ALBUMINA (ALB)
Slo para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca. Respetar
Verde de Bromocresol
MANUAL
RX MONZA
PARA SU USO
La determinacin cuantitativa in vitro de albmina en suero y
plasma. Este producto es adecuado para su utilizacin de forma
manual y en el analizador Rx Monza.
Cat. No.
AB 362 R1. BCG Concentrado 6 x 13.5 ml
6 x 100 ml CAL Patrn 1 x 5.5 ml
SIGNIFICADO CLINICO (1)
La albmina es la protena srica ms abundante representando
el 55-65% de las proteinas totales. Se sintetiza en el hgado y
tiene una vida media de 2 a 3 semanas.
Las principales funciones biolgicas de la albmina son mantener
el equilibrio de agua en suero y plasma, transportar y almacenar
una amplia variedad de ligandos ej: acidos
grasos,calcio,bilirrubina y hormonas como tiroxina. La albmina
tambin es una fuente endgena de aminocidos.
La hipoalbuminemia est asociada con las siguientes condiciones
:analbuminemia; sintesis deteriorada de albmina en el higado;
enfermedades hepaticas; malnutricin o malabsorcin; shock
generalizado; quemaduras o dermatitis; enfermedades renales e
intestinales .La hiperalbuminemia tiene poca relevancia
diagnstica excepto tal vez en deshidratacin.
PRINCIPIO(2)
La medicin de albmina en suero se basa en su unin
cuantitativa con el indicador 3,3',5,5'-tetrabromo-m cresol
sulfontaleina (verde de bromocresol BCG). El complejo
AA
albmina-verde de bromocresol presenta una absorcin mxima
a 578 nm, siendo la absorbancia directamente proporcional a la
concentracin de albmina en la muestra.
G
PREPARACION Y EXTRACCION DE LA MUESTRA
Suero, plasma heparinizado o plasma con EDTA. Se pueden
utilizar los procedimientos normales de recogida y
almacenamiento del suero para las muestras que se vayan a
analizar con este mtodo. El suero es estable durante 3 das a
una temperatura de entre 2 y 8 C, o durante 6 meses a -20C.
COMPOSICIN DEL REACTIVO
Componentes Concentracin inicial de las soluciones
R1. Verde de Bromocresol (BCG) concentrado
Tampn succinato 75 mmol/l, pH 4.2
Verde de bromocresol (BCG) 0.15 mmol/l
Brij 35
Conservante
CAL Patrn Especifico para cada lote
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
las precauciones normales necesarias, que se requieren al
manejar reactivos de laboratorio.
Atencin: Patrn
El material de origen humano del que se deriva este producto ha
sido analizado a nivel de donante para el anticuerpo del Virus de
Inmunodeficiencia Humano (HIV 1, HIV 2), el Antgeno de
Superficie de Hepatitis B (HbsAg), y el anticuerpo del Virus de
Hepatitis C (HCV) y se ha encontrado que es NO-REACTIVO.
Los mtodos utilizadon estn aprobados por FDA.
Sin embargo, dado que ningn mtodo puede ofrecer una
seguridad total de la ausencia de agentes infecciosos, este
material y todas las muestras de pacientes se debern manejar
como posibles transmisores de enfermedades infecciosas y
eliminar apropiadamente.
Hojas Sanitarias y de Seguridad estn disponibles si se desean.
Los reactivos deben utilizarse solamente para su
propsito por personal de laboratorio cualificado, y bajo
condiciones de laboratorio apropiadas.
ESTABILIDAD Y PREPARACION DEL REACTIVO Y
DEL PATRON
R1. Concentrado BCG
Diluya el contenido de una botella con 87 ml de agua
SA
destilada. Estable durante 3 meses si se conserva entre
+15 y +25C.
M
CAL. Estandard
Contenido listo para su uso. Etable hasta la fecha de
caducidad si se conserva entre +15 y +25C.
MATERIALES SUMINISTRADOS
Concentrado BCG
Patron Albumina
MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS
Pipetas para dispensar volumenes 10 l y 3,0 ml.
Cronmetro y bao de agua o bloque de calentamiento para
mantener la temperatura entre 20 - 25C.
Espectrfotmetro con una capacidad de longitud de onda de
600 a 650 nm
Multisuero Valorado Randox Nivel 2 (No. Cat. HN1530) y Nivel
3 (No. Cat. HE 1532)
Srum de calibration Randox Nivel 3 (Cat. No. CAL 2351).
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 MANUAL AB 362

PROCEDIMIENTO(2) CONTROL DE CALIDAD

Utilice H2O de doble destilacin para realizar una nueva Se recomienda para el control de calidad diario Multisueros
calibracin de la ganancia en el modo cubeta. Seleccione ALB en Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel 3. Se deber de analizar dos
la pantalla Run Test (Realizar anlisis) y lleve a cabo un blanco de niveles de controles al menos una vez al da. Los valores
agua de la forma indicada. obtenidos debern encontrarse dentro del rango especificado. Si
los valores se encuentran fuera del rango y su repeticin excluye
Pipetee en una cubeta: error, se debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar programacin del instrumento y el origen de luz.
Blanco de reactivo S0 Patrn S1 Muestra 2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento de
H2O de doble destilacin 3 l - - bacterias puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
Patrn - 3 l - 4. Comprobar la temperatura de reaccin
Muestra - - 3 l 5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
Reactivo 1000 l 1000 l 1000 l 6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de
los Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28
Mzclelo e incbelo durante 20 minutos a 20-25 oC o durante 94422413.
10 minutos a 37 oC.
Introdzcalo en el soporte de la celda de flujo de RX Monza y INTERFERENCIA
pulse Read (Leer) en un plazo de 60 minutos. Se analizaron los siguientes analitos hasta los siguientes niveles y
se encontr que no interfieren:
CALIBRACIN PARA RX MONZA
Se recomienda llevar a cabo una calibracin diaria mediante el Bilirrubina 500 mol/l
patrn CAL que se proporciona en el kit o mediante el suero de Intralpido 1,2%
calibracin de nivel 3 de Randox. Triglicridos 22,75 mmol/l
Hemoglobina 6 g/l
PARA USO MANUAL
VALORES DE NORMALIDAD EN EL SUERO(2)
Longitud de onda: 578 nm o 623 nm Adultos 38 - 44 g/l (3,8 4,4 g/dl)
Espectrofotmetro: 630 nm (600 - 650 nm) Recin nacidos 38 - 42 g/l (3.8 - 4.2 g/dl)
SA
Cubeta: 1 cm de espesor
Temperatura de incubacin: 20 - 25C Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango
Medicin: Frente al blanco de reactivo de referencia para considerar las diferencias en edad, sexo, dieta
M

y localizacin geogrfica.
Pipetear en tubos de ensayo:
CARACTERISTICAS ESPECIFICAS DE
AA

Reactivo Patrn Muestra FUNCIONAMIENTO

Los siguientes datos de funcionamiento se obtuvieron mediante
H2O destilada 0,01 ml --- --- el analizador Rx Monza a una temperatura de 37 oC.
G

Patrn (CAL) --- 0,01 ml ---

Suero o Plasma --- --- 0,01 ml LINEALIDAD
Reactivo de BCG (R1) 3,00 ml 3,00 ml 3,00 ml Este mtodo es lineal hasta 7,55 g/dl. Si la concentracin
sobrepasa este valor, la muestra se debe diluir 1 + 1 con una
solucin del 0,9% de NaCI y debe someterse a ensayo de nuevo.
Mezclar e incubar durante 5 min entre +20 y +25C. Medir la Multiplique el resultado por 2.
absorbancia de la muestra (Amuestra) y del patrn
(Apatrn) frente al blanco de reactivo SENSIBILIDAD
La concentracin mnima detectable de albmina con un nivel
CLCULO MANUAL aceptable de precisin se ha determinado en
La concentracin de albmina en la muestra puede 0,287 g/dl.
calcularse utilizando la frmula siguiente:

Conc. de albmina (g/l o g/dl)

Amuestra
= x Concentracin

Apatrn del patrn

NORMALIZACIN
El suero de calibracin de nivel 3 de Randox sigue lo indicado en
el material de referencia DA470 de la albmina (IFCC).

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 MANUAL AB 362

PRECISION (Suero)
Anlisis (Intra)
Nivel 1 Nivel 2
Media (g/dl) 2,86 4,36
DE 0,036 0,031
CV (%) 1,28 0,71
n 20 20

Anlisis (Inter)
Nivel 1 Nivel 2
Media (g/dl) 2,86 4,36
DE 0,129 0,174
CV (%) 4,52 3,99
n 20 20

CORRELACION
Se compar el mtodo Randox (Y) con un mtodo comercial
disponible (X). Se analizaron 51 muestras con valores
abarcando un rango de 22 a 46 g/l en un analizador Hitachi 747.
El anlisis de regresin lineal de los datos result en la siguiente
ecuacin:

Y = 1,073 X + 0,204
con un coeficiente de correlacin r = 0.9910

Se analizaron 40 muestras con valores de entre 1,66 y 4,51 g/dl.

REFERENCIAS
1. Grant G.H., et al Amino Acids and Proteins; Fundamentals of
SA
Clinical Chemistry, Tietz N.W. Editor, Third Edition, WB
Saunders Company Philadelphia USA, 328-329, 1987
2. Doumas, B.T., Watson, W.A., Biggs, H.G., Clin. Chim. Acta.
M

1971; 31: 87.

AA
G

Revised 10 Sep 10 bm
Rev. 001

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FOSFATASA ACIDA ESTABILIDAD Y PREPARACIN DE REACTIVOS
R1. Bufer

(ACP) Contenios listos para su uso. Estable hasta la fecha de

caducidad si se conserva entre +2 to +8C.
Mtodo Colorimtrico
MANUAL Para la Fosfatasa cida total:
RX MONZA R2. Substrato (R2A)
Disuelva el contenido de 1 botella de sustrato R2 en 3 ml
PARA SU USO de tampn R1. Estable durante 5 das si se conserva entre
Para el anlisis cuantitativo in vitro de Fosfatasa Acida en el suero. +2 y +8C o 24 horas entre +15 to +25C, Conservese
Este producto es adecuado para un uso manual o en el analizador protegido de la luz.
Rx Monza.
Para la Fosfatasa cida no prosttica:
No. Cat. R2. Substrato (R2B)
AC 1011 R1. Tampn 1 x 70 ml Disuelva el contenido de 1 botella de sustrato R2 en 3 ml
20 x 3 ml R2. Sustrato 20 x 3 ml de tampn R1. A continuacin, transfiera el contenido a un
R3. Tartrato 10 frascos vial de tartrato R3. Estable durante 5 das si se conserva
SAM STAB Estabilizador 1 frasco entre +2 to +8C o 24 horas entre +15 y +25C,
Conservese protegido de la luz.
METODO COLORIMETRICO
MATERIALES SUMINISTRADOS
PRINCIPIO(1) Tampn
fosfatasa cida Sustrato
1-naftil-fosfato + H2O fosfato + 1-naftol Tartrato
Estabilizador
1-naftol+sal de 4-cloro-2-metilfenildiazonio*
colorante azo MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS
Multisueros Valorados Randox Nivel 2 (No. Cat. HN 1530) y
SA
* = Sal TR Fast Rojo Nivel 3 (No. Cat. HE 1532)
Srum de calibration Randox Nivel 3 (Cat. No. CAL 2351).
PREPARACION DE LA MUESTRA
Suero. La muestra puede ser estabilizado mediante la adicin de PRPROCEDIMIENTO
M

1 gota de cido actico estabilizador (STAB SAM) a 1 ml de FOSFATASA CIDA TOTAL

suero. Estable durante 3 das a +2 y +8C 24 horas a +15 y Seleccione ACP en la pantalla Run Test (Realizar anlisis) y lleve a
AA

+25C. cabo un blanco de agua de la forma indicada.

Pipetee en un tubo de ensayo:
Suero. La muestra se estabiliza aadiendo una gota de cido
actico (estabilizador 4) a 1 ml de suero. Es estable durante 3 Muestra 0,05 ml
G

das entre +2 y +8C 24 horas entre +15 y +25C. Reactivo 0,5 ml

COMPOSICION DEL REACTIVO Mzclelo, incbelo durante exactamente 5 minutos a 37 C o

durante 10 minutos a 20-25 C y asprelo en Rx Monza.
Componentes Concentraciones en la prueba
FOSFATASA CIDA NO PROSTTICA
R1 Tampn Seleccione NACP en la pantalla Run Test (Realizar anlisis) y
Tampn citrato 75 mmol/l, pH 5,2 lleve a cabo un blanco de agua de la forma indicada.
R2. Sustrato Pipetee en un tubo de ensayo:
1-naftilfosfato 10 mmol/l
Sal TR Fast Rojo 2,5 mmol/l Muestra 0,05 ml
R3. Tartrato Reactivo 0,5 ml
Tartrato sdico 135 mmol/l
SAM STAB Estabilizador Mzclelo, incbelo durante exactamente 5 minutos a 37 C o
Acido actico 3 mmol/l durante 10 minutos a 20-25 C y asprelo en Rx Monza.

CALIBRACIN PARA RX MONZA

PRECAUCIONES DE SEGURIDAD Se recomienda el uso de suero fisiolgico y suero de calibracin
Slo para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca. Ejecutar de nivel 3 de Randox para la calibracin. Es aconsejable cambiar
las precauciones normales requeridas para el manejo de el lote del reactivo para la calibracin o seguir lo indicado por los
reactivos de laboratorio. procedimientos de control de calidad.

Hojas Sanitarias y de Seguridad estn disponibles si se desean.

Los reactivos deben ser utilizados slo para los

propsitos indicados por personal adecuado cualificado
de laboratorio bajo condiciones apropiadas de
laboratorio.

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 MANUAL/ RX MONZA AC 1011

FOR MANUAL USE CARACTERSITCAS ESPECFICAS DE

FUNCIONAMIENTO DE LA TCNICA
Longitud de onda: Hg 405 nm Se obtuvieron los siguientes datos de rendimiento mediante un
Cubeta: 1 cm de espesor analizador RX monza.
Temperatura: 30/37C
Medicin: frente al aire FOSFATASA CIDA TOTAL
LINEALIDAD
El mtodo es lineal hasta una concentracin de 159 U/I.
Pipetear en tubos de ensayo:
Si la concentracin sobrepasa este valor, la muestra se debe
diluir 1 + 4 con una solucin del 0,9% de NaCI y debe someterse
Macro Semi Micro a ensayo de nuevo. Multiplique el resultado por 5.
Muestra 0,20 ml 0,10 ml SENSIBILIDAD
Solucin de reactivo R2 2,00 ml 1,00 ml La concentracin detectable mnima de fosfatasa cida con un
nivel aceptable de precisin se determin en 2,53 U/l.
Mezclar, verter en la cubeta e incubar durante 5 min a 30/37C.
Leer la absorbancia inicial y empezar a cronometrar el tiempo PRECISION
simultneamente. Leer de nuevo al cabo de 1, 2 y 3 min.
Intraensayo
CLCULO MANUAL Nivel 2 Nivel 3
Para calcular la actividad de la fosfatasa cida en la muestra Media (U/l) 15.9 43.6
utilizar las frmulas siguientes: DE 0.717 1.90
CV(%) 4.51 4.35
n 20 20
Fosfatasa cida total:
U/l = 743 x Asol.2a/min Interensayo
Nivel 2 Nivel 3
Fosfatasa prosttica:
Media (U/l) 15.9 43.6
U/l = 743 x (Asol.2a/min - Asol.2b/min) DE 1.05 3.04
CV(%) 6.59 6.98
SA
N 20 20
CONTROL DE CALIDAD
Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel CORRELACIN
3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de Se compar este mtodo (Y) con otro mtodo comercial
M

controles al menos una vez al da. Los valores obtenidos debern disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se lineal:
encuentran fuera del rango y su repeticin excluye error, se
AA

debern seguir los siguientes pasos: Y = 0.9723 X + 0.5527

1. Comprobar programacin del instrumento y la lmpara y un coeficiente de correlacin de r = 0,9925
2. Comprobar que todo material est limpio.
se analizaron 42 muestras de pacientes abarcando un rango de
G

3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento

bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los
Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +44 (0) 28 9442 2413.
INTERFERENCIA
Sueros hemolticos e ictricos (bilirrubina > 3 mg/dl) interfieren
en la prueba.
VALORES NORMALES EN SUERO (2)
2,5 a 93,9 U/l.
FOSFATASA CIDA NO PROSTTICA
LINEALIDAD
El mtodo es lineal hasta una concentracin de 80,8 U/I.
Si la concentracin sobrepasa este valor, la muestra se debe
diluir 1 + 4 con una solucin del 0,9% de NaCI y debe someterse
a ensayo de nuevo. Multiplique el resultado por 5.
SENSIBILIDAD
La concentracin detectable mnima de fosfatasa cida con un
nivel aceptable de precisin se determin en 1,76 U/l.

30C 37C PRECISION

Fosfatasa cida total Intraensayo

Hombre Hasta 4,2 U/l Hasta 4,7 U/l Nivel 1 Nivel 2
Mujer Hasta 3,0 U/l Hasta 3,7 U/l Media (U/l) 6.65 17.8
Fosfatasa cida DE 0.289 0.765
prosttica Hasta 1,5 U/l Hasta 1,6 U/l CV(%) 4.34 4.30
n 20 20

Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango Interensayo

de referencia que refleje la edad, sexo, dieta y localidad Nivel 1 Nivel 2
geogrfica de la poblacin. Media (U/l) 6.65 17.8
DE 0.295 0.892
CV(%) 4.43 5.01
n 20 20

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 MANUAL/ RX MONZA AC 1011

CORRELATION
Se compar este mtodo (Y) con otro mtodo comercial
disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
lineal:

Y = 0.9653 X + 0.1849
y un coeficiente de correlacin de r = 0,9971.

se analizaron 40 muestras de pacientes abarcando un rango de

2,1 a 80,2 U/l.

REFERENCIAS
1. Hillmann, G.J., Clin. Chem. Clin. Biochem. 1971; 9: 273.
2. Silver, D., et al., J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 1983; 21: 519.

SA
M
AA
G

Revisado 05 Sep 11 bm
Rev. 002

PAGE 3 OF 3
ALDOLASA (ALS) PREPARACION DE LOS REACTIVOS Y ESTABILIDAD
R1. Tampn/Sustrato
Fructosa-1,6-difosfato aldolasa Reconstituir un vial de Tampn/Sustrato 1 con 20 ml
e agua bidestilada. Es estable durante 2 semanas si se
MANUAL conserva entre +2 y +8C.
RX MONZA
R2. NADH
PARA SU USO Reconstituir un vial de NADH 2 con 1 ml de agua
Para el anlisis cuantitativo in vitro de Aldolasa en suero y plasma. bidestilada. Es estable durante 4 semanas entre +2 y +8C.
Este producto es adecuado para su utilizacin de forma Manual y
en el analizador RX monza. R3. GDH/TIM/LDH
Componentes listos para su uso. Es estable hasta la
No. Cat. fecha de caducidad cuando se conserva entre +2 y +8C.
AD 189 R1. Tampn/Sustrato 5 x 20 ml
5 x 20 ml R2. NADH 2 x 1 ml ESTABILIDAD Y PREPARACIN DEL REACTIVO EN
R3. GDH/TIM/LDH 1 vial FUNCIONAMIENTO PARA RX MONZA
Prepare el reactivo en funcionamiento como se indica en la tabla
PRINCIPIO siguiente:-
La aldolasa convierte la fructosa-1,6-difosfato (F-1,6-DP) en
gliceraldehdo-3-fosfato (GAP) y dihidroxiacetona fosfato (DAP). Tampn/Sustrato NADH GDH/TIM/LDH
La adicin de triosafosfato isomerasa (TIM), glicerolfosfato R1 R2 R3
deshidrogenada (GDH) y NADH convierte la dihidroxiacetona 2.5ml 0.05ml 0.01ml
fosfato en glicerol-1-fosfato. El grado de la reaccin de la aldolasa 5.0ml 0.1ml 0.02ml
se mide por la disminucin de la absorbancia a 340 nm como 10.0ml 0.2ml 0.04ml
consecuencia de la conversin de NADH en NAD+.
aldolasa
Estable durante 8 horas entre +2 y +8C.
F-1,6-DP GAP + DAP
TIM
MATERIALES SUMINISTRADOS
GAP DAP
SA
Tampn/Sustrato
GDH
NADH
2DAP + 2NADH + 2H+ 2Glicerol-1-P + 2 NAD+ GDH/TIM/LDH
M

MUESTRA MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS

Suero, plasma heparinizado o EDTA plasma. Calibrador de aldolasa de Randox (No. Cat. AD 5000)
AA

Control de Aldolasa Randox Nivel 2 (Cat. No. AD 5001) y Nivel

COMPOSICION DEL REACTIVO 3 (Cat. No. AD 5002)
0.9% Solucin NaCl.
Componentes Concentracin en la prueba
G

PROCEDIMIENTO
R1. Tampn/Sustrato Seleccione ALS en la pantalla Run Test (Realizar anlisis) y lleve a
Tampn colidina 51 mmol/l, pH 7,4 cabo un blanco de agua de la forma indicada.
Monoyodoacetato 0,27 mmol/l
F-1,6-DP 2,7 mmol/l Pipetee en un tubo de ensayo:
R2. NADH 0,23 mmol/l
R3. GDH/TIM/LDH SO* Patrn Muestra
GDH 326 mU/ml S1
TIM 4,35 U/ml
LDH 616 mU/ml H2O de doble destilacin 35l --- ---
Ammonium Sulphate > 35% ALS CAL --- 35 l ---
Muestra --- --- 35 l
Reactivo en funcionamiento 450 l 450 l 450 l
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Unicamente para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca. Mzclelo, incbelo durante 5 minutos a 37C o 10 minutos a 20-
Respetar las precauciones normales necesarias que se requieren 25C y asprelo en RX monza.
al manejar reactivos de laboratorio. *blanco de reactivo

Hojas informativas sobre Salud y Seguridad estn disponibles si se
desean.
Los reactivos deben utilizarse solamente para su
propsito por personal de laboratorio cualificado, y bajo
condiciones de laboratorio apropiadas.
CALIBRACIN PARA RX MONZA
El uso de solucin salina y Randox Aldolasa srica de calibracin
se recomienda para la calibracin. LA calibracin se recomienda
a los cambios en el lote del reactivo como se indica en los
procedimientos de control de calidad.

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 MANUAL/ RX MONZA AD 189

PARA USO MANUAL LINEALIDAD

El mtodo es lineal hasta una concentracin de 106 U/l. Si la
Longitud de onda: 340 nm (Hg 365 nm o Hg 334 nm) concentracin sobrepasa este valor, la muestra se debe diluir
Cubeta: 1 cm de espesor 1+4 con una solucin de NaCl del 0,9% y debe someterse a
Temperatura: 37C ensayo de nuevo. Multiplique el resultado por 5.
Medicin: frente a muestra blanco
SENSIBILIDAD
Pipetear en tubos de ensayo: La concentracin detectable mnima de Aldolasa con un nivel
aceptable de precisin se determin en 1,73 U/l.
Muestra Blanco Calibrador Muestra
PRECISION
Muestra 0,2 ml 0,2 ml 0,2 ml
Tampn/Sustrato (R1 - 2,50 ml 2,50 ml Precisin intraensayo
Solucin NaCl 0,9% 2,50 ml - - Nivel 2 Nivel 3
NADH (R2) - 0,05 ml 0,05 ml Media (U/l) 6.36 19.1
GDH/TIM/LDH (R3) - 0.01 ml 0,01 ml DE 0.295 0.854
CV(%) 4.64 4.47
n 20 20
Mezclar la muestra, R1, R2 y R3 y se incuba durante 5 minutos a
37C y leer la absorbancia A1 contra el blanco de muestra. Precisin interensayo
Dejar reposar a 37C durante exactamente 20 minutos. despus Nivel 2 Nivel 3
de la primera lectura y entonces medir la absorbancia A2 frente Media (U/l) 6.36 19.1
al blanco. DE 0.402 1.35
CV(%) 6.32 7.09
* Si A1 es < 0,95 diluir 1+1 con NaCl al 0,9% y repetir el test.
n 20 20
Multiplicar el resultado por 2.
CORRELACIN
MANUAL DE CLCULO
El mtodo de Randox (Y) se compar con otro mtodo
Para calcular la actividad aldolase utilizar la siguiente frmula:
comercial disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de
regresin lineal:
(A1 - A2) Muestra
SA
x Conc. de calibrador
Y = 0,9815 X + 0,183
(A1 - A2) Calibrador
y un coeficiente de correlacin r = 0,9917.
M

Se analizaron 42 muestras con valores de entre 2,46 y 89,86 U/l.

CONTROL DE CALIDAD
Los controles de Aldolasa Randox Niveles 2 y 3 se recomiendand
AA

REFERENCIA
para el control de calidad diario. Se deberan procesar 2 niveles de
1. Feissli, S., et al., (1966). Klin. Wschr. 44: 390.
control al menos una vez por da. Los valores que se obtengan
deberan entrar dentro de un rango especfico. Si los valores no
G

estan dentro de este rango, y la repeticin excluye el error, se

deberan lleva a cabo los siguientes pasos:
1. Comprobar la programacin del instrumento y la lmpara.
2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento bacteriano
puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los
Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +44 (0) 28 9442 2413.

INTERFERENCIA
La hemlisis interfiere en la prueba.

VALORES DE REFERENCIA(1)
Suero: Hasta 7,6 U/l (37C)

Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango

de referencia que refleje la edad, sexo, dieta y localidad
geogrfica de la poblacin.

CARACTERSTICAS DE RENDIMIENTO ESPECFICAS

Se obtuvieron las siguientes caractersticas de rendimiento
mediante un analizador RX monza y un modo de clula de flujo
a 37C.

Revisado el 15 de Sep 2010 bm

Rev. 001

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ALT PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Slo para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca.
Alanina Aminotransferasa Ejecutar las precauciones normales requeridas para el manejo
IFCC de reactivos de laboratorio.
MANUAL
RX MONZA La solucin R1a contiene Azida Sdica. Evitar su ingestin o el
contacto con la piel o las membranes mucosas. En caso de
PARA SU USO contacto con la piel, lavar la zona afectada con abundante
Para el anlisis cuantitativo in vitro de Alanina agua. En caso de contacto con los ojos o ingestin, buscar
Aminotransferasa en el suero y plasma. Este producto es atencin mdica inmediatamente.
adecuado para un uso manual o en el analizador Rx Monza.
La Azida Sdica reacciona con el plomo y cobre de las
No. Cat. caeras, formando cidos potencialmente explosivos. Cuando
AL 1200 R1a. Tampn/Substrato 1 x 70 ml se desechen dichos reactivos, limpiar con grandes volmenes
20 x 2 ml R1b. Enzima/Coenzima/ de agua para evitar la formacin de cidos. Las superficies
-oxoglutarato 20 x 2 ml metlicas expuestas, debern limpiarse con hidrxido de sodio
al 10%.
AL 1205 R1a. Tampn/Substrato 1 x105 ml Existen hojas de Salud y Seguridad disponibles
10 x 10 ml R1b. Enzima/Coenzima/
-oxoglutarato 10 x 10 ml Los reactivos deben utilizarse solamente para su
propsito por personal de laboratorio cualificado, y
AL 1268 R1a. Tampn/Substrato 1 x 105 ml bajo condiciones de laboratorio apropiadas.
5 x 20 ml R1b. Enzima/Coenzima/
-oxoglutarato 5 x 20 ml PREPARACION DE LOS REACTIVOS Y
ESTABILIDAD
AL 2360 R1a. Tampn/Substrato 5 x 100 ml R1a. Tampn/Substrato
5 x 100 ml R1b. Enzima/Coenzima/ Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad
-oxoglutarato 5 x 100 ml cuando se conserva entre +2 y+8C
SA
METODO UV R1b. Enzima/Coenzima/-oxoglutarato
Este es un mtodo estandard optimizado de acuerdo con las Reconstituir un vial de Enzima/Coenzima/
concentraciones recomendadas por la IFCC. -oxoglutarato R1b con el volumen apropiado de
M

Tampn/Substrato R1a:
PRINCIPIO 2 ml para el kit de 20 x 2 ml (AL 1200)
10 ml para el kit de 10 x 10 ml (AL 1205)
AA

ALT
-oxoglutarato + L-alanina L-glutamato + piruvato 20 ml para el kit de 5 x 20 ml (AL 1268)
LD Estable durante 14 das entre +2 y+8C e 24 horas
piruvato + NADH + H+ L-lactato + NAD+ entre+15 y +25C.
G

MUESTRA Cat. No. AL 2360 5 x 100 ml

Suero, plasma heparinizada o plasma EDTA. Reconstituir un vial of Enzima/Coenzima/-oxoglutarato
R1b con una parte de Tampn/Substrato R1a y despus
COMPOSICION DEL REACTIVO transferir todo el contenido a la botella R1a, enjuagando la
botella R1b varias veces. Estable durante 14 das entre +2
Componentes Concentracin en la Prueba y+8C e 24 horas entre+15 y +25C.

R1a. Tampn/Substrato R1 = Bufer/Substrato/Enzima/Coenzima/-oxoglutarato

Tampn Tris 100 mmol/l, pH 7,5 R2 = Ninguno
L-alanina 0,6 mol/l
R1b. Enzima/Coenzima/-oxoglutarato MATERIALES SUMINISTRADOS
-oxoglutarato 15 mmol/l Tampn/Substrato
LD 1,2 U/ml Enzima/Coenzima/-oxoglutarato
NADH 0,18 mmol/l
MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS
Multisueros Valorados Randox Nivel 2 (No. Cat. HN 1530) y
Nivel 3 (No. Cat. HE 1532)
Sueros de Calibracin Randox Nivel 3 (Cat. No. CAL 2351)
Salino RX series (Cat. No. SA 3854)

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 MANUAL AL 1200

PROCEDIMIENTO INTERFERENCIA
Aspire H2O de doble destilacin y realice una nueva Evitar la hemlisis ya que interfiere con el anlisis.
calibracin de la ganancia en el modo de clula de flujo.
Seleccione ALT en la pantalla Run Test (Realizar anlisis) y VALORES DE NORMALIDAD EN SUERO(1)
lleve a cabo un blanco de agua de la forma indicada.
25C 30C 37C
Pipetee en un tubo de ensayo:
Hombres hasta 22 U/l hasta 29 U/l hasta 40 U/l
Muestra 0,05 ml
Mujeres hasta 17 U/l hasta 22 U/l hasta 31 U/l
Reactivo 0,5 ml

Mzclelo y asprelo en Rx Monza.

Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio
CALIBRACIN PARA RX MONZA rango de referencia que refleje la edad, sexo, dieta y localidad
Se recomienda el uso de suero fisiolgico y suero de geogrfica de la poblacin.
calibracin de nivel 3 de Randox para la calibracin. Es
aconsejable cambiar el lote del reactivo para la calibracin o CARACTERSITCAS ESPECFICAS DE
seguir lo indicado por los procedimientos de control de FUNCIONAMIENTO DE LA TCNICA
calidad. Se obtuvieron los siguientes datos de rendimiento mediante
un analizador Rx Monza en funcionamiento a 37 C.
PARA USO MANUAL
SENSIBILIDAD
Longitud de onda: 340 nm (Hg 334 nm o Hg 365 nm) La concentracin detectable mnima de ALT con un nivel
Cubeta: 1 cm de espesor aceptable de precisin se determin en 7,99 U/l.
Temperatura: 30/37C
Medicin: frente al aire LINEALIDAD
Este mtodo es lineal hasta 500 U/l. Si la concentracin
Pipetear en la Cubeta: sobrepasa este valor, la muestra se debe diluir 1 + x con una
solucin del 0,9% de NaCI y debe someterse a ensayo de
Macro Micro nuevo. Multiplique el resultado por x + 1.
SA
Muestra 0,2 ml 0,1 ml
PRECISION
R1. Enzima/Coenzima/-oxoglutarato 2,0 ml 1,0 ml
M

Mezclar. Leer la absorbancia inicial despus de 1 minuto. Anlisis (Intra)

Leer de nuevo tras 1, 2 y 3 minutos. Observar si el cambio de Nivel 2 Nivel 3
Media (U/l) 38.9 134
AA

absorbancia por minuto est entre

0,11 y 0,16 a 340 nm/Hg 334 nm DE 1.79 1.59
0,06 y 0,08 a Hg 365 nm CV(%) 4.61 1.19
usar slo los valores para los 2 primeros minutos del clculo. n 20 20
G

CLCULO MANUAL Anlisis (Inter)

Para calcular la actividad de la ALT utilizar la siguiente frmula: Nivel 2 Nivel 3
Media (U/l) 38.9 134
U/l = 1746 x A 340 nm/min DE 1.78 5.22
U/l = 1780 x A Hg 334 nm/min CV(%) 4.58 3.90
U/l = 3235 x A Hg 365 nm/min n 20 20

CORRELACIN
NORMALIZACIN Este mtodo (Y) se compar con otro mtodo comercial
El suero de calibracin de nivel 3 de Randox sigue lo indicado en disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
el material de referencia JSCC TS01 de ALT.
lineal:
CONTROL DE CALIDAD
Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y Y = 0,99 X + 17,2
Nivel 3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles y un coeficiente de correlacin r = 0,9935
distintos de controles al menos una vez al da. Los valores
obtenidos debern encontrarse dentro del rango especificado. Si Se analizaron 47 muestras de pacientes con valores de entre
los valores se encuentran fuera del rango y su repeticin excluye 18 y 522 U/l.
error, se debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar la programacin del instrumento y la lmpara. REFERENCIAS
2. Comprobar que todo material est limpio. 1. International Federation of Clinical Chemistry, Scientific
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento Committee. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 1980; 18:
bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los 521-534.
resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de
los Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28 Revisado el 04 Apr 11, bm
94422413. Rev. 004

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AMONIACO (NH3) PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Unicamente para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca.
Mtodo Enzimtico - UV Respetar las precauciones normales necesarias que se requieren
MANUAL al manejar reactivos de laboratorio.

PARA SU USO Las soluciones R1b, R2 y CAL contienen azida sdica. Evitar su
Para la determinacin cuantitativa in vitro de Amonaco en plasma. ingestin o contacto con la piel y mucosas. En caso de contacto
Este producto es adecuado para su utilizacin en Manual. con la piel, lavar inmediatamente el rea afectada con agua
abundante. En caso de ingestin o contacto con los ojos llamar
No. Cat. inmediatamente a un mdico.
AM 1054 R1a. Reactivo 20 x 3 ml
20 x 3 ml R1b. Tampn 70 ml La azida sdica reacciona con el cobre y el plomo de las tuberas,
R2. GLDH 1,0 ml lo que podra producir azidas explosivas. Cuando se desheche
CAL. Patrn 5,5 ml este reactivo enjuagar abundantemente con agua para evitar la
formacin de estas azidas. Las superficies metlicas que hayan
RELEVANCIA CLNICA sido puestas en contacto con la azida sdica deben ser lavadas
La mayor fuente de amoniaco en circulacin es el tracto con hidrxido sdico al 10%.
gastrointestinal. En condiciones normales, el amoniaco se
metaboliza a la urea por las enzimas hepticas. Muchas Hojas informativas sobre Salud y Seguridad estn disponibles si se
enfermedades, tanto heredadas como adquiridas, causan un desean.
incremento en los niveles de amoniaco (hiperamonemia). Las
deficiencias heredadas de las enzimas del ciclo de la urea son la Por favor, desechar todos los materials Biolgicos y Qumicos de
mayor causa de hiperamonemia en nios. La hiperamonemia acuerdo a las pautas locales.
adquirida est provocadas por una enfermedad heptica,
insuficiencia renal o el sndrome de Reye. Un nivel de amoniaco Los reactivos deben ser utilizados solo para los
elevado resulta txico para el sistema nervioso central. propsitos indicados por personal adecuado cualificado
de laboratorio bajo condiciones apropiadas de
PRINCIPIO(1) laboratorio
GLDH
-oxoglutarato + NH3 + NADH glutamato + NAD+ ESTABILIDAD Y PREPARACIN DE LOS REACTIVOS
SA
R1a. Reactivo
El amonaco se combina con -oxoglutarato y NADH en Reconstituir el contenido de un vial de Reactivo R1a con
presencia de glutamato deshidrogenasa (GLDH) para 3 ml de Tampn R1b. Es estable 24 horas entre +15 y
M

+
formar glutamato y NAD . La correspondiente disminucin +25C 2 das entre +2 y +8C.
de la absorbancia a 340 nm es proporcional a la
(1)
R1b. Tampn
AA

concentracin de amonaco en plasma.

Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad
MUESTRA(2) especificada cuando se conserva entre +2 y +8C.
Plasma heparinizado o EDTA plasma.
Se obtiene sangre venosa sin estancar y se conserva en un bao
G

R2. GLDH
de hielo. El plasma se separa dentro de 30 min. El ensayo de Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad
amonaco debera llevarse a cabo inmediatamente. El plasma especificada cuando se conserva entre +2 y +8C.
puede conservarse durante 2 horas a +4C.
CAL. Patrn
COMPOSICIN DEL REACTIVO Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad
especificada cuando se conserva entre +2 y +8C.
Componentes Concentracin inicial de las soluciones
R1 = Reactivo/Tampn
R1a. Reactivo R2 = GLDH
NADH 0,16 mmol/l
-oxoglutarato 2 mmol/l MATERIALES SUMINISTRADOS
R1b. Tampn Reactivo
Trietanolamina 0,15 mol/l, pH 8,6 Tampn
R2. GLDH 1200 U/ml GLDH
CAL. Patrn See lot specific insert Patrn

MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

PROPORCIONADOS
Controles Randox de Amonio Etanol:
NIvel 1 (Cat. No. EA 1366)
Nivel 2 (Cat. No. EA 1367)
Nivel 3 (Cat. No. EA 1368)
MANUAL - AMONIACO - AM 1054 PAGINA 2 DE 2

PROCEDIMIENTO CLCULOS
Ablanco = Blanco A1 - Blanco A2
Longitud de onda: 340 nm
Cubeta: 1 cm de espesor Amuestra = Muestra A1 - Muestra A2
Temperatura: 25/30/37C
Medicin: Frente al aire Utilizando un patrn:

Procedimiento Macro Amuestra - Ablanco

Conc. de x Patrn de conc.
Pipetear en la cubeta: Amonaco = Apatrn - Ablanco

Blanco de Patrn Muestra INTERFERENCIA

Reactivo La hemlisis interfiere con el anlisis.

Muestra --- --- 0,2 ml En muestras normales se observa un pequeo cambio de

Agua destilada 0,2 ml --- --- absorbancia. Esto puede ser aumentado aadiendo 0,3 ml de
Patrn --- 0,2 ml --- muestra en vez de 0,2 ml. para el procedimiento macro y 0,15 ml
Reactivo (R1) 3,0 ml 3,0 ml 3,0 ml de muestra en vez de 0,1 ml para el procedimiento semi micro.

Mezclar, dejar reposar durante 5 min. Leer la absorbancia inicial Para utilizar un mtodo completamente automatizado de
de la muestra y del blanco (A1). amonaco recomendamos No. Cat. AM 1015.

GLDH (R2) 0,02 ml 0,02 ml 0,02 ml VALORES NORMALES (2)

Amonaco en plasma: 10 - 47 mol/l
Mezclar e incubar durante 5 min. Leer la absorbancia final de la 0,17 -0,80 g/ml
muestra y del blanco (A2).
Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango
Procedimiento Semi Micro que refleje la edad, sexo, dieta y localidad geogrfica de la
poblacin.
Pipetear en la cubeta:
LINEALIDAD
SA
Blanco de Patrn Muestra El mtodo es lineal hasta 1180 mol/l (20 g/ml).
Reactivo
REFERENCIAS
Muestra --- --- 0,1 ml 1. Dewan J.G., Biochem J., 1938; 32: 1378.
M

Agua destilada 0,1 ml --- --- 2. Mondzac A., Ehrlich G.E., Seegmiller J.E., J Lab Clin. Med.,
Patrn --- 0,1 ml --- 1965; 66: 526.
AA

Reactivo (R1) 1,5 ml 1,5 ml 1,5 ml

Mezclar, y dejar reposar durante 5 min. Leer la absorbancia inicial

de la muestra y del blanco (A1).
G

GLDH (R2) 0,01 ml 0,01 ml 0,01 ml

Mezclar e incubar durante 5 min. Leer la absorbancia final de la

muestra y del blanco (A2).

CONTROL DE CALIDAD
Los controles Randox de Amonio Etanol Nivel 1, Nivel 2 y
Nivel 3 se recomiendan para el control diario de calidad Deberan
utilizarse como mnimo dos niveles de controles una vez al da. Los
valores obtenidos deberan entrar dentro de un rango determinado.
Si estos valores se salen de ese rango aun habindolo repetido, se
deben seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar los ajustes del instrumento y el foco de luz.
2. Comprobar la limpieza de todo el equipo.
3. Comprobar el agua y la presencia del algn posible agente
contaminante que pueda interferir en los resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin.
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y los componentes del
mismo.
6. Contactar con el Servicio Tcnico de Laboratorios Randox.
Irlanda del Norte (028) 94422413. Revisado el 26 Abril 2010 bm

Rev. 001
ANTITROMBINA III
(AT III)
SEMIAUTOMTICO
INDICACIONES
Determinacin cuantitativa in vitro de la antitrombina III (AT
III) en plasma humano mediante el mtodo cromognico. El
producto es adecuado para uso con mtodos manuales o
semiautomticos.
Nm. cat.
ANT 2754 R1a. Reactivo de trombina 4 x 2 ml
26 ml R1b. Tampn 1 x 10 ml
R2. Sustrato 4 x 2 ml
RELEVANCIA CLNICA
La antitrombina III es un inhibidor de las proteasas
plasmticas del tipo serina. Una funcin importante de la
antitrombina III es inhibir la actividad de la trombina. Por lo
general, la velocidad de inhibicin de la trombina causada por
la antitrombina III es lenta (actividad antitrombina
progresiva). Sin embargo, dicha velocidad puede aumentar
miles de veces en presencia de heparina (actividad cofactor
de la heparina).
Tolefsen y Blank(1) han descubierto otro inhibidor rpido de
la trombina que depende de la heparina, el cofactor II de la
heparina, en el plasma humano. Esta protena puede interferir
en las mediciones de antitrombina III, especialmente a
SA
concentraciones de heparina elevadas (2 unidades/ml USP).
PRINCIPIO
En este mtodo de dos fases(2) se aade trombina a la
M
solucin diluida de plasma que contiene antitrombina III en
presencia de exceso de heparina. Tras un perodo de
incubacin inicial (fase 1) la actividad residual de la trombina
AA
se determina con un sustrato cromognico especfico de la
trombina (fase 2). La actividad residual de la trombina es
inversamente proporcional a la concentracin de
antitrombina III.
G
Con el fin de conferir especificidad para la antitrombina III,
este sistema de ensayo utiliza un concentracin final de
heparina ms baja, en la cual la inactivacin de la trombina
aumentada por heparina, debida al cofactor II de la heparina,
es desdeable. Adems, el cofactor II de la heparina humana
reacciona ms fcilmente con la trombina humana que con la
bovina(3). As, este sistema de ensayo presenta mayor
especificidad para la antitrombina III al utilizar trombina
bovina.
MUESTRA
Plasma citrado.
Plasma diluido 1+40 en NaCl al 0,9%.
RECOGIDA DE MUESTRAS Y PREPARACIN (4)
Mezcle nueve partes de sangre recin extrada con una parte
de citrato trisdico al 3,2% (0,109 mol/l). Evite la hemlisis y
la contaminacin de la muestra sangunea con fluidos
corporales. Se deben rechazar las muestras que contengan
menos del 90% del volumen previsto de llenado. Centrifugue
la sangre durante 15 minutos a 1500 g. Realice el anlisis en
un lapso de 4 horas, si las muestras se conservan entre 20 y
25C. Si la prueba no se realiza antes de las 4 horas, el
plasma puede mantenerse congelado a -20C hasta 2
semanas, o a -70C durante un mximo de 6 meses. Para
obtener ms detalles sobre la recogida de muestras consulte
el documento NCCLS H21-A3.
No postergue el mezclado de la sangre con el
anticoagulante.
Evite la formacin de espuma en la muestra.
Utilice exclusivamente recipientes de plstico o de vidrio
siliconado.
Las muestras turbias, ictricas, lipmicas y hemolizadas
pueden generar resultados errneos.
La congelacin y consiguiente descongelacin de
muestras de plasma que contengan clulas residuales
podra generar membranas celulares daadas que pueden
afectar a los resultados.
El las muestras de plasma con un hematocrito fuera del
intervalo del 20 al 55% puede que la concentracin de
anticoagulante errnea, por lo que debe ajustarse el
anticoagulante segn proceda.
COMPOSICIN DEL REACTIVO
Contenido Concentracin inicial
de las soluciones
R1a. Reactivo de trombina
Trombina bovina liofilizada 8 UI/ml
R1b. Tampn
Tampn tris 90 mmol/l, pH 8,2
R2. Sustrato
Tosyl-Gly-Pro-Arg-4-nitranilida
acetato 2,5 mmol/l
PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS DE
SEGURIDAD
Solo para uso diagnstico in vitro. No pipetee con la boca.
Aplique las precauciones habituales necesarias para la
manipulacin de reactivos de laboratorio.
El reactivo tampn de la antitrombina III (R1b) contiene acida
sdica. Evite la ingestin o el contacto con la piel o las
mucosas. En caso de contacto con la piel, lave el rea
afectada con abundante agua. En caso de contacto con los
ojos o ingestin, busque atencin mdica de inmediato.
La acida sdica reacciona con las tuberas de plomo y cobre,
con el consiguiente riesgo de generacin de acidas explosivas.
Al eliminar estos reactivos, hgalo con gran cantidad de agua
para evitar la acumulacin de acidas. Las superficies
expuestas de metal deben limpiase con hidrxido sdico al
10%.
Estn disponibles, previa peticin, las fichas tcnicas de salud
y seguridad.
Los reactivos deben utilizarse solo para la finalidad
prevista y por personal de laboratorio
adecuadamente cualificado, en unas condiciones de
laboratorio apropiadas.
PGINA 1 DE 3
 MANUAL ANT 2754

ESTABILIDAD Y PREPARACIN DE LOS CLCULO DE LOS RESULTADOS

REACTIVOS Trace el grfico de la Abs/min obtenida con cada calibrador
R1a. Reactivo de trombina de antitrombina III frente al % de antitrombina III
Reconstituya un vial de reactivo de trombina (R1a) con correspondiente en papel de escala lineal.
2 ml de tampn (R1b). La antitrombina III en las muestras de plasma del paciente se
Estable durante 2 das entre +15 y +25C; 14 das puede determinar mediante la interpolacin de la curva de
entre +2 y +8C; 30 das a -20C. calibracin.

R1b. Tampn CONTROL DE CALIDAD

Contenido listo para su uso. Estable hasta la fecha de Se recomiendan los controles de coagulacin Randox de nivel
caducidad cuando se almacena a una temperatura entre 1, 2 y 3 para el control de calidad diario. Deben analizarse
+2 y +8C. tres niveles de controles al menos una vez al da. Los valores
obtenidos deben situarse dentro de un intervalo
R2. Sustrato determinado. Si estos valores estn fuera del intervalo y la
Reconstituya un vial de sustrato (R2) con 2 ml repeticin excluye un posible error, debe procederse como
de agua desionizada. sigue:
Estable durante 8 das entre +15 y +25C; 14 das 1. Comprobar los parmetros del instrumento.
entre +2 y +8C; 90 das a -20C. 2. Comprobar que todo el equipo utilizado est limpio.
Precaliente las partes alcuotas de reactivo de 3. Comprobar los contaminantes, como un crecimiento
trombina (R1a) y sustrato (R2) a +37C antes de bacteriano, que pueden contribuir a la obtencin de
utilizarlas. resultados imprecisos.
4. Comprobar la temperatura de la reaccin.
MATERIALES SUMINISTRADOS 5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y su contenido.
Reactivo de trombina 6. Pngase en contacto con el servicio tcnico de atencin
Tampn al cliente de Randox Laboratories, llamando al telfono
Sustrato +44 (0) 28 9442 2413 (Irlanda del Norte).
MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS
SA
Calibrador de coagulacin Randox (N. cat. CG5037) VALORES PREVISTOS
Controles de coagulacin Randox de nivel 1, 2 y 3 (N. cat. Los valores normales con el reactivo Randox AT III estn
CG5021, CG5022 y CG 5023) comprendidos dentro del 75 y 125%.
M

Micropipetas
Micropuntas Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio
Analizador de coagulacin foto-ptico rango de referencia, ya que pueden existir diferencias entre
AA

Temporizador instrumentos, laboratorios y poblaciones locales.

PROCEDIMIENTO INTERFERENCIA
G

Evite utilizar muestras fuertemente hemolizadas y lipmicas,

Pipetear en una cubeta ya que pueden interferir con el ensayo.
Se comprobaron los siguientes analitos, hasta los niveles que
Muestra diluida/control/calibrador 100 l se indican, sin encontrar interferencias:
Reactivo de trombina (R1) 100 l
Bilirrubina conjugada 12 mg/dl
Mezclar bien e incubar a +37C durante 3 minutos, aadir Bilirrubina libre 12 mg/dl
Intralpidos 300 mg/dl
sustrato (R2) 100 l Triglicridos 320 mg/dl
Hemoglobina 140 mg/dl
Mezclar bien y tras 5 segundos leer la absorbancia inicial a
405 nm. Volver a leer la absorbancia transcurridos 30 CARACTERSTICAS DE RENDIMIENTO
segundos. Se han obtenido los siguientes datos de rendimiento
Determinar la velocidad de cambio de absorbancia mediante un coagulmetro semiautomtico a +37C.
(Abs/min)
SENSIBILIDAD
La actividad mnima detectable de la antitrombina III se
Siga las instrucciones del fabricante del instrumento
determina como 30,0%.
para realizar la prueba.
LINEALIDAD
CALIBRACIN Este mtodo es lineal hasta un 130% de actividad de la
Para la calibracin se recomienda el calibrador de coagulacin antitrombina III. Si la muestra excede este valor, diluya las
Randox (valor especfico de lote). Use salino como calibrador muestras previamente diluidas (1+40) de plasma an ms 1+1
del 0%, con el calibrador de coagulacin Randox como 50% y con salino al 0,9% y repita el anlisis. Multiplique el resultado
100%. Se recomienda calibrar cambiando el lote de reactivo o por 2.
tal como indican los procedimientos de control de calidad.

PGINA 2 DE 3
 MANUAL ANT 2754

PRECISIN

Intraensayo
Normal Patolgica
Media (%) 102 65,5
DE 1.89 2,35
CV (%) 1.86 3,59
n 20 20

Interensayo
Normal Patolgica
Media (%) 85.0 59.4
DE 1.86 2.24
CV (%) 2.19 3.77
n 20 20

CORRELACIN
Este mtodo (Y) se ha comparado con otro mtodo
disponible en el mercado (X) y se ha obtenido la siguiente
ecuacin de regresin lineal:

Y = 1,00X + 0,22
y un coeficiente de correlacin de 1,00

Se analizaron 40 muestras de pacientes que abarcaron un

rango del 38,3 al 113,7%

REFERENCIAS
SA
1. Tolefsen DM and Blank MK, J. Clin. Invest. 68: 589-596,
1981.
2. Odegard OR, Lie M and Abildgaard U: Thromb Res. 6:
287-294, 1975.
M

3. Friberger P, Egberg N, Holmer E, Hellgren M and

Blomback M, Thromb. Res. 25: 433-436, 1982.
AA

4. Rosemary Biggs, Human blood Coagulation,

Haemostasis and Thrombosis, Blackwell Scientific
Publications, Oxford, England, 1972.
G

Revisado 25 may 12 rw
Rev. 002

PGINA 3 DE 3
ALP ESTABILIDAD Y PREPARACION DE LOS
REACTIVOS
Fosfatasa Alcalina R1a. Tampn
MANUAL Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad
RX MONZA cuando se conserva entre +2 y +8C.

PARA SU USO R1b. Substrato

Para el anlisis cuantitativo in vitro de la Fosfatasa Alcalina Reconstituir un frasco de Substrato R1b con el
(ALP) en suero yl plasma. Este producto es adecuado para un volumen apropiado de Tampn R1a:-
uso manual o en el analizador Rx Monza. 3 ml para el kit de 20 x 3 ml (AP 542)
10 ml para el kit de 10 x 10 ml (AP 307)
No. Cat. Estable durante 30 das entre +2 y +8C 3 das entre
AP 542 R1a. Tampn 1 x 70 ml +15 y +25C.
20 x 3 ml R1b. Substrato 20 x 3 ml
MATERIALES SUMINISTRADOS
AP 307 R1a. Tampn 1 x 105 ml Tampn
10 x 10 ml R1b. Substrato 10 x 10 ml Substrato

METODO COLORIMETRICO (1) MATERIALES NECESARIOS PERO NO

Este es una mtodo estndar optimizado de acuerdo a las SUMINISTRADOS
recomendaciones del Deutsche Gesellschaft fr Klinische Multisueros Valorados Randox Nivel 2 (No. Cat. HN 1530) y
Chemie. Nivel 3 (No. Cat. HE 1532)
Srum de calibration Randox Nivel 3 (Cat. No. CAL 2351).
PRINCIPIO Salino (Cat. No. SA 3854)
ALP
p-nitrofenilfosfato + H2O fosfato + p-nitrofenol PROCEDIMIENTO
Aspire H2O de doble destilacin y realice una nueva
MUESTRA(2) calibracin de la ganancia en el modo de clula de flujo.
Suero o plasma heparinizado. Seleccione ALP en la pantalla Run Test (Realizar anlisis) y
Las muestras son estables durante 5 das cuando se conservan
SA
lleve a cabo un blanco de agua de la forma indicada.
entre +2 y +8C.
Pipetee en un tubo de ensayo:
COMPOSICION DEL REACTIVO
M

Muestra 0,01 ml
Componentes Concentraciones en la Prueba Reactivo 0,5 ml
AA

R1a. Tampn Mzclelo y asprelo en Rx Monza.

Tampn Dietanolamina 1 mol/l, pH 9,8
MgCl2 0,5 mmol/l CALIBRACIN PARA RX MONZA
G

R1b. Substrato Se recomienda el uso de suero fisiolgico y suero de

p-nitrofenilfosfato 10 mmol/l calibracin de nivel 3 de Randox para la calibracin. Es
aconsejable cambiar el lote del reactivo para la calibracin o
seguir lo indicado por los procedimientos de control de
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD calidad.
Slo para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca.
Ejecutar las precauciones normales requeridas para el manejo PARA USO MANUAL
de reactivos de laboratorio.
Longitud de onda: Hg 405 nm
Cubeta: 1 cm de espesor
La solucin R1a contiene Azida Sdica. Evitar su ingestin o el
Temperatura: 25C, 30C, 37C
contacto con la piel o las membranas mucosas. En caso de
Medicin: frente al aire
contacto con la piel, lavar la zona afectada con abundante
agua. En caso de contacto con los ojos o ingestin, buscar
Pipetear en la cubeta: Macro Semi- Micro
atencin mdica inmediatamente.
Micro
La Azida Sdica reacciona con el plomo y cobre de las
Muestra 0,05 ml 0,02 ml 0,01 ml
caeras, formando cidos potencialmente explosivos. Cuando
se eliminen dichos reactivos, limpiar con grandes volmenes Reactivo (25C, 30C, 37C) 3,00 ml 1,00 ml 0,50 ml
de agua para evitar la formacin de cidos. Las superficies
metlicas expuestas, debern limpiarse con hidrxido de sodio Mezclar, leer la absorbancia inicial y empezar a cronometrar
al 10%. simultneamente. Leer de nuevo al cabo de 1, 2 y 3 minutos.

La Solucin R1a contiene dietanolamina que puede daar

seriamente los ojos y que es daino si se traga. Evitar la
ingestin y llevar proteccin adecuada para los ojos.

Hojas Sanitarias y de Seguridad estn disponibles si se desean.

Los reactivos deben utilizarse solamente para su

propsito por personal de laboratorio cualificado, y
bajo condiciones de laboratorio apropiadas.
MANUAL / RX MONZA - ALP - FOSFATASA ALCALINA - AP542 / AP 307 PAGINA 2 OF 2

MANUAL CALCULO PRECISION

Utilizar la siguiente formula para calcular la actividad
de ALP: Anlisis Intra
Nivel 2 Nivel 3
U/l = 3300 x A 405 nm/min MACRO Media (U/l) 262 486
U/l = 2760 x A 405 nm/min SEMI-MICRO DE 8.11 9.49
U/l = 2760 x A 405 nm/min MICRO CV(%) 3.10 1.95
n 20 20
CONTROL DE CALIDAD Anlisis Inter
Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel 2 Nivel 3
Nivel 3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles Media (U/l) 262 486
distintos de controles al menos una vez al da. Los valores DE 11.59 17.01
obtenidos debern encontrarse dentro del rango especificado. Si CV(%) 4.43 3.50
los valores se encuentran fuera del rango y su repeticin excluye n 20 20
error, se debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar la programacin del instrumento y la lmpara CORRELATION
2. Comprobar que todo material est limpio. Este mtodo (Y) se compar con otro mtodo disponible en
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento el mercado (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los lineal:
resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin Y = 1.076X - 14.5
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
y un coeficiente de correlacin de r = 0.9975
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de
los Laboratorios Randox, Irlanda del Norte (028) 94422413. se hicieron anlisis a 43 pacientes abarcando un rango
de 52 a 965 U/l.
INTERFERENCIA
Evitar la hemlisis ya que interfiere con el anlisis. Los REFERENCIAS
siguientes analitos se analizaron hasta los siguientes niveles y 1. Rec. GSCC (DGKC); J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 1972;
se encontr que no interfieren: 10: 182.
2. Englehardt A., et al, Aerztl Labor 1970 16 42.
SA
Bilirrubina 300 mol/l (17 mg/dl)
Intralpidos 2%
Triglicridos 22,75 mmol/l (2010 mg/dl)
Hemoglobina 1 g/l (100 mg/dl)
M

VALORES DE NORMALIDAD EN EL SUERO

AA

25C 30C 37C

Hombres/Mujeres 60-170 U/l 73-207 U/l 98-279 U/l

G

Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio

rango de referencia que refleje la edad, sexo, dieta y localidad
geogrfica de la poblacin.

CARACTERSITCAS ESPECFICAS DE
FUNCIONAMIENTO DE LA TCNICA
Los siguientes datos de rendimiento se obtuvieron mediante el
analizador Rx Monza a una temperatura de 37 oC.

SENSIBILIDAD
La concentracin mnima detectable de ALP con un nivel
aceptable de precisin se ha determinado en 49,9 U/l

LINEALIDAD
El mtodo es lineal hasta 1609 U/l. Si la concentracin
sobrepasa este valor, la muestra se debe diluir 1 + 9 con una
solucin del 0,9% de NaCI y debe someterse a ensayo de
nuevo. Multiplicar el resultado por 10.

Revisado el 10 Sep 2010 bm

Rev. 001
AST EXTRACCION Y PREPARACION DE MUESTRAS (5)
Suero:- Use serum free from hemolysis.
Aspartato Aminotransferasa Plasma:- Se puede utilizar EDTA o heparina como anticoagulante.
IFCC El plasma se deger separar de las clulas durante la
MANUAL hora siguiente a su extraccin. Las muestras se debern
refrigerar si no se utilizan inmediatamente:-
PARA SU USO Las muestras que se almacenen durante ms de 3 das se
Para el anlisis cuantitativo in vitro de aspartato aminotransferasa debern congelar a -20C.
(AST) en suero y plasma. Este producto es adecuado para su
utilizacin de forma manual y en el analizador Rx Monza. COMPOSICIN DEL REACTIVO
Cat. No.
Componentes Concentraciones en la prueba
AS 1202 R1a. Tampn/Sustrato 1 x 70 ml
20 x 2 ml R1b. Enzima/Coenzima/ 20 x 2 ml
-oxoglutarato R1a. Tampn/Sustrato
Tampn Tris 80 mmol/l, pH 7,5
AS 1204 R1a Tampn/Sustrato 1 x 105 ml L-aspartato 240 mmol/l
10 x 10 ml R1b Enzima/Coenzima/ 10 x 10 ml R1b. Enzima/Coenzima/-oxoglutarato
-oxoglutarato -oxoglutarato 12 mmol/l
MDH 420 U/l
AS 1267 R1a Tampn/Sustrato 1 x 105 ml LD 600 U/l
5 x 20 ml R1b Enzima/Coenzima/ 5 x 20 ml NADH 0,18 mmol/l
-oxoglutarato

AS 2359 R1a Tampn/Sustrato 5 x 100 ml PRECAUCIONES DE SEGURIDAD

5 x 100 ml R1b Enzima/Coenzima/ 5 x 100 ml Unicamente para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca.
-oxoglutarato Respetar las precauciones normales necesarias que se requieren
al manejar reactivos de laboratorio.
METODO UV
Este es un mtodo estndar optimizado segn las La solucin R1a contiene Azida Sdica. Evitar su ingestin o
concentraciones recomendadas por la IFCC. contacto con la piel y mucosas. En caso de contacto con la piel,
SA
lavar inmediatamente el rea afectada con agua abundante. En
SIGNIFICADO CLINICO(1,2,3,4) caso de ingestin o contacto con los ojos llamar inmediatamente
Las aminotransferasas son un grupo de enzimas que catalizan las a un mdico.
inter conversiones de aminocidos y -oxocidos por medio de la
M

transferencia de grupos amino. La GOT (aspartato La Azida Sdica reacciona con el cobre y el plomo de las
aminotransferasa o transaminasa de oxaloacetato glutamato) se ha
tuberas, lo que podra producir azidas explosivas. Cuando se
AA

encontrado en el citoplasma y mitocondrias de las clulas

estudiadas. En caso de un ligero dao del tejido como por ej. el
hgado, la forma predominante de la GOT en suero es la del
citoplasma, con una cantidad ms pequea proviniente de las
G
deseche este reactivo enjuagar abundantemente con agua para
evitar la formacin de estas azidas explosivas. Las superficies
metlicas que hayan sido puestas en contacto con la azida sdica
deben ser lavadas con hidrxido sdico al 10%.

mitocondrias. Un dao ms severo del tejido dar como resultado

una mayor liberacin de enzima mitocondrial. Los niveles elevados
de AST pueden ser una seal de infarto de miocardio, enfermedad Hojas informativas sobre Salud y Seguridad estn disponibles si
heptica, distrofia muscular y dao de rganos. se desean.
Los msculos del corazn son los que muestran ms actividad de
sta enzima, sin embargo tambin se ha encontrado en el cerebro, Los reactivos deben ser utilizados solo para los
hgado, mucosa gstrica, tejido adiposo y riones humanos. propsitos indicados por personal adecuado cualificado
La IFCC recomienda actualmente (1980) procedimientos de laboratorio bajo condiciones apropiadas de
estandarizados para los anlisis de GOT incluyendo:- laboratorio.
1. optimizacin de las concentraciones de substrato.
2. Empleo de tampones Tris (en lugar de fosfato, el cual se ha
demostrado que inhibe la recombinacin de la apoenzima con
el fosfato piridoxal).
3. Preincubacin de suero y tampn combinado para permitir que
tengan lugar posibles reacciones con NADH.
4. Substrato de inicio (-oxoglutarato)
5. Activacin de fosfato piridoxal opcional.
Este es un mtodo estndar optimizado de acuerdo a las
recomendaciones de la IFCC.

PRINCIPIO
El -oxoglutarato reacciona con la L-aspartato en presencia de
GOT para formar L-glutamato mas oxaloacetato. La reaccin
indicadora utiliza el oxaloacetato para la determinacin cintica
del consumo de NADH.
AST
-oxoglutarato + L-aspartato L-glutamato + oxaloacetato

MDH
oxaloacetato + NADH + H+ L-malato + NAD+
MANUAL/RX MONZA - AST - AS 1202/ AS 1204/ AS 1267/ AS 2359 PAGE 2 OF 3

ESTABILIDAD Y PREPARACIN DE LOS REACTIVOS MANUAL CALCULOS

R1a. Tampn/Sustrato Para calcular la actividad de la GOT utilizar las frmulas
Listo para su uso. Estables hasta la fecha de caducidad siguientes:
cuando se conservan entre +2 y +8C.
U/l = 1746 x A 340 nm/min
R1b. Enzima/Coenzima/-oxoglutarato U/l = 1780 x A Hg 334 nm/min
Reconstituir un vial de Enzima/Coenzima/-oxoglutarato 2 U/l = 3235 x A Hg 365 nm/min
con el volumen adecuado de Tampn/Sustrato 1:
2 ml para el kit de 20 x 2 ml (AS1202)
10 ml para el kit de 10 x 10 ml (AS1204) NORMALIZACIN
20 ml para el kit de 5 x 20 ml (AS1267) El suero de calibracin de nivel 3 de Randox sigue lo indicado en
Es estable durante 14 das conservado entre +2 y +8C el material de referencia JSCC TS01 de AST.
24 horas entre +15 y +25C
Cat. No. AS 2359 5 x 100 ml CONTROL DE CALIDAD
Disolver el contenido de una botella de Enzima/ Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel
Coenzima/-oxoglutarato 2 con un pequeo volumen de 3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de
Tampn/Sustrato 1 y luego transferir el contenido a la controles al menos una vez al da. Los valores obtenidos debern
botella 1, enjuagando varias veces la botella 2. Es estable encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se
durante 14 das cuando se conserva entre +2 y +8oC 24 encuentran fuera del rango y su repeticin excluye error, se
horas entre +15 y +25oC. debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar la programacin del instrumento y la lmpara.
MATERIALES SUMINISTRADOS 2. Comprobar que todo material est limpio.
Tampn/Sustrato 3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento bacteriano
Enzima/Coenzima/-oxoglutarato puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS 5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
Multisueros Valorados Randox Nivel 2 (No. Cat. HN 1530) y 6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los
Nivel 3 (No. Cat. HE 1532) Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28 94422413.
Sueros de Calibracin Randox Nivel 3 (Cat. No. CAL 2351)
Salino (Cat. No. SA 3854) ESPECIFICIDAD/INTERFERENCIA(6,7)
La hemlisis bruta producir falsos resultados elevados.
SA
PROCEDIMIENTO Se deber tomar en consideracin los efectos de varios frmacos
Aspire H2O de doble destilacin y realice una nueva calibracin en la actividad de La GOT en los casos de pacientes que estn
de la ganancia en el modo de clula de flujo. Seleccione AST en la recibiendo grandes dosis de frmacos.
pantalla Run Test (Realizar anlisis) y lleve a cabo un blanco de
M

agua de la forma indicada. Los siguientes analitos se analizaron hasta los siguientes niveles y
se encontr que no interfieren:
AA

Pipetee en un tubo de ensayo:

Hemoglobina 250 mg/dl
Muestra 0.05 ml Bilirrubina libre 25 mg/dl)
Reactivo 0.5 ml Bilirrubina conjugada 25 mg/dl)
G

Triglicridos 1000 mg/dl)

Mix and aspirate into the Rx Monza. Intralipid 200 mg/dl

CALIBRACIN PARA RX MONZA
Se recomienda el uso de suero fisiolgico y suero de calibracin
de nivel 3 de Randox para la calibracin. Es aconsejable cambiar
el lote del reactivo para la calibracin o seguir lo indicado por los
procedimientos de control de calidad.
Young et cols y Friedman et cols dan una lista de sustancias y
condiciones que se conoce que afectan a la actividad in vivo de La
GOT . La integridad de esta lista y la exactitud de la informacin
que en ella se suministra no representa necesariamente la
opinin de Randox Laboratories, Ltd.

PARA USO MANUAL VALORES NORMALES EN SUERO(8,9)

Longitud de onda: 340 nm (Hg 334 nm Hg 365 nm) 25C 30C 37C
Cubeta: 1 cm de espesor
Temperatura: 25/30/37C Hombre: Hasta 18 U/l Hasta 25 U/l Hasta 37 U/l
Medicin: Frente al aire Mujer : Hasta 15 U/l Hasta 21 U/l Hasta 31 U/l

Pipetear en cubeta: Macro Micro

Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango
Muestra 0,2 ml 0,1 ml que refleje la edad, sexo, dieta y localidad geogrfica de la
Enzima/Coenzima/-oxoglutarato 2 2,0 ml 1,0 ml poblacin.

Mezclar, leer la absorbancia inicial al cabo de 1 min. Leer de CARACTERSITCAS ESPECFICAS DE

nuevo al cabo de 1, 2 y 3 min. Observar si la variacin de la FUNCIONAMIENTO DE LA TCNICA
absorbancia por minuto se sita entre Los siguientes datos de funcionamiento se obtuvieron mediante
0,11 y 0,16 a 340/Hg 334 nm el analizador Rx Monza a una temperatura de 37oC.
0,06 y 0,08 a Hg 365 nm
para el clculo usar slo los valores obtenidos durante los 2
primeros minutos.
MANUAL/RX MONZA - AST - AS 1202/ AS 1204/ AS 1267/ AS 2359 PAGE 3 OF 3

LINEALIDAD
Este mtodo es lineal hasta una concentracin de 562 U/l. Si la
concentracin sobrepasa este valor, la muestra se debe diluir 1 +
9 con una solucin de NaCl del 0,9% y debe someterse a ensayo
de nuevo. Multiplicar el resultado por 10.

SENSIBILIDAD
La concentracin detectable mnima de AST con un nivel
aceptable de precisin se determin en 9,3 U/l.

PRECISION

Anlisis (Intra)
Nivel 2 Nivel 3
Media (U/l) 35.6 153
DE 1.66 1.47
CV(%) 4.65 4.63
n 20 20

Anlisis (Inter)
Nivel 2 Nivel 3
Media (U/l) 35.6 153
DE 1.77 7.10
CV(%) 4.86 4.63
n 20 20

CORRELATION
Este mtodo (Y) se compar con otro mtodo disponible en el
mercado (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
lineal:
SA
Y = 1.07X + 4.9
y un coeficiente de correlacin de r = 0.9975

se hicieron anlisis a 43 pacientes abarcando un rango de 28 a

M

559 U/l.
AA

REFERENCIAS
1. Wroblewski F, La Due J.S: Ann Intern Med. 1956; 45: 801.
2. Wroblewski F, La Due J.S: Proc Soc Exp Biol Med 1956;
91: 569.
G

3. Bergmeyer HU, Bowers GN Jr, et al: Clin Chem 1977; 23:

887.
4. Bergmeyer HU, Bowers GN Jr, et al: J.Clin Chem Clin
Biochem 1980; 18: 521-534.
5. Tietz N W: Fundamentals of Clinical Chemistry ed 3.
Philadelphia, WB Saunders Co. 1987, pg 372.
6. Young D S, et al: Clin Chem 1975, 21; No5.
7. Friedman RB, et al: Clin Chem 1980, 26; No4.
8. Wallnofer H, Schmidt.E, Schmidt FW, eds: Synopsis der
Leberkrankheiten Stuttgart, Georg Thieme Verlag, 1974.
9. Thefeld W, et al: Dtsch Med Wschr 1974; 99: 343.

Revisado 10 Sep 10 bm
Rev. 001
AMILASA (AMY) PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Slo para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca.
Etilideno Bloqueado-pNPG7 Ejecutar las precauciones normales requeridas para el manejo
MANUAL de reactivos de laboratorio.
RX MONZA
La Solucin R1a contiene Azida Sdica. Evitar su ingestin o el
PARA SU USO contacto con la piel o las membranas mucosas. En caso de
Para la determinacin cuantitativa in vitro de la Amilasa en el contacto con la piel, lavar la zona afectada con abundante
suero y orina. Este producto es adecuado para su utilizacin agua. En caso de contacto con los ojos o ingestin, buscar
de forma manual y en el analizador Rx Monza. atencin mdica inmediatamente.

No. Cat. La Azida Sdica reacciona con el plomo y cobre de las

AY 2751 R1a. Tampn 1 x 50 ml caeras, formando cidos potencialmente explosivos. Cuando
20 x 2 ml R1b. Substrato 20 x 2 ml se eliminen dichos reactivos, limpiar con grandes volmenes
de agua para evitar la formacin de cidos. Las superficies
AY 1580 R1a. Tampn 1 x 105 ml metlicas expuestas, debern limpiarse con hidrxido de sodio
20 x 5 ml R1b. Substrato 20 x 5 ml al 10%.

AY 1582 R1a. Tampn 2 x 105 ml Existen hojas de Salud y Seguridad disponibles.

9 x 20 ml R1b. Substrato 9 x 20 ml
Los reactivos deben utilizarse solamente para su
METODO COLORIMETRICO(1,2) propsito por personal de laboratorio cualificado, y
bajo condiciones de laboratorio apropiadas.
El mtodo utiliza etilideno bloqueado
p-nitrofenil-maltoeptaosida como substrato. Tambin se utiliza ESTABILIDAD Y PREPARACION DEL REACTIVO
en este mtodo el indicador enzima glucosidasa, utilizado para Reconstituir el contenido de un frasco de Substrato R1b con
liberar el p-nitrofenol. La glucosa terminal del sustrato se el volumen apropiado de Tampn R1a:-
bloquea qumicamente, previniendo la divisin por el enzima 2 ml para el kit de 20 x 2 ml (AY 2751)
indicador. 5 ml para el kit de 20 x 5 ml (AY 1580)
SA
-amilasa 20 ml para el kit de 9 x 20 ml (AY 1582)
etilideno-G7 pNP etilideno -Gx + Gx-pNP Estable durante 21 das entre +2 y + 8oC.

-glucosidase MATERIALES SUMINISTRADOS

M

Gx-pNP glucosa + pNP-glucosido Tampn

Substrato
AA

- glucosidasa
pNP-glucosido glucosa + pNP MATERIALES NECESARIOS PERO NO
SUMINISTRADOS
G = glucosa Multisueros Valorados Randox Nivel 2 (No. Cat. HN 1530) y
G

pNP = paranitrofenol Nivel 3 (No. Cat. HE 1532)

x = 2 to 5 Suero de Calibracin Randox Nivel 3 (No. Cat. CAL 2351).

MUESTRA NOTA
Suero, plasma heparinizado u orina. Evitar la hemlisis ya que puede disminuir los resultados.
Diluir la orina 1+2 con NaCl al 0,9%. Multiplicar el resultado Evitar la contaminacin del reactivo, muestras y material de
por 3. cristal por medio de la saliva o sudor, dado que poseen altos
contenidos de amilasa. No pipetear con la boca.
COMPOSICIN DEL REACTIVO
PROCEDIMIENTO
Componentes Concentracin Inicial de los Reactivos Seleccione AMY en la pantalla de prueba de funcionamiento y
lleve a cabo un blanco de agua segn las instrucciones.
R1a. Tampn
Tampn Pipes 50 mmol/l, pH 7.0 Pipetee en un tubo de ensayo:
Cloruro de Calcio 5.0 mmol/l
Cloruro Sdico 50 mmol/l Muestra 0.01 ml
R1b. Substrato Reactivo 0.5 ml
Tampn Pipes 12.5 mmol/l, pH 7.0
etilideno-G7 pNP 1.0 mmol/l Mezclar y aspirar en el Monza RX
-glucosidasa 12 U/ml
CALIBRACIN PARA RX MONZA
Se recomienda el uso de Calibracin Randox nivel 3 para la
calibracin. Se recomienda calibrar cada cambio de lote del
reactivo o como se indica en los procedimientos de control
de calidad.

PAGE 1 OF 2
 MANUAL/ RX MONZA AY 2751

PARA USO MANUAL SENSIBILIDAD

La concentracin mnima detectable de la amilasa con un nivel
Longitud de onda: 405 nm (400-420 nm) aceptable de precisin ha sido determinada en 17.9 U/l.
Cubeta: 1 cm de espesor
Temperatura: 37C PRECISION
Medicin: frente al aire
Intraensayo
Pipetee en una cubeta: Nivel 2 Nivel 3
Media (U/l) 72.1 251
Muestra 0.02 ml DE 3.17 7.35
Reactivo 1.0 ml CV (%) 4.39 2.93
n 20 20
Mezclar, leer la absorbancia inicial despus de 60 segundos y al
mismo tiempo iniciar el temporizador. Leer de nuevo pasados Interensayo
1, 2 y 3 minutos. Nivel 2 Nivel 3
Media (U/l) 72.1 251
CLCULO MANUAL DE 3.97 8.81
Para calcular la actividad de la amilasa utilizar la siguiente CV (%) 5.50 3.51
frmula: n 20 20
U/l = 4712 x A 405 nm/min
CORRELACION
NORMALIZACIN Se compar este mtodo (Y) con otro mtodo comercial
El suero de Calibracin Randox nivel 3 es trazable a los disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
materiales de referencia amilasa IFCC456 y BCR476. lineal:

CONTROL DE CALIDAD Y = 1.077 X - 8.548

Se recomienda para el control de calidad diario Multisueros con un coeficiente de correlacin r = 0.9963
Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel 3. Se deber de analizar
SA
dos niveles de controles al menos una vez al da. Los valores se analizaron 49 muestras de pacientes abarcando un rango de
obtenidos debern encontrarse dentro del rango especificado. Si 28 - 838 U/l.
los valores se encuentran fuera del rango y su repeticin excluye
error, se debern seguir los siguientes pasos: REFERENCIAS
M

1. Comprobar programacin del instrumento y el origen de luz. 1. Ranscher, E. et al (1986) Fresenius Z. Analyt. Chem. 324:
2. Comprobar que todo material est limpio. 304.
AA

3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento de 2. Kruse - Jarres, J.D. et al (1989). J. Clin. Chem. Clin.
bacterias puede contribuir a la inexactitud de los resultados. Biochem. 27: 103.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus
G

componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de
los Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28
94422413.

VALORES NORMALES
Suero: hasta 95 U / l (37C)
Orina: Aleatorias hasta 490 U / l (37C)
24 horas de orina hasta 450 U/24 horas (37C)

Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio

rango de referencia para considerar las diferencias en edad,
sexo, dieta y localizacin geogrfica.

CARACTERISTICAS ESPECIFICAS DE
FUNCIONAMIENTO
Los siguientes datos se obtuvieron usando un analizador de Rx
Monza en el modo de flujo de clulas a 37C.

LINEARIDAD
El mtodo es lineal hasta una concentracin de 880 U / l.
Diluir las muestras con mayor concentracin en 1 + 9 con
0,9% de Solucin NaCl y repetir el test. Multiplique el
resultado por 10.

Revised 14 Sep 10 bm
Rev. 001

PAGE 2 OF 2
CALCIO (Ca) PREPARACION DE LOS REACTIVOS DE TRABAJO Y
ESTABILIDAD
Mtodo Colorimtrico Mezclar volmenes iguales de las soluciones R1 y R2 en cantidad
MANUAL suficiente para el nmero de muestras que se vayan a ensayar.
RX MONZA Estable durante 7 das cuando se conserve entre +2 y +8C 3
das entre +15 y +25C.
PARA SU USO
Para el anlisis cuantitativo in vitro de Calcio en el suero, plasma y MATERIALES SUMINISTRADOS
orina. Este producto es adecuado para un uso manual o en el Patrn
analizador RX monza. Tampn
Cromgeno
No. Cat. EDTA
CA 590 CAL. Patrn 5.5 ml
200 ml R1. Tampn 1 x 100 ml MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS
R2. Cromgeno 1 x 100 ml Multisueros Valorados Randox Nivel 2 (No. Cat. HN 1530) y
R3. EDTA 10 ml Nivel 3 (No. Cat. HE 1532)
Srum de calibration Randox Nivel 3 (Cat. No. CAL 2351)
METODO COLORIMETRICO(1)
O-cresolftalena complexona sin desproteinizacin. PROCEDIMIENTO DE NOTA
Si la muestra tiene un color fuerte intrnseca (hemoglobina: >
PRINCIPIO 200 mg/dl, bilirrubina> 20 mg/dl, o lipemia marcada), un blanco
Los iones calcio forman un complejo violeta con la de muestra se debe ejecutar. (Ver abajo)
o-cresolftalena complexona en medio alcalino.
Esta prueba es muy sensible, por lo tanto el uso de material
MUESTRA desechable es aconsejable. Recipientes de vidrio debern lavarse
Suero, plasma heparinizado u orina. Diluir la orina con cido clorhdrico diluido y luego enjuagar con agua destilada
1 + 1 en NaCl 0,9%. Multiplicar el resultado por 2. antes de su uso.

COMPOSICION DEL REACTIVO PROCEDIMIENTO

SA
Seleccione Calcio CPC en la pantalla de Ejecucin de prueba y
Componentes Concentraciones iniciales llevar a cabo un blanco de agua segn las instrucciones.
de las soluciones
M

Pipetear en la cubeta:
CAL. Patrn
Calcio Vedi inserto lotto-specifico Blanco de reactivo S0 Patrn S1 Muestra
AA

R1. Tampn
2-amino-2-metil- ddH20 12.5 l - -
propan-1-ol 3.5 mol/l, pH 10,7 Muestra - - 12.5 l
R2. Cromgeno Patrn - 12.5 l -
G

o-Cresolftalena 0,16 mmol/l Reactivo 500 l 500 l 500 l

complexona
8-hidroxiquinolina 6,89 mmol/l Mezclar, incubar por 5 min a +25, +30 o +37C Inserte la cubeta
Acido clorhdrico 60 mmol/l en el porta-RX monza celda de flujo y pulse Leer.
R3. EDTA 150 mmol/l
Para ejecutar un blanco de muestra:
Despus de medir la absorbancia de la muestra de acuerdo con
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD el procedimiento de ensayo, aadir una gota de solucin R3
Unicamente para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca. (EDTA) a la muestra y la solucin del reactivo. Cuando las
Respetar las precauciones normales necesarias, que se requieren muestras han convertido incoloro (despus de aproximadamente
al manejar reactivos de laboratorio. 10 segundos) insertar la cubeta en el porta-RX monza celda de
flujo y pulse leer. Este resultado debe ser manualmente resta de
Hojas informativas sobre Salud y Seguridad estn disponibles si se la muestra para obtener el valor corregido de calcio.
desean.
CALIBRACIN PARA RX MONZA
Los reactivos deben ser utilizados solo para los Recomend el uso de CAL Patrn proporcionado en el kit. La
propsitos indicados por personal adecuado cualificado calibracin se recomienda con un cambio en la cantidad de
de laboratorio bajo condiciones apropiadas de reactivo o como se indica por procudures de control de calidad.
laboratorio.

PREPARACION DE LOS REACTIVOS Y ESTABILIDAD

Todas las soluciones estn listas para su uso. Mantener las
botellas cerradas despus de utilizarlas. Estables hasta la fecha de
caducidad cuando se conservan entre +15 y +25C.

PGINA 1 DE 3
 MANUAL/ RX MONZA CA 590

PARA USO MANUAL CONTROL DE CALIDAD

Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel
Longitud de onda: Hg 578 nm (550-590 nm) 3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de
Espectrofotmetro: 570 nm controles al menos una vez al da. Los valores obtenidos debern
Cubeta: 1 cm de espesor encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se
Medicin: frente a blanco de reactivo encuentran fuera del rango y su repeticin excluye error, se
slo se requiere un debern seguir los siguientes pasos:
blanco por serie 1. Comprobar programacin del instrumento y la lmpara
Temperatura: +20 y +25C/+37C 2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento
bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
1. Para ensayos individuales 4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
Pipetear en tubos de ensayo: 6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los
Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +44 (0) 28 9442 2413.
Blanco de
Reactivo Patrn Muestra INTERFERENCIA/LIMITACIONES
Los siguientes analitos se analizaron hasta los siguientes niveles y
Muestra --- --- 25 l se encontr que no interfieren:
Agua destilada 25 l --- ---
CAL --- 25 l --- Bilirrubina 500 mol/l (29 mg/dl)
Solucin R1 0,5 ml 0,5 ml 0,5 ml Intralipid 2%
Solucin R2 0,5 ml 0,5 ml 0,5 ml
Triglicrido 22,75 mmol/l (2010 mg/dl)
Hemoglobina 6 g/l (600 mg/dl)
Mezclar, leer la absorbancia de la muestra (Amuestra) y del patrn
(Apatrn) frente al reactivo blanco al cabo de 5 a 50 min.
Gadodiamida (OMNISCAN: se utiliza en la RM) interfiere con el
calcio srico causando que los niveles bajos (3).
2. Para ensayos en serie

Pipetear en tubos de ensayo: VALORES NORMALES(2)

SA
Suero: 2,02 -2,60 mmol/l (8,10-10,4 mg/dl)
Blanco de Orina: 2,5 -6,2 mmol/24hrs (100 - 249 mg/24 hrs)
Reactivo Patrn Muestra
Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango
M

Muestra --- --- 25 l de referencia que refleje la edad, sexo, dieta y localidad
Agua destilada 25 l --- --- geogrfica de la poblacin.
Patrn --- 25 l ---
AA

Reactivo de trabajo 1,0 ml 1,0 ml 1,0 ml CARACTERISTICAS ESPECIFICAS DE

FUNCIONAMIENTO
Mezclar, leer la absorbancia de la muestra (Amuestra) y del patrn Los siguientes datos de funcionamiento se obtuvieron mediante
(Apatrn) frente al reactivo blanco al cabo de 5 a 50 min. el analizador RX monza en el modo de cubeta a +37C.
G

Aunque la absorbancia se puede leer durante los 5 a 50 minutos

siguientes, el tiempo de intervalo desde la adicin de la muestra a SUERO
la lectura deber ser exactamente el mismo para el LINEALIDAD
Patrn/Control y Muestra. El mtodo es lineal hasta 5,67 mmol / l (22,7 mg/dl). Las muestras
con concentraciones superiores deben diluirse 1 +1 con el 0,9%
Para ejecutar un blanco de muestra: Despus de medir la de NaCl y volver a ensayar, multiplicar el resultado por 2.
absorbancia de la muestra de acuerdo con el procedimiento de
ensayo, aadir una gota de solucin R3 (EDTA) a la muestra y la SENSIBILIDAD
solucin del reactivo. La concentracin mnima detectable de calcio con un nivel
Cuando las muestras han convertido incoloro (despus de aceptable de precisin se determin como 1,16 mg/dl
aproximadamente 10 segundos) insertar la cubeta en el porta-RX (0,290 mmol/l).
monza celda de flujo y pulse leer. Este resultado debe ser
manualmente resta de la muestra para obtener el valor corregido PRECISION
de calcio.
Intra Assay
CALCULOS Nivel 1 Nivel 2
Amuestra Mean (mg/dl) 9.02 12.4
Concentracin = x Concentracin del patrn SD 0.220 0.249
(mmol/l) Apatrn (mmol/l) CV(%) 2.44 2.01
n 20 20
Amuestra
Concentracin = x Concentracin del patrn Inter Assay
(mg/dl) Apatrn (mg/dl) Nivel 1 Nivel 2
Mean (mg/dl) 9.02 12.4
SD 0.352 0.317
STANDARDISATION CV(%) 3.91 2.56
Randox Calibration Serum Level 3 is traceable to Calcium n 20 20
reference material NIST 909b and NIST 956b.

PGINA 2 DE 3
 MANUAL/ RX MONZA CA 590

CORRELACION
Este mtodo (Y) se compar con otro mtodo disponible en el
mercado (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
lineal:

Y=0.9914 X -0.089
con un coeficiente de correlacin r = 0.9931

Se analizaron 42 muestras con valores de entre 4,1 y 16,5 mg/dl.

ORINA
LINEALIDAD
El mtodo es lineal hasta 7,13 mmol / l (28,6 mg / dl). Las
muestras con concentraciones superiores deben diluirse 1 +1
con el 0,9% de NaCl y volver a ensayar, multiplicar el resultado
por 2.

SENSIBILIDAD
La concentracin mnima detectable de calcio con un nivel
aceptable de precisin se determin como 1,29 mg/dl
(0,321 mmol/l).

REFERENCIAS
1. Ray Sarkar,B.C., and U.P.S. Chauhan., Anal Biochem. 1967;
20: 155.
2. Barnett, R.N., et al. (1973) Amer. J. Clin. Path. 59: 836.
3. Prince et al, Radiology 2003; 227: 639-646
SA
M
AA
G

Revisado 17 nov 11 rw
Rev. 002

PGINA 3 DE 3
CALCIO (Ca) PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Slo para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca. Ejecutar
ARSENAZO III las precauciones normales requeridas para el manejo de
Mtodo Colorimtrico reactivos de laboratorio.
MANUAL
RX MONZA Hojas Sanitarias y de Seguridad estn disponibles si se desean.

PARA SU USO
Para la determinacin cuantitativa in vitro de Calcio en suero,
plasma u orina. Este producto es adecuado para su utilizacin de
forma manual y en el analizador RX monza.
No. Cat.
CA 2390 R1. Reactivo Arsenazo 6 x 100 ml
SIGNIFICADO CLINICO(1)
El calcio es el quinto elemento ms abundante en el cuerpo. La
mayor parte del calcio en el adulto humano es extracelular y el
99% existe como hidroxiapatita cristalina en los huesos y los
dientes donde confiere rigidez. El calcio en el suero existe en
tres formas: unido a protenas (45%); ionizado (45%) y un 10%
forma un complejo con pequeos ligantes difusibles tales como
citrato, lactato, fosfato y bicarbonato. El calcio juega un papel
importante en los mecanismos de transmisin del impulso
nervioso, la contraccin muscular y la coagulacin sangunea. El
calcio tambin participa en la regulacin de la actividad de la
adenilato ciclasa y fosfodiesterasa a travs de la combinacin
reversible con la calmodulina. La secrecin de las glndulas
paratiroides, clulas tiroideas C y las clulas pancreticas B est
controlada por la concentracin de calcio ionizado extracelular
en la superficie celular.
Los niveles elevados de calcio en suero se encuentran en los
M
Por favor, desechar todos los materiales Biolgicos y Qumicos
segn las pautes locales.
Los reactivos deben ser utilizados slo para los
propsitos indicados por personal adecuado cualificado
de laboratorio bajo condiciones apropiadas de
laboratorio.
ESTABILIDAD Y PREPARACIN DE LOS REACTIVOS
Reactivo listo para usar. Estable hasta la fecha de caducidad
cuando se conservan entre +15 y +25C.
MATERIALES SUMINISTRADOS
Reactivo Arsenazo
MATERIALES NECESARIOS PERO NO
SUMINISTRADOS
Pipetear el dispositivo para suministrar 5 l y 1 ml.
Sincronizar el dispositivo y el lavado de agua o el bloque
calefactor para mantener la temperatura a 25, 30 37C.
Espectrofotmetro con capacidad de longitud de onda de 640 a
660 nm.
SA
Multisueros Valorados Randox Nivel 2 (No. Cat. HN 1530) y
Nivel 3 (No. Cat. HE 1532)
Suero de Calibracin Randox Nivel 3 (No. Cat. CAL 2351).

PROCEDIMIENTO
casos de hiperparatiroidismo, los carcinomas, sobredosis de Seleccione Ca en la pantalla Ejecutar prueba y llevar a cabo un
vitamina D y son de valor diagnstico en la deteccin de la blanco de agua segn las instrucciones.
AA

enfermedad renal crnica y enfermedad pancretica aguda. Los

bajos niveles de calcio srico se asocian con hipoparatiroidismo, Pipetee en una cubeta:
deficiencia de vitamina D y la insuficiencia renal.
Blanco de reactivo/ S0 Patrn S1 Muestra
G

PRINCIPIO
Arsenazo III se une especficamente al calcio formando un ddH2O 7.5 l - -
complejo coloreado que puede medirse a 650 nm. Muestra - - 7.5 l
Calibrador - 7.5 l -
Reactivo 500 l 500 l 500 l
Ca++ + Arsenazo III Complejo Coloreado
Mezclar, incubar por 5 min a 25C, 30C o 37C.
La cantidad de calcio presente en la muestra es directamente Inserte la cubeta en el soporte de la clula de flujo del Rx Monza
proporcional a la intensidad del complejo coloreado. y pulse Leer.
MUESTRA(4) PARA USO MANUAL
Suero/Plasma: NO USAR oxalato sdico, EDTA
(Lithium heparinzed) fluoruro sdico como anticoagulantes, Longitud de onda: 650 nm (640 nm - 660 nm)
ya que interfieren. El suero es estable Cubeta: 1 cm light path
durante 8 horas a temperatura
ambiente o 24 horas cuando se Temperatura 25/30/37C
conservan entre +2 y +8C Medicin: against air
Orina: Se recomienda realizar un ensayo
sobre la orina dentro de las dos horas Pipetee en una cubeta:
posteriores a la recoleccin. Blanco de
reactivo Calibrador Muestra
COMPOSICIN DEL REACTIVO
Agua destilada 15 l - -
Componentes Concentracin Inicial de las soluciones Muestra - - 15 l
Calibrador - 15 l -
Reactivo 1 1.0 ml 1.0 ml 1.0 ml
R1. Reactivo Arsenazo III
Acetato Sdico 54.2 mmol/l, pH 5.9 Mezclar y leer la absorbencia de la muestra (Amuestra) y
Arsenazo approx. 250 mol/l calibrador (Acalibrador) contra el blanco de reactivo despus de
Estabilizadores No reactivos 5 minutos.

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 MANUAL/ RX MONZA CA 2390

CLCULO MANUAL PRECISION

Amuestra Precisin Dentro del Anlisis

Concentracin = x calibrador de valor Muestra Nivel 2 Nivel 3
Acalibrador Media (mg/dl) 10.1 12.8
DE 0.337 0.392
CALIBRACIN CV (%) 3.34 3.07
Se recomienda el uso de solucin salina y Suero de Calibracin n 20 20
Randox Nivel 3 para la calibracin. La calibracin se recomienda
en los cambios de lote del reactivo o como se indica en los Precisin Total
procedimientos de control de calidad. Muestra Nivel 2 Nivel 3
Media (mg/dl) 10.1 12.8
CONTROL DE CALIDAD DE 0.424 0.371
Se recomienda para el control de calidad diario Multisueros CV (%) 4.20 2.90
Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel 3. Se deber de analizar dos n 20 20
niveles de controles al menos una vez al da. Los valores
obtenidos debern encontrarse dentro del rango especificado. Si los METHOD COMPARISON
valores se encuentran fuera del rango y su repeticin excluye error, El mtodo Randox (Y) se compar con un mtodo alternativo
se debern seguir los siguientes pasos: disponible comercialmente (X). Cuarenta muestras de los
1. Comprobar programacin del instrumento y el origen de luz. pacientes con valores que abarca el rango de 1,7 a 12.1mg/dl se
2. Comprobar que todo material est limpio. pusieron a prueba. El anlisis de regresin lineal result en la
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento de siguiente ecuacin:
bacterias puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin Y = 0.961 X + 0.4
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes. con un coeficiente de correlacin r = 0.9929
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de
los Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28 ORINA
94422413. LINEARIDAD
SA
Este mtodo es lineal hasta 14,5 mg / dl. Diluir las muestras por
INTERFERENCIAS / LIMITACIONES (5) encima de esta concentracin a 1+1 con el 0,9% de NaCl y
Gadodiamida (OMNISCAN: usado en el RM imagin) interfiere repetir el test. Multiplique el resultado por 2.
con el calcio srico causando niveles bajos.
M

SENSIBILIDAD
VALORES NORMALES(3) El nivel mnimo detectable de calcio con un nivel aceptable de
AA

Suero: 2.02 - 2.60 mmol/l ( 8.10 - 10.4 mg/dl ) precisin ha sido determinada como 0,78 mg / dl.
Orina: 2.5 - 6.2 mmol/24 hrs (100 - 249 mg/24 hrs)
REFERENCIAS
Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango 1. Tietz, N.W., Fundamentals of Clinical Chemistry 2nd Edition
G

de referencia para considerar las diferencias en edad, sexo, dieta
y localizacin geogrfica.
CARACTERISTICAS ESPECIFICAS DE
FUNCIONAMIENTO
Los siguientes datos se obtuvieron usando un analizador Rx
Monza funcionando a una temperatura de 37C.
W.B. Saunders Co., Philadelphia (1976)
2. Michaylova, V., and IIIkova, P., Anal Chem Acta, 53: 194
(1971).
3. Barnett, R.N., et al. (1973) Amer. J. Clin. Path. 59: 836.
4. Young, D. Pestaner L., Clin Chem. 21: 5 (1975).
5. Prince et al, Radiology 2003; 227: 639-646.

SUERO

LINEALIDAD
Este mtodo es lineal hasta 14,4 mg / dl. Diluir las muestras por
encima de esta concentracin a 1 +1 con el 0,9% de NaCl y
repetir el test. Multiplique el resultado por 2.

SENSIBILIDAD
El nivel mnimo detectable de calcio con un nivel aceptable de
precisin ha sido determinada como 0,54 mg / dl.

Revised 17 Nov 11 bm
Rev. 002

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CO2 TOTAL (CO2) PRECAUCIONES DE SEGURIDAD Y CONSEJOS
Slo para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca. Ejecutar
340 nm las precauciones normales requeridas para la manipulacin de
Manual reactivos de laboratorio.

PARA SU USO La solucin R1a contiene azida sdica. Evitar su ingestin o el

Determinacin cuantitativa in vitro de dixido de carbono en contacto con la piel o las membranas mucosas. En caso de
suero y plasma. Este producto es adecuado para su utilizacin en contacto con la piel, lavar la zona afectada con abundante agua
Manual. durante 10 minutos. En caso de contacto con los ojos o
ingestin, buscar atencin mdica inmediatamente.
No. Cat.
CD 127 R1a. Tampn 1 x 105 ml La azida sdica reacciona con el plomo y el cobre de las caeras,
10 x 10 ml R1b. Reactivo CO2 10 x 10 ml formando azidas potencialmente explosivas. Cuando se eliminen
CAL. Standard 1 x 5.5 ml dichos reactivos, limpiar con grandes volmenes de agua para
evitar la formacin de azidas. Las superfcies metlicas expuestas
CD 129 R1a. Tampn 10 x 50 ml debern limpiarse con hidrxido de sodio al 10%.
10 x 50 ml R1b. Reactivo CO2 10 x 50 ml
CAL. Standard 1 x 5.5 ml Existen hojas sanitarias y de seguridad disponibles previa
solicitud.
SIGNIFICADO CLNICO(1)
El incremento de CO2 sanguneo (hipercapnia) provoca una Los reactivos deben ser utilizados solamente para su
acidosis respiratoria. El CO2 aumenta cuando la ventilacin propsito por personal de laboratorio cualificado y bajo
alveolar est disminuida en patologas pulmonares o bronquiales, condiciones de laboratorio apropiadas.
o tambin al respirar aire con niveles elevados de CO2. La
depresin de la capacidad pulmonar total provocada por algunos ESTABILIDAD Y PREPARACIN DE REACTIVOS
medicamentos puede conllevar una retencin de CO2. R1a. Tampn
Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad
PRINCIPIO(2,3) cuando se conserva entre +2 y +8oC.
SA
PEPC
Fosfoenolpiruvato + HCO3- oxaloacetato + H2P04- R1b. Reactivo CO2
CD 127
MDH
Reconstituir 1 vial de CO2 R1b con 10 ml de tampn
oxaloacetato + NADH + H+ malato + NAD+
M

R1a. Estable durante 15 das entre +2 y +8C, en su

La disminucin de la absorbancia a 340 nm provocada por la frasco original sellado, 70 horas entre +2 y +8C o 25
horas entre +15 y +25C expuesto a la atmsfera
AA

oxidacin del NADH es directamente proporcional a la

concentracin de bicarbonato en la muestra. cuando se almacena en el recipiente original o en un
recipiente con un cuello estrecho. Vase la nota 4.
RECOGIDA Y PREPARACIN DE MUESTRAS(4) CD 129
G

Suero o plasma heparinizado. Reconstituir el contenido de un vial de CO2 R1b con

una parte de tampn R1a. Transferir todo el
No deben usarse como anticoagulantes EDTA, oxalato citrato, contenido de la botella de tampn 1, enjuagando el
ya que podran afectar a los resultados. Sumergir la muestra en vial 2 varias veces. Estable durante 15 das entre +2 y
hielo y analizarla en la hora que sigue. Las muestras se debern +8C, en su frasco original sellado, 70 horas entre +2
conservar cerradas hermticamente, ya que el CO2 se difunde de y +8C o 25 horas entre +15 y +25C expuesto a la
la muestra, causando valores errneos (hasta 6 mmol/hr) atmsfera cuando est en su envase original o en en
un recipiente con un cuello estrecho. Vase la nota 4.
COMPOSICIN DE LOS REACTIVOS
NOTA: No agitar el reactivo cuando se
Contents Concentration in the Test reconstituya, ya que esto puede causar una absorcin
de CO2 excesiva. Es suficiente con invertir el frasco
R1a. Tampn con cuidado una vez.
Tampn Tris 25 mmol/l, pH 6.5
R1b. Reactivo CO2 CAL. Patrn
Fosfoenolpiruvato (PEP) 6.3 mmol/l Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad
NADH 0.45 mmol/l cuando se conserva entre +2 y +8oC.
Fosfoenolpiruvato Carboxilasa (PEPC) 200 U/l
Malato Deshidrogenasa (MDH) 600 U/l MATERIAL SUMINISTRADO
Mg2+ 8.0 mmol/l Tampn
CAL. Patrn Vedi inserto lotto-specifico Reactivo CO2
Patrn

MATERIAL NECESARIO PERO NO SUMINISTRADO

Randox Assayed Multisera, Nivel 2, No. Cat. HN1530 y Nivel 3,
No. Cat. HE1532.

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 MANUAL CD 127

NOTAS DE PROCEDIMIENTO SUSTANCIAS QUE INTERFIEREN(4)

1. Para permitir que el reactivo para alcanzar el equilibrio, se La mayor interferencia en este ensayo la constituye el CO2 del
recomienda que se reconstituye preferiblemente la noche aire o del aliento del analista. Existen otros medicamentos y
antes, pero por lo menos 4 horas antes de su uso. El reactivo sustancias que modifican los niveles de CO2 sanguneo. La
es entonces estable durante 15 das entre +2 y +8C en su hemoglobina no afecta en el ensayo hasta una concentracin de 2
vial original sellado o 70 horas entre +2 y +8C expuesto a la g/l.
atmsfera.
2. No exponer el reactivo al aire ms de lo necesario y VALORES NORMALES EN SUERO(5)
almacenarlo cerrado hermticamente. Adultos : Arterial 21 - 28 mmol/l
3. No pipetear con la boca. Venoso 22 -29 mmol/l
4. No agitar el reactivo vigorosamente ya que se podra
producir una absorcin excesiva de CO2 . Arterial Recin nacidos 17,2 -23,6 mmol/l
Nios pequeos 19,0 -23,9 mmol/l
PROCEDIMIENTO
Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango
Longitud de onda: 340 nm de referencia para referirse a la edad, el sexo, la dieta y la
Cuveta: 1 cm de espesor situacin geogrfica de la poblacin.
Temperatura: 37C
Medicin: frente a agua destilada LINEALIDAD
Este mtodo es lineal hasta una concentracin de 50 mmol/l. Las
Pipetear en la cubeta: muestras con concentraciones superiores debern diluirse 1+1
con solucin NaCl al 0,9% y multiplicar el resultado por 2.
Test Blanco Patrn
SENSIBILIDAD
Muestra 5 l -- -- Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango
Agua bidestilada -- 5 l -- se sensibilidad, ya que est limitada por el espectrofotmetro
Patrn -- -- 5 l utilizado. Bajo las condiciones del anlisis, un cambio de la
Reactivo 1000 l 1000 l 1000 l absorbancia de 0,001 unidades es equivalente a 0,8 mmol/l.
SA
Incubar durante 5 min. a 37oC y medir la absorbancia del patrn REFERENCIAS
(Apatrn), de la muestra (Amuestra), y del reactivo blanco (Ablanco). 1. Tietz, N. N., et al "Textbook of Clinical Chemistry" W. B.
Saunders Co., 1986; 1172-1253.
M

CACULO 2. Jacobs, N., et al "Laboratory Test Handbook" 2nd. ed.,

Williams and Wilkins 1990.
AA

Amuestra = Ablanco - Amuestra 3. Forrester, R.L., Wataji, L.J., Silverman, D.A., Pierre K.J., Clin,
Chem. 1976; 22/2: 243-245.
Amuestra 4. Young D.S., Effects of Drugs on Chemical Laboratory Tests,
CO2 Total = x conc. de patrn 3rd ed., AACC Press 1990.
G

(mmol/l) Apatrn 5. Norris, K.A., Atkinson, A.R., Smith, W.G., Clin. Chem. 1975;
21/8: 1093 - 1101.

CALIBRACIN
Se recomienda para la calibracin el patrn CO2 Randox
suministrado con el kit. El patrn est preparado
gravimtricamente utilizando bicarbonato sdico grado A.C.S. Se
recomienda recalibrar para cada serie de muestras analizadas.

CONTROL DE CALIDAD
Se aconseja Randox Assayed Multisera, Nivel 2 y Nivel 3 para un
control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de control
como mnimo una vez al da. Los valores obtenidos deben
encontrarse dentro de un rango especfico. Si los valores se
encuentran fuera del rango y su repeticin excluye el error, se
debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar los parmetros del instrumento y la lmpara.
2. Comprobar que todo el material est limpio.
3. Comprobar el agua y la contaminacin (el crecimiento
bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los resultados).
4. Comprobar la temperatura de reaccin.
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y de sus componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los
Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +44 (0) 28 9442
2413.
Revised 01 Feb 11 bm
Rev. 002

PAGE 2 OF 2
COLESTEROL (CHOL) RECOGIDA Y PREPARACIN DE MUESTRAS(5)
Suero: Puede ser utilizado.
Mtodo Enzimtico de Punto Final Plasma: Tratado con EDTA (1 mg/ml) o heparina (up to 75
MANUAL U/ml) No utilizar citrato, oxalato o fluor.
RX MONZA Las muestras de Plasma y Suero pueden almacenarse durante 4
das +4C.
PARA SU USO
Para la determinacin cuantitativa in vitro de Colesterol en suero y COMPOSICION DEL REACTIVO
plasma. Este producto es adecuado para su utilizacin de forma
Componentes Concentracin inicial de la solucin
manual y en el analizador Rx Monza.
R1. Reactivo
Cat. No. 4-aminoantipirina 0,30 mmol/l
CH 200 R1. Reactivo 6 x 30 ml Fenol 6 mmol/l
6 x 30 ml CAL. Patrn 1 x 5.5 ml Peroxidasa 0,5ml
Colesterol esterasa 0,15 U/ml
CH 201 R1. Reactivo 6 x 100 ml Colesterol oxidasa 0,1 U/ml
6 x 100 ml CAL. Patrn 1 x 5.5 ml Tampn Pipes 80 mmol/l;pH 6,8
CAL. Patrn Vedi inserto lotto-specifico
CH 202 R1. Reactivo 8 x 250 ml
8 x 250 ml CAL. Patrn 1 x 5.5 ml
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
UTILIDAD CLNICA(1,2,3) Unicamente para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca.
El anlisis de Colesterol s utilizado para el diagnstico y Respetar las precauciones normales necesarias, que se requieren
tratamiento de dislipemias y desrdenes metablicos. al manejar reactivos de laboratorio.
Los lpidos representan un importante papel en el cuerpo
humano: ya sea cmo homonas o precursores hormonales, La solucin R1 contiene azida sdica. Evitar su ingestin o el
ayuda a la digestin, fuente o almacn de recursos energticos, contacto con la piel y mucosas. En caso de contacto con la piel,
componentes estructurales y funcionales de membranas lavar inmediatamente el rea afectada con agua abundante. En
caso de ingestin o contacto con los ojos llamar inmediatamente
biolgicas, o funcionando como aislantes para prevenir prdidas
SA
a un mdico.
de calor y permitir la conduccin nerviosa
La azida sdica reacciona con el cobre y plomo de las tuberas, lo
En Qumica Clnica, los lpidos han sido asociado durante la que podra producir azidas explosivas. Cuando se deseche este
M

ltima dcada con el metabolismo de las lipoprotenas y la reactivo enjuagar abundantemente con agua para evitar la
ateriosclerosis formacin de estas azidas. Las superficies metlicas que hayan
sido puestas en contacto con la azida sdica deben ser lavadas
AA

El mtodo descrito por Abell y cols (1952) se refiere a la con hidrxido sdico al 10%.
extraccin del colesterol con disolventes orgnicos y una
posterior hidrlisis alcalina de los steres de colesterol. Hojas informativas sobre Salud y Seguridad estn disponibles si se
La reaccin s altamente especfica, pero la metodologa es desean.
G

laboriosa y requiere reactivos corrosivos, siendo por tanto

impracticable en la rutina diaria del laboratorio Por favor, desechar todos los materiales Biolgicos y Qumicos
segn las pautas locales.
Richmond (1973) describi el mtodo de la colesterol oxidasa,
trs la saponificacin de la muestra. Este mtodo fu el primer Los reactivos deben ser utilizados solo para los
paso hacia un procedimiento totalmente enzimtico. Allain y cols propsitos indicados por personal adecuado cualificado
junto con Roeschaw y cols publicaron en 1974 el primer de laboratorio bajo condiciones apropiadas de
laboratorio.
procedimiento completamente enzimtico para determinar
colesterol, reemplazando as la saponificacin qumica por la
ESTABILIDAD Y PREPARACIN DE LOS REACTIVOS
saponificacin enzimtica. (R1) Reactivo
Listo para su uso. Es estable hasta la fecha de caducidad cuando
PRINCIPIO(4) se conserva entre +2 y +8C en ausencia de contaminacin y
El colesterol se determina tras una hidrlisis enzimtica y una protegido de la luz.
oxidacin. El indicador quinoneimina se forma a partir de
perxido de hidrgeno y 4-aminoantipirina en presencia de fenol (CAL.) Patrn
y peroxidasa. Listo para su uso. Es estable hasta la fecha de caducidad cuando
colesterol se conserva entre +2 y +8C.
Ester de colesterol + H2O colesterol + Acidos grasos
esterasa MATERIALES SUMINISTRADOS
colesterol Reactivo
Colesterol + O2 Colesten-3-ona + H2O2 Patrn
oxidasa

peroxidasa MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS

2H2O2+fenol+4-aminoantipirina quinoneimina + H2O Multisueros Valorados Randox Nivel 2 (No. Cat. HN 1530) y
Nivel 3 (No. Cat. HE 1532)
Srum de calibration Randox Nivel 3 (Cat. No. CAL 2351).

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 MANUAL/ RX MONZA CH 200

PROCEDIMIENTO CONTROL DE CALIDAD

Utilice H2O de doble destilacin para realizar una nueva Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel
calibracin de la ganancia en el modo cubeta. Seleccione CHOL 3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de
en la pantalla Run Test (Realizar anlisis) y lleve a cabo un blanco controles al menos una vez al da. Los valores obtenidos debern
de agua de la forma indicada. encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se
encuentran fuera del rango y su repeticin excluye error, se
debern seguir los siguientes pasos:
Pipetear en tubos de ensayo: 1. Comprobar la programacin del instrumento y la lmpara
2. Comprobar que todo material est limpio.
Blanco de reactivo S0 Patrn S1 Muestra 3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento bacteriano
puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
ddH2O 5 l - - 4. Comprobar la temperatura de reaccin
Patrn - 5 l - 5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
Muestra - - 5 l 6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los
Reactivo 500 l 500 l 0.5 ml Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +44 (0) 28 9442 2413.
Mzclelo e incbelo durante 10 minutos a 20-25C o durante 5 INTERFERENCIA
minutos a 37C. Valores de hemoglobina hasta 200 mg/dl y de bilirrubina hasta 5
Introdzcalo en el soporte de la celda de flujo de RX Monza y mg/dl y de triglicrido hasta 4,64 mmol/l, no interfieren en la
pulse Read (Leer) en un plazo de 60 minutos. prueba.
CALIBRACIN PARA RX MONZA VALORES NORMALES EN SUERO/PLASMA(6)
Recomend el uso de CAL estndar en el kit de calibracin o de Niveles de riesgo
suero Randox Nivel 3. La calibracin se recomienda con un
cambio en la cantidad de reactivo o como se indica por los Valor Interpretacin
procedimientos de control de calidad.
< 5,17 mmol/l (200 mg/dl) Colesterol en sangre deseado
PARA USO MANUAL 5,17 - 6,18 mmol/l (200-239 mg/dl) Colesterol en sangre
lmite-alto
SA
Longitud de onda 500 nm, Hg 546 nm 6,20 mmol/l (240 mg/dl) Colesterol en sangre alto
Cubeta 1 cm de espesor
Temperatura 20-25C, 37C Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango
Medicin frente a reactivo blanco que refleje la edad, sexo, dieta y localidad geogrfica de la
M

poblacin.
Pipetear en la cubeta:
AA

CARACTERSTICAS ESPECIFICAS DE
Reactivo Blanco (l) Patrn (l) Muestra (l) FUNCIONAMIENTO
Los siguientes datos de funcionamiento se obtuvieron mediante
Agua Destilada 10 --- --- el analizador Rx Monza a una temperatura de 25oC.
G

Patrn --- 10 ---

Muestra --- --- 10 LINEALIDAD
Reactivo 1000 1000 1000 El mtodo es lineal hasta una concentracin de colesterol de 656
mmol/l (17.0 mg/dl). Las muestras con concentraciones de
Mezclar, incubar durante 10 min. a 20-25C 5 min. a 37C. colesterol superiores a sta, deben ser diluidas 1+2 con NaCl al
Medir la absorbancia de la muestra (Amuestra) frente al blanco 0,9%. Multiplicar el resultado por 3.
antes de 60 min.
SENSIBILIDAD
CLCULO MANUAL La concentracin detectable mnima de Colesterol con un nivel
1. Utilizando un patrn: aceptable de precisin se determin en 13,7 mg/dl (0,354
Amuestra mmol/l).
Conc. de colesterol = x Conc. de patrn
en la muestra Apatrn PRECISION
Anlisis (Intra)
2. Utilizando un factor: Nivel 2 Nivel 3
Media (mg/dl) 3.65 7.18
Longitud de onda mmol/l mg/dl DE 0.100 0.088
CV(%) 2.74 1.23
n 20 20
Hg 546 nm 21,7 x A 840 x A
500 nm 14,3 x A 553 x A
Anlisis (Inter)
Nivel 2 Nivel 3
Media (mg/dl) 3.65 7.18
NORMALIZACIN DE 0.143 0.333
El suero de calibracin de nivel 3 de Randox sigue lo indicado en CV(%) 3.92 4.64
el material de referencia NIST 909b and NIST 1952a de la n 20 20
Colesterol.

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 MANUAL/ RX MONZA CH 200

CORRELACION
Este mtodo (Y) se compar con otro mtodo comercial
disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
lineal:

Y = 0.963 X - 0.157
y un coeficiente de correlacin r = 0,9943

Se analizaron 44 muestras de pacientes con valores de entre 0,42

y 15,85 mmol/l.

REFERENCIAS
1. Abell, L.L, Levey, B.B., Brodie B.B., et al, J. Biol Chem 195 :
357, 1952
2. Richmond, N., Clin Chem 19 : 1350 - 1356, 1973
3. Roeschlau, P., Bernt, E. and Gruber, J.W., Clin Chem Clin
Biochem. 12 : 403, 1974
4. Trinder, P., Ann clin Biochem 6 : 24, 1969.
5. Clinical Laboratory Diagnostics. 1st Edition (1998) p169;
Lothar Thomas ed. TH-Books Verlagsgesellschaft mbH,
Frankfurt/Main, Germany
6. Third Report of the National Cholesterol Education
Programme (NCEP) Expert Panel on Detection, Evaluation
and treatment of High Blood Cholesterol in Adults (Adult
Treatment Panel III). JAMA Publication, Vol 285, No. 19,
P2486 - 2497; 2001.
SA
M
AA
G

Revisado 15 Sep 10 bm
Rev. 001

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CK-NAC-activada METODO UV(1)
Este es un mtodo estndar optimizado segn las
Creatina Quinasa recomendaciones de la Deutschen Gesellschaft fr Klinische
MANUAL Chemie.
RX MONZA
PRINCIPIO
PARA SU USO CK
Para la determinacin cuantitativa in vitro de Creatina Quinasa en Fosfato de creatina + ADP Creatina + ATP
suero y plasma. Este producto es adecuado para un uso manual o HK
en el analizador RX monza. Glucosa + ATP Glucosa-6-P + ADP
G-6-PDH
No. Cat. Glucosa-6-P + NADP+ Gluconato-6-P + NADPH + H+
CK 110 R1a. Tampn/Glucosa 1 x 70 ml
20 x 2,5 ml R1b. Enzimas/Coenzimas/ 20 x 2,5 ml MUESTRA
Sustrato Suero, plasma heparinizado o EDTA plasma.

CK 335 R1a. Tampn/Glucosa 1 x 70 ml COMPOSICIN DEL REACTIVO

20 x 3,0 ml R1b. Enzimas/Coenzimas/ 20 x 3,0 ml
Sustrato Componentes Concentraciones en la prueba

CK 522 R1a. Tampn/Glucosa 1 x 105 ml R1a. Tampn/Glucosa

10 x 10 ml R1b. Enzimas/Coenzimas/ 10 x 10 ml Tampn Imidazol 0,10 mol/l, pH 6,7
Sustrato Glucosa 20 mmol/l
Mg-Acetato 10 mmol/l
CK 113 R1a. Tampn/Glucosa 2 x 100 ml EDTA 2,0 mmol/l
6 x 30 ml R1b. Enzimas/Coenzimas/ 6 x 30 ml R1b. Enzimas/Coenzimas/Sustrato
Sustrato ADP 2,0 mmol/l
AMP 5,0 mmol/l
SIGNIFICADO CLINICO(3) Pentafosfato de diadenosina 10 mol/l
SA
La Creatina Quinasa (CK) se encuentra principalmente en el NADP 2,0 mmol/l
msculo estriado, el cerebro y los tejidos musculares. El anlisis HK 2,5 U/ml
de la actividad de la CK en plasma o suero, provee un marcardor G-6-PDH 1,5 U/ml
M

sensible para la deteccin de enfermedades del tejido muscular N-Acetilcisteina 20 mmol/l

esesqueltico. Por ej. En la distrofia muscular del tipo Duchenne Fosfato de creatina 30 mmol/l
se pueden encontrar niveles de CK hasta 50 veces superior al
AA

lmite de normalidad establecido. En el caso de la distrofia

muscular progresiva la actividad mxima de sta enzima se PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
observa en nios y lactantes Unicamente para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca.
Respetar las precauciones normales necesarias, que se requieren
G

La actividad de la CK es tambin til en el diagnstico del infarto al manejar reactivos de laboratorio.

de miocardio y acidentes cerebrovasculares.
La determinacin de la CK utilizando creatina fosfato y adenosin-
5-difosfato (ADP) como substratos en lugar de creatina y
adenosin-5-trifosfato (ATP), tiene varias ventajas en el
funcionamiento del test ya que permite un valor de reaccin ms
rpido resultando en una sensibilidad mayor. Se utilizan
cantidades de muestra pequeas y no se necesitan los blancos de
muestra.
Debido a la oxidacin de los grupos sulfidril en la zona activa de
la creatina quinasa, la enzima es muy inestable. Sin embargo, el
enzima se reactiva aadiendo compuestos tiol.
La solucin R1a contiene azida sdica. Evitar su ingestin o el
contacto con la piel y mucosas. En caso de contacto con la piel,
lavar inmediatamente el rea afectada con agua abundante. En
caso de ingestin o contacto con los ojos llamar inmediatamente
a un mdico.
La azida sdica reacciona con el cobre y plomo de las tuberas, lo
que podra producir azidas explosivas. Cuando se deseche este
reactivo enjuagar abundantemente con agua para evitar la
formacin de estas azidas. Las superficies metlicas que hayan
sido puestas en contacto con la azida sdica deben ser lavadas
con hidrxido sdico al 10%

Por este motivo se incluye N-acetil-L-cisteina (NAC) en el test.
Tambin se incluyen en el sistema del test adenosin-5'-
monofosfato (AMP) y diadenosin pentafosfato, para inhibir la
actividad mioquinasa la cual interfiere. En este sistema de test no
existen sulfatos ya que alteran la reaccin ,
Hojas informativas sobre Salud y Seguridad estn disponibles si se
desean.
Los reactivos deben ser utilizados solo para los
propsitos indicados por personal adecuado cualificado
de laboratorio bajo condiciones apropiadas de
laboratorio.

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ESTABILIDAD Y PREPARACIN DE LOS REACTIVOS CALCULOS
R1a. Tampn/Glucosa Para calcular la actividad de la CK utilizar las frmulas siguientes:
Listo para usar. Estables hasta la fecha de caducidad
cuando se conservan entre +2 y +8C. 25/30C 37C

R1b. Enzimas/Coenzimas/Sustrato U/l = 4127 x A340 nm/min U/l = 8095 x A340 nm/min
Reconstituir un vial de Enzimas/Coenzimas/Sustrato R1b U/l = 4207 x A Hg 334 nm/min U/l = 8252 x A Hg 334 nm/min
con el volumen adecuado de Tampn/Glucosa R1a: U/l = 7429 x A Hg 365 nm/min U/l = 14571 x A Hg 365 nm/min
2,5 ml para el kit de 20 x 2,5 ml (CK 110)
3,0 ml para el kit de 20 x 3,0 ml (CK 335)
10 ml para el kit de 10 x 10 ml (CK 522) NORMALIZACIN
30 ml para el kit de 6 x 30 ml (CK 113) El suero de calibracin de nivel 3 de Randox sigue lo indicado en
Estables durante 3 semanas entre +2 y +8C 3 das el material de referencia AD455 (IFCC) de la CK-NAC.
entre +15 y +25C.
CONTROL DE CALIDAD
Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel
MATERIALES SUMINISTRADOS
3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de
Tampn/Glucosa
controles al menos una vez al da. Los valores obtenidos debern
Enzimas/Coenzimas/Sustrato
encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se
encuentran fuera del rango y su repeticin excluye error, se
MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS
debern seguir los siguientes pasos:
Multisueros Valorados Randox Nivel 2 (No. Cat. HN 1530) y
1. Comprobar programacin del instrumento y el origen de luz.
Nivel 3 (No. Cat. HE 1532)
2. Comprobar que todo material est limpio.
Randox Calibration Serum Level 3 (Cat. No. CAL 2351).
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento
bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
PROCEDIMIENTO PARA RX MONZA
4. Comprobar la temperatura de reaccin
Aspirar ddH2O fresco y realizar una nueva calibracin de
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
ganancia en el modo de flujo de clulas. Seleccione la NAC en la
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los
pantalla de Ejecucin de prueba y llevar a cabo un blanco de agua
Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28 94422413.
SA
segn las instrucciones
INTERFERENCIA
Pipetear en tubos de ensayo:
Evitar la hemlisis ya que interfiere con el ensayo.
M

Muestra 10 l
VALORES NORMALES EN SUERO(2,3)
Reactivo 500 l
AA

Mezclar y aspirar a la RX monza. 25C 30C 37C

CALIBRACIN PARA RX MONZA Hombre 10 - 80 U/l 15 - 130 U/l 24 - 195 U/l

Mujer 10 - 70 U/l 15 - 110 U/l 24 - 170 U/l
G

Se recomienda el uso de suero fisiolgico y suero de calibracin

de nivel 3 de Randox para la calibracin. Es aconsejable cambiar
el lote del reactivo para la calibracin o seguir lo indicado por los
procedimientos de control de calidad.
MANUAL PROCEDURE
Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango
que refleje la edad, sexo, dieta y localidad geogrfica de la
poblacin.

Longitud de onda: 340 nm, Hg 365 nm o Hg 334 nm CARACTERISTICAS ESPECIFICAS DE

Cubeta: 1 cm de espesor FUNCIONAMIENTO
Los siguientes datos de funcionamiento se obtuvieron mediante
Temperatura: 25C/30C/37C
Medicin: Frente al aire el analizador RX monza en el modo de flujo de clulas a 37C.

Pipetear en la cubeta: LINEARIDAD

Este mtodo es lineal hasta 2804 U / l. Si la concentracin de la
muestra supera este valor, diluir la muestra 1 +9 con el 0,9% de
25/30C 37C
NaCl y repetir el test. Multiplique el resultado por 9 +1.
Macro Semi Micro Macro Semi Micro
SENSIBILIDAD
Enzimas/Coenzimas/
La concentracin mnima detectable de la Creatina Quinasa con
Sustrato 2,5 ml 1,0 ml 2,5 ml 1,0 ml
un nivel aceptable de precisin se determin como 21,7 U/l.
Muestra 0,1 ml 0,04 ml 0,05 ml 0,02 ml

Mezclar, incubar durante: 3 min a 25C

2 min a 30C
1 min a 37C
Leer la absorbancia inicial y empezar a cronometrar el tiempo
simultneamente. Leer de nuevo al cabo de 1, 2 y 3 min.

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PRECISION

Anlisis (Intra)
Nivel 1 Nivel 2
Media (U/l) 215 549
DE 4.97 8.51
CV(%) 2.31 1.55
n 20 20

Anlisis (Inter)
Nivel 1 Nivel 2
Media (U/l) 215 549
DE 8.41 18.4
CV(%) 3.91 3.35
n 20 20

CORRELACION
Se compar este mtodo (Y) con otro mtodo comercial
disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
lineal:

Y = 0.9538 X + 7.5746
con un coeficiente de correlacin r = 0.9988

Se analizaron 47 muestras con valores de entre 37 y 2755 U/l.

REFERENCIAS
1. Rec. GSCC (DGKC); J. Clin. Chem. Clin. Biochem 1977; 15:
255.
SA
2. Stein, W. (1985), Med. Welt 36: 572.
3. Szasz, G., et al. Clin. Chem 1976; 22: 650.
M
AA
G

Revisado 15 Sep 10 bm
Rev. 001

PAGE 3 OF 3
CK-MB (NAC-act.) PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Slo para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca. Ejecutar
Mtodo UV las precauciones normales requeridas para el manejo de
MANUAL reactivos de laboratorio.
RX MONZA
La solucin R1a contiene Azida Sdicas. Evitar su ingestin o el
PARA SU USO contacto con la piel o las membranas mucosas. En caso de
Para el anlisis cuantitativo in vitro de CK-MB en suero y plasma. contacto con la piel, lavar la zona afectada con abundante agua.
Este producto es adecuado para su utilizacin de forma manual y En caso de contacto con los ojos o ingestin, buscar atencin
en el analizador RX monza. mdica inmediatamente.

No. Cat. Las azidas sdicas reaccionan con el plomo y cobre de las
CK 1296 R1a. CK NAC/CK-MB Tampn/Glucosa 1 x 70 ml caeras, formando cidos potencialmente explosivos. Cuando se
19 x 2.5 ml R1b. Enzima/Coenzimas/ eliminen dichos reactivos, limpiar con grandes volmenes de agua
Substrato/Anticuerpo 19 x 2.5 ml para evitar la formacin de cidos. Las superficies metlicas
CONTROL 1 x 2 ml expuestas, debern limpiarse con hidrxido sdico al 10%.

CK 1553 R1a. CK NAC/CK-MB Tampn/Glucosa 1 x 105 ml Atencin: Suero de Control

5 x 20 ml R1b. Enzima/Coenzimas/
Substrato/Anticuerpo 5 x 20 ml
CONTROL 2 x 2 ml
SIGNIFICADO CLINICO(1)
La Creatina Kinasa (CK) est aceptada internacionalmente como
un indicador sensitivo y especfico del infarto de miocardio agudo
(AMI). Existen 3 tipos de iso-enzimas CK, CK-MM, CK-MB y
CK-BB. El CK-BB lo produce el cerebro a partir del tejido del
esqueleto y el corazn y el CK-MB se produce a partir del
msculo del corazn. En la mayora de los casos la actividad de
CK aumenta durante las 6 horas posteriores a un infarto agudo.
Los valores mximos se observan al cabo de unas 20 horas. La
actividad de CK normalmente vuelve a su normalidad durante el
M
El material de origen humano del que se deriva este producto ha
sido analizado a nivel de donante para el anticuerpo del Virus de
Inmunodeficiencia Humano (HIV 1, HIV 2), el Antgeno de
Superficie de Hepatitis B (HbsAg), y el anticuerpo del Virus de
Hepatitis C (HCV) y se ha encontrado que es NO-REACTIVO.
Sin embargo, dado que ningn mtodo puede ofrecer una
seguridad total de la ausencia de agentes infecciosos, este
material y todas las muestras de pacientes se debern manejar
como posibles transmisores de enfermedades infecciosas.
SA
Hojas de Salud y Seguridad estn disponibles si se desean.
Por favor, desechar todos los materiales Biolgicos y Qumicos
segn las pautes locales.

cuarto o quinto da posterior al infarto.

Los reactivos deben utilizarse solamente para su
AA

PRINCIPIO(3) propsito por personal de laboratorio cualificado, y bajo

Anlisis de Inmunoinhibicin: Se incorpora un anticuerpo en el condiciones de laboratorio apropiadas.
reactivo CK. Este anticuerpo se unir e inhibir la actividad de la
subunidad M de CK-MB. Esto significa que slo se mide la ESTABILIDAD Y PREPARACION DE LOS REACTIVOS
G

actividad de la subunidad B en el suero. Si la actividad se R1a. CK NAC/CK-MB Tampn/Glucosa

multiplica por el factor 2, nos dar la actividad de la CK-MB en Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad
suero. cuando se conserva entre +2 y +8C.

MUESTRA R1b. Enzima/Coenzimas/Substrato/Anticuerpo

Suero, plasma heparinizado o EDTA Reconstituir un frasco de Enzimas/Coenzimas/
Substrato/Anticuerpo R1b con el volumen adecuado de
COMPOSICION DEL REACTIVO Tampn/Glucosa R1a:
2,5 ml para el kit de 19 x 2,5 ml (CK 1296)
Componentes Concentraciones en la Prueba 20 ml para el kit de 5 x 20 ml (CK 1553)
Estable durante 21 das entre +2 y +8C y 3 das entre
R1a. CK NAC/CK-MB Tampn/Glucosa +15 y +25C.
Tampn Imidazola 0.10 mol/l, pH 6.7
Glucosa 20 mmol/l CONTROL
Mg-acetato 10 mmol/l Abrir un frasco de suero de control cuidadosamente,
EDTA 2.0 mmol/l evitando la prdida de material, y reconstituir en
R1b. Enzima/Coenzimas/Substrato/Anticuerpo exactamente 2 ml de agua doblemente destilada. Cerrar el
ADP 2.0 mmol/l frasco y dejar reposar durante 15 minutos, disolver el
AMP 5.0 mmol/l contenido completamente agitando o rotando suavemente.
Pentafosfato de Diadenosina 10 mol/l La CK-MB es estable en suero durante 5 das entre +2 y +
NADP 2.0 mmol/l 8C, 8 horas a +25C y 4 semanas a -20C cuando se
HK 2.5 U/ml congela slo una vez.
G-6-PDH 1.5 U/ml
N-acetilcisteina 20 mmol/l
Fosfato de Creatina 30 mmol/l
Antibody to CK-M
CONTROL

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 MANUAL/ RX MONZA CK 1296

MATERIAL SUMINISTRADO CLCULO MANUAL

CK NAC/CK-MB Buffer/Glucose
Enzimas/Coenzimas/Substrato/Anticuerpo Long. de onda CK-B (U/l) CK-MB (U/l)
Suero de control
340 nm 825 x A 1651 x A
MATERIALES NECESARIO NO SUMINISTRADOS Hg 334 nm 841 x A 1683 x A
Control CKMB Randox No. (Cat. CK 1212) Hg 365 nm 1486 x A 2972 x A
Control Cardaco de Tres Niveles Randox, No. (Cat.
CQ 3100 Nivel y Nivel 3)
Randox CK-MB Calibracin (Cat. No. CK 2393) El cambio de absorbancia por minuto (A/min) tambin se puede
medir y la media de las 5 mediciones de deber utilizar en el
NOTA DE PROCEDIMIENTO(4) clculo.
La Macro-CK es una forma atpica de CK y se compone de
complejos de Inmunoglobulina de Isonenzimas normales. Esta Los factores a utilizar entonces sern:-
forma migra entre MM y MB y se observa principalmente en
mujeres ancianas. Esto no tiene significacin clnica, pero su Longitud de onda CK-B (U/l) CK-MB (U/l)
presencia puede causar resultados falsamente elevados. Si se
sospecha la contribucin de Macro-CK se deber confirmar su A 340 nm/min 4127 8254
presencia por medio de electroforsis. A Hg 334 nm/min 4207 8414
A Hg 365 nm/min 7429 14858
PROCEDIMIENTO
Antes de llevar a cabo el anlisis para medir la actividad de la CK-
MB en suero, es necesario medir la actividad de la CK total CONTROL DE CALIDAD
utilizando el mtodo NAC activado. Se recomienda para el control de calidad diario el Control de
CKMB Randox o el Control Cardaco de Tres Niveles Randox.
PARA RX MONZA Se debern analizar dos niveles de controles al menos una vez al
Seleccione CK-MB en la pantalla ejecutar prueba y lleve a cabo da. Los valores obtenidos debern encontrarse dentro del rango
un blanco de agua segn las instrucciones. especificado. Si los valores se encuentran fuera del rango y su
repeticin excluye error, se debern seguir los siguientes pasos:
SA
Pipetear en tubos de ensayo: 1. Comprobar programacin del instrumento y la lmpara.
2. Comprobar que todo material est limpio.
Blanc Patrn Muestra 3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento bacteriano
M

Reactivo S0 S1 puede contribuir a la inexactitud de los resultados.

4. Comprobar la temperatura de reaccin
Salino 50 l - - 5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
AA

Patrn - 50 l - 6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los

Muestra - - 50 l Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28 94422413.
Reactivo 500 l 500 l 500 l
INTERFERENCIAS
G

Mezclar y aspirar en la Rx Monza. La hemlisis interfiere con el anlisis.

CALIBRACIN PARA RX MONZA RANGO DE REFERENCIA

Se recomienda el uso de solucin salina y el Calibrador Randox Infarto de Miocardio(MI)
CKMB para calibracin. La probabilidad de dao del miocardio es elevado cuando se
presentan los siguientes 3 factores:-
PARA USO MANUAL
Temperatura
Longitud de onda: 340 nm, Hg 334 nm o Hg 365 nm
Cubeta: 1 cm de espesor 25C 30C 37C
Temperatura: 25C, 30C y 37C
Medicin: frente al aire 1 CKhombres >80 U/l1 >130 U/l2 >195 U/l*
CKmujeres >70 U/l1 >110 U/l2 >170 U/l*
Pipetear en la cubeta: 2 CK-MB >10 U/l1 > 16 U/l2 > 25 U/l*
3 una actividad de CK-MB entre 6 y 25% de la actividad CK
Semi-micro Macro total

Muestra 0,04 ml 0,1 ml *Valores calculados

Enzimas/Coenzimas/
Substrato/Anticuerpo 1,0 ml 2,5 ml Se puede sospechar un MI aunque los valores obtenidos sean
inferiores a los lmites especificados. Para confirmar si ha
Mezclar, y dejar reposar a la temperatura apropiada durante 10 ocurrido un infarto reciente, el test se deber repetir al cabo de
minutos. Despus aadir a la cubeta, y leer la absorbancia A1. 4 horas.
Leer la absorbancia A2 exactamente 5 minutos ms tarde.
A = A2 - A1 Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango
de referencia para reflejar la edad, sexo, dieta y localidad
geogrfica de la poblacin.

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 MANUAL/ RX MONZA CK 1296

CARACTERISTICAS ESPECIFICAS DE
FUNCIONAMIENTO
Los siguientes datos de funcionamiento se obtuvieron mediante
el analizador RX monza.

LINEARIDAD
El Anticuerpo inhibe hasta 2000 U/l de CK-MM.
Este ensayo es linear hasta 2044 U/l de actividad CKMB.

SENSIBILIDAD
La concentracin mnima detectable de CKMB con un nivel de
precisin aceptable se determin como 23,5 U/l.

PRECISION

Precisin Dentro del Anlisis

Nivel 1 Nivel 1
Mean (U/l) 136 161
SD 4.89 7.03
CV(%) 3.61 4.37
n 20 20

Precisin Total
Nivel 1 Nivel 2
Mean (U/l) 136 161
SD 6.83 6.56
CV(%) 5.04 4.08
n 20 20
SA
CORRELACION
Se compar este mtodo (Y) con otro mtodo comercial
disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
lineal:
M

Y = 1.0756 X - 18.799
AA

con un coeficiente de correlacin r = 0.9903

Se analizaron 43 muestras con valores de entre 34,4 y 1733 U/l.

G

REFERENCIAS
1. Stein, W., Med. Weit 1985; 36: 572.
2. Szasz, G., and E. W. Busch. Paper presented at 3rd Eur. Congr.
Clin. Chem., Brighton/England, June 1979; 3 - 8 (abstract).
3. Wurburg, U., et al., Clin. Chem. 1976; 54: 357.
4. Jacobs et al, The Laboratory Test Handbook, 2nd edition

Revisado 29 July 11 bm
Rev. 001

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CREATININA (CREA) PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Unicamente para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca.
MANUAL Respetar las precauciones normales necesarias que se requieren
RX MONZA al manejar reactivos de laboratorio.

PARA SU USO La solucin R1a contiene cido pcrico que es txico.

Para la determinacin cuantitativa in vitro de Creatinina en suero La slucion R1b contiene hidrxido sdico que es custico.
plasma u orina. Este producto es adecuado para su utilizacin de
forma manual y en el analizador Rx Monza. Hojas informativas sobre Salud y Seguridad estn disponibles si se
desean.
Cat. No.
CR 510 CAL. Patrn 1 x 5.5 ml Por favor, desechar todos los materiales Biolgicos y Qumicos
200 ml R1a. Acido pcrico 1 x 100 ml segn las pautas locales.
R1b. Hidrxido sdico 1 x 100 ml
Los reactivos deben ser utilizados solo para los
CR 524 CAL. Patrn 1 x 30 ml propsitos indicados por personal adecuado cualificado
6 x 500 ml R1a. Acido pcrico 3 x 500 ml de laboratorio bajo condiciones apropiadas de
R1b. Hidrxido sdico 3 x 500 ml laboratorio.

SIGNIFICADO CLINICO ESTABILIDAD Y PREPARACIN DE LOS REACTIVOS

La creatinina se deriva de la creatina y la creatina fosfato en
tejido muscular y puede ser definida como un producto de
desecho del nitrgeno.La creatinina no es reutilizada pero es
excretada por el cuerpo en la orina via renal. La creatinina es
producida y excretada con un ratio constante ,el cual es
proporcional a la masa muscular del cuerpo.Como consecuencia
de la forma en que la creatinina es excretada por el rion, la
determinacin de creatinina se utiliza principalmente para
diagnosticar el funcionamiento del rion.La creatinina es
considerada como el marcador endgeno ms til en el
diagnostico y tratamiento de enfermedades renales.
La creatinina se mide principalmente para valorar el
M
CAL. Patrn
Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad
cuando se conservan entre +2 y +25C.
R1a. Acido pcrico
Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad
cuando se conservan entre +15 y +25C.
R1b. Hidrxido sdico
SA
Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad
cuando se conservan entre +15 y +25C.

funcionamiento del rion y tiene ciertas ventajas sobre la ESTABILIDAD Y PREPARACION DEL REACTIVO DE
determinacin de urea.Los niveles de creatinina en plasma son TRABAJO
relativamente independientes de la ingesta proteica, de agua Mezclar volmenes iguales de Soluciones R1a y R1b. Estable
AA

,ratio de produccin de orina y del ejercicio.Siendo su ratio de durante 3 das cuando se conserva entre +15 y +25C.
produccin constante,una elevacin de creatinina en plasma es
un indicativo de infraexcrecin sugiriendo un mal funcionamiento MATERIAL SUMINISTRADO
de rion.Los niveles bajos de creatinina en plasma son raros y
G

no son clinicamente significativos.
METODO COLORIMETRICO(1)
PRINCIPIO
La creatinina en solucin alcalina reacciona con cido pcrico para
formar un complejo coloreado. La cantidad del complejo
formado es directamente proporcional a la concentracin de
creatinina.
EXTRACCION Y PREPARACION DE LA MUESTRA
Suero, plasma heparinizado o EDTA-plasma. Estable durante 7
das cuando se conserva entre +2 y +8C.
Orina: extraer la orina sin aditivos. Diluir 1+49 con agua
bidestilada. Estable durante 4 das cuando se conserva entre +2 y
+8C.
COMPOSICIN DEL REACTIVO
Patrn
Acido pcrico
Hidrxido sdico
MATERIAL REQUERIDO PERO NO SUMINISTRADO
Pipetas apropiadas para suministrar 50 l, 100 l, 200 l, 1 ml y
2 ml.
Material para cronometrar y bloque de calentamiento o bao de
agua para mantener temperaturas de 25, 30 37C.
Espectrofotmetro con longitud de onda de 490 - 510 nm.
Multisueros Valorados Randox Nivel 2 (No. Cat. HN 1530) y
Nivel 3 (No. Cat. HE 1532)
Srum de calibration Randox Nivel 3 (Cat. No. CAL 2351)
NOTAS
El grado de reaccin y la absorbancia del producto de la reaccin
son muy sensibles a la temperatura. La temperatura especificada
debe ser por lo tanto mantenida.

Componentes Concentraciones iniciales

de las soluciones

CAL. Patrn Vedi inserto lotto-specifico

R1a. Acido pcrico 35 mmol/l
Surfactante
R1b. Hidrxido sdico 0,32 mol/l

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 MANUAL/ RX MONZA CR 510

PROCEDIMIENTO NORMALIZACIN
Usando ddH2O realizar una nueva calibracin de ganancia nueva Randox Nivel de calibracin Suero 3 es atribuible a la creatinina
en el modo de cubeta. Seleccione CREA en la pantalla de materiales de referencia NIST y 909b del NIST 967.
Ejecucin de prueba y llevar a cabo un blanco de agua segn las
instrucciones. CONTROL DE CALIDAD
Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel
Pipetee en una cubeta: 3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de
controles al menos una vez al da. Los valores obtenidos debern
Blanco de reactivo S0 Patrn S1 Muestra
encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se
encuentran fuera del rango y su repeticin excluye error, se
ddH2O 50 l - -
Patrn - 50 l - debern seguir los siguientes pasos:
Muestra - - 50 l 1. Comprobar programacin del instrumento y el origen de luz.
Reactivo de Trabajo 500 l 500 l 500 l 2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento
Mezclar, inserte en el soporte de Rx Monza celda de flujo y bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
oprima Leer. 4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
PARA USO MANUAL 6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los
Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +44 (0) 28 9442 2413.
Longitud de onda: 492 (490-510 nm)
Cubeta: 1 cm de espesor INTERFERENCIA
Temperatura: 25/30/37C La hemlisis interfiere en la prueba. No usar sueros lipmicos. El
Medicin: Frente al aire mtodo es susceptible a interferencias por altos niveles de
sustancias reductoras. Hervir la orina antes de la prueba puede
Pipetear en la cubeta: ayudar a reducir estas interferencias.
Patrn Muestra VALORES NORMALES(2)
Macro Semi Macro Semi
Suero: Hombre 53 - 97 mol/l(0,6 - 1,1 mg/dl)
Micro Micro
Mujer 44 - 80 mol/l (0,5 - 0,9 mg/dl)
SA
Reactivo de trabajo 2.0 ml 1.0 ml 2.0 ml 1.0 ml Orina: 8,84 - 13,3 mmol/24 hrs
Solucin Patrn 0.2 ml 0.1 ml - - 1 - 1,5 g/24 hrs
Muestra - - 0.2 ml 0.1 ml
M

Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango

Mezclar, leer la absorbancia A1 del patrn y de la muestra al cabo de referencia reflejando edad, sexo, dieta y localizacin
de 30 segundos. Exactamente 2 min despus leer la absorbancia geogrfica de la poblacin
AA

A2 del patrn y de la muestra.

CARACTERSTICAS ESPECIFICAS DE
CALIBRACIN PARA RX MONZA FUNCIONAMIENTO
Recomendaciones sobre el cambio de lote del reactivo o como Los siguientes datos de funcionamiento se obtuvieron mediante
G

se indica en los procedimientos de control de calidad, utilizando el analizador Rx Monza a una temperatura de 37oC.
suministrado Standard CAL en el kit de calibracin o de suero
Randox Nivel 3. SUERO

CLCULO MANUAL LINEALIDAD

A2 - A1 = Amuestra Apatrn Si la concentracin excede 2168 mol/l (24.5 mg/dl) en suero,
diluir suero, plasma u orina diluida 1+4 con NaCl al 0,9% y
Concentracin de creatinina en suero o plasma:
repetir la prueba. Multiplicar el resultado por 5.
Amuestra
x 177 = mol/l
Apatrn SENSIBILIDAD
La concentracin mnima detectable de Creatinina con un nivel
aceptable de precisin se ha determinado en 14.0 mol/l (0.158
Amuestra
mg/dl).
x 2 = mg/dl
Apatrn
PRECISION
Concentracin de creatinina en orina: Anlisis (Intra)
Amuestra Nivel 2 Nivel 3
x 8,85 = mmol/l Media (mg/dl) 1.46 4.19
DE 0.040 0.068
Apatrn
CV(%) 2.75 1.63
n 20 20
Amuestra
x 100 = mg/dl Anlisis (Inter)
Apatrn Nivel 2 Nivel 3
Media (mg/dl) 1.46 4.19
mg creatinina/dl orina DE 0.042 0.122
Aclaramiento x ml orina 24 hrs. CV(%) 2.86 2.91
de creatinina = [ml/min] n 20 20
mg creatinina/dl suero x 1440

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 MANUAL/ RX MONZA CR 510

CORRELACION
Se compar este mtodo (Y) con otro mtodo comercial
disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
lineal:

Y = 1.098 X - 0.27
con un coeficiente de correlacin r = 0.9995

Se analizaron 47 muestras con valores de entre 0,24 y 15,3 mg/dl.

ORINA

LINEALIDAD
Si la concentracin excede 85309 mol / l (963 mg / dl) en la
orina, diluir la orina 1 +4 con agua destilada y repetir el ensayo.
Multiplicar el resultado por 5.

SENSIBILIDAD
La concentracin mnima detectable de Creatinina con un nivel
aceptable de precisin se ha determinado en 2221 mol/l
(25.1 mg/dl).

REFERENCIAS
1. Bartels, H., Bohmer, M., (1972) Clin. Chem. Acta 37: 193.
2. Schirmeister, J., H. Willmann, and H. Kiefer. (1964). Dtsch.
Med. Wschr. 89: 1018.
SA
M
AA
G

Revised 15 Sep 10 bm
Rev. 001

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 MANUAL/ RX MONZA CR 510

SA
M
AA
G

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NEFA PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Unicamente para diagnstico in vitro, no pipetear con la boca.
Acidos Grasos No Esterificados Respetar las precauciones normales necesarias, que se
MANUAL requieren al manejar reactivos de laboratorio.
RX MONZA
Por favor, desechar todos los materiales Biolgicos y
PARA SU USO Qumicos segn las pautas locales.
Para la determinacin cuantitativa in vitro de Acidos Grasos No
Esterificados (NEFA) en suero y plasma. Este producto es Hojas informativas sobre Salud y Seguridad estn disponibles si
adecuado para su utilizacin de forma manual y en el se desean.
analizador RX monza.
Los reactivos deben ser utilizados solo para los
propsitos indicados por personal adecuado
Cat. No. cualificado de laboratorio bajo condiciones apropiadas
FA 115 R1a. Tampn 1 x 70 ml de laboratorio.
3 x 10 ml R1b. Enzima/Coenzimas 3 x 10 ml
R2a. Diluyente de la Enzima 3 x 20 ml ESTABILIDAD Y PREPARACIN DE LOS
R2b. Maleimida 3 x 20 ml REACTIVOS
R2c. Reactivo Enzima 3 x 20 ml R1a. Tampn
CAL Patrn 1 x 5.5 ml Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad
cuando se conserva entre +2 y +8C.
METODO COLORIMETRICO
R1b. Enzima/Coenzimas
PRINCIPIO(3,5,6) Reconstituir un vial de Enzima/Coenzimas R1b con
Acetil CoA Sintetasa 10 ml de Tampn R1a. Estable durante 5 das entre
NEFA+ATP+CoA Acil CoA+AMP+PPi +2 y +8C. No congelar. Proteger de la luz.
Acetil CoA Oxidasa
Acil CoA + O2 2,3 trans-enoil-CoA + H2O2 R2a. Diluyente del Enzima
SA
Peroxidasa Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad
2H2O2 + TOOS + 4-AAP Aducto Prpura + 4H2O conservado entre +2 y +8C.

4-AAP = 4-Aminoantipirina R2b. Maleimida

M

TOOS = N-etil-N-(2-hidroxi-3-sulfopropil)-m-toluidina Reconstituir el contenido de una botella de

Maleimida R2b con el contenido entero de una
MUESTRA(1) botella de diluyente del Enzima R2a. Asegurarse de
AA

Suero, plasma. que la Maleimida est completamente disuelta. Usar

No usar plasma heparinizado, ya que la heparina interfiere en inmediatamente para reconstituir la botella R2c.
el anlisis. Los anticoagulantes adecuados son los siguientes:
EDTA
G

R2c. Reactivo Enzima

Citrato de Sodio Reconstituir el contenido de un vial de Reactivo
Fluoruro de Sodio Enzima R2c con una botella de Solucin R2b
Oxalato de Amonaco reconstituida. Estable durante 5 das entre +2 y
+8C. No congelar. Proteger de la luz.
COMPOSICIN DEL REACTIVO
CAL Patrn
Componentes Concentracin inicial de las Soluciones Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad
cuando se conserva entre +2 y +8C.
R1a. Tampn
Tampn fosfato 0,04 mol/l, pH 6,9 R1= Tampn / Enzima/ Coenzimas
Cloruro de magnesio 3 mmol/l R2 = Diluyente del Enzima / Maleimida / Enzima
Surfactante Reactivo
R1b. Enzima/Coenzimas
Acil Coenzima A Sintetasa 0,3 U/ml MATERIALES SUMINISTRADOS
Ascorbato oxidasa 1,5 U/ml Tampn
Coenzima A 0,9 mmol/l Enzima/Coenzimas
ATP 5,0 mmol/l Diluyente del Enzima
4-amino antipirina 1,5 mmol/l Maleimida
R2a. Diluyente del Enzima Reactivo Enzima
Fenoxietanol 0,3% (w/v) Patrn
Surfactante
R2b. Maleimida 10,6 mmol/l MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS
R2c. Enzima reactivo Multisueros Valorados Randox Nivel 2
Acil coenzima A oxidasa 10 U/ml (No. Cat. HN 1530) y Nivel 3 (No. Cat. HE 1532).
Peroxidasa 7,5 U/ml
TOOS 1,2 mmol/l
CAL Patrn Vedi inserto lotto specifico

PGINA 1 DE 3
 MANUEL FA 115

NOTAS(1,7) RX MONZA PROCEDURE

1. Muestras visiblemente lipmicas requieren una muestra Seleccione NEFA en la pantalla Run Test (Realizar anlisis) y
blanco. lleve a cabo un blanco de agua de la forma indicada.

2. Muestras con niveles de bilirrubina o hemoglobina Pipetee en un tubo de ensayo:

superiores a los indicados a continuacin, requieren una
muestra blanco: Reactivo Patrn Muestra *

Muestra
Nivel Mximo Efecto sobre Blanc S0 S1 Blank
permitido para el resultado dd H2O 10 l - - -
pruebas de exactitud Patrn - 10 l - -
Muestra - - 10 l -
Bilirrubina 10 mg/dl Disminuido Reactivo 1 200 l 200 l 200 l 200 l
Hemoglobina 100 mg/dl Aumentado
Mzclelo, incbelo durante 5 minutos a +37C.
Estas muestras necesitarn un blanco de muestra* para llevarse
a cabo (Ablanco de muestra). En el caso de un procedimiento Reactivo 2 400 l 400 l 400 l 400 l
manual, la concentracin de NEFA se calcular de la siguiente Muestra - - - 10 l
manera:-
Mzclelo, incbelo durante 5 minutos a +37C.
Amuestra - Amuestra blanco Introduzca la cubeta en el soporte de la celda de flujo del
mmol/l = x Conc. de patrn RX monza y pulse Read (Leer).
Apatrn
* Consulte las notes 1 y 2.
En el caso del RX monza, la concentracin de NEFA se
calcular de la siguiente manera: MANUAL PROCEDIMIENTO(6)

Muestra - Muestra Blanco = Muestra Concentration (mmol/l) Longitud de onda: 550 nm

SA
Cubeta: 1 cm de espesor
3. Durante la recuperacin de los materiales de control de Temperatura: +37C
calidad se puede observar al leer monocromtico. Para Medicin: Frente al reactivo blanco
M

corregir este tomar lecturas adicionales para Amuestra y

APatrn a 700 nm, y la resta de las lecturas de longitud de Pipetear en la cubeta:
onda principales.
AA

React. Patrn Muestra *Muestra

4. La muestra que va a ser analizada no debe heparinizarse, ya blanco blanco
que esto estimulara la actividad de la lipoproten-lipasa,
provocando la liberacin de NEFA de los triglicridos Agua destilada 50 l --- --- ---
G

asociados a las lipoprotenas sanguneas. En consecuencia, Patrn --- 50 l --- ---

la sangre extraida de pacientes que estn recibiendo Muestra --- --- 50 l ---
tratamiento teraputico con heparina, o sangre recogida Solucin R1 1,0 ml 1,0 ml 1,0 ml 1,0 ml
en envases con heparina no es adecuada para esta prueba.
Mezclar e incubar a +37C durante 10 minutos.
5. Debido a la incorporacin de ascorbato oxidasa en el
Reactivo Enzima 4, niveles de cido ascrbico superiores a Solucin R2 2,0 ml 2,0 ml 2,0 ml 2,0 ml
20 mg/dl (es decir > 10 veces el valor normal) no Muestra --- --- --- 50 l
interfieren en la prueba.
Mezclar e incubar a +37C durante 10 min. Leer la
6. Las determinaciones de NEFA deben llevarse a cabo con absorbancia de la muestra (Amuestra) y del patrn (Apatrn)
suero obtenido de individuos en ayunas, de lo contrario los frente a reactivo blanco a 550 nm.
resultados no pueden ser directamente comparados con
los rangos normales de controles en ayunas. * Consulte las notes 1, 2 y 3.

7. Si la muestra de suero permanece a temperatura ambiente N.B.: Tiempo de lectura debe ser exactamente
durante un tiempo considerable, el nivel de NEFA aumenta 10 min.
debido a la accin enzimtica. Por tanto, si el anlisis no es
inmediato, las muestras de suero pueden congelarse
a -20C durante un mximo de 24 horas.

8. Si Apatrn - Areactivo blanco es < 0,180 repetir la prueba con

reactivo fresco.

PGINA 2 DE 3
 MANUEL FA 115

INTERFERENCIA
CALCULOS Si se realiza la tcnica de los NEFA de forma automtica, el
1. Utilizando una curva de calibracin reactivo no debera colocarse en el instrumento tras los
La curva de calibracin debe ser confirmada para cada triglicridos
nuevo lote de reactivos de la forma siguiente:
CARACTERSTICAS ESPECIFICAS DE
No. de Tubo 1 2 3 4 FUNCIONAMIENTO
Nombre Blanco Patrn Patrn Patrn Los siguientes datos de funcionamiento se obtuvieron
bajo normal elevado mediante el analizador RX monza a una temperatura de
+37C.
NEFA Patrn --- 25 l 50 l 100 l
Agua 50 l 25 l --- --- LINEALIDAD
Solucin R1 1,0 ml 1,0 ml 1,0 ml 1,0 ml El mtodo es lineal hasta 2,24 mmol/l. Para muestras con
concentraciones superiores, diluir 1+3 con agua bidestilada y
Mezclar e incubar a +37C durante 10 min. repetir la prueba. Multiplicar el resultado por 4.

Solucin R2 2,0 ml 2,0 ml 2,0 ml 2,0 ml SENSIBILIDAD

El nivel mnimo detectable con una precisin aceptable se ha
Mezclar e incubar a +37C durante 10 min. determinado en 0,072 mmol/l

Abs 0,000 (leer) (leer) (leer) PRECISION

*valores estandares 0,000 valores estandares Precisin Dentro del Anlisis

x 0,250 x 0,500 x 1,000 Nivel 1 Nivel 2
Media (mmol/l) 1.73 1.20
* Se puede encontrar valores estandares en la insercion DE 0.082 0.058
especifica del lote, incluido en el kit. CV(%) 4.74 4.81
n 20 20
Representar absorbancias (A550 nm) frente a concentraciones
SA
de NEFA (mmol/l). Debe ser una lnea recta, ya que sigue la
Ensayo total
Ley de Beer y es lineal entre 0.0 y 2.0 mmol/l.
Nivel 1 Nivel 2
2. Utilizando un patrn Media (mmol/l) 1.73 1.20
DE 0.078 0.052
M

La concentracin de NEFA en una muestra puede ser

determinada por medio de la siguiente ecuacin. CV(%) 4.51 4.32
n 20 20
AA

Amuestra
mmol/l = x Concentracin de patrn CORRELATION
Apatrn This method (Y) was compared with another commercially
available method (X) and the following linear regression
G

CONTROL DE CALIDAD equation obtained:

Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y
Nivel 3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles
distintos de controles al menos una vez al da. Los valores
obtenidos debern encontrarse dentro del rango especificado. Si
los valores se encuentran fuera del rango y su repeticin excluye
error, se debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar la programacin del instrumento y la lmpara.
2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento
bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los
resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de
los Laboratorios Randox, Irlanda del Norte + 44 (0) 28
9442 2413.
RANGO NORMAL(2,8)
En ayunas: 0,1 - 0,9 mmol/l.
Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio
rango que refleje la edad, sexo, dieta y localidad geogrfica de
la poblacin.
Y = 1.0372 X + 0.0457
and a correlation coefficient of r = 0.9855
49 patient samples were analysed spanning the range
0.09 to 2.08 mmol/l.
REFERENCIAS
1. DeVries, G.H., Mamunes, P., Miller, C.D. and Hayward,
D.M., Analytical Biochem. 1976; 70: 156-166.
2. Henry, R. J., Clinical Chemistry, Principles and Techniques,
2nd Edition, Harper and Row, 1974;
p. 1451.
3. Matsubara, C., Neshikawa, Y., Yoshida, Y., and Tateamura,
K. Analytical Biochem. 1983; 130: 128-133.
4. Mulder. C. J., Clin. Chem. Clin. Biochem. 1983; 21:
823-827.
5. Hosaka, K., Kiteucki, T., Mitsukida, N., and Kawagucki, A.
J., Biochem. 1981;89: 1799-1803.
6. Shimizu, S., Tani, Y., Yamada, H., Tabata, M., and Murachi,
T., Analytical Biochem. 1980; 107: 193-198.
7. Okabe, H., Uji, Y., Nagaehima, K. and Noma, A. Clin,
Chem. 1980; 26111: 1540-1543.
8. Duncombe, W.G., Biochem. J. 1963; 88: 7.

Revisado 31 oct 12 rw
Rev. 005

PGINA 3 DE 3
GLUCOSA (GLUC-PAP) COMPOSICIN DEL REACTIVO

GOD/PAP Componentes Concentracin inicial de las soluciones

MANUAL
RX MONZA R1a. Tampn
Tampn fosfato 0,1 mol/l, pH 7,0
PARA SU USO Fenol 11 mmol/l
Para la determinacin cuantitativa in vitro de Glucosa en suero, R1b. Reactivo GOD-PAP
plasma y orina. Este producto es adecuado para un uso manual o 4-Aminofenazona 0,77 mmol/l
en el analizador Rx Monza. Glucosa oxidasa 1,5 kU/l
Peroxidasa 1,5 kU/l
Cat. No. CAL. Patrn
GL 364 R1a. Tampn 10 x 100 ml Glucosa Ver inserto del lote especfico
10 x 100 ml R1b. Reactivo GOD-PAP 10 x 100 ml
CAL. Patrn 1 x 5.5 ml
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
GL 1021 R1a. Tampn 2 x 500 ml Unicamente para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca.
2 x 500 ml R1b. Reactivo GOD-PAP 2 x 500 ml Respetar las precauciones normales necesarias, que se requieren
CAL. Patrn 1 x 5.5 ml al manejar reactivos de laboratorio.

GL 366 R1a. Tampn 6 x 500 ml R1a contiene azida sdica. Evitar su ingestin o el contacto con la
6 x 500 ml R1b. Reactivo GOD-PAP 6 x 500 ml piel y mucosas. En caso de contacto con la piel, lavar
CAL. Patrn 1 x 5.5 ml inmediatamente el rea afectada con agua abundante. En caso de
ingestin o contacto con los ojos llamar inmediatamente a un
PRINCIPIO mdico.
La glucosa se determina despus de una oxidacin enzimtica en
presencia de glucosa oxidasa. El perxido de hidrgeno formado La azida sdica reacciona con el cobre y plomo de las tuberas, lo
reacciona, catalizado por la peroxidasa, con fenol y que podra producir azidas explosivas. Cuando se tire este
4-aminofenazona para formar un indicador de quinoneimina reactivo enjuagar abundantemente con agua para evitar la
SA
rojo-violeta. formacin de estas azidas. Las superficies metlicas que hayan
sido puestas en contacto con la azida sdica deben ser lavadas
PRINCIPIO DE LA REACCION(1) con hidrxido sdico al 10%.
M

GOD
Glucosa + O2 + H2O Acido glucnico + H2O2 Hojas informativas sobre Salud y Seguridad estn disponibles si se
desean.
AA

POD
2H2O2+ 4-aminofenazona + fenol
RECOGIDA DE MUESTRAS Y ALMACENAMIENTO
quinoneimina + 4H2O Los reactivos deben ser utilizados solo para los
propsitos indicados por personal adecuado cualificado
de laboratorio bajo condiciones apropiadas de
G

La glucosa es estable durante 24 horas entre +2 y +8C si el laboratorio.

suero se prepara a los 30 minutos despus de la recoleccin.
Mediante la adicin de un inhibidor de la gliclisis (NaF, KF), la
muestra se pueden almacenar hasta 24 horas entre +15 y +25C
o 3 das entre +2 y +8C. Para el almacenamiento a largo plazo
las muestras se deben colocar en envases sellados y congelarse a
-20C.
Las muestras hemolizadas no deben utilizarse, ya que la hemlisis
interfiere con esta prueba.
Plasma: se permite el uso de heparina de litio como un
anticoagulante.
Orina: orina de 24 horas se debe recoger en un frasco oscuro y
mantener en hielo.
Orina al azar se debe usar una muestra fresca. La muestra debe
ser almacenada entre +2 y +8C si no se utiliza inmediatamente.
ESTABILIDAD Y PREPARACIN DE LOS REACTIVOS
R1a. Tampn
Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad
cuando se conserva entre +2 y +8C
R1b. Reactivo GOD-PAP
Reconstituir el contenido de un vial de Reactivo R1b con
un pequeo volumen de Tampn R1a y transferir el
contenido entero a la botella R1a, enjuagando varias
veces la botella R1b. El reactivo de trabajo es estable
durante 3 meses entre +2 y +8C 5 das entre +15 y
+25C.
CAL. Patrn
Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad
entre +2 y +8C.

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 MANUAL GL 364

MATERIALES SUMINISTRADOS CONTROL DE CALIDAD

Tampn Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel
Reactivo GOD-PAP 3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de
Patrn controles al menos una vez al da. Los valores obtenidos debern
encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se
MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS encuentran fuera del rango y su repeticin excluye error, se
Multisueros Valorados Randox Nivel 2 (No. Cat. HN 1530) y debern seguir los siguientes pasos:
Nivel 3 (No. Cat. HE 1532) 1. Comprobar la programacin del instrumento y la lmpara.
Sueros de Calibracin Randox Nivel 3 (Cat. No. CAL 2351) 2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento bacteriano
PROCEDIMIENTO puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
Usando ddH2O realizar una nueva calibracin de ganancia en el 4. Comprobar la temperatura de reaccin
modo de cubeta. Seleccione GLU en la pantalla de Ejecucin de 5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
prueba y llevar a cabo un blanco de agua segn las instrucciones. 6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los
Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28 94422413.
Pipetear en la Cubeta:
INTERFERENCIAS
Patrn S1 or Muestra Reactivo Blanco S0 Esta prueba no se ve afectada por el cido rico, cido ascrbico,
glutatin, anticoagulantes, bilirrubina y creatinina a
Muestra/Patrn 5 l 0 l concentraciones fisiolgicas.
Reactivo 1 500 l 500 l
VALORES NORMALES(2)
Mezclar, incubar durante 25 min a 15-25C 10 min a 37C. Suero,plasma (en ayuno) 4,2-6,4 mmol/l 75-115 mg/dl
Insertar en el soporte de flujo de clula de Rx Monza y oprima
Leer dentro de los 60 minutos. Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango
que refleje la edad, sexo, dieta y localidad geogrfica de la
CALIBRACIN PARA RX MONZA poblacin.
Se recomienda el uso de glucosa estndar Randox
proporcionado o Suero de calibracin Randox Nivel 3. CARACTERSITCAS ESPECFICAS DE
SA
Es aconsejable cambiar el lote del reactivo para la calibracin o FUNCIONAMIENTO DE LA TCNICA
seguir lo indicado por los procedimientos de control de calidad. Se obtuvieron los siguientes datos de rendimiento mediante un
analizador Rx Monza en funcionamiento a 37C.
M

PARA USO MANUAL

SUERO
Longitud de onda: 500 nm, Hg 546 nm
AA

Cubeta: 1 cm de espesor SENSIBILIDAD

Temperatura: 15-25oC 37oC La concentracin detectable mnima de Glucosa con un nivel
Medicin: frente a reactivo blanco aceptable de precisin se determin en 0,343 mmol/l (6.18
G

mg/dl).
Pipetear en tubos de ensayo:
LINEALIDAD
Macro Semi-Micro El mtodo es lineal hasta una concentracin de glucosa de 32,1
mmol/l (578 mg/dl). Para muestras con valores superiores a
Patrn o Reactivo Patrn o Reactivo dichas concentraciones diluir 1+2 con NaCl al 0,9% y multiplicar
Muestra Blanco Muestra Blanco el resultado por 3.

Patrn o muestra 20 l --- 10 l --- PRECISION

Reactivo 2000 l 2000 l 1000 l 1000 l
Anlisis (Intra)
Mezclar, incubar durante 25 min a 15-25C 10 min a 37C y Nivel 2 Nivel 3
medir la absorbancia del patrn (Apatrn) y de la muestra (AMuestra) Media (mmol/l) 6.53 15.0
frente al reactivo blanco antes de 60 min. DE 0.203 0.640
CV(%) 3.11 4.26
CLCULO MANUAL n 20 20
AMuestra Patrn conc.
Concentracin de glucosa (mmol/l) = x (mmol/l) Anlisis (Inter)
APatrn Nivel 2 Nivel 3
Media (mmol/l) 6.53 15.0
Amuestra Patrn conc. DE 0.269 0.774
(mg/dl) = x (mg/dl) CV(%) 4.11 5.15
APatrn n 20 20

NORMALIZACIN
El suero de calibracin de nivel 3 de Randox sigue lo indicado en
el material de referencia NIST 917b y NIST 965a de Glucosa.

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 MANUAL GL 364

CORRELACIN
Este mtodo (Y) se compar con otro mtodo comercial
disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
lineal:

Y = 0.9091 X + 0.5645
y un coeficiente de correlacin r = 0,9898

Se analizaron 40 muestras de pacientes con valores de entre 0.39

y 21.3 mmol/l.

ORINA

LINEALIDAD
El ensayo es lineal hasta una concentracin de glucosa de
30,6 mmol/l (551 mg/dl). Para muestras con valores superiores a
dichas concentraciones diluir 1+2 con NaCl al 0,9% y multiplicar
el resultado por 3.

SENSIBILIDAD
La concentracin detectable mnima de Glucosa con un nivel
aceptable de precisin se determin en 0,295 mmol/l (5,32
mg/dl).

PRECISION

Anlisis (Intra)
Nivel 2 Nivel 3
Media (mmol/l) 2.68 15.8
SA
DE 0.073 0.723
CV% 2.71 4.59
n 20 20
M

Anlisis (Inter)
Nivel 2 Nivel 3
AA

Media (mmol/l) 2.68 15.8

DE 0.068 0.738
CV% 2.53 4.68
n 20 20
G

REFERENCIAS
1. Barham, D, and Trinder, P. Analyst 1972; 97: 142.
2. Teuscher, A. and Richterich, P. Schweiz Med. Wschr. 1971;
101: 345 and 390.
3. Tietz, N.W. Clinical Guide to laboratory tests. 2nd edition.
Philadelphia, Pa: WB Saunders Co.; 1990: 246-250

Revisado 15 Sep 10 bm
Rev. 001

PAGE 3 OF 3
GLUTAMATO ESTABILIDAD Y PREPARACIN DE LOS REACTIVOS
R1a. Tampn/Substrato
DESHIDROGENASA Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad
cuando se conservan entre +2 y +8C.
(GLDH) R1b. Enzima/Coenzimas
MANUAL
RX MONZA No. Cat. GL 441
Reconstituir el contenido de una botella de Enzima/
PARA SU USO Coenzima 2 con 6 ml de Tampn/Substrato 1. Estable
Para el anlisis cuantitativo in vitro de Glutamato Deshidrogenasa durante 1 semana entre +2 y +8C.
(GLDH) en el suero. Este producto es adecuado para su
utilizacin de forma manual y en el analizador RX monza. No. Cat. GL 442
Reconstituir el contenido de un frasco de Enzima/
No. Cat. Coenzima 2 con una parte de Tampn/Substrato 1 y
GL 441 R1a. Tampn/Substrato 1 x 70 ml transferir todo el contenido a la botella 1 enjuagando el
8 x 6 ml R1b. Enzima/Coenzima 8 x 6 ml frasco 2 varias veces. Estable durante 1 semana entre +2
R2. -oxoglutarato 2 x 10 ml y +8C.
GL 442 R1a. Tampn/Substrato 5 x 100 ml
5 x 100 ml R1b. Enzima/Coenzima 5 x 100 ml R2. -oxoglutarato
R2. -oxoglutarato 2 x 20 ml Reconstituir el contenido de un frasco de
-oxoglutarato 3 con el volumen apropiado de agua
Este es un mtodo estndar optimizado de acuerdo a las doblemente destilada:-
recomendaciones del Deutsche Gesellschaft fr Klinische 10 ml para el kit de 8 x 6 ml (GL 441)
Chemie. Este procedimiento mide la reaccin de arrastre no 20 ml para el kit de 5 x 100 ml (GL 442)
especfica. Estable durante 8 semanas entre +2 y +8C 7 das entre
+15 y +25C.
PRINCIPIO(1)
GLDH
Nota: Si utiliza este ensayo en un sistema automatizado, por favor
-oxoglutarato + NADH + NH4+ glutamato+NAD++H2O
consulte la hoja de procedimiento de ese sistema, segn las
SA
MUESTRA instrucciones de reconstitucin puede ser diferente.
Suero.
Los sueros hemolticos y lipmicos interfieren con el anlisis. MATERIALES SUMINISTRADOS
M

Tampn/Substrato
COMPOSICION DEL REACTIVO Enzima/Coenzima
-oxoglutarato
AA

Componentes Concentraciones en la Prueba

MATERIALES NECESARIOS PERO NO
R1a. Tampn/Substrato SUMINISTRADOS
Tampn Trietanolamina 50 mmol/l, pH 8,0 Multisueros Valorados Randox Nivel 2 (No. Cat. HN 1530) y
G

Acetato de Amoniaco 100 mmol/l

Nivel 3 (No. Cat. HE 1532)
EDTA 2,5 mmol/l
R1b. Enzima/Coenzima Sueros de Calibracin Randox Nivel 3 (Cat. No. CAL 2351)
ADP 1,0 mmol/l Salino RX series (No. Cat. SA 3854)
NADH 0,2 mmol/l
LD 2 U/ml PROCEDIMIENTO
R2. -oxoglutarato 7 mmol/l Seleccione GLDH en la pantalla de ejecucin y llevar a cabo un
blanco de agua segn las instrucciones.
Pipetear en tubos de ensayo:
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Slo para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca. Ejecutar Sample 0.10 ml
las precauciones normales requeridas para el manejo de Reactivo R1 0.50 ml
reactivos de laboratorio.
Mezclar e incubar durante exactamente 5 minutos a 37C o 10
Las soluciones R1a y R2 contienen Azida Sdica. Evitar su minutos a 20-25C
ingestin o el contacto con la piel o las membranes mucosas. En
caso de contacto con la piel, lavar la zona afectada con abundante Reactivo R2 0.02 ml
agua. En caso de contacto con los ojos o ingestin, buscar
atencin mdica inmediatamente. Mezclar y aspirar en el Monza Rx inmediatamente.

La Azida Sdica reacciona con el plomo y cobre de las caeras,
formando cidos potencialmente explosivos. Cuando se eliminen
dichos reactivos, limpiar con grandes volmenes de agua para
evitar la formacin de cidos. Las superficies metlicas expuestas,
debern limpiarse con hidrxido de sodio al 10%.
Hojas Sanitarias y de Seguridad estn disponibles si se desean.
RX MONZA CALIBRACIN
El uso de solucin salina y la calibracin Randox Nivel 3 en suero
se recomienda para la calibracin. La calibracin se recomienda a
los cambios en el lote del reactivo o como se indica en los
procedimientos de control de calidad.

Los reactivos deben ser utilizados slo para los

propsitos indicados por personal adecuado cualificado
de laboratorio bajo condiciones apropiadas de
laboratorio.

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 MANUAL/ RX MONZA GL 441

PARA USO MANUAL LINEALIDAD

Longitud de onda: 340 nm (Hg 334 nm or Hg 365 nm) El mtodo es lineal hasta una concentracin de 77,3 U/l. Si la
cubeta: 1 cm de paso de la luz concentracin de la muestra supera este valor, diluir la muestra
Temperatura: 25C 1 +4 con el 0,9% de NaCl y repetir el test. Multiplique el
Medicin: contra el aire resultado por 5.
Introducir en una cubeta: Macro Semi Micro SENSIBILIDAD
La concentracin detectable mnima de Glutamato
Enzima/Coenzima (25C) (R1) 2.5 ml 1.0 ml Deshidrogenasa con un nivel aceptable de precisin se
Suero 0.5 ml 0.2 ml determin en 2,90 U/l.
Mezcle bien y deje reposar a 25 C durante 3 minutos, luego
medir la absorbancia A1, deje reposar durante exactamente 5 PRECISION
minutos y leer absorbancia A2 (no especfica de reaccin lenta).
Precisin Dentro del Anlisis
-oxoglutarato (R2) 0.1 ml 0.04 ml Nivel 1 Nivel 2
Media (U/l) 13.5 28.3
Mezclar bien y leer la absorbancia A3, deje reposar durante DE 0.562 0.985
exactamente 5 minutos a 25 C y leer la absorbancia A4. CV(%) 4.16 3.48
(A3-A4) - (A1-A2) = A / 5 minutos n 20 20

MANUAL DE CLCULO Precisin Entre Anlisis

Para calcular la actividad de la GLDH utilizar la siguiente frmula: Nivel 1 Nivel 2
U/l (25C) = 197 x A 340 nm / 5 min. Media (U/l) 13.5 28.3
U/l (25C) = 365 x A Hg365 nm / 5 min. DE 0.764 1.56
U/l (25C) = 201 x A Hg334 nm / 5 min. CV(%) 5.66 5.53
n 20 20
CONTROL DE CALIDAD
Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel CORRELACIN
3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de Este mtodo (Y) se compar con otro mtodo comercial
SA
controles al menos una vez al da. Los valores obtenidos debern disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se lineal:
encuentran fuera del rango y su repeticin excluye error, se
debern seguir los siguientes pasos:
M

Y = 0.9585 X +0.1913
1. Comprobar programacin del instrumento y la lmpara. y un coeficiente de correlacin r = 0,9944.
2. Comprobar que todo material est limpio.
AA

3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento se analizaron 40 muestras de pacientes abarcando un rango de
bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los resultados. 3,13 a 58,06 g/l.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes. REFERENCIAS
G

6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los
Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +44 (0) 28 9442 2413.
INTERFERENCIAS NO ESPECIFICAS
Se ha observado una interferencia no especfica con la medicin
de la actividad del glutamato deshidrogenasa en el 60% de los
sueros. En una actividad normal del glutamato deshidrogensa
equivale a 0,4 U/l por regla general y en ocasiones excede 1 U/l.
Para tener en cuenta la interferencia no especfica es necesario
estimar un blanco de suero con -oxoglutarato.
1. Schmidt, E. and Schmidt, F.W. In: Method of Enzymatic
Analysis, 3rd ed. H.K. Bergmeyer, J. Bergmeyer, and M.
Grosse, Eds. Weirheim, Verlag Chemie, 1983, 3: 216-227.
2. In: Clinical Guide to Laboratory Tests 2nd ed. N. W. Tietz,
Eds. W.B. Saunders Company. Philadelphia 1990 p.260.
3. Schmidt, E. et al (1992) Eur. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 30
pp 493-502.

VALORES DE NORMALIDAD EN EL SUERO(2,3)

25C 37C

Hombres: < 4,0 U/l <7,0 U/l

Mujeres: < 3,0 U/l <5,0 U/l

Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango

que refleje la edad, sexo, dieta y localidad geogrfica de la
poblacin.

CARACTERSITCAS ESPECFICAS DE
FUNCIONAMIENTO DE LA TCNICA
Se obtuvieron los siguientes datos de rendimiento mediante un
analizador RX monza en funcionamiento a 37C.
Revisado 12 Aug 11 bm
Rev. 002

PAGE 2 OF 2
GLUCOSE PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Unicamente para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca.
GOD/PAP Respetar las precauciones normales necesarias, que se requieren
(LIQUIDO) al manejar reactivos de laboratorio.
MANUAL
Reactivo contiene azida sdica. Evitar su ingestin o el contacto
PARA SU USO con la piel y mucosas. En caso de contacto con la piel, lavar
Para el anlisis cuantitativo in vitro de Glucosa en el sangre, suero, inmediatamente el rea afectada con agua abundante. En caso de
plasma y orina. Este producto es adecuado para uso Manual. ingestin o contacto con los ojos llamar inmediatamente a un
mdico.
Cat. No.
GL 2623 R1. Glucosa Reactivo 6 x 100 ml La azida sdica reacciona con el cobre y plomo de las tuberas, lo
CAL. Patrn 1 x 5.5 ml que podra producir azidas explosivas. Cuando se tire este
reactivo enjuagar abundantemente con agua para evitar la
GL 2614 R1. Glucosa Reactivo 2 x 500 ml formacin de estas azidas. Las superficies metlicas que hayan
CAL. Patrn 1 x 5.5 ml sido puestas en contacto con la azida sdica deben ser lavadas
con hidrxido sdico al 10%.
SIGNIFICADO CLINICO
La medicin exacta de la glucosa en suero o plasma es Hojas informativas sobre Salud y Seguridad estn disponibles si se
importante en el diagnstico y el tratamiento de trastornos del desean.
metabolismo de hidratos de carbono tales como diabetes
mellitus, hipoglucemia neonatal, hipoglucemia idioptica y de Por favor, desechar todos los materiales Biolgicos y Qumicos
carcinoma de clulas de islotes pancreticos. La glucosa se mide a segn las pautas locales.
menudo en colaboracin con diversas pruebas de tolerancia tras
la administracin de dosis de la leucina, la insulina, el glucagn o Los reactivos deben ser utilizados solo para los
glucosa. propsitos indicados por personal adecuado cualificado
de laboratorio bajo condiciones apropiadas de
PRINCIPIO laboratorio.
SA
La glucosa se determina despus de una oxidacin enzimtica en
presencia de glucosa oxidasa. El perxido de hidrgeno formado ESTABILIDAD Y PREPARACIN DE LOS REACTIVOS
reacciona, catalizado por la peroxidasa, con fenol y R1. Glucose Reactivo
4-aminofenazona para formar un indicador de quinoneimina Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad
M

rojo-violeta. entre +2 y +8C.

AA

PRINCIPIO DE LA REACCION(1) CAL. Patrn

GOD
Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad
Glucosa + O2 + H2O Acido glucnico + H2O2 entre +2 y +8C.
POD
G

2H2O2+ 4-aminofenazona + fenol quinoneimina + 4H2O MATERIALES SUMINISTRADOS

RECOGIDA DE MUESTRAS Y ALMACENAMIENTO
Suero, plasma de litio y orina. Si es posible, los componentes
celulares separados de suero o plasma de inmediato, ya ms
tardar una hora despus de recoger la muestra de sangre.
Mediante la adicin de un inhibidor de la gliclisis (NaF, KF), las Nivel 3 (No. Cat. HE 1532)
muestras se pueden almacenar hasta 24 horas entre +15 y +25
C o hasta 7 das a 4 C. La orina: orina de 24 horas se debe
recoger en un frasco oscuro y se mantuvieron en hielo. Orina al
azar - una muestra fresca debe ser utilizado. La muestra debe ser
almacenado entre +2 y +8 C si no se utiliza inmediatamente.
COMPOSICIN DEL REACTIVO
Glucosea Reactivo
Patrn
MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS
Multisueros Valorados Randox Nivel 2 (No. Cat. HN 1530) y
Uranil Acetato 0,16% (Cat. No. DP 647 2 x 500 ml)
NOTAS
Es normal que este reactivo sea de un color rosa plido que se
oscurezca con el tiempo. Este hecho no afecta al funcionamiento
del mismo.

Componentes Concentracin inicial de las soluciones

R1. Glucosa Reactivo

Tampn fosfato 50 mmol/l, pH 7,0
Tampn MOPS 50 mmol/l, pH 7,0
Fenol mmol/l
4-Aminofenazona 0,77 mmol/l
Glucosa oxidasa 1,5 kU/l
Peroxidasa 1,5 kU/l
CAL. Patrn
Glucosa Vedi inserto lotto-specifico

PAGE 1 OF 2
 MANUAL GL 2623

PROCEDIMIENTO PARA EL ENSAYO DE GLUCOSA VALORES NORMALES(3,4)

GOD-PAP SIN DESPROTEINIZACION
Suero,plasma 4.2-6.4 mmol/l (75-115 mg/dl)
Longitud de onda: 500 nm, Hg 546 nm
Cubeta: 1 cm de espesor Orina al azar 0.1 0.8 mmol/l (1 15 mg/dl)
Temperatura: 15-25C 37C
Orina de 24 horas <2.78 mmol/d (<0.5 g/d)
Medicin: frente a reactivo blanco
Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango
que refleje la edad, sexo, dieta y localidad geogrfica de la
Pipetear en tubos de ensayo: poblacin.

Macro Semi-Micro LINEALIDAD

El mtodo es lineal hasta una concentracin de glucosa de 22,2
Patrn o Reactivo Patrn o Reactivo mmol/l (400 mg/dl). Para muestras con valores superiores a
Muestra Blanco Muestra Blanco dichas concentraciones diluir 1+2 con agua destilada y multiplicar
el resultado por 3.
Patrn o muestra 20 l --- 10 l ---
Reactivo 2000 l 2000 l 1000 l 1000 l SENSIBILIDAD
Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio
intervalo de sensibilidad ya que esto est limitado por la
Mezclar, incubar durante 25 min a 15-25C 10 min a 37C y sensibilidad del espectrofotmetro utilizado. Bajo las condiciones
del ensayo un cambio de 0,01 unidades de absorbancia es
medir la absorbancia del patrn (Apatrn) y de la muestra (AMuestra) equivalente a 0,013 mmol/l (0,23 mg/dl).
frente al reactivo blanco antes de 60 min. Aunque la absorbancia
se puede leer en cualquier momento durante un perodo de REFERENCIAS
hasta 60 minutos despus del tiempo especificado de incubacin, 1. Barham, D, and Trinder, P. Analyst 1972; 97: 142.
el intervalo entre la adicin de la muestra y la lectura debe de ser 2. Clinical Chemistry Principles and Techniques, Second Edition,
exactamente el mismo que para el Patrn/Control y la Muestra. R.J. Henry, D.C. Cannon and J.W. Winkelman Editors, Harper
and Row, Maryland, USA, 1288, 1974.
CALCULOS 3. Teuscher, A. and Richterich, P. Schweiz Med. Wschr. 1971;
SA
AMuestra 101: 345 and 390.
Concentracin de glucosa (mmol/l) = x Patrn conc. 4. Tietz, N.W. Clinical Guide to laboratory tests. 2nd edition.
APatrn (mmol/l) Philadelphia, Pa: WB Saunders Co.; 1990: 246-250.
M

Amuestra
(mg/dl) = x Patrn conc.
AA

APatrn (mmol/l)

CONTROL DE CALIDAD
Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel
G

3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de

controles al menos una vez al da. Los valores obtenidos debern
encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se
encuentran fuera del rango y su repeticin excluye error, se
debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar programacin del instrumento y la lmpara.
2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento
bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los
Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28 94422413.

INTERFERENCIAS
Se analizaron los siguientes analitos hasta los niveles indicados y
se encontr que no interfieren:

Haemoglobin 1000 mg/dl

Free Bilirubin 25 mg/dl
Conjugate Bilirubin 25 mg/dl
Triglycerides 1000 mg/dl
Intralipid 400 mg/dl

Revisado 13 Nov 08, bm

Rev. 001

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 COMPOSICION DEL REACTIVO
GLUTATION
Componentes Concentraciones en la Prueba
REDUCTASA (GLUT RED)
MANUAL
RX MONZA R1a. Tampn
Fosfato Potsico 250 mmol/l pH 7,3
PARA SU USO EDTA 0,5 mmol/l
Para el anlisis cuantitativo in vitro de Glutation Reductasa en el R1b. Substrato
suero, el plasma y los eritrocitos. Este producto es adecuado GSSG 2,2 mmol/l
para su utilizacin de forma manual y en el analizador Rx Monza. R2. NADPH 0,17 mmol/l

No. Cat.
GR 2368 R1a. Tampn 1 x 70 ml PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
5 x 5 ml R1b. Substrato 5 x 5 ml Slo para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca. Ejecutar
R2. NADPH 5 x 3 ml las precauciones normales requeridas para el manejo de
reactivos de laboratorio.
SIGNIFICADO CLINICO
El anlisis de Glutation Reductasa se ha utilizado en la deteccin Hojas Sanitarias y de Seguridad estn disponibles si se desean.
de enfermedades hepticas y malignas, en la valoracin de la
nutricin (estado de la riboflavina) y la deteccin de estados de Los reactivos deben ser utilizados slo para los
deficiencia determinados genticamente. propsitos indicados por personal adecuado cualificado
Nota: Asegurarse de que los estados aparentes de deficiencia de laboratorio bajo condiciones apropiadas de
enzimtica no son debidos a la reduccin de la riboflavina. laboratorio.
SA
Principio del Anlisis (1) ESTABILIDAD Y PREPARACION DE LOS REACTIVOS
El Glutation reductasa cataliza la reduccin de glutation (GSSG) R1a. Tampn
M

en presencia de NADPH, el cual se oxida a NADP+. La Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad
disminucin en la absorbancia se mide a cuando se conserva entre +2 y +8C.
AA

340 nm.
GR R1b. Substrato
NADPH + H+ + GSSG NADP+ + 2 GSH Reconstituir el contenido de un frasco de Substrato 2
G

con 5 ml de Tampn 1. Estable durante 2 das cuando

(GSH = Glutation Reducido) se conserva entre +2 y +8C.

PREPARACION DE LA MUESTRA R2. NADPH

Suero, Plasma o Eritrocitos. Reconstituir un frasco de NADPH 3 con 3 ml de H20
Preparacin del Eritrocito. bidestilada. Estable durante 2 das cuando se conserva
Centrifugar 0,5 ml de sangre entera durante 5 min a entre +2 y +8C.
2000 rpm. Eliminar el plasma y la capa de color de ante,
asegurandose de que no se quiten demasiados eritrocitos, MATERIALES SUMINISTRADOS
arriesgando as un muestreo de clulas no representativo. Lavar Tampn
los eritrocitos tres veces volviendo a suspenderlo en NaCl al Substrato
0,9%, y centrifugando durante 5 min a 2000 rpm despus de cada NADPH
lavado.
MATERIALES NECESARIOS PERO NO
Lisar las clulas volviendo a suspenderlas en H20 bidestilada fra, SUMINISTRADOS
guardar hasta 0.5 ml. Dejar reposar durante 10 min entre +2 - Suero de Control de Glutation Reductasa Randox GR 2608
+8C. Centrifugar el lisado durante 5 min a 2000 rpm para
eliminar el estroma. Diluir 100 l de lisado con 1,9 ml de
solucin NaCl al 0,9% para el anlisis.

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 MANUAL/ RX MONZA GR 2368

PROCEDIMENTO CONTROL DE CALIDAD

Seleccione GR en la pantalla de Ejecucin de prueba y llevar a Se recomiendan los Sueros de Control de Glutation Reductasa
cabo un blanco de agua segn las instrucciones. para el control de calidad diario. Analizar el control al menos una
vez al da. Los valores obtenidos debern encontrarse dentro del
Pipetear en tubos de ensayo: rango especificado. Si los valores se encuentran fuera del rango y
Reagent Blank Patrn Muestra su repeticin excluye error, se debern seguir los siguientes pasos:
S0 S1 1. Comprobar programacin del instrumento y la lmpara
ddH2O 20 l - - 2. Comprobar que todo material est limpio.
Patrn - 20 l - 3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento
Muestra - - 20 l bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
R1 500 l 500 l 500 l 4. Comprobar la temperatura de reaccin
Mezclar bien 5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
R2 100 l 100 l 100 l 6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los
Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28 94422413.
Mezclar y aspirar en el Monza RX.
ESPECIFICIDAD
CALIBRACIN PARA RX MONZA El Glutation Reductasa es altamente especfico para
Se recomienda para la calibracin el uso de solucin salina y Glutation(GSSG).
suero de calibracin Randox glutatin reductasa. La calibracin
se recomienda con el cambio de lote o como se indica por los RANGO DE REFERENCIA(2)
procedimientos de control de calidad. Plasma/Suero 33 - 73 U/l
Eritrocitos 4,7 13,2 U/gHb
PARA USO MANUAL
Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango
SA
Longitud de onda: 340 nm de normalidad, ya que pueden darse variaciones regionales.
Cubeta: 1 cm de espesor
Temperatura: 37C. CARACTERISTICAS ESPECIFICAS DE
M

Medicin: frente al aire FUNCIONAMIENTO

Los siguientes datos de funcionamiento se obtuvieron mediante
AA

Pipetear en la cubeta el analizador RX monza a una temperatura de 37oC, con el

volumen de aspiracin fijado en 500 l.
Lisado Diluido 40 l
Substrato (R1) 1000 l
G

LINEARIDAD
El ensayo es lineal hasta 387 U/. Las muestras mayores que este
Mezclar bien
debe ser diluido con 1 +9 0,9% de solucin de NaCl y re-ensay.
NADPH (R2) 200 l Multiplicar el resultado por 10.

Mezclar, y empezar a cronometrar simultneamente. Leer la SENSIBILIDAD

absorbancia inicial al cabo de 1 minuto. Leer de nuevo al cabo Se deber de considerar como el lmite de deteccin un valor de
de 2, 3, 4 y 5 minutos. 9.69 U/l.

CLCULO MANUAL PRECISION

La actividad del Glutation Reductasa se puede calcular a partir de
la siguiente frmula: Within run precision
Level 2 Level 3
a) U/l sangre entera = 4983 x A 340 nm/min x Factor de Mean (U/l) 42.0 86.9
Dilucin (20) SD 2.03 2.24
b) Convirtiendo a u/g Hemoglobina CV (%) 4.84 2.58
n 20 20
ejemplo
Una muestra contiene un nivel de hemoglobina de
Total precision
16 g/dl 160 g/l.
Level 2 Level 3
Valor de Glutation Reductasa: 1488 U/l.
Mean (U/l) 42.0 86.9
SD 2.75 3.75
Por lo tanto el valor de la muestra = 1488
CV (%) 6.55 4.32
= 9,3 u/gHb
n 20 20
160

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 MANUAL/ RX MONZA GR 2368

CORRELACION
El mtodo de Randox (Y) se compar con otro mtodo
comercial disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de
regresin lineal:

Y = 1.017 X + 1.54
con un coeficiente de correlacin r = 0.9888.

Se analizaron 42 muestras con valores de entre 14 y 309 U/l.

REFERENCIAS
1. Goldberg D.M. & Spooner RJ (1983) in Methods of
Enzymatic Analysis (Bergmeyen, H.V. Ed.) 3rd edn.
vol 3, pp 258-265, Verlog Chemie, Deerfield Beach,
Fl.
2. Melissinos, K.G.,Delidov, A.Z., Varsov, A.G., Begietti, S.S.,
Drivas, G.J., Nephron, 28: 76-79, (1981).

SA
M
AA
G

Revisado 15 Sep 10 bm
Rev 001

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IgA ESTABILIDAD Y PREPARACION DE LOS REACTIVOS
R1. Tampn Ensayo
IMMUNOTURBIDIMETRIC ASSAY FOR IgA Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad cuando
MANUAL se conserva entre +2 y +8C.
RX MONZA
R2. Reactivo Anticuerpo
PARA SU USO Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad cuando
Para el anlisis cuantitativo in vitro de IgA en el suero y el plasma. se conserva entre +2 y +8C.
Este producto es adecuado para su utilizacin de forma manual y
en el analizador Rx Monza. MATERIALES SUMINISTRADOS
Tampn Ensayo
No. Cat. Reactivo Anticuerpo
IA 2447 R1. Tampn Ensayo 1 x 60 ml
R2. Reactivo Anticuerpo 1 x 5 ml MATERIALES NECESARIOS PERO NO
SUMINISTRADOS
PRINCIPIO Calibrador de Protena Especfica Valorado Lquido Randox para
La muestra que contiene IgA humano se diluye adecuadamente y anlisis de muestras diludas, No. Cat IT 2692
despus se reacciona con antisuero especfico para formar un Controles de Protena Especfica Valorados Lquidos Randox
precipitante que se mide turbidimtricamente a 340 nm. Se Nivel 1 No. Cat. PS 2682
puede determinar la concentracin de IgA en la muestra Nivel 2 No. Cat. PS 2683
construyendo una curva estndar a partir de las absorbancias de Nivel 3 No. Cat. PS 2684
los patrones. Solucin de NaCl al 0,9%

EXTRACCION Y CONSERVACION DE LA MUESTRA PROCEDIMIENTO (Anlisis Manual)

Se puede utilizar el suero, plasma heparinizado o plasma EDTA. Diluir las muestras 1+20 con solucin de NaCl al 0,9%.
El IgA es estable durante 3 das entre +15 y +25C, 7 das entre
+2 y +8C, o 6 meses a -20C. Se recomienda que todos los reactivos y muestras de suero se
equilibren a temperatura ambiente antes de usar. Se deber
COMPOSICION DEL REACTIVO preparar una curva estndar para cada anlisis que se realice y se
SA
recomienda que las muestras se analicen en duplicado junto con
Componentes Concentraciones Iniciales controles apropiados. Experiencia con el kit podra permitir al
en la Prueba operador realizar el anlisis un cierto nmero de veces sin re-
M

calibracin con tal que se utilizen el mismo reactivo de trabajo,

R1. Tampn de Ensayo espectrofotmetro, cubeta y condiciones del anlisis tales como
Glicol de Polietileno mximo 6% la temperatura.
AA

Tampn Tris/HCl 20 mmol/l, pH 7,4

Cloruro Sdico 150 mmol/l En caso de elegir esta alternativa se deber prestar especial
R2. Reactivo Anticuerpo consideracin a los resultados del control.
Anti IgA (humano)
G

Seleccone la IgA en la pantalla de Ejecucin de prueba y llevar a

cabo un blanco de agua segn las instrucciones.
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Pipetear en la Cubeta:
Slo para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca. Ejecutar
las precauciones normales requeridas para el manejo de S0 SO* S1 S1 Muestra Muestra
reactivos de laboratorio. Blanco Blanco Blanco

Los Reactivos R1 y R2 contienen Azida Sdica. Evitar su ingestin ddH2O 50 l 50 l --- --- --- ---
o el contacto con la piel o las membranas mucosas. En caso de Diluido CAL
contacto con la piel, lavar la zona afectada con abundante agua. Patrn --- --- 50 l 50 l --- ---
En caso de contacto con los ojos o ingestin, buscar atencin Diluido
mdica inmediatamente. Muestra --- --- --- --- 50 l 50l
Tampn
El Azida Sdica reacciona con el plomo y cobre de las caeras, Ensayo (R1) 500 l 500 l 500 l 500 l 500 l 500 l
formando cidos potencialmente explosivos. Cuando se eliminen
dichos reactivos, limpiar con grandes volmenes de agua para Mezclar bien y se incuba a 25C fuera del analizador durante 10
evitar la formacin de cidos. Las superficies metlicas expuestas, minutos
debern limpiarse con hidrxido de sodio al 10%.
Reactivo
Anticuerpo (R2) --- 50 l --- 50 l --- 50 l
Hojas Sanitarias y de Seguridad estn disponibles si se desean.
Mezclar bien y se incuba a 25C fuera del analizador durante 30
Los reactivos deben ser utilizados solo para los minutos. Inserte en el soporte de RX monza celda de flujo y
propsitos indicados por personal adecuado cualificado pulse leer.
de laboratorio bajo condiciones apropiadas de
laboratorio. *Blanco de Reactivo

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 MANUAL/ RX MONZA IA 2447

PARA USO MANUAL RANGOS DE NORMALIDAD (1,2)

Adultos: 54 - 268 IU/ml
Longitud de onda: 340 nm (0,9 4,5 g/l)
Cubeta: 1 cm de espesor 90 - 450 mg/dl
Temperatura: 25C Nios:* 90 33 IU/ml
Medicin: frente al aire (8-10 aos) (1,5 0,5 g/l)
151 55 mg/dl
Pipetear en la cubeta apropiada: Recin Nacidos:* 0,18 0,6 IU/ml
(2-8 das) (0,003 0,01 g/l)
Patrones Muestra 0.3 1.0 mg/dl

Patrones Diluidos 100 l de cada - * valor medio desviacin estndar

Muestra Diluida - 100 l
Tampn de Ensayo R1 1,0 ml 1,0 ml Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango
de referencia que refleje la edad, sexo, dieta y localidad
Mezclar bien, medir la A1 al cabo de 10 mins. geogrfica de la poblacin.

Pipetear en la cubeta apropiada: FACTORES DE CONVERSIN

Reactivo Anticuerpo R2 100 l 100 l IU/ml x 1,68 = mg/dl

mg/dl x 0,595 = IU/ml
Mezclar bien, medir la A2 al cabo de 30 mins.
(Relacionado al estndar de inmunoglobulina WHO 67/86)
CLCULO MANUAL
Calcular el cambio en absorbancia para cada patrn y muestra. CARACTERISTICAS ESPECIFICAS DE
FUNCIONAMIENTO
ei. A = A2 - A1 Los siguientes datos de funcionamiento se obtuvieron mediante
el analizador Rx Monza a una temperatura de 37C.
SA
Despus trazar la media de las concentraciones estndar frente a
los valores A correspondientes utilizando papel grfico. LINEALIDAD
[Utilizar un programa de ordenador apropiado para curva, si est Este ensayo es lineal hasta 785 mg/dl.
disponible, en una transformacin logit/log]. La concentracin de
M

la muestra IgA se obtiene leyendo el valor A a partir de la curva SENSIBILIDAD

de calibracin. No intentar extrapolar por encima o debajo del La concentracin mnima detectable de IgA es 45.6 mg/dl.
rango de patrones
AA

NOTA:
CALIBRACION Si el valor de la muestra excede el patrn ms alto:
Recomendamos el Calibrador de Protena Especfica Valorado Diluir la muestra diluida previamente (1+20) otra vez 1+1 con
solucin NaCl al 0,9% (w/v). Multiplicar el resultado por 2. (P.S.:
G

Lquido Randox para anlisis de muestras diludas.

CONTROL DE CALIDAD
Se recomiendan los Controles de Protena Especfica Valorados
Lquidos Randox, Nivel 1, 2 y 3 para el control de calidad diario.
Analizar dos niveles distintos de controles al menos una vez al da.
Los valores obtenidos debern encontrarse dentro del rango
especificado. Si los valores se encuentran fuera del rango y su
repeticin excluye error, se debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar programacin del instrumento y la lmpara
2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento
bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los
Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +44 (0) 28 9442 2413.
ver gammopata a continuacin).
Si el valor de la muestra es inferior al patrn ms bajo:
Diluir la muestra pura 1+10 con solucin NaCl al 0,9% (w/v).
Multiplicar el resultado por 0,52.
(P.S.: Ver gamopata a continuacin)
GAMMOPATIA
Las muestras que se sospecha tienen gammopata monoclonal o
policlonal debern de someterse siempre a electrofrosis de la
protena para poder detectar cualquier exceso de antgeno. El
exceso de antgeno puede resultar en resultados bajos falsos.
Tambin se podra sospechar Hipergammoglobulinemia si al
volver a empezar la reaccin con 100 l de la muestra diluida no
resulta en un incremento significativo en la absorbancia.

ESPECIFICIDAD
No existe una reaccin cruzada con IgG y IgM bajo las
condiciones del anlisis.

Las muestras extremadamente lipmicas o hemolticas y los

niveles elevados de detergentes inicos pueden interferir en el
anlisis.

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 MANUAL/ RX MONZA IA 2447

PRECISION
Precisin Dentro del Anlisis
Nivel 1 Nivel 2
Media (mg/dl) 192 291
DE 2.98 5.62
CV (%) 1.55 1.93
n 20 20

Precisin Total
Nivel 1 Nivel 2
Media (mg/dl) 192 291
DE 13.2 17.8
CV (%) 6.86 6.12
n 20 20

CORRELACIN
El mtodo Randox (Y) se compar con otro mtodo comercial
disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
lineal:

Y = 0.9955 X + 0.4802
y un coeficiente de correlacin r = 0,9975

Se analizaron 45 muestras de pacientes con valores de entre 49 y

669 U/l.

REFERENCIAS
1. Becker, W.: Laboratoriumbltter 1980; 30: 25.
2. Geiger, H. & Hoffman, P.: Z. Kinderheilk 1970; 109: 22.
SA
3. Whicher, J.J., Price, C.P., Spencer, K., Critical Reviews in
Clinical Laboratory Sciences, 1983; 18: 213-216.
M
AA
G

Revisado 15 Sep 10 bm
Rev. 001

PAGE 3 OF 3
IgG ESTABILIDAD Y PREPARACIN DE LOS REACTIVOS
R1. Tampn Ensayo
ENSAYO INMUNOTURBIDIMETRICO PARA IgG Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad cuando
Anlisis Manual se conserva entre +2 y +8C.
RX MONZA
R2. Reactivo Anticuerpo
PARA SU USO. Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad cuando
Para el anlisis cuantitativo in vitro de la IgG en suero y plasma. se conserva entre +2 y +8C.
Este producto es adecuado para su utilizacin de forma manual y
en el analizador Rx Monza. MATERIALES SUMINISTRADOS
Tampn Ensayo
Cat. Nos. Reactivo Anticuerpo
IG 2448 R1. Tampn Ensayo 1 x 60 ml
R2. Reactivo Anticuerpo 1 x 5 ml MATERIALES NECESARIOS PERO NO
SUMINISTRADOS
PRINCIPI Solucin de NaCl al 0,9% (w/v).
La muestra que contiene IgG humana se diluye adecuadamente y Calibrador de Protena Especfica Lquido Randox para anlisis de
despus se hace reaccionar con antisuero especfico para formar muestras diludas, (No. Cat IT 2692)
un precipitante que se mide turbidimtricamente a 340 nm. Se Controles de Protenas Especficas Valorados Lquidos
puede determinar la concentracin de IgG en la muestra Nivel 1 No. Cat. PS 2682
construyendo una curva estandar a partir de las absorbancias de Nivel 2 No. Cat. PS 2683
los patrones. Nivel 3 No. Cat. PS 2684

EXTRACCION Y CONSERVACION DE LA MUESTRA PROCEDIMIENTO (Anlisis Manual)

Se puede utilizar suero, plasma heparinizado o plasma EDTA.La Diluir las muestras 1+20 con solucin de NaCl al 0,9%.
IgG es estable durante 3 das entre +15 y +25C, 7 das entre +2
y +8C, o 6 meses a -20C. Se recomienda que todos los reactivos y muestras de suero se
equilibren a temperatura ambiente antes de usar. Se deber
SA
COMPOSICIN DEL REACTIVO preparar una curva estandar para cada anlisis que se realice y se
recomienda que las muestras se analicen en duplicado junto con
Componentes Concentraciones Iniciales en la Prueba controles apropiados. La frecuencia de recalibracin (tras un
cierto nmero de usos) podr ser establecida a partir de la
M

R1. Tampn Ensayo experiencia en el uso de este kit, siempre y cuando se utilizen el
Glicol Polietileno mximo 6% mismo reactivo de trabajo, espetrofotmetro, cubeta y
AA

Tampn Tris/HCl 20 mmol/l, pH 7,4 condiciones del anlisis tales como la temperatura.
Cloruro Sdico 150 mmol/l
R2. Reactivo Anticuerpo En caso de elegir esta alternativa se deber prestar especial
IgG Anti (humana) consideracin a los resultados del control.
G

Seleccone la IgG en la pantalla de Ejecucin de prueba y llevar a

PRECAUCIONES DE SEGURIDAD cabo un blanco de agua segn las instrucciones.
Slo para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca. Ejecutar
las precauciones normales requeridas para el manejo de Pipetear en la Cubeta:
reactivos de laboratorio.
S0 SO* S1 S1 Muestra Muestra
Los Reactivos R1 y R2 contienen Azida Sdica. Evitar su ingestin Blanco Blanco Blanco
o el contacto con la piel o las membranas mucosas. En caso de
contacto con la piel, lavar la zona afectada con abundante agua. ddH2O 10 l 10 l --- --- --- ---
En caso de contacto con los ojos o ingestin, buscar atencin Diluido CAL
Patrn --- --- 10 l 10 l --- ---
mdica inmediatamente.
Diluido
Muestra --- --- --- --- 10 l 10l
La Azida Sdica reacciona con el plomo y cobre de las caeras, Tampn
formando cidos potencialmente explosivos. Cuando se eliminen Ensayo (R1) 500 l 500 l 500 l 500 l 500 l 500 l
dichos reactivos, limpiar con grandes volmenes de agua para
evitar la formacin de cidos. Las superficies metlicas expuestas, Mezclar bien y se incuba a 25C fuera del analizador durante 10
debern limpiarse con hidrxido sdico al 10%. minutos

Hojas de Salud y Seguridad estn disponibles si se desean. Reactivo

Anticuerpo (R2) --- 50 l --- 50 l --- 50 l
Los reactivos deben ser utilizados solo para los
propsitos indicados por personal adecuado cualificado Mezclar bien y se incuba a 25C fuera del analizador durante 30
de laboratorio bajo condiciones apropiadas de minutos. Inserte en el soporte de RX monza celda de flujo y
laboratorio. pulse leer.

*Blanco de Reactivo

PAGE 1 OF 3
 MANUAL/ RX MONZA IG 2448

PARA USO MANUAL ESPECIFICIDAD

No existe ninguna reaccin con IgA e IgM bajo las condiciones
Longitud de onda: 340 nm del anlisis.
Cubeta: 1 cm de espesor
Temperatura: 25C Las muestras extremadamente lipmicas o hemolticas y altos
Medicin: frente al aire niveles de detergentes inicos pueden interferir con la prueba.

Pipetear en la cubeta apropiada: RANGOS DE NORMALIDAD (1,2)

Adultos: 92 - 207 IU/ml
Patrones Muestra (8 - 18 g/l)
(800 - 1800 mg/dl)
Patrones diluidos 20 l de cada -
Muestra diluida - 20 l Nios:* 122 23,0 IU/ml
Tampn ensayo (R1) 1,0 ml 1,0 ml (8-10 aos) (10,6 2 g/l)
(1055 200 mg/dl)
Mezclar bien, medir A1 al cabo de 10 minutos.
Neonatos:* 134 34,7 IU/ml
Pipetear en la cubeta apropiada: (2-8 das) (11,6 3,0 g/l)
(1164 301 mg/dl)
Reactivo Anticuerpo (R2) 100 l 100 l
* valor medio desviacin estandar
Mezclar bien, medir A2 al cabo de 30 minutos.
Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango
CLCULO MANUAL que refleje la edad, sexo, dieta y localidad geogrfica de la
Calcular el cambio en absorbancia para cada patrn y muestra. poblacin.

A = A2 - A1 FACTORES DE CONVERSIN
IU/ml x 8,68 = mg/dl
SA
Despus trazar la media de las concentraciones del patrn frente mg/dl x 0,1152 = IU/ml
a los valores A correspondientes utilizando papel grfico.
[Utilizar un programa de ordenador apropiado para curva, si est (Relacionado al patrn de inmunoglobulina WHO 67/86)
disponible, en una transformacin logit/log]. La concentracin de
M

IgG en la muestra se obtiene leyendo el valor A a partir de la CARACTERISTICAS ESPECIFICAS DE

curva de calibracin. No intentar extrapolar por encima o debajo FUNCIONAMIENTO
AA

del rango de patrones. Los siguientes datos se obtuvieron usando un analizador de RX

monza en el modo de cubeta funcionando a una temperature de
CALIBRACION 25C.
Se recomienda el Calibrador de protena Especfica Lquido
G

Randox para anlisis de muestras diludas. LINEALIDAD

CONTROL DE CALIDAD
Se recomiendan los Controles de Protenas Especficas Valorados
Lquidos Randox, Niveles 1, 2 y 3 para el control de calidad diario.
Se deber de analizar dos niveles distintos de controles al menos
una vez al da. Los valores obtenidos debern encontrarse dentro
del rango especificado. Si los valores se encuentran fuera del rango
y su repeticin excluye error, se debern seguir los siguientes
pasos:
1. Comprobar programacin del instrumento y la lmpara.
2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento
bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los
Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28 94422413.
Este ensayo es lineal hasta 5025 mg/dl.
SENSIBILIDAD
La concentracin mnima detectable de IgG es 337 mg/dl.
NOTA:
Si el valor de la muestra excede el patrn ms alto:
Diluir la muestra diluida previamente (1+20) otra vez 1+1 con
solucin NaCl al 0,9% (w/v). Multiplicar el resultado por 2. (P.S.:
ver gammopata a continuacin).
Si el valor de la muestra es inferior al patrn ms bajo:
Diluir la muestra pura 1+10 con solucin NaCl al 0,9% (w/v).
Multiplicar el resultado por 0,52.
(P.S.: Ver gamopata a continuacin)
GAMMOPATIA
Las muestras que se sospecha tienen gammopata mononuclear o
polinuclear debern someterse siempre a electroforosis de la
protena para poder detectar cualquier exceso de antgeno. El
exceso de antgeno puede resultar en falsos resultados bajos.
Tambin se podra sospechar Hipergamaglobulinemia si al volver
a empezar la reaccin con 100 l de la muestra diluida no resulta
en un incremento significativo en la absorbancia.

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 MANUAL/ RX MONZA IG 2448

PRECISION

Anlisis (Intra)
Nivel 2 Nivel 3
Media (mg/dl) 1043 1648
DE 10.3 19.6
CV(%) 0.99 1.19
n 20 20

Anlisis (Inter)
Nivel 2 Nivel 3
Media (mg/dl) 1043 1648
DE 43.2 26.4
CV(%) 4.14 1.60
n 20 20

CORRELACIN
El mtodo Randox (Y) se compar con otro mtodo comercial
disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
lineal:

Y = 0.9780 X + 18.137
y un coeficiente de correlacin r = 0,9980

Se analizaron 49 muestras de pacientes con valores de entre 399

y 4859 mg/dl.

REFERENCIAS
SA
1. Becker, W.: Laboratoriumbltter 1980; 30: 25.
2. Geiger, H. & Hoffman, P.: Z. Kinderheilk 1970; 109: 22.
3. Whicher, J.J., Price, C.P., Spencer, K., Critical Reviews in
Clinical Laboratory Sciences, 1983; 18: 213-216.
M
AA
G

Revisado 15 Sep 10 bm
Rev. 001

PAGE 3 OF 3
L-LACTATO (LAC) PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Slo para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca.
PAP Ejecutar las precauciones normales requeridas para el manejo
Determinacin Enzimtica de L-Lactato de reactivos de laboratorio.
MANUAL
RX MONZA
La solucin R1a contiene Azida Sdica. Evitar su ingestin o el
PARA SU USO contacto con la piel o las membranes mucosas. En caso de
Para la determinacin cuantitativa in vitro de L-Lactato en plasma contacto con la piel, lavar la zona afectada con abundante
y CSF. Este ensayo s especfico para la determinacin de L- agua. En caso de contacto con los ojos o ingestin, buscar
Lactato. Este producto es adecuado para un uso manual o en atencin mdica inmediatamente.
el analizador Rx Monza.
La Azida Sdica reacciona con el plomo y cobre de las
Cat No. caeras, formando cidos potencialmente explosivos. Cuando
LC 2389 R1a. Tampn 1 x 100 ml se eliminen dichos reactivos, limpiar con grandes volmenes
16 x 6 ml R1b. Reactivo Enzima 16 x 6 ml de agua para evitar la formacin de cidos. Las superficies
CAL Patrn 1 x 5.5 ml metlicas expuestas, debern limpiarse con hidrxido de sodio
al 10%.
METODO COLORIMETRICO
La concentracin de L-Lactato en la muestra se determina de
acuerdo a la siguiente reaccin. Existen hojas de Salud y Seguridad disponibles
Lactato Oxidasa
L-Lactato + O2 piruvato + H2O2 Los reactivos deben utilizarse solamente para su
propsito por personal de laboratorio cualificado, y
H2O2 + 4-aminoantipirina + TOOS bajo condiciones de laboratorio apropiadas.
Peroxidasa
Producto prpura + 4H2O ESTABILIDAD Y PREPARACIN DE LOS
REACTIVOS
TOOS = N-etil-N-(2 hidroxi-3-sulfopropil) R1a. Tampn
m-toluidina Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad
SA
cuando se conserva entre +2 y +8C.
El L-Lactato es uno de resultados netos de la gluconeognesis
producida en el msculo esqueltico activo. El L_Lactato s
metabolizado en el hgado. El NADH s producido en la R1b. Reactivo Enzima
gluclisis en los tejidos por oxidacin aerbica. Si no hay Reconstituir el contenido de un frasco de Reactivo
M

presencia suficiente de oxgeno para que se produzca esta Enzima R1b con 6 ml de Tampn R1a. Estable
oxidacin, se regenera NAD+ a partir de NADH en la durante 6 semanas entre +2 y +8C 2 semanas entre
AA

reduccin de piruvato a lactato +15 y +25C, cuando se conserva protegido de la luz.

Una concentracin incrementada de lactato en la sangre es
as un indicador de metabolismo anaerbico hecho que se da, CAL Patrn
por ejemplo, si disminuye el flujo de sangre a los tejidos y el Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad
G

suministro de oxgeno es insuficiente. En casos de reducciones

de oxgeno severas, podra darse la Acidosis Lctica. El L- cuando se conserva entre +2 y +8C.
Lactato por lo tanto se puede utilizar como un indicador de
fallo circulatorio severo. MATERIALES SUMINISTRADOS
Tampn
MUESTRA Reactivo Enzima
Plasma (anticoagulantes: litio heparina lodoacetato, fluoruro Patrn
EDTA, fluoruro oxalato, fluoruro sdico).
CSF Utilizar sin modificacin. MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS
Multisueros Valorados Randox Nivel 2 (No. Cat. HN 1530) y
La sangre se toma de una vena libre de estasis y se conserva Nivel 3 (No. Cat. HE 1532)
en un bao de hielo. El plasma se separa por medio de la
centrifugacin durante los 30 minutos siguientes. La demora
en la separacin puede llevar a un incremento de los valores NOTAS
de lactato observados. El anlisis se deber llevar a cabo Evitar la contaminacin del reactivo, muestras y material de
inmediatamente. cristal por medio de la saliva o el sudor dado que tienen
contenidos elevados de lactato.
COMPOSICIN DEL REACTIVO
Componentes Concentraciones Iniciales
R1a. Tampn
Tampn Pipes 100 mmol/l, pH 7,20
TOOS 2,1 mmol/l
Azida Sdica 1 g/l
R1b. Reactivo Enzima
4-aminofenazono 0,4 mmol/l
Peroxidasa 1000 U/l
Lactato oxidasa 600 U/l
Ascorbato oxidasa 10000 U/l
CAL Patrn Especifico para cada lote

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PROCEDIMIENTO VALORES DE NORMALIDAD(5)
Seleccione LAC en la pantalla de Monza ejecutar prueba y mmol/l mg/dl
llevar a cabo un blanco de agua con agua dulce doble destilada Plasma 0,5 2,22 4,5 - 20
(ddH2O) como se indica en las instrucciones.

Pipetear en la Cubeta: Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio

rango que refleje la edad, sexo, dieta y localidad geogrfica de
Reactivo Blanco S0 Patrn S1 Muestra la poblacin.
dd H2O 5 l - -
Patrn - 5 l - CARACTERSITCAS ESPECFICAS DE
Muestra - - 5 l FUNCIONAMIENTO DE LA TCNICA
Reactivo 500 l 500 l 500 l Las siguientes caractersticas de rendimiento se obtuvieron
utilizando un Rx Monza en modo cubeta funcionando a 37C y
Mezclar e incubar por 5 minutos a 37C. Inserte la cubeta en calibrado en el estndar proporcionado por el Kit.
el soporte del flujo de clula y oprima leer.
LINEALIDAD
CALIBRACION
El test es lineal hasta una concentracin de L-Lactato de 19,7
Se recomienda la calibracin durante el cambio de lote de
mmol/l (178 mg/dl). Diluir las muestras superiores a esta
reactivo, o como se indica en los procedimientos de control
concentracin 1+1 con NaCl al 0,9% y multiplicar el resultado
de calidad, usando el estndar proporcionado en el Kit.
por 2.
PARA USO MANUAL
SENSIBILIDAD
Longitud de onda 550 nm La concentracin detectable mnima de L-lactato con un nivel
Cubeta 1 cm de espesor aceptable de precisin se determin en 0,165 mmol/l (1,49
Temperatura de Reaccin 20-25C, 37C mg/dl).
Medicin frente al blanco de reactivo
PRECISION
Pipetear en los tubos de ensayo:
Precisin Dentro del Anlisis
Blanco del Patrn Muestra
Nivel 2 Nivel 3
SA
Reactivo (l) (l) (l)
Muestra -- -- 10 Media (mg/dl) 13.1 53.3
Patrn -- 10 -- DE 0.106 0.458
Reactivo 1000 1000 1000 CV(%) 0.81 0.86
M

n 20 20

Mezclar, incubar durante 10 minutos entre 20 - 25C 5 Precisin Total

AA

minutos a 37C. Medir la absorbancia de la muestra (Amuestra) Nivel 2 Nivel 3

y el patrn (Apatrn) frente al blanco del reactivo dentro de los Media (mg/dl) 13.1 53.3
siguientes 30 minutos. DE 0.749 1.93
CV(%) 5.72 3.62
G

CLCULO MANUAL
Amuestra n 20 20
Concentracin de L-Lactato = x Concentracin
Apatrn del patrn (mg/dl) CORRELACIN
Este mtodo (Y) se compar con otro mtodo comercial
Amuestra disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
Concentracin de L-Lactato = x Concentracin lineal:
Apatrn del patrn (mmol/l)

NORMALIZACIN Y = 0.9382 X + 0.2605

El L-Lactato Randox Estndar incluido en este Kit es trazable a
L-Lactato mtodo de referencia Gravimtrico.
CONTROL DE CALIDAD
Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y
Nivel 3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles
distintos de controles al menos una vez al da. Los valores
obtenidos debern encontrarse dentro del rango especificado. Si
los valores se encuentran fuera del rango y su repeticin excluye
error, se debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar la programacin del instrumento y la lmpara.
2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento
bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los
resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus
componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de
los Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28
94422413.
y un coeficiente de correlacin r = 0,9980
Se analizaron 49 muestras de pacientes con valores de entre
6.5 y 123 mg/dl.
REFERENCIAS
1. Shimojo N et al, CLIN CHEM 1989; 35(9): 1992 - 1994.
2. Shimojo N, Fujino K et al, CLIN CHEM 1991; 37(11) 1978
- 1980.
3. Lehninger Al: Principles of Biochemistry, Worth Publishers,
New York, 1993, p 416.
4. Mascini M et al, CLIN CHEM. 1987; 34(4) 591 - 593.
5. Jacobs DS, Kasten BL, Demott WR and Wolfson WL:
Laboratory Test Handbook, LEXI COMP INC, OHIO,
1990, p. 245.
Revisado 15 Sep 10 bm
Rev. 001

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LIPASA (LPS) PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Unicamente para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca.
Triacilglicerol Lipasa Respetar las precauciones normales necesarias, que se requieren
Mtodo UV al manejar reactivos de laboratorio.
MANUAL
RX MONZA La solucin R1a contiene azida sdica. Evitar su ingestin o el
contacto con la piel y mucosas. En caso de contacto con la piel,
PARA SU USO lavar inmediatamente el rea afectada con agua abundante. En
Para el anlisis cuantitativo in vitro de Lipasa en el suero y plasma. caso de ingestin o contacto con los ojos llamar inmediatamente
Este producto es adecuado para un uso manual o en el analizador a un mdico.
Rx Monza.
La azida sdica reacciona con el cobre y plomo de las tuberas, lo
No. Cat. que podra producir azidas explosivas. Cuando se tire este
LI 188 R1a. Tampn 1 x 70 ml reactivo enjuagar abundantemente con agua para evitar la
20 x 2.5 ml R1b. Sustrato 20 x 2.5 ml formacin de estas azidas. Las superficies metlicas que hayan
CAL. Patrn 4 x 3.0 ml sido puestas en contacto con la azida sdica deben ser lavadas
con hidrxido sdico al 10%.
LI 194 R1a. Tampn 2 x 70 ml
4 x 30 ml R1b. Substrate 4 x 30 ml Hojas informativas sobre Salud y Seguridad estn disponibles si se
CAL. Patrn 4 x 3.0 ml desean.

SIGNIFICADO CLINICO(1) Los reactivos deben ser utilizados slo para los
El sistema de test de la lipasa es un medio para medir la actividad propsitos indicados por personal adecuado cualificado
del enzima lipasa en el suero y el plasma. La medicin de la lipasa de laboratorio bajo condiciones apropiadas de
se utiliza en el diagnstico y tratamiento de enfermedades del laboratorio.
pncreas tales como pancreatitis aguda y obstruccin del
conducto pancretico. PREPARACION DE LOS REACTIVOS Y ESTABILIDAD
R1a. Tampn
METODO TURBIDIMETRICO(3) Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad
SA
cuando se conservan entre +2 y +8C.
PRINCIPIO
Lipasa R1b. Sustrato
M

Triolena + 2H2O monoglicrido + 2 ac. olico Reconstituir el contenido de un vial de Sustrato R1b con
el volumen apropiado de Tampn R1a.
Se mide la disminucin de la turbidez a 340 nm. 2,5 ml para el kit de 20 x 2,5 ml (LI 188)
AA

30 ml para el kit de 4 x 30 ml (LI 194)

MUESTRA Estable durante 2 semanas cuando se conserva entre +2 y
Suero o plasma heparinizado. +8C 5 das entre +15 y +25C.
La lipasa es estable en la muestra durante 5 das entre
G

+2 y +8C 24 horas entre +20 y +25C. CAL. Patrn

Disolver el contenido de un vial de Patrn 3 en 3,0 ml
COMPOSICION DEL REACTIVO de agua bidestilada, rotar lentamente durante 30 min
antes de utilizar. Estable durante 5 das entre +2 y +8C.
Componentes Concentracin en la prueba
MATERIALES SUMINISTRADOS
R1a. Tampn Tampn
Tampn Tris 26 mmol/l, pH 8,9 Sustrato
R1b. Sustrato Patrn
Desoxicolato sdico 16,7 mmol/l
Cloruro clcico 0,04 mmol/l MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS
Triolena 0,3 mmol/l Multisueros Valorados Randox Nivel 2 (No. Cat. HN 1530) y
Colipasa 4 mg/l Nivel 3 (No. Cat. HE 1532)
CAL. Patrn Ver valor asignado
en el inserto del lote especfico NOTAS(2)
En raras ocasiones, el suero del paciente puede presentar un
aumento de la absorbancia en vez de un descenso. La actividad
de la lipasa en estas muestras normalmente se encuentra dentro
del rango normal. Actividades extremadamente elevadas de lipasa
pueden conducir a un considerable consumo de sustrato, siendo
estos casos A1 menor de 0,500. Cuando esto ocurra, diluir la
muestra 1+9 con una solucin de NaCl 0,9% y repetir la prueba.
Multiplicar el resultado por 10. Es preferible utilizar cubetas
desechables. Las cubetas de cristal deben lavarse
abundantemente, especialmente despus de haber sido utilizadas
para ensayos de triglicridos o colesterol.

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 MANUAL/ RX MONZA LI 188

PROCEDIMIENTO
Seleccione LIP en la pantalla ejecutar prueba y lleve a cabo un INTERFERENCIA
blanco de agua segn las instrucciones. La hemlisis interfiere en la prueba.
Pipetear en la Cubeta: VALORES NORMALES(4)
Suero: Hasta 190 U/l (37C)
Reactivo Blanco S0 Patrn S1 Muestra

ddH20 20uL - - Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango de

Muestra - - 20uL referencia que refleje la edad, sexo, dieta y localidad geogrfica de la
CAL Patrn - 20uL - poblacin.
Reactivo 500uL 500uL 500uL
CARACTERSITCAS ESPECFICAS DE
Mezclar cuidadosamente para evitar la formacin de espuma, FUNCIONAMIENTO DE LA TCNICA
entonces inserte la cubeta en el soporte de flujo de clulas de Se obtuvieron los siguientes datos de rendimiento mediante un
RX monza y oprima leer. analizador Rx Monza en funcionamiento a 37C.

LINEALIDAD
CALIBRACIN PARA RX MONZA
Se recomienda la calibracin usando el CAL estndar Si la actividad de la lipasa excede 940 U/l, diluir la muestra 1+1
proporcionado en el Kit. Calibrar en el cambio de lote de con NaCl al 0,9% y repetir la prueba. Multiplicar el resultado por
reactivo o segn se indica en los procedimientos de control de 2.
calidad.
SENSIBILIDAD
PARA USO MANUAL La concentracin detectable mnima de lipasa con un nivel
aceptable de precisin se determin en 24,5 U/l.
Longitud de onda: 340 nm (Hg 365 nm o Hg 334 nm)
Cubeta: 1 cm de espesor PRECISION
Temperatura: 37C
Medicin: frente al aire Precisin Dentro del Anlisis
SA
Nivel 1 Nivel 2
Pipetear en la cubeta: Media (U/l) 129 403
DE 6.05 16.2
Patrn Muestra CV(%) 4.69 4.02
M

Macro Semi Micro Macro Semi Micro n 20 20

Reactivo 2,5 ml 1,0 ml 2,5 ml 1,0 ml Precisin Total
AA

Muestra --- --- 0,1 ml 0,04 ml Nivel 1 Nivel 2

Patrn 0.1 ml 0,04 ml --- --- Media (U/l) 129 403
DE 6.57 17.8
Mezclar. Evitar la formacin de espuma. Leer la absorbancia A1 CV(%) 5.09 4.41
G

del patrn y de la muestra al cabo de 4 min. Despus de otros 5 n 20 20

min leer la absorbancia A2 del patrn y de la muestra.
CORRELACIN
A de la muestra o del patrn = A1 - A2
Este mtodo (Y) se compar con otro mtodo comercial
disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
CLCULO MANUAL lineal:
Calcular el factor de la prueba de la siguiente manera:
Y = 1.0495 x -10.67
Actividad(patrn) y un coeficiente de correlacin r = 0,9832
Factor =
Apatrn Se analizaron 45 muestras de pacientes con valores de entre
43-918U/l.
Actividad lipasa en la muestra = Factor x Amuestra
REFERENCIAS
CONTROL DE CALIDAD
1. Tietz NW et al. Lipase in serum-the elusive enzyme: An
Se recomiendan los Multisueros Ensayados Randox, Nivel 2 y Nivel
3 para el control de calidad diario. Se deber de analizar dos niveles overview. Clin Chem 1993; 39:746-756.
distintos de controles cada da. Los valores obtenidos debern 2. Lott, J. A., et al. Clin. Chem. 1986; 32: 1920.
encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se 3. Ziegenhorn J., et al. Clin. Chem. 1979; 25: 1067.
encuentran fuera del rango y su repeticin excluye error, se 4. Weisshaar, H.D., et al. (1981). Dtsch. Med. Wschr.
debern seguir los siguientes pasos: 106: 239.
1. Comprobar programacin del instrumento y la lmpara.
2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento
bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin.
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los Revisado 15 Sep 10 bm
Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28 94422413.
Rev. 001

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MAGNESIO PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Slo para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca. Ejecutar

(AZUL DE XILIDIL) las precauciones normales requeridas para el manejo de

reactivos de laboratorio.
Mtodo Colorimtrico
MANUAL La solucin R1 contiene Azida Sdica. Evitar su ingestin o el
RX MONZA contacto con la piel o las membranas mucosas. En caso de
contacto con la piel, lavar la zona afectada con abundante agua.
PARA SU USO En caso de contacto con los ojos o ingestin, buscar atencin
Para el anlisis cuantitativo in vitro de Magnesio en el suero, el mdica inmediatamente.
plasma y la orina. Este producto es adecuado para un uso manual
o en el analizador RX monza. La Azida Sdica reacciona con el plomo y cobre de las caeras,
formando cidos potencialmente explosivos. Cuando se eliminen
No. Cat. dichos reactivos, limpiar con grandes volmenes de agua para
MG 531 R1. Reactivo de color 3 x 100 ml evitar la formacin de cidos. Las superficies metlicas expuestas,
debern limpiarse con hidrxido de sodio al 10%.
3 x 100 ml CAL. Patrn 1 x 5.5 ml
Hojas Sanitarias y de Seguridad estn disponibles si se desean.
SIGNIFICADO CLINICO
El Magnesio es uno de los principales cationes intracelulares en el Los reactivos deben utilizarse solamente para su
cuerpo. Su accin est relacionada con la del calcio. La deficiencia propsito por personal de laboratorio calificado, y bajo
de magnesio, hipomagnesemia, puede resultar en varias condiciones de laboratorio apropiadas.
enfermedades neuromusculares, debilidad, temblores, tetania y
convulsiones. Se asocia con hipocalcemia, terapia intravenosa, PREPARACION Y ESTABILIDAD DE LOS REACTIVOS
diabetes mellitus, alcoholismo, dilisis y embarazo. Todos los reactivos estn listos para su uso. Estables hasta la
fecha de caducidad cuando se conservan entre +2 y +25C.
Los niveles elevados de magnesio en suero se asocian con
deshidratacin, acidez diabtica grave y Enfermedad de Addison. MATERIALES SUMINISTRADOS
Las condiciones que interfieren con la filtracin glomerular como Reactivo de Color de Magnesio
en el caso de fallo renal resultan en retencin de magnesio y por
SA
Patrn de Magnesio
ello aumento de sus niveles en suero.
MATERIALES NECESARIOS PERO NO
PRINCIPIO(1-5) SUMINISTRADOS
M

Los iones de magnesio reaccionan con azul de xilidilo en un Material de pipeteo para el suministro de 10 l y 1,0 ml.
medio alcalino para formar un quelato soluble en agua de color Cronmetro y bao de agua o bloque de calentamiento para
morado-rojizo. La intensidad del color es proporcional a la mantener una temperatura entre 20 - 25C.
AA

concentracin de magnesio en la muestra. El Calcio se excluye
de la reaccin por medio de su conjugacin con el EGTA.
EXTRACCION Y CONSERVACION DE LA MUESTRA
G
Un espectrofotmetro con una longitud de onda de 520 nm.
Multisueros Valorados Randox Nivel 2 (No. Cat. HN 1530) y
Nivel 3 (No. Cat. HE 1532).
Multisueros de Precisin Humanos Randox Nivel 2 (No. Cat.

Suero, Plasma (no plasma tratado con EDTA) u orina. La UN1557) y Nivel 3 (No. Cat. UE1558).
muestra de orina de 24 horas puede contener sedimentos que
absorben el magnesio. Aadir unas gotas de cido clorhdrico NOTA
concentrado (pH 3-4) para disolver el sedimento y diluir con Todo el material deber estar libre de contaminacin de
DDH2O 1+4 (resultado x 5). Magnesio. Las fluctuaciones en valores de blanco de ms de un
10% en una serie, son ms probables debido a la contaminacin
COMPOSICION DEL REACTIVO del material con magnesio. Lavar la muestra y los contenedores
del reactivo con solucin al 10% de Triton X 100, sumergir en
Componentes Concentracin Inicial de los Reactivos cido clorhdrico o Ntrico diluido de 1 a 2 horas y enjuagar con
agua destilada. Invertir y dejar gotear hasta que se seque.
R1. Reactivo de Color
Azul de Xilidilo 0,1 mmol/l PROCEDIMIENTO
Tampn Tris 0,2 mmol/l Seleccione Mg en la pantalla de Ejecucin de prueba y llevar a
Carbonato Potsico 77 mmol/l cabo un blanco de agua segn las instrucciones.
EGTA 0,04 mmol/l Pipetear en la Cubeta:
CAL. Patrn Ver inserto lote especfico Reactivo Blanco S0 Patrn S1 Muestra
ddH2O 5 l - -
Muestra - - 5 l
Calibrador - 5 l -
Reactivo 500 l 500 l 500 l

Mezclar, incubar durante 5 minutos a 20-25 C. Inserte la cubeta

en el porta-RX monza celda de flujo y pulse Leer.

CALIBRACION
Recomend el uso de CAL estndar suministrado en el kit de
calibracin o de suero Randox Nivel 3. Calibrar el cambio de
lote del reactivo o como se indica en los procedimientos de
control de calidad.

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 MANUAL/ RX MONZA MG 531

PARA USO MANUAL VALORES DE NORMALIDAD(6)

Longitud de onda: 520 nm ADULTOS

Cubetas: 1 cm de espesor
Temperatura: 20 - 25C Suero 0.65 1.05 mmol/l (1.58 - 2.55 mg/dl)
Medicin: frente al blanco de reactivo Orina 3.00 5.00 mmol/24 hrs (73 - 122 mg/24 hrs)

Procedimiento Macro
Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango
Pipetear en las cubetas: de referencia que refleje la edad, sexo, dieta y localidad
geogrfica de la poblacin.
Blanco de Reactivo Patrn Muestra
CARACTERISTICAS ESPECIFICAS DE
Reactivo de Color 2,0 ml 2,0 ml 2,0 ml FUNCIONAMIENTO
Agua Destilada 20 l - - Los siguientes datos se obtuvieron usando un analizador de
RX monza, en el modo de cubeta, calibrado en Calibracin de
Patrn - 20 l - nivel Randox Suero 3.
Muestra - - 20 l
SUERO
Mezclar bien e incubar durante 5 minutos a temperatura
ambiente. Medir la absorbancia final de la muestra (Amuestra) y del LINEARIDAD
patrn (Apatrn) frente al Blanco de Reactivo. El color resultante El mtodo es lineal hasta 2,34 mmol/l (5,69 mg/dl). Las muestras
es estable durante 3 horas a temperatura ambiente. con concentraciones ms elevadas se debern diluir 1+1 con
agua doblemente destilada y repetir el anlisis. Multiplicar el
Procedimiento Semi Micro resultado por 2.
Blanco de Reactivo Patrn Muestra SENSIBILIDAD
El nivel mnimo detectable se ha determinado como
Reactivo de Color 1,0 ml 1,0 ml 1,0 ml 0,036 mmol/l (0,088 mgl/dl).
Agua Destilada 10 l - -
Patrn - 10 l - PRECISION
Muestra - - 10 l
Intra assay
SA
Mezclar bien e incubar durante 5 minutos a temperatura Nivel 2 Nivel 3
ambiente. Medir la absorbancia final de la muestra (Amuestra) y del Media (mg/dl) 2.43 4.50
patrn (Apatrn) frente al Blanco de Reactivo. El color resultante DE 0.017 0.020
es estable durante 3 horas a temperatura ambiente. CV(%) 0.70 0.44
M

n 20 20
CLCULO MANUAL
Inter assay
AA

Amuestra
Concentracin de Magnesio (mmol/l) = x Conc. Nivel 2 Nivel 3
Apatrn Estndar Media (mg/dl) 2.43 4.50
(mmol/l) DE 0.066 0.081
Amuestra CV(%) 2.71 1.79
G

Concentracin de Magnesio (mg/dl) = x Conc. n 20 20

Apatrn Estndar
(mg/dl)
NORMALIZACIN
Standard Randox magnesio incluido en el kit se puede rastrear al
magnesio de materiales de referencia NIST 909b.
CONTROL DE CALIDAD
Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel
3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de
controles al menos una vez al da. Los valores obtenidos debern
encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se
encuentran fuera del rango y su repeticin excluye error, se
debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar programacin del instrumento y la lmpara
2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento
bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin.
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los
Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +44 (0) 28 9442 2413.
INTERFERENCIA
Se analizaron los siguientes analitos hasta los niveles indicados y
se encontr que no producen interferencias:
Hemoglobina <1000 mg/dl (10 g/l)
Bilirrubina <25 mg/dl (427 mol/l)
Triglicridos <1000 mg/dl (11 mmol/l)
MTODO DE COMPARACIN
El mtodo Randox (Y) se compar con otro equipo de prueba
disponible en el mercado (X). Cuarenta muestras de pacientes
con valores que abarca el intervalo 1,75 a 5,58 mg / dl se
ensayaron. El anlisis de regresin lineal de los datos como
resultado la siguiente ecuacin.
Y = 0.997 X - 0.0004
con un coeficiente de correlacin, r = 0,9989
ORINA
LINEARIDAD
Este mtodo es lineal to12.6 mmol/l (30,6 mg/dl).
SENSIBILIDAD
El nivel mnimo detectable se ha determinado como
0,618 mmol/l (1,50 mg/dl).
REFERENCIAS
1. Mann, C.K., Yoe, J.H., Anal. Chem. (1956), 28: 202-205.
2. Mann, C.K., Yoe, J.H., Anal. Chim. Acta (1957), 16: 155-160.
3. Ogata, H., Hiroi, L., Anal. Chem. (1959), 8: 21.
4. Bohuon, C., Clin. Chim. Acta. (1962), 7: 811-817.
5. Rice E.N., Lapara, C.Z., Clin. Chim. Acta. (1964) 10: 369.
6. Teitz N.W. Clinical Guide to Laboratory Tests. W.B.
Saunders Co (1983).
Revisado 15 Sep 10 bm
Rev. 001

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SODIO (Na) CALIBRACIN
Se recomienda el uso de la Calibracin Randox Nivel 3 (CAL
Prueba Colorimtrica Enzimtica 2351), utiliza el blanco como S2 y lo diluye 4+1 como S1 (4 partes
RX Series Cal Nivel 3 + 1 parte de agua) con agua doblemente destilada. Se
1
recomienda realizar una calibracin diaria de 2 puntos como se
indica en el procedimiento de control de calidad.
USO DEL REACTIVO
La cuantificacin in vitro de Sodio se determina en suero y CONTROL DE CALIDAD
plasma. Este producto es apto para utilizarse en los Se recomienda utilizar el Multi-suero de ensayo Randox Nivel 2 y
Analizadores de la RX Series. Nivel 3 para realizar el control de calidad diario. Deben evaluarse
al menos dos niveles de calidad una vez al da. Los valores
No. Cat. obtenidos del control de calidad deben caer dentro del rango
NA7167 R1a. Solucin Tampn 4 x 45 ml de valores especficos. Si los valores caen fuera del rango,
R1b. Enzima 4 x 45 ml deber repetir y excluir los errores siguiendo los siguientes
R2a. Diluyente 2 x 39 ml pasos:
R2b. Sustrato 2 x 39 ml
1. Verificar la configuracin del analizador
MUESTRA 2. Verificar la limpieza del analizador
Suero, plasma tratada con heparina o litio. 3. Verificar la calidad del agua
ESTABILIDAD Y PREPARACIN DE LOS REACTIVOS 4. Verificar la temperatura de reaccin
5. Verificar la fecha de caducidad del reactivo
R1.Solucin Tampn/Enzimas
Transferir el contenido de un frasco de solucin 6. Contactar a Soporte Tcnico de Randox
tampn R1 al frasco de Enzima R1b y disolver Los requerimientos de control de calidad deberan ser
agitando suavemente, asegurando que el contenido determinados en concordancia con las regulaciones
quede disuelto completamente. Transferir el gubernamentales o con los requerimientos acreditativos
contendido de la solucin tampn R1a enjuagando el correspondientes.
vial R1b varias veces. Evite la formacin de espuma.
CARACTERSTICAS ESPECFICAS DEL DESEMPEO
Estable por 2 semanas de +2 hasta +8C o 5 das de Se obtuvieron las siguientes caractersticas especficas de
+15 hasta +25C.
funcionamiento al utilizar un analizador de la Rx Series.
R2. Diluyente/Sustrato
Transferir el contendio del frasco de Diluyente R2a
SA
en el frasco de Sustrato R2b y disolver agitando LINEALIDAD
suavemente, asegurando que el contenido quede Este mtodo es lineal hasta la concentracin de Sodio de
dusuelto completamente en el diluyente. Transferir 182 mmol/l. Muestras por debajo de esta concentracin
M
el contendio en el diluyente R2b varias veces. Evite deberen diluirse 1+1 con agua doblemente destilada (no usar
la formacin de espuma. Estable por 2 semanas de solucin salina 0.9% ) y repetir el ensayo. Multiplar el
+2 hasta +8C o 5 das de +15 hasta +25C. resultado por 2.
AA

MATERIALES PROPORCIONADOS SENSITIVITY

La concentracin mnima detectable para Sodio con un nivel
Solucin Tampn de precisin adecuado se determin como 57.8 mmol/l.
Enzima
G

Diluyente
PRECISIN
Sustrato
Precisin dentro de la Corrida
MATERIALES REQUERIDOS PERO NO
SUMINISTRADOS Level 2 Level 3
Multi-suero de ensayo Randox Nivel 2 (No. Cat. HN 1530) y Media (mmol/l) 139 159
DE 3.82 4.94
Nivel 3 (No. Cat. HE 1532).
CV(%) 2.75 3.11
Calibrador Randox Nivel 3 (No. Cat. CAL 2351). n 20 20
NOTAS DE PROCEDIMIENTO
Cuando el Sodio y Potasio se solicitan en conjunto, el Sodio Precisin entre Corridas
debe determinarse inmediatamente antes de analizar el Potasio. Level 2 Level 3
Media (mmol/l) 139 159
PROCEDIMIENTO DE 3.78 5.66
Seleccionar NA en la pantalla "Run Test" y realice un blanco de CV(%) 2.72 3.56
agua.
n 20 20
Pipetear en la cubeta:
CORRELACIN
Se compar este mtodo (Y) con otro mtodo comercial
Blanco de Reactivo S0 Estndar S1 Muestra disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de
ddH2O 20 l - - regresin lineal:
Estndar - 20 l -
Muestra - - 20 l
R1 500 l 500l 500 l Y = 0.9955 X + 1.2358
y un coeficiente de correlacin de r = 0.9813
Mezclar e incubar por 5 minutos a 37C. Posteriormente adicionar:
Se analizaron 41 muestras de pacientes abarcando
R2 200 l 200 l 200 l un rango de 87.85 hasta 188.51 mmol/l.

Mezclar adecuadamente, inserte la cubeta en el espacio del

RX Monza para la celda de flujo y presione "Read". Revisado 08 Mar 11 lm
ESTADO DE LOS PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Unicamente para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca.

ANTIOXIDANTES Respetar las precauciones normales necesarias que se requieren

al manejar reactivos de laboratorio.

TOTALES (TAS) Hojas informativas sobre Salud y Seguridad estn disponibles si se

MANUAL desean.

PARA SU USO Por favor, desechar todos los materiales Biolgicos y Qumicos
Para la determinacin cuantitativa in vitro del Estado de los segn las pautas locales.
Antioxidantes Totales en suero, plasma, vino, cerveza o zumos de
fruta. Este producto es adecuado para su utilizacin en Manual. Los reactivos deben ser utilizados solo para los
propsitos indicados por personal adecuado cualificado
Cat No. de laboratorio bajo condiciones apropiadas de
NX 2332 R1. Tampn 1 x 100 ml laboratorio.
5 x 10 ml R2. Cromgeno 5 x 10 ml
5 x 10 t R3. Sustrato 2 x 5 ml ESTABILIDAD Y PREPARACIN DE LOS REACTIVOS
CAL Patrn 5 x 1 ml R1. Tampn
Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad
PRINCIPIO DEL ANALISIS cuando se conserva entre +2 y +8C.
ABTS (2,2'-Azino-di-[3-etilbenzotiazoln sulfonato]) se incuba
con peroxidasa (metamioglobina) y H2O2 para generar el radical R2. Cromgeno
catin ABTS*+. Este radical presenta una coloracin verde- Reconstituir un vial de cromgeno R2 con 10 ml de
azulada relativamente estable, que se mide a 600 nm. La Tampn R1. Estable 2 das cuando se conserva entre +2
presencia de antioxidantes en la muestra produce una supresin y +8C u 8 horas entre +15 y +25C.
de esta coloracin, siendo esta supresin, proporcional a la
concentracin de antioxidantes presentes en la muestra. R3. Sustrato
SA Diluir 1 ml de sustrato R3 con 1.5 ml de Tampn R1.
HX-FeIII + H2O2 .X - [FeIV = 0] + H2O Estable 24 horas cuando se conserva entre +2 y 8C. En
la forma no diluida es estable hasta la fecha de caducidad
ABTS + .X - [FeIV = 0] ABTS*+ + HX - FeIII cuando se conserva entre +2 y +8C
M
HX-FeIII = Metamioglobina CAL Patrn
.X - [FeIV = 0] = Ferrilmioglobina Reconstituir un vial de Patrn con 1 ml de agua
ABTS= 2,2'-Azino-di-[3-etilbenzotiazoln sulfonato] doblemente desionizada. Estable durante 2 das cuando se
AA

ABTS es marca registrada de Boehringer Mannheim. conserva entre +2 y +8C 1 mes a -20C.

MUESTRA(2) Nota: Si este anlisis se utiliza en un sistema

Suero fresco o plasma heparinizado. Evitar muestras hemolizadas. automatizado, por favor, referirse a la hoja de
G

La muestra puede ser conservada hasta 36 Hs entre +2 y +8C. procedimiento para ese sistema, ya que las
El plasma/suero puede ser congelado durante un mximo de 14 instrucciones de reconstitucin podran diferir.
das. Evitar ciclos repetidos de congelacin-descongelacin. Para
el vino tinto diluya 1 + 3. Los zumos de frutas pueden ser MATERIALES SUMINISTRADOS
analizados tambin, pero deben filtrarse con un filtro de 0.45 l. Tampn
Cromgeno
COMPOSICIN DEL REACTIVO Sustrato
Patrn
Componentes Concentraciones en la prueba
MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS
R1. Tampn Control Randox de Antioxidantes Totales Cat.No. NX 2331
Tampn Fosfato Salino 80 mmol/l, pH 7,4 0,9% de NaCl de la solucin (Na Sin azida)
R2. Cromgeno
Metamioglobina 6,1 Hmol/l NOTAS
ABTS 610 Hmol/l 1. Es muy importante controlar exactamente el tiempo de
R3. Sustrato reaccin. Los resultados se vern afectados si se
Perxido de hidrgeno cambian los volmenes, los tiempos de incubacin y las
(forma estabilizada) 250 Hmol/l temperaturas. El kit del Estado Antioxidante Total slo
CAL Patrn se puede utilizar con un espectrofotmetro atemperado.
6-hidroxi-2,5,7,8-tetrametilcromn
-2-cido carboxlico Especfico por lotes 2. Azida de sodio interfiere en el ensayo y no debe ser aadi a
la solucin 0,9% de NaCl que puede ser utilizado para diluir las
muestras que exceden la linealidad del ensayo.

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 MANUAL NX 2332

PROCEDIMIENTO LINEALIDAD
Muestras que presentan concentraciones superiores a
Longitud de onda: 600 nm 2,5 mmol/l deberan ser diluidas con NaCl al 0,9% y analizadas
Cubeta: 1 cm de espesor otra vez. Se recomienda diluir las muestras nicamente cuando
Temperatura: 37C sea necesario ya que una dilucin lleva consigo un aumento de
Medida: frente al aire hasta 20% en los valores. La mayor parte de las muestras no
necesitarn ser diluidas porque los resultados sern ms bajos de
Pipetear en cubeta: 2,5 mmol/l.

Reactivo Patrn Muestra PATENTES

Blanco Este producto est sujeto a Patente UK 2250819 y Patentes y
Aplicaciones derivadas de PCT Aplicacin de Patente
Agua Bidestilada 20 Hl - - PCT/GB91/02228.
Patrn - 20 Hl -
Muestra - - 20 Hl REFERENCIAS
Cromgeno (R2) 1 ml 1 ml 1 ml 1. Miller, N.J., Rice-Evans, C., Davies,
M.J., Gopinathan, V. and Milner, A., Clinical Science (1993)
Mezclar bien, incubar hasta alcanzar la temperatura y leer 84, 407-412.
absorbancia inicial (A1) 2. Data on file at Randox.
Aadir:

Sustrato (R3) 200 Hl 200 Hl 200 Hl

Mezclar y empezar a cronometrar simultneamente. Leer la

absorbancia (A2) al cabo de exactamente 3 minutos.

A2 - A1 = A de muestra/patrn/blanco

CALCULO
SA
Estado de los Antioxidantes Totales:
conc del patrn
Factor =
M
(A blanco - A patrn)
mmol/l = Factor x (A Blanco- A Muestra)
AA

CONTROL DE CALIDAD
Se recomiendan Control Randox de Antioxidantes Totales para el
control de calidad diario. Este control debera procesarse como
mnimo una vez al da Los valores obtenidos debern encontrarse
G

dentro del rango especificado. Si los valores se encuentran fuera del

rango y su repeticin excluye error, se debern seguir los siguientes
pasos:
1. Comprobar la programacin del instrumento y la lmpara.
2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin, por ej. el crecimiento
bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los
Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +44 (0) 28 9442 2413.

VALORES DE REFERENCIA
Rango: 1,30 - 1,77 mmol/l Plasma

Este rango fue determinado en poblacin activa Europea. Se

recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango que
refleje la edad, sexo, dieta y localidad geogrfica de la poblacin.

Revisado 13 Nov 09 ck
Rev. 001

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GLUCOSA-6-FOSFATO PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Unicamente para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca.

DESHIDROGENASA Respetar las precauciones normales necesarias, que se requieren

al manejar reactivos de laboratorio.

(G-6-PDH) La solucin R1, R2, R3 y R4 contiene azida sdica. Evitar su

ingestin o el contacto con la piel y mucosas. En caso de
MANUAL contacto con la piel, lavar inmediatamente el rea afectada con
RX MONZA agua abundante. En caso de ingestin o contacto con los ojos
llamar inmediatamente a un mdico.
PARA SU USO
Para la determinacin cuantitativa in vitro de La azida sdica reacciona con el cobre y plomo de las tuberas, lo
Glucosa-6-Fosfato Deshidrogenasa en eritrocitos. Este producto que podra producir azidas explosivas. Cuando se tire este
es adecuado para un uso manual o en el analizador RX monza. reactivo enjuagar abundantemente con agua para evitar la
formacin de estas azidas. Las superficies metlicas que hayan
Cat. No. sido puestas en contacto con la azida sdica deben ser lavadas
PD 410 R1. Tampn 1 x 100 ml con hidrxido sdico al 10%.
100 ml R2. NADP 1 x 2 ml
R3. Sustrato 1 x 2 ml Hojas informativas sobre Salud y Seguridad estn disponibles si se
R4. Digitonina 1 x 20 ml desean.

METODO UV Por favor, desechar todos los materiales Biolgicos y Qumicos

segn las pautas locales.
PRINCIPIO(1)
La actividad del enzima se determina midiendo la variacin de la Los reactivos deben ser utilizados solo para los
absorbancia a 340 nm que se produce por la reduccin del propsitos indicados por personal adecuado cualificado
NADP+. de laboratorio bajo condiciones apropiadas de
G-6-PDH laboratorio.
G-6-P + NADP+ gluconato-6-P + NADPH + H+
SA
ESTABILIDAD Y PREPARACIN DE LOS REACTIVOS
MUESTRA R1. Tampn
Eritrocitos. Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad cuando
M

se conserva entre +2 y +8C.

PREPARACION DE LA MUESTRA
Lavar 0,2 ml de sangre con 2 ml alcuotos de solucin de NaCl al R2. NADP
AA

0,9%. Centrifugar despus de cada lavado a 3000 rpm durante 10 Reconstituir el contenido de la botella 2 con 2 ml de agua
minutos. Repetir 3 veces. Repetir 3 veces. Suspender el bidestilada. Estable durante 4 semanas entre +2 y +8C.
centrifugado de eritrocitos en 0,5 ml de solucin 4, dejar durante
R3. Sustrato
G

15 min a +4C y centrifugar de nuevo. Use el sobrenadante en

el ensayo en un plazo de 2 horas. Reconstituir el contenido de la botella 3 con 2 ml de agua
bidestilada. Estable durante 4 semanas entre +2 y +8C.
COMPOSICIN DEL REACTIVO
R4. Digitonina
Componentes Concentraciones en la prueba Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad cuando
se conserva entre +2 y +8C.
R1. Tampn
Tampn trietanolamina 31,7 mmol/l, pH 7,6 MATERIALES SUMINISTRADOS
EDTA 3,2 mmol/l Tampn
R2. NADP 0,34 mmol/l NADP
R3. Sustrato 0,58 mmol/l Sustrato
R4. Digitonina Digitonina

MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS

Control para G-6-PDH Randox
Deficiente No. Cat. PD 2617
Normal No. Cat. PD 2618
Agua bi destilada

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 MANUAL/ RX MONZA PD 410

PROCEDIMIENTO La actividad G-6-PDH se expresa como eritrocitos mU/109 o

Determinar el nmero de eritrocitos/ml de sangre. como hemoglobina mU / g . Para el clculo de actividad G-6-
PDH como eritrocitos mU/109 para la comparacin con el
1. RX MONZA valor normal, se divide la actividad calculada (mU / ml de sangre
Seleccione G6PD en la pantalla de Ejecucin de prueba y llevar a por los eritrocitos) con el recuento de los glbulos rojos por ml.
cabo un blanco de agua segn las instrucciones.
eg. Conteo de RBC por ml = 5.3 x 109
Pipetear en tubos de ensayo:
mU/eritrocitos per ml = 695
Mestra
695
Haemolysate 7.5 l mU/109 eritrocitos = = 131
Reagent R1 500 l 5.3
Reagent R2 15 l
Para el clculo de actividad G-6-PDH como
hemoglobina mU/g.
Mezclar, incubar durante 5 min a 37C y aadir:
La siguiente ecuacin se utiliza.
Reagent R3 7.5 l
mU.eritrocitos por ml x 100
G-6-PDH mU/gHb =
Mezclar bien y aspirar en el RX monza. Hb (g/dl)
2. PARA USO MANUAL 100 = Factor para convertir de ml a dl
Longitud de onda: 340 nm (Hg 334 nm o Hg 365 nm) Hb(g/dl) = Concentracin de hemoglobina
Cubeta: 1 cm de espesor determin para cada muestra
Temperatura: 37C
Medicin: frente al aire eg. mU/ ml por eritrocitos = 695

Pipetear en tubos de ensayo:

SA
Hb(g/dl) = 15.0

Macro Semi Micro 695 x 100

R1 3.00 ml 1.00 ml G-6-PDH mU/gHb =
M

R2 0.10 ml 0.03 ml 15.0

Haemolysate 0.05 ml 0.015 ml
= 4633
AA

Mezclar, incubar durante 5 min a 37C y aadir:

Correccin de la Temperature
R3 0.05 ml 0.015 ml Tenga en cuenta que la correccin de la temperatura por
debajo solo puede ser utilizada para las muestras de pacientes.
G

Mezclar, leer la absorbancia inicial y empezar a cronometrar

simultneamente.
Leer de nuevo al cabo de 1, 2 y 3 min.
CLCULO MANUAL
Para calcular la actividad de la G-6-PDH utilizar las
siguientes frmulas:
Macro
mU/erythrocytes per ml sangre* = 30476 x A 340 nm/min
mU/erythrocytes per ml sangre* = 54857 x A Hg 365 nm/min
mU/erythrocytes per ml sangre* = 31068 x A Hg 334 nm/min
Semi Micro
mU/erythrocytes per ml sangre* = 33650 x A 340 nm/min
mU/erythrocytes per ml sangre* = 60571 x A Hg 365 nm/min
mU/erythrocytes per ml sangre* = 34304 x A Hg 334 nm/min
Cuando la temperatura es de 37 C, no se requiere ningn
factor de correccin de temperatura (TCF). Si los resultados de
muestras de los pacientes se presentan a una temperatura que
no sea 37 C, se debe utilizar un TCF.
Cubeta de TCF
Temperatura (C)
25 2.076
30 1.515
CONTROL DE CALIDAD
Se recomiendan los Control para G-6-PDH Randox , Deficiente y
Normal para el control de calidad diario. Analizar dos niveles
distintos de controles al menos una vez al da. Los valores
obtenidos debern encontrarse dentro del rango especificado. Si los
valores se encuentran fuera del rango y su repeticin excluye error,
se debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar programacin del instrumento y el origen de luz.
2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento de
bacterias puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los
Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28 94422413.

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 MANUAL/ RX MONZA PD 410

INTERFERENCIAS
Los reticulocitos tienen un nivel de G6-PDH ms elevado que el
de los hematies maduros. No se recomienda por tanto que se
realice este anlisis trs una crisis hemolitica severa, ya que esto
puede ofrecer resultados falsaments elevados. El anlisis puede
resultar util una vez que los hematies hayan vuelto a su nivel
normal.
VALORES NORMALES(3)
En eritrocitos: 245 - 299 mU/109 eritrocitos (37C)
REFERENCIAS
1. Kornberg, A. et al., Methods in Enzymology 1,
Academic Press, New York, 1955; p.323.
2. Makarem, A., Clinical Chemistry-Principles and
Techniques. 2nd Ed. R.F. Henry, D. C. Cannon, J.W.
Winkelman, Editors. Harper and Row, Hagerstown
[MD], 1974; 1128-1135.
3. Lohr GW, Waller HD: Glucose-6-Phosphate
Dehydrogenase. Methods of Enzymatic Analysis,
3rd Edition - Varlag Chemie, Wehnheim: 1974; p. 636.

6.97 - 20.5 U/g Hb (37C)

Hemoglobina en sangre (g/dl)

Hombres Adultos 13 - 18
Mujeres Adultos 11 - 16
Recin nacidos 14 - 23

Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango

que refleje la edad, sexo, dieta y localidad geogrfica de la
poblacin.

CARACTERSITCAS ESPECFICAS DE
FUNCIONAMIENTO DE LA TCNICA
Se obtuvieron los siguientes datos de rendimiento mediante un
analizador RX monza en funcionamiento a 37C.
SA
LINEALIDAD
Este mtodo es lineal hasta una concentracin de 4303 U / l.
Diluir las muestras con concentraciones mayores con 0,2 ml de
M

hemolizado con 1,8 ml de solucin de NaCl al 0,9% y repita la

prueba. Multiplicar el resultado por 10.
AA

SENSIBILIDAD
La concentracin mnima detectable de G6PDH en los
eritrocitos con un nivel aceptable de precisin ha sido
determinada como 154 U/l.
G

PRECISION

Anlisis (Intra)
Nivel 1 Nivel 2
Media (U/l) 784 1533
DE 33.2 71.3
CV (%) 4.24 4.65
n 20 20

Anlisis (Inter)
Nivel 1 Nivel 2
Media (U/l) 784 1533
DE 50.5 78.3
CV (%) 6.45 5.11
n 20 20

CORRELACIN
Este mtodo (Y) se compar con otro mtodo comercial
disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
lineal:

Y = 1.0069 x + 47.644
y un coeficiente de correlacin r = 0,9903
Revised 17 Nov 11 ml
Se analizaron 50 muestras de pacientes con valores de entre 162 Rev.002
y 1200U/l.

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FOSFORO INORGNICO PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS DE SEGURIDAD
Slo para uso diagnstico in vitro. No pipetee con la boca.
(PHOS) Aplique las precauciones habituales necesarias para la
manipulacin de reactivos de laboratorio.
Mtodo UV
MANUAL Las soluciones R1a y R1b contienen cido sulfrico. Evite la
RX MONZA digestin de estos productos y su contacto con la piel o las
membranas.
USO PREVISTO
Para la determinacin cuantitativa in vitro del fsforo inorgnico El CAL contiene azida sdica. Evite la digestin de estos
en suero y orina. Este producto es adecuado para uso manual y productos y su contacto con la piel o las membranas. En caso de
para el analizador Rx Monza. contacto con la piel, lave la zona afectada con gran cantidad de
agua.
N. de cat. En caso de contacto con los ojos o, si se produce digestin,
PH 1016 R1a. Blanco de reactivo 1 x 210 ml acuda de inmediato al mdico.
300 ml R1b. Reactivo de molibdato 1 x 90 ml La azida sdica reacciona con las tuberas de cobre y de plomo y
CAL. Patrn 1 x 5,5 ml forma azidas metlicas explosivas en potencia. Al desechar
reactivos de este tipo, lave con gran cantidad de agua para evitar
RELEVANCIA CLNICA que se acumulen azidas. Las superficies metlicas expuestas a
El cuerpo humano contiene aproximadamente 1 kg de fsforo. estos reactivos se deben limpiar con hidrxido sdico al 10%.
Las sales calcificadas del fosfato que constituye la sustancia
inorgnica del hueso suponen aproximadamente el 80% del total Estn disponibles previa peticin las fichas tcnicas de salud y
de fsforo. El resto est distribuido por las restantes clulas del seguridad.
cuerpo, principalmente como fsforo orgnico en fosfolpidos y
fosfoprotenas. En el suero, la mayor parte del fsforo Los reactivos deben utilizarse slo para la finalidad
inorgnico se encuentra en forma libre, estando ligado el 15% prevista y por personal de laboratorio adecuadamente
aproximadamente a protenas. Cuando aparecen niveles
cualificado, en unas condiciones de laboratorio
anmalos de fosfato srico, suelen acompaar a enfermedades
apropiadas.
del rin, seas y paratiroideas. El fosfato se suele medir junto
con el calcio srico, ya que cada una de las mediciones resulta de
SA
utilidad para interpretar la otra. ESTABILIDAD Y PREPARACIN DE LOS REACTIVOS
Todos los reactivos estn listos para usar. Estable hasta la fecha
PRINCIPIO DEL ENSAYO (1) de caducidad si se almacena a una temperatura de +15 C a
El fsforo inorgnico reacciona con el molibdato armnico en +25C.
M

presencia de cido sulfrico para formar un complejo de

fsfomolibdato que se mide a 340 nm. ESTABILIDAD Y PREPARACIN DEL REACTIVO DE
AA

RECOGIDA DE LA MUESTRA Y PREPARACIN (2)
El suero es la muestra recomendada.
El suero es estable durante 5 das si se almacena a +2-8 C. Es
G
TRABAJO
Mezcle un envase de Blanco de reactivo R1a con un envase de
Reactivo de molibdato R1b (300 ml de reactivo de trabajo).
Cuando se trata de volmenes menores, prepare el reactivo de

estable durante 3 meses si se almacena congelado a -20C. Evite trabajo conforme a lo que indica la tabla siguiente:
las muestras hemolticas ya que la hemolisis interfiere en la
prueba. Blanco de reactivo (R1a) Reactivo de molibdato (R1B)
Orina: La orina de 24 horas se debe recolectar en una botella
lavada con cido y libre de detergentes. Tras la recoleccin de la 7,0 ml 3,0 ml
muestra, acidifquela hasta alcanzar un pH <3,0. 14,0 ml 6,0 ml
Diluir la orina 1+19 con solucin de 0,9% NaCl. Multiplicar el 28,0 ml 12,0 ml
resultado por 20.

COMPOSICIN DEL REACTIVO Estable durante 8 semanas a una temperatura de +15 a +25C.

Contenido Concentracin inicial de las soluciones MATERIALES SUMINISTRADOS

Blanco de reactivo
R1a. Blanco de reactivo Reactivo de molibdato
cido sulfrico 0,36 mol/l Patrn
Cloruro de sodio 154 mmol/l
Detergente MATERIALES NECESARIOS QUE NO SE
R1b. Reactivo de molibdato SUMINISTRAN
Molibdato armnico 3,5 mmol/l Dispositivos de etiquetado capaces de entregar 10 l y 1 ml.
cido sulfrico 0,36 mol/l Temporizador y bao de agua o bloque calefactor para mantener
Cloruro de sodio 154 mmol/l la temperatura a +20-+25C o +37C.
CAL. Patrn Espectro fotmetro que pueda medir a 340 nm.
Fosfato potsico Consulte el prospecto de cada lote Multisueros analizados de nivel 2 de Randox (N de cat.
HN 1530) y nivel 3 (N de cat. HE 1532).
Suero de calibracin de nivel 3 de Randox Nivel (N de cat.
CAL 2351).

PGINA 1 DE 4
 MANUAL/ RX MONZA PH 1016

PROCEDIMIENTO CONTROL DE CALIDAD

Realice una nueva calibracin de ganancia [Gain Calibration] con Se recomienda utilizar los Multisueros analizados de Randox de
una cubeta que contenga ddH2O recin preparada. Seleccione el nivel 2 y 3 para el control de calidad diario. Deben analizarse dos
programa PHOS en la pantalla Run Test [ejecucin de prueba] y niveles de controles al menos una vez al da. Los valores obtenidos
realice un blanco de agua la ley como se indica. deben situarse dentro de un rango determinado. Si estos valores
estn fuera del rango y la repeticin excluye un posible error,
Pipetee en la cubeta: deben realizarse los pasos siguientes:
1. Comprobar los ajustes del instrumento y la fuente de luz.
2. Comprobar que todo el equipo utilizado est limpio.
Blanco de reactivo Patrn Muestra
3. Comprobar el agua; los contaminantes, como un crecimiento
S0 S1
bacteriano, pueden contribuir a la obtencin de resultados
imprecisos.
Agua destilada 5 l --- --- 4. Comprobar la temperatura de la reaccin.
Muestra --- --- 5 l 5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y su contenido.
Patrn --- 5 l --- 6. Contactar con el servicio tcnico de atencin al cliente de
Reactivo de trabajo 0,5 ml 0,5 ml 0,5 ml Randox Laboratories llamando al telfono +44 (0) 28 9442
2413 (Irlanda del Norte).
Mezcle, cubre durante 10 minutos a +20 - +25C antes de
realizar la lectura, tal y como se indica en la pantalla. INTERFERENCIA
Los analitos indicados ms abajo se sometieron a prueba hasta
CALIBRACIN PARA RX MONZA alcanzar los niveles siguientes y se determin que no interferan:
Se recomienda utilizar el patrn de calibrado CAL se proporciona en Bilirrubina 500 mol/l
el kit o bien el Suero de calibracin de nivel 3 de Randox para Intralipid 0,4%
muestras de suero. Triglicridos 4,05 mmol/l
Se recomienda utilizar el patrn de calibracin CAL proporciona Hemoglobina 7 g/l
en el kit para muestras de orina. Calibre cuando cambie de lote
de reactivo o bien cuando indiquen los procedimientos de VALORES NORMALES (2, 3)
control de calidad. Suero: 0,87 - 1,45 mmol/l (2,7 - 4,5 mg/dl)
SA
PARA USO MANUAL Orina de 24 horas: 12,9 - 42,0 mmol/d
(0,4 - 1,3 g/d) Dieta libre
Longitud de onda: 340 nm
Cubeta: Recorrido luminoso de 1 cm Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio
M

Temperatura: +20- +25C/+37C intervalo de referencia para reflejar la edad, sexo, dieta y
Medicin: frente a blanco de reactivo ubicacin geogrfica de la poblacin.
AA

Pipetee en la cubeta: CARACTERSTICAS DE EFICACIA ESPECFICAS

Los siguientes datos de rendimiento se han obtenido utilizando
Blanco Patrn Muestra un analizador Rx Monza, calibrado con el Suero de suero de
G

calibracin de nivel 3 de Randox, a +37oC.

Agua destilada 10 l --- --- SUERO
Muestra --- --- 10 l
Patrn --- 10 l --- SENSIBILIDAD
Reactivo de trabajo 1 ml 1 ml 1 ml Se ha determinado que el nivel mnimo detectable era de 0,307
mmol/l (0,953 mg/dl).
Mezcle, incube durante 10 minutos a +20- +25C o a 5 min a
37C. Mida la absorbancia de la muestra (muestra A) y del patrn LINEALIDAD
(patrn A) frente al blanco de reactivo. El mtodo es lineal hasta 7,77 mmol/l (24,1 mg/dl). Las muestras
que presenten una concentracin ms elevada se deben diluir
NOTA 1 + 4 con una solucin 0,9% (p/v) NaCl y someterse a nuevo
Las muestras ictricas y ligeramente lipmicas exigen realizar un ensayo, multiplicando el resultado por 5.
blanco de muestra. Utilizando el mismo esquema de pipeteo, PRECISIN
mezcle en 10 l de muestra con 1000 l de blanco de reactivo.
En el Rx Monza, la Concentracin de la muestra (mmol/l) = Intraensayo
Muestra (mmol/l) Blanco de muestra (mmol/l). En el caso de Nivel 2 Nivel 3
Promedio (mg/dl) 4,60 6,77
los usuarios que realizan el mtodo manual, a continuacin la DT 0,040 0,141
absorbancia del blanco de muestra (blanco de muestra A) se resta de la CV(%) 0,88 2,08
absorbancia de la muestra (muestra A). n 20 20
Interensayos
ESTANDARIZACIN Nivel 2 Nivel 3
El Suero de calibracin de nivel 3 de Randox es trazable Promedio (mg/dl) 4,60 6,77
conforme a lo que indican los materiales de referencia para DT 0,199 0,197
fsforo inorgnico NIST 186lg. CV(%) 4,32 2,91
n 20 20

PGINA 2 DE 4
 MANUAL/ RX MONZA PH 1016

COMPARACIN CON OTROS MTODOS

El mtodo de Randox (Y) se someti comparacin con otro kit
de prueba comercial (X). Se sometieron a prueba muestras de
71 pacientes, que presentaban un rango de 1,57 a 15,1 mg/dl. El
anlisis de regresin lineal de los datos ha producido la siguiente
ecuacin:
Y = 0,91 X - 0,6897
con un coeficiente de correlacin r = 0,9990

ORINA
SENSIBILIDAD
Se ha determinado que el nivel mnimo detectable era de 1,12
mmol/l (3,48 mg/dl).

LINEALIDAD
El mtodo es lineal hasta 57,7 mmol/l (179 mg/dl). Las muestras
que presenten una concentracin ms elevada se deben diluir
1 + 4 con una solucin 0,9% (p/v) NaCl y someterse a nuevo
ensayo, multiplicando el resultado por 5.

PRECISIN

Intraensayo
Nivel 2 Nivel 3
Promedio (mg/dl) 29,5 89,2
DT 1,06 4,16
CV(%) 3,60 4,66
SA
n 20 20

Interensayos
Nivel 2 Nivel 3
M

Promedio (mg/dl) 29,5 89,2

DT 1,08 3,86
CV(%) 3,68 4,33
AA

n 20 20

REFERENCIAS
1. Henry, R.J., Clinical Chemistry, Principles and Techniques,
G

2nd Edition, Harper and Row, p. 525, 1974.

2. Tietz, N., Clinical Guide to Laboratory Tests, W.B.
Saunders Company, Philadelphia 1983; 5: 384.
3. Tietz, N.W. Clinical Guide to laboratory tests. 2nd edition.
Philadelphia, Pa: WB Saunders Co.; 1990: 444-446.

Revisado: 02 May 12 bm
Rev. 002

PGINA 3 DE 4
 MANUAL/ RX MONZA PH 1016

SA
M
AA
G

PGINA DEJADA EN BLANCO INTENCIONADAMENTE

PAGE 4 OF 4
POTASIO (K) MATERIALES SUMINISTRADOS
Reactivo Precipitante
MANUAL Na-Tetrafenilboron
NaOH
PARA SU USO Patrn
Para el anlisis cuantitativo in vitro de Potasio en el suero y
plasma. Este producto es adecuado para uso Manual. MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS
Multisueros Valorados Randox Nivel 2 (No. Cat. HN 1530) y
Cat. No. Nivel 3 (No. Cat. HE 1532)
PT 1600 R1. Reactivo Precipitante 1 x 100 ml
100 ml R2a. Na-Tetrafenilboron 1 x 50 ml NOTAS PROCEDIMIENTO
R2b. NaOH 1 x 50 ml Se recomienda utilizar material de plstico desechable durante el
CAL Patrn 1 x 5.5 ml anlisis, ya que el material de cristal contaminado puede dar lugar
a grandes errores. Evitar la contaminacin con detergentes.
PRINCIPIO
El tetrafenilboron sdico reacciona con los iones de potasio en PROCEDIMIENTO
un medio alcalino libre de protenas para producir una 1. Precipitacin
suspensin trbida de tetrafenilboron potsico. La cantidad de
turbidez producida es proporcional a la concentracin de Pipetear en tubos de centrifugacin:
potasio.
Macro Micro
MUESTRA
Suero o plasma litio-heparin. Muestra 100 l 50 l
Reactivo Precipitante (R1) 1000 l 500 l
Las elevaciones en los niveles de potasio en suero / plasma puede
ocurrir debido a los posibles efectos de la manipulacin de la Mezclar y centrifugar durante 8 minutos a 12000 rpm.
muestra. Por esta razn las muestras de sangre debe mantenerse
a temperatura ambiente y el retraso en la centrifugacin debe ser 2. Anlisis de Potasio
evitado. Recentrifugacin no es recomendable.
SA
Longitud de onda: 578 nm, Hg 578 nm
COMPOSICION DEL REACTIVO Cubeta: 1 cm de espesor
Medicin: frente al reactivo blanco
M

Componentes Concentracin Inicial de las Soluciones Temperatura: +20 - +25C

R1. Reactivo Precipitante Pipetear en tubos de ensayo:

AA

Acido Tricloro Actico 0,3 mol/l

R2a. Tetrafenilboron Sdico 0,2 mol/l Macro Micro
R2b. Hidrxido Sdico 2,0 mol/l Patrn Muestra Patrn Muestra
CAL Patrn Vedi inserto lotto-specifico
G

Reactivo de Trabajo (R2) 2000 l 2000 l 1000 l 1000 l

Patrn (CAL) 200 l -- 100 l --
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD Sobrenadante -- 200 l -- 100 l
Unicamente para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca.
Respetar las precauciones normales necesarias, que se requieren
al manejar reactivos de laboratorio. El patrn y el sobrenadante claro se debern aadir en el medio
de la superficie del reactivo de trabajo para producir una
Hojas informativas sobre Salud y Seguridad estn disponibles si se turbidez homognea. Mezclar cuidadosamente y dejar reposar
desean. durante al menos 5 minutos. Medir la absorbancia del patrn y la
muestra frente al reactivo blanco (A).
Los reactivos deben ser utilizados slo para los
propsitos indicados por personal adecuado cualificado CALCULO
de laboratorio bajo condiciones apropiadas de Concentracin de Potasio
laboratorio.
Amuestra
PREPARACION DE LOS REACTIVOS Y ESTABILIDAD mmol/l = x Patrn conc.
Utilizar todas las soluciones sin diluir. Estable hasta la fecha de Apatrn
caducidad cuando se conserva entre +15 y +25C.

PREPARACION DE LOS REACTIVOS Y ESTABILIDAD

DE TRABAJO (R2)
Mezclar partes iguales de las soluciones R2a y R2b para formar
reactivo suficiente para el nmero de muestras a analizar. Estable
durante 30 das entre +15 y +25C y 60 das entre +2 y+8C.

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 MANUAL PT 1600

CONTROL DE CALIDAD
Se recomiendan los Multisueros Ensayados Randox, Nivel 2 y Nivel
3 para el control de calidad diario. Se deber de analizar dos niveles
distintos de controles cada da. Los valores obtenidos debern
encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se
encuentran fuera del rango y su repeticin excluye error, se
debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar programacin del instrumento y la lmpara
2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento
bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los
Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +44 (0) 28 9442 2413.

INTERFERENCIA
La hemlisis interfiere con el anlisis debido al alto contenido de
potasio en las clulas sanguneas rojas, por lo tanto las muestras
se debern separar del cogulo lo antes posible.

VALORES NORMALES(4)
3,5 5,1 mmol/l (13,7 19,9 mg/dl)

Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango

de referencia que refleje la edad, sexo, dieta y localidad
geogrfica de la poblacin.

LINEALIDAD
SA
El mtodo es lineal hasta una concentracin de Potasio de 10
mmol/l. Para muestras con concentraciones superiores diluir 1+2
con NaCl al 0,9% y multiplicar el resultado por 3.
M

REFERENCIAS
1. Hillmann, G., Beyer, G., J. Clin. Chem. and Clin. Biochem.,
AA

1967; 5: 93.
2. Henry, R. J., Clin. Chem., Harper and Row, New York, Sec.
Edit., 1974; 646.
3. Teitz, N. W., Fundamentals of Clinical Chemistry, Saunders,
G

Philadelphia, Sec. Edit., 1976; 876.

4. Teitz, N.W., Textbook of Clinical Chemistry. W.B. Saunders
Company, Philadelphia, 1986; 1842.

Revisado 25 Jan 10 ck
Rev. 001

PAGE 2 OF 2
RANSEL COMPOSICIN DE LOS REACTIVOS ADICIONALES

Glutation Peroxidasa Componentes Concentracin inicial de las Soluciones

SOLO PARA INVESTIGACION
MANUAL
RX MONZA Fosfato Potsico 10,3 mmol/l
Ferricianida Potsica 6.08 mmol/l
PARA SU USO Cianida Potsica 7,68 mmol/l
Para la determinacin cuantitativa in vitro de Glutation Peroxidasa Surfactante 0.1% v/v
en sangre entera. Este producto es adecuado para un uso
manual o en el analizador Rx Monza.
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Unicamente para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca.
Cat. No.
Respetar las precauciones normales necesarias que se requieren
RS 504 R1a. Reactivo 8 x 6,5 ml
al manejar reactivos de laboratorio.
8 x 6,5 ml R1b. Tampn 1 x 70 ml
8 x 6 t Semi micro R2. Hidroperxido 1 x 1 ml
La solucin R1b contiene azida sdica. Evitar su ingestin o
8 x 2 t Macro de cumeno
contacto con la piel y mucosas. En caso de contacto con la piel,
R3. Diluyente 2 x 200 ml
lavar inmediatamente el rea afectada con agua abundante. En
caso de ingestin o contacto con los ojos llamar inmediatamente
RS 505 R1a. Reactivo 8 x 10 ml
8 x 10 ml R1b. Tampn 1 x 100 ml a un mdico.
8 x 10 t Semi micro R2. Hidroperxido 1 x 1 ml
La azida sdica reacciona con el cobre y el plomo de las tuberas,
8 x 4 t Macro de cumeno
lo que podra producir azidas explosivas. Cuando se deseche este
R3. Diluyente 2 x 200 ml
reactivo enjuagar abundantemente con agua para evitar la
Complementario del lote: formacin de estas azidas. Las superficies metlicas que hayan
HG 1539 Hemoglobina Reactivo 5 x 100 ml sido puestas en contacto con la azida sdica deben ser lavadas
con hidrxido sdico al 10%.
METODO UV(1)
Este mtodo est basado en el trabajo de Plagia and Valentine. La
SA
La solucin R2 es nociva, si se traga o inhala, causa irritacin y es
Glutation Peroxidasa (GPX) cataliza la oxidacin del Glutation combustible.
(GSH) por el hidroperxido de cumeno. El Glutation oxidado
(GSSG) en presencia de Glutation Reductasa (GR) Y NADPH es La solucin R2 es Hidroperxido de cumeno que es custico.
M
inmediatamente convertido en su forma reducida con una
oxidacin concomitante de NADPH en NADP+. Se mide la La solucin de Drabkin contiene cianuro por lo que puede ser
AA

disminucin de la absorbancia a fatal si se ingiere.

340 nm.
Hojas informativas sobre Salud y Seguridad estn disponibles si se
PRINCIPIO DE LA REACCION desean.
G

GPX
2GSH + ROOH ROH + GSSG + H2O Los reactivos deben ser utilizados solo para los
GR propsitos indicados por personal adecuado cualificado
GSSG + NADPH + H+ NADP+ + 2GSH de laboratorio bajo condiciones apropiadas de
laboratorio
MUESTRA
Utilizar sangre entera heparinizada. Si la muestra proviene de
oveja o cabra, diluir 0,05 ml con 3 ml de diluyente. Para ganado
vacuno, caballos y otras especies diluir 0,05 ml de muestra con 2
ml de diluyente. Para muestras humanas ver NOTA.

COMPOSICIN DEL REACTIVO

Componentes Concentraciones en la prueba

R1a. Reactivo
Glutation 4 mmol/l
Glutation Reductasa 0,5 U/l
NADPH 0,34 mmol/l
R1b. Tampn
Tampn fosfato 0,05 mol/l, pH 7,2
EDTA 4,3 mmol/l
R2. Hidroperxido de cumeno 0,18 mmol/l
R3. Diluyente

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 MANUAL/ RX MONZA RS 504

ESTABILIDAD Y PREPARACIN DE LOS REACTIVOS PROCEDIMIENTO

R1a. Reactivo Seleccione GPx en la pantalla de Ejecucin de Prueba y llevar a
Reconstituir un vial de Reactivo R1a con el volumen cabo un blanco de agua segn las instrucciones.
apropiado de Tampn R1b:
6,5 ml para el kit de 8 x 6,5 ml (RS 504) Pipetear en tubos de ensayo:
10 ml para el kit de 8 x 10 ml (RS 505)
Estable durante 48 horas entre +4 y +8C u 8 horas Muestra 10 l
entre +15 y +25C. Reactivo R1 500 l
Cumeno R2 40 l
R1b. Tampn
Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad Mzclelo y asprelo en Rx Monza.
cuando se conserva entre +2 y +8C.
CALIBRACIN DE RX MONZA
R2. Hidroperxido de cumeno Se recomienda diariamente o como se indica en los
Diluir 10 Hl R2 con 10 ml de agua bidestilada y mezclar procedimientos de control de calidad, usando Control Randox
bien, agitando vigorosamente, ya que el cumeno es difcil Ransel
de disolver. Debe utilizarse solucin fresca preparada en
el da. Concentrado es estable hasta la fecha de caducidad PARA USO MANUAL
cuando se conserva entre +2 y +8C. Para medir el
volumen de hidroperxido de cumeno se deber utilizar Longitud de onda: 340 nm
una pipeta con accin de desplazamiento positiva, y Cubeta: 1 cm de espesor
capilares de cristal. Temperatura: 37C
Medicin: frente al aire
R3. Diluyente
Reconstituir el contenido de un vial de Diluyente R3 con Pipette into cuvette:
200 ml de agua bidestilada. Estable durante
4 semanas cuando se conserva entre +2 y +8C Macro Semi-Micro
3 das entre +15 y +25C.
SA Muestra Blanco de Muestra Blanco de
MATERIALES SUMINISTRADOS diluida Reactivo diluida Reactivo
Reactivo
Tampn Muestra diluida 0.05 ml --- 0.02 ml ---
M
Hidroperxido de cumeno H2O destilada --- 0.05 ml --- 0.02 ml
Reactivo para diluir Reactivo R1 2.50 ml 2.50 ml 1.00 ml 1.00 ml
Cumeno R2 0.10 ml 0.10 ml 0.04 ml 0.04 ml
AA

MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS

Control de Ransel (Cat. No. SC 692) Mezclar la muestra, R1 y R2. Leer la absorbancia inicial de la
Agua bidestilada muestra y blanco de reactivo despus de un minuto y al mismo
Reactivo Hemoglobina (Cat. No. HG 1539) tiempo iniciar el temporizador. Leer otra vez pasados 1 y 2
G

Diluyente Ransel (RS 2318) minutos. Restar el valor del blanco de reactivo al de la muestra.

NOTAS(2,3) MANUAL CALCULOS

Cuando se utiliza sangre entera heparinizada humana, se
recomienda el uso de reactivo de Hemoglobina para la dilucin.
Esto es debido a que la presencia de peroxidasas en sangre
humana puede conducir a falsos resultados (ms elevados). La
adicin de cianuro, sirve para inhibir esta interferencia positiva.
De todas formas, antes de aadir el reactivo de Hemoglobina, es
necesaria la dilucin de la sangre con la solucin de diluyente 4,
para convertir la glutation en su forma reducida. La forma
oxidada sera rpidamente inhibida por el cianuro. Se
recomienda el siguiente mtodo utilizando reactivo de
Hemoglobina.
Preparacin: Diluir el contenido de un vial de reactivo de
Drabkin con 480 ml de agua bidestilada. Conservar protegido de
la luz. Estable durante 6 meses o hasta la fecha de caducidad,
segn sea ms corto, cuando se conserva entre +15 y +25C.
Diluir 0,05 ml de sangre entera heparinizada en 1 ml de solucin
de diluyente (R3); incubar durante 5 min. y aadir
1 ml de reactivo de Hemoglobina. Mezclar bien y ensayar en la
forma normal. Se recomienda que las muestras sean analizadas en
los 20 min despus de la adicin del reactivo de Hemoglobina.
La concentracin de Glutation Peroxidasa puede calcularse a
partir de la siguiente frmula:
U/l de hemolisado = 8412 x A 340 nm/minuto
(Ver instrucciones tcnicas)
CONTROL DE CALIDAD
Se recomiendan un control de Ransel para el control de calidad
diario. Este control debera procesarse como mnimo una vez al
da. Los valores obtenidos debern encontrarse dentro del rango
especificado. Si los valores se encuentran fuera del rango y su
repeticin excluye error, se debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar la programacin del instrumento y la lmpara
2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento bacteriano
puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los
Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28 94422413.

PAGE 2 OF 2
 MANUAL/ RX MONZA RS 504

VALORES NORMALES
27,5 - 73,6 U/g Hb
4171 - 10881 U/l

Este rango se tom de una poblacin trabajadora Europea. Se

recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango
normal.

CARACTERSITCAS ESPECFICAS DE
FUNCIONAMIENTO DE LA TCNICA
Los siguientes datos se obtuvieron usando un analizador RX
Monza en el modo de flujo de clulas a 37C con un volumen de
aspiracin de 450 l.

LINEALIDAD
El mtodo es lineal hasta una concentracin de 925 U/l. Diluir las
muestras con una concentration mayor con el agente diluyendo y
multiplicar el resultado por el factor de dilucin

SENSIBILIDAD
La concentracin mnima detectable de la peroxidasa de
glutacin con un nivel aceptable de precisin ha sido
determinado como 75 U/l

PRECISION

Precisin Dentro del Anlisis

Nivel 1 Nivel 2 SA
Media (U/l) 240 456
DE 11.7 14.6
CV(%) 4.86 3.20
n 20 20
M

Precisin Total
Nivel 1 Nivel 2
AA

Media (U/l) 240 456

DE 17.5 19.9
CV(%) 7.30 4.37
n 20 20
G

CORRELACION
Este mtodo Randox (Y) se compar con otro mtodo
disponible en el mercado (X). Se analizaron 40 muestras de
pacientes con valores de entre 102 y 650 U/l. Se obtuvo la
siguiente ecuacin de regresin lineal:

Y= 1.0155 X +8.637

con un coeficiente de correlacin r = 0,9829

REFERENCIAS
1. Paglia, D.E. and Valentine, W.N., J. Lab. Clin. Med., 1967; 70:
158.
2. Kraus, R.J. & Ganther, H. E. Biochem. & Biophys. Res. Comm
1980; 96: 1116.
3. Prohaska, J.R., Oh, S.H., Hoekstra, W.G. & Ganther, H.E.
Biochem. & Biophys. Res. Comm. 1977; 74: 64.

Revisado 20 Sep 10 bm
Rev. 001

PAGE 3 OF 3
RANSOD COMPOSICIN DEL REACTIVO

Superoxido Dismutasa Componentes Concentraciones iniciales de las Soluciones

MANUAL
RX MONZA R1a. Sustrato mixto
Xantina 0,05 mmol/l
PARA SU USO I.N.T. 0,025 mmol/l
Para la determinacin cuantitativa in vitro de Superoxido Dismutasa R1b. Tampn
en sangre entera. Este producto es adecuado para un uso manual CAPS 40 mmol/l, pH 10,2
o en el analizador Rx Monza. EDTA 0,94 mmol/l
R2. Xantn Oxidasa 80 U/l
No. Cat. CAL Patrn Vedi inserto lotto specifico
SD 125 R1a. Sustrato Mixto 5 x 20 ml
5 x 20 ml R1b. Tampn 1 x 105 ml
R2. Xantin Oxidasa 3 x 10 ml PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
CAL Patrn 5 x 10 ml Unicamente para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca.
Respetar las precauciones normales necesarias, que se requieren
PRINCIPIO al manejar reactivos de laboratorio.
La funcin de la superxido dismutasa (SOD) es acelerar la
dismutacin de un radical txico, el radical superxido (O2.), Hojas informativas sobre Salud y Seguridad estn disponibles si se
producido durante un proceso oxidativo enrgico, en perxido desean.
de hidrgeno y oxgeno molecular.
Este mtodo emplea Xantina y Xantin oxidasa (XOD) para Los reactivos deben ser utilizados solo para los
formar radicales superxido, los cuales reaccionan con cloruro propsitos indicados por personal adecuado cualificado
de 2-(4-yodofenil)-3-(4-nitrofenol)-5-fenil tetrazolio (I.N.T) para de laboratorio bajo condiciones apropiadas de
formar un colorante formazn rojo. Se mide la actividad de la laboratorio
superxido dismutasa por el grado de inhibicin de esta
reaccin. Una unidad de SOD es la que causa un 50% de ESTABILIDAD Y PREPARACIN DE LOS REACTIVOS
inhibicin del valor de reduccin de INT bajo las condiciones del R1a. Sustrato Mixto
SA
anlisis. Reconstituir un vial de Sustrato Mixto R1a con
20 ml de Tampn R1b. Es estable durante 10 das
XOD cuando se conserva entre +2 y +8C.
M

Xantina Acido rico + O2-.

R1b. Tampn
O2. Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad
AA

I.N.T colorante formazn cuando se conserva entre +2 y +8C.

O R2. Xantn Oxidasa

Reconstituir el contenido de un vial de Xantn Oxidasa
G

SOD
O2. + O2 + 2H+ O2 + H2O2 R2 con 10 ml de agua bidestilada. Estable durante 2
semanas cuando se conserva entre +2 y +8C.
PREPARACION DE LA MUESTRA
Utilizar muestras de sangre entera heparinizada o con EDTA. Se CAL Patrones
recomienda lavar los eritrocitos 4 veces con una solucin de Reconstituir el contenido de un vial de Patrn (CAL)
NaCl al 0,9%. con 10 ml de agua bidestilada. Posteriormente las
diluciones de este patrn deben ser preparadas con
Centrifugar 0,5 ml de sangre entera durante 10 min a 3000 rpm. muestra diluyente Ransod. Se recomienda hacer las
Despus aspirar el plasma. siguientes diluciones del patrn CAL (o S6) para
Despus lavar los eritrocitos 4 veces con 3 ml de solucin de construir la curva patrn:
NaCl al 0,9 %, centrifugando durante 10 min a 3000 rpm despus
de cada lavado. R1 = Sustrato Mixto
R2 = Xantin Oxidasa
El centrifugado lavado de eritrocitos deber completarse con
2,0 ml de agua bidestilada fra. Mezclar y dejar reposar durante Es recomendable que todos los reactivos y muestras
15 min a 4C. El lisado se diluye con 0,01 mol/l de Tampn estn equilibrados a temperatura ambiente antes de su
Fosfato pH 7,0, de forma que el porcentaje de inhibicin caiga uso.
entre el 30 y el 60%.
MATERIALES SUMINISTRADOS
Para muestras humanas se recomienda 25 partes de dilucin de Sustrato mixto
lisado (Factor de dilucin final = 100) y para muestras de bovinos Tampn
50 partes (Factor de dilucin final = 200). Xantn Oxidasa
Patrones

MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS

Diluyente Ransod (No. Cat. SD 124) (0,01 mol/l Tampn Fosfato,
pH 7,0).
Control de RANSOD No. Cat. SD 126.

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 MANUAL SD 125

PROCEDIMIENTO CALCULOS
Seleccionar SOD en la pantalla Run Test (Realizar anlisis), y A2 - A1
llevar a cabo un blanco de agua de la forma indicada. = A/min de patrn o de muestra
3
Pipetear en la Cubeta:
Patrn Patrn Pruebas Control Indice de muestra diluyente (Indice S1) =Indice de reaccin sin
S1 S2 TO S6 inhibir = 100%

Diluente Prueba Ransod 15 l - - - Todos los indices tanto de los patrones como de las muestras
Patrn - 15 l - - diluidas deben ser convertidos en porcentajes del indice del
Diluir la prueba - - 15 l - diluyente de muestra y sustraidos del 100% para obtener un
Diluir el control - - - 15 l porcentaje de inhibicin:
Sustrato Mixto (R1) 500 l 500 l 500 l 500 l
(Apatrn/min x 100)
Mezclar bien y aadir 100 - = % inhibicin
(AS1/min)
Xantin Oxidasa (R2) 75 l 75 l 75 l 75 l
(Amuestra/min x 100)
Mezclar bien, introducir la cubeta en el soporto de la celda de la 100 - = % inhibicin
Rx Monza y pulsar Read (leer). (AS1/min)

CALIBRACIN Representar el porcentaje de inhibicin para cada patrn frente a

Calibrar esta prueba usando el patrn proporcionado con el Kit. Log10 (concentracin de patrn en unidades SOD/ml).
Se recomienda que las siguientes diluciones estn realizadas con
el patrn Cal ( S6) para producir una curva estndar:- Utilizar el porcentaje de inhibicin de la muestra para obtener las
unidades de SOD de la curva patrn.
Patrn Volumen de
solucin patrn Diluente Prueba Unidades de SOD/ml de sangre entera =
Unidades de SOD en la curva patrn/ml x factor de dilucin
SA
S6 Patrn no diluido -
S5 5 ml of S6 5 ml Conversin a unidades de SOD/g de Hemoglobina
S4 5 ml of S5 5 ml
M

S3 5 ml of S4 5 ml Unid.SOD/ml
S2 3 ml of S3 6 ml = Unidades de SOD/g de Hemoglobina
g Hemoglobina/ml
AA

S1= Diluente Prueba (0,01 mol fosfato tampn pH 7,0)

Todos los patrones diluidos se mantienen estables durante dos ILUSTRACION
semanas entre +2 y +8C. (a) Una muestra de bovino diluida 1 en 300 veces con diluyente
de muestra Ransod produjo una inhibicin del 33%.
G

Se requiere una nueva calibracin para cada anlisis.

Desde la curva patrn:
PARA USO MANUAL
No de unidades SOD en la muestra = 0,575
Longitud de onda: 505 nm
Cubeta: 1 cm de espesor (b) Conversin en unidades de SOD/ml de sangre entera
Temperatura: 37C
Medicin: frente al aire 0,575 x 300 = 172,5 unidades de SOD/ml

Pipetear en la cubeta: (c) Conversin en unidades de SOD/g hemoglobina

Muestra Patrones Muestra Valor de muestra de hemoglobina = 0,118 g/ml

Diluyente S2 - S6 diluida
172,5
Muestra diluida --- --- 0,05 ml (Unid. SOD/ml)/(g hemoglobina/ml) = = 1461,9
Patrn --- 0,05 ml --- 0,118
Diluyente de Muestra
Ransod 0,05 ml --- ---
Sustrato Mixto (R1) 1,7 ml 1,7 ml 1,7 ml

Mezclar bien

Xantina Oxidasa (R2) 0,25 ml 0,25 ml 0,25 ml

Mezclar y leer la absorbancia inicial A1 al cabo de

30 segundos y empezar a cronometrar el tiempo
simultaneamente. Leer la absorbancia final A2 al cabo de
3 minutos.

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 MANUAL SD 125

CONTROL DE CALIDAD REFERENCIAS

Se recomiendan un control Ransod, para el control de calidad 1. Woolliams JA, Wiener G, Anderson PH, McMurray
diario. Analizar el control al menos una vez al da. Los valores CH Research in Veterinary Science 1983, 34: 253-256.
obtenidos debern encontrarse dentro del rango especificado. Si los 2. Suttle NF, The Veterinary Record 1986, 119: 519-522.
valores se encuentran fuera del rango y su repeticin excluye error, 3. Suttle NF, McMurray CH Research in Veterinary Science
se debern seguir los siguientes pasos: 1983; 35: 47-52.
1. Comprobar programacin del instrumento y la lmpara. 4. Arthur JR, Boyne R Life Sciences 1985 36: 1569-1575.
2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento
bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin.
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los
Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28 94422413.

VALORES NORMALES
1102 - 1601 U/g Hb
164 - 240 U/ml

Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango

de referencia que refleje la edad, sexo, dieta y localidad
geogrfica de la poblacin.

CARACTERSITCAS ESPECFICAS DE
FUNCIONAMIENTO DE LA TCNICA
Se obtuvieron los siguientes datos de rendimiento mediante un
analizador Rx Monza en funcionamiento a 37C.

LINEALIDAD
SA
Las muestras deben ser diluidas para conseguir una inhibicin
entre el 30% y el 60% del porcentaje del diluyente de la muestra
(por ej. la reaccin no inhibida).
M

SENSIBILIDAD
La concentracin mnima detectable de SOD inferior a la
AA

estndar debe ser relatada como <S1 valor estndar.

PRECISION
G

Precisin Dentro del Anlisis

Nivel 1 Nivel 2
Media 101.0 131.5
DE 4.88 4.30
CV(%) 4.64 3.58
n 20 20

Precisin Entre Anlisis

Nivel 1 Nivel 2
Media 101.0 131.5
DE 6.27 8.50
CV(%) 5.96 7.07
n 20 20

CORRELACIN
Este mtodo (Y) se compar con otro mtodo comercial
disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
lineal:

Y = 0.9417 X + 0.1004
y un coeficiente de correlacin r = 0,965

Se analizaron 41 muestras de pacientes con valores de entre 23-

318U/ml.

Revisado 15 Sep 10 bm
Rev. 001

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HIERRO SERICO (Fe) Los reactivos deben ser utilizados slo para los
propsitos indicados por personal adecuado cualificado
Mtodo colorimtrico de laboratorio bajo condiciones apropiadas de
MANUAL laboratorio.
RX MONZA
ESTABILIDAD Y PREPARACION DE LOS
PARA SU USO
REACTIVOS
La determinacin cuantitativa in vitro de hierro en suero. Este
producto es adecuado para un uso manual o en el analizador Rx R2. Reductor
Monza. Disolver el contenido de un vial de Reductor R2 con
15 ml de agua desionizada libre de hierro. Estable durante 4
No. Cat. semanas entre +4 y +8oC.
SI 257 R1. Cromgeno 1 x 10 ml
2 x 100 ml R2. Reductor 1 x 15 ml El resto de los componentes estn listos para usar. Estables
R3. Tampn 2 x 100 ml hasta la fecha de caducidad cuando se conservan entre +15
CAL Patrn 1 x 10 ml y +25oC.

SIGNIFICADO CLINICO MATERIALES SUMINISTRADOS

Medidas de hierro (no hemo) se utilizan en el diagnstico y Cromgeno
tratamiento de enfermedades como la anemia por deficiencia de Reductor
hierro, hemocromatosis (una enfermedad asociada con el Tampn
depsito generalizado en los tejidos de dos pigmentos que Patrn
contienen hierro, de hemosiderina y de hemofuscin, y se
caracteriza por la pigmentacin de la piel), y la enfermedad renal MATERIALES NECESARIOS PERO NO
crnica. SUMINISTRADOS
Multisueros Valorados Humanos Randox Nivel 2 (No. Cat. HN
PRINCIPIO(1,2,3)
El ion frrico se disocia de su protena transportadora, 1530) y Nivel 3 (No. Cat. HE 1532).
transferrina, en medio cido y se reduce simult-neamente a su Sueros de Calibracin Randox Nivel 3 (Cat. No. CAL 2351)
forma ferrosa. Este ion ferroso forma un complejo con el
cromgeno, el cual es un indicador sensible al hierro, para NOTAS SOBRE EL PROCEDIMIENTO
formar un cromforo azul con un mximo de absorcin a 595 Es esencial que todos los aparatos utilizados en la recogida de las
SA
nm. muestras y en la prueba estn libres de contaminacin con
trazas de hierro.
MUESTRA
Suero. Para que los recipientes de cristal queden libres de hierro deben
M

No utilizar plasma en este ensayo. lavarse con cido clorhdrico diluido (aproximadamente 0,1 N) y
enjuagarse abundantemente con agua desionizada libre de
COMPOSICIN DEL REACTIVO hierro.
AA

No usar plasma en este anlisis.

Componentes Concentracin inicial de las soluciones
PROCEDIMIENTO
R1. Cromgeno Usando fresco ddH2O realizar una nueva calibracin de ganancia
G

Ferene 22.2 mmol/l en el modo de cubeta. Seleccione Fe en la pantalla de Ejecucin

R2. Reductor
de prueba y llevar a cabo un blanco de agua segn las
Acido ascrbico 1.3 mol/l
R3. Tampn instrucciones.
Tampn acetato 0.087 mol/l, pH 4.65
Dimetil sulfxido Pipetear en la Cubeta:
Surfactante
CAL Patrn Vedi inserto lotto-specifico Reactivo Blanco / S0 Patrn S1 Muestra

Puffer 500 l 500 l 500 l

PRECAUCIONES DE SEGURIDAD Reductor 25 l 25 l 25 l
Slo para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca. Respetar Agua libre de hierro 125 l - -
las precauciones normales necesarias, que se requieren al Patrn - 125 l -
manejar reactivos de laboratorio. Muestra - - 125 l
El Tampn R3 contiene Azida Sdica. Evitar su ingestin o el Mezclar, insertar la cubeta en el soporte de flujo de clula del
contacto con la piel o las membranas mucosas. En caso de RX Monza cuando se le pida para muestra en blanco y oprima
contacto con la piel, lavar la zona afectada con abundante agua. Leer.
En caso de contacto con los ojos o ingestin, buscar atencin
mdica inmediatamente. Cromgeno 25 l 25 l 25 l
La Azida Sdica reacciona con el plomo y cobre de las caeras,
formando cidos potencialmente explosivos. Cuando se eliminen Mezclar, incubar durante 15 minutos a 20-25 C. Inserte la cubeta
dichos reactivos, limpiar con grandes volmenes de agua para en el soporte de flujo de clula RX Monza cuando se le solicite
evitar la formacin de cidos. Las superficies metlicas para la muestra y presione leer.
expuestas, debern limpiarse con hidrxido de sodio al 10%.
CALIBRACIN PARA RX MONZA
El Tampn contiene tambin dimetil sulfxido que es nocivo. Recomendado en un cambio de lote del reactivo o como se
Evitar el contacto con la piel y los ojos. indica en los procedimientos de control de calidad, utilizando el
CAL estndar proporcionado en el kit o Suero de calibracin
Hojas Sanitarias y de Seguridad estn disponibles si se desean. Randox Nivel 3.

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 MANUAL SI 257

PARA USO MANUAL VALORES NORMALES EN SUERO(4)

Adulto Hombre: 10.6 - 28.3 mol/l (59 - 158 g/dl)
Longitud de onda: 595 nm (590 nm - 610 nm) Mujer: 6.6 - 26 mol/l (37 - 145 g/dl)
Cubeta: 1 cm de espesor
Temperatura: 20-25oC
Medicin: frente a reactivo blanco Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango
de referencia para considerar las differencias en edad, sexo,
PROCEDIMIENTO MACRO dieta y localizacin geogrfica.

Pipetear en la cubeta: CARACTERSITCAS ESPECFICAS DE

FUNCIONAMIENTO DE LA TCNICA
Reactivo Muestra Patrn
Blanco Se obtuvieron los siguientes datos de rendimiento mediante un
analizador Rx Monza en funcionamiento a 25oC.
Tampn 2,0 ml 2,0 ml 2,0 ml
Reductor 0,1 ml 0,1 ml 0,1 ml LINEALIDAD
Agua libre de hierro 0,5 ml - - El mtodo es lineal hasta una concentracin de 152 mol/l
Patrn - - 0,5 ml (854 g/dl). Las muestras con concentraciones superiores se
Muestra - 0,5 ml -
debern diluir 1+2 con agua desionizada, y repetir la prueba.
Mezclar, leer la absorbancia inicial de la muestra y del patrn Multiplicar el resultado por 3.
frente a reactivo blanco.
SENSITIVITY
Cromgeno 0,1 ml 0,1 ml 0,1 ml The minimum detectable concentration of Serum Iron with an
acceptable level of precision was determined as 0.964 mol/l
Mezclar, incubar durante 5 min entre 20-25oC. Leer la
absorbancia final frente a reactivo blanco. Restar la absorbancia (5.39 g/dl).
inicial de la absorbancia final para obtener el A del patrn y de
la muestra. PRECISION
PROCEDIMIENTO SEMI-MICRO Anlisis (Intra)
Pipetear en la cubeta: Nivel 2 Nivel 3
Media (g/dl) 104 196
SA
Reactivo Muestra Patrn DE 1.77 3.96
Blanco CV(%) 1.70 2.02
n 20 20
Tampn 1,00 ml 1,00 ml 1,00 ml
M

Reductor 0,05 ml 0,05 ml 0,05 ml

Agua libre de hierro 0,25 ml - - Anlisis (Inter)
Patrn - - 0,25 ml Nivel 2 Nivel 3
AA

Muestra - 0,25 ml - Media (g/dl) 104 196

DE 3.49 6.26
Mezclar, leer la absorbancia inicial de la muestra y del patrn CV(%) 3.35 3.20
frente a reactivo blanco. n 20 20
G

Cromgeno 0,05 ml 0,05 ml 0,05 ml

Mezclar, incubar durante 15 min entre 20-25oC. Lea la
absorbancia final contra el blanco de reactivo.
A = Absorbancia Final - Absorbancia Inicial
CALCULOS
Amuestra
Concentracin = x Conc. de patrn
A patrn
NORMALIZACIN
Suero de Calibracin Randox Nivel 3 es trazable al material de
de referencia NIST 937 Suero Hierro.
CONTROL DE CALIDAD
Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel
3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de
controles al menos una vez al da. Los valores obtenidos debern
encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se
encuentran fuera del rango y su repeticin excluye error, se
debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar programacin del instrumento y la lmpara
2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento
bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de
los Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28
94422413.
CORRELACIN
Este mtodo (Y) se compar con otro mtodo comercial
disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
lineal:
Y = 0.902 X + 1.92
y un coeficiente de correlacin r = 0,9995
Se analizaron 45 muestras de pacientes con valores de entre
10.23 y 599.01 g/dl.
REFERENCIAS
1. Ceriotti, F., and Ceriotti, G., Improved Direct Specific
Determination of Serum Iron. Clin. Chem. 26/2, 327-331
(1980).
2. Henry, R.J.: Clinical Chemistry Principles and Techniques,
New York, Harper and Row (1968) pg. 386.
3. Young, D.S., Hicks, J.M., Method for automatic
determination of serum iron, J. Clin. Pathol. 18: 98 - 102
(1965).
4. Weippl, G. et al. (1973). Blut 27:261.
Revisado 16 Sep 10 bm
Rev. 001

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SIFILIS RPR (SYP-RPR)
TEST RAPIDO DE TARJETA DE REAGINA PLASMATICA COMPOSICIN DEL REACTIVO
MANUAL Suspensin de Antgeno de RPR
1. Suspensin de cardiolipina, que contiene carbono
PARA SU USO microparticulado. Contiene timerosal.
Para el anlisis cuantitativo in vitro de Sfilis en suero y
plasma. Este producto es adecuado para uso Manual. 2. Suero de Control Positivo (Dispensador Rojo)
Control lquido estabilizado, reactivo con antgeno de
No. Cat. RPR.
SY 1478 1. Suspensin de Antgeno 3. Suero de Control Negativo (Dispensador Blanco)
100 pruebas de Carbono RPR 1 x 2 ml Control lquido estabilizado, no reactivo con antgeno
2. Control Positivo 1 x 0.5 ml de RPR.
3. Control Negativo 1 x 0.5 ml
4. Botella dispensadora de plstico 1
5. Aguja Dispensadora PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
calibrada para suministrar 16 l 1 Slo para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca.
6. Tarjetas de Pruebas Desechables 10 Ejecutar las precauciones normales requeridas para el
7. Pipeta Desechable 100 manejo de reactivos de laboratorio.

SY 1479 1. Suspensin de Antgeno
500 pruebas de Carbono RPR
2. Control Positivo
3. Control Negativo
4. Botella dispensadora de plstico
5. Aguja Dispensadora
calibrada para suministrar 16 l
6. Tarjetas de Pruebas Desechables
7. Pipeta Desechable
Se pueden solicitar otras variaciones de los formatos arriba
indicados.
Los controles contienen Azida Sdica. Evitar su ingestin o
2 x 5 ml el contacto con la piel o las membranas mucosas. En caso
1 x 1 ml de contacto con la piel, lavar la zona afectada con
1 x 1 ml abundante agua. En caso de contacto con los ojos o
1 ingestin, buscar atencin mdica inmediatamente.
1 El Azida Sdica reacciona con el plomo y cobre de las
SA
50 caeras, formando cidos potencialmente explosivos.
500 Cuando se eliminen dichos reactivos, limpiar con grandes
volmenes de agua para evitar la formacin de cidos. Las
superficies metlicas expuestas, debern limpiarse con
M
hidrxido de sodio al 10%.

El material de origen humano del que se deriva este

AA

INTRODUCCIN
La Sfilis es una enfermedad crnica, contagiosa y a
menudo venrea congnita producida por el Treponema
pallidum. Este organismo pertenece a un grupo de
bacterias gram-negativas llamadas Espiroquetas, las
G
producto ha sido analizado a nivel de donante para el
anticuerpo del Virus de Inmunodeficiencia Humano (HIV 1,
HIV 2), el Antgeno de Superficie de Hepatitis B (HbsAg), y
el anticuerpo del Virus de Hepatitis C (HCV) y se ha

cuales se definen por su estructura molecular nica. La
infeccin resulta del contacto con superficies hmedas,
resultantes de lesiones del tejido epitelial de la piel o las
membranas mucosas. Si no se trata, esta enfermedad
puede resultar en cambios irreversibles del sistema
nervioso y cardiovascular. La sfilis continua siendo una
enfermedad de alta incidencia, a pesar de los avances en
la terapia antibitica moderna.
PRINCIPIO
La prueba de Sfilis RPR es una prueba macroscpica de
floculacin no treponmica para la deteccin y titracin de
reaginas (anticuerpos en circulacin producidos como
resultado de la lesin del tejido causada por la enfermedad)
en el suero o el plasma. El antgeno utilizado en el kit es
una modificacin del antgeno de VDRL. Consiste en una
suspensin coloidal de cardiolipina equilibrada con licitina
y colesterol, y mezclada con carbono microparticulado. La
aglutinacin ocurre en presencia de las reaginas, la cual es
visiblemente intensificada por la presencia del carbono
microparticulado.
MUESTRAS
Se puede utilizar plasma, suero calentado o sin calentar.
Las muestras hemolizadas o contaminadas no son
adecuadas para el test. Las muestras de suero fresco se
pueden conservar entre +2 y +8C durante varios das
antes del anlisis o a -20C si se conservan durante ms
tiempo.
encontrado que es NO-REACTIVO. Los mtodos utilizadon
estn aprobados por el FDA.
Sin embargo, dado que ningn mtodo puede ofrecer una
seguridad total de la ausencia de agentes infecciosos, este
material y todas las muestras de pacientes se debern
manejar como posibles transmisores de enfermedades
infecciosas y eliminar apropiadamente.
Hojas Sanitarias y de Seguridad estn disponibles si se
desean.
Los reactivos deben ser utilizados slo para los
propsitos indicados por personal adecuado
cualificado de laboratorio bajo condiciones apropiadas
de laboratorio.
ESTABILIDAD Y PREPARACION DE LOS REACTIVOS
Sacar la caja que contiene la suspensin de antgeno de
R.P.R. y los controles sricos y refrigerarla a su llegada. El
antgeno de RPR y el control srico son estables hasta la
fecha de caducidad cuando se conservan entre
+2 y +8C. No guardar las tarjetas de la prueba en el
refrigerador, conservarlas a temperatura ambiente. No
tocar los crculos de la prueba con los dedos ya que esto
podra dejar restos aceitosos en el area de reaccin
aumentando la probabilidad de resultados del test
invlidos.
 MANUAL - SIFILIS (RPR) - SY 1478

MATERIAL SUMINISTRADO B. PRUEBA CUANTITATIVA

Suspensin de Antgeno de Carbono RPR
Control Positivo
Control Negativo
Botella Dispensadora de Plstico
Aguja Dispensadora Calibrada para suministrar 16 Hl
Tarjetas de Test Desechables
Pipeta Desechable
MATERIALES NECESARIOS PERO NO
SUMINISTRADOS
1. Rotor mecnico con etapa horizontal, operando a
100 r.p.m.
2. Pipeta automtica calibrada para suministrar 50 l. Es
necesaria para la prueba cuantitativa.
PREPARACIN DE LOS REACTIVOS
Todos los reactivos estn listos para su uso despus de
alcanzar una temperatura ambiente (NOTA 1). Agitar la
suspensin de antgeno para obtener una suspensin
homognea y transferir el contenido a la botella
dispensadora de plstico suministrada. Para ello, quitar la
tapa de la botella de plstico y colocar la aguja
dispensadora en el tapn de cierre-luer. Con cuidado
apretar la botella de plstico e insertar la punta de la aguja
en la suspensin de antgeno. Dejar que la botella se
expanda lentamente para que la suspensin de antgeno
entre en la botella (NOTA 2).
M
1. Utilizando una pipeta automtica dispensar 50 l de
salino fisiolgico en los crculos del 1 al 5 de la tarjeta
de la prueba. No extender.
2. Utilizando una pipeta dispensar 50 l de la muestra
(suero o plasma) que se va a valorar en el salino del
primer crculo. (Ver Figura. 1)
3. Utilizando el mismo final de la pipeta mezclar el salino y
la muestra moviendo la mezcla hacia arriba y abajo 5 o
6 veces y transferir 50 l al salino en el segundo
crculo.
4. Realizar de la misma manera diluciones en serie hasta
el ultimo crculo. Quitar 50 l del crculo final. (Ver
Figura 2)
5. Utilizando el extremo plano de una pipeta desechable
limpia para cada muestra, extender las muestras
diludas por toda el area de cada crculo de la prueba
empezando por la dilucin ms alta. (No. de Crculo 5).
6. Proceder como en la prueba cualitativa a partir del
paso 4 en adelante.
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS
El ltimo paso de dilucin que contiene agregados
macroscpicos indica el titre de la muestra. Si la ltima
dilucin da un resultado positivo, entonces las series de
SA
dilucin se debern extender.
Cada grupo de resultados se deber realizar con los
controles positivos y negativos suministrados para validar

PROCEDIMIENTO de la prueba.
AA

A. PRUEBA CUALITATIVA LIMITACIONES DE LA PRUEBA

1. Utilizando una pipeta desechable, dispensar una gota Al igual que todos los test no treponmicos, el test de sfilis
( 50 l) de suero o plasma en el crculo de la tarjeta RPR puede dar resultados positivos falsos. Tales
de la prueba. reacciones han sido producidas por enfermedades tales
G

2. Con la parte plana de una pipeta desechable, extender como lepra, mononucleosis infecciosa y enfermedades
la muestra por toda el rea del crculo de la prueba. autoinmunes. Por lo tanto, es importante que todas las
3. Repetir los pasos 1 y 2 para cada muestra utilizando muestras reactivas sean confirmadas por otro test
una pipeta nueva. serolgico, preferiblemente un test especfico del
4. Agitar el ensamblaje de la botella dispensadora, invertir treponema tal como FTA-ABS o TPHA. El diagnstico final
y golpear suavemente la aguja para sacar las burbujas. se deber basar en una correlacin de los resultados del
5. Poner la aguja en posicin perpendicular a la tarjeta de test con el historial clnico del paciente.
test y dejar que caiga una gota de antgeno en cada
muestra de la prueba. La prueba se puede utilizar tambin para observar la terapia.
6. Rotar la tarjeta de test a 100 r.p.m. durante 8 minutos
en un rotor mecnico. Tras la rotacin mecnica es
necesario rotar e inclinar la tarjeta brevemente a mano NOTAS
(de un lado para otro), para ayudar a diferenciar entre 1. La sensibilidad puede verse reducida a temperaturas
los resultados reactivos y los no reactivos. bajas. Los mejores resultados se obtienen entre
7. Despus leer inmediatamente los resultados en el 23-29C.
macroscopio con buena luz. 2. La estabilidad a largo plazo del producto se ve reducida
cuando el antgeno se conserva en la botella
dispensadora de plstico. Por lo tanto, se recomienda
LECTURA E INTERPRETACIN que el antgeno restante se devuelva a la botella de
Las lecturas se puntuan segn el criterio siguiente: cristal original despus del anlisis del da. La botella
de plstico y el ensamblaje de la aguja se debern
PATRN OBSERVADO INTERPRETACIN aclarar muy bien con agua destilada y secar al aire
Agregados grandes en el centro REACTIVO antes de usar.
periferia del area del test 3. No volver a utilizar las tarjetas de test. Las tarjetas se
Agregados ms pequeos en REACTIVO DEBIL pueden secar al aire y archivar como documentos de
los ejes del area del test los resultados permanentes.
o
Sin agregados, apariencia gris NO REACTIVO
suave

PAG 2 DE 3
REFERENCIAS
1. McGrew, B.E. et al., Amer. J. Clin. Path., 1968; 50: 52.
2. Portnoy, J. et al., U.S. Publ. Health Report, 1962; 77:
645.
3. Stevens, R.W. & Stroebel, E., Amer. J. Clin. Path.,
1970; 53: 32.
4. Manual of Tests for Syphilis PHS Publications, No. 411,
U.S. Govt. Printing Office.

Figura. 1

SA
Diluciones
M
AA
G

Revisado 31 Julio 06 ne
Rev. 001

PAG 3 DE 3
PROTEINAS TOTALES ESTABILIDAD Y PREPARACIN DE LOS REACTIVOS
R1. Reactivo Biuret
(TP) Diluir el contenido de una botella R1 con 400 ml de agua
bidestilada, enjuagando la botella a fondo. Es estable un
Mtodo Biuret
MANUAL ao cuando se conserva hermticamente cerrado entre +2
RX MONZA y +25C.

PARA SU USO R2. Reactivo Blanco

Para la determinacin cuantitativa in vitro de Proteinas Totales en Diluir el contenido de una botella R2 con 400 ml de agua
suero y plasma. Este producto es adecuado para su utilizacin de bidestilada, enjuagando la botella a fondo. Es estable un
forma manual y en el analizador RX monza. ao cuando se conserva hermticamente cerrado entre +2
y +25C.
No. Cat.
TP 245 R1. Reactivo Biuret 2 x 100 ml
2 x 500 ml R2. Reactivo blanco 1 x 100 ml CAL. Patrn
CAL. Patrn 1 x 5.5 ml Listo para usar. Es estable hasta la fecha de caducidad
cuando se conserva entre +2 y +25C.
PRINCIPIO
En medio alcalino, los iones cpricos, interaccionan con los MATERIALES SUMINISTRADOS
enlaces peptdicos de las proteinas formando un complejo Reactivo Biuret
coloreado. Reactivo Blanco
MUESTRA Patrn
Suero, plasma heparinizado, EDTA plasma.
MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS
COMPOSICIN DEL REACTIVO Multisuero Valorado Randox Nivel 2 (No. Cat. HN1530) y Nivel
3 (No. Cat. HE 1532)
Componentes Concentraciones de las soluciones Sueros de Calibracin Randox Nivel 3 (Cat. No. CAL 2351)

R1. Reactivo Biuret NOTAS

SA
Hidrxido sdico 100 mmol/l Si la lectura no puede llevarse a cabo a Hg 546 nm, debe
Tartrato Na-K 16 mmol/l utilizarse un patrn para calcular la concentracin de proteinas
Yoduro potsico 15 mmol/l
Sulfato cprico 6 mmol/l totales en la muestra. La muestra blanco para sueros claros o
R2. Reactivo blanco incoloros corresponde aproximadamente a 0,2 g de proteinas
M

Hidrxido sdico 100 mmol/l totales/dl, y puede ser ignorada.

Tartrato Na-K 16 mmol/l
AA

CAL. Patrn Cuando se analicen sueros ictricos (5 mg bilirrubina/dl),

Protena Especifico para cada lote hemolticos o lipmicos debe analizarse una muestra blanco
hecha con 0,02 ml de suero o plasma y 1,0 ml de la Reactivo
blanco R2. Esta debe medirse frente al agua y la absorbancia
G

PRECAUCIONES DE SEGURIDAD obtenida debe restarse de la absorbancia de la muestra.

Unicamente para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca.
Respetar las precauciones normales necesarias, que se requieren
al manejar reactivos de laboratorio. PROCEDIMIENTO
Realice una calibracin de ganancia nuevo con una cubeta que
Las soluciones R1 y R2 contienen hidrxido sdico que es contiene ddH2O fresco. Seleccione el programa de TP en la
castico. En caso de contacto accidental, lavar inmediatamente el pantalla de ejecucin de la prueba y llevar a cabo un blanco de
area afectada con agua abundante y buscar inmediatamente agua segn las instrucciones.
atencin mdica.
Pipetear en la cubeta:
CAL contiene azida sdica. Evitar su ingestin o el contacto con
la piel y mucosas. En caso de contacto con la piel, lavar Reactivo blanco Patrn Muestra Muestra
inmediatamente el rea afectada con agua abundante. En caso de S0 S1 en blanco
ingestin o contacto con los ojos llamar inmediatamente a un
mdico. Agua destilada 0.01 ml -- -- --
Patrn (CAL) -- 0.01 ml -- --
La azida sdica reacciona con el cobre y plomo de las tuberas, lo Suero -- -- 0.01 ml 0.01 ml
que podra producir azidas explosivas. Cuando se tire este R1 0.5 ml 0.5 ml 0.5 ml --
reactivo enjuagar abundantemente con agua para evitar la R2 -- -- -- 0.5 ml
formacin de estas azidas. Las superficies metlicas que hayan
sido puestas en contacto con la azida sdica deben ser lavadas
con hidrxido sdico al 10%. Mezclar, incubar durante 30 minutos a +20 a +25C, antes de
leer las instrucciones en la pantalla
Hojas informativas sobre Salud y Seguridad estn disponibles si se
desean. CALIBRACIN PARA RX MONZA
Recomendaciones sobre el cambio de lote del reactivo o como
Los reactivos deben ser utilizados solo para los se indica en los procedimientos de control de calidad, utilizando
propsitos indicados por personal adecuado cualificado CAL estndar proporcionado en el kit de calibracin o Nivel
de laboratorio bajo condiciones apropiadas de Randox Suero 3.
laboratorio.

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 MANUAL/ RX MONZA TP 245

PARA USO MANUAL VALORES NORMALES EN SUERO(2)

Longitud de onda: Hg 546 nm (530 - 570 nm) g/dl g/l

Cubeta: 1 cm light path
Temperatura: 20 to 25C Adultos 6,4 - 8,3 64 - 83
Medicin: against reagent blank

Pipetear en la cubeta: Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango

que refleje la edad, sexo, dieta y localidad geogrfica de la
Reactivo Patrn Muestra poblacin.
Blanco
CARACTERSITCAS ESPECFICAS DE
Agua destilada 0,02 ml --- --- FUNCIONAMIENTO DE LA TCNICA
Patrn (CAL) --- 0,02 ml --- Se obtuvieron los siguientes datos de rendimiento mediante un
Suero o plasma --- --- 0,02 ml analizador RX monza en funcionamiento a 25C.
R1 1,0 ml 1,0 ml 1,0 ml
LINEALIDAD
Mezclar, incubar durante 30 min entre +20 y +25C. Medir la El mtodo es lineal hasta una concentracin de 13,0 g/dl
absorbancia de la muestra (Amuestra) y del patrn (Apatrn) frente al (130 g/l). Si la absorbancia de la muestra excede 0,7, diluir 1+1
reactivo blanco. con NaCl al 0,9%. Multiplicar el resultado por 2.

CLCULO MANUAL SENSIBILIDAD

1. Cuando la medicin se lleva a cabo a Hg 546 nm, la La concentracin detectable mnima de Proteinas Totales con un
concentracin de protenas totales puede ser calculada de la nivel aceptable de precisin se determin en 0,476 g/dl (4,76
siguiente manera: g/l).

Conc. de Prot. Tot = 190 x Amuestra PRECISION

(g/l)
SA
Anlisis (Intra)
Conc. de Prot. Tot = 19 x Amuestra Nivel 1 Nivel 2
(g/dl) Media (g/dl) 6.04 4.48
DE 0.034 0.024
M

2. Utilizando un patrn: CV(%) 0.57 0.53

n 20 20
AA

Amuestra
Conc. de Prot. Tot. = x Conc. Patrn Anlisis (Inter)
Apatrn Nivel 1 Nivel 2
Media (g/dl) 6.04 4.48
G

NORMALIZACIN DE 0.251 0.135

El suero de calibracin de nivel 3 de Randox sigue lo indicado en CV(%) 4.15 3.01
el material de referencia NIST 927d de Proteinas Totales. n 20 20

CONTROL DE CALIDAD CORRELACIN

Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel
3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de
controles al menos una vez al da. Los valores obtenidos debern
encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se
encuentran fuera del rango y su repeticin excluye error, se
debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar programacin del instrumento y el origen de luz.
2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento de
bacterias puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los
Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +44 (0) 28 9442 2413.
Este mtodo (Y) se compar con otro mtodo comercial
disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
lineal:
Y = 0.9665 X - 0.0589
y un coeficiente de correlacin r = 0,9850
Se analizaron 40 muestras de pacientes con valores de entre 4,29
y 10,40 g/dl.
REFERENCIAS
1. Weichselbaum, T.E., Amer. J. Clin. Path., 16: 40.
2. Tietz NW. Clinical Guide to Laboratory Tests. 3rd Edition. WB
Saunders Company. Philadelphia. PA pp 518-519 (1995)

INTERFERENCIA
Los siguientes analitos se analizaron hasta los siguientes niveles y se
encontr que no interfieren:

Bilirrubina 500 mol/l (29 mg/dl)

Intralipid 2%
Triglicrido 22,75 mmol/l (20,0 mg/dl) Revisado 16 Sep 10 bm
Hemoglobina 10 g/l Rev. 001

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TRIGLICERIDOS PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Unicamente para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca.
Mtodo GPO-PAP Respetar las precauciones normales necesarias, que se requieren
MANUAL al manejar reactivos de laboratorio.
RX MONZA
La reactivo R1a contiene azida sdica. Evitar su ingestin o el
PARA SU USO
Para el anlisis cuantitativo in vitro de Trigliceridos en suero y contacto con la piel y mucosas. En caso de contacto con la piel,
plasma. Este producto es adecuado para un uso manual o en el lavar inmediatamente el rea afectada con agua abundante. En
analizador RX monza. caso de ingestin o contacto con los ojos llamar inmediatamente
a un mdico.
Cat. No.
TR 210 R1a. Tampn 1 x 100 ml La azida sdica reacciona con el cobre y plomo de las tuberas, lo
6 x 15 ml R1b. Reactivo enzima 6 x 15 ml que podra producir azidas explosivas. Cuando se deseche este
CAL. Patrn 1 x 5.5 ml reactivo enjuagar abundantemente con agua para evitar la
formacin de estas azidas. Las superficies metlicas que hayan
TR 213 R1a. Tampn 10 x 50 ml
10 x 50 ml R1b. Reactivo enzima 10 x 50 ml sido puestas en contacto con la azida sdica deben ser lavadas
CAL. Patrn 1 x 5.5 ml con hidrxido sdico al 10%.

TR 212 R1a. Tampn 5 x 100 ml Hojas informativas sobre Salud y Seguridad estn disponibles si se
5 x 100 ml R1b. Reactivo enzima 5 x 100 ml desean
CAL. Patrn 1 x 5.5 ml
Los reactivos deben ser utilizados solo para los
SIGNIFICADO CLINICO propsitos indicados por personal adecuado cualificado
Las medidas de Triglicridos se utilizan en el diagnstico y
de laboratorio bajo condiciones apropiadas de
tratamiento de enfermedades relacionadas con el metabolismo
lipdico (Hiperlipoproteinemias), diversos desordenes endocrinos laboratorio.
(neprosis diabetes mellitus) y obstruccin heptica (obstruccin
biliar extraheptica). ESTABILIDAD Y PREPARACIN DE LOS REACTIVOS
R1a. Tampn
METODO COLORIMETRICO(1) Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad
SA
Los triglicridos se determinan tras hidrlisis enzimtica con cuando se conservan entre +2 y +8C.
lipasas. El indicador es una quinoneimina formada a partir de
perxido de hidrgeno, 4-amino-fenazona y
R1b. Reactivo enzima
4-clorofenol bajo la influencia cataltica de la peroxidasa.
M

Cat. No. TR 210

PRINCIPIO(2,3,4) Reconstituir un vial de Reactivo enzima R1b con 15 ml de
Tampn R1a. Estable durante 21 das entre +2 y +8C 3
AA

lipasas
Triglicridos + H2O glicerol + cidos grasos das entre +15 y + 25C conservar protegido de la luz.
GK
Glicerol + ATP glicerol-3-fosfato + ADP Cat. Nos. TR 213 y TR 212
G

Glicerol-3-fosfato + O2
GPO
dihidroxiacetona fosfato + H2O2 Reconstituir un vial de Reactivo enzima R1b con un
POD
pequeo volumen de Tampn R1a y despus transferir
2H2O2 + 4-aminofenazona + 4-clorofenol quinoneimina todo el contenido al frasco R1a, enjuagando el vial R1b
+ HCl + 4H2O varias veces. Estable durante 21 das entre +2 y +8C 3
PREPARACION DE LA MUESTRA(1) das entre +15 y +25C. Conservar protegido de la luz.
Se puede utilizar el suero, plasma heparinizado o con EDTA.
Tomar la muestras despus de 12 a 14 horas en ayunas. Tras la CAL. Patrn
separacin las muestras son estables hasta 7 das cuando se Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad,
conservan entre +2 y +8C o 3 meses a -20C. Se debern evitar cuando se conserva entre +2 y +8C.
los tubos recubiertos con Glicerol cerrado al vaco, as como el
proceso repetido de congelacin y descongelacin. R1 = Reactivo enzima
R2 = Ninguno
COMPOSICION DEL REACTIVO

Componentes Concentraciones en la prueba MATERIALES SUMINISTRADOS

Tampn
R1a. Tampn Reactivo enzima
Tampn Pipes 40 mmol/l, pH 7,6 Patrn
4-clorofenol 5,5 mmol/l
Magnesio-iones 17,5 mmol/l MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS
R1b. Reactivo enzima Multisueros Valorados Randox Nivel 2 (No. Cat. HN 1530) y
4-aminofenazona 0,5 mmol/l Nivel 3 (No. Cat. HE 1532)
ATP 1,0 mmol/l Sueros de Calibracin Randox Nivel 3 (Cat. No. CAL 2351)
Lipasas 150 U/ml
Glicerol-kinasa 0,4 U/ml
Glicerol-3-fosfato oxidasa 1,5 U/ml NOTA DE PROCEDIMIENTO
Peroxidasa 0,5 U/ml Para corregir para libre de glicerol, restar 0,11 mmol/l (10 mg/dl)
CAL. Patrn Vedi inserto lotto-specifico al valor calculado de triglicrido.

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 MANUAL/ RX MONZA TR 210

PROCEDIMIENTO NORMALIZACIN
Usando ddH2O realizar una nueva calibracin de ganancia nueva Calibracin Randox suero Nivel 3 es atribuible a hacer referencia
en el modo de cubeta. Seleccione el TRI en la pantalla de a ID-GC/MS mtodo.
Ejecucin de prueba y llevar a cabo un blanco de agua segn las
instrucciones. CONTROL DE CALIDAD
Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel
Pipetear en la Cubeta: 3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de
controles al menos una vez al da. Los valores obtenidos debern
Reactivo Blanco S0 Patrn S1 Muestra encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se
encuentran fuera del rango y su repeticin excluye error, se
ddH2O - - -
debern seguir los siguientes pasos:
Patrn - 5 l -
1. Comprobar programacin del instrumento y el la lmpara
Muestra - - 5 l
Reagent R1 500 l 500 l 0.50 ml 2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento
Mezclar, incubar durante 10 min a 20-25oC o 5 min a 37 C. bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
Inserte en el soporte de RX Monza celda de flujo y oprima Leer 4. Comprobar la temperatura de reaccin
dentro de los 60 minutos. 5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus
componentes.
CALIBRACIN PARA RX MONZA 6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los
Recomendado con el cambio de lote de reactivos o como Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +44 (0) 28 9442 2413.
inidicated por los procedimientos de control de calidad,
utilizando CAL estndar proporcionado en el kit de calibracin o INTERFERENCIAS
de suero Randox Nivel 3. El mtodo no se ve influenciado por concentraciones de
hemoglobina de hasta 6 g/l (600 mg/dl) o por concentraciones de
PARA USO MANUAL bilirrubina de hasta 500 mol/l (29 mg/dl).

Longitud de onda: 500 nm; Hg 546 nm VALORES DE REFERENCIA(5)

Cubeta: 1 cm Se recomiendan los siguientes lmites superiores para la
determinacin del factor de riesgo de hipertrigliceridemia:
SA
Temperatura: 20-25C 37C
Medida: frente a reactivo blanco
slo es necesario un reactivo Sospecha de hipertrigliceridemia a partir de:
blanco por serie 1,71 mmol/l (150 mg/dl)
M

Hipertrigliceridemia incrementada a partir de:

Pipetear en tubos de ensayo: 2,29 mmol/l (200 mg/dl)
AA

Reactivo Blanco Patrn Muestra Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango
l l l de referencia que refleje la edad, sexo, dieta y localidad
geogrfica de la poblacin.
G

Muestra - - 10
Patrn (CAL) - 10 - CARACTERSITCAS ESPECFICAS DE
Reactivo (R1) 1000 1000 1000 FUNCIONAMIENTO DE LA TCNICA
Se obtuvieron los siguientes datos de rendimiento mediante un
Mezclar, incubar durante 10 minutos a 20-25C 5 minutos a analizador RX monza en funcionamiento a 25C.
37C. Medir la absorbancia de la muestra (Amuestra) y el patrn
(Apatrn) frente al reactivo blanco en los 60 minutos siguientes. LINEALIDAD
El anlisis es lineal hasta una concentracin de triglicridos de
CLCULO MANUAL 1172 mg/dl. Las muestras que presenten una concentracin
1. Utilizando patrn: superior, deben ser diluidas 1 + 4 con NaCl al 0,9%. Multiplicar el
Amuestra resultado por 5.
Concentracin triglicridos = x 2,29 = mmol/l
Apatrn SENSIBILIDAD
La concentracin detectable mnima de Trigliceridos con un nivel
Amuestra aceptable de precisin se determin en 22.9 mg/dl.
x 200 = mg/dl
Apatrn

2. Utilizando factor:

Concentracin Triglicridos
Longitud de onda mmol/l mg/dl

Hg 546 nm 11,95 1048

500 nm 8,47 743

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 MANUAL/ RX MONZA TR 210

PRECISION

Anlisis (Intra)
Nivel 2 Nivel 3
Media (mg/dl) 110 259
DE 3.19 6.42
CV(%) 2.90 2.48
n 20 20

Anlisis (Inter)
Nivel 2 Nivel 3
Media (mg/dl) 110 259
DE 5.85 9.89
CV(%) 5.32 3.82
n 20 20

CORRELACIN
Este mtodo (Y) se compar con otro mtodo comercial
disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
lineal:

Y = 0.902 X + 16.1
y un coeficiente de correlacin r = 0,9965

Se analizaron 42 muestras de pacientes con valores de entre 45 y

417 mg/dl.

REFERENCIAS
1. Tietz N.W., Clinical Guide to Laboratory Tests, Second
SA
Edition W.B. Saunders Company, Philadelphia, USA 554-556,
1990.
2. Jacobs N J, VanDemark, P.J., Arch Biochem Biophys 1960;
88: 250-255.
M

3. Koditschek L K, Umbreit, W W., J Bacteriol 1969; 98:

1063-1068.
4. Trinder P., Ann Clin Biochem 1969; 6: 24-27.
AA

5. Study Group, European Atherosclerosis Society. Strategies

for the prevention of coronary heart disease: A policy
statement of the European Athersclerosis Society. (1987).
G

Eur. Heart. J. 8 : 77.

Revisado 16 Sep 10 bm
Rev. 001

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ACIDO URICO (UA) PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Unicamente para diagnstico in vitro. No pipetear con la
Mtodo Colorimtrico Enzimtico boca. Respetar las precauciones normales necesarias, que se
MANUAL requieren al manejar reactivos de laboratorio.
RX MONZA
La solucin R1a contiene azida sdica. Evitar su ingestin o el
PARA SU USO contacto con la piel y mucosas. En caso de contacto con la
Para el anlisis cuantitativo in vitro de Acido Urico en el suero, piel, lavar inmediatamente el rea afectada con agua
plasma y orina. Este producto es adecuado para un uso abundante. En caso de ingestin o contacto con los ojos
manual o en el analizador Rx Monza. llamar inmediatamente a un mdico.

Cat. No. La azida sdica reacciona con el cobre y plomo de las tuberas,
UA 230 R1a. Tampn 1 x 100 ml lo que podra producir azidas explosivas. Cuando se tire este
6 x 15 ml R1b. Reactivo Enzima 6 x 15 ml reactivo enjuagar abundantemente con agua para evitar la
CAL. Patrn 1 x 5.5 ml formacin de estas azidas. Las superficies metlicas que hayan
sido puestas en contacto con la azida sdica deben ser lavadas
UA 233 R1a. Tampn 10 x 50 ml con hidrxido sdico al 10%.
10 x 50 ml R1b. Reactivo Enzima 10 x 50 ml
CAL Patrn 1 x 5.5 ml Hojas informativas sobre Salud y Seguridad estn disponibles si
se desean.
METODO COLORIMETRICO(1)
El cido rico se convierte, catalizado por la uricasa, en Los reactivos deben ser utilizados solo para los
alantoina y perxido de hidrgeno. El perxido de hidrgeno propsitos indicados por personal adecuado
formado, catalizado por la peroxidasa, oxida el cido cualificado de laboratorio bajo condiciones apropiadas
SA
3,5-dicloro-2-hidroxibencenosulfnico y la de laboratorio.
4-aminofenazona para dar un compuesto de quinoneimina
rojo-violeta. ESTABILIDAD Y PREPARACION DEL REACTIVO
M

R1a. Tampn
PRINCIPIO Listo para su uso. Etable hasta la fecha de caducidad si
AA

uricasa
se conserva entre +2 to +8oC.
Ac. rico + O2 + 2H2O Alantoina + CO2 + H2O2
R1b. Reactivo Enzima
G

2H2O2 + Ac. 3,5-dicloro-2-hidroxibencenosulfnico UA 230

+ 4-Amino-fenazona Reconstituir un vial de R1b Reactivo enzimtico con
peroxidasa
15 ml de Buffer R1a. Estable 21 das entre +2 y +8C
N-(4-antipiril)-3-cloro-5-sulfonato-p-benzoquinoneimina o 5 das entre +15 y +25C si se almacena protegido
de la luz
MUESTRA
Suero, plasma heparinizado o plasma EDTA, orina. UA 233
Diluir la orina 1+10 con agua destilada. Reconstituir el contenido de un vial de R1b Reactivo
enzimtico con una porcin de Buffer R1a y luego
COMPOSICION DEL REACTIVO transferir todo el contenido a la botella R1a,
enjuagando el frasco R1b varias veces.
Componentes Concentraciones en la prueba Estable por 21 das entre +2 y +8C o 5 das entre
+15 y +25C si se almacena protegido de la luz.
R1a. Tampn
Tampn HEPES 50 mmol/l, pH 7,0 CAL. Patrn
3,5 DCHBS 4 mmol/l Listo para su uso. Etable hasta la fecha de caducidad si
R1b. Reactivo Enzima se conserva entre +2 to +8C.
4-Aminofenazona 0,25 mmol/l
Peroxidasa 1000 U/l MATERIALES SUMINISTRADOS
Uricasa 200 U/l Tampn
CAL Patrn Especifico para cada lote Reactivo Enzima
Patrn

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 MANUAL/ RX MONZA UA 230

MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS CALCULO MANUAL

Multisuero Valorado Randox Nivel 2 (No. Cat. HN1530) y
Nivel 3 (No. Cat. HE 1532) El uso de un patrn
Sueros de Calibracin Randox Nivel 3 (Cat. No. CAL 2351) Suero o plama

PROCEDIMIENTO Amuestra
Usando ddH2O realizar una nueva Calibracin de Ganancia en Conc. Acido Urico = patrn x (mol/l)
el modo de cubeta. Seleccione UA en la pantalla Ejecutar conc. Apatrn
prueba y llevar a cabo un blanco de agua segn las
instrucciones. Amuestra
Conc. Acido Urico = patrn x (mg/dl)
Pipetear en la cubeta:
conc. Apatrn
Reactivo Blanco S0 Patrn S1 Muestra

ddH2O - - - Orina
Patrn - 10 l - Amuestra
Muestra - - 10 l Conc. Acido Urico = patrn x (mol/l)
Reactivo 500 l 500 l 500 l conc. Apatrn

Mezclar, incubar durante 15 min a 20-25C 5 min a Amuestra

37C. Insertar en el soporte de flujo de clula de RX monza Conc. Acido Urico = patrn x (mg/dl)
y oprima Leer dentro de los 30 minutos. conc. Apatrn

CALIBRACIN PARA RX MONZA Utilizacin de un factor:

Conc. Acido Urico
SA
Recomendado con el cambio de lote de reactivos o como se
indica en el procedimiento de control de calidad, utilizando el (mol/l) (mg/dl)
CAL estndar proporcionado en el kit o suero de calibracin Longitud de Suero/ Orina Suero/ Orina
Randox Nivel 3. onda: Plasma Plasma
M

520 nm 2029 22306 34.1 375

PARA USO MANUAL Hg 546 nm 3112 34202 52.3 575
AA

Longitud de onda: 520 nm; Hg 546 nm NORMALIZACIN

Cubeta: 1 cm de espesor El suero de Calibracin nivel 3 tiene trazabilidad con el
G

Temperatura de reaccin: 20-25C / 37C material de referencia ID-GC/MS.

Medicin: frente a reactivo blanco
slo se requiere un CONTROL DE CALIDAD
reactivo blanco por serie Se recomiendan los Multisueros Ensayados Randox, Nivel 2 y
Nivel 3 para el control de calidad diario. Se deber de analizar
Pipetear en tubos de ensayo: dos niveles distintos de controles cada da. Los valores
obtenidos debern encontrarse dentro del rango especificado.
Reactivo Muestra (l) Patrn (l) Si los valores se encuentran fuera del rango y su repeticin
Blanco (l) excluye error, se debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar programacin del instrumento y el origen de
Muestra - 20 - luz.
Patrn (CAL) - - 20 2. Comprobar que todo material est limpio.
Reactivo (R1) 1000 1000 1000 3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento de
bacterias puede contribuir a la inexactitud de los
Mezclar, incubar durante 15 minutos a 20-25oC o durante resultados.
exactamente 5 min a 37oC. Medir la absorbancia de la muestra 4. Comprobar la temperatura de reaccin
(Amuestra) y del patrn (Apatrn) frente al reactivo blanco 5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus
durante los 30 minutos siguientes. componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de
los Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28
94422413.

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 MANUAL/ RX MONZA UA 230

INTERFERENCIA CORRELACIN
Hemoglobina hasta 100 mg / dl y bilirrubina hasta 20 mg / dl Este mtodo (Y) se compar con otro mtodo comercial
no afectan la determinacin. Si las mediciones no puede disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
llevarse a cabo a 520 nm o Hg 546 nm se debe utilizar la lineal:
norma prevista.
Y = 0.933 X + 0.16
y un coeficiente de correlacin r = 0,9808
VALORES NORMALES
Suero2: Hombre 202 - 416 mol/l Se analizaron 40 muestras de pacientes con valores de entre
1.05 y 15.16 mg/dl.
3.4 - 7.0 mg/dl

ORINA
Mujer 142 - 339 mol/l
2.4 - 5.7 mg/dl
SENSIBILIDAD
La concentracin detectable mnima de Acido Urico con un
Orina3: 1.5 - 4.5 mmol/24 horas
nivel aceptable de precisin se determin en 2.06 mg/dl.
250 - 750 mg/24 horas
LINEALIDAD
Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio El mtodo es lineal para una concentracin de 26,7 mg/dl.
rango de referencia que refleje la edad, sexo, dieta y localidad Para la muestras con concentraciones superiores diluir 1+1
geogrfica de la poblacin. con agua destilada y repetir la prueba. Multiplicar el resultado
por 2.
CARACTERSITCAS ESPECFICAS DE
FUNCIONAMIENTO DE LA TCNICA PRECISION
Se obtuvieron los siguientes datos de rendimiento mediante
SA
un analizador Rx Monza en funcionamiento a 37C. Anlisis (Intra)
Nivel 2 Nivel 3
SUERO Media (mg/dl) 14.1 23.8
M

DE 0.250 0.362
SENSIBILIDAD CV(%) 1.77 1.52
AA

La concentracin detectable mnima de Acido Urico con un n 20 20

nivel aceptable de precisin se determin en 0,599 mg/dl.
Anlisis (Inter)
G

LINEALIDAD Nivel 2 Nivel 3

El mtodo es lineal para una concentracin de 24,5 mg/dl. Media (mg/dl) 14.1 23.8
DE 0.557 0.912
Para la muestras con concentraciones superiores diluir 1+1
CV(%) 3.95 3.83
con solucin de NaCl al 0,9% y repetir la prueba. Multiplicar el
n 20 20
resultado por 2.

CORRELACIN
PRECISION
Este mtodo (Y) se compar con otro mtodo comercial
disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
Anlisis (Intra) lineal:
Nivel 2 Nivel 3
Media (mg/dl) 5.81 8.97 Y = 0,9853 X + 0,669
DE 0.022 0.049 y un coeficiente de correlacin r = 0,9879
CV(%) 0.38 0.55
n 20 20 Se analizaron 45 muestras de pacientes con valores de entre
3,28 y 21,58 mg/dl.
Anlisis (Inter)
Nivel 2 Nivel 3 REFERENCIAS
Media (mg/dl) 5.81 8.97 1. Fossati, P., Prencipe, L., and Berti, G., Clin. Chem. (1980)
DE 0.328 0.371 26/2, 227-231 .
CV(%) 5.64 4.14 2. Thefeld, W. et al. Dtsch. Med. Wschr. (1973) 98, 380.
n 20 20 3. Krieg, M. et al. J. Clin. Chem. Clin. Biochem.(1986) 24,
863.
Revisado 16 Sep 10 ck
Rev. 001

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ACIDO URICO (UA) ESTABILIDAD Y PREPARACION DEL REACTIVO
El reactivo enzima y el patrn estn listos para usar. Los
Reactivo Lquido reactivos son estables hasta la fecha de caducidad cuando se
Mtodo Colorimtrico Enzimtico conservan entre +2 y +8C, protegidos de la luz.
MANUAL

PARA SU USO MATERIALES SUMINISTRADOS

Para el anlisis cuantitativo in vitro de Acido Urico en el suero, Reactivo Enzima
plasma y orina. Este producto es adecuado para su utilizacin en Patrn
Manual.
MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS
No. Cat. Multisuero Valorado Randox Nivel 2 (No. Cat. HN1530) y Nivel
UA 1613 R1. Reactivo Enzima 4 x 100 ml 3 (No. Cat. HE 1532)
4 x 100 ml CAL Patrn 1 x 5.5 ml

METODO COLORIMETRICO PROCEDIMIENTO

El cido rico se convierte, catalizado por la uricasa, en alantoina
y perxido de hidrgeno. El perxido de hidrgeno formado, Longitud de onda: 520 nm; Hg 546 nm
catalizado por la peroxidasa, oxida el cido Cubeta: 1 cm de espesor
3,5-dicloro-2-hidroxibencenosulfnico y la Temperatura de reaccin: 20-25oC 37oC
4-aminofenazona para dar un compuesto de quinoneimina Medicin: frente a reactivo blanco
rojo-violeta. slo se requiere un
reactivo blanco por serie
PRINCIPIO(1,2)
uricasa
Pipetear en tubos de ensayo:
Ac. rico + O2 + 2H2O alantoina + CO2 + H2O2

2H2O2 + Ac. 3,5-dicloro-2-hidroxibencenosulfnico Reactivo Blanco l Muestra l Patrn l

+ 4-Amino-fenazona
peroxidasa Muestra - 20 -
Patrn (CAL) - - 20
N-(4-antipiril)-3-cloro-5-sulfonato-p-benzoquinoneimina Reactivo 1 1000 1000 1000
SA
MUESTRA Mezclar, incubar durante 15 minutos a 20-25oC o durante
Suero, plasma heparinizado o plasma EDTA, orina.
exactamente 5 min a 37oC. Medir la absorbancia de la muestra
Diluir la orina 1+10 con agua destilada.
M

(Amuestra) y del patrn (Apatrn) frente al reactivo blanco durante

COMPOSICION DEL REACTIVO los 15 minutos siguientes.
AA

Componentes Concentraciones en la prueba Aunque la absorbancia se puede leer en cualquier momento

durante un perodo de hasta 15 minutos despus del tiempo
R1. Reactivo Enzima especificado de incubacin, el intervalo entre la adicin de la
Tampn HEPES 200 mmol/l, pH 7,55 muestra y la lectura debe de ser exactamente el mismo que para
G

4-Aminofenazona 0,25 mmol/l el Patrn/Control y la Muestra.

3,5 DCHBS 4,0 mmol/l
Uricasa 200 U/l
Peroxidasa 1000 U/l CALCULO DE LA CONCENTRACION DE ACIDO
CAL Patrn Especifico para cada lote URICO

Suero o plama
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD Amuestra
Unicamente para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca. Conc. Acido Urico = x conc. del patrn
Respetar las precauciones normales necesarias, que se requieren Apatrn
al manejar reactivos de laboratorio.

El R1 reactivo contiene azida sdica. Evitar su ingestin o el Orina

contacto con la piel y mucosas. En caso de contacto con la piel, Amuestra
lavar inmediatamente el rea afectada con agua abundante. En Conc. Acido Urico = x conc. del patrn x 11
caso de ingestin o contacto con los ojos llamar inmediatamente Apatrn
a un mdico.

La azida sdica reacciona con el cobre y plomo de las tuberas, lo

que podra producir azidas explosivas. Cuando se tire este
reactivo enjuagar abundantemente con agua para evitar la
formacin de estas azidas. Las superficies metlicas que hayan
sido puestas en contacto con la azida sdica deben ser lavadas
con hidrxido sdico al 10%.

Hojas informativas sobre Salud y Seguridad estn disponibles si se

desean.

Los reactivos deben ser utilizados solo para los

propsitos indicados por personal adecuado cualificado
de laboratorio bajo condiciones apropiadas de
laboratorio.

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 MANUAL UA 1613

CONTROL DE CALIDAD
Se recomiendan los Multisueros Ensayados Randox, Nivel 2 y
Nivel 3 para el control de calidad diario. Se deber de analizar
dos niveles distintos de controles cada da. Los valores obtenidos
debern encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores
se encuentran fuera del rango y su repeticin excluye error, se
debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar programacin del instrumento y el origen de
luz.
2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento de
bacterias puede contribuir a la inexactitud de los
resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus
componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de
los Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28
94422413.

INTERFERENCIA
Haemoglobin up to 100 mg/dl and Bilirubin up to 20 mg/dl do not
affect the determination.

VALORES NORMALES(3,4)
Suero: Hombre 202 - 416 mol/l
3,4 - 7,0 mg/dl
Mujer 142 - 339 mol/l
2.4 - 5.7 mg /dl
SA
Orina: 1,5 - 4,5 mmol/24 hrs.
250 - 750 mg/24 hrs.
M

Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango

de referencia que refleje la edad, sexo, dieta y localidad
geogrfica de la poblacin.
AA

LINEALIDAD
El mtodo es lineal para una concentracin de 1189 mol/l 20
mg/dl. Para la muestras con concentraciones superiores diluir
G

1+1 con solucin de NaCl al 0,9% y repetir la prueba. Multiplicar

el resultado por 2.

SENSIBILIDAD
Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio
intervalo de sensibilidad ya que esto est limitado por la
sensibilidad del espectrofotmetro utilizado. Bajo las condiciones
del ensayo un cambio de 0,004 unidades de absorbancia es
equivalente a 0,98 mmol / l.

REFERENCIAS
1. Barham, D., and Trinder, P., Analyst 97, 142-145 (1972).
2. Fossati, P., Prencipe, L., and Berti, G., Clin. Chem. 26/2,
227-231 (1980).
3. Thefeld, W. et al. Dtsch. Med. Wschr. (1973) 98, 380.
4. Krieg, M. et al. J. Clin. Chem. Clin. Biochem.(1986) 24, 863.

Revisado 28 June 10 lm
Rev. 001

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PROTEINAS TOTALES PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Slo para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca. Respetar

(UP) las precauciones normales necesarias, que se requieren al

manejar reactivos de laboratorio.
(ORINA)
MANUAL El Patrn (CAL) contiene azida sdica. Evitar su ingestin o el
RX MONZA contacto con la piel y mucosas. En caso de contacto con la piel,
lavar inmediatamente el rea afectada con agua abundante. En
PARA SU USO caso de ingestin o contacto con los ojos llamar inmediatamente
Para la determinacin cuantitativa in vitro de Proteinas Totales en a un mdico.
orina y C.S.F. Este producto es adecuado para un uso manual o
en el analizador RX monza. La azida sdica reacciona con el cobre y plomo de las tuberas, lo
que podra producir azidas explosivas. Cuando se tire este
No. Cat. reactivo enjuagar abundantemente con agua para evitar la
UP 1570 R1. Reactivo colorante 3 x 100 ml formacin de estas azidas. Las superficies metlicas que hayan
3 x 100 ml CAL. Patrn 1 x 5.5 ml sido puestas en contacto con la azida sdica deben ser lavadas
con hidrxido sdico al 10%.
UP 1571 R1. Reactivo colorante 6 x 100 ml
6 x 100 ml CAL. Patrn 1 x 5.5 ml Precaucin: Estndar
El material humano del que se deriva este producto ha sido
SIGNIFICADO CLINICO(1) evaluado a nivel de donante para buscar anticuerpos del virus de
El anlisis de la Protena Total en la orina y el lquido cerebro inmunodeficiencia humana (VIH 1, VIH 2), antgenos de superficie
espinal es de gran valor en el diagnstico de enfermedades de hepatitis B (HbsAg) y anticuerpos del virus de hepatitis C
renales y del sistema nervioso central. Las elevaciones en la (HCV), y result ser NO REACTIVO. Se han llevado a cabo los
protena urinaria son muy comunes en las siguientes condiciones: mtodos aprobados por la FDA estadounidense para realizar
ejercicio enrgico, fiebre e hipotermia, nefrosis y nefropata dichas pruebas.
diabtica e infecciones de las vias urinarias. El anlisis de la No obstante, puesto que ningn mtodo puede garantizar
protena total en el lquido cerebro espinal ayuda en el plenamente que est exento de agentes infecciosos, este material
diagnstico de condiciones tales como meningitis, tumores CNS y todas las muestras de pacientes deben manipularse teniendo en
SA
y hemorragia cerebral. cuenta su posibilidad de transmisin de enfermedades infecciosas
y deben tratarse en consecuencia.
PRINCIPIO(2)
M

El rojo de pirogalol se acompleja con proteinas en un medio Hojas informativas sobre Salud y Seguridad estn disponibles si se
cido que contiene iones molibdato. El complejo azul resultante desean.
presenta una absorcin mxima a 600nm. La densidad ptica a
AA

600 nm es directamente proporcional a la concentracin de Por favor, desechar todos los materiales Biolgicos y Qumicos
proteinas totales de las muestras. segn las pautes locales.

EXTRACCION Y PREPARACION DE LA Los reactivos deben ser utilizados solo para los
G

MUESTRA(3,4,10) propsitos indicados por personal adecuado cualificado

Orina : extraccin de 24 horas, las muestras de orina se pueden de laboratorio bajo condiciones apropiadas de
conservan entre +2 y +8C hasta 24 horas o congeladas hasta 3 laboratorio.
meses hasta que se analizen.
C.S.F.(Lquido cerebro espinal): Se debern de analizar durante la ESTABILIDAD Y PREPARACIN DE LOS REACTIVOS
hora siguiente a su extraccin Listo para usar. Estable hasta la fecha de caducidad cuando se
conservan entre +15 y +25C.
OBSERVACIONES
1. Aditivos: No es necesario el uso de conservantes. MATERIALES SUMINISTRADOS
2. La heparina puede causar interferencias si se utiliza en Reactivo a color de la protena urinaria
muestras de LCR. Urinary Protein Standard

COMPOSICIN DEL REACTIVO MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS

1. Material de pipetaje adecuado para suministrar 10 l,
Componentes Concentracin inicial de la Solucin 50 l, 1 ml y 3 mls.
2. Cronmetro y bloque de calentamiento o bao de agua para
R1. Reactivo colorante mantener +25C +37C.
Rojo de pirogalol 60 mol/l 3. Un espectrofotmetro con una capacidad de longitud de
Molibdato disdico 40 mol/l onda de 600 nm.
Acido succnico 50 mmol/l 4. NaCl al 0,9% para la dilucin de la muestra (si es necesario).
Oxalato sdico 1 mmol/l 5. Controles de orina ensayados de Randox de nivel 2,
Benzoato sdico 3 mmol/l (N. cat. AU 2352) y nivel 3 (N. cat. AU 2353) o controles
CAL. Patrn de LCR de Randox de nivel 2 (CF 1500) y nivel 3 (CF 1501).
Protena (seroalbmina humana) Vedi inserto lotto
specifico

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 MANUAL/ RX MONZA UP 1570

PROCEDIMIENTO CALIBRACION
Seleccione UP (Arriba) en la pantalla Run Test (Realizar anlisis) Se recomienda el patrn de Protena Urinaria Randox
y lleve a cabo un blanco de agua de la forma indicada. (1 g/l) suministrado con este kit para la calibracin cuando se
Pipetee en una cubeta: analizen muestras de orina o CSF. La dilucin del patrn antes de
su uso no es necesaria. El patrn se prepara gravimtricamente
Blanco de reactivo S0 Patrn S1 Muestra
utilizando un grado de reactivo de albmina de suero humano. Se
Agua redestilada 10 l - - recomienda la recalibracin para cada serie de muestras
Patrn - 10 l - analizadas.
Muestra - - 10 l
Reactivo R1 500 l 500 l 500 l CONTROL DE CALIDAD
Controles de orina ensayados de nivel 2 y nivel 3 o controles de
Mzclelo y djelo incubar durante exactamente 10 minutos a LCR de Randox de nivel 2 y nivel 3. Analice dos niveles distintos
20-25C o 5 minutos a 37C. de controles al menos una vez al da. Los valores obtenidos
Introduzca la cubeta en el soporte de la celda de flujo del RX debern encontrarse dentro del rango especificado. Si los
Monza y pulse Read (Leer). valores se encuentran fuera del rango y su repeticin excluye
error, se debern seguir los siguientes pasos:
PARA USO MANUAL 1. Comprobar programacin del instrumento y el origen de
luz.
Longitud de onda: 600 nm 2. Comprobar que todo material est limpio.
Temperatura: 25/37C 3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento de bacterias
Medicin: Frente al blanco de reactivo puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
Pipetear en tubos de ensayo: 5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los
Mtodo Macro Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28 94422413.

(9)
Reactivo blanco Patrn Muestra INTERFERENCIA
Como en todos los mtodos de tincin, la subestimacin de
SA
Agua bidestilada 50 l --- --- protena puede ocurrir en muestras de orina que contengan
Patrn --- 50 l --- cadenas ligeras de inmunoglobulina (p. ej. protena de Bence
Orina o C.S.F --- --- 50 l Jones). Cuando se sospeche de dichas muestras, se deberan
Reactivo 3000 l 3000 l 3000 l analizar tambin mediante electroforesis.
M

Mtro Semi-micro VALORES NORMALES

AA

Normalmente se recomienda que, siempre que sea possible, cada

Reactivo blanco Patrn Muestra laboratorio establezca su propio rango de valores esperados, o
intervalo de referencia para anlisis que se lleven a cabo
Agua bidestilada 20 l --- --- normalmente. Dado que tales valores pueden variar con la edad,
G

Patrn --- 20 l --- sexo, dieta, localidad geogrfica o instrumento.

Orina o C.S.F --- --- 20 l
Reactivo 1000 l 1000 l 1000 l Orina 0.028 - 0.141 g/24h (2)
0.01 - 0.14 g/l (6)
C.S.F. 0.15 - 0.45 g/l (6)
Mezclar, incubar durante exactamente 10 minutos a 25C 5
minutos a 37C. Medir la absorbancia de la muestra (Amuestra) y CARACTERSTICAS DE RENDIMIENTO ESPECFICAS
del patrn (Apatrn) frente al blanco de reactivo. Los siguientes datos de rendimiento se obtuvieron mediante el
analizador RX monza en funcionamiento a una temperatura de
CLCULO MANUAL 37C.
Amuestra
Concentracin de la Protena (g/l) = x Patrn SENSIBILIDAD
Apatrn conc. La concentracin detectable mnima de protenas totales en orina
con un nivel aceptable de precisin se determin en 0,022 g/l.
Para determinar la Protena Urinaria de 24 horas, medir el
volumen de la orina de 24 horas en ml y analizar el contenido de LINEARIDAD
protena en la orina (g/l) segn el procedimiento. Calcular la Este mtodo es lineal hasta una concentracin de 2,14 g/l. Las
Protena Urinaria de 24h utilizando la siguiente frmula: muestras con concentraciones superiores deben diluirse 1 + 4
con una solucin del 0,9% (p/v) de NaCl y deben someterse a
Protena (g/24h) = Protena Urinaria (g/l) x TV/1000 ensayo de nuevo multiplicando los resultados por 5.

donde TV = volumen de orina de 24h en ml

1000 = Convierte ml/da en l/da

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 MANUAL/ RX MONZA UP 1570

PRECISIN
Precisin intraensayo
Nivel 1 Nivel 2
Media (g/dl) 0.065 0.275
DE 0.002 0.002
CV (%) 2.93 0.67
n 20 20

Interensayo
Nivel 1 Nivel 2
Media (g/dl) 0.065 0.275
DE 0.003 0.013
CV (%) 5.34 4.74
n 20 20

CORRELACIN
Se compar este mtodo (Y) con otro mtodo comercial
disponible y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin lineal:

Y = 0.9911 X + 0.0029

con un coeficiente de correlacin r = 0,9998

Se analizaron 46 muestras de pacientes con valores de entre
0,04 y 1,36 g/l.

REFERENCIAS
1. Pesce, A.J., Kaplan, L.A.: Methods in Clinical Chemistry
(1987).
2. Watanabe, N., Kamei, S., Ohkubo, A., Yamanaka, M.,
SA
Ohsawa, S., Makino, K., and Tokuda, K., Clin. Chem., 1986;
32/8: 1551.
3. Laboratory Test Handbook, Jacobs et al. ed 2.
M

4. Orsonneau, J., Dowet, P., Massoubre, C., Lustenberger, P.,

and Bernard, S., Clin. Chem., 1989; 35/11: 2233.
5. Henry R.J., Cannon, D.C., Winkelman, J.W., "Clinical
AA

Chemistry, Principles & Techniques," Harper & Row, 2nd Ed.

1974.
6. Teitz, N.W., "Fundamentals of Clinical Chemistry", W.B.
Saunders Company, 1970 Philadelphia.
G

7. Young, D.S., et al. Clin. Chem., 21: 5. ID, 1975.

8. Friedman, R.B., et al. Clin. Chem., 26: 4. ID, 1980.
9. Tietz N.W., Textbook of Clinical Chemistry. 2nd ed. W.B.
Saunders Co., 717-723, 1994.
10. Yang J.Y., Chien T.I., Lu J.Y. and Kao J.T.
Heparin Interference in the cerebrospinal fluid Protein Assay
Measured in the Pyrogallol Red Molybdate Complex. Clin.
Chim Acta 2009 Oct; 408 (1-2): 75-78.

Revisado 16 Sep 10 bm
Rev. 001

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PARA SU USO PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Para el anlisis cuantitativo in vitro de la Urea en suero, plasma y Slo para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca. Ejecutar
orina. Este producto es adecuado para uso Manual. las precauciones normales requeridas para el manejo de
reactivos de laboratorio.
No. Cat.
UR 107 R1a. Ureasa 5 x 1 ml La solucin R1a contiene Azida Sdica. Evitar su ingestin o el
5 x 100 ml R1b. Tampn Fosfato 5 x 100 ml contacto con la piel o las membranas mucosas. En caso de
R2. Hipoclorito 1 x 100 ml contacto con la piel, lavar la zona afectada con abundante agua.
CAL. Patrn 1 x 5.5 ml En caso de contacto con los ojos o ingestin, buscar atencin
mdica inmediatamente.
METODO COLORIMETRICO(1,2)
El Azida Sdica reacciona con el plomo y cobre de las caeras,
PRINCIPIO formando cidos potencialmente explosivos. Cuando se eliminen
El mtodo se basa en la siguiente reaccin:- dichos reactivos, limpiar con grandes volmenes de agua para
ureasa evitar la formacin de cidos. Las superficies metlicas expuestas,
Urea + H2O 2NH3 + CO2 debern limpiarse con hidrxido de sodio al 10%.

El Salicilato y el hipoclorito en el reactivo reaccionan con los Hojas Sanitarias y de Seguridad estn disponibles si se desean.
iones de amonio para formar un complejo verde (2.2
dicarboxilindofenol). Los reactivos deben ser utilizados slo para los
propsitos indicados por personal adecuado cualificado
MUESTRA de laboratorio bajo condiciones apropiadas de
Suero, EDTA, plasma tratado con citrato o heparinizado. laboratorio.
Orina diluda 1+20 en agua destilada. Multiplicar el resultado por
21. ESTABILIDAD Y PREPARACION DE LOS REACTIVOS
La Ureasa R1a, el Tampn Fosfato R1b, el Hipoclorito Sdico R2
COMPOSICION DEL REACTIVO y el Patrn estn listo para su uso. Estable hasta la fecha de
caducidad cuando se conservan entre +2 y +8C.
Componentes Concentraciones Iniciales
SA
de las soluciones ESTABILIDAD Y PREPARACION DEL REACTIVO DE
TRABAJO (R1)
R1a. Ureasa 5000 U/l Aadir 1 frasco de ureasa a R1a botella de Tampn Fosfato R1b.
M

R1b. Tampn Fosfato 120 mmol/l, pH 7,0 Estable durante 1 mes entre +2 y +8C protegido de la luz.
Salicilato Sdico 63,4 mmol/l
Nitroprsido Sdico 5,00 mmol/l MATERIALES SUMINISTRADOS
AA

EDTA 1,5 mmol/l Ureasa

R2. Hipoclorito Sdico 18 mmol/l Tampn Fosfato
Hidrxido Sdico 750 mmol/l Hipoclorito Sdico
CAL. Patrn Vedi inserto lotto-specifico Patrn
G

MATERIALES NECESARIOS PERO NO

SUMINISTRADOS
Multisueros Valorados Randox Nivel 2 (No. Cat. HN 1530) y
Nivel 3 (No. Cat. HE 1532)

NOTAS DE PROCEDIMIENTO
Utilizar cristal libre de iones de amonio.
El Reactivo 2 se puede diluir 1+4 con agua doblemente destilada
(estable durante 6 meses entre +2 y +8C). Despus se utiliza
1 ml de Reactivo 2 en la prueba. El volumen final de la reaccin
ser 2 ml y la linealidad
50 mmol/l (3 g/l).

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 MANUAL UR 107

PROCEDIMIENTO LINEARIDAD
El mtodo es lineal hasta 33,3 mmol/l (200 mg/dl) en el suero o
Longitud de onda: 600 nm (Hg 578 nm - Hg 623 nm) plasma, y 700 mmol/l (4195 mg/dl) en la orina. Las muestras con
Cubeta: 1 cm de espesor concentraciones ms elevadas se diluirn 1 + 1 con NaCl al 0,9%
Temperatura: 25C, 37C y repetir la prueba. Multiplicar el resultado por 2.
Medicin: frente al blanco de reactivo
REFERENCIAS
Pipetear en los tubos de ensayo: 1. Fawcett, J.K., Scott, J.E., J. Clin. Path., 1960; 13: 156-159.
2. Patton, C.J., Crouch, S.R., Anal. Chem., 1977; 49: 464-469
Blanco de Patrn Muestrea
Reactivo

Patrn - 10 l -
Muestra - - 10 l
Reactivo de
trabajo (R1) 1000 l 1000 l 1000 l

Mezclar. Incubar durante al menos 3 min a 37C 5 min a 20-

25C.

Sodio 200 l 200 l 200 l

Hipoclorito (R2)

Mezclar. Incubar durante al menos 5 min a 37C 10 min a

20-25C. Medir la absorbancia del patrn (Apatrn) y la
absorbancia de la muestra (Amuestra) frente al blanco de reactivo
durante las siguientes 2 horas.
SA
CALCULO
Amuestra
Conc. de urea = x Conc. de (mmol/l)
Apatrn patrn
M

Amuestra
Conc. de urea = x (mg/dl)
AA

Conc. de
Apatrn patrn

CONTROL DE CALIDAD
G

Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel

3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de
controles al menos una vez al da. Los valores obtenidos debern
encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se
encuentran fuera del rango y su repeticin excluye error, se
debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar programacin del instrumento y la lmpara
2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento
bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los
Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28 94422413.

VALORES DE NORMALIDAD
Suero o plasma: 2,5 7,5 mmol/l (0,15 0,45 g/l)
Orina: 338 - 583 mmol/24h (20 - 35 g/24h)

Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango

de referencia que refleje la edad, sexo, dieta y localidad
geogrfica de la poblacin.

Revisado 30 Jan 09 bm
Rev. 001

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UREA TOMA Y PREPARACION DE LA MUESTRA(3,4)
Suero/Plasma: La Heparina se puede utilizar como
Mtodo Enzimtico Cintico anticoagulante.
MANUAL No utilizar heparinato de amonio.
RX MONZA Orina (24 h): Recoger la orina sin aditivos: refrigerar tras la
toma4
PARA SU USO. Se recomienda una dilucin de 1+20 con NaCl
Para el anlisis cuantitativo in vitro de la Urea en suero, plasma y al 0,9%. Multiplicar el resultado
orina. Este producto es adecuado para un uso manual o en el por 21.
analizador Rx Monza.
La Urea es estable en el suero/plasma durante 1 da a +25oC, 3
No. Cat. das a +2 y +8oC, 3 meses a -20oC.
UR 220 R1a. Tampn 1 x 100 ml La Urea es estable en la orina durante 4 das cuando se conserva
6 x 15 ml R1b. Reactivo Enzima 6 x 15 ml entre +2 y +8oC3.
CAL. Patrn 1 x 5.5 ml
COMPOSICION DEL REACTIVO
UR 221 R1a. Tampn 10 x 50 ml
10 x 50 ml R1b. Reactivo Enzima 10 x 50 ml Componentes Concentracin Inicial de las Soluciones
CAL. Patrn 1 x 5.5 ml
R1a. Tampn
UR 2364 R1a. Tampn 6 x 500 ml Tampn Tris 150 mmol/l, pH 7,6
6 x 500 ml R1b. Reactivo Enzima 6 x 500 ml R1b. Reactivo Enzima
CAL. Patrn 1 x 5.5 ml Ureasa 10 U/ml
GLDH 2 U/ml
SIGNIFICADO CLINICO(1,2) NADH 0,26 mmol/l
La urea se sintetiza en el hgado a partir del amonaco, como Adenosina-5-difosfato 3 mmol/l
resultado de la desaminacin de amino cidos. Esta biosntesis es -oxoglutarato 14 mmol/l
el mecanismo principal de eliminacin del exceso de nitrgeno CAL. Patrn Especifico para cada lote
en el organismo. Las mediciones obtenidas en este anlisis se
SA
utilizan en el diagnstico de anomalas metablicas y sobre todo
renales. Se debe destruir ms del 60% del rin antes de que los PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
niveles de urea en plasma aumenten significativamente. Este test Slo para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca. Ejecutar
M

se utiliza ms frecuentemente junto con el de la creatinina srica las precauciones normales requeridas para el manejo de
para niveles de protenas elevados (descompensacin cardaca, reactivos de laboratorio.
reduccin de agua).
AA

La solucin R1a y el Patrn contienen azida sdica. Evitar su

En 1913, Marshall1 introdujo un anlisis utilizando ureasa para la ingestin o el contacto con la piel o las membranas mucosas. En
determinacin de urea en la sangre. Se realizaba la valoracin del caso de contacto con la piel, lavar la zona afectada con abundante
amonaco liberado a partir de la urea por medicin de la ureasa. agua. En caso de contacto con los ojos o ingestin, buscar
G

Desde entonces se han utilizado muchas otras tcnicas para atencin mdica inmediatamente.
medir el amonaco producido.
El Azida Sdica reacciona con el plomo y cobre de las caeras,
En 1965 Talke y Schubert2 crearon un procedimiento enzimtico formando cidos potencialmente explosivos. Cuando se eliminen
para la determinacin de urea, utilizando el sistema enzimtico dichos reactivos, limpiar con grandes volmenes de agua para
asociado de ureasa - GLDH (Glutamato deshidrogenasa). evitar la formacin de cidos. Las superficies metlicas expuestas,
debern limpiarse con hidrxido de sodio al 10%.
METODO UV(1,2)
La urea se hidroliza en presencia de agua y ureasa para producir Hojas Sanitarias y de Seguridad estn disponibles si se desean.
amonaco y dixido de carbono. El amonaco producido en la
primera reaccin se combina con -oxoglutarato y NADH en Los reactivos deben ser utilizados slo para los
presencia de glutamato deshidrogenasa para producir glutamato propsitos indicados por personal adecuado cualificado
y NAD+. de laboratorio bajo condiciones apropiadas de
laboratorio.
PRINCIPIO
ureasa
Urea + H2O 2 NH3 + CO2
GLDH
2 -oxoglutarato + 2 NH4+ + 2 NADH 2 L- glutamato +
2 NAD+ + 2 H2O

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 MANUAL UR 220

ESTABILIDAD Y PREPARACION DE LOS REACTIVOS PARA USO MANUAL

R1a. Tampn
Listo para usar. Estable hasta la fecha de caducidad cuando Longitud de onda: 340 nm (Hg 334 nm or Hg 365 nm)
se conserva entre +2 y +8C. Cubeta: 1 cm de espesor
R1b. Reactivo Enzima Temperatura de reaccin: 37C
UR 220 Medicin: Frente al blanco de reactivo
Reconstituir un vial de Reactivo Enzima 2 con 15 ml de
Tampn 1. Estable durante 4 semanas entre +2 y +8C 2 Pipetear en la cubeta:
das entre +15 y +25C.
Reactivo Patrn Muestra (l)
UR 221, UR 2364 Blanco (l)
Reconstituir el contenido de un vial de Reactivo Enzima 2
con una parte de Tampn 1 y transferir el contenido
entero a la botella Tampn 1, enjuagando la botella Patrn -- 10 --
Reactivo Enzima 2 varias veces. Estable durante 4 semanas Muestra -- -- 10
entre +2 y +8C 2 das entre +15 y +25C. Reactivo 1000 1000 1000

CAL. Patrn Mezclar, leer la absorbancia inicial despus de 30 segundos y

Listo para usar. Estable hasta la fecha de caducidad activar el temporizador de forma simultnea. Leer de nuevo
cuando se conserva entre +2 y +8C. despus de 1, 2 y 3 minutos.

MATERIALES SUMINISTRADOS CALIBRACIN PARA EL USO MANUAL

Tampn Se recomienda para la calibracin urea estndar Randox. Por
Reactivo Enzima favor, consulte la hoja de lote especfico.
Patrn La recalibracin se debe completar para cada serie de muestras
analizadas. Consulte el apropiado manual de operador o la hoja
MATERIALES NECESARIOS PERO NO de aplicaciones para instrucciones especficas de calibracin del
SUMINISTRADOS analizador. La norma est preparada gravimtricamente
Dispositivos para pipeteo adecuados para la entrega de 10 l y utilizando urea pura disponible comercialmente.
SA
1000 l.
Dispositivo temporizador y bloque calentador o bao de de agua CLCULO MANUAL
para mantener 37C. Un espectrofotmetro con capacidad de Para calcular la concentracion de urea utilizar la siguiente
M

longitud de onda de 340/334/365 nm. frmula:

Multisera ensayada Randox Nivel 2 (Cat. N HN 1530) y Nivel 3 AMuestra
(Cat. N HE 1532) Conc de Urea = x Concentracin del patrn
AA

Suero de calibracin Randox Nivel 3 (Cat. No. CAL 2351) (mmol/l or mg/dl) APatrn
Para convertir las unidades convencionales de SI4 unidades de
NOTA
multiplicar las unidades convencionales por 0.166.
G

Se pueden usar todos los anticoagulantes excepto heparinato de

amonio.
mg/dl urea x 0.166 = mmol/l urea
PROCEDURE eg. 20 mg/dl Urea = 20 x 0.166 = 3.32 mmol/l
Usando ddH2O realizar una nueva calibracin de ganancia en el
modo flujo de clula. Seleccione UREA en la pantalla Ejecutar NORMALIZACIN
prueba y llevar a cabo un blanco de agua segn las instrucciones. Suero Calibracin Randox Nivel 3 es atribuible a la urea material
de referencia NIST 909b.
Pipetear en tubos de ensayo:
CONTROL DE CALIDAD
Reactivo Blanco S0 Patrn S1 Muestra Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel
3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de
ddH2O 5 l - - controles al menos una vez al da. Los valores obtenidos debern
Patrn - 5 l - encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se
Muestra - - 5 l encuentran fuera del rango y su repeticin excluye error, se
Reactivo 500 l 500 l 500 l debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar programacin del instrumento y la lmpara
Mezclar y aspirar en la Rx Monza. 2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento
CALIBRACIN PARA RX MONZA bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
Se recomiendan para calibracin urea estndar Randox 4. Comprobar la temperatura de reaccin
proporcionado en el kit o suero de Calibracin Randox Nivel 3. 5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
La norma est preparada gravimtricamente utilizando urea pura 6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los
disponible comercialmente. Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28 94422413.
Calibrar en el cambio de lote del reactivo o como se indica en
los procedimientos de control de calidad.

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 MANUAL UR 220

ESPECIFICIDAD/LIMITACIONES(5,6)
Se analiz la posible interferencia de la Bilirrubina hasta 20 mg/dl
y se encontr que no interfiere. Las muestras altamente
lipmicas pueden causar errores de absorbancia, por lo que la
muestra se debe de diluir. Se analiz la posible interferencia de la
hemlisis hasta 500 mg/dl y se encontr que no interfiere.
Se debe tomar especial cuidado para prevenir la contaminacin
con amonaco de las muestras que se vayan a analizar para urea.
El amonaco existente en la atmsfera, en la habitacin, en el
agua o en el reactivo podra elevar los resultados del anlisis.
Young et al5 y Friedman et al6 dan una lista de sustancias y
condiciones que se sabe afectan a los niveles de urea. Randox no
se hace responsable de la integridad o exactitud de la
informacin contenida en estas listas.
VALORES DE NORMALIDAD (7)
Suero/Plasma 1.7-8.3 mmol/l (10-50 mg/dl)
Orina (24 Horas) 333-583 mmol/l (20-35 g/24 h)
Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango
de referencia para considerar las differencias en edad, sexo, dieta
y localizacin geogrfica.
CARACTERISTICAS ESPECIFICAS DE
FUNCIONAMIENTO
Los siguientes datos de rendimiento se obtuvieron usando un
analizador Rx Monza funcionando a una temperatura de 37 C
con el volumen de aspiracin fijado en 500 l.
SUERO
M
CORRELATION
This method (Y) was compared with another commercially
available method (X) and the following linear regression equation
obtained:
Y = 1.089 X - 0.446
and a correlation coefficient of r = 0.9935
43 patient samples were analyzed spanning the range 4.1 to 49
mmol/l.
ORINA
LINEARIDAD
El mtodo es lineal hasta 958 mmol / l (5757mg/dl). Diluir las
muestras con una concentracin ms alta a 1 +1 con 0,9% de
solucin de NaCl y repetir prueba. Multiplique el resultado por
2.
SENSIBILIDAD
La concentracin mnima detectable de Urea con un nivel
aceptable de precisin se ha determinado en 43.2 mmol/l.
REFERENCIAS
1. Marshall EK Jr: J Biol Chem 1913; 15:487.
2. Talke H; Schubert GE: Klin Wschr 1965; 43:174.
3. Tietz N. W., Textbook of Clinical Chemistry.
W.B. Saunders Co, 1987, 1254-1316.
4. Tietz N.N: Clinical Guide to Laboratory Tests Philadelphia.
SA
W.B. Saunders Co, 1983 pg 494.
5. Young D.S., Pestaner, L.C., Gibbermann, V. Clin. Chem,
1975; 21: No.5.

6. Friedmann R.B, et al: Clin Chem 1980; 26 No.4.

LINEARIDAD 7. Kerscher,L; Tieqenhorn,J; Methods of enzymatic Analysis,
El mtodo es lineal hasta 50.3 mmol/l (302 mg/dl). Para H.U. Bergmeyer Ed., VCH
AA

concentraciones superiores diluir la muestra 1+1 con NaCl al Verlagsgesellschaft, Weinheim, 1985 3rd Ed; Vd VII, p.453.
0,9% y repetir la prueba. Multiplicar el resultado por 2.

SENSIBILIDAD
G

La concentracin mnima detectable de Urea con un nivel

aceptable de precisin se ha determinado en 2,13 mmol/l.

PRECISION

Anlisis (Intra)
Nivel 1 Nivel 2
Media (mmol/l) 6.87 19.5
DE 0.312 0.515
CV(%) 4.55 2.64
n 20 20

Anlisis (Inter)
Nivel 1 Nivel 2
Media (mmol/l) 6.87 19.5
DE 0.37 1.18
CV(%) 5.41 6.02
n 20 20

Revisado 16 Sep 10 bm
Rev. 001

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