PROCESOS QUMICOS INDUSTRIALES

Laboratorio N 01

CATLISIS ENZIMTICA

INFORME

Integrantes:
Castaeda Chacn, Danny
Quispe Aylas, Sharon

Seccin: C11 4 B

Profesor: Hinostroza, Robert

Fecha de realizacin: 20 de febrero

Fecha de entrega: 06 de marzo
Laboratorio de procesos qumicos N 01

INDICE:

Resumen pg. 3
Objetivos pg.3
Diagrama de flujo. pg.3-6
Discusin de resultados pg. 6-8
Conclusiones pg.8
Cuestionario. pg.9-12
Bibliografa pg. 12

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Laboratorio de procesos qumicos N 01

RESUMEN:
En el presente trabajo desarrollaremos el anlisis cualitativo de enzimas y sus
aplicaciones, tomando como referencias sus propiedades catalizadoras en una
reaccin qumica, Adems cabe recalcar que otra de los anlisis que se realiza
es el reconocimiento de azucares reductoras, tomando como referencia los
reactivos de Fehling.
En nuestra primera experiencia compararemos la importancia de una enzima
en una reaccin de descomposicin (perxido de hidrogeno). Mientras que en
la segunda experiencia analizaremos detectaremos la aparicin de azucares
reductores mediante la solucin de Fehling. Mientras que la experiencia tres
analizaremos azucares en presencia de alcohol yodado. Mientras que en la
experiencia cuatro analizaremos la importancia de los catalizadores
enzimticos frente a una reaccin de azucares.

OBJETIVOS:

Describir y analizar la accin de una enzima como biocatalizador.

Argumentar acerca de las reacciones con catlisis enzimtica marcando
diferencias y semejanzas con las que no la tienen.
Relacionar la catlisis enzimtica con procesos industriales donde es
necesaria su aplicacin.

DIAGRAMA DE FLUJO:
Experiencia 1:

Vaso de precipitado con 25 ml Vaso precipitado con 75 ml de

de perxido de hidrgeno perxido de hidrgeno + hgado

Comparar

2
Laboratorio de procesos qumicos N 01

Experiencia 2:

Glusosa Sacarosa Almidn

Aadir 1ml de Fehling A + 1ml de Fehling B

Experiencia 3:

1 ml 1ml 1ml
Glusosa Sacarosa Almidn

Aadir 1ml Lugol

3
Laboratorio de procesos qumicos N 01

Experiencia 4.1:

Aadir 8 gotas HCl

Bao mara 5

2ml
Sacarosa
1ml de Fehling A +
1ml de Fehling B

Bao mara 2

Experiencia 4.2:

3 gotas de HCl
37.5 ml de Almidn
Agitar

Ebullicin

1ml de
Aadir 2 gotas de Lugol
15

5 1ml de la
solucin
1ml de la
solucin

10

1ml de la
solucin
4
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Experiencia 4.3:

2 ml de saliva
37.5 ml de Almidn
Agitar

Calor 2

1ml de
Aadir 2 gotas de Lugol
15

5 1ml de la
solucin
1ml de la
solucin

10

1ml de la
solucin

5
Laboratorio de procesos qumicos N 01

DISCUCIN DE RESULTADOS:
Experiencia 1: Accin cataltica de una enzima
H2O2(ac) H2O(l) + O2(g)

En este primer experimento se observ que en el primer vaso el perxido de

hidrogeno se descompone lentamente dando como productos oxgeno y agua.
Sin embargo, en el segundo vaso la descomposicin fue rpida debido a que
se observ instantneamente una gran cantidad de espuma, pues en este caso
usamos un catalizador biolgico (catalasa) para acelerar la reaccin.
Experiencia 2: Prueba de Fehling

Formaci
Solucin Coloraci
N Tubo n de
de n
Precipit
Glucosa a do Rojo
1 S
Ladrillo
Azul
Sacarosa
2 No oscuro
(solucin)
Azul
3 Almidn No oscuro
(emulsin)

El ensayo con el licor de Fehling se fundamenta en el poder reductor del

grupo carbonilo. ste se oxida a un cido carboxlico y reduce la sal de
cobre(II) en medio alcalino a xido de cobre (I), que forma un precipitado de
color rojo.
De acuerdo a la estructura de glucosa y la sacarosa, el primero tiene grupo
carbonilo (-CHO) y el segundo no. Por lo tanto, la glucosa es un azcar
reductor debido a la presencia del grupo carbonilo en su estructura,
mientras que la sacarosa es un azcar no reductor.

Por otro lado, el almidn es una mezcla de dos tipos de polisacridos: la

amilosa y amilopectina. La amilosa es un polisacrido de tipo lineal, cuyas
unidades de glucosa estn unidas por enlaces -1.4. La amilopectina es un
polmero de glucosa muy ramificado. Al tratarse de una mezcla de
polisacridos, carece de grupo carbonilo, por lo que no ser un azcar
reductor.

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Laboratorio de procesos qumicos N 01

Experiencia 3: Prueba de Lugol

Coloracin al
N Tubo Solucin de agregar
Lugol
Glucosa
1 -
Sacarosa
2 -
3 Almidn Negro azulado

La prueba del yodo se utiliza para descubrir pequeas cantidades de almidn

en una solucin. El almidn produce un color negro azulado oscuro, cuando se
mezcla con el reactivo de Lugol. Esta prueba se puede utilizar para observar la
hidrlisis del almidn, ya que el color cambia lentamente a medida que el
almidn se degrada y se convierte en nuevos productos de cadenas ms
cortas.
Por lo tanto, la prueba dio positiva solo en el tubo N 3, debido a que se
contena la solucin de almidn, generndose un color azul intenso, mientras
que en los otros tubos de ensayo (que se tenan monosacridos y disacridos)
no hubo cambio alguno.
La aparicin del color azul intenso, manifiesta la formacin de un complejo de
almidn con yodo.

Experiencia 4: Hidrlisis cida de un azcar no reductor

La sacarosa es un carbohidrato de tipo disacrido que est

compuesta por una unidad de glucosa y fructosa. El enlace ocurre
entre el grupo aldehdo de la glucosa y el grupo cetona de la
fructosa.
Por lo tanto, el grupo aldehdo de la glucosa como el grupo cetona
de la fructosa estn relacionados en el enlace, la sacarosa no tiene
grupo aldehdo, ni grupo cetona, potencialmente libres, y no es un
azcar reductor. Esta es la razn por la cual da negativo a la Prueba
de Fehling.
Sin embargo, la sacarosa puede ser hidrolizada por cidos o por
enzimas, como en este caso que se us cido clorhdrico. Esta
hidrlisis de sacarosa produce una mezcla de fructosa y glucosa,
llamada azcar invertida.

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Laboratorio de procesos qumicos N 01

Experiencia 5: Catlisis mediante cidos y enzimas

Amilasa (Saliva)

La hidrlisis parcial del almidn se puede lograr mediante enzimas

y cidos, por lo que en la prueba de Lugol, se debi formar un color
rojizo debido a la presencia de dextrinas, producto de la hidrlisis.

CONCLUSIONES:
S determin que las enzimas son protenas catalizadoras encargadas de
aumentar el metabolismo en los seres vivos (acelera las reacciones
bioqumicas).
La hidrlisis de carbohidratos se generan por accin de cidos o
enzimas.

CUESTIONARIO:
1. Qu es una enzima?
Una enzima es una protena que se combina con uno o ms compuestos de
forma que reaccionan especficamente a mucha mayor velocidad que lo haran
sin el enzima. Las enzimas son como las dems protenas, tienen estructura
primaria y se pliegan en una conformacin particular de manera que sus grupos
reactivos estn dispuestos del modo apropiado para dar al conjunto actividad
biolgica. Los grupos reactivos de una enzima tiene dos misiones. Una es unir
los compuestos particulares en proximidad al sito donde tiene lugar la catlisis
y la otra funcin es realizar el mecanismo cataltico. [1]

2. Explique las teoras que explican la accin enzimtica.

El carcter protenico de las enzimas lleva a pensar en una interaccin entre el
sustrato y una porcin de la superficie de la protena enzimtica (en centro
activo) para explicar la accin enzimtica de las enzimas. Por otra parte, el
estudio cintico de las reacciones enzimticas nos muestra que la accin
procede a travs de la formacin de un complejo enzima-substrato; para una
reaccin monosubstrato.

E es la enzima, S el substrato, P el producto de la reaccin y ES el complejo

enzima-substrato.

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Laboratorio de procesos qumicos N 01

La suposicin de que la reaccin tiene lugar en la superficie de la molcula de

enzima da un carcter de catlisis heterognea a la accin enzimtica, de ah
que su velocidad pueda expresarse por una relacin anloga a la isoterma de
adsorcin de Langmuir.
Por otra parte, la especificidad de las reacciones enzimticas nos indica que la
interaccin enzima-substrato esta medida a travs de una disposicin
altamente precisa de los grupos qumicos de la enzima, de forma que solo
pueden entrar al centro activo las molculas que encajen perfectamente en los
mismos. De esta forma, una pequea variacin en la estructura molecular del
substrato podra impedir su fijacin al centro activo, estas ideas fueron
adelantas por Emil Fischer en 1894, cuando propuso su conocida analoga de
la llave y la cerradura para explicar la especificidad enzimtica; una enzima es
especifica hacia su substrato de la misma forma que una cerradura solo puede
ser abierta por una llave determinada. Esta idea se ha mantenido bsicamente
inalterada durante dcadas, y ha dado lugar a lo que podramos llamar el
modelo de interaccin estereoqumica que explica no solo la accin enzimtica,
sino muchos otros fenmenos biolgicos que tienen lugar a travs de la
interaccin de una protena y un ligando (por ejemplo, la accin hormonal y el
efecto de frmacos).
A pesar de su general aceptacin, el modelo de la llave y la cerradura no
explica algunos fenmenos en Enzimologa. Para eliminar estos inconvenientes
Koshland en 1959 amplio la hiptesis de la llave y cerradura para dar origen a
la teora de ajuste inducido, segn la cual, la fijacin del substrato al centro
activo altera la configuracin de la enzima de modo que acerca los grupos
encargados de su transformacin a sus objetivos especifico. Este punto de
vista est mas de acuerdo con lo que hoy sabemos de la estructura proteica,
que imaginamos mucho ms flexible que lo que supona; y as mismo encaja
con el modo de accin de los llamados efectores- alostricos. Esto no quiere
decir que se haya abandonado la idea de la llave-cerradura; de hecho, la
accin de muchas enzimas se puede explicar en esa lnea; el ajuste inducido
no ha hecho sino ampliar su significado; en un smil mecnico, podramos
hablar de llaves y cerraduras flexibles para exponer nuestro actual concepto de
la accin enzimtica. La teora del ajuste inducido conduce a un desarrollo
ulterior sobre la accin enzimtica. Esta puede ser descrita en trminos de
estabilizacin del estado de transicin. El estado de transicin es una especie
qumica inestable, situada en un mximo de energa potencial, con una
configuracin tridimensional que no es ni la de los reactivos ni la de los
productos, sino una forma intermedia. [2]

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Laboratorio de procesos qumicos N 01

3. Qu es una hidrlisis de un carbohidrato? Explique con una

ecuacin qumica.
La hidrlisis de un carbohidrato se exclusivamente en los disacridos
y polisacridos, ya que el objetivo es separar en molculas
individuales (monosacridos).

4. La hidrlisis de un carbohidrato slo puede ser enzimtica o de

qu otra manera se puede lograr?
Puede observarse la hidrlisis enzimtica de una protena por la disminucin de
la reaccin de Biuret o por la formacin de grupos amnicos o por la aparicin
de sustancias positivas a la ninhidrina.

5. Enuncie la ecuacin de Michaellis- Menten y explique el significado

de la misma.
El carcter protenico de las enzimas lleva a pensar en una interaccin entre el
sustrato y una porcin de la superficie de la protena enzimtica (en centro
activo) para explicar la accin enzimtica de las enzimas. Por otra parte, el
estudio cintico de las reacciones enzimticas nos muestra que la accin
procede a travs de la formacin de un complejo enzima-substrato; para una
reaccin monosubstrato.

E es la enzima, S el substrato, P el producto de la reaccin y ES el complejo

enzima-substrato.

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La suposicin de que la reaccin tiene lugar en la superficie de la molcula de

enzima da un carcter de catlisis heterognea a la accin enzimtica, de ah
que su velocidad pueda expresarse por una relacin anloga a la isoterma de
adsorcin de Langmuir. [2]

6. Indique ejemplos de la industria donde se explique la catlisis

enzimtica.
FERMENTACIN ALCOHOLICA.

El trabajo de Pasteur mostro que las fermentaciones son procesos vitales

que desempean una funcin de importancia fisiolgica fundamental para
la vida de muchas clulas. El desarrollo posterior de los conocimientos
acerca de la naturaleza de la fermentacin surgi como resultado de una
observacin accidental hecha por H. Buchner en 1987.Al intentar conservar
un extracto de levadura, preparado moliendo clulas de levadura con
arena, Buchner aadi una gran cantidad de azcar y quedo sorprendido
al observar un desprendimiento de dixido de carbono acompaado de
formacin de alcohol. Se haba descubierto as una preparacin enzimtica
soluble, capaz de llevar a cabo la fermentacin alcohlica.
La fermentacin alcohlica es un ejemplo conocido de los
procedimientos en que se efectan alteraciones enzimticas, tanto cuando
se agrega alguna enzima como cuando se aade algn microbio vivo
(levadura). Primero se calienta el grano amilceo para gelatinizar el
almidn, y luego se aade malta (que contienen enzimas diastticas) para
convertir el almidn en azcar fermentable (maltosa). Si el producto que
se desea obtener es alcohol, se agrega entonces levadura. El empleo de
amilasa en forma de malta es indudablemente la mayor aplicacin industrial
que tiene las enzimas, pero no es del todo conocida la accin de estas
amilasas. La elaboracin de vinagre con alcoholes es un proceso
enzimtico producido por un microbio vivo (Acetobacter aceti). Como el
alcohol es oxidado y convertido en cido actico con oxgeno de la
atmsfera. Aislada de las bacterias, la enzima cataliza igualmente la
oxidacin, pero es mucho ms econmico valerse de la clula viva intacta.

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Laboratorio de procesos qumicos N 01

BIBLIOGRAFA:

Arias, E. B. (2013). Compendio de enzimologa. Espaa: Ediciones

universidad salamanca.
McGilvery, R. W. (1997). Conceptos bioqumicos. Espaa: Editorial
Revert.

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