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supuradas y de los cadveres. Las ideas hipocrticas sobre las miasmas o emanaciones
contagiosas, fueron sustituidas por las teoras sobre la implicacin de diminutos seres vivos
en la produccin y transmisin de la enfermedad.
El principio del contagio por criaturas invisibles fue registrado por Varro (116-27 a.n.e.),
Lucrecio (95-55 a.n.e.), Plinio (23-79 a.n.e.), Galeno (131-201 a.n.e.).
En el siglo XIII, Roger Bacn (ms de un milenio ms tarde), postul que las enfermedades
eran producidas por animlculos invisibles y ms tarde Fracastori de Verona en 1546, escribi
que las enfermedades transmisibles eran causadas por semillas de enfermedad a travs del
contacto directo, por medio de objetos sucios o a travs del aire. Esta clara expresin de la
teora microbiana de la enfermedad se adelant a su tiempo y tuvo que esperar al desarrollo
cientfico y tcnico de la sociedad para su confirmacin experimental a travs del
microscopio.
Perodo morfolgico.
Perodo fisiolgico.
En 1859, Pasteur dio al traste con los mantenedores e la teora de la generacin espontnea, al
demostrar que los caldos calentados y protegidos el aire, no permitan el crecimiento de los
microorganismos. Con este descubrimiento, en 1875, pudo probar que la fermentacin
alcohlica de los frutos y granos era causada por microbios, comenzando la poca en que los
estudios bioqumicos llamaron la atencin de numerosos investigadores.
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Durante el perodo morfolgico, el diagnstico de las enfermedades contagiosas no se bas
en trabajos con cultivos puros de bacterias. En 1878, Lister haba obtenido cultivos puros de
lactobacillus mediante diluciones sucesivas en caldos, pero fue Koch quien desarroll los
mtodos de cultivo en medios slidos, con lo que obtuvo cepas aisladas que permitieron
identificar a las especies por la morfologa de sus colonias y por sus actividades fisiolgicas
sobre diversos sustratos. Los ltimos 20 aos del siglo XIX, constituyeron la edad de oro de
la bacteriologa. Para el ao 1900, casi todas las bacterias causantes de enfermedades haban
sido descritas.
La introduccin a la prctica de los filtros de Chamberland y de Berkefeld, facilit la
investigacin bioqumica de las toxinas, enzimas y otros productos del metabolismo
microbiano. Este perodo fisiolgico se ha extendido hasta nuestros das. La biotecnologa
moderna permite obtener una gran cantidad de sustancias tiles al hombre, fabricadas por
microorganismos: antibiticos, hormonas, alimentos. No debemos dejar de mencionar en este
perodo, la contribucin de los estudios sobre fisiologa microbiana al desarrollo de los
mtodos de esterilizacin y desinfeccin, utilizados en la lucha contra las infecciones. Los
trabajos de Lister y de Pasteur, aplicando tales descubrimientos, viabilizaron el advenimiento
de la asepsia quirrgica y dela antisepsia.
Perodo inmunolgico.
En 1878, Jenner public sus observaciones y experimentos sobre la vacuna contra la viruela.
Durante la dcada de 1880, Pasteur desarroll una serie de inmunizaciones para la profilaxis
de algunas enfermedades: ntrax, rabia; sentando las bases cientficas de la ciencia
inmunolgica. Para tratar de explicar la aparicin y el aumento de la resistencia del
organismo despus de padecer la enfermedad o recibir una vacuna, se elaboraron dos teoras:
la celular de Metchnikov que haca residir los mecanismos de resistencia en las clulas
fagocticas; y la humoral de Erlich, Bordet y otros, que centraban en los anticuerpos el efecto
protector. Las verdades relativas contenidas en ambas teoras han sido avaladas por la ciencia
contempornea. En los albores del siglo XX, los trabajos de Richet, Von Pirquet, Schick y
otros, sentaron las bases para el estudio de los fenmenos de alergia e hipersensibilidad que
aparecen como respuesta alterada del organismo a la introduccin de sustancias extraas.
Aunque el embrin de la ciencia inmunolgica se gest en el seno de la microbiologa, al
crear sus principales mtodos para el diagnstico de las enfermedades infecciosas; esta
ciencia rebasa en la actualidad el marco del estudio de la respuesta a los agentes infecciosos y
de las lesiones que estos provocan indirectamente.
Perodo quimioterpico.
Los mdicos antiguos realizaron mltiples intentos para curar las enfermedades infecciosas
con el empleo de diversas sustancias vegetales y minerales. En 1632, la condesa de Chinchon
introdujo en Europa la corteza del rbol de quina, que utilizaban los indios peruanos contra
las fiebres paldicas. A principios del siglo XX, Erlich, buscando el proyectil mgico que
poseyera toxicidad selectiva contra los microorganismos y no afectara al enfermo, descubre y
emplea compuestos arsenicales (Salvarsn) para el tratamiento de la sfilis.
La era moderna de los antibiticos y quimioterpicos se desarroll recin despus que
Domagk inform en 1935, que el Prontosil, un derivado de la anilina, tena un efecto
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espectacular sobre las infecciones por Estreptococos, descubriendo despus que dicha
sustancia era convertida por el organismo en sulfanilamida, que era el principio activo del
medicamento. En 1940, Florey y Chain lograron introducir en la prctica mdica el primer
antibitico: la penicilina, descubierto por Fleming en 1929.
Estas drogas fueron consideradas como la aparente panacea que liquidara para siempre las
infecciones, pero pronto aparecieron los fenmenos de resistencia de los microorganismos y
de sensibilizacin de los pacientes, como consecuencia del uso indiscriminado de tales
medicamentos, situacin que se mantiene en la actualidad y que es motivo de numerosas
investigaciones.
Perodo virolgico.
Perodo gentico.
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celular normal, como anormal, incluyendo el cncer. La manipulacin de las estructuras
cromosmicas por la ingeniera gentica, plantea grandes perspectivas a la humanidad.
Bacteriologa.
Micologa.
Virologa.
Protozoologa.
Helmintologa.
Artropodologa.
Los agentes biolgicos de importancia mdica que sern objeto de estudio son:
Virus.
Bacterias.
Hongos.
Protozoos.
Helmintos.
Artrpodos.
Relaciones ecolgicas.
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Se conoce como animal de vida libre a aquel que no tiene vinculaciones vitales con otros
seres Ej. los rumiantes.
El parsito es el organismo que tiene que vivir dentro o encima de otro a expensas de l
durante una parte de su vida o toda su existencia, se trata generalmente de seres vivos ms
potentes que pueden suministrarle proteccin o nutricin Ej. Ascaris lumbricoides en el ser
humano.
Entre la vida libre y la parasitaria existen diversos estadios graduales tales como:
El parsito y el hospedero.
Todo parsito tiene que hacer su parasitismo por una de las tres razones siguientes:
Parasitismo obligado: Es cuando el organismo tiene que parasitar para vivir. Son los de
mayor importancia y segn el tiempo y el momento de su ciclo evolutivo de parasitismo
se puede clasificar en:
- Permanentes. (Necator)
- Peridicos. (Mosca)
- Temporarios. (Mosquito)
Los parsitos que no rebasan la superficie externa del hospedero ni la luz de sus cavidades
naturales abiertas al exterior (odo, fosas nasales, boca, etc.) son llamados ectoparsitos. A su
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vez aquellos que se sitan en el interior del hospedero se denominan endoparsitos, pudiendo
tener estos ltimos una localizacin intra o extracelular.
Tipos de hospederos.
La interrelacin entre el parsito, los hospederos y el medio ambiente, es tan estrecha que
permite al primero, aprovechar los sistemas nutritivos y de defensa del segundo, logrando con
sto, evolucionar desde el punto de vista biolgico, hasta formas que se consideran
perfectas, pues en ellos ya no aparecen estructuras tales como la boca, apndices
locomotrices, etc., debido a que el parsito se ha acostumbrado o adaptado al hospedero de
una forma tal que en su informacin gentica se van perdiendo estructuras sin uso, a la vez
que aparecen otras capaces de permitir una mejor fijacin al hospedero Ej. los ganchos de la
Taenia saginata, o racionalizar de tal manera sus sistemas que slo est presente lo esencial
Ej. sistemas digestivos y nerviosos de la Fasciola heptica. La adaptacin de un parsito a
uno, o un grupo de hospederos provoca la aparicin de variantes morfolgicas o biolgicas de
las especies.
Las adaptaciones morfolgicas ya han sido mencionadas, pero de las biolgicas diremos que
tienen gran importancia los llamados tropismos. Estas adaptaciones son ms que fenmenos
invariables que aparecen en los parsitos como respuesta a la accin de variaciones fsico-
qumicas del medio ambiente.
Positivo.
Negativo.
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Fototropismo (luz).
Termotropismo (temperatura).
Hidrotropismo (agua).
Geotropismo (tierra).
Histotropismo (tejidos).
El ciclo biolgico o evolutivo de un parsito es toda la trayectoria del mismo desde los
primeros estadios vitales hasta las formas parasitarias adultas dentro y fuera del hospedero.
Diheteroxenos: Son los que tienen dos hospederos diferentes, uno definitivo que
alberga la forma adulta y otro intermediario que alberga a las larvas. Ej. Wuchereria
bancrofti, cuyos hospederos definitivos e intermediarios son el hombre y el mosquito.
Poliheteroxenos: Son los que tienen un hospedero definitivo y dos intermediariois
sucesivos que albergan a dos formas larvarias diferentes.
Diheteromonoxenos: Son los que pueden indistintamente realizar una evolucin
directa en un solo hospedero, o indirecta en dos hospederos (definitivo y el
intermediario).
Se llaman focos naturales a determinadas zonas del mundo donde existen caractersticas
similares de temperatura, humedad, presin, etc. que facilitan el desarrollo de la fauna
parasitolgica. Estas zonas faunianas o focos pueden estar determinadas geogrficamente por
los distintos continentes y pases en dependencia del parsito de que se trate.
La biocenosis es un concepto muy estrechamente ligado a estas zonas naturales o focos y se
define como la asociacin en una misma rea alimenticia de organismos pertenecientes a
especies diferentes.
Virus: Son agentes submicroscpicos, constituidos por un ncleo central de cido nucleico,
protegidos por una cubierta proteica que a su vez puede hallarse rodeada por una envoltura
lipoproteica. Solamente contienen un tipo de cido nucleico, ya sea ADN o ARN. Son
intracelulares obligados.
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Clamidias: Son elementos muy pequeos, parsitos obligados intracelulares, que se
multiplican mediante un ciclo de desarrollo caracterstico produciendo inclusiones
citoplasmticas en las clulas del hospedero. Son susceptibles a algunos antimicrobianos. Los
distintos miembros del grupo se identifican por su virulencia para diferentes hospederos, por
las lesiones que provocan y por su estructura antignica.
Mycoplasmas: Son las clulas de menor tamao, capaces de vivir en forma independiente.
Algunas tienen menor tamao que los grandes virus y atraviesan filtros que retienen a todas
las bacterias, diferencindose estas ltimas por la carencia de pared celular y por la presencia
de esteroles en la membrana citoplasmtica. En consecuencia los Mycoplasmas no son
susceptibles a los antibiticos que interfieren con la sntesis de la pared.
Bacterias: Son clulas pequeas protegidas de una pared celular compleja que les permite
sobrevivir en diferentes ambientes. En algunas especies, la pared est rodeada de una cpsula
externa gelatinosa.
Hongos: Pueden verse tanto en forma de levadura como de mohos (hongos filamentosos),
inclusive pueden alterar su estructura de acuerdo a las condiciones ambientales.
Protozoos: Son organismos unicelulares, con una organizacin muy compleja, presentando
varias caractersticas comunes con las clulas humanas.
Helmintos: Presentan simetra bilateral y son invertebrados. Se van a dividir en dos Phylum
de importancia en la medicina:
Nematelmintos.
Platelmintos.
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TEMA II. AGRESIN Y RESPUESTA.
El proceso infeccioso.
La inmunologa ha alcanzado una gran importancia en el desarrollo de las Ciencias
Mdicas actuales, es conocido que la inmunidad y la infeccin son inseparables.
La inmunologa naci del estudio de cmo los animales mediante medios naturales o
artificiales, se valoran inmunes contra las infecciones microbianas y toxinas.
El mundo est lleno de microorganismos y por tanto da a da nos ponemos en contacto con
muchos de ellos y a qu se debe que no nos enfermemos con ms frecuencia? Esto se debe
a los mecanismos que participan en la defensa del organismo que pueden ser especficas e
inespecficas. A su vez a travs de la vacunacin tambin protegemos a las personas para
evitar que se enfermen.
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El proceso infeccioso: Es la propiedad que tienen los microorganismos de ponerse en
relacin con el hospedero, constituyendo la entrada, desarrollo y multiplicacin de un
agente inaparente (no hay signos ni sntomas de la enfermedad).
EXOTOXINAS ENDOTOXINAS
Muy txicas, mortales para los animales de laboratorio Poco txicas, mortales para los animales de
en microgramos o menos. laboratorio en dosis de cientos de microgramos.
Ej. toxina de la difteria, Cl botulinum, Cl. tetani, etc. Ej. endotoxinas de E. coli, neisserias, etc.
NO
OTRAS PROPIEDADES:
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Expoliacin: Algunos parsitos para su alimentacin y desarrollo sustraen del
hospedero sustancias necesarias, Ej. sangre, etc.
Invasividad: Propiedad que tienen los microorganismos de entrar en los tejidos del
hospedero, multiplicarse y de ah diseminarse. Entre los factores que intervienen en
la invasividad se encuentran, enzimas extracelulares, componentes de superficie y
otros desconocidos Ej. microorganismos invasivos: Yersinia pestis, ntrax, TB, etc.
Enzimas extracelulares:
Mecanismos de defensa.
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Piel: Integridad
A. grasos. (Ph cido)
1) Barrera tisular Sudor ( Lisozima. y ph cido)
F . Normal.
Mucosa: Integridad.
A. mucociliar.
Lgrimas (lisozima).
Acidez estomacal.
Bilis.
Acidez vaginal.
F. Normal.
Es facilitada por:
-Espacios tisulares pequeos (ej. alvolo)
-Superficies rugosas.
-Anticuerpos (opsoninas)
Si el microorganismo llega a los tejidos, encuentra a los macrfagos fijos del S R E, Ej.
pulmn (macrfago alveolar), hgado (clulas de Kupffer), bazo (sinusoides), etc.
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Poliaminas.
Fagocitinas.
Vasodilatacin.
Vasoconstriccin.
Flujo sanguneo.
Marginacin de leucocitos.
Diapdesis.
5) Complemento (C).
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Alterna inespecfica o de la properdina.
7) Fiebre.
Inmunidad: Abarca todos los mecanismos fisiolgicos que permiten reconocer aquellas
sustancias o elementos ajenos a s mismo y las respuestas que llevan a su neutralizacin y
eliminacin.
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Respuesta inmune celular mediada por clulas especficamente sensibilizadas
(linfocitos T).
La activa es cuando los efectores son elaborados por el propio organismo y pasiva cuando
los efectores son transferidos de un organismo a otro.
Activa Pasiva
Contacto previo con el antgeno No requiere contacto con el antgeno
Los anticuerpos son propios Los anticuerpos son ajenos
El comienzo de la actividad es tardo El comienzo de la inmunidad es inmediato
Dura mucho tiempo Dura poco tiempo
1. Especificidad
2. Heterogenicidad
3. Memoria
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decrece. Si inyectamos el mismo toxoide por segunda vez, uno o dos meses despus al
mismo conejo, se obtiene una respuesta de anticuerpos ms rpida y abundante.
Podemos inferir que despus del primer contacto, qued una poblacin de clulas de
memoria que reconocen al antgeno.
Mecanismos de defensa del hospedero a nivel de superficie.
Adhesin y penetracin de los microorganismos a clulas
epiteliales.
Mecanismos de defensa a nivel de superficie.
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Factores Contienen Accin Resultado
1. Compite con los patgenos por los nutrientes. Ej. Estreptococo viridans.
2. Produce cidos grasos: Estos bajan el ph e inhiben la colonizacin de los patgenos
Ej. bacterias anaerobias que retardan desarrollo de Salmonella.
3. Producen sustancias germicidas Ej. colicinas (destruyen bacterias por bloqueo de la
fosforilacin oxidativa). Son sustancias bactericidas de tipo antibitico.
4. Produce lpidos cutneos antibacterianos Ej. Propionibacterium acnes produce
lpidos que interfieren con el crecimiento de Estafilococos y Estreptococos en piel.
5. Producen sustancias txicas ej. Piocinas
c) Mecanismos de arrastre: Existe una gran cantidad de funciones normales que actan
coordinadamente para disminuir la carga bacteriana del cuerpo. Ej.
Piel - Decamacin.
- Eliminacin de microorganismos a travs del sudor y las secreciones sebceas.
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Conjuntivas- Eliminacin de microorganismos a travs de las lgrimas.
Tractus respiratorio- Eliminacin de partculas grandes que penetran por las fosas
nasales, a travs de la tos, estornudo o deglucin. Los microorganismos (el 90 % se
une al mucus) son expulsados tambin a travs de los mecanismos anteriores.
Salivacin
Para que se produzca la adhesin tiene que existir una correlacin entre los factores de
superficie del microorganismo (sitios de fijacin) y los receptores de las clulas epiteliales.
Adhesinas:
Fimbrias.
Flagelos.
Lipoproteico + protena M.
Fibronectina (glucoprotena)
Glucanos de sacarosa.
Glucanos y dextranos.
Hemaglutinina.
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Flagelos: a travs de los flagelos las Salmonellas y otros microorganismos entricos se
fijan al epitelio de la mucosa intestinal
Fibronectina: Se encuentra en las clulas del epitelio bucal donde sirve de unin al
Estreptococo hemoltico.
Las clulas epiteliales poseen receptores constituidos por carbohidratos como: D mannosa,
L fructuosa, D galactosa, que no se saben dnde estn localizados pero que pueden ayudar
a la adhesin de los microorganismos, pero existen otros carbohidratos que s permiten
que se unan que son las llamadas adhesinas ( fimbrias, flagelos, fibronectina y otros)
Ej.
C. diphteriae
B. pertussis
V. cholereae
E. coli enteropatgena
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Shigella
Toxoplasma
Salmonella
A travs de:
Efectores
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NO TODO ANTGENO ES BUEN INMUNGENO
Antgeno: Toda sustancia que es capaz de combinarse con los efectores de la respuesta
inmune.
Haptenos:
Sustancias extraas al organismo.
Bajo peso molecular.
Poca complejidad estructural.
Hidratos de carbono
Pptidos Protena (Portador) Inmungeno
Lpidos
Antigenicidad: Capacidad de una sustancia para combinarse con un anticuerpo o con una
clula especficamente sensibilizada.
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Clasificacin de los antgenos
Las inmunoglobulinas (Ig) son protenas especializadas que portan actividad de anticuerpos,
o sea la propiedad de combinarse especficamente con la sustancia que provoc su formacin.
Se encuentran en el suero sanguneo, lquidos extravasculares, secreciones exocrinas y en la
superficie de los linfocitos.
La actividad funcional de las inmunoglobulinas slo puede ser entendida sobre la base del
conocimiento de su estructura.
Cada Ig est formada por una unidad bsica o monmero, compuesta por 4 cadenas
polipeltdicas.
Cada cadena polipeptdica tiene una porcin NH 3 terminal (regin variable) y una porcin
COO terminal (regin constante). El antgeno reacciona con la regin variable y la regin
constante est involucrada con las reacciones biolgicas.
Los sitios de fijacin del antgeno estn formados slo por un pequeo nmero de
aminocidos de las regiones variables (v) de las cadenas H y L.
Existen cinco (5) clases de inmunoglobulinas (IgG, IgA, IgM, IgD e IgE) definidas por
diferencias en la secuencia de aminocidos en las regiones de las cadenas pesadas constantes.
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en el suero
(mg x 100 mL)
Fija el C', atraviesa
IgG 1000 - 75 % 150 la placenta, 2da
en respuesta inmune
Fija el C', acta como
IgA 200 - 15 % 170
anticuerpo secretor
Fija el C', 1ra en
IgM 120 - 10 % 890
respuesta inmune
Presenta receptores
IgD 3 - 0,2 % 150
en linfocitos
Presente en
IgE 0,05 - 0,004 % 196
reacciones anafilcticas
Ag Ab Ag Ab
Intervienen:
pH
temperatura
iones
fuerzas (electrostticas, Coulmbicas, Van de Waals, enlaces de H2
Afinidad: Es la fuerza de combinacin del sitio activo del anticuerpo con un determinante
antignico aislado, de los muchos que puede poseer un antgeno.
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Existen 2 mecanismos diferentes que conducen a las reacciones del C': va clsica y va
alternativa. Despus de su activacin conduce a diferentes procesos biolgicos: lisis de
clulas, bacterias, virus; hasta la participacin directa en la respuesta inflamatoria.
La va alternativa del C' puede servir como una primera lnea de defensa en el husped no
inmunizado, funcin que desempea independientemente de la fagocitosis (sobre todo en
infecciones por bacterias Gram negativas).
La actividad del C' depende de 9 protenas sricas que actan en secuencia, cuando una de
ellas se activa es capaz de activar a la otra como "cascada". El componente final C' 9 tiene la
capacidad de abrir un hueco en la clula provocando la lisis o muerte de la misma.
La activacin de este sistema tambin conduce a otras funciones biolgicas que son
importantes en la salud y en la enfermedad.
Los activadores son: Inmunocomplejos (Ag - Ab) con participacin de las IgG e IgM y
agregados de Igs.
1. Etapa de reconocimiento.
2. Etapa de activacin.
3. Etapa de ataque a la membrana.
Etapa de reconocimiento
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Va Clsica Va Alterna
Mediadores de la inflamacin
megacariocito plaquetas
serie eritroide eritrocitos
serie mieloide monocito macrfago
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granulocito - neutrfilos
- eosinfilos
- basfilos
-mastocitos o clulas
cebadas
serie linfoide clulas B B timo dependientes 30 %
B timo independientes
clulas T TH cooperante
(70 % ) Ts supresor
timo independiente TC citotxico
THT hipersensibilidad retardada
rganos inmunocompetentes:
a) rganos centrales
Timo: Se deriva de la 3ra y 4ta bolsa bronquial como evaginacin central durante la 6 ta
semana de vida intrauterina. Tiene la tasa ms alta de produccin celular. Es el primer
rgano en producir linfocitos (linfocitos timo dependientes). Est constituido por
clulas epiteliales y linfocitos. Al timo llegan linfocitos indiferenciados provenientes de
la mdula sea, que en este rgano maduran y se conviertes en clulas
inmunocompetentes.
Medula sea: acta como rgano linfoide central y controla la maduracin de los
linfocitos responsables de la inmunidad humoral o mediada por anticuerpos.
Bolsa de Fabricio: es el equivalente de la mdula sea en las aves.
b) rganos perifricos
Bazo
Ganglios linfticos
Tejido linfoide asociado al tubo digestivo
Clulas T Clulas B
Pobladas por linfocitos que maduran Pobladas por linfocitos que maduran
en el timo en la mdula sea en los mamferos y
en la Bolsa de Fabricio en las aves
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Linfocitos T Linfocitos B
Clulas inmunocompetentes:
Las clulas que participan en la respuesta inmune son: linfocitos T, linfocitos B, plasmocitos,
macrfagos, polimorfonucleares, mastocitos, eosinfilos y basfilos.
Linfocitos T:
Linfocitos B:
Plasmocitos:
Sintetizan inmunoglobulinas.
Linfocito B Linfocito T
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- Receptor FC y C
Forma de conteo Inmunofluorescencia con Forma rosetas con
anti - Ig eritrocitos de carnero
Frecuencia en el 50 % 50 %
bazo
Frecuencia en 30 % 70 %
sangre
Clulas plasmticas formadoras Linfocitos comprometidos
Maduracin de anticuerpos inmunolgicamente
humoral celular - humoral
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(linfocitos T, macrfagos y linfocitos B) estn involucrados en la respuesta humoral, lo cual
se conoce con el nombre de cooperacin celular.
El mecanismo de activacin de las clulas B es complejo y no muy bien comprendido, pero la
hiptesis ms aceptada en el momento actual propone los siguientes pasos:
3) Liberacin del factor de crecimiento por las clulas B que estimula al linfocito B a la
proliferacin. Este factor puede ser liberado tambin por TH.
Fenmeno mediante el cual el sistema inmune de un individuo responde ante una sustancia
extraa de una forma alterada que trae como consecuencia lesiones hsticas. Tiene
memoria y especificidad inmunolgica.
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Inmediatas Anticuerpos I Anafilctica
II Citotxica
III Complejos txicos (Ag-Ab)
V Estimulatoria
Retardadas Clulas especializadas, IV Retardada
sensibilizadas
Son producidas por sustancias activas liberadas por algunas clulas de los tejidos como:
clulas cebadas o basfilos.
Dependiendo del modo o va de administracin del antgeno, las manifestaciones clnicas
pueden ser:
)a Generalizadas
)b Localizadas por aparatos
Aparato respiratorio: obstruccin bronquial y edema de la laringe.
Aparato digestivo: nusea, vmito, diarrea, clicos abdominales.
Aparato cardiovascular: hipotensin, shock.
Piel: prurito, eritema, ronchas.
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Puede ocurrir por 2 mecanismos: que el anticuerpo se una al antgeno de las membranas
celulares (clula husped) o que el antgeno primario se adsorba a las membranas celulares y
luego el anticuerpo se una a l.
Respuesta humoral
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1. Opsoninas: Opsonizacin mediada por anticuerpos (facilitan la fagocitosis). Los
anticuerpos reconocen al antgeno de la bacteria y atraen macrfagos y clulas asesinas
(killer), que facilitan la fagocitosis por stas clulas.
La fagocitosis es la defensa fundamental contra la invasin de los microorganismos,
favorecida por el cambio de carga superficial que stas sufren debido a la interaccin con
el anticuerpo.
2. Lisis: Bacteriolisis mediada por el C. La formacin del inmunocomplejo (Ag Ab)
activa la va clsica del C, lo que da como resultado la inmunocitolisis.
3. Neutralizacin: Ocurre la inmovilizacin por anticuerpos neutralizantes.
4. Produccin de antitoxinas: La liberacin de sustancias txicas (toxinas) da lugar a la
formacin de anticuerpos antitoxinas, que bloquean la accin de las mismas.
Respuesta celular
1. Macrfagos:
aumentan en la capacidad fagoctica
aumentan en el nmero de fagolisosomas y su contenido enzimtico
por lo tanto, aumentan la capacidad para digerir las bacterias fagocitadas.
3. Clulas asesinas:
K (killer): tienen receptor para IgG y el anticuerpo acta como un puente.
NK (asesina natural): matan sin necesidad de contacto previo con el antgeno;
lisan directamente a las clulas, pero sin especificar; requieren contacto clula
clula (beso inmunolgico).
La inmunidad celular antibacteriana se produce para bacterias que tienen vida intracelular. Ej.
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Mecanismos de inmunidad en algunas infecciones por Clostridium tetani, S. aureus, etc.
(txica).
1. La inmunidad que se crea es pobre, por lo que se ven ataques subsecuentes despus de
cada infeccin. Se supone que aparecen IgG.
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Gemacin de la membrana celular o de la membrana nuclear (vacuolar). Se observa
en los virus envueltos.
Ruptura o lisis de la clula infectada. Se observa en los virus desnudos.
Replicacin viral.
Los virus slo se multiplican en el interior de una clula viva y sta puede efectuarse en el
ncleo o en el citoplasma.
Los virus ARN generalmente se multiplican en el citoplasma, con excepcin de los
retrovirus (SIDA).
Los virus ADN generalmente se multiplican en el ncleo, con excepcin de los
poxvirus.
No todos los virus completan los pasos de la replicacin.
Diseminacin.
Muchos virus producen enfermedad en sitios distantes a su puerta de entrada. Ej. enterovirus,
los cuales penetran por tracto digestivo y producen enfermedad en el SNC.
Tipo I: Que tambin se denomina extracelular. En este tipo la clula infectada es lisada y las
partculas virales activas (cido nucleico) se esparcen en forma extracelular hacia las clulas
no infectadas vecinas y distantes. Ej: en el virus de la Influenza y los adenovirus.
Tipo II o Intercelular: El virus se disemina de una clula a otra a travs de los puentes
intercelulares sin contacto con el medio extracelular por Ej: virus de la varicela.
Tipo III o nuclear: tambin se conoce como diseminacin vertical, en este tipo el genoma
del virus se integra al genoma de la clula del hospedero y en la divisin celular est pasando
junto con la clula por el ncleo. Ej: los retrovirus.
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Hematgena secundaria: la infeccin y replicacin viral inicial ocurren en la superficie de
una mucosa y despus va seguida de la diseminacin hematgena a los rganos. Ej:
sarampin, paperas.
Neural: ciertos virus inoculados en sitios perifricos se diseminan por el sistema nervioso.
Ej: virus de la rabia (rhabdovirus).
a) Plasticidad serolgica: Existen algunos virus, como es el virus de la influenza, que sufre
cambios genticos que le permiten cambiar su estructura con frecuencia y dar lugar a
recombinacin gentica, que vara dando lugar a diferentes pandemias y dificulta que el
individuo cree inmunidad.
b) Disfraz: Las protenas virales en la superficie de la clula infectada por virus pueden
unirse a materiales normales del hospedero por lo que ocultan sus antgenos al aparato
inmunolgico. Ej: el virus del herpes.
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En las enfermedades virales con un perodo de incubacin corto (Ej. catarro comn e
influenza), los virus no pasan a travs del sistema sanguneo debido a que su rgano
de choque o diana, coincide con la puerta de entrada al organismo.
2. Neutralizacin facilitada por C. El C slo puede lisar algunos virus con cpside por
lisis directa. Ej: retrovirus. El recubrimiento de viriones con factores del C tambin
puede facilitar su fijacin y digestin por las clulas fagocticas.
3. Lisis de la clula infectada por virus. Las clulas infectadas que tienen antgenos
codificadas por el virus en su superficie son susceptibles a la citolisis por el Ac y el C
principalmente por la va alterna.
4. Opsonizacin: El recubrimiento de los virus extracelulares por Acs IgG y por C o para
ambas puede facilitar la fagocitosis y la destruccin intracelular por macrfagos o por
PMNs.
A. Inhibicin de enzimas.
El virus de la influenza tiene una enzima, la neuroaminidasa, que rompe al receptor viral y
facilita la penetracin del virus. Los Acs contra la neuroaminidasa limitan la replicacin viral.
37
I. La citotoxidad celular. Las clulas infectadas por virus pueden ser lisadas por linfocitos
sensibilizados o en algunos casos por macrfagos activados o an por PMNs.
38
TEMA III. BACTERIOLOGA MDICA.
39
necesario para la produccin de energa metablica. As eucariotes y procariotes se distinguen
de los virus, que dependen de las clulas husped para efectuar estas funciones tan necesarias.
Muchas son las aplicaciones de la bacteriologa, en el ambiente, en los procesos industriales,
en el control de los insectos causantes de enfermedades, en la depuracin microbiana de
aguas residuales, etc; todos stos con fines beneficiosos para el hombre, sin embargo,
tambin en la guerra biolgica, con el empleo deliberado de organismos vivos o de sus
toxinas para causar la muerte o incapacidad.
El inters y la investigacin en torno a la guerra biolgica cumplen 2 fines importantes: 1ro la
preparacin para la defensa y 2do que pudiera considerarse accidental, pero los mtodos y
conocimientos adquiridos al protegernos para la guerra biolgica aumentarn nuestra
posibilidad de controlar las enfermedades debido a causas naturales.
Aun antes de que Pasteur demostrara experimentalmente que las bacterias eran la causa de
algunas enfermedades, muchos observadores haban presentado pruebas de la teora de los
grmenes como agentes productores de enfermedades. Fracastori de Verona (1483-1553)
sugiri ya que las enfermedades podan deberse a organismos invisibles que se transmitan de
una persona a otra. En 1792 Anton Van Plenciz, de Viena, no slo estableci que la causa de
enfermedad eran agentes vivos, sino que supuso que grmenes diferentes provocaban
distintas enfermedades y Oliver Wendell; mdico famoso y hombre de letras, insisti en que
la fiebre puerperal era contagiosa y se originaba probablemente por un germen que se
transmita de unas madres a otras.
Existen pocas enfermedades infecciosas cuyo agente etiolgico no se conozca. El hecho de
que algunas infecciones microbianas no estn dominadas puede deberse, bien a nuestro
defecto del conocimiento de factores predisponentes en el husped o a otros aspectos de la
patogenia, tales como la accin sinrgica de los microorganismos.
La clula bacteriana.
Resulta casi imposible comprender lo que sucede en el interior de la clula viva, si se carece
de los conocimientos sobre la accin enzimtica; obtenidos en los cursos de bioqumica. Para
comenzar nuestro estudio sobre la clula bacteriana, debemos considerarla como una
pequesima bolsa repleta de enzimas, capaz de desarrollar un intercambio energtico con el
medio, que puede ser ms de cien veces mayor con respecto al mismo peso de tejido
humano.
40
Estructura de la clula procaritica.
La clula procaritica es ms simple que la clula eucaritica a cualquier nivel con una
excepcin: la pared celular puede ser ms compleja.
Estructuras externas
Estructuras internas
1.- Nucleoides
2.- Ribosomas
3.- Grnulos (Citoplasmticos)
4.- Mesosomas
5.- Cromatforos
Estructuras externas
Membrana celular.
Composicin:
a) Fosfolpidos
b) Polipptidos
Funciones:
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Pared celular.
Envoltura rgida entre la membrana y la cpsula, diferente en las bacterias Gram (+) y las
bacterias Gram (-).
Composicin:
Gram (+)
Gram (-)
- Murena-Peptidoglicano-Mucopptido.
- Lipoprotenas.
- LPS (Es muy txico para los animales y se les denomina endotxinas debido a que
slo es liberado cuando las clulas bacterianas son lisadas.
- Las bacterias Gram (-) tambin presentan la membrana exterior, tpica capa formada
por fosfolpidos, LPS y protenas, que tiene como funcin:
Funciones:
- Proteccin osmtica: (La presin osmtica interna de las bacterias es muy grande,
flucta entre 5 a 20 atmsferas, como resultado de una concentracin de solutos
adquiridos mediante transporte activo. En casi todos los medios esta presin sera
suficiente para hacer explotar la clula si no fuera por la presencia de paredes celulares
con enorme resistencia a la tensin. La pared celular bacteriana debe su resistencia a la
murena.
- Divisin celular, funcionando como un primordio para su propia biosntesis.
- Carcter tintoreal.
- Morfologa.
- Varias capas de la pared celular, son sitios de determinantes antignicos primordiales
de la superficie celular.
- La pared celular es en general permeable sin selectividad especfica, sin embargo la
membrana externa bloquea el paso de molculas relativamente grandes.
42
Protoplastos y esferoplastos: Las bacterias habitualmente se lisan en agua o suero cuando la
capa de peptidoglucano de la pared celular rgida de la envoltura celular se disuelve con
lisozima o por medio de otros agentes. Sin embargo cuando se le estabiliza con soluciones
hipertnicas de sacarosa o de sales (0,2 a 0,5, segn el microorganismo) se libera un cuerpo
esfrico carente de pared y osmticamente sensible que se conoce como protoplasto. Cuando
se retienen los componentes de la envoltura, el cuerpo osmticamente sensible se denomina
esferoplasto. En general las bacterias Gram (+) producen protoplastos, mientras que, los
microorganismos Gram (-) originan esferoplastos, dado que retienen de manera inevitable,
algunos componentes de la membrana externa.
Cpsula.
Composicin:
- Polisacridos.
- A veces cido hialurnico.
- En algunas bacterias est constituida por polipptidos.
Funciones:
Flagelos.
Composicin:
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- Protena (Flagelina.)
Funciones:
- Movilidad
(Se originan en el CITOPLASMA y no en la pared celular.)
Apndices muy finos, rgidos y cortos. Muchas bacterias Gram(-) lo presentan. Se conocen 2
tipos de pilis:
44
de Bacillus y Pseudomonas acumulan 30 % o ms de su peso como poli hidroxibutirato.
Finalmente estn los polifosfatos, tambin conocidos como grnulos de tincin
metacromtica de Babes- Ernst o grnulos de volutina, que se encuentran en el
Corynebacterium diphtheriae, en el bacilo de la peste (Yersinia pestis), en micobacterias
(por ej: Mycobacterium tuberculosis) y otros. Los grnulos de volutina se tien de
diferentes colores, que varan del rojo al azul (es decir de forma metacromtica), con azul
de toluidina y azul de metileno.
Esporas:
Algunas bacterias son capaces de formar esporas, como las pertenecientes a los gneros
BACILLUS y CLOSTRIDIUM, la espora es una clula bacteriana en reposo rodeada de
gruesas capas resistentes al calor y agentes qumicos.
Se forma en el citoplasma bajo condiciones ambientales adversas (Esporulacin) es liberada
por destruccin de la clula original y en condiciones nutricionales favorables, puede
activarse para producir una clula bacteriana nica (Germinacin).
Por sto la formacin de esporas en las bacterias se considera un mecanismo de resistencia y
no una forma de reproduccin, ya que no aumenta el nmero de individuos.
Divisin celular.
Las bacterias se producen o multiplican por fisin binaria o biparticin. Despus del
alargamiento de la clula, se forma una membrana citoplsmica transversa y
subsiguientemente una nueva pared celular. En las bacterias, la membrana transversa y la
pared celular, crecen a partir de las capas ms externas hacia el interior, un proceso en el cual
los mesosomas del tabique se hallan ntimamente involucrados. Los ncleos cuyo nmero se
ha duplicado antes de la divisin, se distribuyen equitativamente entre las dos clulas hijas.
Aunque las bacterias carecen de un huso acromtico, la membrana transversa se forma de tal
modo, que separa a los dos cromosomas homlogos formados por replicacin cromosmica.
Esto se logra mediante la fijacin del cromosoma a la membrana celular. De acuerdo con un
modelo, la terminacin de un ciclo de replicacin de DNA desencadena aparentemente la
sntesis de membrana entre los sitios de fijacin de los dos cromosomas homlogos que son
desplazados por el crecimiento invaginante de la membrana transversa. Contina el depsito
de nuevo material celular, originando el estiramiento y el doblamiento final de la envoltura
celular.
45
Agrupaciones bacterianas.
Al permanecer unidas temporalmente las clulas despus de dividirse, pueden formar ciertos
grupos caractersticos. Dependiendo del plano de la divisin y del nmero de divisiones, a
travs de las cuales las clulas permanecen unidas, pueden ocurrir los siguientes arreglos:
Cocos:
Parejas (diplococos)
Cadenas (Estreptococos)
Racimos (Estafilococos)
Grupos de 4 clulas (Ttradas)
Grupos de 8 clulas (Sarcinas)
Bacilos:
- Parejas (Diplobacilos)
- Cadenas (Estreptobacilos)
- Hileras paralelas (Palizadas o letras chinas)
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Las clulas bacterianas al igual que las clulas de todos los organismos vivos, realizan una
serie de transformaciones qumicas, mediante reacciones enzimticas, que en su conjunto
constituyen el metabolismo celular. Las posibilidades metablicas de una clula
determinan la calidad y cantidad de nutrientes requeridos y le aseguran la capacidad para
producir trabajo (biosntesis, transporte, movimiento). El metabolismo de las clulas
est sujeto a mecanismos de regulacin que permiten una distribucin del flujo de energa
y materia que, respetando el principio de mxima economa, resulta en un aumento
ordenado de todos los componentes celulares, siendo esta la definicin de crecimiento.
Fisiologa bacteriana.
Nutricin Bacteriana:
1: Nutrientes
a) Donadores de Hidrgeno (Glucosa)
b) Aceptores de Hidrgeno (Oxgeno molecular)
c) Fuente de C
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d) Fuente de Nitrgeno (Amoniaco)
e) Minerales (S)
f) Factores de crecimiento (La clula no puede sintetizar A.A, Vitaminas, etc.)
3.- Temperatura:
- Psicroflicos (10 20 C)
- Mesoflicos (30 37 C)
- Termoflicos (40 60 C)
4.- Aereacin:
- Presin Osmtica.
- Concentracin salina.
48
En los laboratorios de microbiologa clnica y sanitaria, el personal tcnico procede a
elaborar diariamente una serie de compuestos nutritivos, los cuales tienen la finalidad de
proporcionar a los diferentes microorganismos que se investigan, una fuente de alimentos,
donde cada especie halle los nutrientes especficos de acuerdo con sus exigencias
nutricionales, de esta forma el germen dispondr de los alimentos suficientes que le
permiten desarrollarse y multiplicarse a la vez que realizan el conjunto de sus actividades
fisiolgicas habituales.
Estos nutrientes pueden ser simples o complejos y reciben el nombre de medios de
cultivo.
Lquidos (caldos)
Slidos. (se le agrega agar o gelatina en proporciones adecuadas para obtener un
material gelificado).
Semislidos. (se le agrega agar o gelatina en proporciones adecuadas para obtener un
material gelificado en menor proporcin.)
Segn su composicin.
naturales
Simples artificiales.
Sintticos.
Vivos.
Sintticos: En stos se encuentran todas las sustancias nutritivas que requieren los grupos
bacterianos. Casi siempre se suministran deshidratados, basta slo aadirle agua (cantidad
requerida). Ej: Caldo corazn, medio de Kligler, medio de Mac Conkey, SS agar, etc. En
estos medios es importante que SIEMPRE se le ajuste el Ph.
49
Selectivos: Resultan especficos para un solo tipo de germen no pudiendo desarrollarse
en ellos, ninguna de las dems especies. Ej: SS agar.
Para lograr identificar una especie bacteriana es necesario, ante todo, aislarla en un cultivo
puro que slo contenga a la progenie de una clula de dicha especie. Para ello es necesario
sembrar una porcin de la muestra sobre la superficie de un medio slido para separar a
las bacterias de modo tal, que en el sitio en que queda confinada cada una de ellas, se
desarrolla una colonia.
Colonias bacterianas.
50
como son los que se refieren a la influencia del oxgeno y la temperatura, actividades
bioqumicas; constitucin antignica de la clula (propiedades serolgicas) y
capacidad patgena.
Por otro lado y desde los tiempos de Pasteur y Koch. Conocen los bacterilogos el hecho
de que una misma especie bacteriana puede presentar desviaciones en su morfologa y
fisiologa normales. Esto podra inducir a perplejidad, porque como sabemos, la identidad
de un microorganismo se determina por comparacin de los caracteres que presenta con
los establecidos previamente para su especie.
Las plantas y los animales superiores poseen una riqueza de rasgos morfolgicos y
fisiolgicos que facilitan su clasificacin en grupos de individuos que presentan entre si un
elevado nivel de similitud fenotpica, lo que permite diferenciarlos de otros grupos.
La reproduccin sexual entre dos individuos de una poblacin, confirma la pertenencia a
una especie determinada. La simplicidad de los procariotes, impide que las reglas
taxonmicas utilizadas por los botnicos y zologos, sean aplicables en la clasificacin de
las bacterias.
No obstante si nos atenemos a estas normas son muy pocas las especies bacterianas que se
encuentran bien definidas.
Aun dentro de los individuos de una especie, se producen diferencias entre los grupos en
diferentes tipos o variedades.
CEPA: Conjunto de clulas bacterianas que tienen un origen comn, por haber sido
obtenida a partir de un cultivo puro.
51
Aquellos en que los rasgos distintivos de cada especie se arreglan en una orden tal que
permiten identificacin rpida basada en exclusiones sucesivas.
Clasificacin de Murray.
til para la prctica mdica ya que incluye a las bacterias patgenas ms frecuentes, se
basa en lo siguiente:
- Cocos
- Bacilos
- Espirilos
- Gram (+)
- Gram (-)
- BAAR
- Crecimiento en presencia o no de O2
- Aerobios
- Anaerobios
Clasificacin filogentica.
Una clasificacin filogentica agrupa a tipos que se encuentran emparentados, es decir que
tienen un ancestro comn.
Las especies originadas por evolucin divergente de un ancestro comn se agrupan en un
solo gnero.
Los gneros con un origen comn son agrupados en una sola familia.
El reconocimiento de relaciones filogenticas en los organismos superiores es ayudado
grandemente por la existencia de restos fsiles de ancestros comunes y por la multitud de
caractersticas morfolgicas que puedan estudiarse.
La carencia de fsiles de bacterias, imposibilita emplear esta clasificacin.
Clasificacin gentica.
52
Mediante tcnicas empleadas en las investigaciones de biologa molecular e ingeniera
gentica, se emplean como indicadores de identidad, la composicin de bases nitrogenadas
del ADN, siendo la relacin G/C la ms empleada.
Nomenclatura bacteriana.
Siguiendo las tradiciones taxonmicas, las bacterias se designan con nombres en latn en
que el primero escrito con mayscula designa al gnero y el segundo con minscula a la
especie:
Staphylococos aureus
Salmonella typhi
Streptococo pneumoniae
Echerichia coli
Neisseria meningitidis
Neisseria gonorrhoeae
Replicacin de cromosoma:
Las tiras complementarias se separan actuando cada una de ellas como un templete o
plantilla sobre el cual se ensambla una tira complementaria. El orden de sucesin de las
bases en la nueva tira es dictado rgidamente por las posibilidades de formacin de los
puentes de Hidrgeno donde quiera que el templete lleve adenina la nueva cadena tendr
timina y as sucesivamente. En consecuencia la replicacin, lleva a la formacin de dos
nuevas hlices y cada una identifica a la original.
El cromosoma bacteriano se replica siguiendo un orden a lo largo de su estructura
empleando en una secuencia especfica a las que se llama punto de origen o replicacin,
este punto es el que se adhiere al mesosoma de la membrana celular.
53
El cromosoma se subdivide para su funcin en segmentos cada uno de los cuales
determina el orden de sucesin de los A.A. y por tanto la estructura de una protena. Estas
protenas como enzimas, componentes de membrana y otras estructuras celulares
determinan las propiedades del organismo.
La base fsica de ambos fenmenos se encuentra en el GEN (factor gentico que controla
las propiedades de los organismos.
La sustancia qumica de los cromosomas, responsable tanto de la autoreproduccin como
de la funcin de los genes es el ADN.
Variaciones biolgicas.
Los cambios o variaciones que ocurren en las propiedades de las clulas pueden ser de dos
tipos:
54
Normalmente las mutaciones son raras, y por lo comn slo una entre millones de clulas
llega a ser una mutante.
Las mutaciones pueden ocurrir espontneamente o ser inducidas por determinados agentes
mutgenos como:
- Radiaciones
- Sustancias qumicas, etc.
En las bacterias no hay fusin real de clulas sexuales para formar un cigote como ocurre
en los organismos eucariticos. En lugar de ellos, parte del material gentico de una clula
donadora es transferido a una clula receptora. El ADN proveniente del exterior y el
material gentico de las clulas receptora se aparean y recombinan por ruptura y reunin
inmediatamente despus de la transferencia. Durante las divisiones celulares posteriores,
el cromosoma recombinante es segregado en el interior de una sola clula.
1.- TRANSFORMACIN:
Una clula receptora competente capta ADN soluble del medio, liberada por la clula
donadora.
2.- TRANSDUCCIN:
3.- CONJUGACIN:
La clula receptora capta ADN por contacto celular directo con la clula donadora.
2.- LOS FACTORES COL: Transportan genes que provocan que sus huspedes
produzcan lisinas (protenas que son toxinas letales para las bacterias coliformes).
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3.- LOS FACTORES DE RESISTENCIA: (FACTOR R) Estos transportan genes que le
confieren a la clula husped resistencia a diferentes agentes antimicrobianos, como los
antibiticos. Un slo plsmido puede transportar genes separados para la resistencia a:
- Estreptomicina
- Cloranfenicol
- Tetraciclinas
- Sulfanamidas
Las bacterias pueden hacerse resistentes a las drogas antimicrobianas por cualquiera de los
siguientes tres mecanismos genticos:
B.- Por recombinacin: Una vez que aparece una mutacin resistente a las drogas, sta
puede ser transferida a otras clulas por:
- Transformacin
- Transduccin
- Conjugacin
C.- Por adquisicin de Plsmidos: Los plsmidos pueden contener genes que le
confieren a la clula resistencia a diferentes agentes antimicrobianos.
En las bacterias Gram(-) la transferencia de factores R de una clula a otra se realiza por
conjugacin.
En las bacterias Gram (+) los plsmidos son trasportados de clulas a clulas por
transduccin.
Ingeniera gentica.
56
requerida para la particin con enzimas restrictivas, permite que los fragmentos que
contienen genes o partes de genes se unan por covalencia a plsmidos (vectores) que
ms adelante pueden ser insertados en huspedes bacterianos. Las colonias bacterianas o
clonas que contienen genes especficos, pueden ser identificados por hibridacin de DNA
o RNA, con probadores qumicos o radioqumicos. De otro modo productos protenicos
codificados por esos genes, pueden ser reconocidos por su actividad enzimtica o por
tcnicas inmunolgicas.
Estos ltimos procedimientos han mejorado en forma importante por la notable
selectividad que se logra con los anticuerpos monoclonales (anticuerpos que se forman de
una sola clona de clulas, por ejemplo, en un tumor de clulas plasmticas como el
mieloma), que se unen a determinantes antignicos especficos en los productos
protenicos. As las tcnicas de ingeniera gentica pueden usarse para aislar casi cualquier
gen con propiedades bioqumicas identificables.
Los genes aislados pueden usarse para diversos propsitos. La mutagnesis dirigida a un
sitio puede identificar y alterar la secuencia de DNA de un gen. De este modo es posible
determinar residuos de nucletidos esenciales para la funcin gentica y, si se desea,
modificarlos. Con tcnicas de hibridacin, el DNA puede utilizarse como probador que
reconoce cidos nucleicos correspondientes a la secuencia de su propio DNA. Por
ejemplo, un virus latente en tejido animal puede detectarse con un DNA probador aunque
no se observe actividad viral. Los productos protenicos de genes virales aislados, ofrecen
grandes oportunidades como vacunas debido a que pueden prepararse sin genes que
codifiquen la replicacin del cido nucleico viral. Adems, protenas como la insulina que
tienen funciones tiles, pueden obtenerse en cantidades abundantes en bacterias que
expresan los genes clonados. Por lo tanto la ingeniera gentica prev la obtencin de
protenas de gran utilidad a bajo costo, permitiendo la produccin de hormonas, interfern,
antibiticos, nutrientes, protenas, etc.
Tambin se pronostica la posibilidad de alterar el genotipo de un organismo, o con lo que
pudiera obtenerse especies de gran valor econmico.
Desgraciadamente mientras unos se empean en utilizar la ingeniera gentica para el bien
de la humanidad otros como los imperialistas, se ocupan de utilizar esta ciencia como un
arma biolgica.
Esterilizacin y desinfeccin.
El bienestar y la prosperidad del hombre dependen en gran medida de su dominio sobre las
poblaciones microbianas. Muchas prcticas de la vida cotidiana como la depuracin del
agua, la pasteurizacin de la leche o la refrigeracin de los alimentos, tienen por objeto
este importante aspecto del control de las poblaciones microbianas. Las razones
principales para la aplicacin de estos procedimientos de lucha contra los
microorganismos son:
57
La inhibicin o destruccin de los microorganismos puede conseguirse con el empleo de
agentes fsicos o de productos qumicos. Los procedimientos empleados tienen por
fundamento someter los organismos a la accin de un producto qumico que les sea nocivo
o a una condicin fsica desfavorable. Algunas de estas condiciones se limitan a inhibir el
crecimiento y la actividad metablica, mientras que otras destruyen efectivamente las
clulas. Existe una multitud de agentes que sirven para controlar las poblaciones
microbianas, pero la naturaleza de su efecto es variable, y cada uno de ellos tiene limitada
su aplicacin en la prctica.
El trmino esterilizacin implica el uso de agentes qumicos o fsicos para eliminar todos
los microorganismos viables de un material.
Para realizar la esterilizacin sobre algn objeto debemos seleccionar el mtodo ms
adecuado.
Antes de pasar a describir los mtodos de esterilizacin debemos definir algunos trminos
que usualmente se emplean en relacin con los agentes antibacterianos y que son de gran
importancia para su futuro vocabulario mdico.
BACTERICIDAS:
Agente que mata las bacterias. La accin bactericida difiere de la bacteriostasis
nicamente en que es irreversible; es decir, el microorganismo muerto no puede
reproducirse ms, an cuando sea retirado del contacto con el agente. En algunos casos el
agente causa lisis (disolucin) de las clulas; en otros casos las clulas permanecen
intactas e inclusive pueden continuar metablicamente activas.
BACTERIOSTATICOS:
Agente que inhibe la multiplicacin bacteriana. (accin reversible, o sea, se reanuda en
cuanto se retira el agente).
ESTERIL:
Libre de vida de cualquier clase. La esterilizacin puede efectuarse por filtracin (en el
caso de lquidos o aire) o por tratamiento con agentes microbicidas. Dado que el criterio
de muerte para los microorganismos es su incapacidad para reproducirse, el material
estril puede contener clulas microbianas metablicamente intactas.
SPTICO:
Caracterizado por la presencia de microorganismos perjudiciales en el tejido vivo.
ASPTICO:
Caracterizado por la ausencia de microorganismos perjudiciales (La asepsia se consigue
adoptando precauciones de esterilizacin, instrumentos esterilizados, etc.).
ANTISPTICO:
Que tienen la propiedad de matar microorganismos perjudiciales en tejidos vivos.
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DESINFECTANTE:
Tienen la propiedad de matar organismos infecciosos especialmente en superficies
inanimadas. Es demasiado txica para aplicarla directamente a los tejidos.
Los agentes antibacterianos actan de diferentes formas sobre los agentes biolgicos, as
tenemos:
d) Antagonismo qumico:
Es la interferencia de un agente qumico en la reaccin normal entre una enzima
especfica y su substrato. El antagonismo acta por combinacin con alguna parte de la
holoenzima ( ya sea con el activador mineral, con la apoenzima proteica, o con la
coenzima).
Remocin del agente: Cuando las clulas que se encuentran inhibidas por la
presencia de un agente bacteriosttico son separadas, lavadas completamente en la
centrfuga y resuspendidas en un medio de cultivo fresco, reanudan su
multiplicacin normal.
Inactivacin del agente: Los agentes a menudo son inactivados por la adicin al
medio de una sustancia que se combine con ellos impidiendo su combinacin con
59
constituyentes celulares. Por ejemplo el in mercrico puede ser inactivado por la
adicin al medio de compuestos sulfhidrlicos como el cido tiogliclico.
Proteccin contra la lisis osmtica: La lisis osmtica se puede impedir haciendo
el medio isotnico para los protoplastos bacterianos desnudos, para lo cual se
requieren concentraciones de 10 a 20 % de sacarosa; en tales condiciones los
protoplastos inducidos por la penicilina permanecen viables y continan creciendo
como formas L.
Reversibilidad por substrato: Cuando un antagonista qumico del tipo anlogo
forma un complejo disociante con la enzima, es posible desplazarlo mediante una
concentracin elevada de substrato normal; tales casos son llamados de inhibicin
competitiva. La relacin entre la concentracin del inhibidor y la concentracin
del substrato que revierte la inhibicin recibe el nombre de ndice antibacteriano, el
cual generalmente es muy alto (100 a 10,000), indicando una afinidad mucho
mayor de la enzima por su substrato normal.
Agentes fsicos.
Calor hmedo.
- Vapor libre: (nunca sobrepasa los 100C). El vapor libre se emplea algunas veces
para realizar la esterilizacin fraccionada o tindalizacin. Este mtodo consiste en
una exposicin al vapor libre durante 30' en tres das sucesivos.
1er. Da: Se eliminan todas las clulas vegetativas que haya, pero no tiene efecto sobre
las esporas. Durante todo el da se les permite germinar.
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El vapor a presin es ms caliente que el agua en ebullicin o vapor libre, cuando ms alta
es la presin del vapor, mayor es la temperatura resultante. Alcanza una temperatura de
121C = 15 de presin = 1 kg/cm2 por este mtodo se matan las esporas.
Calor seco.
(Se utiliza para esterilizar materiales que deben permanecer secos). Se utilizan
temperaturas excesivas aplicadas por largos perodos de tiempo. El calor acta
desnaturalizando las protenas, los cidos nucleicos de la clula y fragmentando las
membranas celulares.
- Flameado:
- Horno:
El horno cosiste en una cmara cerrada en la que circula aire caliente impulsado por un
ventilador a fin de lograr una esterilizacin segura mediante la carbonizacin de los
constituyentes celulares. (160oC a 170oC durante una hora o ms)
- Jeringuillas
- Placas cultivo
- Pipetas
- Instrumentos metlicos (espculos)
- Diversos polvos y aceites que no pueden esterilizarse por calor hmedo debido a su
impermeabilidad a la humedad ej: Aceite mineral.
b) Radiaciones.
- Quirfanos
- Salas hospitalarias
- Cubculos de preparacin de medios de cultivo, etc.
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- Radiaciones Ionizantes: (rayos X, gamma, catdicos, beta) (Destruyen ADN) Se
emplean en:
- Suturas quirrgicas
- Guantes
- Catteres
- Envases plsticos
a) Filtracin.
Un medio muy til de esterilizacin de lquidos que no pueden ser esterilizados por otros
medios como:
- Solucin de azucares
- Sueros, etc.
Agentes qumicos.
Los desinfectantes son letales para todo tipo de clula. Debido a su inespecificidad, no es
sorprendente que las bacterias desarrollen muy poca resistencia a estos agentes. No
obstante muchos de ellos son demasiado txicos para los tejidos y slo se emplean en
superficies y objetos inanimados.
Entre estos agentes qumicos tenemos:
- Alcoholes
- Fenol y sus derivados
- Iones de metales pesados
- Agentes oxidantes
- Detergentes
- Derivados del furano
- Colorantes
- Gases
a) Alcoholes:
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b) Fenoles:
d) Agentes oxidantes: Los agentes oxidantes fuertes inactivan a las clulas oxidando
grupos sulfhidrilos libres. Entre estos tenemos:
- Perxido de H2
- Permanganato de K
- Iodo
- Cloro
- Hipoclorito.
- Compuestos que liberan cloro lentamente (cloruro de cal)
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f) Agentes alquilantes: Numerosos agentes reaccionan como compuestos en la clula
para sustituir tomos lbiles de hidrgeno con radicales alquilo. Los dos agentes de
este tipo que se usan comnmente con fines de desinfeccin son:
64
Los cocos pigenos. Estafilococos, Estreptococos, Enterococos.
Las enfermedades infecciosas del hombre, pueden agruparse siguiendo diversos criterios,
uno de ellos sera conforme a la forma en que se transmiten o contagian con ms
frecuencia y de la puerta de entrada ms comn de los agentes patgenos en el organismo.
No obstante algunos microorganismos tienen la propiedad de afectar ms de una parte del
organismo y pueden ingresar en ste por diversas vas, siendo ste el caso de los cocos
pigenos, microorganismos que comenzaremos a estudiar en el da de hoy.
Los estafilococos.
Morfologa e identificacin:
65
sustancias qumicas (por ejemplo, penicilina), experimentan lisis o cambian a formas L,
pero NO las afectan las sales biliares NI la optoquina.
Toxinas y enzimas.
Los estafilococos pueden producir enfermedad tanto por su capacidad para multiplicarse y
extenderse con amplitud por los tejidos, como por la produccin de sustancias
extracelulares. Algunas de estas sustancias son enzimas; otras se consideran toxinas
aunque pueden funcionar como las anteriores. Muchas toxinas se encuentran bajo control
gentico de los plsmidos; Algunas estn incluso bajo control tanto cromosmico como
extracromosmico. En otros casos no se ha podido definir aun bien el mecanismo del
control gentico
- Hemolisina alfa: (es una protena heterloga que puede producir lisis de los
eritrocitos y lesionar las plaquetas y es probablemente idntica a los factores
mortales y dermonecrticos de la exotoxina. Puede tener tambin una accin muy
poderosa sobre el msculo liso vascular)
- Hemolisina beta. (degrada a la esfingomielina y es txica para muchas clases de
clulas, incluso los eritrocitos humanos).
- Hemolisina gamma
66
- Hemolisina delta.
Patogenia.
67
Los estafilococos especialmente epidermidis, forman parte de la flora normal de la piel
humana y de los sistemas respiratorio y digestivo. De 40 a 50 % de los seres humanos son
portadores nasales de S. aureus tambin se les encuentra con regularidad en el aire y en
las ropas personales, las ropas de cama y otros fmites de los ambientes humanos.
La patogenicidad de una cepa dada de estafilococo es la resultante de los factores y toxinas
extracelulares antes mencionadas, aunadas a las propiedades invasivas de la cepa.
En un extremo tenemos la intoxicacin alimentaria, atribuible a la ingestin de la
enterotoxina preformada, en el otro extremo, la bacteriemia y abscesos estafiloccicos
diseminados en todos los rganos. Es manifiesta la contribucin potencial de las diversas
sustancias extracelulares a la patogenia a causa de la naturaleza de sus acciones
individuales.
Las cepas invasoras y patgenas de S. aureus tienden a producir coagulasa, pigmento
amarillo, y a ser hemolticas. Los estafilococos no invasores y no patgenos, como S.
epidermidis, tienden a ser negativos a la coagulasa y no hemolticos. Es raro que estos
microorganismos produzcan supuracin, pero pueden infectar a las prtesis ortopdicas o
cardiovasculares. S. saprophyticus es, de manera tpica, un microorganismo no
pigmentado, resistente a la novobiocina y no hemoltico; produce infecciones de las vas
urinarias en mujeres jvenes.
Diagnstico de laboratorio.
Muestras:
68
desarrollado. La formacin de burbujas (liberacin de oxgeno), indica prueba positiva.
Esta puede realizarse tambin vertiendo solucin de perxido de hidrgeno sobre el
crecimiento en placa.
5. Prueba de la termonucleasa: (DNAasa)
6. Cultivo en telurito: (puede sustituir la coagulasa).
7. Pruebas serolgicas y de tipificacin: Se pueden identificar anticuerpos contra el
cido teicoico de las infecciones profundas prolongadas (por ejemplo, endocarditis
estafiloccica), y a veces las distinguen del cuadro de bacteriemia estafiloccica pero
tienen poco valor prctico. Son tiles los patrones de sensibilidad a los antibiticos
para investigar las infecciones por S. aureus y para determinar si los S. epidermidis de
los hemocultivos representan bacteriemia causada por la misma cepa, sembrada desde
un mismo nido de infeccin. La tipificacin por bacterifagos es til en epidemiologa
en los brotes graves de infecciones por S. aureus como podra suceder en un hospital.
Los estreptococos.
Los estreptococos son bacterias esfricas Grampositivas que forman, de modo
caracterstico, pares o cadenas durante el crecimiento. Se encuentran ampliamente
distribuidos en la naturaleza, algunos son miembros de la flora normal del hombre, en
tanto que otros estn asociados a importantes enfermedades humanas atribuibles en parte a
la infeccin por el propio microorganismo y en parte a una sensibilizacin hacia ellos.
Producen una gran variedad de sustancias y enzimas extracelulares.
Los estreptococos son un grupo heterogneo de bacterias y ningn sistema es suficiente
para clasificarlos. Veinte especies que incluyen Streptococcus pyogenes (grupo A),
Streptococcus agalactiae (grupo B), y enterococos (grupo D), se caracterizan por
combinaciones de diversas peculiaridades: caractersticas del crecimiento de la colonia,
patrones de hemlisis en agar sangre (hemlisis alfa, beta o ausencia de la misma),
composicin antignica de sustancias de la pared celular especfica de grupo y reacciones
bioqumicas. Los tipos de Streptococcus pneumoniae (neumococos) se clasifican
adicionalmente por la composicin antignica de los polisacridos capsulares.
Las enfermedades estreptoccicas y sus complicaciones supurativas o no, constituyen un
problema que afecta frecuentemente a la poblacin escolar, adolescentes y adultos
jvenes.
Universalmente se han realizado estudios en los cuales se seala que el diagnstico,
tratamiento correcto y temprano de las infecciones estreptoccicas constituyen la actividad
esencial en la prevencin de la cardiopata reumtica.
Forma e identificacin:
69
y C, poseen cpsulas compuestas de cido hialurnico. Estas estructuras son ms
fcilmente apreciables en cultivos jvenes. Impiden la fagocitosis. La pared celular del
estreptococo contiene protenas (antgenos M,T,R,), carbohidratos (especficos de
grupo) y peptidoglucano. Los pilis semejantes a vellos, sobresalen a travs de la
cpsula de los estreptococos del grupo A. Los pilis consisten en parte, de protena M y
estn cubiertos con cido lipoteicoico. Este ltimo es importante en la unin de los
estreptococos de las clulas epiteliales.
D. Variacin: Las variantes de una misma cepa de estreptococo pueden dar lugar a
colonias con diferencias morfolgicas; sto es particularmente marcado entre cepas del
grupo A, las cuales pueden dar lugar a colonias enmaraadas y a colonias lustrosas.
Las colonias enmaraadas estn formadas por microorganismos que elaboran mucha
protena M; tales microorganismos tienden a ser virulentos y a ser relativamente poco
sensibles a la fagocitosis de los leucocitos humanos. Las colonias lustrosas tienden a
producir poca protena M y a menudo son avirulentas.
Estructura antignica.
70
3. Sustancia T: Permite la diferenciacin de ciertos tipos de estreptococos por
aglutinacin con antisueros especficos. Este antgeno NO se relaciona con la
virulencia.
4. Protena R: Otro antgeno ms de superficie.
5. Nucleoprotenas: Posiblemente forme la mayora del cuerpo celular de los
estreptococos. (se les denomina tambin sustancias P)
Toxinas y enzimas.
71
Estreptolisina O con actividad hemoltica solamente cuando est reducida.
Estreptolisina S responsable de la hemlisis que se produce en las placas de agar
sangre.
Clasificacin:
72
C. Polisacridos capsulares: La especificidad antignica de los polisacridos capsulares,
se usa para clasificar S. pneumoniae en 83 tipos (American System) y para tipificar
estreptococos del grupo B (S. agalactiae).
Los estreptococos y Enterococos siguientes tienen importancia mdica. (se incluyen los
nombres de especies menos comunes para aclarar clasificaciones previas y actuales)
73
11. Peptoestreptococos. ( numerosas especies) ( Proliferan slo bajo condiciones
anaerobias o microaeroflicas y en forma variable producen hemolisinas. Son parte de
la flora normal de la boca, vas respiratorias superiores, intestino y vas genitales
femeninas. A menudo participan con muchas otras especies bacterianas en infecciones
anaerobias mixtas en abdomen, pelvis, pulmn o cerebro)
Patogenia.
- Erisipela.
- Fiebre puerperal.
- Infeccin generalizada.
- Faringitis estreptoccica.
- Pioderma estreptoccica. (Imptigo).
C. Endocarditis infecciosa
74
- Fiebre reumtica.
- Glomerulonefritis.
Diagnstico de laboratorio.
Inmunidad:
Neumococos.
Los neumococos (S pneumoniae) son diplococos Grampositivos, frecuentemente
lanceolados y agrupados en cadenas; poseen una cpsula formada por polisacridos que
permite una fcil tipificacin con antisueros especficos. Pueden ser lisados con facilidad
por agentes tensoactivos, por ejemplo las sales biliares. Probablemente los agentes
tensoactivos eliminan o inactivan a los inhibidores de las autolisinas de la pared
microbiana. Estos microorganismos son habitantes del aparato respiratorio superior del
hombre y pueden causar neumona, sinusitis, otitis, bronquitis, bacteriemia, meningitis y
otros procesos infecciosos.
Morfologa e identificacin.
75
Gramnegativos y tienden a lisarse espontneamente. La autolisis de los neumococos es
notablemente acelerada por los agentes tensoactivos.
Estructura antignica.
Patogenia.
76
La patogenicidad del microorganismo depende de sus propiedades invasivas y est
relacionada con la presencia de su cpsula, que impide la ingestin de los organismos
encapsulados por los fagocitos.
1. Anormalidades del aparato respiratorio: Otras infecciones (por ejemplo virosis) que
lesionan las clulas superficiales; acumulaciones anormales de moco (por ejemplo en
alergias, asma), lo cual protege a los neumococos de la fagocitosis; obstruccin
bronquial (por ejemplo en la atelectasia) y lesiones del aparato respiratorio debidas a
irritantes que alteran el manto mucociliar.
Los neumococos penetran por las vas respiratorias superiores a partir de las excreciones
respiratorias de personas infectadas.
77
Generalmente constituyen una infeccin de tipo endgeno, ya que los factores
predisponentes son ms importantes en la produccin de la enfermedad que la adquisicin
del microorganismo.
Diagnstico de laboratorio.
1. Frotis teidos: Los frotis hechos a partir del esputo rojo herrumbroso, teidos por la
tcnica de Gram, muestran organismos tpicos, muchos neutrfilos polimorfonucleares
y bastantes eritrocitos.
2. Pruebas de hinchazn de la cpsula: El esputo fresco emulsionado mezclado con
antisuero, da hinchamiento de las cpsulas (reaccin de hinchazn) para identificacin
de neumococos y posible tipificacin. El exudado peritoneal tambin se puede usar
para pruebas de hinchamiento de la cpsula.
3. Cultivo: El esputo se cultiva en agar sangre y se incuba en CO2.
4. Inyeccin intraperitoneal de esputo a ratones de laboratorio: Los animales
mueren en 18 a 24 horas; la sangre del corazn da un cultivo puro de neumococos.
Esta forma de cultivo para neumococos es muy sensible pero rara vez se utiliza porque
es necesario conservar una colonia de ratones.
5. La meningitis neumoccica, deber diagnosticarse mediante examen y cultivo rpido
del L.C.R.
Inmunidad.
78
Las Neisserias.
Las enfermedades infecciosas del hombre, pueden agruparse siguiendo diversos criterios,
uno de ellos sera conforme a la forma en que se transmiten o contagian con ms
frecuencia, (por ejemplo por contacto sexual) y de la puerta de entrada ms comn de los
agentes patgenos en el organismo. No obstante algunos microorganismos tienen la
propiedad de afectar ms de una parte del organismo y pueden ingresar en ste por
diversas vas, siendo ste el caso de las neisserias.
La familia Neisseriaceae incluye a las especies de Neisseria y Branhamella catarrhalis, lo
mismo que a las especies de Acinetobacter y de Kingella y Moraxella. Las Neisserias son
un grupo de cocos Gram(-) que se agrupan en parejas. Algunos son habitantes normales
del aparato respiratorio, otros, gonococo y meningococo, producen importantes patologas
humanas y su localizacin caracterstica es intracelular (dentro de los leucocitos
polimorfonucleares). Gonococos y meningococos estn estrechamente relacionados, tienen
una homologa de DNA de 70 %, y se distinguen con algunas pruebas de laboratorio y por
sus caractersticas especficas: los meningococos tienen cpsula de polisacridos en tanto
que los gonococos no, y los primeros rara vez tienen plsmidos en tanto que cuentan con
ellos la mayor parte de los gonococos. Lo que es ms importante, ambas especies se
distinguen por las presentaciones clnicas ordinarias de las enfermedades que producen: de
manera tpica los meningococos se encuentran en las vas respiratorias superiores y
producen meningitis, en tanto que los gonococos producen infecciones genitales. Sin
embargo, se sobreponen los espectros clnicos de las enfermedades producidas por
gonococos y meningococos. El estudio de las neisserias patgenas, en especial los
gonococos, ha contribuido en gran medida a los conocimientos obtenidos sobre las bases
moleculares de las enfermedades causadas por agentes patgenos de las mucosas.
Morfologa e identificacin.
79
mucoides, convexas, resplandecientes y elevadas, con un dimetro de 1 a 5 mm. Las
colonias son transparentes u opacas, no pigmentadas y no hemolticas.
- Aerobios facultativos.
- Producen indofenoloxidasa.
- Fermentan diferentes carbohidratos y producen cido pero no gas, y los patrones de
fermentacin de los mismos son un medio para distinguirlas.
- Los no patgenos (sicca, flava, catarrhalis etc), crecen en medios de cultivo simples a
temperatura ambiente.
- Los patgenos (gonorrhoeae, meningitidis), necesitan:
- Atmsfera hmeda y rica en CO2 .
- Temperatura adecuada. (35- 37C).
- Crecen mejor en medios que contienen sustancias orgnicas complejas como sangre
calentada. (agar chocolate), hemina, protenas animales.
- El crecimiento se inhibe por la accin de ciertos constituyentes txicos del medio, por
ejemplo, cidos grasos o sales.
- Mueren con rapidez a causa de la desecacin, luz, sol, calor hmedo y muchos
desinfectantes.
- Producen enzimas autolticas que dan por resultado tumefaccin y lisis rpida in vitro
a 25C y a Ph alcalino.
Neisseria gonorrhoeae.
Los gonococos fermentan slo la glucosa y difieren de otras neisserias desde el punto de
vista antignico. Suelen producir colonias ms pequeas que otras neisserias. Los
gonococos aislados de muestras clnicas o conservados por subcultivo selectivo forman
colonias pequeas tpicas que contienen bacterias con pili. En subcultivo no selectivo se
forman tambin colonias de mayor tamao que contienen gonococos sin pili.
Estructura antignica.
A Pili: Estos son los apndices en forma de vellos que se extienden hasta varias micras
desde la superficie del gonococo. Fomentan la fijacin a las clulas del husped y la
resistencia a la fagocitosis. Estn constituidos por protenas llamadas pilinas. Las
pilinas de casi todas las cepas de N. gonorrhoeae son diferentes desde el punto de vista
antignico y una sola cepa puede elaborar muchas formas distintas de estructuras
antignicas de pilina.
B Por (protena I): Se extiende por toda la membrana del gonococo. Se encuentra en
trmeros que forman poros en la superficie, por los cuales entran a las clulas algunos
nutrimentos. Cada cepa de gonococo expresa slo un tipo de Por, pero cada una de las
80
protenas de las diferentes cepas es distinta desde el punto de vista antignico. La
tipificacin serolgica de la Por mediante reacciones de aglutinacin con anticuerpos
monoclonales, ha distinguido 18 serovares del tipo porA y 28 serovares del tipo PorB.
(La serotipificacin se efecta slo en los laboratorios de referencia).
C Opa (protena II): Esta protena funciona en la adherencia de los gonococos dentro de
las colonias y para la fijacin de stos a la clula del husped. Una parte de la molcula
de Opa se encuentra en la membrana gonoccica exterior, y el resto se encuentra sobre
la superficie. Una cepa de gonococo puede expresar uno, dos, tres o ningn tipo de
Opa, aunque cada cepa tiene 10 o ms genes para Opas diferentes.
D Rmp (protena III): Esta protena est conservada en la antigenicidad de todos los
gonococos; es una protena modificable por reduccin (Rmp) y cambia su peso
molecular aparente cuando se encuentra en estado reducido. Se une con Por en la
formacin de poros en la superficie celular.
E Lipopolisacrido (LPS): En contraste con el de los bacilos Gramnegativos
intestinales, el LPS gonoccico no tiene cadenas laterales O antignicas largas y es
llamado algunas veces lipooligosacrido. Los gonococos pueden manifestar ms de
una cadena de LPS antignicamente diferente de manera simultnea. La toxicidad de
las infecciones gonoccicas se debe en gran medida a los efectos endotxicos del LPS.
F Otras protenas: Diversas protenas constantes desde el punto de vista antignico de
los gonococos tienen funciones pobremente definidas en la patogenia. La Lip (H8) es
una protena de superficie expuesta que se puede modificar con calor, al igual que la
Opa. La Fbp (protena ligada al hierro), semejante en peso molecular a la Por, se
expresa cuando es limitada la provisin de hierro, por ejemplo en caso de infeccin
humana. Los gonococos elaboran una proteasa de la IgA1 que desdobla e inactiva a la
IgA1, inmunoglobulina importante de la mucosa del ser humano. Los meningococos,
Haemophilus influenzae y neumococos, tambin elaboran una proteasa IgA1 similar.
En los gonococos han evolucionado mecanismos para cambiar con frecuencia de una
forma antignica (pilina, Opa o LPS) a otra de la misma molcula. Este cambio tiene lugar
en uno de cada 103 gonococos, tasa extremadamente rpida de cambio para bacterias.
Dado que pilina Opa y LPS son antgenos expuestos en la superficie de los gonococos,
tienen importancia en la respuesta inmunitaria a la infeccin. El rpido cambio de la
molcula de una forma antignica a otra, ayuda a los gonococos a eludir el sistema
inmunitario del husped.
El mecanismo de cambio para la pilina, que se ha estudiado con cuidado, es diferente del
mecanismo para la Opa.
Los gonococos tienen mltiples genes para codificar pilina, pero slo un gen se inserta en
el sitio de expresin, de donde los gonococos pueden remover todo o parte de este gen
para pilina y reemplazarlo por todo o parte de otro gen para esta sustancia. Este
mecanismo les permite a los gonococos, expresar muchas molculas de pilina con
estructuras antignicas diferentes en el transcurso del tiempo. El mecanismo de cambio de
Opa comprende al menos en parte, la adicin o eliminacin del DNA, de una o ms de las
repeticiones pentamricas codificadoras que proceden a la secuencia que codifica al gen
estructural de Opa. Se desconoce el mecanismo de cambio del LPS.
81
Los gonococos contienen varios plsmidos; 95 % de las cepas poseen un plsmido
criptico, pequeo de funcin desconocida. Otros dos plsmidos contienen genes que
codifican la produccin de lactamasa, que les confiere resistencia a la penicilina. Estos
plsmidos son transmisibles por conjugacin entre gonococos; tienen semejanza con un
plsmido encontrado en H. influenzae productor de penicilinasa y es posible que los
adquieran de Haemophilus u otros microorganismos Gramnegativos. Cinco o veinte por
ciento de los gonococos contienen un plsmido con genes que codifican la conjugacin; la
frecuencia es ms elevada en reas geogrficas donde son muy comunes los gonococos
productores de penicilinasa. En forma experimental en gonococos se ha desarrollado
resistencia a la tetraciclina en altas concentraciones mediante la insercin de un gen
estreptoccico que codifica para la resistencia a ese antibitico, dentro del plsmido
conjugativo.
Patogenia.
- Producen enfermedad por su propiedad invasiva, pero al parecer slo las bacterias con
pili son virulentas.
- No se desarrolla inmunidad siendo comn la reinfeccin.
- Se adquiere por contacto sexual.
- Hombre: Produce uretritis que se puede extender a prstata y epiddimo, si persiste
puede dejar una secuela como la estrechez uretral.
- Mujer: Infeccin asintomtica, a veces flujo mucopurulento y diseminacin a trompas
de Falopio (salpingitis) y torrente circulatorio (septicemia, artritis supurativa)
- En recin nacidos de madres infectadas se produce conjuntivitis purulenta (oftalma
neonatorum) que progresa a la ceguera.
- La bacteriemia gonoccica produce lesiones cutneas (en especial ppulas y pstulas
hemorrgicas) en manos, antebrazos, pies y piernas, tenosinovitis y artritis supurativa,
por lo general de tobillos, rodillas y muecas. La endocarditis gonoccica es una
infeccin poco comn pero grave. Los gonococos producen a veces meningitis e
infecciones oculares en adultos, estas infecciones tienen manifestaciones semejantes a
las producidas por los meningococos.
Diagnstico de laboratorio
1. Muestras:
- Pus.
- Sangre para hemocultivo.
- Secrecin uretral.
- Exudado Endocervical.
- Exudado conjuntival.
- Masaje prosttico.
- Mucosa rectal.
- Lquido sinovial.
82
2. Frotis: Observacin microscpica. (Diplococos arrionados Gram.(-). (Dentro de los
piocitos). Esto plantea un diagnstico presuntivo
3. Cultivo en agar chocolate y Thayer Martin: Se aprecian colonias tpicas en 18- 24
horas de incubacin.
4. Positividad a la prueba de la oxidasa.
5. Coaglutinacin.
6. Inmunofluorescencia.
7. Fermentacin de azcares.
8. Serologa: El suero y el lquido genital contienen anticuerpos IgG e IgA contra los pili,
las protenas de la membrana exterior y el LPS del gonococo. Algunas IgM de los
sueros humanos son bactericidas para los gonococos in vitro. En personas infectadas se
pueden identificar anticuerpos contra las vellosidades y las protenas de la membrana
exterior del gonococo mediante prueba de mancha inmunitaria,
radioinmunoinvestigacin y ELISA. Sin embargo, estas pruebas carecen de utilidad
como auxiliares diagnsticos por diversos motivos: la heterogenicidad antignica de
los gonococos, el retraso en el desarrollo de los anticuerpos en caso de infeccin aguda
y un gran nivel de fondo de anticuerpos en la poblacin sexualmente activa.
Neisseria meningitidis.
Estructura antignica.
83
meningoccico es el causante de muchos de los efectos txicos que ocurren en la
enfermedad que produce.
Patogenia.
El ser humano es el nico husped natural para el meningococo. Los nios y adultos
jvenes son muy susceptibles a las infecciones meningoccicas. Puede originar epidemias
en reas cerradas donde existe hacinamiento.
La va de entrada es la nasofaringe. En ella los microorganismos se fijan a las clulas
epiteliales con ayuda de las vellosidades; pueden formar parte de la flora transitoria sin
producir sntomas. Desde la nasofaringe los microorganismos pueden llegar a la sangre y
producir bacteriemia; quiz los sntomas produzcan la impresin de infeccin de las vas
respiratoria superiores. La meningococemia fulminante es ms grave, con fiebre elevada y
erupcin hemorrgica. Puede haber coagulacin intravascular diseminada y colapso
circulatorio ( sndrome de Water-house-Friderichen).
La meningitis es la complicacin ms comn de la meningococemia. Suele iniciarse de
manera sbita con cefalalgia intensa, vmitos y cuello rgido, y progresa hasta el coma en
plazo de unas cuantas horas.
Durante la meningococemia ocurre trombosis en muchos vasos sanguneos pequeos y
diversos rganos, con infiltracin perivascular y hemorragias petequiales. Puede haber
miocarditis intersticial, artritis y lesiones cutneas. En caso de meningitis, se inflaman de
manera aguda las meninges, con trombosis de los vasos sanguneos y exudacin de
leucocitos polimorfonucleares, de modo que la superficie del cerebro queda cubierta por
un exudado mucopurulento espeso.
No se sabe lo que transforma a la infeccin asintomtica de la nasofaringe en
meningococemia y meningitis, pero el fenmeno se puede prevenir mediante anticuerpos
sricos bactericidas especficos contra el serotipo infeccioso. La bacteriemia por Neisseria
meningitidis se ve favorecida por la ausencia de anticuerpos bactericidas (IgM e IgG),
inhibicin de la accin bactericida srica por un anticuerpo IgA de bloqueo, o una
deficiencia del complemento (C5, C6, C7 O C8). Los meningococos se someten
fcilmente a fagocitosis en presencia de opsonina especfica.
Diagnstico de laboratorio
1. Muestras:
- Sangre para Hemocultivo. (meningococemias).
- LCR. Para frotis y cultivo (meningoencefalitis).
- Exudado nasofarngeo (portadores).
- Puncin de petequias para frotis y cultivo.
- Suero (pruebas serolgicas).
- Gota gruesa.
84
- Gota gruesa.
3. Cultivo.
- Agar chocolate.
- Thayer Martin.
4. Prueba de la oxidasa.
5. Fermentacin de azcares.
6. Determinacin de grupos serolgicos.
7. Aglutinacin de lminas con sueros especficos.
8. Pruebas serolgicas. Determinar Acs a los polisacridos meningoccicos del paciente
mediante pruebas de aglutinacin con ltex o de hemaglutinacin o por su actividad
bactericida.
Inmunidad.
85
Los bacilos Gram (+)
Las bacterias anaerobias desempean sin duda un papel importante en muchas
enfermedades infecciosas de riesgo mortal, aunque su significacin queda aun por
determinar en algunos cuadros clnicos. Las infecciones anaerobias pueden afectar
cualquier regin anatmica del cuerpo siempre que las condiciones de los tejidos sean
apropiadas para ello. Los anaerobios participan comnmente en abscesos de cualquier
rgano (cerebro, pulmn, hgado trompas y ovarios) y la fuente de infeccin puede ser
endgena o exgena,
En tiempos pasados y antes del triunfo de la revolucin moran muchas personas por
enfermedades infecciosas, en muchos casos, las causas eran desconocidas, sin embargo, en
otras, aunque estas causas se conocieran no se tenan los recursos monetarios para pagar la
atencin medica la cual era para los privilegiados o la clase pudiente.
Los gobiernos existentes, no se preocupaban por la salud del pueblo, sin embargo, al
triunfar la revolucin, sta fue una de las primeras ramas que se empez a desarrollar, la
salud del pueblo y por el pueblo.
La medicina preventiva ha sido algo muy importante, porque lo esencial no es tener
hospitales para ingresar enfermos, sino evitar precisamente que las personas enfermen y
mueran inclusive por enfermedades muy peligrosas. As es como fue desapareciendo en
gran escala, el ttanos y la difteria entre otras enfermedades infecciosas, aunque todava
suelen verse casos espordicamente y precisamente nuestra clase de hoy va a referirse
entre otras a los agentes causales de estas enfermedades.
Caractersticas generales.
B. cereus
aerobios B. subtilis.
B. anthracis.
esporulados
Cl. botulinum.
86
Anaerobios Cl. tetani. Cl. perfringes
Cl. g. gaseosa Cl. novyi
Cl. septicum
C. diphtereae
aerobios C. vaginalis (G. vaginalis)
no esporulados Listeria
anaerobios Actinomices
Los bacilos Grampositivos formadores de esporas son las especies de los gneros Bacillus
y Clostridium. Estos bacilos son cosmopolitas y debido a que forman esporas, pueden
sobrevivir en el ambiente por muchos aos. El gnero Bacillus es aerobio, mientras que
los clostridios son anaerobios obligados.
De las numerosas especies de ambos gneros, Bacillus y Clostridium, la mayor parte no
causan enfermedad y no se han estudiado en la microbiologa mdica. Sin embargo, varias
especies, causan enfermedades importantes en el hombre. El ntrax, padecimiento
prototipo en la historia de la microbiologa, es causado por Bacillus anthracis. El ntrax
sigue siendo una enfermedad importante de los animales y en ocasiones, del hombre y
Bacillus anthracis poda ser tambin, un agente principal de guerra biolgica.
Bacillus.
Los microorganismos del gnero Bacillus son bacilos Gram (+), grandes, que se agrupan
formando cadenas, forman esporas y son aerobios.
La mayora de los miembros de este gnero son organismos saprofitos. (organismos que se
forman en las sustancias putrefactas) como Bacillus cereus y subtilis , prevaleciendo en el
suelo, el agua, el aire y sobre vegetales diversos. B. cereus puede desarrollarse en los
alimentos, produciendo una enterotoxina que provoca envenenamiento alimentario. Tales
microorganismos pueden en ocasiones producir enfermedades en personas con
alteraciones inmunitarias por ejemplo: meningitis, endocarditis, endoftalmitis,
conjuntivitis o gastroenteritis aguda. Bacillus anthracis el cual causa el ntrax, es el
principal patgeno del gnero.
Bacillus anthracis
Patogenia.
87
de esporas a los pulmones. En el hombre las excoriaciones de la piel predisponen a la
infeccin.
Las esporas germinan en los tejidos en el sitio de entrada y los bacilos se propagan por va
linftica a la sangre, multiplicndose libremente las bacterias.
En el hombre el ntrax da lugar a una infeccin de la piel que se conoce como Pstula
maligna.
Se presenta primero una ppula despus de penetrar el microorganismo o la espora. Esta
ppula rpidamente se transforma en vescula, despus en pstula y finalmente en una
ulcera necrtica a partir de la cual, la infeccin puede propagarse dando lugar a una
septicemia.
Otro tipo de ntrax (Neumona primaria), resulta de la inhalacin de esporas del polvo de
lana, cuero y pelo (enfermedad de los cargadores de lana), que es a menudo mortal.
Los Clostridios son bacilos grandes, mviles, Gram (+) anaerobios, que forman esporas,
pueden descomponer las protenas, formar toxinas o ambas cosas, Su hbitat natural es
el suelo o el intestino de los animales y el hombre, la mayora de las especies son
organismos saprofitos del suelo. Entre los patgenos se encuentran los causantes del
Botulismo, del Ttanos y de la Gangrena gaseosa.
Morfologa e identificacin.
A. Organismos tpicos: Bacilos Gram (+) grandes esporulados, las esporas son
generalmente mayores que el dimetro de los bacilos. En Cl. tetani la espora se
localiza en un polo del bacilo, dndole la apariencia de palillo de tambor, en las
diversas especies la espora se encuentra colocada ecuatorial, subterminal o terminal.
La mayora de los clostridios son mviles y poseen flagelos peritricos.
B. Cultivo: Crecen solamente en condiciones de anaerobiosis.
C. Forma de las colonias. Son variables para las diferentes especies y la mayora
producen hemlisis en gelosa sangre.
D. Caractersticas del crecimiento. La caracterstica ms importante de los bacilos
anaerobios, es su incapacidad para utilizar el oxgeno como aceptor final de hidrgeno;
carecen de citocromo y citocromooxidasa y son incapaces de destruir el perxido de
hidrgeno porque carecen de catalasa y peroxidasa. Por ello el H 2O2 tiende a
acumularse hasta alcanzar concentraciones txicas Pueden fermentar diversos
azucares; muchos digieren a las protenas. La leche es acidificada por algunos,
digerida por otros, en tanto que un tercer grupo (por ejemplo C. perfringes) provoca en
dicho medio la llamada fermentacin tormentosa, es decir, con el cogulo
disgregado por el gas. Diferentes especies producen una gran variedad de enzimas.
E. Caractersticas antignicas: Los Clostridios comparten antgenos, pero tambin
parecen poseer antgenos especficos solubles que permiten agruparlos por medio de
pruebas de precipitacin.
Clostridium botulinum.
88
Este microorganismo es de distribucin mundial, se le encuentra en el suelo y
ocasionalmente en heces de animales. Las esporas de C. botulinum, son particularmente
resistentes al calor, soportando una temperatura de 100C cuando menos durante tres a
cinco horas; esta resistencia al calor disminuye en Ph cido o en concentraciones elevadas
de sal.
Producen enfermedad por elaboracin de una potente toxina termolbil, la cual se destruye
en 1 minuto por ebullicin y en 10 minutos por calentamiento entre 75 a 85C.
Hay 8 tipos antignicos de toxina botulnica (A-H). Los tipos A, B y E son los mas
frecuentemente asociados con la enfermedad en el humano.
Las esporas de C. botulinum germinan en alimentos envasados al vaco o ahumados, en
los que existen condiciones de anaerobiosis. El Botulismo es una intoxicacin resultante
de la ingestin de alimentos en los cuales se ha desarrollado el C. botulinum y ha
producido la toxina.
La toxina acta bloqueando la produccin o liberacin de Acetilcolina en las sinapsis
y uniones neuromusculares, produciendo una parlisis flccida.
Perturbaciones visuales.
Ronquera o incapacidad para deglutir.
Parlisis bulbar.
Paro respiratorio o cardiaco y
Muerte.
Los sntomas gastrointestinales, no son regularmente prominentes; no hay fiebre. El
paciente permanece completamente consciente hasta poco antes de la muerte. La tasa de
mortalidad es elevada. Los pacientes que se recuperan no forman antitoxina en sangre.
Ocasionalmente los lactantes durante los primeros meses de la vida, desarrollan debilidad,
signos de parlisis y prueba electromiogrfica de botulismo. C. botulinum y la toxina
botulnica se hallan en las heces, pero no en el suero, se cree que C. botulinum se
desarrolla en el intestino y produce la toxina. La mayor parte de estos lactantes se
recuperan con tratamiento de sostn solamente. Sin embargo, el botulismo en los lactantes,
puede ser una de las causas del sndrome de muerte sbita neonatal. La alimentacin con
miel se ha considerado como una causa posible de botulismo infantil.
Clostridium tetani.
Patogenia.
89
Cl. tetani penetra por lesiones de piel o mucosas contaminadas con polvo o heces de
humanos y animales. En esta rea de tejido muerto (heridas, cordn umbilical, suturas
quirrgicas), las esporas germinan, las formas vegetativas se reproducen y fabrican la
toxina tetnica. Esta pasa a la circulacin sangunea y acta sobre el tejido nervioso de la
mdula espinal y de los nervios perifricos dando por resultado los espasmos musculares.
El ttanos se caracteriza por contracciones tnicas y convulsiones de los msculos
voluntarios, llegando a afectar los msculos de la mandbula (trismus) las cuales se
contraen de tal forma que el paciente no puede abrir la boca.
Estos viven en el suelo y en el intestino de los animales. Su patogenicidad esta dada por su
propiedad invasiva y elaboracin de toxinas y enzimas:
90
Diagnostico de laboratorio.
Productos patolgicos.
Examen microscpico: En los frotis teidos se pueden observar bacilos gram (+)
grandes, en ocasiones pero no siempre, esporulados. La situacin de la espora
(terminal, subterminal o central), facilita la identificacin de la especie de Clostridium.
Cultivo: En condiciones anaerobias.
Demostracin de la toxina: La identificacin final se basa en la produccin de
toxinas y su neutralizacin por la antitoxina especfica in vivo o in vitro.
Corynebacterias, Listeria y Actinomices.
Los bacilos Grampositivos que no forman esporas, son un grupo variado de bacterias.
Muchos miembros del gnero Corynebacterium y sus equivalentes anaerobios, las especies
del gnero Propionobacterium, forman parte de la flora normal de la piel y membranas
mucosas del hombre. Otras corynebacterias se encuentran en animales y plantas. C
diphtheriae, es el miembro ms importante del grupo, ya que produce una exotoxina
potente que causa la difteria humana. Listeria monocytogenes y Erysipelothrix, se
encuentran en su mayor parte en animales y en ocasiones, causan enfermedad grave en el
hombre.
C. diphthereae.
Morfologa.
Son bacilos Gram (+) en forma de palillo de tambor, dispuestos en palizadas o en forma de
letra china, no son esporulados.
Presentan distribuidos en su interior grnulos metacromticos de volutina.
Se cultivan en agar sangre telurito, donde las colonias presentan coloraciones que van del
gris al negro, debido a que el telurito es reducido intracelularmente. En el medio de suero
coagulado de Lffler, las colonias son pequeas, granulares y grisceas, con bordes
irregulares
Son aerobios estrictos. Producen cido de la glucosa, forman cistinasa y carecen de ureasa.
Para determinar la capacidad de producir toxina de un bacilo diftrico aislado se realiza
una prueba de virulencia in vitro. Consiste en cultivar el bacilo sospechoso, cerca de una
tira de papel de filtro saturado de antitoxina en un medio de cultivo especial de agar.
Despus de 48 horas de incubacin, la toxina difunde en el medio y donde se encuentra a
la antitoxina, se produce un precipitado que forma unas lneas radiales.
91
Patogenia
El C. diphteriae tiene como husped natural al hombre. Este agente se presenta de manera
natural en vas respiratorias, heridas o en la piel de personas infectadas o de portadores
normales. Se transmite por gotitas o contacto, en individuos susceptibles; luego, los
bacilos virulentos proliferan en las membranas mucosas o en abrasiones cutneas y
comienzan a producir toxina.. Su patogenicidad es el resultado de la accin de la toxina
elaborada por los microorganismos. La adquisicin de determinado fago, que se reduce a
profago, conduce a la toxigenicidad (conversin lisognica). La toxina cuando se absorbe
causa:
Listeria monocitogenes.
Bacilo Gram (+), corto, no esporulado que puede encontrarse formando parte de la flora
normal de la vagina. Crece bien en medios enriquecidos con sangre donde produce zonas
de hemlisis. En agar triptosa produce colonias verde azules, crece a temperatura de 37C
pero tambin puede crecer a 25C. Aerobio o microaeroflico,. Se distribuye mundialmente
en el hombre, animales, suelo y plantas. Al examen directo presenta una tpica disposicin
difteroide en palizadas.
La relacin causal de epidemias de listeriosis con alimento contaminado, sugiere que la
forma natural de infeccin por este microorganismo es por va gastrointestinal.
Puede producir:
92
Enfermedad diseminada (neumona, empiema y endocarditis).
Actinomices israelii.
Bacilo Gram (+), ramificado (se inclua antes entre los hongos filamentosos), anaerobio.
Forma parte de la flora indgena de la cavidad bucal y del tracto gastrointestinal, no se ha
aclarado lo que transforma el estado de portador de los microorganismos en bacterias
invasivas.
La lesin tpica consiste en un absceso con necrosis central, rodeado por tejido de
granulacin y por tejido fibroso, el pus a menudo contiene grnulos de azufre y puede
drenar hacia el exterior a travs de los fistidios. La diseminacin a sangre es rara.
La lesin inicial en la mitad de los enfermos es cervicofacial afectando:
Cara.
Cuello.
Lengua.
Mandbula.
93
Enterobacterias.
Las Enfermedades Diarreicas Agudas (EDA), constituyen un serio problema cuando se
presentan en nios. El control de las EDA, el conocimiento de sus agentes etiolgicos, el
rpido tratamiento y sobre todo las mejoras higinico sanitarias y la educacin popular
posibilitan que cada ao ocurran menos muertes por esta causa, sin embargo, en los pases
en desarrollo, las EDA como primera causa de muerte ocupan un lugar significativo, de
ah que el conocimiento de los agentes etiolgicos sea de gran importancia en el
diagnstico de la enfermedad.
Las Enterobacterias constituyen una familia de bacilos Gram (-), no esporulados,
anaerobias o aerobias facultativas, mviles merced a flagelos peritricos, que carecen de
citocromooxidasa, poseen una gran actividad metablica, fermentan una gran variedad de
carbohidratos, poseen una estructura antignica compleja, producen diversas toxinas y
otros factores de virulencia. En la actualidad se han descrito por lo menos 27 gneros y
102 especies, as como 8 grupos entricos.
Son organismos ubicuos que se encuentran en el suelo, el agua y la vegetacin. Algunas
forman parte de la flora normal del intestino del hombre y los animales, otras son
generalmente patgenas para el hombre.
Estructura antignica.
94
Las enterobacteriaceas tienen una estructura antignica compleja. Se clasifican por medio
de ms de 150 antgenos somticos O termoestables (LPS), ms de 100 antgenos K
termolbiles (capsulares) y ms de 50 antgenos H (flagelares). En Salmonella typhi los
antgenos capsulares se llaman antgenos Vi.
Toxinas y enzimas.
La mayor parte de las bacterias gramnegativas poseen LPS complejos en las paredes
celulares. Estas sustancias, endotoxinas, tienen diversos efectos fisiopatolgicos. Muchas
bacterias intestinales Gramnegativas producen tambin exotoxinas de importancia clnica.
Salmonellas
Los organismos del gnero Salmonella son bacilos Gram (-) mviles, anaerobios
facultativos, que no fermentan la lactosa, patgenos para el hombre y los animales por va
oral.
Morfologa e identificacin.
Estructura antignica
Antgeno "H" o flagelar (se inactiva por calentamiento a temperatura superior a 60C).
Antgeno "O" somtico (forma parte de a pared de la clula bacteriana (LPS), y son
resistentes al calentamiento prolongado a 100C).
95
Antgeno "Vi" o capsular (presentes en la extrema periferia de la bacteria, se destruye
por calentamiento durante 1 hora a 60C).
Los cultivos que poseen antgeno "Vi" son ms virulentos que los que no lo poseen.
Toxinas: Como en todas las bacterias Gram (-), la membrana de las Salmonellas contiene
LPS. Se liberan por lisis de las clulas y actan como endotoxinas. Ya ha sido demostrada
una enterotoxina termolbil, prcticamente idntica a la del clera.
Patogenia.
1. Las fiebres intestinales o fiebre tifoidea (S. typhi) y paratifoidea (S. paratyphi).
Penetran en los linfticos intestinales linfa sangre tejido linfoideo donde se
multiplican.
2. Septicemias.
3. Enterocolitis por irritacin violenta de las mucosas.
Shigellas
En los medios de cultivo (SS), forman colonias muy parecidas a las de Salmonella, o sea:
Redondas.
Convexas.
Transparentes.
Bordes regulares.
Forman cidos a partir de carbohidratos pero no gas (excepto newcastle y manchester).
Grupo Tipo
A (1-10)
B (1-6)
C (1-15)
D (1)
Estructura antignica.
96
Es completa, la mayora comparten los antgenos "O" con otros bacilos entricos.
Patogenia.
Dolor abdominal.
Clicos.
Diarreas.
Fiebre.
Ya que el gnero Shigella invade mucosa intestinal (leon terminal y colon) produciendo
infeccin local, necrosis, formacin de ulceras que sufren infeccin sobreaadida por otros
microorganismos entricos.
Las heces son lquidas y contienen moco y sangre. Despus de las primeras evacuaciones
se acompaan de tenesmo.
Las enfermedades producidas por Shigella dysenteriae pueden ser graves e inclusive
mortales.
Lo principal es la acidosis y deshidratacin. Shigella dysenteriae y flexneri, elaboran
enterotoxinas, neurotoxinas y citotoxinas.
Inmunidad.
Se presenta respuesta serolgica especifica de tipo (IgA que limita la reinfeccin pero
puede producirse).
Echerichia coli.
97
estndar de invasividad determina la capacidad del microorganismo de producir
queratoconjuntivitis en los ojos de los cobayos (Prueba de Sreny).
Ya se conocen otras dos cepas de E. coli que tambin pueden producir cuadros diarreicos,
ECEH la cual puede producir verdaderos cuadros de diarrea con sangre e inclusive llegar a
producir el sndrome hemoltico urmico y la ECEA.
ECEP.
Guardan relacin con diarrea estival de los lactantes, brotes de diarrea en salas de cuna
y las epidemias de diarrea infantil en diversas comunidades.
ECEI.
ECEH.
98
Se identific en 1982 cuando surgi un brote de colitis hemorrgica en los Estados Unidos
y se demostr que haba sido causado por un serotipo especfico de E.coli O 157: H 7.
tambin causa el Sndrome hemoltico urmico y la Prpura trombocitopnica trombtica.
ECET
99
ECEA
Vibrionaceas y Pseudomonas.
El clera constituye una enfermedad infecciosa que parece haber tenido su origen en los
deltas de los ros Ganges y Brahmaputra en Bangladesh.
Aunque en el sudeste de Asia se ha mantenido endemo epidmica, ha ocasionado distintas
pandemias desde la primera mitad del siglo XIX, constituyendo la actual, la sptima,
iniciada en 1961 en las islas Clebes, lo que ha tenido una amplia difusin al afectar
alrededor de 98 pases con un comportamiento un tanto impredecible.
Sus consecuencias en la salud se traducen por su contagiosidad, severidad y mortalidad si
no se toman las medidas de control adecuadas. Por otra parte sus repercusiones
econmicas, se expresan en los gastos de la atencin medica de enfermos, afectacin
salarial y laboral, as como su influencia sobre el comercio, turismo y otros.
La experiencia acumulada hasta el presente ha demostrado que es imposible evitar la
introduccin del clera en un pas, sin embargo, s es posible contener su propagacin con
un fuerte sistema de vigilancia epidemiolgica, as como medidas de prevencin
adecuadas.
100
Son resistentes a las condiciones alcalinas (crecen bien a Ph entre 8,5 y 9,5).
Crecen bien en 6 % de Cloruro de sodio.
Patogenia.
Inmunidad.
101
Diagnstico de laboratorio.
Productos patolgicos.
Heces fecales.
Vmitos.
Examen microscpico.
Cultivo.
Pruebas bioqumicas.
- Oxidasa.
- Catalasa.
- Cuerda.
- Fermentacin de azucares.
- Formacin de Indol.
- Capacidad de reducir nitratos a nitritos.
Serologa.
Aeromonas.
102
No esporulado.
Produce la enzima catalasa.
Aeromona hydrphila es la especie ms importante que causa enfermedad en el
hombre.
Produce hemlisis en agar sangre.
Predomina en agua dulce y en ocasiones en animales de sangre fra (reptiles,
anfibios, peces).
Produce diarreas e infecciones extraintestinales.
No crecen en 6% de Cloruro de sodio (lo que lo diferencia del V. clera)
Plesiomonas.
Pseudomona aeruginosa.
El genero Pseudomona est compuesto por bacilos Gram (-), mviles que difunden a
travs del medio. Se encuentran ampliamente distribuidos en el suelo, el agua, las aguas
negras y el aire y es frecuente descubrirla en los ambientes hmedos hospitalarios. Puede
colonizar al ser humano normal, en el cual es un microorganismo saprfito.
Se presenta frecuentemente en pequea proporcin en la flora intestinal normal. Otras
especies de Pseudomonas ocurren en el medio pero rara vez producen enfermedades.
Crece con facilidad en los medios de cultivo, no fermenta la lactosa y forma colonias lisas
de color verdoso fluorescente y de olor aromtico "dulzn". De las colonias difunde un
pigmento verde azul hacia el medio. Algunas cepas tienen actividad hemoltica.
Es patgena slo cuando es introducida en zonas que carecen de las defensas normales y
produce enfermedad. Es muy resistente a los antibiticos. Presentan una gran
susceptibilidad a las infecciones por este microorganismo, los lactantes y prematuros,
pacientes quemados y los que han sufrido intervenciones quirrgicas o diagnsticas.
Causa infecciones de heridas donde originan un pus verde azuloso, de ah su nombre
comn (bacilo piocinico), causa tambin meningitis, septicemias infecciones urinarias
neumonas, otitis y conjuntivitis.
RESUMIENDO:
103
Mvil (presenta flagelo polar).
Se encuentra de manera aislada en parejas y ocasionalmente, en cadenas cortas.
AEROBIO obligado.
Crece con facilidad en diversos medios de cultivos.
Produce en ocasiones un olor dulzn o de uvas.
Algunas cepas producen hemlisis en gelosa sangre.
Crece bien a una temperatura que oscila entre 37 a 42C (su crecimiento a 42C
ayuda a ditinguirla de otras especies de Pseudomona).
Produce citocromooxidasa (oxidasa +).
Diagnstico de laboratorio.
Productos patolgicos.
- Pus.
- LCR.
- Sangre.
- Orina.
- Esputo.
- Secreciones conjuntivales.
Examen microscpico.
Cultivo.
Pruebas bioqumicas.
- Produccin de pigmentos.
- Prueba de oxidasa.
- Crecimiento a 42C.
- Motilidad.
- Reduccin de nitratos a nitritos.
104
Determinacin de Piocianotipos.
Proteus.
Los organismos del grupo Proteus crecen en medios de cultivo simples, donde sus
colonias tienden a extenderse o diseminarse por la superficie (spread). Hidrolizan
rpidamente la urea.
Especies:
P. mirabilis.
P. vulgaris.
M. morganii.
P. rettgeri.
Patogenia.
Productos patolgicos.
- Orina.
- Sangre.
- Pus.
- etc.
Examen microscpico.
Cultivo.
Las muestras pueden sembrarse en agar nutriente o en agar sangre donde sus colonias
forman spread.
En el medio diferencial de Mc Conkey produce colonias blancas o incoloras, ya que no
ataca la lactosa. Son mviles.
105
Pruebas bioqumicas. Se determina:
- Fermentacin de azucares.
- Hidrlisis de la urea.
- Produccin de indol.
- Produccin de sulfidrico.
- Crecimiento en citrato.
Yersinia.
Hasta hace poco ha surgido como una causa comn de enteritis aguda. Puede aislarse de
heces en cultivos microaeroflicos incubados a 42C en un medio que contenga
Vancomicina, Polimixina B y Trimetropin.
El perodo de incubacin es de 2-10 das. No produce vmitos pero s diarreas y fiebre.
El microorganismo crece en yeyuno e leon.
106
Los bacilos gram(-) pequeos.
Las brucellas
1. Son riesgos inherentes a la profesin o actividad de las personas que estn en estrecho
contacto con animales o con sus productos, por ejemplo: veterinarios, ganaderos y
carniceros.
2. Rara vez se transmiten de persona a persona.
3. Las manifestaciones clnicas son anlogas.
107
Las brucellas son pequeos cocobacilos Gram (-), aerobios, inmviles, no esporulados y
con relativa inactividad metablica. Son parsitos obligados de los animales y del hombre,
siendo caracterstica su localizacin intracelular. Presentan, adems, cpsula.
Se conocen diferentes especies de Brucellas entre ellas tenemos:
Forma e identificacin:
A. Organismos tpicos: El aspecto en cultivos jvenes vara desde cocos a bacilos de 1,2
m. de largo, predominando las formas cocobacilares cortas. Los organismos son
Gram (-) pero a menudo se tien irregularmente. Puede demostrarse la presencia de
cpsula en las variantes lisas y mucoides. Estos organismos son inmviles y no
esporulados.
B. Cultivo: En medios enriquecidos, aparecen colonias pequeas, convexas y lisas a los 2
a 5 das.
C. Caractersticas del crecimiento: Las brucellas estn adaptadas a un hbitat
intracelular y sus requerimientos nutritivos son complejos. Algunas cepas han sido
cultivadas en medios sintticos compuestos por 18 aminocidos, vitaminas, sales y
glucosa. Los productos patolgicos recientemente obtenidos de fuentes animales o
humanas se inoculan generalmente en agar soya tripticasa. Br. abortus requiere 5- 10
% de CO2 para su crecimiento. Las dems especies crecen bien sin CO 2. Las brucellas
utilizan diversos carbohidratos, pero no producen cido ni gas en cantidades
suficientes como para aprovechar estas pruebas en su clasificacin. Algunas cepas
producen catalasa y oxidasa. Muchas cepas producen cido sulfidrico, los nitratos son
reducidos a nitritos. Son moderadamente sensibles al calor y a los cidos. Mueren
en la leche durante la pasteurizacin.
Patogenia.
108
Las brucellas producen la brucellosis (fiebre ondulante, fiebre de Malta), enfermedad
febril caracterizada por una fase septicmica aguda con formacin de ndulos
granulomatosos en rganos parenquimatosos (ganglios, hgado, bazo, medula sea, etc),
seguida por un estadio crnico que puede prolongarse muchos aos y llegar a afectar
diversos tejidos con formacin de abscesos (osteomielitis, meningitis, colecistitis, etc).
Diagnstico de laboratorio.
Muestras:
Cultivo:
En medios enriquecidos:
Caldo Soya Tripticasa.
Agar Soya Tripticasa.
Medio difsico de Castaeda.
(Se incuba en 10 % de CO2.).
Los haemophilus.
Es un grupo de bacilos gram (-) pequeos, que necesitan medios de cultivo enriquecidos
generalmente con sangre para su aislamiento.
Algunos forman parte de la flora microbiana normal del hombre, otros Haemophillus
influenzae son causantes de enfermedades humanas.
Haemophilus influenzae.
Se encuentra en las mucosas de las vas respiratorias del hombre. Es una causa importante
de meningitis en nios y en ocasiones produce infecciones de las vas respiratorias en
nios y adultos.
109
Estructura antignica:
Poseen polisacridos capsulares que permiten determinar 6 tipos (A- F) por prueba de
hinchazn de la cpsula (prueba de Neufeld) frente al antisuero especfico.
Patogenia:
Diagnstico de laboratorio.
Productos patolgicos:
LCR.
Pus.
Sangre.
Esputo.
Etc.
Cultivo:
Requerimientos nutricionales:
110
se encuentran de la colonia de estafilococo, indica que requieren factor V, ya que los
estafilococos liberan abundantemente dicho factor en el medio.
Bordetella pertussis.
Se cultiva en el medio especial de Bordet Gengou (agar- papa- sangre- glicerol), donde
forman colonias pequeas, lisas, convexas, con un lustre perlado en 36 a 72 horas. Dichas
colonias pueden estar rodeadas por un estrecho halo de hemlisis.
La B. pertussis vive en el hombre. Los microorganismos encapsulados son violentos y por
desintegracin liberan una endotoxina que interviene en la produccin de lesiones. Penetra
por la va respiratoria a partir de pacientes. Causa la tosferina. La mayora de los casos de
enfermedad ocurren en nios pequeos. Los microorganismos se adhieren y multiplican en
el epitelio superficial de la trquea y los bronquios, donde interfiere en el movimiento
ciliar. No invade la sangre. La endotoxina irrita las clulas superficiales y crea sntomas
catarrales (tos paroxstica y linfocitosis).
Legionella pneumophila.
Es la bacteria causal del brote epidmico (que ha recibido tanta publicidad) de una
enfermedad respiratoria que atac a las personas que asistieron a una convencin de
legionarios estadounidenses en Filadelfia en 1976, se han diagnosticado
retrospectivamente otros brotes que ocurrieron en 1965 o antes y en todo el mundo. Desde
1947 han aparecido infecciones espordicas con sntomas o sin ellos.
Las legionellas se tien mal, aparentemente es Gram (-) y se aslan con frecuencia de
biopsia de pulmn pero rara vez de liquido pleural, sangre o esputo.
La infeccin NO se contrae por el contacto con los pacientes enfermos, sino que se
requiere del ambiente por aspiracin de aerosoles o polvo asociados o con excavaciones
del suelo.
Hay cuando menos 4 tipos antignicos.
La infeccin asintomtica puede ser comn y se descubre slo por la elevacin de los Acs
especficos. La enfermedad clnica puede manifestarse por la aparicin brusca de fiebre
alta, escalofros, malestar, tos seca, hipoxia, diarrea y postracin o delirio. El Rx de trax
revela consolidacin a menudo multilobar irregular. Puede haber leucocitosis,
hiponatremia, hematuria y pruebas de funcionamiento heptico anormales. Durante las
epidemias, las tasas de mortalidad han sido entre el 10 y el 20 %.
El diagnstico puede basarse en un notable incremento en el titulo de Acs sricos a los
Ags de la legionella lo cual se descubre por IF o por tincin inmunofluorescente del
microorganismo en el tipo pulmonar obtenido por biopsia o en la necropsia. El diagnstico
rara vez se hace por el crecimiento del microorganismo a partir de especmenes obtenidos
en vida.
111
La legionella es susceptible in vitro a diferentes medicamentos antimcrobianos. La
eritromicina (500 mg) por va EV cada 6 horas ha sido eficaz en el tratamiento de la
infeccin humana as como de la enfermedad experimental en los cobayos.
Bacteroides.
Es un gran grupo de anaerobios estrictos, no esporulados, formado por bacterias Gram (-)
que son muy pleomrficas.
Crecen en forma rpida en medios de cultivo complejos.
Los polisacridos capsulares, parecen ser factores de virulencia importantes.
Son habitantes normales de la parte alta del sistema respiratorio, sistema genital y sistema
digestivo. Constituyen mas del 95 % de la flora fecal normal. Las especies mas
frecuentemente encontradas son:
Pulmn.
Encfalo.
Peritoneo.
Pelvis.
Lesiones ulcerativas de piel y mucosas.
Treponema pallidum:
112
An cuando antes de 1905, algunos investigadores haban observado el Treponema, fueron
en el ao sealado Schaudinn y Hoffman, quienes comunicaron con toda certeza su
hallazgo.
Si bien existen evidencias de haberse padecido la enfermedad desde tiempos
inmemoriales, adquiere carcter epidmico y pandmico desde el descubrimiento de
Amrica. La contrajo la tripulacin de Coln desde el primer viaje, difundindose
rpidamente por toda Europa.
La palabra Sfilis proviene del nombre de un pastor llamado Sfilo, quien contrajo la
enfermedad como castigo de los dioses.
Morfologa e identificacin:
113
Patogenia.
- Aborto.
- Otros nacen muertos.
114
Unos cuantos nacen vivos pero desarrollan los signos de Sfilis congnita durante la
infancia como:
- Queratitis intersticial.
- Dientes de Hutchinson.
- Nariz en silla de montar.
- Tibia en sable. (periostitis)
- Y otras anomalas del SNC.
Diagnstico de laboratorio.
A Productos patolgicos:
Inmunidad.
Un individuo con sfilis activa o pian, parece ser resistente a una superinfeccin por T.
pallidum. Sin embargo, si la sfilis temprana o el pian, son tratados prontamente y en
115
forma adecuada, la infeccin es erradicada y el individuo se hace otra vez completamente
susceptible. Las diversas respuestas inmunitarias por lo general no erradican la infeccin
ni detienen su progreso.
Leptospiras.
Morfologa e identificacin.
Patogenia.
Las leptospiras tienen como hbitat natural a los animales (roedores, cerdo, ganado, etc).
La infeccin humana es el resultado de la ingestin de agua o alimentos contaminados con
orina y/o heces de animales infectados por el microorganismo, menos frecuentemente los
organismos pueden penetrar por piel o mucosas. Despus de un perodo de incubacin de
una a dos semanas, se presenta una iniciacin febril variable durante las cuales las
espiroquetas se encuentran en la circulacin sangunea. El microorganismo se establece
entonces en los rganos parenquimatosos (hgado, rin, etc), produciendo hemorragias y
necrosis que se manifiestan por: ictericia, insuficiencia renal, sangramiento y anemia. El
padecimiento a menudo es bifsico. Despus de una mejora inicial, se desarrolla la
segunda fase cuando sube el ttulo de anticuerpos IgM. Se manifiesta con frecuencia como
una meningitis asptica, con cefalea intensa, rigidez del cuello y pleocitosis en el LCR.
La hepatitis y la nefritis tambin pueden recurrir y es posible que haya lesiones en piel,
msculos y ojo. El grado y distribucin de la invasin de rganos varan en los diferentes
padecimientos producidos por distintas leptospiras en las diversas partes del mundo.
Muchas infecciones son leves o subclnicas. En los individuos con leptospirosis, es
particularmente frecuente, la hepatitis. La orina del hombre puede contener espiroquetas
en la segunda y tercera semana de la enfermedad.
116
Inmunidad.
Despus de la infeccin sigue una inmunidad slida especfica del serovar, pero pueden
producirse reinfecciones con serovares diferentes.
Diagnstico de laboratorio.
A Productos patolgicos.
B Observacin microscpica.
- Sangre.
- Orina.
El examen microscpico al campo oscuro o frotis gruesos teidos con Giemsa, muestran
ocasionalmente leptospiras en sangre recin obtenida de enfermos con infeccin temprana.
El examen de orina en campo oscuro sometida a centrifugacin puede ser positivo.
C Cultivo. Los medios de cultivo para aislamiento de leptospiras deben contener suero
de conejo al 10 % (son lquidos o semislidos). El crecimiento es lento y es necesario
conservar los cultivos varias semanas.
Chlamydias.
117
Se dividen en 2 especies: trachomatis y psitacii, sobre la base de:
Su composicin antignica,
Inclusiones intracelulares sensibles a las sulfonamidas y
Produccin de enfermedad.
Al principio eran consideradas como virus por su parasitismo intracelular, sin embargo, se
diferencian en varias caractersticas:
Las Chlamydias pueden considerarse bacterias Gram (-) que carecen de algunos
mecanismos para la produccin de energa metablica y no pueden sintetizar ATP. Este
defecto las obliga a una existencia intracelular, donde la clula husped proporciona los
intermediarios ricos en energa.
- Adherencia.
- Penetracin.
- Transformacin del cuerpo inicial y formacin de cuerpos elementales hijos.
118
de la clula husped para infectar a otras clulas. El ciclo de desarrollo requiere de 24 a 48
horas.
- Tracoma: Infeccin ocular que sigue un curso crnico y evoluciona hacia la ceguera.
Se conoce desde la antigedad. Fue bien descrita en el papiro de Ebers, el cual se
escribi en Egipto hace 3,800 aos. Es una queratoconjuntivitis crnica que comienza
con cambios inflamatorios agudos en la conjuntiva y en la crnea y que progresa hasta
producir fibrosis y ceguera.
Mycoplasma.
Se trata de clulas muy pequeas que carecen de pared celular estando limitadas solamente
por una membrana citoplasmtica, lo que las hace adoptar formas dismiles (esfricas,
piriformes, filamentosas). La especie ms importante para la medicina es el Mycoplasma
pneumoniae, que provoca una infeccin respiratoria conocida como Neumona atpica
primaria.
Rickettsias.
Pequeos cocobacilos pleomrficos que se tien mal con el colorante de Gram pero
pueden observarse al microscopio coloreados por tcnicas especiales. Las clulas tienen
todas las estructuras de las bacterias Gram (-) pero son parsitos intracelulares.
Las Rickettsias son parsitos naturales de los artrpodos pudiendo afectar a los animales
superiores y al hombre, produciendo el tifus epidmico y diversas reacciones febriles.
119
Flora normal del cuerpo humano.
Un nmero indeterminado de microorganismos suelen hallarse en forma transitoria o
permanente en diferentes zonas anatmicas del cuerpo humano, tanto en reas externas
(piel, mucosas, etc), como en reas internas (faringe, intestino, vagina, etc), sin que esto
signifique necesariamente que estn produciendo a esos niveles cuadros infecciosos.
Estos microorganismos son considerados como miembros de la flora microbiana normal.
El trmino flora microbiana normal se refiere a la poblacin de microorganismos que
residen en piel y membranas mucosas de personas normales sanas. Es dudoso si existe una
flora viral normal en el hombre.
La piel y las mucosas hospedan siempre a una gran variedad de microorganismos, los cuales
pueden ser divididos en 2 tipos:
120
- Flora residente.
- Flora transitoria.
Los microorganismos que estn siempre presentes en la superficie del cuerpo son
comensales. Su presencia no es esencial para la vida ya que se pueden criar animales libres
de grmenes que carecen completamente de una flora microbiana normal.
Sin embargo la flora residente de algunos sitios desempea un papel definido en el
mantenimiento de la salud y de las funciones normales.
Algunos miembros residentes de la flora intestinal sintetizan vitamina K y ayudan a la
absorcin de los nutrientes.
En las mucosas y la piel, la flora residente normal, puede prevenir su colonizacin por
bacterias patgenas y finalmente la produccin de enfermedad mediante el proceso de
interferencia microbiana.
Por otro lado los miembros de la flora normal pueden por si mismos causar enfermedades
bajo ciertas condiciones. Ej:
- Cndida albicans.
- Enterobacterias.
- Estreptococo viridans.
Estos microorganismos por estas razones se les denomina oportunistas.
121
- Estreptococos alfa hemolticos (viridans).
- Estreptococos faecalis (enterococos).
- Bacilos coliformes Gram (-).
- Acinetobacter.
- A veces hongos y levaduras en los pliegues de la piel.
- Algunas mycobacterias cido resistentes no patgenas en reas ricas en secreciones
sebceas como: genitales externos, odo externo, etc.
En el momento del nacimiento son estriles aunque pueden contaminarse a su paso por el
canal vaginal.
- Estreptococo viridans.
- Espiroquetas anaerobias.
- Bacteroides.
- Fusobacterias.
- Vibriones anaerobios.
- Lactobacilos.
En el adulto:
- Actinomicetos (amgdalas).
- Levaduras (boca).
122
- Bacteroides.
Fosas nasales.
- Corynebacterias.
- Estafilococos (aureus y epidermidis).
- Estreptococos.
En nios amamantados:
- Estreptococos lcticos.
- Lactobacilos.
Despus de la ablactacin:
- Coliformes.
- Cndida albicans, etc.
La porcin anterior de la uretra de ambos sexos contiene un nmero pequeo de los mismos
tipos de organismos hallados en la piel y el perin.
Al nacer:
Pubertad:
Menopausia:
- Clostridios.
123
- Estreptococos anaerobios.
- Estreptococos hemolticos del grupo B.
- Bacterias coliformes.
- Cndidas s/p.
No se considera nosocomial:
124
2. La infeccin en un nio que se sepa o se demuestre que ha sido adquirida por va
transplacentaria (herpes simple, toxoplasmosis, rubeola, citomegalovirus y sfilis) y
que comienza precozmente tras el nacimiento.
Antecedentes histricos:
El problema de las IIH se hizo patente desde el comienzo de los hospitales como
instituciones de caridad, en el ao 325 d.n.e., pero su presencia ligada a la ciruga es tan
antigua como las intervenciones quirrgicas de trepanacin de crneo, reducciones de
fracturas y otras, practicadas por el hombre desde hace 3000 aos a.n.e.
La historia de la medicina tiene destacadas presencias, que dedicaron su quehacer al
conocimiento y prevencin de las IN, ejemplos son Semmelweis (1818-1865), toclogo
hngaro, que fue el primero en exigir el lavado escrupuloso de las manos y uso del agua
clorada, para evitar las infecciones en su servicio de Maternidad; Louis Pasteur (1822-
1895) que estudi el proceso de fermentacin en la cerveza y los vinos y demostr que se
deba a los microorganismos procedentes del ambiente y de manera muy avanzada para su
poca, plante que la causa de la putrefaccin en el tejido animal se deba a la presencia de
estos mismos grmenes; Jos Lister (1827-1912) eminente cirujano ingls que public el
estudio El principio antisptico en la prctica quirrgica y Roberto Koch (1843-1910)
bacterilogo alemn, que demostr que las bacterias constituan un agente causal de
infecciones y public en 1877 La causa de infeccin en las heridas.
El conocimiento del problema mediante estudios aislados, se inicia ms recientemente, en
la dcada de los 50, con los estudios de focos de infeccin en los hospitales, por
investigadores de Inglaterra, Escocia, y del CDC de Atlanta. Posteriormente, en los aos
60 se llevan a cabo estudios ms sistemticos y organizados y es en la dcada de los 70 en
que surgen en muchas partes del mundo Programas de Vigilancia y Control de las
Infecciones Nosocomiales.
En Cuba, los precursores de la antisepsia fueron los doctores Raymundo Menocal y
Gabriel Casuso, cirujanos que a finales del siglo XIX implantaron en el pas, las tcnicas
descritas por Lister.
En pocas ms recientes se fueron dando pasos que nos permitieron estar a la altura del
desarrollo internacional, y as podemos mencionar las investigaciones realizadas en las
dcadas de los aos 60 -70, donde se logra el conocimiento de la incidencia de la IIH en
Institutos y Hospitales del pas.
125
En 1968 se crea el primer Comit de Prevencin de la Infeccin Hospitalaria en el
Hospital Clnico Quirrgico Enrique Cabrera , que ya en el 1970, el Ministerio de Salud
Pblica, hace extensivo a todos los hospitales del pas.
En el ao 1974-1975, en la Ciudad de la Habana, se estructura la funcin de la Enfermera
de Vigilancia Epidemiolgica, que pas a constituir uno de los pilares ms importantes en
este campo.
En 1983 se aprueba el Programa de Prevencin y Control de las Infecciones
Hospitalarias, que se aplic con carcter nacional y se cre por resolucin ministerial, un
grupo de expertos llamado, Grupo Nacional para la Prevencin y Control de la Infeccin
Hospitalaria. En 1984 se publica el Reglamento y Normas Nacionales para la
Prevencin y Control de la Infeccin Hospitalaria. Estos documentos que constituyen
instrumentos de trabajo, han sido actualizados peridicamente.
126
Entre los mtodos de eficacia demostrada destaca la esterilizacin, el lavado de manos, el
sistema cerrado de recogida de orina, los cuidados del catter endovenoso, algunos tipos
de profilaxis antimicrobiana perioperatoria y la utilizacin restringida de equipos de
terapia respiratoria.
Los mtodos cuya eficacia es dudosa, aunque pueden ser tiles en la clnica son, el
aislamiento de los enfermos y la educacin y concienciacin del personal de los
hospitales.
Entre las actuaciones de ineficacia probada incluyen procedimientos tan difundidos como
la desinfeccin de suelos, paredes y superficies, la nebulizacin ambiental con
desinfectantes, el uso de rayos ultravioletas, el flujo laminar, la quimioprofilaxis en ciruga
limpia, el uso de filtros en sueros endovenosos y el muestreo microbiolgico ambiental.
Existe consenso en sealar el gasto econmico improcedente debido al empleo de estas
medidas ineficaces y muy costosas.
Entre los procederes microbiolgicos, tanto el muestreo ambiental, como otros estudios
microbianos, deben ser empleados cuando permitan comprobar las sospechas clnicas y
apoyar el pensamiento epidemiolgico y nunca deben ser utilizados de manera
indiscriminada y mucho menos para demostrar deficiencias higinicas, realizndose el
estudio slo de aquellas muestras que sean importantes para las actividades de vigilancia y
control, ya que de otro modo, lo nico que se logra es atiborrar los laboratorios de trabajo,
con resultados a los cules no se les puede dar una posterior interpretacin.
Un ejemplo tpico de falsear la informacin de los resultados microbiolgicos es lo que
ocurre en la vigilancia epidemiolgica de la resistencia de las bacterias a los
antimicrobianos, cuando cepas bacterianas de una misma especie y con el mismo
antibiotipo, resultan aisladas repetidamente de una misma fuente, y el reconocimiento de
la repeticin del dato, con fines de descartarlo en los informes de carcter epidemiolgico,
se hace un problema difcil a resolver en la prctica, a menos que se haya contemplado en
el proceso de informatizacin del laboratorio.
127
B. Las fuentes y vehculos de infeccin son:
El contacto directo.
La va area.
La va oral.
La va parenteral.
Conociendo las mltiples causas que estn presentes en la posibilidad de adquirir una
infeccin hospitalaria, y las diversas localizaciones en que se puede manifestar sta, se ha
propuesto el establecimiento de un programa por objetivos de lucha contra la infeccin,
donde la vigilancia, tanto epidemiolgica, como microbiolgica se ejerce sobre los riesgos
especficos y as tenemos la vigilancia sobre pacientes sometidos a los riesgos de la
ventilacin asistida, de cateterismos endovenos, sonda vesical, o a los mtodos diliticos,
por mencionar algunos de los ms frecuentes.
Los microorganismos que con ms frecuencia causan IIH y a su vez los ms estudiados
son bacterias del tipo de las E. coli, P. aeruginosa, Enterococcus spp, S. aureus,
estafilococos coagulasa negativa y Enterobacter spp. Se han reportado tambin bacterias
anaerobias, Legionella spp y agentes micticos, virales y parasitarios. Dentro de los
hongos la Candida albicans es la especie ms encontrada, otras especies de Candida , los
Aspergillus spp, la Torulopsis y otros hongos son aislados con menos frecuencia.
La etiologa viral de una infeccin nosocomial, aunque sospechada, es pocas veces
confirmada, fundamentalmente por la dificultad que implica el realizar estos diagnsticos
etiolgicos.
Las infeciones nosocomiales virales se localizan con mayor frecuencia en el tractus
respiratorio y el gastro intestinal, son producidas por agentes virales como el Virus
Sincitial Respiratorio, Citomegalovirus, Virus del Herpes Simple y Rotavirus.
El riesgo de adquirir una infeccin nosocomial por rubeola, sarampin y varicela, es alto
entre los trabajadores de la salud susceptibles o no inmunizados Tambin la hepatitis viral
puede ser adquirida, por contacto con sangre positiva a antgenos de la hepatitis de
pacientes y de donantes y aunque reducido, no podemos olvidar el riesgo tanto para
trabajadores como para pacientes, de la adquisicin del Virus del SIDA.
128
Las IIH producidas por parsitos son relativamente pocas en comparacin con los otros
agentes microbianos, y la mayora de las veces han sido estudiados por causar infecciones
en pacientes con SIDA, dentro de estos tenemos al Pneumocystis carinii, el Toxoplasma
gondii, y el Cryptosporidium spp.
129
ser utilizados con objetivos epidemiolgicos bien definidos y nunca de manera
indiscriminada.
1.- Pacientes
2.- Personal
130
determinadas situaciones, el aislamiento repetido de la misma cepa de estafilococos de las
manos, en ausencia de un portador nasal, puede indicar que el sujeto es un portador
perianal.
El aislamiento de microorganismos de la superficie del cuerpo o de una secrecin, no
necesariamente indica que sea un microorganismo establecido en ese sitio, puede ser un
contaminante de una fuente externa o de otro sitio de la misma persona. La significacin
de un hallazgo particular puede, dependiendo del sitio de la muestra y del nmero de
microorganismos presentes, estar en relacin con la reiteracin del aislamiento y an as,
las interpretaciones no son siempre fcilmente realizadas.
Las actividades mdicas implican riesgos reconocidos para adquirir hepatitis viral, SIDA y
tuberculosis. La influenza, enfermedades por meningococos, sarampin, varicela, herpes
simple, rotavirus, rubeola y patgenos intestinales, pueden tambin ser un problema en
circunstancias particulares. Las medidas higienico sanitarias, sean las habituales o las
descritas como Precauciones Estndar, disminuirn de manera importante los riesgos de
adquirirlas y es ms importante el uso del servicio de salud de los trabajadores, para
detectar personas que tengan una enfermedad infecciosa, o que sean portadores, que los
estudios de rutina.
La presente opinin es que los portadores deben ser estudiados solo cuando la fuente de
una infeccin especfica est bajo investigacin.
Los muestreos de aire para evaluacin microbiolgica no deben ser ejecutados de manera
rutinaria, pero pueden ser requeridos en alguna ocasin por sospecha por infecciones por
Legionella spp y Aspergillus spp, o para monitorear salones de operaciones.
Las muestras del medio ambiente pueden ser requeridas para detectar un reservorio de
microbios que pueda tener significacin en la ocurrencia de un episodio de infeccin, en
este caso el objetivo es detectar una cepa microbiana particular, pero su deteccin no lleva
automticamente a la conclusin que la infeccin de esa fuente contaminada fue
responsable del brote. Se necesita establecer que la infeccin de esa fuente y no de otra,
pudo llegar causar la infeccin a todos o a la mayora de los pacientes implicados. En
oportunidades se hacen aislamientos de fuentes ambientales alternativas a las cuales es
imposible dar explicacin.
Cuando el muestreo es requerido, ste puede ser realizado por el mtodo de placa
expuesta, que es un mtodo gravimtrico o por tcnicas volumtricas ms sofisticadas,
para las que existen equipos de varias firmas comerciales.
En todos los casos, es deseable contar con un patrn microbiano del local, realizado en
condiciones ideales y que va a servir como punto de comparacin.
Los conteos altos de microorganismos en el aire, generalmente son atribuibles a la
presencia de demasiadas personas en el lugar, a un excesivo movimiento del personal y a
deficiencias de climatizacin. Factores todos que pueden ser fcilmente detectados por
observacin.
No se recomienda el mtodo bacteriolgico como procedimiento de rutina en el control de
ambiente de salones de operaciones, ni de otros ambientes especiales, a menos que por
cuestiones muy bien definidas, sea imposible utilizar otro mtodo de control.
131
En todos los casos es desaconsejable su uso con propsitos educativos.
Las superficies tienden a ser irregularmente contaminadas y los resultados de los estudios
bacterianos son difciles de evaluar.
Las muestras de rutina de superficies generales tales como pisos, paredes y artculos que
no estn en contacto directo con el paciente o el personal, dan resultados que solo pueden
ser relacionados con riesgos definidos de infeccin. Si es necesario, deben ser realizados
conteos cuantitativos o semicuantitativos de la contaminacin por unidad de rea de
superficie y el rea debe ser suficientemente grande, para minimizar el efecto de la
contaminacin irregular.
La posibilidad de asociar contaminacin del medio con una falla de la tcnica de
desinfeccin es mayor cuando el patgeno es un bacilo Gram negativo. Con los cocos
Gram positivos es usualmente imposible distinguir entre contaminacin por va area o
por contacto.
Las pruebas para la presencia de patgenos especficos sobre las superficies, solo sirve
para propsitos limitados.
132
En la prctica hospitalaria se recomienda el muestreo regular de las diluciones en uso,
de los desinfectantes que se estn aplicando siguiendo el mtodo de Kelsey y Maurer.
4.- Catteres:
Contaminacin del catter: cultivos positivos de la extremidad del catter, a una cifra no
significativa, en cultivos cuantitativos o semicuantitativos, en ausencia de signos locales o
generales de infeccin
Colonizacin del catter: presencia de un cultivo positivo de la extremidad del catter,
en cantidad significativa (>15 unidades formadoras de colonias (UFC) por la tcnica
semicuantitativa, >1000 UFC/ml en la tcnica cuantitativa), en ausencia de signos
generales de infeccin atribuibles al catter. Localmente puede existir un eritema, pero sin
supuracin local franca. La colonizacin puede provenir de un foco a distancia a los
mismos microorganismos que son aislados del catter
Infeccin clnica del catter: presencia de un cultivo positivo de la extremidad del
catter (> 15 UFC por la tcnica semicuantitativa, >1000 UFC/ml en la tcnica
cuantitativa) en presencia de signos generales o locales de infeccin, con evidencia de
alguno de los sntomas cuando se retira el catter
Infecciones bacterimicas del catter: presencia de un cultivo positivo de la
extremidad del catter (>15 UFC por la tcnica semicuantitativa, >1000 UFC/ml en la
tcnica cuantitativa), asociado a una bacterimia secundaria por el mismo microorganismo
aislado del catter, en ausencia de otros focos infecciosos a ese microorganismo
Si no es posible retirar el catter, una infeccin del catter puede ser tambin identificada,
si la sangre tomada por el catter, contiene ms de 5 a 10 veces el mismo microorganismo
que la sangre tomada en periferia.
133
Para decidir el estudio de un brote de IIH, lo primero es conocer cuando estamos en esta
situacin y sto se define por la presencia de dos o ms casos en una sala, servicio o
institucin de salud, que guarden relacin entre s y que se compruebe que son producidos
por una fuente comn, en un perodo limitado de tiempo y que excede los lmites de la
incidencia habitual.
Solo una pequea proporcin de IIH forma parte de un brote definido y ese debe ser
reconocido rpidamente.
Por otra parte, una epidemia de infeccin hospitalaria es definida cuando existe un
aumento significativo de la tasa esperada de la infeccin en cuestin, superior a la que se
haba encontrado (p<0,05).
Si solamente un agente etiolgico est involucrado en la epidemia, el objetivo de la
investigacin epidemiolgica ser la identificacin de la fuente de infeccin y el
mecanismo de transmisin del agente, y ambos tienen que ser avaladas por criterios
microbiolgicos.
Por definicin, todas las epidemias intrahospitalarias son prevenibles, lo que resalta la
importancia de la investigacin de las mismas lo ms pronto posible, pero a pesar de la
vigilancia epidemiolgica activa y el establecimiento de medidas de control, los brotes
epidmicos siempre ocurrirn por la presencia de pacientes susceptibles expuestos a
graves riesgos.
Para la decisin de las muestras a tomar durante un brote epidmico es muy importante
tener en cuenta el tipo de infeccin, el nmero de pacientes involucrados, su relacin
epidemiolgica, el personal involucrado en su cuidado y los posibles mecanismos de
transmisin, incluyendo: las manos del personal, los instrumentos, medicamentos,
catteres, procedimientos o intervenciones comunes a todos ellos.
Brotes o epidemias pueden ser identificados gracias al aislamiento de una cepa nica, de
un grupo de pacientes infectados con un microorganismo adquirido o no en el hospital.
La identificacin de estas cepas en especie y el hallazgo de un nico patrn de resistencia
pueden ser suficientes para establecer la presencia de un brote con relacin a una cepa
nica. Sin embargo cuando una especie de un organismo es un miembro frecuente de la
flora indgena o ambiental se requieren de mtodos ms complejos de diferenciacin.
Al emplear dichos mtodos debe de tenerse presente un objetivo epidemiolgico, ya que
de lo contrario es posible obtener resultados confusos y hasta conflictivos; debe de tenerse
en cuenta la variabilidad del mtodo, por lo que las pruebas de tipificacin deben
realizarse bajo las mismas condiciones y en el mismo tiempo, incluyendo controles con
cepas no relacionadas en el brote. Entre los mtodos utilizados se incluyen:
biotipificacin, infeccin por fagos, bacteriocinas, serotipificacin, anlisis de DNA
plasmdico, o cromosmico, hibridacin con sondas de DNA, electroforesis de protenas,
anlisis de RNA ribosomal, y amplificacin de DNA por el mtodo de la reaccin en
cadena de la polimerasa (PCR).
Estos mtodos son usados para subdividir grupos de microorganismos, generalmente
miembros de una especie, de manera que sea posible precisar si poseen el mismo patrn
tipo o no. Cuando los microorganismos difieren en esta caracterizacin, se asume son
epidemiolgicamente distintos; as es posible eliminar infecciones o fuentes de infecciones
que no son relevantes en el incidente bajo investigacin. Cuando los organismos tienen el
mismo patrn tipo, tomamos como evidencia la relacin epidemiolgica.
134
Ninguna aseveracin es siempre verdadera, y la fuerza de la evidencia en pro o en contra
de la relacin de la cepa, depende de dos caractersticas del sistema de tipaje usado.
Con los resultados que obtiene el laboratorio del procesamiento de las muestras de las
diferentes procedencias hospitalarias, se confecciona el mapa microbiano de la unidad, que
est dado por los elementos siguientes:
135
Naturaleza del medio y de la poblacin bacteriana:
En el ambiente de los hospitales y en menos escala en los lugares donde acuden enfermos
(policlnicas, consultorios), concurren todos los elementos explicados anteriormente: aire,
agua, alimentos, cuyo conjunto conforma el ambiente inanimado que guarda ntima relacin
con las infecciones nosocomiales y puede contribuir a la aparicin de casos espordicos o
brotes de enfermedades, proporcionando focos de contacto y transmisin por vehculo
comn. Sin embargo; no se debe prestar una excesiva atencin a la presencia de microbios en
los objetos del ambiente inanimado, y menos an, considerar que tal presencia representa de
por s, evidencia de un foco peligroso de infeccin. Tal supuesto puede conducir a malgastar
recursos humanos y materiales en medidas de control ambiental que nada resuelven. En tales
casos puede haber necesidad de hacer un mayor nfasis sobre la prevencin y control de la
propagacin por contacto directo a travs del ambiente animado (enfermos, mdicos,
enfermeras, tcnicos y auxiliares), que constituyen el principal foco de transmisin de la
infeccin hospitalaria.
136
muestras para estudio microbiano. Estas normas deben revisarse peridicamente con el
personal de enfermera y mdico.
Las tcnicas que se utilizan para la recoleccin de las muestras para estudio bacteriano,
dependern de la naturaleza del problema diagnstico y de la enfermedad en cuestin.
Para el diagnstico de las afecciones micticas, se pueden obtener diversas muestras,
segn el tipo de micosis y la regin afectada. Para las micosis superficiales y subcutneas,
las muestras por lo general son partes del cuero cabelludo, de la piel y uas. Para las
micosis profundas, el material depender del agente que se sospeche y su localizacin.
Los mtodos que se emplean en la obtencin de muestras para estudios virolgicos, no
difieren mucho de los que se emplean para los estudios bacterianos. Sin embargo, es
importante tener presente la inestabilidad de muchos virus cuando la temperatura excede
de 4 C. Es preciso, por lo tanto un mayor control en el mantenimiento de la temperatura
durante la conservacin o envo de una muestra. Para su transporte pueden utilizarse
termos o neveras porttiles con hielo seco.
El diagnstico de la mayora de las enfermedades producidas por parsitos intestinales se
realiza por medio del examen de las heces fecales, que debern ser recogidas en
recipientes limpios que permitan su fcil transporte. Las heces obtenidas del suelo o de
excusados no son satisfactorias debido al peligro de que estn contaminadas con larvas
saprfitas y otros organismos del suelo o con orina que puede destruir los trofozoitos, si
stos se encontraran en la muestra.
Si las muestras se envan inmediatamente al laboratorio y pueden procesarse lo ms pronto
posible, no necesitan preservativos; pero si por el contrario, se conoce que va a existir
demora en el inicio del proceder analtico, deben ser conservadas en soluciones
preservativas.
Otras muestras que con frecuencia se obtienen en los casos de parasitismo intestinal
son:
Helmintos o progltides que pueden expulsarse con materia fecal o sin sta. Pueden
colocarse en un frasco con solucin salina, agua alcohol o formalina.
Muestra de la regin perianal tomada con cinta adhesiva transparente. Importante
en el diagnstico de la oxiurasis.
Muestras obtenidas por sigmoidoscopa.
Algunos parsitos pueden encontrase en alguna fase de su ciclo biolgico en
material distinto de las heces fecales. Por ejemplo, E. histolytica en el hgado,
mucosa intestinal u otros tejidos. (Estudio de la muestra del material
correspondiente).
Muestras de secrecin duodenal y biliar. Muy importante en el diagnstico de
Giardia lamblia, cuando los exmenes de las heces fecales son negativos.
Otros parsitos:
137
Las muestras de exudados y otras secreciones que se obtienen con hisopos estriles
constituyen el medio habitual para diagnosticar infecciones causadas por diversos
parsitos y se obtienen de: crvix, vagina, prstata, lesiones abiertas, lceras,
biopsias, punciones etc.
Otras muestras:
Consideraciones generales.-
Entre las consideraciones generales que debemos tener presente para la seleccin y
recoleccin de los especmenes, podemos sealar:
Tener una idea clara de los objetivos para los cuales se toma la muestra: aislamiento e
identificacin de un agente etiolgico, titulacin de anticuerpos, determinacin de las
fuentes de contaminacin del agua o alimentos, las causas de una intoxicacin, etc.
La muestra debe ser representativa:
La muestra se obtendr de la regin anatmica de donde pueda ser encontrado el
microorganismo.
Considerar el estado de la enfermedad.
Las muestras para estudios de ambiente, agua, leche, y otros alimentos, se tomarn de
acuerdo con el tipo de investigacin solicitada, siempre representando el proceso o la
situacin en estudio.
La cantidad de la muestra colectada ser la adecuada para realizar todos los estudios
solicitados.
Siempre que sea posible, debemos obtener la muestra antes del inicio de la terapia
antimicrobiana.
En algunos tipos de muestras se utilizarn frascos con sustancias neutralizantes de los
antimicrobianos que contengan los productos en estudio. Ejemplos: Cloro en el agua,
antibiticos en sangre.
Observar medidas, para evitar que se contamine la muestra.
Instruir claramente a los pacientes.
Emplear contenedores estriles y en caso necesario, el medio de transporte adecuado.
Enviar las muestras rpidamente al laboratorio.
138
Suministrar suficiente informacin al laboratorio.
Un aspecto muy importante relacionado con las muestras, es la definicin del momento
ptimo para su obtencin, el cual puede estar basado en el tipo del proceso infeccioso y
en la capacidad, organizacin y habilidad del personal del laboratorio para colectar las
muestras.
Debido a las caractersticas de trabajo de los laboratorios, stos, generalmente, estn ms
capacitados para recibir las muestras durante la jornada laboral diurna, fundamentalmente
139
en horarios de la maana. Las muestras que necesariamente tienen que ser obtenidas en
horarios avanzados de la tarde y durante la noche, y que no sern sembradas dentro de las
dos horas siguientes a su obtencin, podran no producir resultados confiables si no se
procede de manera adecuada durante la conservacin y transporte de la muestra.
En estos casos, puede ser necesaria la utilizacin de un medio de transporte, pues
conocemos que los microorganismos, crecen, se reproducen y mueren rpidamente. Los
medios de transporte se han creado para detener o prevenir los tres procesos.
Resultados errneos o incompletos pudieran producirse si alguno de estos procesos
ocurre antes de que la muestra comience a procesarse en el laboratorio.
Se conocen bajo la denominacin de procedimientos de rutina del laboratorio, aquellos
que se hacen en forma continua mientras que el laboratorio tiene sus procedimientos
establecidos en forma permanente; en este caso, lo importante ser la coordinacin para
lograr que las muestras lleguen en forma satisfactoria y que el laboratorio tenga la
capacidad para elaborarlas.
La marcha analtica de algunos especmenes no se encuentran entre los procedimientos
antes sealados, debido a que requieren equipos, medios de cultivo, colorantes y otros
reactivos especiales o de uso no frecuente en el laboratorio que se deba encargar del
procesamiento de la muestra. En estos casos, el mdico de asistencia deber consultar con
el microbilogo, acerca de la posibilidad de realizar el examen.
Los casos que con mayor frecuencia pudieran presentarse son:
1. Cultivos de virus.
2. Pruebas para estudio del poder bactericida del suero.
3. Campo oscuro para deteccin de espiroquetas y otras bacterias.
4. Hemocultivos especiales para cultivar hongos y formas L.
5. Recuperacin de chlamydias, rickettsias, leptospiras y otros organismos poco
frecuentes.
Se obtendrn las muestras correspondientes, y de ser posible se crearn las condiciones para
realizar el estudio en el laboratorio o se realizarn las coordinaciones pertinentes para enviar
la muestra al laboratorio que pueda procesarla.
Como conclusin de estas reflexiones sobre la muestra para estudio microbiano, quisiera
destacar el hecho de que el mdico de asistencia espera la informacin de los laboratorios de
microbiologa y parasitologa mdicas diagnstica, para ayudar a salvar a su paciente; y
hemos visto que es en las manos de la persona encargada de seleccionar, obtener y transportar
las muestras donde se encuentra parte de esta gran responsabilidad.
140
A pesar de los esfuerzos realizados en el mundo con el fin de yugular dichas enfermedades,
stas continan siendo una de las principales causas de morbilidad y mortalidad. En la
actualidad, existe, adems, un persistente aumento del nmero de pacientes con
enfermedades de base o tratamientos que con frecuencia condicionan la aparicin de
infecciones oportunistas.
Ante la presencia de una enfermedad infecciosa, el laboratorio puede contribuir a establecer
su diagnstico mediante pruebas que podemos agrupar en cuatro categoras:
Las pruebas de laboratorio para contribuir con la seleccin racional del tratamiento
antimicrobiano.
Cuando el laboratorio est ubicado dentro de las instalaciones mdicas generales, debe
ofrecer al mdico de asistencia, con rapidez y exactitud, la informacin referente a la
presencia o ausencia de un agente microbiano, que puede estar especfica o potencialmente
implicado en un proceso de enfermedad infecciosa que est afectando a un paciente y,
adems, completar prontamente la informacin, con los resultados relativos a las pruebas de
resistencia in vitro a los antimicrobianos.
Con el uso adecuado del recurso microbiolgico podemos lograr:
Poblaciones abiertas: Los datos microbiolgicos figuran entre los primeros que
sugieren la existencia de enfermedades epidmicas en la comunidad.
Poblaciones cerradas: Un nmero poco comn de ejemplares de un solo patgeno o
un cuadro poco comn de susceptibilidad a los antimicrobianos puede indicar un
brote de infeccin nosocomial.
Pacientes en riesgo: Prediccin de aparicin de infeccin nosocomial (prevenibles e
inevitables).
141
Cuando nos enfrentamos a un paciente con un cuadro clnico sugestivo de una enfermedad
infecciosa; corresponde al mdico de asistencia, hacer un diagnstico presuntivo, indicar los
exmenes de laboratorio e iniciar tratamiento. l sabe cules son las pruebas que solicitar,
cmo y cuando tomar las muestras y cmo interpretar los resultados.
En el momento de solicitar los exmenes, debe informar al laboratorio sobre su impresin
diagnstica y los antecedentes de la teraputica antibitica del paciente.
Estos elementos permiten orientar el trabajo del laboratorio de Microbiologa, pues es bien
conocido que en el mismo no hay un solo mtodo disponible que permita observar y aislar
todos los microorganismos patgenos o diferenciarlos de los no patgenos.
Las tcnicas usadas para este fin variarn segn el sndrome clnico y el tipo de agente que se
est considerando: virus, bacteria, hongo u otro parsito.
Al personal del laboratorio, jerarquizado por el microbilogo jefe, le corresponden los
detalles tcnicos de los diferentes procederes analticos, desde las consideraciones sobre las
muestras hasta suministrar la ms precisa, adecuada y rpida informacin sobre el agente
infeccioso.
El xito de los exmenes microbiolgicos depende en gran medida del modo como se
obtienen las muestras, de la rapidez y de las condiciones con que las mismas llegan al
laboratorio. La rotulacin apropiada de las muestras es un factor importante en el uso
adecuado del recurso microbiolgico. (Ver folleto titulado: La muestra para estudio
microbiano.).
Muchas veces los procederes analticos se pueden inutilizar por falta de cuidado y por el
empleo de mtodos defectuosos en la recoleccin y manejo de las muestras. Con el fin de
superar estos errores, dichos mtodos deben estar normados y figurar en los manuales del
laboratorio y del personal de enfermera. Debe revisarse peridicamente con participacin del
personal del laboratorio, de enfermera y mdico.
Entre los procedimientos ms importantes en la marcha analtica de una muestra para estudio
microbiano, se encuentran los exmenes microscpicos de los productos patolgicos frescos,
teidos o sin teir, con el fin de demostrar la presencia de un agente infeccioso en la muestra.
Frecuentemente no se emplean estos mtodos y se pierde la importante informacin que
brinda este recurso, de gran ayuda para el diagnstico.
Algunos de los exmenes microscpicos directos no slo nos ofrecen las ventajas antes
sealadas, sino que tambin nos permiten predicciones de los resultados de los cultivos.
Como ejemplo muy til podemos citar, los exmenes directos en la deteccin de bacteriuria.
El examen en campo oscuro debe realizarse a toda muestra de orina que llegue con
indicacin de cultivo. Estos resultados tienen un valor predictivo de cultivos negativos de
95,5% y una especificidad de 97,3%, con el consiguiente ahorro en recursos materiales y
humanos.
Otro propsito importante de los laboratorios de microbiologa es tratar de demostrar la
presencia de un agente infeccioso mediante la preparacin de cultivos bajo condiciones
ambientales que sean adecuadas para el crecimiento de una amplia variedad de
microorganismos.
La decisin de cuntos y cules mtodos y medios de cultivo se usarn en cada laboratorio y
frente a cada caso, queda a cargo de las normas de trabajo y en gran parte, a la experiencia
del director del laboratorio. Para estas definiciones, son indispensables las valoraciones sobre
el tipo de poblacin que atiende, las funciones del laboratorio y los datos que aportan los
mdicos de asistencia.
142
Uno de los pasos ms decisivos en estos estudios es la observacin de los primocultivos, que
debe realizarse a simple vista y con ayuda de aumento, siempre con buena iluminacin. Esta
importante tarea debe realizarla el personal ms calificado y con ms experiencia, auxiliado
por un miembro del equipo tcnico.
Si despus de la inspeccin de los cultivos, los microorganismos representan los normales de
la regin anatmica de donde se obtuvo la muestra, la identificacin con pruebas adicionales,
resulta superflua.
Si la muestra procediera de una regin que es normalmente estril o que la presencia del
microorganismo no es normal, el laboratorio debe establecer la identificacin de la cepa
aislada.
En algunos casos, la identificacin debe establecerse hasta gnero y especie, en otros, resulta
suficiente conocer que se trata de un miembro de un gnero determinado. Si la cepa procede
de un paciente en circunstancias especiales o fuera necesario por razones epidemiolgicas,
higinicas o profilcticas, es posible que se requieran ms pruebas para la identificacin del
microorganismo, que nos permitan una caracterizacin ms exhaustiva.
En nuestro laboratorio de Microbiologa peditrica, tenemos establecido la realizacin de
diferentes niveles de identificacin a las cepas aisladas; estando en dependencia de las
caractersticas del paciente del cual procede y del tipo de muestra de la cual se obtuvo.
El personal del laboratorio no siempre tiene que reflejar las clasificaciones taxonmicas ms
exactas y es muy importante que conozca los diferentes sinnimos que pueden aplicarse al
microorganismo que identifican.
La deteccin inmunoqumica de antgenos solubles en los productos patolgicos se ha
convertido en un examen frecuente en algunos laboratorios de Microbiologa y nos brinda la
posibilidad de poder detectar la presencia de los antgenos microbianos, an en aquellas
muestras donde no se han observado ni aislado los microorganismos. La sensibilidad y la
sencillez tcnica, son ventajas de estas pruebas.
Son muy diversos los mtodos que se pueden emplear para detectar los antgenos solubles y
ninguno por s slo puede recomendarse para todos los antgenos bacterianos, sino que cada
uno debe evaluarse independientemente y aplicarse como mtodo para cada antgeno.
Los inmunoanlisis de enzima (IAE) incluyendo los anlisis inmunoabsorbentes ligados a
enzimas (ELISA) y las pruebas de aglutinacin (LA y COA), se usan para detectar antgenos
de agentes infectantes (bacterias, hongos, virus, parsitos), presentes en muestras clnicas.
Las pruebas de inmunofluorescencia (IF), directas e indirectas son mtodos que nos
permiten identificar antgenos, se describen en otros captulos de este libro y aparecen
enunciadas en los captulos correspondientes a diferentes microorganismos causantes de
infecciones bacterianas, micticas, virales y parasitarias.
El desarrollo y aplicacin de nuevos mtodos de biologa molecular, que son capaces de
detectar o identificar, de manera rpida y con alta sensibilidad y especificidad a
microorganismos o algunas de sus caractersticas, cambian sustancialmente la prctica de los
laboratorios de microbiologa clnica, en su objetivo de diagnosticar infecciones.
Estos procedimientos de diagnstico molecular tienen como principio bsico, la hibridacin
de una sonda de cido nucleico caracterizada, a una secuencia especfica de cido nucleico
en una muestra de prueba, seguida por deteccin del hbrido apareado.
Otra responsabilidad importante de los laboratorios de Microbiologa clnica es la realizacin
de las pruebas que contribuyen al uso racional de los antimicrobianos, entre los que tenemos
los mtodos que nos permiten conocer, in vitro, la sensibilidad y resistencia de las cepas
143
aisladas frente a las drogas antimicrobianas y la demostracin de la produccin o no, de
enzimas que inactivan a dichas drogas.
Para la realizacin de todas estas pruebas, se seleccionarn aquellas drogas que sern tiles
in vivo frente al microorganismo aislado, segn las caractersticas de resistencia propias o
naturales del grupo al que pertenece y teniendo en cuenta las caractersticas del paciente y de
la regin anatmica de la cual se aisl.
Con el fin de que estas pruebas de laboratorio contribuyan adecuadamente al tratamiento
antimicrobiano, deben poder ofrecer
la informacin lo ms rpido posible, unido a la exactitud, reproducibilidad y buenos
controles.
Otros procedimientos de laboratorio que pueden ofrecer un auxilio importante en el
diagnstico de las enfermedades infecciosas, son las pruebas serolgicas.
Los cultivos de ciertas bacterias, hongos, parsitos y virus pudieran no ser satisfactorios por
diferentes causas: no desarrollo del mtodo adecuado, terapia antimicrobiana previa a la
toma de la muestra o cronicidad de la enfermedad. Bajo estas circunstancias, la deteccin
de anticuerpos especficos y no especficos puede resultar una gran ayuda en el diagnstico y
en la epidemiologa.
Debemos recordar que la demostracin de un anticuerpo especfico indica exposicin
efectiva (por infeccin o por vacunacin) en algn momento, pero pudiera no tener relacin
con la infeccin actual, por lo cual es necesario ser muy cuidadoso en la indicacin precisa y
en la interpretacin adecuada de los resultados de este recurso indirecto.
Con frecuencia es necesario demostrar un aumento en la concentracin de anticuerpos en la
segunda de dos muestras de sangre, obtenidas del paciente con un intervalo de tiempo
determinado.
Al utilizar las pruebas serolgicas como recurso de ayuda diagnstica de las enfermedades
infecciosas, debemos tener presente algunas consideraciones con relacin a las mismas:
144
diagnstico de laboratorio microbiolgico, adems de ser ms simples y econmicos. No slo
me refiero a la aplicacin de los procederes de las tcnicas moleculares aplicadas al
diagnstico microbiolgico, sino tambin a la introduccin de micromtodos, de la
instrumentacin y de la automatizacin en estos diagnsticos.
Pero no podemos olvidar que con el empleo racional y adecuado de los procedimientos
convencionales y tradicionales, se puede minimizar el tiempo de demora de los informes del
laboratorio y hacerlos, por lo tanto, ms tiles. En este sentido nos resultan de gran ayuda:
145
Los resultados que emite el laboratorio de Microbiologa no deben quedar como elementos
dispersos, es necesaria la integracin de los mismos a los pacientes y stos al medio
hospitalario.
Resulta indispensable para el personal del laboratorio y para los mdicos que usan el recurso,
conocer cules son las posibilidades analticas con que cuenta, cules son sus limitaciones y
cules los laboratorios que puede recomendar o a los que puede enviar los especmenes para
los estudios que no pueda realizar.
Como conclusin podemos sealar que, no basta con la indicacin precisa del examen
microbiolgico y un correcto proceder analtico, sino que es necesaria la conjuncin de las
acciones del mdico de asistencia y del microbilogo, lo cual repercutir favorablemente en
los resultados de las pruebas de laboratorio, su interpretacin y su aplicacin en el campo de
las enfermedades transmisibles, independientemente de los recursos materiales con que
cuente el laboratorio que realiza los estudios.
Adems, con la introduccin de nuevos procedimientos; como los micromtodos, la
instrumentacin, la automatizacin y los mtodos de biologa molecular y su impacto en la
prctica, se han producido cambios en el diario quehacer y en los resultados obtenidos en los
laboratorios de microbiologa y parasitologa mdicas.
El hombre vive sirvindose de los hongos y especficamente de las levaduras desde hace
muchos siglos, para fermentar zumos de frutas, para esponjar el pan y para hacer sabrosos
y nutritivos ciertos productos alimenticios.
Su importancia es mayor que en tiempos pasados porque podemos emplearlos en nuestra
industria en procesos fermentativos ms diversos y adems para sintetizar ciertas
protenas, grasas y vitaminas.
146
No todos los hongos son beneficiosos, existen hongos perjudiciales como los
fitopatgenos que ocasionan daos econmicos en la agricultura, (recordar el moho azul
del tabaco).
El descubrimiento de la relacin causal de algunos hongos con enfermedades infecciosas,
precedi en muchos aos a los trabajos de Pasteur y Koch con bacterias patgenas. A pesar
de su inicio temprano, la micologa mdica nunca ha recibido tanta atencin como la
bacteriologa. Esto tal vez pueda atribuirse a la naturaleza relativamente benigna de las
micosis ms comunes, la rareza de las ms graves y a la base morfolgica de la
identificacin de estas formas estructurales complejas.
Propiedades generales.
Son organismos eucariticos, no fotosintticos, que poseen una pared celular compuesta de
quitina, que se reproducen de forma sexual y asexual, son inmviles y pueden ser
filamentosos y levaduriformes.
Las enfermedades causadas por hongos segn la forma de adquirirlas pueden ser:
Endgenas.
Exgenas.
147
El agente etiolgico en las enfermedades exgenas, se halla en la mayora de los casos en
el suelo y el hombre las adquiere accidentalmente.
Tambin podemos decir que las enfermedades producidas por hongos pueden adquirirse
por varias formas:
Hongos perfectos:
- Ficomicetos.
- Ascomicetos.
- Basidiomicetos.
Hongos imperfectos:
- Deuteromicetos.
Los hongos que presentan los dos tipos de reproducciones (sexual y asexual) se les llama
"hongos perfectos"
Los hongos que presentan un slo tipo de reproduccin (asexual) se les llama "hongos
imperfectos".
Morfologa.
* Filamentosos.
* Levaduriformes.
Filamentosos: Constituido por filamentos denominados hifas que pueden ser tabicadas o
no. Al conjunto de hifas ramificadas y entrelazadas se le llama "Micelio" que puede ser
areo o vegetativo.
El micelio areo es superficial, da lugar a las esporas y su funcin es reproductora.
El micelio vegetativo es profundo, crece dentro del substrato o medio de cultivo y su
funcin es nutritiva.
148
Los hongos filamentosos se desarrollan lentamente en 1 a 2 semanas, a temperatura
ambiente, formando colonias macroscpicas de aspecto algodonoso, velludo o
pulverulento. Se cultiva en medio de Saboureaud y se incuba a temperatura ambiente.
Los hongos de importancia mdica crecen en condiciones aerbicas, a una temperatura entre
22 y 37C en medios de cultivo que contengan compuestos nitrogenados y carbohidratos,
ajustados a un Ph 6,0 y 6,5. Algunas especies requieren factores de crecimiento (Vitaminas,
AA) y microelementos minerales.
Reproduccin.
Los hongos se reproducen sexual y asexualmente por esporas, las que tambin pueden
constituir elementos de resistencia.
Las esporas de los hongos filamentosos nacen a partir del micelio areo y sus
caractersticas se emplean para la identificacin de los hongos.
Las esporas sexuales se reproducen por fusin de dos clulas y las asexuales se forman
por diferenciacin de las hifas.
149
Ascosporas. De la fusin resulta la formacin de un saco o asca que contiene los
productos meiticos en la forma de 4 u 8 esporas (ascosporas). Las esporas asexuales
(conidios) nacen externamente en las puntas de las hifas. Ej: (Penicillium, Aspergillus,
Piedra negra).
Pitiriasis. (Giti).
1.- Micosis superficiales Piedra
Dermatofitosis.
Cromomicosis. (Piel)
3.- Micosis subcutneas. Micetoma. (Piel- TCS)
Esporotricosis. (Linfticos)
Rinosporidiosis
Histoplasmosis. (Resp.)
4.-Micosis profundas. Criptococosis. (Resp.) (oportunista)
150
Candidiasis. (Resp.) (oportunista)
Coccidiodosis. (Resp.)
151
Trichophyton. (pelo, piel, uas)
Microsporum. (pelo, piel).
Epidermophyton. (piel, uas)
Patogenia.
T. rubrum.
T. tonsurans.
M.audinii.
E. floccosum.
Entre los hongos que tienen como husped natural los animales, e infectan al hombre se
encuentran:
M. canis.
M. nanum.
M. gypseum.
Los dermatofitos pueden causar diversas afecciones entre las que sealaremos:
Tia corporal.
Tia de los pies.
Tia ceflica.
Tia de la barba.
Onicomicosis.
La infeccin es favorecida por: humedad, calor, edad, composicin qumica de la piel,
sudoracin, predisposicin gentica, etc.
Producen enzimas queratolticas que digieren el pelo, la epidermis y las uas, segn el
gnero.
152
1. Recoleccin de muestras: raspado de piel pelo y uas.
2. Examen directo: Examen de las lesiones micticas bajo una lmpara de luz
ultravioleta (lmpara de Wood), donde en los casos positivos se observa, fluorescencia
verdosa en los pelos. Observacin microscpica: El examen de los pelos demuestra si
hay afectacin interior y exterior.
Pitiriasis versicolor.
Aspergillus.
Cromomicosis.
153
La Cromomicosis es una infeccin granulomatosa crnica, de evolucin muy lenta que
afecta la piel y T.C.S, caracterizada por la formacin de ndulos cutneos verrucosos y
producida por diferentes hongos filamentosos de la familia DEMATIACEAE. (Fonsecaea
pedrosoii, Fonsecaea compactum, Phialophora verrucosa y Cladosporium carrionii) que
forman colonias pardas o negras.
Diagnstico de laboratorio.
Recoleccin de la muestra.
Observacin microscpica. (esclerotes, hifas).
Pruebas bioqumicas (licuefaccin de la gelatina, hidrlisis de la casena, digestin del
almidn).
Microcultivo (tipo de esporulacin).
Patogenia.
154
micosis, pero la mayora slo desarrollan sntomas menores o ninguno, slo una minora
de los enfermos progresa a la enfermedad completamente desarrollada y grave o mortal.
Las reacciones inmunitarias mediadas por clulas del husped son de importancia capital
en la determinacin del resultado de estas infecciones.
En las micosis generales, la reaccin tpica en los tejidos es un granuloma crnico con
grado variable de necrosis y formacin de abscesos.
Cndida.
La candidiasis es una micosis causada por diferentes especies del gnero Candida que se
caracteriza por producir una infeccin aguda o subaguda y crnica, en la cual el hongo
puede ocasionar lesiones en la boca, vagina, piel, uas, bronquios o pulmones y
ocasionalmente septicemia, endocarditis o meningitis. La Candida puede comportarse
como oportunista, y puede producir adems, micosis cutneo- mucosa y profundas.
Formas clnicas:
Candidiasis cutnea.
Intertrigo.
Lesiones cutneas generalizadas.
Candidiasis broncopulmonar.
Candidiasis generalizada.
Septicemia.
Meningoencefalitis.
Endocarditis.
Patogenia.
155
Embarazo.
Tratamiento prolongado con antibiticos de amplio espectro.
Inmunodepresin primaria o secundaria.
Diabetes sacarina.
Patogenia.
Caractersticas........INVASIVA. (Pseudohifas)
Susceptibles:
Endgeno
Mecanismo de transmisin
Exgeno
156
B. Genitales femeninos. La vulvovaginitis se parece al algodoncillo, pero produce
irritacin, prurito intenso y secrecin. La prdida del Ph cido normal de la vagina,
predispone a la vulvovaginitis por Cndida. El Ph cido es conservado normalmente
por la flora normal. La diabetes, el embarazo, la progesterona y la antibioticoterapia
predisponen a la enfermedad.
C. Piel. La infeccin de la piel ocurre principalmente en las partes hmedas del cuerpo,
como las axilas, pliegues interglteos, ingle o pliegues submamarios; es muy comn
en los individuos obesos y diabticos. Estas zonas se vuelven de color rojizo y exudan
lquido, pudiendo desarrollar vesculas. La infeccin por Cndida de los espacios
interdigitales de las manos se observa con frecuencia despus de la inmersin
prolongada en agua; es muy comn en las amas de casa, cocineros, en los manejadores
de verduras y de pescado, etc.
E. Pulmones y otros rganos. La infeccin por Cndida puede ser un invasor secundario
de los pulmones, riones y otros rganos donde alguna enfermedad previa se hallaba
presente (por ejemplo, tuberculosis o cncer). En la leucemia no controlada y en los
enfermos quirrgicos o con inmunosupresin, las lesiones de Cndida pueden ocurrir
en muchos rganos. La endocarditis por Cndida (con frecuencia debida a C.
parapsilosis) ocurre particularmente en los toxicmanos o sobre prtesis valvulares. En
ocasiones se desarrolla candiduria despus de sondeos urinarios, pero tiende a remitir
de manera espontnea.
Diagnstico de laboratorio.
Recoleccin de la muestra.
Hisopo. (Mucosas).
Bistur. ( Raspados cutneas).
Esputo. (Broncopulmonar).
Generalizadas. (Sangre) endocarditis, septicemia.
157
Cultivo: En medio de Saboureaud a temperatura ambiente de 48- 72 horas. A 37C, se
acelera el crecimiento. Se desarrollan colonias blandas, color cremoso, que tienen un
olor a levadura. El desarrollo superficial consiste en clulas ovales en gemacin. El
desarrollo sumergido consiste en pseudomicelios.
Tubo germinativo.
Fermentacin de azcares.
Histoplasma capsulatum.
Caractersticas y clasificacin.
-Suelo-tierra-filamentos-fragmentos miceliales
Microconidios y macroconidios.
Patogenia.
Los microconidios son inhalados de una fuente exgena, penetran en los alvolos
pulmonares, donde se convierten en pequeas clulas levaduriformes gemantes que son
fagocitados por los macrfagos alveolares y pueden diseminarse dentro de ellos por el
158
torrente sanguneo localizndose en el SRE provocando una reaccin inflamatoria con
infiltrado de neutrfilos y linfocitos. La infeccin aguda pulmonar es la forma ms
frecuente y se caracteriza por la formacin de pequeos tubrculos de clulas epiteloides
que dan un moteado tpico en las imgenes radiogrficas, acompaando a un cuadro
clnico febril con signos de localizacin broncopulmonar. Este proceso evoluciona
favorablemente, pero con sntomas indistinguibles de la tuberculosis cavitaria. La
histoplasmosis sistmica afecta a un escaso nmero de pacientes, en los cuales se ven
comprometidos, adems de los pulmones, otros rganos, pudiendo evolucionar de formas
aguda o progresiva, siendo esta ltima de suma gravedad. En raras ocasiones se han
descrito lesiones primarias de piel y mucosas a consecuencia de una inoculacin directa.
Resumiendo Patogenia:
Sintomtica
Histoplasmosis diseminada.
Presuntivo.
Clnico.
Epidemiolgico.
Radiolgico.
Serolgico.
Certeza------Diagnstico de laboratorio. (examen directo y cultivo).
Diagnstico de laboratorio.
159
elemento diagnstico importante, pero no es frecuente. El cultivo de estos materiales
muestra resultados positivos transcurridas varias semanas, debido al lento crecimiento de
este agente.
La prueba cutnea de histoplasmina es positiva en aquellas personas que han padecido la
infeccin a veces inaparente, y ste se mantiene por muchos aos, por lo que su valor
diagnstico es mnimo. Durante la infeccin pueden detectarse anticuerpos precipitantes
por inmunodifusin o contrainmunoelectroforesis a partir de la tercera semana. La llamada
banda de precipitacin que aparece tempranamente y desaparece poco tiempo despus de
la recuperacin, indica una infeccin activa.
Criptococcus.
Es una levadura que se caracteriza por una amplia cpsula de carbohidratos en cultivos y
lquidos de los tejidos. Ocurre ampliamente diseminada en la naturaleza y se halla en un
nmero muy grande en las heces secas de las palomas. La enfermedad en el humano por lo
general es oportunista.
Morfologa e identificacin.
Estructura antignica.
Patogenia.
160
comn es una meningitis crnica de lento desarrollo con remisiones y exacerbaciones
espontneas frecuentes.
Tumor enceflico.
Absceso del encfalo.
Enfermedad degenerativa del SNC.
Cualquier meningitis por hongos o Mycobacterias.
LCR.
Esputo.
Orina.
Suero.
Exudados.
Examen microscpico: Se colorea con tinta china, observndose clulas
levaduriformes encapsuladas.
Cultivo: El cultivo de las muestras sembrado en el medio de Saboureaud e
incubado a 37 C, produce un crecimiento de aspecto cremoso y de color blanquecino.
Serologa: Aglutinacin con ltex (para detectar antgenos capsulares).
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163
* Mdico. Especialista de 2do grado en Microbiologa.
Profesor Asistente de la Asignatura Agentes Biolgicos.
164
*** Mdico Especialista de 1er grado en Microbiologa.
Profesor Asistente de la Asignatura Agentes Biolgicos.
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