"Ao del Buen Servicio al Ciudadano"

INFORME N 2

TTULO: TINCIN DIFERENCIAL GRAM

MESA N6
INTEGRANTES:

20150437 GAONA VARA, RICARDO

20150056 MARTEL ARANDA, YEFERSON

20150454 PARI CHOQUE, SANDRA

20121266 RAMIREZ RUPAY, BRYAN

20140172 TEJADA RUIZ, JOSE ANDRE

GRUPO: F (mircEoles de 3-5)

Ciclo: 2017-I

AO: 2017
2

1 INTRODUCCIN

2 OBJETIVOS

3 MARCO TERICO

4 MTODOS

5 OBSERVACIONES Y RESULTADOS

5.1 OBSERVACIONES
Muestra N 1: Staphylococcus sp.

Grado de aumento: 1000x

Gnero: Staphylococcus sp.
Gram: Gram (+)

Forma: Cocos
Agrupacin: Racimos
Tamao: 0,8 a 1,5 m
Colorante: Cristal violeta
Fuente: Elaboracin Propia

Fuente: Foto tomada en el laboratorio

3

Muestra N 2: E. coli

Grado de aumento: 1000x

Gnero: E. coli
Gram: Gram (-)

Forma: Cocobacilo
Agrupacin: No tiene
Tamao: 2 m de largo por 0,5
m de dimetro
Fuente: Elaboracin propia

Fuente: Foto tomada en el laboratorio

Muestra N 3: Bacillus sp.

Grado de aumento : 1000x

Gnero: Bacillus sp.
Gram: Gram (+)

Forma: Bacilo
Agrupacin: Cadena
Tamao: 1,2 m de largo por 0,5
de dimetro m.

Fuente: Elaboracin Propia

4

Fuente: Foto tomada en el laboratorio

5.2 RESULTADOS
Muestra N 1: Staphylococcus sp.
Siguiendo los pasos mencionados anteriormente, se observ en el
microscopio con grado de aumento 1000 X, que las bacterias en forma
de cocos y agrupadas en racimos de Staphylococcus sp. se tieron de
color azul, lo cual nos indica la presencia de una bacteria Gram positiva.

Muestra N 2: E. Coli

Siguiendo los pasos mencionados anteriormente, se observ en el

microscopio con grado de aumento 1000 X, que las bacterias en forma
de cocobacilo y dispersas (sin agrupacin) de E. Coli. se tieron de color
rojo , lo cual nos indica la presencia de una bacteria Gram negativa.

Muestra N 3: Bacillus sp.

Siguiendo los pasos mencionados anteriormente, se observ en el
microscopio con grado de aumento 1000 X, que las bacterias de forma
de bacilo y agrupadas en cadenas de Bacillus sp se tieron de color azul,
lo cual nos indica la presencia de una bacteria Gram positiva.

6 DISCUSIONES
Staphylococcus sp. Y Bacillus sp.
La gruesa pared celular de las bacterias gram positivas est constituida
principalmente por peptidoglicano. Se cree que sta gruesa capa de
peptidoglicano es la determinante de que estas bacterias retengan el cristal
violeta de la coloracin de Gram. Sin embargo, estas clulas contienen tambin
una gran cantidad de cido teicoico: polisacridos que se unen al cido N-
5

acetilmurmico o a los lpidos de la membrana plasmtica. En este ltimo caso

se denomina cido lipoteicoico. Tanto los cidos teicoicos como los
lipoteicoicos, tienen la funcin de estabilizar la pared celular. Adems, los
cidos teicoicos tienen un rol en la virulencia de estos microorganismos, porque
actan como antgenos de superficie que se unen a receptores especficos en
las clulas del husped. La superficie externa del peptidoglicano de las
bacterias Gram positivas est generalmente cubierta de protenas. Los
diferentes grupos de bacterias Gram positivas y las diferentes especies difieren
en la composicin de sus protenas y de cidos teicoicos; sto es til para la
clasificacin serolgica y la identificacin bacteriana.
Estas bacterias no se tien con los colorantes normales, pero una vez que se
han teido con fucsina (forzando mediante calentamiento de la preparacin),
tienen resistencia a decolorarse por una mezcla de cido clorhdrico al 3% en
etanol de 96o. Por ello se denominan como bacterias cido-alcohol
resistentes. Esta propiedad depende esencialmente de la presencia, en su
pared celular de unos lpidos llamados cidos miclicos.
E. Coli

Tanto las Gram-positivas como las Gram-negativas captan la misma cantidad

de cristal violeta (CV) e iodo (I). El complejo CV-I sin embargo es atrapado
dentro de la clula Gram positiva por la deshidratacin y la reduccin del
tamao de los poros de la pared resultante del proceso de lavado con solvente.
En contraste en las Gram negativas la fina (y probablemente discontinua) capa
de peptidoglicano no impide la extraccin por el solvente del complejo.
Adems de tener una capa delgada de peptidoglicano, la membrana externa de
los Gram negativos tienen fosfolpidos y lipopolisacridos (LPS) hacen frente a
las condiciones exteriores. Y hacen que la membrana sea soluble en
solventes orgnicos, como por ejemplo la mezcla de alcohol/acetona lo cual
hace que se decolore, y como consecuencia tome el color de la safranina.

7 CONCLUSIONES
En la prctica se demostr la existencia de dos grupos principales de
bacterias, que fueron las gram positivas y las gram negativas; esto
mediante la utilizacin de la tcnica de tincin diferencial de gram, en el
cual las gram positivas toman una coloracin azul, mientras que las gram
negativas toman una coloracin roja, se comprob que esto depende de la
estructura de la pared de las bacterias, ya que las gram positivas poseen
una gruesa capa de peptidoglucano, mientras que las gram negativas
cuentan con una delgada capa de este compuesto, por lo que ellas no se
tornan azul.

8 CUESTIONARIO
6

9 BIBLIOGRAFA
Microbiologa clnica. (2008). Estructura de los microorganismos. Editorial
Unavarra. Espaa
https://www.ugr.es/~eianez/Microbiologia/05pared.htm
http://www.biologia.edu.ar/bacterias/micro4.htm
http://acmundomicro.blogspot.pe/2015/05/cuadro-comparativo-de-las-gram-
y-las.html