S.

Larrana,b,
*,MRSimnb,MVMorenoc,d,MPSantamarinaSiuranae,A.Perellosebuah,d
sebuahCentrodeInvestigacionesdeFitopatologa(CIDEFI),FacultaddeCienciasAgrariasyForestales,Universidad
NacionaldeLaPlata,60y119,1900LaPlata,BuenosAires,ArgentinabCerealicultura,FacultaddeCienciasAgrariasy
Forestales,UniversidadNacionaldeLaPlata,BuenosAires,ArgentinacLaboratoriodeBiologaFuncionalyBiotecnologa
(Biolab),FacultaddeAgronomiadeAzul,UniversidadNacionaldelCentrodelaprovinciadeBuenosAires,Argentinad
ConsejoNacionaldeInvestigacionesCientficasyTcnicas(CONICET),ArgentinaeDepartamentodeEcosistemas
Agroforestales,EscuelaTcnicaungguldelMedioRuralyEnologa,UniversidadPolitcnicadeValencia,Spanyol
menyoroti
pengaruhendofitikdarigandumterhadapDrechsleratriticirepentisdievaluasi.Beberapaendofitikmengurangimiselium
pertumbuhandansporapatogen.HifadankonidiadariDrechsleratriticirepentisyangalteratedolehendofitik.Endofitikdari
daungandumyang
efektifdalammengurangitempatkeparahantan.Bacillussp.bencipatogen
berhasildalamsemuates.
graphicalabstract
articleinfo
Pasalsejarah:Diterima1April2014Revisi9Agustus2015Diterima10September2015Tersediaonline11September2015
Keywords:jamurendofitendofitikTriticumaestivumPyrenophoratriticirepentisTantempat
abstrak
endofitikdari kultivar gandum terisolasi di provinsi Buenos Aires, Argentina, dinilai untuk potensi mereka sebagai agen
biokontrol terhadap Pyrenophora triticirepentis (Meninggal.) Drechsler (anamorph Drechslera triticirepentis) (Meninggal.)
Shoem(DTR),agenpenyebabdaritempattangandum.Endofitikdisaringmenggunakanteknikkulturgandadanmemeriksaefek
padapertumbuhan,sporulasidanaktivitasgalantifunditesrumahkaca.Sebagianendofitikdiujisecarasignifikanmengurangi
DTRpertumbuhancomdikupasdengankontrolkecualiRhodotorularubra1115haripascainokulasi.Trichodermahamatum,
Penicilliumsp.,Bacillussp.danPaecilomyceslilacinussecarasignifikanmengurangidiameterkolonipatogen.Sebagianbesar
endofitikdievaluasimenunjukkanperubahanmorfologidikonidiadan/ataumiseliadariD.triticirepentis.Selainitu,dua
endofitik,Bacillussp.danFusariumsp.,berkurangdapattercapaiperkecambahanpersensporadariDTRdibandingkandengan
kontroldenganmasingmasing82%dan52%.DalamrumahkacapercobaanT.hamatum,ChaetomiumglobosumdanFusarium
sp.secarasignifikan(P60,05)mengurangikeparahanpenyakitrataratapadasemuatigadaundibandingkandengankontrol.
Namun,efekantagonisterbaikditunjukkandenganT.hamatumkarenamengakibatkanpenindasanterbesardalamrumahhijau
danditesdualpiring.Demikianjuga,Bacillussp.adalahmikroorganismeyangbencipatogendalamtesinvitrolainnyadisorot.
Darihasilyangmenjanjikan,kamimenyimpulkanbahwaendofitmemilikipotensidalamkontrolbiologistempattangandum
yangdisebabkanolehD.triticirepentis,khususnyaT.hamatumdanBacillussp.
2015ElsevierIncAllrightsreserved.
*
PenulisSesuaidi:CentrodeInvestigacionesdeFitopatologa(CIDEFI),FacultaddeCienciasAgrariasyForestales,
UniversidadNacionaldeLaPlata,60y119,1900LaPlata,BuenosAires,Argentina.
AlamatEmail:silvinalar@gmail.com(S.Larran).
http://dx.doi.org/10.1016/j.biocontrol.2015.09.00210499644/2015ElsevierIncAllrightsreserved.
PengendalianHayati92(2016)1723

endofitikdarigandumsebagaiagenbiokontrolterhadaptanpenyakitbercak
IsidaftartersediadiScienceDirect
Biological
homepagejurnalControl:www.elsevier.com/locate/ybcon
1.Pendahuluan

endofitjamur, berbagai kelompok ascomycetous jamur didefinisikan secara fungsional oleh terjadinya mereka dalam
menggugattisasimtomatiktanaman,telahditemukandisemuakeluargatanaman(Arnold,2007).Demikianjuga,berbagai
generabakteridapatdiisolasidarijaringantanamanwajahdidesinfeksisurataudiekstrakdaribagiandalambagiantanaman
(Chanway,1988;.Hallmannetal,1997;.QuadtHallmannetal,1997).
Peranmasyarakatendofitdiendofit/tanamantionsassociatelahdibahassecaraintensif(PorrasAlfarodanBayman,2011;
Sturtzetal,2000.).Endofitikberinteraksidengan,dantumpangtindihdalamfungsidengan,kelompoklainintimikrobayang
menjajahjaringantanaman,misalnyapatogen,epifit,dansaprotrophs(PorrasAlfarodanBayman,2011).Halinimenunjukkan
bahwakehadiranendofitdalamjaringantanamandapatmemberikankeuntungantertentuuntuktanamaninang(Carroll,1991).
Beberapaendofitikjamurmempengaruhipertumbuhantanamandanrespontanamanterhadappatogen,herbivoradanperubahan
lingkungan;oranglaindapatmemberikantoleransitermaluntukhostmereka(Arnold,2007;PorrasAlfarodanBayman,2011;
Sturtzetal,1998.).Jugabakteriendofitdiketahuimerangsangpertumbuhantanamaninang,baikmelaluiantagonismelangsung
mikrobapatogenataudenganmenginduksiresistensisistemikuntukorganismepenyebabpenyakit(Arnold,2007;Duijffetal,
1997;..Plebanetal,1995;Sturtzetal.,1998).
Endofitikdenganefekbiokontroltelahmenerimaperhatiansebagaialternatifuntukpengendalianpenyakitkimiayangjuga
mengurangipenggunaanbahankimiaberbahaya(Baconetal,2001;.BacondanHinton,2007;PorrasAlfarodanBayman,2011).
Sebagaicontoh,endofitikbakteriyangdiisolasidarijagungsebagaiBacillussubtilisdanBacillusmojavensistelahmenunjukkan
potensibesardalambiokontrolFusariummoniliformepadajagungdanmengurangibibithawargandumyangdisebabkanoleh
Fusariumgraminearumdanspesiesmasingmasingterkait(Baconetal,2001;.BacondanHinton,2007).Trichodermaspp.dan
lainlainjamurendofitdiisolasidaridaundanpolongdariTheobromacacaotelahmenunjukkanefekantagonisterhadaptigamon
palingcomdanpatogenekonomispentingdarikakao(Phytophthorapalmivora,Moniliophthoraroreri,danMoniliophthora
perniciosa)(Baileyetal,2006;.Mejaetal.,2008).Haliniditunjukkandalambeberapapathosystemsbahwaendofitikadalah
agenbiokontrolefektifyangmengurangikeparahanpenyakitpenyakittanaman(Carroll,1988;Narisawaetal,1998;.Wicklowet
al.,2005).
Kehadiranendofitikdalamgandumtelahditunjukkanolehbeberapapenulis(Sieberetal,1988;.Crousetal,1995;.Istifadah
danMcGee,2006;Istifadahetal,2006.)TapiadasedikitpenelitianmengenaiasosiasiendofitdigandumdiArgentina(Larranet
al., 1999, 2002a, 2007). Penelitian kami sebelumnya telah difokuskan pada esti kawin kelimpahan dan / atau keragaman
endofitikjamurassocidiciptakandenganjaringanhostpentingagronomiyangberbeda(Larranetal.,2000,2001,2002b).
DalamstudiyangdilakukanolehLarranetal.(1999,2002a,2007)diArgentina,Serratiasp.,Alternariaalternata,Chaetomium
globosum,Cladosporiumherbarum,Epicoccumnigrum,Cryptococcussp.,Rhodotorularubra,Penicilliumsp.,Bacillussp.,F.
graminearum,BipolarissorokinianadanTrichodermahamatumsecarakonsistenpulihdaridaundanbatangtanamangandum
yangsehat.
TantempatgandumyangdisebabkanolehPyrenophoratriticirepentis(Meninggal.)Drechsler(anamorphDrechsleratritici
repentis)(Meninggal.)Shoem(DTR)adalahsalahsatupenyakitgandumdaunyangpalingmerusakdiseluruhdunia,termasuk
Argentina(MorenodanPerello,2010).Kontrolbiologismenggunakanantagonistelahditelitidalambeberapatahunterakhir
untukminimizepenggunaanbahankimia(PerellodanMnaco,2007;PerellodanDalBello,2011).Potensinonpatogenik
mikroflorasaprofitbagiantanamanudarauntukpengendalianbiologisserealpatogentelahdiakui(Fokkemaetal.,1979).Spesies
Trichodermadiisolasidariphylloplanegandumtelahextension
18S.Larranetal./PengendalianHayati92(2016)1723
sivelydipelajariuntukpotensibiokontrolmerekaterhadapDTR(Perelloetal.,2003,2008).
PenelitiansebelumnyapadajamurendofittelahmenunjukkanbahwaChaetomiumsp.terisolasidaridaungandumyangsehat
mengurangijumlahdanpengembanganpustuladarikaratdaunPucciniareconditaf.sp.tritici(begodanMcGee,2003).Selain
itu,spesiesyangberbedadariChaetomiummenghambatpertumbuhanP.triticirepentisinvitro(IstifadahdanMcGee,2006;.
Istifadahetal,2006).
Padapenelitianini,percobaandilakukanuntukmengevaluasiefekantagonissepuluhmikroorganismeendofitdaritanaman
gandumyangsehatterhadapDTRuntukpotensimerekasebagaiagenbiokontroldaritempattan.
2.Bahandanmetode
2.1.Isolatdanbudaya
AmonosporikmengisolasiDTRLH019daripatogentempattanD.triticirepentisdigunakandalamsemuapercobaan.Isolat
originallydiperolehdaritanamangandumyangterinfeksitumbuhpadabidangeksperimental''J.HirschhorndariFacultadde
CienciasAgrariasyForestales,UniversidadNacionaldeLaPlata,BuenosAires,tinaArgendandipeliharaatas2%Media
potatodextroseagar(PDA)budayapada5CsebagaibagiandarikoleksiCIDEFI.
Jamur, bakteri, dan endofitik ragi yang digunakan dalam karya ini diisolasi dari gandum dalam studi sebelumnya dan
dipeliharaatas2%PDApada5CdalamkoleksiCIDEFI(Larranetal.,2007).TheendofitikdievaluasiadalahA.alternata,
Bacillussp.,C.globosum,Cladosporumherbarum,E.nigrum,Fusariumsp.,Penicilliumsp.,Paecilomyceslilacinus,R.rubra
danT.hamatum.MetodologidanteknikyangdigunakanuntukisolasidanidentifikasidijelaskandalamLarranetal.(2007).
Bakteri, jamur dan ragi koloni disubkultur dalam cawan Petri di kedua agar nutrien (bakteri) atau PDA (jamur dan ragi).
Subkulturdiinkubasiselama4dan10hari,masingmasingsampaidigunakan.
2.2.ujipatogenisitas
Tespatogenisitasdilakukanuntukmemastikanbahwamikroorganismefitatyangendokapilardigunakandalampercobaanini
adalah non patogen pada gandum. Ini adalah sehubungan dengan fakta bahwa endofitik masyarakat selain mutualistik dan
comensalsimbionistic,dapatmencakuppatogenlatenataustrainyangvirulentetapiyangpesaingmiskinrelatifterhadaporang
lainjaringanmenjajahmikroorganisme(Arnold,2007;PorrasAlfarodanBayman,2011).
TheendofitikA.alternata,Bacillussp.,C.globosum,C.herbarum,E.nigrum,Fusariumsp.,Penicilliumsp.,P.lilacinus,R.
rubradanT.hamatumdievaluasiuntukpatogenisitasmenggunakan30haritanamangandumlamakultivarrentanBuckPoncho
dibawahkondisirumahkaca.Empattanamandimasingmasingduapotdisemprotsampailaridengansuspensidari2106
konidia/mlmasingmasingendofitjamurdisiapkandalamairsulingsterilyangmengandung0,1%(v/v)Tween20disesuaikan
denganhemositometera.Ragi,R.rubradanbakteriisolatBacillussp.yangditerapkanpada1 108CFU/mldisesuaikan
denganmenggunakanspektrofotometer(optiksitydenpada600nm).Tanamankontroldisemprotdenganairsulingsterilsaja.
Semuatanamandiinkubasiselama48jamdalamkantongplastikdankemudiandipertahankanpada202Cdalamrumahkaca
dandinilaiuntuktingkatkeparahanpenyakitsetiap3hariselama14hari.
2.3.Gangguanhifadanpenghambatanpertumbuhankoloni
Efekantagonisdari7jamur,1ragidan1bakteri(A.alternata,Bacillussp.,C.globosum,C.herbarum,Fusariumsp.,
Ium.Penicilliumsp.,P.lilacinus,R.rubradanT.hamatum)diuji
persentaseperkecambahankonidiadihitungdan
menggunakanteknikkulturdual.Agarcakram(6mmdiameter)dariendofitjamurditempatkan3.5cmjauhdariDTRpada
kumantabungtivekepadamerekakonidiapertumbuhandanvesikelkontrol.dataformasiyangjugaarcsin
dinilaip
xtranseratnya
9cmPetrihidanganyangmengandung2%PDA.Cakramdariendofitik
dibentukuntukmenyeragamkanvarianresidualdan
statistikdanpatogenyangdiambildaribudayadari10harituadan7
dianalisismenggunakananalisisvarians(ANOVA).
Saranayangcomharituamasingmasing.Bakteridanragiyangmelesatpada
dikupasdenganujiLSD(P60,05).piringdenganplug
patogen.Sebuahplugdenganpatogensendiriadalahkontrol.Semuapiringkulturdiinkubasipada242C.Percobaandiulang
duakalidanperlakuanrepli
2,5.Percobaanrumahkaca
berdedikasiempatkalidalamsetiappercobaan.Pertumbuhandtrdinilaidenganmengukurdiameterkoloni(cm)setelah3,7,11
dan15haripascainokulasidalamduaarah:diameter1(D1),diametertegaklurusdenganarahendofitik,dandiameter2(D2),
diameterarahendofittersebut.Pengukurandihentikanketikakolonimencapaitepipiringatauberhentitumbuh.Rataratadari
keduadiameterdihitung.Tingkatpertumbuhandianggapsebagaipertumbuhanharian(cm)dariDTRpervalantarwaktu(35;5
7;711,dan1115hari)antaraempatkaliuationevaldiuji.Tingkatpertumbuhandihitungsebagaicmperharipertumbuhan
DTRuntuksetiapintervalwaktu.Olehkarenaitutigatingkatpertumbuhan(Gr1,Gr2danGr3)ditentukansebagaiberikut:Gr1
=berartidiameterkoloniberakhirnilaiberartidiameterkolonimulaidarinilai/jumlahharidariintervalwaktu(4hari).
Pengamatanperubahanmorfologidilakukanpadakotakkecilagardipotongdaribidangpembauranpertumbuhandandarimargin
koloniuntukDTR.Potonganpotonganinidiperiksamenggunakanlingkupmikrocahaya.Interaksidinilaidenganmenggunakan
kunciberdasarkantionsobservadariPorter(1924)danDickinsondanBoardman(1971).Reratadiameter(D1+D2/2)dan
tingkatpertumbuhan(13)dianalisisdenganGENSTAT(2008)menggunakanmodellinierumum(GLM)untukpengukuran
ulangdenganpercobaan,kalidanendofitiksebagaifaktor.BerartidibandingkandenganujiLSD(P60,05).
Penelitianinidirancanguntukmenentukanapakahprainokulasidaundenganendofitikgandum,Bacillussp.,C.globosum,C.
herbarum,E.nigrum,Fusariumsp.,Penicilliumsp.,P.lilacinus,R.rubra,danT.hamatummemilikiefekantagonisterhadap
DTRpadabibitgandum.Duapercobaandalamrancanganacaklengkapdilakukandirumahkaca.Limabijidarikultivargandum
BuckPonchoditaburkandi12cmpotplastikberdiameterdirumahhijaupadasuhuberkisarantara15sampai25Cdengan
photoperiod14h.Salahsatupercobaanmemiliki4ulangan,sedangkanvariabeljumlahulangan(310)telahmencetakgoldi
percobaanlainnya.Tanamandiinokulasipadatahappertumbuhan15menurutZadoksetal.(1974)sampailimpasandengan
suspensimasingmasingdariendofitikmenggunakanalatpenyemprotgenggam.Theendofitikyangditerapkanuntukdaundalam
airsulingdengan0,02%Tween80,1harisebelumpatogen.Suspensipatogendanphytesendokapilardisusunolehmembanjiri4
dan10harituabudaya(bakteri,ragidanjamur,masingmasing)denganairsulingsterildankemudianmenggosokbudaya
permukaandenganbatanggelassteril.Suspensivortexeddandisaringmelaluidualapisankaintipis.Konsentrasikonidiayang
digunakanuntukDTRadalah2105konidia/ml,sedangkanuntukjamuryangendofitik2106konidia/mldisiapkan.Ragi
dan bakteri yang digunakan pada 1 108 CFU / ml. Konsentrasi disesuaikan dengan bantuan hemositometer dan
spektrofotometeruntukjamurdanragi,danuntukbakterimasingmasingsepertidijelaskandiatas.Kontrol
2.4.Penghambatanperkecambahanspora
tanamandiinokulasidenganpatogenhanyasampailimpasanmenggunakanalatpenyemprotgenggam.Semuatanamandiinkubasi
selama48jamdalamplastik
PenelitianinidirancanguntukmengevaluasiefekantagonisendofitikBacillussp.,C.globosum,C.herbarum,E.nigrum,
Fusariumsp.,Penicilliumsp.,P.lilacinus,R.rubradanT.hamatumterhadapDTRdalamujisuspensidipasangkan.
tasdankemudiandipertahankanpada202Cdalamrumahkaca.Thedevelopmentdaripenyakitbercaktandinilaidengan
memperkirakanusiapersenluasdaunnekrotikpadatigadauntermudadarisetiaptanamanperperlakuansetelah12hari.Data
arcsin
Tetesan(50ml)dari1:1suspensikonidiadarisetiapkombinasigenendofitpatogenesisyangdipipetkedalamsumurdari
slideronggakaca.Tetesanserupapatogensajayangdigunakansebagaikontrol.KonsentrasikonidiadariDTRadalah2105
konidia/mldanendofitikjamuradalah2106konidia/ml.Ragidanbakteriyangdigunakanpada1108CFU/ml.Semua
konsentrasidisesuaikansepertidijelaskandiatas.Slidediinkubasidiruangkelembabankecildi242Cdalamkegelapan
selama 48 jam dan kemudian diperiksa menggunakan mikroskop cahaya. Spora dinilai dari tiga ulangan dari 12 bidang
mikroskopispada100dan200Aperbesaran.Sebuahkonidiumdianggaptelahberkecambahjikakumantabunglebihdarisatu
setengahdaripanjangconid
p
xberubahuntukmenyesuaikandistribusinormaldanmenormalkanvarians
residual.PengaruhmasingmasingendofitdievaluasimelaluisebuahANOVAuntukrancanganacaklengkaptidakseimbang
denganKASIHpengalamandanendofitiksebagaifaktor.BerartidibandingkandenganujiLSD(P60,05).
3.Hasil

3.1.Ujipatogenisitas
Tespatogenisitasmenunjukkanbahwaendofitiktidakmenyebabkangejalapadatanamandiinokulasi.Hasilinimembawakita
Tabel1ANOVAuntukefekdariendofitterhadappertumbuhanDrechsleratriticirepentisdiempatkalievaluasiyangdiujiin
vitro.
SumbervariasiDFBerartipersegiFaPnilai
Percobaan10,2740,280,595endofitik9144,411150,30P60,001Percobaanendofitik90,4590,490,884Kesalahan60
0,961Evaluasikali3159,2171956,70P60,001kaliEvaluasipercobaan30,0961,180,307Evaluasikaliendofitik27
9,574117,66P60,001kaliEvaluasipercobaanendofitik270,1652,030,015Kesalahan1800,081
tesFisher.
S.Larranetal./PengendalianHayati92(2016)172319
Tabel2ANOVAuntuktingkatpertumbuhanDrechsleratriticirepentisterhadapendofitikpadaempatkalievaluasiyangdiujiin
vitro.
SumbervariasiDFBerartipersegiFaPnilai
Percobaan10,0020,450,504endofitik90,841176,49P60,001Percobaanendofitik90,0061,380,218Kesalahan570,005
Evaluasikali28,602935,01P60,001kaliEvaluasipercobaan20,0192,030,147Evaluasikaliendofitik180,57862,88P
60,001kaliEvaluasipercobaanendofitik180,0202,170,014Kesalahan1200,009
tesFisher.
untukmempertimbangkanmengevaluasipotensimerekasebagaiagenbiokontrolterhadapDTR.
3.2.Invitroaktivitasantagonistes
HasilyangdiperolehdalampercobaanbudayagandauntukmengevaluasiaktivitasantagonisdariendofitikterhadapDTR
menunjukkanbahwaadapengaruhyangsignifikan(P60,001)dariendofitik,kalievaluasidanendofitikkalievaluasiinteraksi
sehubungandenganDTRkoloniukuran(Tabel1dan2).Sebagianendofitikdiujisecarasignifikanmengurangipertumbuhan
DTRdibandingkandengankontrolkecualiR.rubra1115haripostinokulasi(Tabel3).SepertiyangditunjukkandalamTabel3,
efeksupresifadalahdemonterbaikdidemonstrasikandipertama37hari(Gr1).Tingkatpertumbuhan2dan3menghasilkan
nilaiyanglebihrendahkarenakoloniDTRmencapaihidangantepiPetrisetelah7hariatauberhentitumbuh.
KetikainteraksikolonidisemuakemungkinankombinasiberpasanganantaraendofitikdanDTRpadaPDAdievaluasikami
mengamatiberbagaijenisinteraksi.InteraksiDTRdenganphytesendokapilarditunjukkanpadaGambar.1danjenisberikut
ditugaskan: Tipe A: saling pembauran pertumbuhan, misalnya A. alternata dan Fusar ium sp. (. Gambar 1A); Ketik Bi:.
PertumbuhansalingpembauranmanaPenicilliumsp,P.lilacinusdanR.rubratumbuhdiatasDTR(.Gambar1B);KetikBii:
pertumbuhanpembauran,dimanaDTRtelahberhenti
Tabel3SaranadiameterdantingkatpertumbuhanDrechsleratriticirepentisdiempatkalievaluasidibawahinvitrotes.
DiameterpertumbuhanD.triticirepentis(cm)berarti
Tingkatpertumbuhan(Gr)***(haricm/)
3**71115Gr1Gr2Gr3
D.triticirepentis
(kontrol)
3.06d*8.80e9.00e9.00e1.43e0.05a0.00a
Alternaria
alternata
2.90cd6.08c6.22c6.41c0.79c0.03a0.05a
Bacillussp.1.39a2.49a2.72b2.86b0.25b0.08a0.03aChaetomiumglobosum
3.05d6.22c6.28c6.44c0.79c0.01a0.04a
Cladosporium
herbarum
2.95cd6.00c7.64d8.03d0.76c0.41b0.01a
Fusarium sp. 2.89cd 6.19c 6.24c 6.32c 0.83c 0.01a 0.02a Penicillium sp. 1.91ab 2.10a 2.11a 2.11a 0.04a 0.00a 0.00a
Paecilomyces
lilacinum
2.44bc3.22b3.22b3.22b0.20b0.00a0.00a
Rhodotorularubra3.07d7.50d9.00e9.00e1.10d0.38b0.00aTrichodermahamatum
1.73ab1.90a1.90a1.90a0.04a0.00a0.00a
 *Berartidiikutiolehhurufyangsamapadakolomyangsamatidakberbedasecarastatistik(P60,05),ujiLSD.
**kaliEvaluasi:3,7,11dan15hari.***Tingkatpertumbuhan(Gr):pertumbuhanharian(cm)dariDrechsleratriticirepentis
untukmasingmasingtigakaliselangantarakaliempatevaluasi:37;711dan1115.Grdihitungsebagaiberikut:gr=berarti
diameterkoloniberakhirnilaiberartidiameterkolonimulaidarinilai/jumlahharidariintervalwaktu(4hari).
20S.Larranetal./PengendalianBiologi92(2016)1723
pertumbuhandanditumbuhiolehT.hamatum,C.herbarumdanC.globosum(Gambar1C.);JenisD:salingmembatasijarak,di
manaDTRlawanBacillussp.(.Gambar1D);dankontrol(DTRsaja)(Gambar.1E).
Dalampercobaanuntukmengevaluasikemampuanendofitikuntukmenghambatperkecambahanspora,hasilmenunjukkan
bahwaduaendofitik,Bacillussp.danFusariumsp.,berkurangsecarasignifikanpersensporadariDTRdibandingkandengan
kontroldenganmasingmasing82%dan52%(Gambar.2).
Pemeriksaan mikroskopis dari patogen dipotong dari perimeter koloni dan dari uji suspensi dipasangkan menunjukkan
perbedaanyangjelasdalamhifadankonidiamorfologiantaraperlakuandankontrol.DalamkombinasidenganBacillussp.,
Fusariumsp.,C.globosum,Penicilliumsp.danR.rubra,konidiadariDTRdisajikanplasmolisisdanlebihpendekdanbengkak
kumantabungdievaluasiolehvisual.P.lilacinusjugamengakibatkanysisplasmolkonidiaDTR.Konidiumkumantabung
dengan pembentukan vesikel dan hifa vacuolation diamati di hadapan Bacillus sp. Penicillin lium sp. pembentukan
chlamydosporesdiinduksi.T.hamatum,Bacillussp.,C.globosum,P.lilacinumdanPenicilliumsp.perawatanexhibproduksi
itedsenyawaberpigmendidalamhifaataumedia.ZonamelanisasihifadindingdansisplasmolymiseliumdiamatiketikaDTR
dihadapkandenganT.hamatum(Gambar.3).Semuaperubahaninitidakdiamatidimediaataudibudayadenganpatogensaja.
3.3.Percobaanrumahkaca
HasilANOVAmenunjukkanbahwaadaencessignifikanberbeda(P60,001)antaraendofitikdalamtingkatkeparahandari
tempattanpadadaunpertama,keduadanketigadanuntukmeandaritigadaungandumdiinokulasidenganDTR(Tabel4).
Selainitu,penelitianmenunjukkanperbedaanyangsignifikanuntukdaunpertamadanusiaaver,tapitidakadainteraksiantara
eksperimendanendofitik.T.hamatum,C.globosum,danFusariumsp.secarasignifikan(P60,05)mengurangikeparahan
penyakitrataratapadasemuatigadaundibandingkandengankontrol(Tabel5).SebuahefekyangjelasdariT.hamatumdalam
mengurangidaerahpersentasedaunberpenyakitterutamadisorot.
4.Diskusi

DiArgentina,pengendalianbiologisdianggapsebagaipilihanyangmenarikbagipengelolaanbeberapapenyakittanaman.
Dalamstudisebelumnya,mikrofloradariphylloplanegandummenunjukkanpotensiuntukpengendalianhayatipatogengandum
jamurdanterhadapDTR(Perelloetal,2001,2002,2003,2008;.PerellodanMnaco,2007).Strategilaintionaladdibisa
menjadipenggunaanendofitantagonissebagaiagenkontrolbio(Baileyetal,2006;.BegodanMcGee,2003;Istifadahdan
McGee,2006;Arnold,2007).
 Semuaendofitikdinilaidalamkaryainisebelumnyaterisolasipadafrekuensitinggidaridaungandumtanpagejala(Larranet
al., 1999, 2002b, 2007). Demikian juga, karena endofit daun menempati relung ekologi sama dengan patogen daun, dapat
dihipotesiskanbahwaendofitdaunmungkinuntukmemilikipalingcocokuntukbiokontrolpatogendaunsebagaiDTR.
Sepertiyangditunjukkandalamhasilkerjakami,Bacillusbencipatogendalamsemuaujiinvitro.Menariknya,Bacillusspp.
memiliki
Gambar.1.jenisInteraksiantaraDrechsleratriticirepentis(DTR)danendofitikdalambudayadualon2%PDAsetelahlima
belashariinkubasi:(A)tipeA:salingpembauranpertumbuhanA.alternata/DTR;(B)tipeBi:salingpembauranpertumbuhan
Penicilliumsp.tumbuhdiatasD.triticirepentis;(C)ketikBii:pembauranpertumbuhanDTRtelahberhentipertumbuhandan
ditumbuhiolehT.hamatum;(D)jenisD:salingmembatasipadajarak.D.triticirepentislawanBacillussp.;(E)kontrol(DTR).
S.Larranetal./PengendalianHayati92(2016)172321
Gambar.2.SporeperkecambahanDrechsleratriticirepentisdihadapanmasingmasingsembilanendofitik.
dilaporkansebagaiagenbiokontrolsuksesolehbeberapapenulis(NielsendanSorensen,1997;.Alippietal,2000;.Kloepperet
al,2004).
Penurunantingkat perkecambahanspora danperubahan morfologiDTR selainpenurunan yangsignifikan dalamtingkat
keparahandaritempattandirumahkacaditunjukkanolehFusariumspdanC.globosum.Demikianjuga,senyawaberpigmen
yangdiamatidalamhifaataudimediadalamperawatandenganT.hamatum,Bacillussp.,
22S.Larranetal./PengendalianBiologi92(2016)1723
Gambar.3.mikrografCahaya(400A)miseliumdankonidiaperubahandariD.triticirepentis(DTR)dalambudayaganda:(A)
miseliumnormalDTR(kontrol);(B)chlamydospores(CHL)dansenyawaendapanberpigmendalammiselium(pp)(DTR/
Penicilliumsp.);(C)plasmolisismiselium(DTR/Trichodermahamatum);(D)zonamelanisasidaridindingselhifa(mz)(DTR/
Thamatum.);(E)konidianormalDTR;(F)lebihpendekdanbengkakkumantabungdanpembentukanvesikel(v)(DTR/
Bacillussp.)Dan(G)konidiumplasmolisis(DTR/Penicilliumsp.).Skalabar=sekitar7m.
Tabel4ANOVAuntukefekdariendofitdiinokulasipadatigagandumdaununtukmengurangitankeparahanpenyakitbercak.
SumbervariasidaunDFPertamadaunKeduadaunKetigaSecarakeseluruhanberarti
MSAFbnilaiPvalueMSFPnilaiMSFPnilaiMSFP
Percobaan10,1165,620,0200,0020,170,6800,00011endofitik90,1426.92P<0,0010,0727.31P<0,0010,0166,83P
<0,0010,04412,81P<0,001Percobaanendofitik90,0170,810,6070,0131,300,2530,003Kesalahan740,0210,0090,002
0,008
MS:berartipersegi.tesbFisher.
Tabel5PengaruhendofitikdalamtingkatkeparahanberartispottandisebabkanolehDrechsleratriticirepentisdievaluasipada
tigadaungandumdirumahkaca.
EndofitikPertama
daun
Keduadaun
Ketigadaun
Keseluruhanberarti
Berartipersentaseluasdaunyangsakit
Bacillussp.74.01c*14.58bcd0.76abcd29.78cChaetomiumglobosum54.32b10.93ab0.36abc21.87bCladosporiumherbarum
69.34bc19.10cde1.61def30.02cEpicoccumnigrum69.29bc22.87e0.99bcde31.05cFusariumsp.59.74b10.94ab0.34ab
23.67bPenicilliumsp.70.36cd24.59e1.67ef32.21cPaecilomyceslilacinus68.60bc11.88abc0.25a26.91bcRhodotorularubra
74.92c23.90e1.07bcde33.30cTrichodermahamatum38.89a7.27a0.20a15.46aControl.(D.trititirepentis
saja)
74.45c21.55de2.67f32.89c
*Berartidiikutiolehhurufyangsamapadakolomyangsamadalamperlakuanyangsamasecarastatistiktidakberbedasesuai
denganLSD(P60,05).Databackberubahberartidaritransformasiarcsin.
C.globosum,P.lilacinumdanPenicillimsp.Olehsisilain,Bacillussp.,Penicilliumsp.danP.lilacinumtelahterbuktiuntuk
menghasilkanplasmolisis,pembentukanchlamidosporesdanperubahankonidiasementaraT.hamatumdiproduksimelanisation
danhifaplasmolisis.
MengenaiTrichoderma,spesiesyangberbedatelahberhasilmembuktikanuntukbiokontrolpatogentanaman(Suttondan
Peng,1993;Elad,1994;Michereffetal,1995.),Diantaranyalatesisoendofityangtelahmenunjukkanefekantagonisterhadap
penyakit Theobromacacao (kakao) (Baileyet al., 2006) danterhadap layuFusarium darilentil (Dolatabadiet al., 2012).
Demikianjuga,Trichodermaspp.terisolasidariphylloplanegandummenunjukkanhambatanpertumbuhanmiseliumdankedua
konidiadanhifaplasmolisisdariDTR(Perelloetal.,2003,2006)danpengurangantingkatkeparahantempattandalamkondisi
lapangan(PerellodanDalBello,2011).MenuruthasilyangdiperolehdiharmatunpekerjaanT.kamiadalahcalonyangbaik
untukstudilebihlanjutkarenamengakibatkanpenindasanterbesardalamujirumahkacadandiujidualpiring.
LaporansebelumnyamenunjukkanbahwaspesiesChaetomiummenghambatP.pertumbuhantriticirepentisdiinvitrodanin
tesplanta(Istifadahetal,2006;.IstifadahdanMcGee,2006).Selamakami
invitromengujiendofitC.globosumdiproduksiperubahankonidiaDTR.Selainitu,dalampekerjaanPenicilliuminisp.danP.
lilacinusyangmenunjukkanpotensibesardalamujiinvitrosebagaiagenbiokontrolyangdikutipsebelumnyasebagaiantagonis
efisienterhadappenyakitbercakdaungandumdiArgentina(Perelloetal.,2002).
Selain jamur berfilamen dan bakteri efek R. rubra, ragi kosmopolit dan kontaminan umum (udara, tanah, dan tanaman)
menyebabkan mikosis oportunistik (Gyaurgieva et al., 1996) diuji dalam pekerjaan ini. Ragi ini sebelumnya terisolasi dari
phylloplanegandum(PerellodanMnaco,2007)danituantagoefeknistictelahdibuktikanterhadapjamurdigandumdaun
komplekspenyakitSeptoriatritici,B.sorokiniana,DTRdanAlterNariatriticimaculans.Menariknya,isolatkamiR.rubra
diproduksiplasmolisiskonidia, lebih pendek kumantabung patogen, danpenurunanyangsignifikandaritingkatkeparahan
tempattandidaungandumtermuda.
EfekantagonisendofitikdiujidisiniterhadapDTRdalambudayagandadikonfirmasidenganjelasolehhasilyangdiperoleh
di rumah hijauketika mereka pradiinokulasi dengan patogen pada daun gandum. Dari hasil yang menjanjikan, kami
menyimpulkanbahwaT.hamatumdanBacillussp.sangatdisorotdanbisamenjadikomponentantimpormanajemenpenyakit
gandumterintegrasi.
Referensi

Alippi,AM,Perello,AE,Sisterna,MN,Greco,NM,Cordo,CA,2000.Potensibakterimembentuksporasebagaiagenbiokontrol
penyakitdaungandumdalamkondisilaboratoriumdanrumahkaca.J.TanamanDis.Prot.107,155169.Arnold,EA,2007.
Memahamikeragamandaunjamurendofit:kemajuan,
tantangan,danperbatasan.JamurBiol.Wahyu21,5166.Bacon,CW,Hinton,DM,2007.Potensiuntukmengendalikanbibit
hawargandumyangdisebabkanolehFusariumgraminearumdanspesiesterkaitmenggunakanbakteriendofitBacillus
mojavensis.BiokontrolSci.Technol.17,8194.Bacon,CW,Yates,IE,Hinton,DM,Meredith,F.,2001.Pengendalianhayati
Fusariummoniliformepadajagung.Mengepung.Kesehatanperspect.109,325332.Bailey,BA,Bae,H.,Strem,MD,Roberts,
DP,Thomas,SE,tongkatuskup,J.,Samuels,GJ,Choi,I.Y.,Holmes,KA2006.jamurdangentanamanekspresiselamathe
colonizationofcacaoseedlingsbyendophyticisolatesoffourTrichodermaspecies.Planta224,14491464.Carroll,GC,1988.
Fungalendophytesinstemsandleaves:fromlatentpathogensto
mutualisticsymbiont.Ecology69,29.Carroll,GC,1991.Fungalassociatesofwoodyplantsasinsectantagonistsinleaves
andstems.In:Barbosa,P.,Krischick,VA,Jones,CG(Eds.),MicrobialMediationofPlantHerbivoreInteractions.Wiley,New
York.Chanway,KP,1988.Bacterialendophytes:ecologicalandpracticalimplications.
Sydowia50,149170.Crous,PW,Petrini,O.,Marais,GF,Petrorius,ZA,Rehder,F.,1995.Occurrenceoffungalendophytes
incultivarsofTriticumaestivuminSouthAfrica.Mycoscience36,105111.Dickinson,CH,Boardman,F.,1971.Physiological
studiesofsomefungiisolated
frompeat.Trans.Br.Mycol.Soc.55,293305.Dingle,J.,McGee,PA,2003.Someendophyticfungireducethedensityof
Puccinia
reconditafsp.triticiinwheat.Mycol.Res.107,310316.Dolatabadi,HK,MohammadiGoltapeh,E.,Mohammadi,N.,
Rabiey,M.,Rohani,N.,Varma,A.,2012.BiocontrolpotentialofrootendophyticfungiandTrichodermaspeciesagainst
Fusariumwiltoflentilunderinvitroandgreenhouseconditions.J.Agric.Sci.Technol.14,407420.Duijff,BJ,Gianinazzi
Pearson,V.,Lemanceau,P.,1997.Involvementoftheoutermembranelipopolisacharidesintheendophyticcolonizationof
tomatorootsbybiocontrolPseudomonasfluorescensstrainWCS417r.Barufitol.135,325334.Elad,Y.,1994.Biological
controlofgrapegreymoldbyTrichodermaharzianum.Crop
Prot.13,35.Fokkema,N.,DenHouter,J.,Kosterman,Y.,Nelis,A.,1979.Manipulationofyeastsgrownwheatleavesand
theirantagonisticeffectonCochliobolussativusandSeptorianodorum.Trans.Br.Mycol.Soc.72,1929.GenStat,2008.3rded.
VSNInternationalLtd.,UK.Gyaurgieva,OH,Bogomolova,TS,Gorshkova,GI,1996.Meningitiscausedby
RhodotorularubrainanHIVinfectedpatient.J.Med.Dokterhewan.Mycol.34,357359.Hallmann,J.,QuadtHallmann,A.,
Mahafee,WC,Kloepper,JW,1997.Bacterial
endophytesinagriculturalcrops.Bisa.J.Microbiol.43,895914.Istifadah,N.,McGee,P.,2006.EndophyticChaetomium
globosumreducesdevelopmentoftanspotinwheatcausedbyPyrenophoratriticirepentis.Aust.PlantPathol.35,411418.
Istifadah,N.,Saleeba,J.,McGee,P.,2006.IsolatesofendophyticChaetomiumspp.inhibitthefungalpathogenPyrenophora
triticirepentisinvitro.Bisa.J.Bot.84,11481155.
S.Larranetal./BiologicalControl92(2016)172323
Kloepper,JW,Ryu,CM,Zhang,S.,2004.Inducesystemicresistanceandpromotion
ofplantgrowthbyBacillusspp.Phytopathology94,12591266.Larran,S.,Perell,A.,Alippi,H.,1999.Determinacinde
hongosendfitosencultivaresdetrigopanysurelacinconlaexpresindepatgenosfoliaresnecrtofos.In:ActasXCongreso
LatinoamericanodeFitopatologa.Guadalajara,Jalisco,Mxico,p.79.Larran,S.,Mnaco,C.,Alippi,HE,2000.Endophytic
fungiinbeet(Betavulgarisvar.
esculentaL.)leaves.Adv.Horticult.Sci.14,193196.Larran,S.,Mnaco,C.,Alippi,HE,2001.Endophyticfungiinleaves
ofLycopersicon
esculentumMill.DuniaJ.Microbiol.Biotechnol.17,181184.Larran,S.,Perell,A.,Simn,MR,Moreno,V.,2002a.
Isolationandanalysisofendophyticmicroorganismsinwheat(TriticumaestivumL.)leaves.DuniaJ.Microbiol.Biotechnol.18,
683686.Larran,S.,Rolln,C.,BrunoAngeles,HJ,Alippi,HE,Urrutia,MI,2002b.Endophyticfungiinhealthysoybeanleaves.
Menginvestasikan.Agr.Melecut.Prot.Veg.17,173178.Larran,S.,Perell,A.,Simn,MR,2007.Theendophyticfungifrom
wheat(Triticum
aestivumL.).DuniaJ.Microbiol.Biotechnol.4,565572.Meja,LC,Rojas,EI,Maynarda,Z.,VanBael,S.,Arnold,AE,
Hebbar,P.,Samuels,GJ,Robbins,N.,Herre,EA,2008.EndophyticfungiasbiocontrolagentsofTheobromacacaopathogens.
Biocontrol46,414.Michereff,SJ,DaSilveira,NSS,Reis,A.,Mariano,RLR,1995.GreenhousescreeningofTrichoderma
isolatesforcontrolofCurvularialeafspotofyam.Micopathologia130,103108.Moreno,V.,Perell,A.,2010.Occurrenceof
PyrenophoratriticirepentiscausingtanspotinArgentina.In:Arya,A.,Perell,A.(Eds.),ManagementofFungalPlant
Pathogens.CABI,UnitedKingdom.Narisawa,K.,Tokumasu,S.,Hashiba,T.,1998.Suppressionofclubrootformationin
Chinesecabbagebytherootofendophyticfungus,Heteroconiumchaetospira.PlantPathol.47,206210.Nielsen,P.,Sorensen,
J.,1997.MultitargetandmediumindependentfungalantagonismbyhydrolyticenzymesinPaenibacilluspolymyxaandBacillus
pumilusstrainsfrombarleyrhizosphere.JaninMicrobiol.Ecol.22,183192.Perell,A.,DalBello,G.,2011.Suppressionoftan
spotandplantgrowthpromotionofwheatbysyntheticandbiologicinducersinfieldconditions.Ann.Appl.Biol.158,267274.
Perell,A.,Mnaco,C.,2007.StatusandprogressofbiologicalcontroloffoliardiseasesofwheatinArgentina.In:Kumar,
Pawan(Ed.),EcofriendlyManagementofSeedborneDiseases.ScientificPublishers,Jodhpur,India,pp.283321.Perell,A.,
Simn,MR,Sisterna,M.,Cordo,C.,Arambarri,AM,2001.Microfloraofwheat(TriticumaestivumL.)inBuenosAires
province(Argentina)anditspossiblesignificanceinbiologicalcontroloffoliarpathogens.Z.Pflanzankrankh.Pflanzanschutz
108,459471.Perell,A.,Simn,MR,Arambarri,AM,2002.Interactionbetweenfoliarpathogensandthesaprophytic
microfloraofthewheat(TriticumaestivumL.)phylloplane.J.Phytopathol.150,232243.Perell,A.,Mnaco,C.,Simn,MR,
Sisterna,M.,DalBello,G.,2003.BiocontrolefficacyofTrichodermaisolatesfortanspotofwheatinArgentina.CropProt.22,
10991106.Perell,A.,Mnaco,C.,Moreno,MV,Cordo,C.,Simn,MR,2006.TheeffectofTrichodermaharzianumandT.
koningiionthecontroloftanspot(Pyrenophoratriticirepentis)andleafblotch(Mycosphaerellagraminicola)ofwheatunder
fieldconditionsinArgentina.BiocontrolSci.Technol.16,803813.Perell,A.,Moreno,V.,Mnaco,C.,Simn,MR,2008.
EffectofTrichodermaspp.isolatesforbiologicalcontroloftanspotofwheatcausedbyPyrenophoratriticirepentisunderfield
conditionsinArgentina.Biocontrol53,895904.Pleban,S.,Ingel,F.,Chet,I.,1995.ControlofRhizoctoniasolaniand
SclerotiumrolfsiiinthegreenhouseusingendophyticBacillusspp.Eur.J.PlantPathol.101,665672.PorrasAlfaro,A.,
Bayman,P.,2011.Hiddenfungi,emergentproperties:endophytes
andmicrobiomes.Annu.Rev.Phytopathol.49,291315.Porter,CL,1924.Concerningthecharactersofcertainfungias
exhibitedbytheir
growthinthepresenceofotherfungi.Saya.J.Bot.11,168188.QuadtHallmann,A.,Benhamou,N.,Kloepper,JW,1997.
Bacterialendophytesin
cotton:mechanismsofenteringtheplant.Bisa.J.Microbiol.43,577582.Sieber,T.,Riesen,TK,Mller,E.,Fried,PM,
1988.Endophyticfungiinfourwinterwheatcultivars(TriticumaestivumL.)differinginresistanceagainstStagonospora
nodorum(Berk.)Cast.andGerm.=Septorianodorum(Berk.)Berk.J.Phytopathol.122,22892306.Sturtz,AV,Christie,BR,
Matheson,BG,1998.Associationofbacterialendophytepopulationsfromredcloverandpotatocropswithpotentialfor
beneficialallelopathy.Bisa.J.Microbiol.44,162167.Sturtz,AV,Christie,BR,Nowak,J.,2000.Bacterialendophytes:
potentialroleindevelopingsustainablesystemsofcropproduction.Crit.Rev.PlantSci.19,130.Sutton,J.,Peng,G.,1993.
BiocontrolofBotrytiscinereainstrawberryleaves.
Phytopathology83,615621.Wicklow,DT,Shoshannah,R.,Deyrup,ST,Gloer,JB,2005.Aprotectiveendophyteofmaize:
AcremoniumzeaeantibioticsinhibitorytoAspergillusflavusandFusariumverticillioides.Mycol.Res.109,610618.Zadoks,
JC,Chang,TT,Konzak,K.,1974.Adecimalcodeforthegrowthstagesof
cereals.WeedRes.14,415421.