TALLER 3.

Instrumental

1. Describa cules son los componentes bsicos de un espectrmetro.

2. La absortividad molar de una solucin acuosa es 200 dm3 mol-1 cm-1. Calcular el porcentaje de transmitancia a
travs de una celda de 1.00 cm y que es llenada con la solucin acuosa con concentracin de 5x10-3 mol dm-3.

3. El -caroteno tiene una absortividad molar de 100000 dm3 mol-1 cm-1 a cierta longitud de onda. Calcular la
cantidad de caroteno en una celda de 1.00 cm necesario para absorber el 90% de la radiacin incidente.

4. Explique por qu los complejos de metales de transicin son coloreados.

5. Un compuesto tiene una absortividad molar de 2.17 x 103 L cm-1mol-1. Que concentracin de compuesto se
necesitara para obtener una disolucin que tiene una transmitancia de 8.42 por 100 en una cubeta de 2.5 cm?
R: 1.98 x 10-4.

6. Mediante una tcnica de espectrofotometra se determin el contenido de fsforo en un mineral. El

procedimiento empleado se describe a continuacin: 8.35 g de muestra se disuelven y se tratan de manera
que todo el fsforo se transforme en el complejo azul de ortofosfato y se completa con agua destilada a
volumen final de 100 mL. La transmitancia de la solucin resultante es 30.6 %. Si la solucin patrn de
ortofosfato de sodio, que se trata de igual manera, y que tiene una concentracin final de 2.467x10 -4 M
dio una transmitancia de 20.5 %, calcule el contenido de fsforo en la muestra expresado en ppm de
Na3PO4.

7. La cafena (C8H10O2N4H2O) posee una absorbancia de 0.510 a 272 nm y 1 cm de paso ptico en disoluciones
de concentracin de 1 mg/100 mL. Una muestra de 2.5 g de caf soluble se diluye con agua a 500 mL. Se
toman 250 mL se aaden 25.0 mL de H2SO4 0.1 M y se diluye a 500 mL. Se mide la absorbancia a 272 nm
resultando ser 0.415. Calcular los gramos de cafena por Kg de caf soluble que tiene muestra muestra. Peso
molecular (cafena)=212 g/mol

8. Un analista desea determinar la concentracin exacta de una solucin de Sulfato de Cobre (II) por
espectroscopia Uv-Vis la cual se estima que esta alrededor de 0.01 mol.dm-3. El analista cuenta con una
solucin estndar de 1 mol.dm-3 de Sulfato de Cobre (II). Describa detalladamente el proceso para realizar
dicho anlisis y obtener una concentracin lo ms exacta posible.

9. Se prepara una solucin estndar de 4.95X10-3 M de un compuesto tomando 2 mL de esta solucin y

diluyndola con un solvente a 25 mL. El estndar diluido tiene una absorbancia de 0.624 a 238 nm
en una celda de 1.00 cm. Un blanco que contiene solo el solvente tiene una absorbancia de 0.029 a
238 nm. La absorbancia de una muestra de concentracin desconocida de este compuesto preparada
en el mismo solvente tiene una absorbancia de 0.377 a 238 nm. Cul es la concentracin del
compuesto en la muestra? Cul es la absortividad molar de del compuesto a 238 nm?

10. Una de las formas para determinar hierro en alimentos, es convertir, todo el hierro presente a su estado Fe+3
con oxidantes, despus de lo cual se adiciona tiocianato de potasio, formando un complejo de color rojo que
permite su cuantificacin. El complejo FeSCN 2+, cuya longitud de onda mxima de absorcin es de 580 nm,
tiene una absortividad molar de 7.00 x 10 3 Lcm-1mol-1. Calcular:

a. La absorbancia a 580 nm de una solucin del complejo 2,22 x 10-4 M, si se mide en una cubeta de
1.25 cm. Rta.1.94
b. La absorbancia de una solucin cuya transmitancia es la mitad de la solucin anterior. Rta.2.24
 c. Qu concentraciones de Fe(III) podran determinarse, si se usan cubetas de 1.00 cm y la absorbancia
se mantiene entre 0.100 y 1,50? Rta. 1.43 x 10 -5 2.05 x 10 -4

11. La constante de equilibrio de la reaccin 2CrO4- + 2H+ Cr2O72- + H2O es de 4.1x1014. Las
absortividades molares de las dos especies principales en una solucin de K2Cr2O7 son:

CrO4- Cr2O72-
345 1,84 x 10 3 10,7 x 10 2
370 4,81 x 10 3 7,28 x 10 2
400 1,88 x 10 3 1,89 x 10 2

Se prepararon tres soluciones disolviendo 4.00 x 10 4, 2.00 x 10 4 y 1.0 x 10 4 moles de K2Cr2O7 en agua y
diluyendo hasta 1 litro con una disolucin tampn de pH igual a 5.6. Deducir los valores de absorbancia
tericos (cubetas de 1.00 cm) para cada solucin y representar los datos grficamente para (a) 345 nm, (b)
370 nm y (c) 400nm. Rta:

M K2Cr2O7 M CrO4- M Cr2O72- A345 A390 A400

4,0 x 10 -4 3,055 x10 -4 2,473 x 10 -4 0,827 1,649 0,621

12. Un producto alimenticio se someti a una serie de procedimientos experimentales para identificar presencia
de contaminantes donde se evidenci plomo luego del estudio. Por tanto, se llev a cabo un anlisis por
absorcin atmica para determinar el contenido del contaminante en la muestra. El procedimiento que se
sigui fue el siguiente: se tom 1.0 mL de la muestra y se diluy a un volumen final de 5.0 mL, donde se
obtuvo una seal de absorbancia de 0.293 a 283.3 nm. Una segunda muestra de 1.0 mL es fortificada con 1.00
L de un estndar de plomo de 1860 ppb y diluido posteriormente a un volumen final de 5.0 mL. Luego, se
realiz la medida de esta nueva muestra y se obtuvo una seal de absorbancia de 0.436 a la misma longitud de
onda. Determinar la concentracin de plomo en la muestra original.

13. Una alcuota de 25,0 ml de una solucin acuosa de quinina, utilizada como infusin antimalrica, se diluy a
50 ml y se encontr que tena una absorbancia de 0.832 a 348 nm cuando se midi en una celda de 2 cm. Una
segunda alcuota de 25 ml se mezcl con 10 ml de una disolucin que contena 23.4 ppm de quinina; despus
de diluir a 50,0 ml, esta disolucin present una absorbancia de 1,22 cuando se ley en la cubeta de 2,00 cm.
Calcular las partes por milln de quinina en la muestra. Rta. 20.1 ppm.

14. Los compuestos A y B absorben en la regin UV del espectro. La sustancia A tiene un mximo a 267 nm
(=175 L g-1cm-1) y un mnimo a 312 nm ( =12.6 L g-1cm-1). La sustancia B exhibe un mximo de absorcin
a 312 nm (a=186 l g-1cm-1) y no absorbe a 267 nm. Una solucin que contiene los dos componentes tiene una
absorbancia de 0.726 y 0.544 a 267 y 312 nm respectivamente cuando se utilizan celdas de 1 cm de camino
ptico. Cules son las concentraciones de A y B en mg/l?

15. Una muestra de 5,12 g de una muestra que contiene sulfato de cobre grado alimenticio, se disolvi en
solucin cida, luego se adicion un ligando que forma con el catin un complejo coloreado. A continuacin
se diluy con agua hasta 200,0 ml en un baln volumtrico. El anlisis se complet tratando las siguientes
alcuotas como se indica:

Volumen de reactivos, ml
Vol. de muestra, ml 3,82ppm Cu2+ Ligando H2O A (545nm,1,0 cm)
50,0 0,00 20,0 30,0 0,512
50,0 4,00 20,0 26,0 0,844
Calcular el porcentaje de cobre en la muestra.
16. Una disolucin que contiene el complejo formado entre Bi(III) y tiourea tiene una absortividad molar de 9,3
X 103 L cm-1 mol-1 a 470 nm.
a. Cul es la absorbancia de una disolucin 5,67 X 10-5 M del complejo a 470 nm en una celda de 1,00 cm.
Rta. 0,528.
b. Cul es el porcentaje de transmitancia de la disolucin descrita en a. Rta. 29,6%.
c. Cul es la concentracin molar del complejo en una disolucin que tiene la absorbancia descrita en a)
cuando se mide a 470 nm en una celda de 2,50 cm. Rta. 2,27 X 10-5 M.

17. Describa brevemente los siguientes trminos:

a. Fotoluminiscencia
b. Quimioluminiscencia
c. Fluorescencia
d. Fosforescencia
e. Conversin interna
f. Rendimiento cuntico

18. Qu caractersticas estructurales favorecen la fluorescencia?

19. Explique por qu es importante realizar espectroscopia de florescencia con bajas concentraciones del
compuesto.
20. Describa los componentes de un espectrofluorometro? Qu mtodo tiene mayor sensibilidad y selectividad
Uv-vis o fluorescencia? Por qu?

21. Explicar la diferencia que existe entre un espectro de emisin fluorescente y un espectro de excitacin
fluorescente. Cul se parece ms a un espectro de absorcin?

22. Para cul de los siguientes compuestos se espera un mayor rendimiento cuntico de fluorescencia?
Explicarlo.

23. Cmo afectan la temperatura y el tipo de solvente la fluorescencia de un analito?

24. Si en su laboratorio se necesita analizar Riboflavina (vitamina B2) en una muestra de alimento y usted
sospecha que esta se encuentra a niveles excesivamente bajos, Cul mtodo escogera usted, Uv-Vis o
fluorescencia y por qu?

25. La vitamina E tiene una de emisin de 280 nm. Una muestra de 0,842 g de leche en polvo se diluy a 1,0
litro con isopropanol. La fluorescencia de esta solucin fue de 280 U.F. Una mezcla de una alcuota de 25 ml de la
muestra con 5 ml de una solucin estndar de vitamina E de 0,250 ppm, dio una intensidad fluorescente de 670
unidades. Calcular el % de vitamina E en la muestra de leche.

26. En la determinacin fluorimtrica de la extraccin de dosis teraputicas de penicilina, la muestra de orina (10
mL) es primero extrada con cloroformo, y a 10 mL del extracto de cloroformo que contiene penicilina se le
aaden 5 mL de una solucin de benceno que contiene 10 mg de 2-metoxi 6-cloro 9-(8 aminoetil)- aminocridina
junto con 2 mL de acetona y 5 mL de una solucin de cido actico glacial al 1% en volumen. Despus de un
periodo de espera de una hora, la aminoacridina forma un producto de condensacin con la penicilina que es
aislado por una serie de extracciones.
Finalmente, una solucin acuosa acidificada del producto de condensacin; se coloca en una celda, se irradia con
luz ultravioleta a 365 nm y se mide la luminiscencia a 540 nm, determinndose la seal como lectura de corriente
en un galvanmetro. En el anlisis de una muestra de orina (10 mL) tratada de acuerdo con este procedimiento, el
galvanmetro registr 28,79 uA. Una muestra blanco (no contiene penicilina) dio una lectura de 9,13 uA,
mientras que dos soluciones patrones que contenan 0,65 y 1,50 g de penicilina por 10 mL dieron lecturas de
18,89 y 32,54 uA, respectivamente cuando se trataron por el procedimiento anterior. Calcular el contenido de
penicilina en la muestra de orina en microgramos. R: 1,285 g.

27. La micotoxina M1 encontrada en la leche (potente carcingeno, cuyo valor mximo permisible por la FDA es
de 0.5 ppb), tiene una de excitacin de 365 nm y una de emisin de 420 nm. Si las siguientes soluciones
estndar de M1 dieron, respectivamente:
[M1 ppb] Intensidad Fluores.
0,2 0,013
0,3 0,027
0,4 0,039
0,5 0,045

Construir una curva de calibracin y deducir la ecuacin de la recta generada.

Si una muestra de leche se diluye a la mitad y al analizar su fluorescencia, a las mismas condiciones de los
estndares, dio una intensidad fluorescente de 0,031, Cul es el nivel de la micotoxina M1 en la muestra de
leche?
De acuerdo al procedimiento descrito, por qu cree usted que no se requiri etapa adicional, como la
derivatizacin?

28. Varias soluciones (50 mL) que contienen diferentes concentraciones de zinc son acomplejados con un exceso
de 8-hidroxiquinolina y extradas con 100 mL de cloroformo. La fluorescencia medida de cada solucin es la
siguiente:

Zn (mg/100mL) Lectura de fluorescencia (F), %

3 15,2
4 20,1
6 31,0
8 39,8
10 51,1
12 61,0
14 72,3
16 85,7
 18 95,3
20 100,0

Una solucin desconocida fue tratada de la misma forma que los patrones y la lectura de la fluorescencia fue
del 37%.

a. . Deducir la ecuacin por el mtodo de mnimos cuadrados.

b. Calcular la concentracin de Zn en la muestra.

29. Si en su laboratorio de anlisis qumico hay equipos de U.V. y fluorescencia, y la empresa elabora
premezclas alimenticias, Cmo justificara a su jefe la compra de un equipo de absorcin atmica?

30. Describa las principales diferencias entre la tcnica de absorcin atmica y emisin atmica.

31. Definir los siguientes trminos: Atomizacin, nebulizacin, quemador, plasma, chisporroteo, supresor de
ionizacin, interferencia espectral, modulacin, amortiguador de radiacin, agente de liberacin, agente
protector.

32. Una muestra de 25 mL que contiene Cd+2 dio una seal instrumental de 20,5. Al adicionar 0,5 mL de un
patrn que contiene 0,03 M de cadmio, la seal aumento hasta 50,4. a) Determine la concentracin de cadmio
en la muestra asumiendo que la seal es directamente proporcional, a la concentracin de analito. b) Que
mtodo de calibracin se esta aplicando en el anlisis? Explique.

33. Una muestra molida y seca de 5,0 g del alga marina espirulina se macer con solucin buffer de extraccin,
luego se trat con cido tricloroactico para precipitar las protenas, despus de la filtracin, se complet a
volumen a 100 ml con agua destilada. 5,0 ml de esta solucin se llevaron a pH de 3,0 y se extrajeron con dos
porciones de 5,0 ml de metil-isobutil-cetona, que contenan el acomplejante de plomo APCD. El extracto se
aspir en una llama de aire/acetileno y produjo una absorbancia de 0,501 cuando se ley a 283,30 nm.
Alcuotas de 5,0 ml de soluciones estndar de plomo que contienen 0,400 y 0,600 ppm de Pb se trataron de
igual forma y produjeron absorbancias de 0,396 y 0,500 respectivamente. Calcular los ppm de Pb en la
muestra, asumiendo que se cumple la ley de Beer.

34. Con el fin de determinar cromo en vasijas de cermica empleadas para almacenar alimentos, se someten a
lixiviacin con solucin de HCl 1% v/v. De la solucin de extraccin se toman alcuotas de 10 ml y se
adicionan a cada uno de cinco balones de 50.0 ml. Luego se adicionan los siguientes volmenes de un
estndar de cromo de 12,2 ppm y las soluciones se diluyen hasta volumen con HCl 1% v/v, obtenindose las
siguientes lecturas en un equipo de absorcin atmica:
Muestra - ml ml de Estndar Absorbancia
10.0 0.0 0.201
10.0 10.0 0.292
10.0 20.0 0.378
10.0 30.0 0.467
10.0 40.0 0.554
a. Deducir la ecuacin por el mtodo de mnimos cuadrados.
b. Calcular en ppm la concentracin de cromo en la muestra.

35. Un acero de alto grado se analiz para ver su contenido en Mn, usando para su determinacin Fe como
estndar interno. Se prepar una muestra estndar que contena Fe y 5 mg L -1 de Mn cuya lectura de
intensidades absolutas fueron 8.0 (2933 A) y 10.2 (2932 A) respectivamente. Una muestra desconocida de
acero se trat de la misma forma, es decir, se le aadi la misma concentracin de Fe y se midieron las
 intensidades absolutas a las longitudes de onda correspondientes para cada metal obtenindose valores de 8.2
y 12.5 para Fe y Mn respectivamente.
a. Explica brevemente en qu consiste el mtodo de calibracin usando patrn interno.
b. calcula la concentracin de Mn en la muestra de acero desconocida. Rta. 5.98 mg L-1

36. En el desarrollo de un procedimiento para anlisis de sodio por emisin de llama a una = 589 nm, en una
matriz alimenticia, el analista observa que una solucin de muestra que contiene 1,0 ppm de sodio da una
emisin de 34% mientras la misma solucin de 1,0 ppm de sodio a la que se adicionan 10 ppm de potasio, da
una lectura de 43%. En vista de que una solucin de 10 ppm de potasio (sin sodio) no da una lectura
apreciable a =589 nm, d una explicacin del aumento debida a la presencia de potasio en la solucin.

37. Se desea determinar el contenido de Magnesio en un suplemento vitamnico que contiene como aditivos
(saborizantes) compuestos que presentan una importante absorbancia en la regin de 450 a 700 nm. Las
vitaminas que forman parte del suplemento presentan emisin de fluorescencia entre 400-560 nm. De los
siguientes mtodos cul/es podr utilizar y cul/es no. Justifique en los casos afirmativos los pasos
adicionales, mencionando los reactivos necesarios.
a) Espectroscopa de absorcin atmica
b) Espectroscopa UV-visible
c) Espectroscopa de fluorescencia

Mg = 5800 a 560 nm

38. Para la determinacin de aluminio en muestras de agua de ro se aplic el mtodo de adicin de estndar. En
todos los casos se utiliz un volumen de la muestra de 10 mL, y a las cuales se les adiciono una solucin
patrn (S) de aluminio 0,15 mM. Finalmente, todas las soluciones se diluyeron a un volumen de 25 mL y se
obtuvieron los resultados siguientes:

Solucin Seal
Muestra sola 5,0

Muestra + 2 mL de S 10,1
Muestra + 4 mL de S 15,1

Muestra + 6 mL de S 20,0

Determine la concentracin de Al en la muestra a partir de:

a) Una grfica de la seal medida, en funcin de la concentracin del estndar y considere el efecto de dilucin.
b) Una grfica de la seal medida, en funcin del volumen del estndar aadido.