INDICE

INTRODUCCIN..................................................................................................2

PROPIEDADES DE LA UNIN ANTGENO-ANTICUERPO..............................2

EXPRESIN DE LA UNION ANTIGENO-ANTICUERPO IN VITRO..................3

1. Reaccin de Neutralizacin.....................................................................3

2. Reaccin de Precipitacin.......................................................................3

2.1. Inmunodifusin Pasiva.........................................................................3

2.2. Inmunodifusin Activa.........................................................................4

3. Reaccin de Aglutinacin........................................................................4

4. Reaccin de Inmunofluorescencia..........................................................4

5. Reaccin de fijacin de Complemento.....................................................5

INTRODUCCIN

El antgeno es una sustancia extraa que se introduce al interior de nuestro

organismo provocando una respuesta inmunitaria estimulando la produccin de
anticuerpos, la reaccin antgeno-anticuerpo es la especificidad en la que un
antgeno solo puede combinarse con el anticuerpo que lo induce a una
estrecha relacin. La unin entre stos se lleva a cabo en la formacin de un
enlace entre la regin fijadora del antgeno de la inmunoglobulina y el
determinante antignico.

Esta reaccin antgeno-anticuerpo puede conducir in vivo a la neutralizacin del

efecto txico de una toxina bacteriana o a la inhibicin de la multiplicacin de
un virus, tambin puede ser observable directamente como la formacin de un
precipitado o la aglutinacin celular, a la vez puede presentar reacciones
biolgicas subsiguientes a las anteriores (lisis bacteriana).

PROPIEDADES DE LA UNIN ANTGENO-ANTICUERPO

1.- Especificidad: capacidad de los anticuerpos para diferenciar entre antgeno

(epttopos) estructuralmente muy prximos o parecidos. Los anticuerpos
reaccionan de forma ms eficaz con los antgenos que desencadenaron su
produccin (antgenos homlogos), que con antgenos similares u otros
antgenos (antgenos heterlogos). Los elementos estructurales del epitopo que
destacan de la masa central del inmungeno se comportan
como inmunodominantes, y son particularmente significativos en la
determinacin de la especificidad. Estos anticuerpos son muy discriminadores y
distinguen fcilmente entre dos molculas que difieren en un carbono, o incluso
entre ismeros de la misma molcula.

2.- Afinidad: fuerza de unin entre el antgeno y el anticuerpo en el

inmunocomplejo elemental definida por la suma de las fases de unin y
repulsin que concurren en los lugares de interaccin. Los complejos
inmunitarios de escasa afinidad son ms persistentes in vivo y tienden a inducir
fenmenos de autoinmunidad. Los complejos de alta afinidad son eliminados
con ms eficacia y no tienden a inducir fenmenos autoinmunitarios.

3.- Avidez: fuerza de unin de un antgeno polivalente con su poblacin de

anticuerpos de especificad mltiple; es decir, la afinidad global de todas las
molculas que constituyen el retculo o complejo antgeno-anticuerpo.
EXPRESIN DE LA UNION ANTIGENO-ANTICUERPO IN VITRO

Dependiendo de la naturaleza del antgeno y del anticuerpo y de las

condiciones de la reaccin se pueden observar diferentes tipos de reacciones
serolgicas:

1. Reaccin de Neutralizacin

Mediante anticuerpos especficos (sueros) se pueden neutralizar antgenos

como toxinas, virus o enzimas, su unin provocar la neutralizacin y ast no
podr ejercer su efecto toxico. Los anticuerpos neutralizantes requieren un solo
tipo de combinacin con el antgeno para poder actuar y ast pueden ser
univalentes, bivalentes o multivalentes. Un antisuero que contiene anticuerpos
neutralizantes contra una toxina se denomina "antitoxina".

2. Reaccin de Precipitacin

La reaccin de precipitacin ocurre cuando se combina un anticuerpo divalente,

con un antgeno soluble y conlleva a la formacin de agregados que precipitan
en un punto de concentracin ptima entre ambos. Estas reacciones de
precipitacin son fcilmente observables "in vitro", especialmente mide
concentraciones de anticuerpos. Para que la precipitacin ocurra en forma
mxima se necesita que tanto el antgeno como el anticuerpo estn en
concentraciones ptimas, cuando cualquiera de los reaccionantes estn en
exceso no se pueden formar grandes agregados antgeno-anticuerpo.

Segn su clasificacin son:

2.1. Inmunodifusin Pasiva

a. Prueba del anillo o prueba de la interfase: se realiza deslizando unas

gotas de la solucin de antgeno sobre la superficie de un suero sin diluir, si se
produce la reaccin aparece un anillo de precipitacin en la interfase suero.

b. Difusin en Gel: tcnica de uso frecuente y son:

Difusin simple en tubo: se realiza en un gel de Agar, que contiene el

anticuerpo o el antgeno solidificado en el interior del tubo, sobre cuya
superficie se aade, en fase lquida, una solucin de antgeno o de anticuerpo
segn el caso.

Doble difusin en tubo: idntica a la anterior con la diferencia entre la

columna de Agar que contiene el anticuerpo y la fase que contiene el antgeno
se interpone una columna de Agar, en cuyo espesor se produce el encuentro
de ambos reactantes.

Doble difusin en placa: se realiza en pocillos perforados en una capa de

Agar, en los que se vierten soluciones de antgenos o anticuerpos y la difusin
perifrica en el espesor del Agar de ambos reactante se encontrar a cierta
distancia de los pocillos, produciendo bandas de precipitacin.

2.2. Inmunodifusin Activa

a. Contrainmunoelectroforesis: se realiza en geles de Agar, en la placa se

abren dos pocillos; uno contendr antgeno y el otro anticuerpo, luego la placa
es sometido a un campo electrofortico, antgeno y anticuerpo emigran uno
hacia el otro hasta encontrarse y producir una banda de precipitacin si existe
especificidad entre los dos reactantes.

b. Electroinmunoanlisis

Electroinmunodifusin en dos dimensiones: los antfgenos son sometidos

a un campo electrofortico en un gel que contiene el anticuerpo. El anticuerpo
permanece fijo y el antgeno emigra en el gel formndose precipitados en forma
de "cohetes".

Electroforesis cruzada de Laurell: se realiza una electroforesis de las

protenas a diferenciar. Una vez efectuada la separacin, la placa de Agar se
adhiere a otra que contiene los antgenos y se somete a una electroforesis
cruzada, producindose una precipitacin en forma de cohetes.

3. Reaccin de Aglutinacin

Cuando un antgeno particulado (bacterias, clulas o hemates) reacciona con

su anticuerpo especfico (divalente por lo menos), se observa la formacin de
grumos o agregados de estas partculas, esto se conoce como aglutinacin. En
estas reacciones el determinante antignico est sobre la superficie de una
partcula o de una clula.

Estas reacciones son ms sensibles que las de precipitacin para detectar

pequeas cantidades de anticuerpos, debido a que relativamente pocas
molculas de anticuerpo pueden unir efectivamente un gran nmero de
partculas de antgeno en grumos gruesos macroscpicamente visibles. Es por
esto que cuando queremos aumentar la sensibilidad de una reaccin de un
antgeno soluble con su anticuerpo especfico, se transforma el antgeno
soluble en particulado adsorbindolo o unindolo qumicamente a partculas
como esferas de ltex o arcilla coloidal y de esta manera pueden ser
detectados los anticuerpos por reacciones de aglutinacin, conocido
como AGLUTINACIN PASIVA.
Tambin se pueden aglutinar glbulos rojos y este fenmeno se conoce como
HEMAGLUTINACIN.

4. Reaccin de Inmunofluorescencia

Es una tcnica donde las molculas de anticuerpos son convertidos en

sustancias fluorescentes, unindoles qumicamente a compuestos orgnicos
fluorescentes tales como isotiocianato de fluorescencia (fluorescencia verdosa)
o rodamina (fluorescencia rojiza). Esto no altera la especificidad del anticuerpo
pero hace posible su deteccin cuando est unido a clulas o tejidos usando un
microscopio para fluorescencia. Los anticuerpos fluorescentes son de
considerable utilidad en microbiologa diagnstica.

Para demostrar la presencia de antgenos o clulas bacterianas utilizando

anticuerpos fluorescentes, existen dos procedimientos: el mtodo directo y el
indirecto.

4.1. En el mtodo directo, el anticuerpo marcado se utiliza para aadir contra

el antgeno especfico. La preparacin cubierta con una solucin del anticuerpo
fluorescente, se incuba durante un tiempo en una estufa, para que se produzca
la reaccin antgeno-anticuerpo. Se lava y se observa en el microscopio de
fluorescencia.

4.2. En el mtodo indirecto, la presencia del anticuerpo especfico sobre la

superficie de la clula es detectada por el uso de otro anticuerpo fluorescente
dirigido contra el anticuerpo especfico.

5. Reaccin de fijacin de Complemento

Una propiedad importante del sistema del complemento es que sus

componentes son enzimticamente alterados durante la reaccin, de modo que
no reaccionarn en una nueva secuencia de reacciones, es decir si el
complemento es consumido durante las reacciones antgeno-anticuerpo esto
es llamado FIJACIN DE COMPLEMENTO y ocurre cuando un anticuerpo de
tipo IgG o IgM reacciona con el antgeno en presencia de complemento, aun
cuando ste no sea requerido en la reaccin.

La prueba de fijacin de complemento se lleva a cabo en dos fases. En la fase

primera se mezclan el suero del paciente (previamente calentado a 56C.) y el
antgeno en presencia de una cantidad determinada de complemento; esta
mezcla es generalmente incubada durante 30 minutos a 37C. Si se forman los
complejos antgeno-anticuerpo, el complemento es fijado.

En la segunda fase se aade el sistema indicador que consiste en glbulos

rojos de carnero y anticuerpos contra glbulos rojos de carnero. La ocurrencia
de hemolisis indica que el complemento no fue utilizado por lo tanto, en la fase
1 no se ha producido una reaccin Ag-Ac especfica. En cambio, la ausencia de
hemolisis, indica que el complemento ha sido fijado y por lo tanto que en la fase
1 se ha producido una reaccin Ag-Ac, en este caso se considera una reaccin
de fijacin del complemento positiva, mientras que en el primer caso se
considera negativa la reaccin de fijacin de complemento.

BIBLIOGRAFA

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