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Prctica N5

Ttulo: Determinacin del fenotipo del factor Rh: Antgenos C,E,c,e.

Objetivo de aprendizaje: Al terminar la prctica el estudiante ser capaz de:

Identificar la presencia de antgenos del sistema Rh tipo C, c y E, e.


Discernir una posible genotipificacin de acuerdo a las tres nomenclaturas: Fisher-
Weiner-Rosenfield.

1. Introduccin

Los antgenos C,c,E,e han sido considerados despus del D unos de los ms importantes
en la prctica transfusional, relacionados por la capacidad inmungena que poseen y la
induccin en la produccin de anticuerpos en pacientes carentes del antgeno
correspondiente (Buelvas Corts,Armado; Muiz-Daz,Eduardo; Len de
Gonzlez,Gabriela, 2014). Tambin existen reportes de la presencia de Eritroblastosis
fetal en nios con el antgeno E y madres carentes de este; a pesar de ser menos severa
que el antgeno D es de importancia clnica por la patologa que ocasiona en los recin
nacidos (Bonilla Zavala, Snchez Huerta, & Rivera Lpez, 2011), por lo que es necesario
conocer el fenotipo del Rh no solamente en personas D negativos sino a nivel de toda la
poblacin.
Se han venido empleando varias nomenclaturas para definir genotipos y fenotipos de este
sistema, basados en funcin de algunas teoras como las formuladas por Fisher-Race que
denomin a los antgenos por separado D,C,c,E,e; seguido de la formacin de tripletas
cuando se forman los haplotipos. CDe/CDE (Aven, 2007).
Weiner en cambio, asign a cada haplotido empleando la letra R para aquellos que
presentan el D positivo y r para los que carecen del antgeno (Buelvas Corts,Armado;
Muiz-Daz,Eduardo; Len de Gonzlez,Gabriela, 2014).
La prueba de identificacin de los fenotipos del sistema Rh se fundamenta en la reaccin
antgeno-anticuerpo y su visualizacin mediante la aglutinacin, para ello se utiliza
suspensin de clulas rojas y reactivos monoclonales anti-C, anti-c; anti-E y anti-e
(Asociacin Americana de Bancos de Sangre, 2012).

2. Prctica

2.1 Reactivos

Clulas rojas del donante


Anti-D
Anti-C, c, E, e

2.2 Materiales:

Cuaderno de laboratorio
Pipeta pasteur
Porta-objetos
Tubos
3. Procedimiento: Se tipificar 2 muestras de sangre: Grupo directo en tubo, grupo
inverso, factor Rh y fenotipos C,c,E,e.

a) Enumerar cinco tubos: cdigo # de la muestra en cada tubo de sangre adems


coloque las siglas: anti-D; C; c; E; e
b) Prepare una suspensin de eritrocitos del 3-5% en solucin salina
c) Coloque una gota de cada reactivo en cada uno de los tubos.
d) Coloque una gota de suspensin de eritrocitos en cada tubo
e) Agite suavemente
f) Centrifugar 15 seg a 3000 rpm.
g) Agite suavemente el tubo y re-suspenda el botn celular. Examine las reacciones
resultantes macroscpicamente.
h) Observe la presencia del botn de aglutinacin en cada tubo

Ejemplo:
Cdig Anti Anti Anti Anti Anti Anti Anti Anti Resultados
o del -A -B -AB -D -C -c -E -e
tubo
Fenotipo Genotip
o
34 (-) (+) (+) (+) (+) (-) (-) (+) BRh(D)+ CDe/CD R1/R
e 1
23 (+) (-) (+) (-) (+) (-) (-) (+) ARh(D)R Cde/cdE r/R2
h-

Definicin de la potencia de la reaccin

Cuando se leen los resultados es necesario que diferencie la potencia de las reacciones;
en general se utilizan por puntajes:

Aglutinacin completa de todas las clulas

4+
Aglutinacin de la mayora de clulas

3+
Aglutinacin a simple vista

2+
Positividad dbil

1+
No se observa aglutinacin

Negativo
Lisis de glbulos rojos (hemolisis)

Informe de Laboratorio: Siga el formato de Informe de Laboratorio (Anexo 3):

1) Realice un reporte y analice los resultados obtenidos.

Responda el siguiente cuestionario:

2) De los resultados obtenidos determine el fenotipo y genotipo y clasifquelos de


acuerdo a las nomenclaturas de Fisher/Race; Weiner y Rosenfield.

3) Qu importancia tiene la determinacin del fenotipo del Rh, en personas Rh


negativas y positivas?.

4) Las respuestas se basarn en un artculo cientfico el que deber ser enviado


conjuntamente con el informe. La fecha del artculo debe ser entre el 2012 en
adelante; fechas inferiores no sern tomados en cuenta.

Bibliografa
Recomendada

Asociacin Americana de Bancos de Sangre. (2012). Manual Tcnico de Bancos de


Sangre (Vol. 17 Edicin). (A. A. Inmunohematologia, Trad.) Argentina.

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