dos mais conhecidos exemplos deste mecanismo a aquisio de anticor-
pos por camundongos recm-nascidos a partir do leite da me. A luz do intestino, onde o leite est,
tem pH cido. Neste pH, um receptor da superfcie apical das clulas epiteliais do intestino reconhece
as molculas de imunoglobulina e as endocita em vesculas revestidas por clatrina. Depois de desfazer o
revestimento de clatrina, as vesculas vo se fundir com o domnio basolateral da membrana da clula,
expondo os complexos receptor-imunoglobulina ao meio extracelular que banha o domnio basolateral,
que tem pH 7,0. No pH neutro, o receptor no tem mais afinidade pela imunoglobulina, soltando-a.
Assim, as molculas de anticorpo, que vieram no leite materno, atravessam as clulas que revestem o
intestino do filhote sem sofrerem qualquer modificao e chegam sua corrente sangunea, de onde
so distribudas por todo o organismo. Esse mecanismo recebe o nome de transcitose.

CEDERJ 109
Biologia Celular I | Compartimentos endocticos

A principal caracterstica do endossoma inicial o seu pH,


ligeiramente acidificado como resultado da atividade de uma bomba
de prtons caracterstica da via endoctica. Essa bomba de prtons
hidrolisa ATP para transportar prtons do citoplasma para dentro dos
compartimentos endocticos. Ela conhecida como ATPase vacuolar ou
V-H+-ATPase. Assim, o pH do endossoma inicial de cerca de 6,5.

Figura 20.8: Desenho esquemtico da via endoctica mediada por receptor. Os complexos receptor-ligante se
agrupam e, com auxlio do revestimento de clatrina, so endocitados com grande eficincia, passando aos com-
partimentos que formam a via endoctica. O ncleo (N), o retculo endoplasmtico (RE) e o complexo de Golgi
tambm esto representados, apesar de no fazerem parte da via. (Desenho original de Isabel Porto Carreiro.)

Ligantes e receptores se separam

Quando chegam ao endossoma inicial e encontram o pH ligeiramente


cido, tanto o receptor quanto o ligante mudam de conformao, causando
o desacoplamento dos complexos. A partir da, ligante e receptor seguiro
caminhos diferentes: enquanto o ligante prosseguir na via endoctica, a
maioria dos receptores passar a outro compartimento, as vesculas de
reciclagem (ou endossoma de reciclagem), que retornam membrana
plasmtica, tornando a expor os receptores na superfcie, onde podero
participar de novo evento endoctico (Figura 20.8).

110 CEDERJ
20 MDULO 3
Ligantes e receptores nem sempre se separam!

AULA
Alm do colesterol associado a seu transportador, o LDL, outras molculas essenciais para as
clulas tambm so captadas por endocitose mediada por receptor. Uma das mais estudadas
a endocitose da molcula que transporta ferro na corrente sangunea, a transferrina.
A transferrina ligada a ferro chamada holotransferrina e reconhecida por um receptor
presente na maioria das clulas eucariticas. A endocitose se d pelo mecanismo, que voc j
conhece, de formao de vesculas revestidas por clatrina. Depois do revestimento desfeito,
as vesculas se fundem com o endossoma inicial e, no pH 6,5 desse compartimento, a holo-
transferrina libera os tomos de ferro, que so ativamente bombeados para o citoplasma,
tornando-se apotransferrina (transferrina sem ferro). Diferentemente do que ocorre com o
LDL, o receptor tem afinidade por apotransferrina (no por holotransferrina!) em pH cido.
Ainda acoplados, receptor e apotransferrina seguem de volta para a membrana plasmtica.
Ao atingirem a superfcie celular, reencontram o pH do meio extracelular, de 7,2-7,4. Nesse
pH, o receptor no tem afinidade por apotransferrina e o complexo se desfaz. A apotransfer-
rina vai ligar outros tomos de ferro e o receptor livre vai poder ligar holotransferrina, com
quem tem grande afinidade no pH do meio extracelular. Sem dvida nenhuma, bastante
econmico devolver a transferrina ao meio extracelular para que a mesma molcula possa
transportar muitos tomos de ferro, entrando e saindo da clula vrias vezes. Por causa
desse trnsito intracelular peculiar, o complexo receptor-transferrina tem sido considerado
marcador de endossoma inicial em clulas de mamfero (Figura 20.9).

Figura 20.9: Os receptores ligam holotransferrina na superfcie da clula (1) e so agrupados (2)
em vesculas revestidas por clatrina (2-4). Depois que a vescula se destaca (5), o revestimento
despolimeriza (6) e a vescula se funde com o endossoma inicial (Ei). Por causa do pH 6,5 desse
compartimento, o ferro se solta da transferrina (7) e bombeado para o citoplasma. A apotrans-
ferrina e o receptor voltam para a superfcie (8-9), onde se soltam. Note que, nesse mecanismo de
captao de ferro em clulas de mamfero, nem a transferrina, nem o ferro atingem o endossoma
tardio (Et) e muito menos o lisossoma (L). (Desenho original de Flavia Moreira Leite.)

CEDERJ 111
Biologia Celular I | Compartimentos endocticos

O endossoma tardio

Os ligantes, agora j desligados dos receptores, sairo do endossoma


inicial em vesculas carreadoras pequenas e cidas, que s se fundem
com o prximo compartimento da via endoctica, o endossoma tardio
(Figura 20.8). A bomba de prtons tambm est presente na membrana
desse compartimento e faz com que o pH interno do endossoma tardio
seja ainda mais baixo que o do endossoma inicial, cerca de 6,0. Alm
de receber as vesculas do endossoma inicial que trazem o material
endocitado, o endossoma tardio tambm recebe as enzimas lisossomais
que chegam do complexo de Golgi em vesculas transportadoras.
Voc deve lembrar que as enzimas lisossomais so sintetizadas
no retculo endoplasmtico e so glicosiladas ao passar pelo Golgi,
possuindo a rvore glicdica completa at cido silico, no? Lembra
tambm que a maioria das glicoprotenas produzidas ao longo da via
secretria (retculo endoplasmtico complexo de Golgi) segue em
vesculas para a membrana plasmtica e o meio extracelular. Como ser
que as enzimas lisossomais so desviadas desse caminho? A resposta est
numa pequena diferena entre a rvore glicdica dessas enzimas e a das
outras glicoprotenas: pelo menos algumas das manoses acrescentadas
s enzimas lisossomais so fosfatadas, isto , ficam diferentes das
manoses comuns porque recebem um grupamento fosfato ligado ao
carbono 6, sendo por isso chamadas manoses-6P (l-se manose seis
fosfato). Enquanto percorrem o complexo de Golgi, so reconhecidas
por um receptor voltado para o lmen que reconhece especificamente
as glicoprotenas que tm manose-6P. A partir desse reconhecimento,
a enzima lisossomal vai continuar a ser glicosilada normalmente, mas
sempre ligada ao receptor. Chegando rede trans do Golgi, os complexos
receptor-manose-6P so reunidos em uma pequena regio (com ajuda
de clatrina!), de onde brotar uma vescula que levar as enzimas ao
endossoma tardio (Figura 20.10).
No endossoma tardio, o pH 6,0, cido o suficiente para que
os complexos receptor-enzima se desacoplem. Assim, a enzima vai ter o
fosfato retirado da manose, enquanto os receptores, agora desocupados,
vo voltar ao complexo de Golgi em uma vescula. Chegando ao complexo
de Golgi, esses receptores pescaro outras enzimas lisossomais para levar
ao endossoma tardio.

112 CEDERJ
20 MDULO 3
AULA
Figura 20.10: As enzimas lisossomais marcadas por manose-6P so reconhecidas
por receptores de manose-6P e levadas ao endossoma tardio acopladas a eles. L
chegando, encontram o pH cido, o que provoca o desacoplamento. O receptor
desocupado retorna ao Golgi, enquanto a enzima tem o fosfato retirado.

Voc pode perceber que o material endocitado e as enzimas


lisossomais se encontraram no endossoma tardio e que, portanto,
a digesto enzimtica pode comear a. De fato comea, mas muito
devagar, por duas razes: a primeira que o pH 6,0 no o pH timo
dessas enzimas, assim, elas funcionam com menor velocidade; a segunda
razo que muitas enzimas lisossomais so sintetizadas na forma de uma
proenzima, que tem alguns aminocidos a mais. A regio pro da enzima
como uma trava que no deixa a enzima funcionar, dessa forma, ela
no sair digerindo tudo pelo caminho. Essa trava precisa ser cortada
para que a enzima funcione. O corte feito por proteases lisossomais
que j esto ativas, ou seja, j tiveram a poro pro cortada.
O endossoma tardio de clulas de mamfero caracterizado
pelo pH 6,0, pela presena de material endocitado junto com enzimas
lisossomais, a maioria ainda inativa, e pela presena do receptor para
manose-6P. Dentro do endossoma tardio, freqentemente, so vistas
membranas formando reentrncias e vesculas internas. Nas clulas
em que isso ocorre, o endossoma tardio tambm chamado corpo
multivesicular. O significado dessa morfologia peculiar ainda discutido,
mas especula-se que facilite a digesto de membranas provenientes de
outros compartimentos.

CEDERJ 113
Biologia Celular I | Compartimentos endocticos

O lisossoma

Tanto as enzimas como as molculas endocitadas sero finalmente


levadas por vesculas ao ltimo compartimento da via endoctica, o
lisossoma. Os lisossomos so compartimentos de pequeno volume e
numerosos, sendo mais freqentemente encontrados na regio perinuclear.
So bastante cidos, tambm por ao da ATPase vacuolar, apresentando
pH interno entre 4,5 e 5,0. Nesse pH, as enzimas lisossomais tornam-se
ativadas, porque suas pores pro foram retiradas, e passam a funcionar
a pleno vapor.
Que enzimas existem no lisossoma? Confira na Figura 20.11.

Figura 20.11: Os lisossomas tm enzi-


mas capazes de hidrolisar praticamente
todos os tipos de macromolcula e essas
enzimas tm funcionamento timo em
pH cido.

Como voc pode verificar, as enzimas lisossomais podem hidrolisar


cidos nuclicos, protenas, acares, lipdios, fosfolipdios, proteoglicanas
etc. Ser que eles precisam mesmo de tudo isso? Se pensarmos apenas
na endocitose de molculas (pinocitose), algumas dessas enzimas
seriam usadas muito raramente, mas os lisossomas tambm digerem
freqentemente partculas maiores capturadas por fagocitose. No se
pode esquecer dos fagcitos profissionais, responsveis pela remoo de
clulas velhas, defeituosas ou estranhas ao organismo, como bactrias.
Essas clulas no fagocitam apenas para obter nutrientes (mas claro
que elas usam as molculas resultantes da digesto de suas presas).

114 CEDERJ
20 MDULO 3
Nesse caso, a bomba de prtons vai ser inserida na membrana do
vacolo fagoctico e logo comear a acidificar o lmen do fagossoma. Em

AULA
poucos minutos, lisossomas j formados, ou vesculas transportadoras
de enzimas lisossomais provenientes do Golgi, se fundiro ao vacolo,
descarregando seu contedo. A partir da, o vacolo fagoctico passa
a ser denominado fagolisossoma e ter condies de digerir todos os
componentes da clula que tenha sido fagocitada.

Afinal, os nutrientes chegam ao citoplasma

A ao das enzimas lisossomais reduz as macromolculas a seus


componentes mais simples, ou seja, reduz protenas a aminocidos,
nucleotdeos a bases nitrogenadas e acares etc. Os produtos da digesto
lisossomal so transportados para o citoplasma por translocadores
especficos e ento aproveitados pelas clulas. Uma partcula de LDL,
por exemplo, ter os cidos graxos dos triglicerdios usados como
combustvel mitocondrial na produo de ATP, ou usados no retculo
endoplasmtico liso, assim como o colesterol, para produzir membrana
nova ou como precursor de outras molculas.
Mas existem molculas que os lisossomas no conseguem
digerir. Essas molculas podem ter dois destinos: a) serem excretadas;
para isso, o lisossoma faz exocitose descarregando o contedo no meio
extracelular e incorporando sua membrana membrana plasmtica; b)
ficarem acumuladas dentro do lisossoma, o que diminui sua capacidade
funcional, podendo at mesmo deixar de funcionar de to entupido; um
lisossoma carregado de material no-digervel chamado corpo residual.
Nos dois casos isso pode acarretar srios problemas de sade, resultando
em doenas de armazenamento. Voc encontra vrios desses problemas
e situaes detalhados nos boxes adiante.

CEDERJ 115
Biologia Celular I | Compartimentos endocticos

Doenas lisossomais
Quando alguma enzima lisossomal no funciona, seu substrato no digerido se acu-
mula. Isso acontece em muitas doenas. Entre as mais conhecidas esto a doena de
Hurler, cujos portadores no digerem glicosaminoglicanas. Os portadores da doena
de Tay-Sachs acumulam um tipo de glicolipdio, os gangliosdeos, enquanto os porta-
dores da doena de Gaucher acumulam outro tipo, os cerebrosdeos. A Sndrome de
Niemann-Pick engloba vrias lipidoses e seus portadores no digerem colesterol ou
esfingomielina. A forma mais grave de doena lisossomal a doena da clula I (o I
se deve ao acmulo de corpos de incluso). Os portadores dessa doena tm apenas
um gene defeituoso (felizmente recessivo!), acarretando a ausncia da enzima que
fosforila a manose no carbono 6. Assim, as enzimas lisossomais no so reconheci-
das pelo receptor de manose-6P no Golgi e no so dirigidas via endoctica, e sim
secretadas. Por isso, os portadores da doena da clula I so diagnosticados pela
presena de vrias enzimas lisossomais na corrente sangunea.

Importncia dos lisossomas em macrfagos


Os macrfagos, por serem fagcitos muito ativos, freqentemente fagocitam mate-
riais que no podem digerir. Os macrfagos pulmonares so vtimas da fagocitose,
voluntria ou involuntria, de partculas em suspenso no ar, provenientes do fumo
ou da poluio do ar. Os lisossomas de macrfagos pulmonares de fumantes podem
chegar a ter tantos corpos residuais que acabam morrendo e provocando grandes
reaes inflamatrias no tecido pulmonar, formando reas necrosadas. Algumas
doenas profissionais tambm possuem o mesmo mecanismo, como a silicose, que
atinge trabalhadores de indstrias de vidro, amianto ou que utilizam jateamento
de areia. Esses profissionais inalam partculas de slica, que so fagocitadas por
macrfagos pulmonares e no so digeridas. Com o tempo, o acmulo de partcu-
las no pulmo causa uma grande reao inflamatria, reduzindo drasticamente a
capacidade pulmonar dessas pessoas, causando sua morte.

Tatuagens: menos inofensivas do que parecem


Um outro exemplo, menos dramtico, de substncia que os lisossomas no
conseguem digerir a tinta usada nas tatuagens. por isso que os desenhos
se tornam permanentes, os pigmentos ficam sendo repetidamente fagocitados
por geraes e geraes de macrfagos e outras clulas do sistema imune, que
no conseguem digeri-los. Isso acaba gerando duas conseqncias: os indivduos
tatuados acabam desenvolvendo anticorpos especficos e, ao longo dos anos,
as tatuagens acabam ficando um tanto borradas, pela migrao de macrfagos
para regies perifricas ao desenho inicial.

116 CEDERJ
20 MDULO 3
Por que os lisossomos no se autodigerem?

Se os lisossomas possuem enzimas capazes de digerir fosfolipdios,

AULA
por que no digerem sua prpria membrana? A resposta est nas
glicoprotenas dessa membrana. As protenas da membrana lisossomal
voltadas para o lmen so fortemente glicosiladas e suas rvores glicdicas
terminam em cido silico. A enzima capaz de retirar o cido silico, a
sialidase (ou neuraminidase) a nica glicosidase que no est presente
no lisossoma. Assim, as outras enzimas, capazes de danificar a membrana
lisossomal, simplesmente no tm acesso a ela (Figura 20.12).

Protena

Enzimas

Glicdio

Membrana

Figura 20.12: A rvore glicdica das glicoprotenas da mem-


brana lisossomal impedem que as enzimas lisossomais ataquem
a membrana da prpria organela.

CEDERJ 117
Biologia Celular I | Compartimentos endocticos

Os lisossomas e o estado funcional de uma clula

Os lisossomas tambm servem para degradar organelas inteiras


que tenham envelhecido ou estejam sobrando. O exemplo mais conhecido
o do aumento do nmero de mitocndrias decorrente de uma grande
demanda de ATP por tempo prolongado. Se a necessidade de ATP
diminuir, a diminuio do nmero de mitocndrias feita por autofagia,
fenmeno em que as organelas a serem destrudas so envolvidas por
perfis de membrana do retculo, que criam um ambiente protegido onde
os lisossomas podem fundir, descarregando as enzimas lisossomais.
Na Figura 20.13, foram resumidas as principais vias endocticas que
envolvem a participao de lisossomas.

Figura 20.13: Os lisossomas so o ltimo compartimento da via endoctica. Para eles,


convergem e se fundem os fagossomas, os endossomas contendo molculas endocitadas
via receptor ou por fase fluida e vacolos autofgicos contendo organelas que estejam
velhas ou sobrando.

118 CEDERJ
20 MDULO 3
RESUMO

AULA
A endocitose mediada por receptor mais eficiente porque os complexos
receptor-ligante ficam concentrados em pequenas vesculas.

A concentrao dos complexos receptor-ligante resultante da formao do


revestimento de clatrina, cuja funo reunir numa pequena rea de membrana
as molculas que devem ser endocitadas, excluindo as que no devem.

O revestimento de clatrina desfeito assim que a vescula se destaca da


membrana.

A vescula endoctica se funde com o endossoma inicial, descarregando nele


seu contedo.

Como o pH do endossoma mais baixo (6,5), os complexos receptor-ligante se


desassociam.

Enquanto os receptores retornam membrana em vesculas de reciclagem, os


ligantes seguem para o endossoma tardio.

Alm dos ligantes, o endossoma tardio recebe as enzimas lisossomais que vieram
do Golgi acopladas ao receptor de manose-6P.

O pH do endossoma tardio mais baixo ainda (6,0), fazendo com que as enzimas
lisossomais e os receptores de manose-6P se soltem. Os receptores voltam para
o Golgi.

Apesar do baixo pH no endossoma tardio, a maioria das enzimas lisossomais


ainda no funciona, porque ainda esto travadas pela regio pro.

Tanto enzimas como ligantes seguiro para os lisossomas, onde o pH o mais


baixo da via endoctica, estando entre 5,0 e 4,5. Nos lisossomas, as enzimas so
destravadas e funcionam plenamente.

CEDERJ 119
Biologia Celular I | Compartimentos endocticos

EXERCCIOS

1. Qual a principal vantagem da endocitose mediada por receptor em relao


endocitose de fase fluida?

2. Como os complexos receptor-ligantes so reunidos em uma rea da membrana?

3. Como a molcula de clatrina? Como o polmero formado por ela?

4. Como a vescula revestida por clatrina se solta da membrana plasmtica?

5. O que um endossoma inicial?

6. O que acontece nesse compartimento?

7. O que torna o endossoma cido?

8. O que o endossoma tardio?

9. De onde vm as enzimas lisossomais? Como so endereadas aos compartimentos


endocticos?

10. Por que as enzimas lisossomais no digerem as protenas do prprio lisossoma?

11. O que so doenas de armazenamento?

12. O que autofagia? Como se forma o vacolo autofgico?

120 CEDERJ
Biologia Celular I

Gabarito
Aula 13

1.

a) Receptor: protena presente na membrana ou no citoplasma de uma clula


que capaz de reconhecer um ligante especificamente, disparando um evento
celular.

b) Ligante: molcula secretada ou exposta na membrana de uma clula, que


reconhecida por um receptor, ligando-se a ele.

c) Molcula sinalizadora: corresponde ao ligante.

d) Clula-alvo: a clula que possui o receptor para um determinado ligante.

2. Na parcrina, o sinalizador tem vida curta e se dissemina apenas entre as


clulas mais prximas. J a sinalizao autcrina aquela em que a prpria
clula que secreta o sinalizador afetada por ele.

3. Na sinalizao endcrina, a molcula sinalizadora dura bastante e atinge


clulas muito distantes do local onde produzida. A sinalizao neuronal um tipo
de sinalizao parcrina, mas como os neurnios possuem longos prolongamentos
os axnios a molcula sinalizadora pode atingir clulas muito distantes do
corpo celular onde ele produzido.

4. Todas esto corretas.

5. Deve ser uma molcula pequena e hidrofbica para que possa atravessar a
bicamada lipdica.

6. Porque, uma vez dentro da clula-alvo, os hormnios formam um complexo com


uma protena citoplasmtica e so transportados para o ncleo, onde terminam
por ativar um ou mais genes. At que os efeitos da(s) protena(s) codificada(s) por
aquele gene sejam aparentes, leva algum tempo.

7.

a) abrindo um canal inico;

b) ligando-se a um receptor extracelular que ativa uma protena G intracelular;

c) ligando-se a um receptor enzimtico.

8. A acetilcolina, secretada por neurnios motores, e o receptor de acetilcolina,


presente nas membranas das clulas musculares esquelticas.

122 CEDERJ
9. So protenas que ligam GTP, hidrolisando-o a GDP e Pi. Esta alternncia
entre ligao a GTP e GDP funciona como um sinal liga/desliga para a protena,
disparando vrios eventos.

10. GIs atuam inibindo a atividade de outras protenas. GEs atuam estimulando a
atividade de outras protenas.

Aula 14

1. Dentro da clula, isto , no citossol.

2. Sempre na superfcie da membrana voltada para o meio extracelular.

3. Canais ativados por ligante e os que estimulam a protena G.

4. O receptor de acetilcolina um canal ativado por ligante. A protena G


pode ativar a adenilciclase hidrolisando ATP a AMPc, que ativa muitas enzimas
citoplasmticas.

5. uma protena que fosforila (= adiciona um fosfato) a uma molcula.

6. A adenilciclase hidrolisa ATP a AMPc, que por sua vez ativa uma enzima como
a PKA, uma quinase que fosforila outras protenas.

Ao ser ativada pela protena G, a fosfolipase C cliva o PIP2 em IP3 e DAG. O IP3
libera clcio armazenado no retculo endoplasmtico. J o DAG recruta o PKC no
citossol. O PKC se tornar ativo ao combinar-se com o clcio liberado pela IP3.

7. So molculas, como o clcio, que disparam efeitos celulares. Embora eles


no sejam as molculas sinalizadoras, sua presena conseqncia da cascata
de reaes disparada por estas. O clcio, ou outro mensageiro secundrio, tanto
pode ser a ltima molcula a sinalizar uma atividade celular, no citoesqueleto, por
exemplo, quanto ser um mero intermedirio numa cascata que prossegue ainda
por vrios degraus (molculas).

8. mantida baixa pelo bombeamento ativo para a luz do retculo endoplasmtico


ou para o meio extracelular. Tambm pode ser trocado, sem gasto adicional de
energia, por sdio, num esquema de antiporte.

9. uma seqncia em que a partir de um primeiro reconhecimento entre um ligante


e seu receptor, molculas passam a ser ativadas em srie, com um efeito domin.

CEDERJ 123
A grande vantagem a amplificao do sinal inicial, isto , uma molcula ativa
duas, que ativaro quatro, e assim por diante, resultando na ativao final de
muitas molculas a partir de umas poucas inicialmente utilizadas.

Aula 15

1. Pela invaginao de membranas a partir da superfcie e pelo englobamento


(endocitose) de outros organismos primitivos.

2. Meio intracelular, ou citossol, espao intranuclear e os compartimentos internos


limitados pelas membranas do retculo endoplasmtico, complexo de Golgi,
mitocndrias, plastdeos, peroxissomos, lisossomas e vesculas de endocitose e
de secreo.

3.

2 m

1,5m

1m

rea: 2 + 2 + 3 + 3 + 1,5 + 1,5 = 13 m2

Volume: 1,5 x 2 x 1 = 3 m3

4. rea: 2 (15 x 20) + 2 (12 x 10) + 2 (10 x 10) = 1040 m2

Volume: 15 x 20 x 10 = 3000 m3

relao rea2 / rea1 = 1040/ 13= 80

relao Volume2 / Volume1 = 3000 / 3 = 1000

O volume da segunda clula mil vezes maior do que o da primeira!

5. Se a superfcie se dobrar, formando vilosidades ou invaginaes.

6. Entram j na sua forma final, enovelada, atravs de comportas, os chamados


complexos do poro.

7. Essas protenas possuem seqncias de endereamento e passam por complexos


translocadores existentes na membrana dessas organelas.

8. Por vesculas que brotam de um lugar para o seguinte.

124 CEDERJ
9. No, de acordo com a protena que est sendo sintetizada eles permanecem
livres ou se aderem ao retculo.

10. uma seqncia de aminocidos que informa o destino de uma protena que
comea a ser sintetizada.

Aula 16

1. Sntese de protenas transmembrana, de secreo e protenas lisossomais e


tambm sntese da bicamada lipdica.

2. Porque os ribossomos no permanecem aderidos em carter permanente


membrana do retculo.

3. Nenhuma. Os ribossomos so todos iguais, ao iniciarem a leitura de um RNAm


que eles so ou no direcionados para o retculo, se existir uma seqncia de
endereamento codificada naquele RNAm.

4. Existe no citoplasma uma protena solvel, a SRP (seqncia reconhecedora de


sinal) que se liga seqncia sinal de aminocidos e s se desliga dela depois de
se ancorar a um receptor da membrana do retculo.

5. A cadeia de aminocidos passa atravs de um complexo de protenas


translocadoras, o translocon.

6. Seqncias de aminocidos hidrofbicos impedem que ela prossiga entrando


no retculo, assim, uma parte da cadeia fica exposta no citossol.

7. enzimaticamente cortada.

8. Sua seqncia de aminocidos alterna seqncias hidrofbicas e seqncias


hidroflicas, que funcionam como pontos de incio e parada da passagem pela
cadeia atravs da bicamada.

9. Os lipdeos so sintetizados no citossol e se inserem na membrana do retculo


sempre do lado citosslico. As enzimas chamadas scramblases transferem alguns
lipdeos para o folheto da membrana voltado para luz do retculo, de modo que
os dois folhetos cresam homogeneamente.

10. So transportados um a um a partir da membrana do retculo liso.

CEDERJ 125
Aula 17

1. O complexo de Golgi est sempre localizado na regio perinuclear da clula.


Ele pode ser visto em microscopia de fluorescncia localizando-se molculas que
s esto presentes ali ou pela impregnao pela prata, mtodo desenvolvido por
Cajal e Golgi, quando pela primeira vez esta organela foi descrita. Em microscopia
eletrnica, o complexo de Golgi tem um aspecto tpico de cisternas empilhadas
s quais se fundem ou brotam vesculas.

2. As protenas que so sintetizadas no retculo endoplasmtico so transferidas


para o Golgi em vesculas que brotam do retculo e se fundem face cis, ou de
entrada, do Golgi. Depois de passar atravs das lamelas mediais, as protenas saem
em vesculas que brotam na face trans ou de sada do Golgi.

3. Porque os acares precisam ser acrescentados e cortados na ordem certa, caso


contrrio a protena no ser corretamente endereada.

4. a) Glicosilao de protenas consiste em acrescentar rvores glicdicas a


determinados aminocidos da cadeia protica.

b) Participar da sntese de proteoglicanas, adicionando grupamentos sulfato


a protenas.

c) distribuir as macromolculas provenientes do retculo endoplasmtico entre


a membrana plasmtica, onde tais molculas se incorporaro ou sero secretadas;
ou vesculas de secreo que se acumulam no citoplasma esperando um sinal para
exocitarem seu contedo; ou lisossomos.

5. Tipo N- comea no retculo. Os acares se ligam sempre ao aminocido


asparagina. Tipo O- comea no Golgi. Os acares se ligam a um aminocido
treonina ou serina.

Aula 18

1. Erro na correta seqncia de aminocidos e no dobramento da protena, expondo


stios hidrofbicos e tambm impedindo a correta glicosilao da mesma.

2. So protenas que, com gasto de ATP, se ligam a cadeias proticas em formao,


ajudando no seu correto enovelamento. Porque quando a clula sofre um choque
trmico aumenta a sntese de protenas com defeito e, conseqentemente, tambm
aumenta a quantidade citoplasmtica de chaperonas que tentam consertar essas
protenas.

126 CEDERJ
3. As hsp60 tm uma forma de barril na qual aprisionam a protena defeituosa
e tentam consert-la. As hsp70 atuam desenovelando e enovelando a protena,
tanto para que ela assuma a conformao certa como para que ela possa passar
pelos complexos translocadores de organelas como a mitocndria.

4. So complexos proticos existentes no citoplasma que atuam como trituradores


de protenas malformadas. As enzimas proteolticas dos proteassomas so ativas
no pH citoplasmtico (7,0).

5. Essas protenas so marcadas pela ubiquitina, isto , so ubiquitinadas. Os


proteassomas possuem um receptor para ubiquitina, ligando-se assim s protenas
destinadas destruio.

6. So agregados de protenas malformadas que no foram degradados pelos


proteassomas e se acumulam em clulas ou tecidos.

Aula 19

1.

a) Molculas pequenas e hidrofbicas, como O2, CO2, NO.

b) Acares, ons e outras molculas pequenas e hidroflicas.

c) Macromolculas (protenas, polissacardeos) ou microorganismos (bactrias,


fungos etc.).

2. Nutrio e defesa do organismo.

3. Principalmente protozorios e clulas do sistema imune, mas quase todos os


tipos celulares podem, a princpio, fagocitar.

4. Na pinocitose so englobadas pequenas pores de fluido extracelular, formando


vesculas menores que 150 nm. Na fagocitose so internalizadas partculas maiores
e o vacolo endoctico mede 250 nm ou mais.

5. Molculas de superfcie, como acares ou anticorpos aderidos superfcie da


clula-alvo.

6. So vacolos que englobam grande quantidade de fluido extracelular pela


projeo de um pseudpodeo para a face dorsal da clula. Alm de aquisio de
nutrientes, clulas do sistema imune fazem um patrulhamento por amostragem,
detectando possveis molculas estranhas.

CEDERJ 127
Aula 20

1. Em ambas, a vescula endoctica possui o mesmo tamanho, mas na endocitose


mediada por receptor h muito mais partculas endocitadas em cada vescula. Em
outras palavras, a eficincia maior, pois as partculas so concentradas na rea
de membrana que dar origem vescula endoctica.

2. Sob o lado citoplasmtico da membrana organiza-se uma rede de molculas de


clatrina. Essas molculas de clatrina se ligam a protenas adaptadoras, as adaptinas,
que por sua vez se ligam aos complexos receptor-ligante.

3. A molcula de clatrina se parece com uma estrela de 3 pernas e o polmero forma


hexgonos e pentgonos, se fechando numa esfera, como uma bola de futebol.

4. Ela estrangulada pela protena dinamina.

5. O endossoma inicial formado pela fuso de vrias vesculas endocticas, j


sem o revestimento de clatrina, com um compartimento com pH levemente cido
(6,5).

6. Os ligantes se desligam de seus receptores. Estes ltimos se destacaro e


formaro vesculas de reciclagem, voltando membrana, onde podero capturar
mais ligantes. Os ligantes prosseguiro para outro compartimento.

7. A presena de uma protena transmembrana que importa prtons do citoplasma


para esse compartimento por transporte ativo.

8. um compartimento um pouco mais cido que o endossoma inicial (pH 6,0)


para onde so conduzidos os ligantes do endossoma inicial e que recebe enzimas
lisossomais recm-sintetizadas.

9. Elas so sintetizadas no retculo e no Golgi, como todas as protenas de secreo,


e contm um sinal caracterstico: a manose 6-fosfato.

10. Porque a membrana interna dos lisossomas muito glicosilada, e os lisossomas


no possuem a enzima que digere o ltimo acar da rvore glicdica, o cido silico,
impedindo, assim, as outras enzimas de alcanar a membrana do lisossoma.

11. Quando uma mutao faz com que enzimas lisossomais sejam defeituosas
(podem no funcionar, podem no ter seqncia de endereamento correta), os
substratos que elas deveriam digerir acabam se acumulando no citoplasma ou no
meio extracelular.

128 CEDERJ
12. quando a clula digere alguns de seus prprias componentes, como
mitocndrias, que estejam sobrando. O vacolo autofgico se forma a partir de
membranas do retculo, que envolvem a organela que vai ser degradada, criando
um ambiente apropriado ao das enzimas lisossomais.

CEDERJ 129
I SBN 85 - 89200 - 63 - 9

9 788589 200639