VARIABILIDAD ESPACIO-TEMPORAL DEL SISTEMA DE CARBONATOS EN

AMBIENTES INTERMAREALES: IMPLICANCIAS PARA EL DISEO DE

EXPERIMENTOS DE ACIDIFICACIN DEL OCANO.

Por

Fernando Felipe Gajardo Muoz

Memoria entregada a la Facultad de Ciencias

de la Universidad Catlica de la Santsima Concepcin
para optar al ttulo profesional de Bilogo Marino

Profesor gua: Dr. Cristian A. Vargas

Profesor patrocinador: Dr. Antonio J. Brante

Concepcin, Abril de 2017

 ACTA DE CERTIFICACIN

Certifico que el presente trabajo de Memoria de Ttulo se realiz bajo mi direccin y ha

sido aprobado.

Profesor Gua: Doctor Cristian Antonio Vargas Glvez

______________________________

Declaro que el contenido de esta Memoria de Ttulo no ha sido presentado total o

parcialmente para optar a otro Ttulo o Grado Acadmico.

Fernando Felipe Gajardo Muoz

__________________________

Nota del Examen de Ttulo: ____

Fecha de aprobacin del Examen de Ttulo:

_______ de _______________ de 201_

Ministro de Fe: ______________________

____________________
Mi vida se ha encontrado plagada de dificultades, pero como dice el proverbio lo que
no te mata te hace ms fuerte, y ahora me siento ms fuerte que nunca. Me dedico este
trabajo a m mismo por permitirme aprender en todo momento, a mi hijo por ser mi
timn y a mi mujer por ser mi ancla.
 AGRADECIMIENTOS

Agradezco a Dios por haberme dado la fortaleza durante todos estos aos para
perseverar y no claudicar en los momentos difciles. Tambin quiero agradecer a mi mujer
Daniela, por haberme acompaado durante todo este tiempo, entregarme su apoyo, alegra
y amor incondicional, que en conjunto con mi hijo Lucas son el pilar fundamental de mi
vida y lo que me motiva a superarme siempre, pues s que siempre hay un angelito
observando mis pasos.

Igualmente quiero agradecer a mi amigo Eloy y a su familia por haberme acogido

como un integrante ms de su familia en su casa, al profesor Antonio Brante quien siempre
estuvo presente y dispuesto a atender mis dudas, a Paulina Contreras por ser una excelente
persona, por su gran disposicin y los innumerables favores concedidos, a todas las
personas que trabajan en el Laboratorio de Funcionamientos de Ecosistemas Acuticos de
la Universidad de Concepcin, pues conoc grandes seres humanos siempre dispuestos a
brindarme su ayuda. Agradecer tambin al profesor Cristian Vargas, Bernardo Broitman
y al proyecto FONDECYT 1130254 por brindarme su apoyo, conocimiento y todos los
instrumentos necesarios para desarrollar esta investigacin.

Finalmente quiero agradecer a mis padres, hermanos, a los dos ngeles que me miran
desde el cielo y a mis amigos de la vida por tenerme siempre en sus pensamientos y
desearme lo mejor en todo momento, ya que estoy cierto de que sin esas buenas energas
no podra ser quien soy.

iv
 Tabla de contenido
Resumen ........................................................................................................................... vii
Abstract ...........................................................................................................................viii
Introduccin ....................................................................................................................... 1
Hiptesis............................................................................................................................. 6
Hiptesis ........................................................................................................................ 6

Objetivos ............................................................................................................................ 7
Objetivo General ........................................................................................................... 7
Objetivos Especficos .................................................................................................... 7

Mtodos .............................................................................................................................. 8
rea de estudio .............................................................................................................. 8
Determinacin de parmetros fsico-qumicos ............................................................ 10
Salinidad, pH, oxgeno disuelto, temperatura .......................................................................... 10
Determinacin de alcalinidad .................................................................................................. 11
Clculo de parmetros del sistema de carbonatos .................................................................. 12
Determinacin de parmetros biolgicos .................................................................... 13
Cobertura biolgica ................................................................................................................. 13
Clorofila ................................................................................................................................... 14
Anlisis estadsticos .................................................................................................... 15
Caracterizacin volumtrica y distancia de la costa de las pozas intermareales .................... 15
Caracterizacin meteorolgica de la comuna de Tom ........................................................... 15

Resultados ........................................................................................................................ 17
Caracterizacin meteorolgica de la comuna de Tom ............................................... 17
Caracterizacin volumtrica y distancia de la costa de las pozas intermareales ......... 19
Caracterizacin de los parmetros fsico qumicos ..................................................... 19
Caracterizacin de parmetros biolgicos ................................................................... 28
Cobertura biolgica ................................................................................................................. 28
Concentracin de pigmentos fotosintticos .............................................................................. 30
Anlisis estadsticos .................................................................................................... 31
Regresiones .............................................................................................................................. 31

v
 Anlisis estadstico ANDEVA anidado delta de pH ................................................................. 32

Discusin .......................................................................................................................... 34
Conclusiones .................................................................................................................... 40
Referencias ....................................................................................................................... 41

vi
 RESUMEN

Gran parte del CO2 presente en los ocanos es absorbido desde la atmsfera. Como
muchos gases el CO2 es soluble en agua, pero adems reacciona con sta formando un
balance de distintas especies qumicas cuya sumatoria se conoce como carbono inorgnico
disuelto (CID), y cuyo incremento provoca una disminucin en el pH, lo que
indirectamente genera una disminucin en el CaCO3. Esto es un problema para
organismos calcificadores quienes utilizan esta molcula para formar sus esqueletos. Dado
que plataformas de observacin han mostrado como el pH del ocano ha disminuido desde
valores de entre 8 u 8,2 a 7,9; investigadores han expuesto a diferentes organismos
marinos a altos niveles de pCO2 (bajo pH) esperados para fines de siglo, pero estos niveles
podran encontrarse hoy en da en pozas intermareales, pues estas quedan desconectadas
del mar durante marea baja, por lo que procesos biolgicos locales pueden determinar la
qumica de los carbonatos en estos ambientes. En este estudio se caracterizaron los rangos
de variacin de pH y AT entre la madrugada y la tarde, y con estos valores se calcularon
los dems parmetros del sistema de carbonatos, durante 9 das en 3 pozas intermareales
de la playa de Cocholge y simultneamente se contrast con los niveles de la columna
de agua adyacente. Los resultados muestran diferencias significativas en los rangos de
variacin de pozas en contraste con la columna de agua, adems en pozas durante la
madrugada existe una subsaturacin de CaCO3 todo esto determinado mayormente por
fotosntesis y respiracin. De lo que se desprende que los organismos calcificadores
habitantes de pozas intermareales estn adaptados a estos niveles de fluctuacin y estudios
posteriores podran analizar como responden a estas variaciones. Adicionalmente se
deber considerar la procedencia de los organismos al momento de evaluar los efectos de
la posible acidificacin del ocano.

Palabras clave: calcificadores, pCO2, pH, pozas intermareales.

vii
 ABSTRACT

Most of the CO2 present in the oceans is absorbed from the atmosphere. As many gases
CO2 is soluble in water, but also reacts with it to form a balance of different chemical
species whose summation is known as dissolved inorganic carbon (DIC), nd whose
increase causes a decrease in pH, which indirectly generates a decrease in the CaCO3.
This is a problem for calcifying organisms because they use this molecule to form their
skeletons. Given that observation platforms have shown how the pH of the ocean has
decreased from values of 8 or 8.2 to 7.9; researchers have exposed different marine
organisms to high levels of pCO2 (low pH) expected by the end of the century, but these
levels could be found today in intertidal pools, as these are disconnected of the sea during
low tide, so that local biological processes can determine the chemistry of carbonates in
these environments. In this study the ranges of variation of pH and AT were characterized
between the early morning and the afternoon, and with these values the other parameters
of the carbonate system were calculated, during 9 days in 3 intertidal pools of the beach
of Cocholge and simultaneously was contrasted with the levels of the adjacent water
column. The results show significant differences in the ranges of pool variation in contrast
to the water column, also in pools during the early morning there is a subsaturation of
CaCO3 all this determined mainly by photosynthesis and respiration. From which it is
deduced that the calcifying organisms inhabiting intertidal pools are adapted to these
levels of fluctuation and later studies could analyze how they respond to these variations.
In addition, the origin of organisms should be considered when evaluating the effects of
possible acidification of the ocean.

Key words: calcifiers, intertidal pools, pCO2, pH.

viii
 INTRODUCCIN

En los ocanos el carbono lo podemos encontrar formando parte de dos reservorios

importantes ya sea en forma orgnica constituyendo parte de los seres vivos o, muertos, o
molculas orgnicas resultantes de su actividad, o constituyendo molculas inorgnicas
disueltas en la columna de agua tales como el dixido de carbono (CO2) o el bicarbonato,
HCO3- (Libes 2009). El carbono circula en los ocanos por diferentes mecanismos. Uno
de los cuales es la fijacin de la fraccin inorgnica (i.e. principalmente CO2 gaseoso o
bicarbonato, HCO3-) llevada a cabo por los organismos fotosintezadores, quienes lo
utilizan como elemento esencial en la sntesis de materia orgnica (Libes 2009). El destino
de esta materia orgnica es finalmente llegar a ser transferida a niveles trficos superiores
o que termine siendo finalmente degradada por la comunidad microbiana, y
posteriormente devuelta a su forma orgnica como CO2 (Reimer & Rodrguez 2014).

En los ecosistemas marinos, el CO2 no solo es generado como producto de reciclaje,

ya que una fraccin importante de ste es absorbido desde la atmsfera (Millero 2000). Se
estima que aproximadamente el 70% del CO2 que ha permanecido en la atmsfera tras su
emisin ha sido absorbido por el ocano. La solubilidad del dixido de carbono es una
acusada funcin inversa de la temperatura superficial marina (Libes 2009). El CO2 es
soluble en agua como la mayora de los gases; sin embargo, a diferencia de otros gases
como el oxgeno, el CO2 reacciona con el agua y forma un balance de varias especies
inicas y no inicas y a travs de estas reacciones se liberan protones (H+) lo que provoca
una disminucin en el pH del agua de mar (Cao et al. 2007).

Las diferentes formas inorgnicas del carbono en el agua son conocidas

colectivamente como carbono inorgnico disuelto (CID) (Libes 2008). Estas especies
incluyen al: dixido de carbono libre disuelto (CO2 (aq)), cido carbnico (H2CO3),
bicarbonato (HCO3-) y carbonato (CO32-), este ltimo es de gran importancia y el que se
ver mermado pues los protones disueltos se adicionan a esta molcula generando ms
bicarbonato (Cao et al. 2007). Por otro lado el carbonato es esencial para organismos
calcificadores, pues construyen sus estructuras de carbonato de calcio (CaCO3) en un

1
proceso conocido como calcificacin. Algunos estudios indican que cuando disminuye el
pH la tasa de calcificacin de moluscos disminuye, afectando su crecimiento (Kroeker et
al., 2013). La disponibilidad de este compuesto en el mar es cuantificado a travs del
ndice de Omega Aragonita ( Aragonita) u Omega Calcita ( Calcita) (Gianguza et al. 2000).
Las reacciones que ocurren en el ambiente marino son:

CO2 (aq) + H2O H2CO3 HCO3- CO32- + 2H+

Sin embargo, a diferencia de lo que ocurre en el ocano abierto, en ecosistemas

costeros la qumica de los carbonatos y con ello el pH del agua de mar son muy variables,
esto como resultado de muchos factores (Middelboe & Hansen 2007; Waldbusser &
Salisbury 2014). Algunos autores (Prez et al. 2016; Vargas et al. 2016) sealan que los
niveles de CO2 en las aguas costeras estn determinados entre otros procesos por: (a)
descargas fluviales, ya que las aguas provenientes de los ros influenciadas por actividades
humanas son ricas en nutrientes y CID, lo que puede conllevar a una mayor productividad
primaria, adems son portadores de agua dulce, lo que genera una disminucin en la
alcalinidad (Waldbusser & Salisbury 2014; Aguilera et al. 2015), (b) eventos de
surgencias, donde aguas fras ricas en CO2 (bajo pH) y nutrientes afloran en la superficie
de aguas costeras provocando adems de forma indirecta un efecto positivo en la
productividad primaria (Waldbusser & Salisbury 2014; Vargas et al. 2016). Y (c) dos
procesos biolgicos: fotosntesis en donde las microalgas y los bosques de macroalgas son
los responsables de remover el CO2 circundante, y la respiracin animal y vegetal (durante
la noche) que adiciona CO2 al medio. Estos procesos biolgicos adems pueden presentar
variaciones en sus tasas de produccin a escalas cortas de tiempo (e.g. das, semanas,
quincenas) (Rouco 2011; Waldbusser & Salisbury 2014).

La baha de Concepcin, rea somera y semicerrada, beneficia por su geografa la

ocurrencia de los eventos antes mencionados, adems se encuentra bajo la influencia de
fuertes vientos que favorecen an ms los procesos de surgencias. El rea adems se
caracteriza por una alta productividad primaria y est sujeta a una fuerte actividad
antrpica (Rudolph et al .2002; Linacre & Palma 2004). Bajo las circunstancias

2
mencionadas con anterioridad y otras, los niveles de pH pueden ser en ocasiones muy
inferiores a los establecidos para el ocano abierto, el rango de variacin de muchos
parmetros del sistema carbonato puede incluso en un perodo de 24 horas exceder las
proyecciones de cambio esperadas para finales de siglo en la qumica del carbonato
ocenico derivada del aumento de CO2 en la atmsfera, que entre las variadas
consecuencias, conlleva una disminucin del pH, proceso conocido como Acidificacin
de ocano (AO) el cual se ha generado por el aumento de las emisiones de CO2 desde el
inicio de la revolucin industrial, provocando un incremento en los niveles de CO2 en la
atmsfera, desde 280 ppm a valores cercanos a los 400 ppm en la actualidad (Feely et al.
2009; Mancera et al. 2013; Cornwall et al. 2013; Waldbusser & Salisbury 2014).

Middelboe & Hansen (2007) reportan que, en ambientes marinos con poco recambio
de agua, los niveles de pH pueden variar entre valores de 7,8 a 8,6 en promedio. Algo
similar es de esperar que ocurra en ambientes como pozas intermareales, pues la
variabilidad en los niveles de pH ser mayor en estos ambientes que quedan aislados del
mar durante ciertas horas del da en perodos de marea baja, pues los procesos de
fotosntesis y respiracin podran estar determinando los valores de la qumica de los
carbonatos. Pero no solo los valores de la qumica de los carbonatos sern los que
fluctuarn durante el da, tambin lo harn parmetros fsico-qumicos tales como
salinidad, temperatura, y oxgeno. Ms aun estos valores pueden diferir entre pozas que
se encuentren a diferente altura del intermareal (distancia de la marea ms baja), diferente
grado de exposicin o pozas de diferente volumen (Martins et al. 2007), lo que podra
sugerir que organismos que habitan estos ambientes estn adaptados a diversos niveles de
fluctuaciones.

Es importante generar conocimiento acerca de la variacin natural en los niveles de

pH y pCO2 que puede existir en ambientes intermareales para contrastarlo con lo que
sucede en el ocano abierto, esto en el marco de los estudios de la AO. El ocano es
responsable en gran medida de mantener estables las concentraciones de este gas en la
atmosfera, pues absorbe cerca del 40% de las emisiones lo que representa 24 millones de
toneladas de CO2 diarias (Harroul-Kolieb & Savitz, 2009).En la actualidad la tasa de

3
ingreso de CO2 al ocano proveniente de la atmsfera es 100 veces ms rpida que durante
la ltima glaciacin (periodo de mayor acidez del agua de mar) (Harroul-Kolieb & Savitz,
2009), lo que conlleva una disminucin en el pH de aguas superficiales del ocano y con
ello una disminucin en el estado de saturacin del carbonato de calcio (), adems
provoca que la lisoclina este situada ms cerca de la superficie (Feely et al. 2004;Mancera
et al. 2013; Alarcn et al. 2015). Trabajos han mostrado a travs de sistemas de
observacin (Bates, 2007; Bates & Peters, 2007), como el pH del ocano abierto ha ido
disminuyendo desde valores de 8 hasta 8,2 a niveles de 7,9 llevndose a cabo muchos
experimentos que evalan los efectos de estos cambios en organismos marinos
(Branchieri, 2013).

Numerosos grupos de investigacin en el mundo han tratado de abordar el desafo

que constituye el poder lograr determinar los impactos que tendr la acidificacin del
ocano sobre los organismos marinos, impactos que an desconocemos. La mayora de
estos estudios se han enfocado en determinar los efectos de altos niveles de pCO2 (bajo
pH) sobre organismos marinos, desde procesos moleculares, fisiolgicos, de crecimiento
(Berge et al. 2006; Barton et al. 2012), y desde bacterias, peces, hasta una escala
ecosistmica (Contreras 2008; Dupont et al. 2008) incluso trabajos revelan que bajos
niveles de pH provocan una merma en el sistema inmune de organismos formadores de
concha (Castillo 2016). Gran parte de estos experimentos han consistido en exponer por
perodos de corto (das) y/o mediano (meses) plazo a estos organismos frente a potenciales
escenarios de cambio en pH o pCO2 (e.g. 750 o 1200 matm pCO2) proyectados para 50 o
100 aos ms (Barton et al. 2012); esto ltimo con el fin de conocer las respuestas de stos
frente a condiciones acidas del medio. Sin embargo, como ya se mencion los ecosistemas
intermareales naturalmente podran mostrar una variabilidad espacio-temporal que puede
llegar a ser muy superior a los niveles de pH o pCO2 esperados para fines de siglo en el
ocano abierto, lo que podra generar mecanismos de adaptacin local, y mostrar como
las especies costeras podran llegarse a ver afectadas frente a potenciales escenarios de
cambio en la qumica del ocano. En base a esto mismo, es esencial como primera medida,
para disear experimentos ms realistas, poder conocer cul es el rango de variabilidad

4
natural al cual se ven expuestos los organismos marinos dentro del gran mosaico de
microambientes que pueden observarse en la zona costera.

5
 HIPTESIS

La actividad biolgica (fotosntesis y respiracin) determinada principalmente por

la disponibilidad y cantidad de luz, y temperatura, junto con la actividad de las mareas
determina que los niveles de pH y pCO2 en pozas intermareales muestren una escala de
variabilidad semidiurna mayor en comparacin a ambientes someros donde existe
continuo flujo de agua de mar (control). Por lo que este trabajo se enfocar en probar que:

Hiptesis

Pozas intermareales muestran una variabilidad significativamente mayor de pH y

pCO2 en una escala temporal semidiurna (12 h) que los ambientes control (zona donde
rompe la ola), durante marea baja.

6
 OBJETIVOS

Objetivo General

Caracterizar la variacin semi-diurna, diurna en la qumica del sistema de

carbonatos asociada al pH y pCO2 en sitios intermareales con dos diferentes tipos de
ambientes (i.e. pozas intermareales vs no poza).

Objetivos Especficos

Objetivo 1: Comparar la variacin semi-diurna y diurna del sistema de carbonatos

en dos ambientes intermareales, utilizando informacin de parmetros fsicos
(salinidad, temperatura), qumicos (pH, alcalinidad, oxgeno disuelto y DIC) y
biolgicos (cobertura vegetal, cobertura animal y clorofila).
Objetivo 2: Determinar rangos de variacin diaria en el sistema de carbonatos en
pozas intermareales asociadas al periodo del da.
Objetivo 3: Determinar para ambos ambientes los dems parmetros de los
carbonatos pCO2, estado de saturacin del ion carbonato (Aragonita), CID mediante
el programa CO2 Sys.
Objetivo 4: Explorar como la variabilidad en el sistema de carbonato est asociada
a procesos biolgicos, como respiracin y fotosntesis, a travs del anlisis de la
variabilidad en otros parmetros, como oxgeno, clorofila y cobertura biolgica.

7
 MTODOS

rea de estudio

El lugar de estudio se emplaz en el intermareal rocoso de la playa de Cocholge

(3635S) en la Baha de Concepcin. Se determinaron tres sitios, con dos ambientes; un
ambiente poza y un ambiente control, estos fueron caracterizados mediante diferentes
parmetros fsicos, qumicos y biolgicos. Las tres pozas intermareales se localizan en
diferentes plataformas rocosas, y el lugar en donde rompe la ola en las respectivas
plataformas se consider como el ambiente control.

Figura 1: Ubicacin geogrfica de la playa de Cocholge en la baha de Concepcin

(Camus et al. 2016).

La toma de muestras se dividi en tres campaas de muestreo durante la primavera

del ao 2016, la primera se llev a cabo los das 17,18 y 19 de octubre, la siguiente 30 de
octubre (da 31 de octubre fue suprimido por fuerte lluvia), 1 y 2 de noviembre, y la ltima

8
campaa se llev a cabo 14, 15 y 16 de noviembre. Muestreando cada da dos sitios (con
sus respectivos ambientes) los sitios fueron elegidos de forma aleatoria, resguardando que
cada sitio fuese muestreado dos veces en la madrugada y dos veces en la tarde por
campaa (i.e. Ver tabla 1). Consideramos que idealmente el mejor diseo experimental
hubiese sido muestrear todos los das de cada campaa las tres pozas; sin embargo, esto
no se pudo realizar puesto que en muestreos de ensayo no se logr muestrear las tres pozas
antes de que el sol incidiere en forma directa en la ltima muestreada, y la idea de este
trabajo es contrastar lo que sucede con el pH producto de la fotosntesis y la respiracin
durante el da y la noche.

Los horarios de muestreo fueron a las 07:00 (semi-diurno) y a las 19:00 (diurno),
esto para dos sitios cada da con su respectivo ambiente. Los muestreos se realizaron
durante marea baja procurando que en el segundo da de muestreo esta ocurriera cercana
a las 7:00 y a las 19:00. Las mediciones se realizaron en forma directa en el ambiente
poza, en cambio en el ambiente control se extrajo agua con un balde de 3 litros para
obtener muestras y determinar los diferentes parmetros.

Figura 2: Diseo experimental para cualquiera de las 3 campaas, C1, C2, C3: Control
1 2 y 3, P1, P2, P3: Poza 1 2 y 3, crculos y rectngulos en blanco: pozas y controles
respectivamente no muestreados durante ese da.

9
 TABLA 1
Tabla modelo para cualquiera de las 3 campaas de muestreo en el intermareal
rocoso de la playa de Cocholge.

Da 1 Da 2 Da 3 Hora pH DIC Alcalinidad Clorofila [O2] Cobertura biolgica T Salinidad

Poza 1 Poza 3 Poza 2 7:00 1 1 1 1 1 1 1
Poza 1 Poza 3 Poza 2 19:00 1 1 1 1 1 1 1 1
Poza 3 Poza 2 Poza 1 7:00 1 1 1 1 1 1 1
Poza 3 Poza 2 Poza 1 19:00 1 1 1 1 1 1 1 1
Control 1 Control 3 Control 2 7:00 1 1 1 1 1 1 1
Control 1 Control 3 Control 2 19:00 1 1 1 1 1 1 1
Control 3 Control 2 Control 1 7:00 1 1 1 1 1 1 1
Control 3 Control 2 Control 1 19:00 1 1 1 1 1 1 1
Total 24 24 24 24 24 6 24 24

Determinacin de parmetros fsico-qumicos

Salinidad, pH, oxgeno disuelto, temperatura

Estos parmetros fueron determinados a travs del uso del multiparmetro
Scientific Orion star A329 el cual realiza las lecturas por medio de electrodos y entrega
valores de pH de 0 a 14 en escala NBS, salinidad en PSU, oxgeno en mg*L-1, y
temperatura en C. Las variables fueron cuantificadas para cada sitio y ambiente dos veces
al da en la maana y en la tarde (7:00 y 19:00), para evidenciar el efecto que tiene el
componente biolgico (respiracin y fotosntesis) sobre estos parmetros en estos
ambientes. Se obtuvieron tres datos para cada parmetro y se calcul un promedio. La
temperatura se registr en conjunto con cada medicin de los dems parmetros y luego
se calcul un promedio.

10
 Figura 3: Imagen de medicin in situ de pH y oxgeno disuelto en el ambiente poza.

Determinacin de alcalinidad
Los valores de pH y alcalinidad total (AT) fueron utilizados para calcular el resto de
los parmetros del sistema de carbonatos (e.g. pCO2, Aragonita). Por esto se colectaron
muestras de agua para determinar AT, en frascos de DBO de vidrio borosilicato con tapa
esmerilada de 250 ml dos veces al da, en la maana y en la tarde (07:00 y 19:00) para
cada sitio y ambiente muestreado. Las muestras se envenenaron con cloruro de mercurio
saturado (HgCl2) al 0,02% volumen muestra. Luego estas botellas se sellaron con papel
parafilm y mantuvieron dentro de una nevera a no ms de 25C en obscuridad. Para luego
ser transportadas al Laboratorio de Funcionamiento de Ecosistemas Acuticos (LAFE) de
la Facultad de Ciencias Ambientales (Universidad de Concepcin), donde fueron
analizadas mediante el mtodo de titulacin de celdas abiertas (Dickson et al., 2007).

La temperatura durante las mediciones se control por medio de una sonda ATC de
temperatura que posee un electrodo, con respecto a la salinidad el valor fue el que se
registr en terreno con el multiparmetro scientific Orion star A329. Como se mencion

11
anteriormente AT se determin utilizando el mtodo de titulacin de celdas abiertas
(Dickson et al., 2007), utilizando un sistema de titulacin-Tritrino Semi-Automtico AS-
ALK2 Apollo SciTech . El sistema AS-ALK2 est equipado con un electrodo de pH
combinado (8102BNUWP, Thermo Scientific, USA) y una sonda de temperatura para el
control de temperatura (Sonda Star ATC, Thermo Scientific, EE.UU.) conectada a un
medidor de pH (medidor de pH Orion Star A211 Thermo Scientific, ESTADOS
UNIDOS). Todas las muestras se analizaron a 25C ( 0,1C) con regulacin de la
temperatura utilizando un bao de agua termoregulado (Compaero de laboratorio CW-
05G). La exactitud se control con un material de referencia certificado (CRM,
suministrado por el Dr. Andrew Dickson, Universidad de California, San Diego, EE.UU.)
y la repetibilidad AT promedi 2-3 mol kg-1.

Figura 4: Imagen de la adicin de 250 ml de agua de mar en una botella de DBO.

Clculo de parmetros del sistema de carbonatos

Datos de pH y AT junto con valores de temperatura y salinidad se utilizaron para
calcular el resto de parmetros del sistema de carbonato (por ejemplo, pCO2, CO3-2) y el

12
estado de saturacin del CaCO3 (). Los anlisis se realizaron utilizando el software
CO2SYS para MS Excel (Pierrot et al., 2006) establecido con las constantes de solubilidad
de Lueker (Lueker et al., 2000). Para todos los clculos se utiliz la constante de equilibrio
KHSO4 determinada por Dickson (1990) y la concentracin total de boro por Uppstrom
(1974)

Determinacin de parmetros biolgicos

Cobertura biolgica
Se determin el porcentaje de cobertura animal y vegetal en el ambiente poza
categorizando los organismos a nivel de gnero, a excepcin de una alga roja crustosa
(necesidad de corte histolgico para identificacin) y de los bivalvos encontrados los que
se categorizaron a nivel de familia (dificultad para discernir entre juvenil de Semimytilus
y Perumytilus). Esta tarea se realiz con el propsito de relacionar posibles diferencias en
los niveles de pH entre pozas con diferentes grados y composicin de cobertura biolgica.
Con este objetivo se utiliz un cuadrante de 25x25 cm el que posee una abertura de malla
de 2,5 cm. Esto se llev a cabo, colocando el cuadrante al azar cinco veces en cinco
distintos lugares de cada poza, luego se identificaron los diferentes organismos que se
encontraron en cada vrtice de los cuadrados de 2,5x2,5 y posteriormente con estos
valores determin el porcentaje de cobertura vegetal y animal y la composicin de la
comunidad en estos sitios. Esta medicin se realiz solo en el ambiente poza una vez por
da de muestreo.

A B

Figura 5: Imagen A y B, utilizacin del cuadrante para la determinacin de la cobertura

biolgica en el ambiente poza.

13
Clorofila
Para establecer relaciones entre el aporte fotosinttico de la comunidad de
microalgas y variaciones de pH entre los diferentes ambientes y sitios, se colectaron
muestras de agua 2 veces al da en la maana y en la tarde (07:00 y 19:00) de cada
ambiente. Estas se filtraron con un tamiz de 200 m para impedir el ingreso de organismos
zooplanctnicos y fueron almacenadas en envases plsticos de un litro, cubiertos con cinta
reflectante para impedir el ingreso de luz. Una vez finalizado el muestreo, se trasladaron
al (LAFE) de la Universidad de Concepcin, en donde se filtraron 200 ml de la muestra
por un filtro APFF (GF/F) de 0,7 m de dimetro de poro. Este fue guardado y etiquetado
en un sobre de papel aluminio y vuelto a guardar dentro de una bolsa Ziploc en una
congeladora hasta su posterior anlisis.

Figura 6: La imagen muestra la adicin de 300 ml de agua de mar pasada por un tamiz
de 200m.

Para estimar la concentracin de clorofila y feopigmentos la cuantificacin de las

muestras fue realizada en un fluormetro Turner Designs 10AU, antes y despus de ser
acidificadas (Parsons et al, 1984; Iriarte & Gonzlez, 2004).

14
Anlisis estadsticos

Se aplic una transformacin de datos a una escala logartmica, para posteriormente

realizar una correlacin de Pearson en el ambiente poza y otra en el ambiente control
entre los datos de pH y pCO2 con el fin de evaluar la independencia de los datos esto se
realiz con programa estadstico Sigma Plot v.6.0.

Se calcul la diferencia absoluta diaria de pH y pCO2 entre la maana y la tarde para

cada ambiente en cada sitio muestreado, con lo que se generaron deltas de pH y pCO2,
posteriormente se realizaron dos ANDEVAS anidados. En el primero los elementos del
diseo fueron: variable respuesta delta de pH, factor principal sitio, factor anidado
ambiente, unidad experimental Poza y Control, rplicas 6, para el segundo ANDEVA
anidado solo cambi la variable respuesta pues fue el delta de pCO2. En ninguno de los
dos casos se cumpli con el supuesto de normalidad, pero adems en el segundo
ANDEVA realizado no se cumpli con el supuesto de homocedasticidad, por ello se
realiz una transformacin a una raz cuadrada de los datos. Como no se cumpli con los
supuestos de normalidad en ambos casos se realiz un test de Levene, el cual se considera
ms robusto, para analizar el supuesto de homogeneidad de las varianzas, todo lo anterior
se realiz con el programa estadstico Statistic 8.0.

Caracterizacin volumtrica y distancia de la costa de las pozas intermareales

Se determin el volumen de cada poza y la distancia a cual se encuentra cada una
de su respectiva entrada de agua, con el fin de mostrar la semejanza que existe entre estas
y con ello disipar posibles diferencias asociadas a estas variables, esta tarea se realiz con
dos listones de madera graduados.

Caracterizacin meteorolgica de la comuna de Tom

En experimentos mensurativos que caracterizan la variacin natural de los
ambientes es importante tener un reflejo de lo que sucede con las dems variables
asociadas al tiempo. Por lo que se caracterizaron las variables meteorolgicas de la
comuna de Tom con datos de la red meteorolgica de CEAZA-met, Chile y el Servicio

15
Hidrogrfico de la Armada de Chile (SHOA) adems de observaciones personales en
terreno.

16
 RESULTADOS

A continuacin se exponen los resultados obtenidos durante las tres campaas de

muestreo en los diferentes sitios y ambientes, en el intermareal rocoso de la playa de
Cocholge durante la primavera de 2016.

Caracterizacin meteorolgica de la comuna de Tom

El clima de las comunas ubicadas en la Baha de Concepcin es fluctuante, incluso

en perodos cortos de tiempo, como queda manifiesto en las tablas 1, 2 y 3 en donde
encontramos das con precipitaciones y das soleados de forma adyacente en todas ellas,
tambin se presentan variaciones en la intensidad y direccin del viento, y en la radiacin
solar incidente.

TABLA 2
Caracterizacin meteorolgica de la comuna de Tom durante la primera campaa
de muestreo.
T Horario
Velocidad Radiacin
atmosfrica Direccin del Precipitaciones Orto y mareas
Das/Variables del viento solar Observaciones
(C) Mn- viento () -1
(mm) -2
ocaso solar bajas y
(m*s ) (W*m )
Mx alturas
Lluvia de la maana hasta
16-10-2016 las 17:00 aprox. 19:30
(Da previo al 5,8 5,3 79 comenz a despejarse.
muestreo) Rafagas entre 7-11 m*s-1

Despejado con nubosidad

M aana NNE 06:13-0,1 parcial. Luna llena mas
17-10-2016 5-15 Tarde WNW
2,1 0,2 294,3 7:05-20:11
18:21-0,2 grande del ao

Lluvia intensa desde las

11:30-15:30 aprox. Horarios
M aana ESE 07:03-0,1
18-10-2016 5-13 Tarde S
1,5 1,6 137,1 7:04-20:12
19:04-0,2
de muestreo parcial
variando a nublado

M aana SSEE 07:57-0,2 Despejado durante todo el

19-10-2016 4-17 Tarde WSW
1,8 0,1 314,4 7:02-20:13
19:50-0,3 da

17
 TABLA 3
Caracterizacin meteorolgica de la comuna de Tom durante la segunda campaa
de muestreo.
T Horario
Velocidad Radiacin
atmosfrica Direccin del Precipitacion Orto y mareas
Das/Variables del viento solar Observaciones
(C) Mn- viento () -1
es (mm) -2
ocaso solar bajas y
(m*s ) (W*m )
Mx alturas
Nublado pero
29-10-2016 caluroso, 4 das
da previos los
(Da previo al 12- 20 2 0 281,8
mas calurosos de
muestreo) octubre

Maana
Maana SSE 05:40-0,3 nublado, tarde
30-10-2016 11-19 2,9 0 312,3 6:49-20:24
Tarde SW 17:35-0,3 caluroso

Da perdido por
fuertes lluvias
31-10-2016 6-16 2,4 9,4 157,9
durante la tarde

Maana
nublado, tarde
Maana SSE 06:50-03 despejado,
01-11-2016 4-15 1,9 0,1 309 6:47-20:26
Tarde SSW 18:30-04 viento suave y
oleaje muy fuerte

Todo el da
Maana SSE 07:25-0,4 despejado,
8-16 2,6 0 331,5 6:46-20:27
Tarde SSW 19:00-0,4 viento y oleaje
02-11-2016 suave

18
 TABLA 4
Caracterizacin meteorolgica de la comuna de Tom durante la tercera campaa
de muestreo.

T Horario
Velocidad
atmosfrica Direccin del Precipitacio Radiacin Orto y mareas
Das/Variables del viento -2 Observaciones
(C) Mn- viento () nes (mm) solar (W*m ) ocaso solar bajas y
(m*s-1)
Mx alturas
13-11-2016
Nublado Con
(Da previo al 2,9 0 343,7
fuertes vientos.
muestreo)
Lluvia de 11:30-
20:30, luna ms
Maana NW 05:20-0,2
14-11-2016 13-17 2,3 2,1 126 6:34-20:40 grande en 80
Tarde NNW 17:15-0,2 aos.

Lluvia tenue
durante la
Maana SSE 06:05-0,1
15-11-2016 12-20 3,6 0,4 342,9 06:34-20:41 madrugada
Tarde SSW 17:55-0,2 hasta las 6:30.

Despejado
Maana durante todo el
06:55-0,1
16-11-2016 9-21 SSW 4,8 0 370,3 06:33-20:42 da. Viento
18:40-02 fuerte en la
Tarde SSE
tarde.

Caracterizacin volumtrica y distancia de la costa de las pozas intermareales

El volumen aproximado de la poza N1 fue de 1,260 m3 y la distancia de la costa

fue de 12 m, los valores encontrados para la poza N2 fueron de 1,390 m3 y 11,4 m, y por
ltimo los registros de la poza N3 fueron 1,665 m3 y 9 m todo estos analizado con una
marea de 0,3.

Caracterizacin de los parmetros fsico qumicos

Los rangos promedios de las variaciones diarias de pH, oxgeno disuelto y

temperatura fueron mayores en todas las campaas en los ambiente poza en contraste con
los ambiente control, el valor de pH en las pozas ms bajo fue de 7,335 y el ms alto 8,821
(ver tabla 4), la variacin del pH en los ambiente control fluctu desde 7,605 hasta 8,209
(ver tabla 4). De forma directamente proporcional vari el oxgeno pues al igual que el pH

19
los valores bajos se registraron en la maana con un mnimo de 1,490 mg*L-1 (ver tabla
4) y durante la tarde haba una mayor disponibilidad de oxgeno disuelto con un mximo
de 20,797 mg*L-1 (ver tabla 4) esto para el ambiente poza, mientras que en los controles
se puede decir que existi una mayor estabilidad con respecto a este parmetro con un
registro mnimo de 9,35 mg*L-1 (ver tabla 4) y un mximo de 11,303 mg*L-1 (ver tabla
4). La temperatura mnima fue similar entre los ambientes control y las pozas, en promedio
cercana para ambas a los 11 grados, no as con las mximas pues estas fueron superiores
en los ambientes poza con un mximo de 20,9 C (ver tabla 4) y para los controles la
mxima fue tan solo de 14,8 (ver tabla 4). Importante es sealar que los rangos promedios
de variacin de estos 3 parmetros en las 3 campaas fueron mayores en la poza 3 seguido
por la 1 y finalmente la 2 con un menor rango de variacin promedio, distinto es lo que
ocurri en los ambientes control pues aqu los registros fueron heterogneos en los sitios
a travs de las campaas, sin embargo se observa que cuando aumenta la temperatura el
pH tambin aumenta (ver fig. 7).

Se registraron grandes rangos de variacin de CID y A T en los ambientes pozas en

todas las campaas, a diferencia de lo que ocurri en los ambientes control en donde estos
valores fueron ms homogneos durante los periodos de muestreo (Ver fig. 8). Al
contrario de lo que sucedi con los parmetros mencionados en el prrafo anterior, los
valores altos de CID y AT se registraron en los muestreos realizados durante la maana y
los bajos en la tarde. El rango de variacin de la AT fue de 1987 mmol*kgSW-1 hasta
2358 mmol*kgSW-1(ver tabla 4) para el ambiente poza, mientras que en los ambientes
control el registro mnimo fue de 2236 mmol*kgSW-1 y el mximo 2314 mmol*kgSW-
1
(ver tabla 4). Los valores de DIC las pozas oscilaron entre 1434-2411 mmol*kgSW-1
(ver tabla 4) y en los ambiente control entre 2011-2276 mmol*kgSW-1 (ver tabla 4). Los
mayores rangos de variacin promedio en el ambiente poza se registraron en la poza 3
seguida por la poza 1 y por ltimo la poza 2 en todas las campaas (ver fig. 8).

Los datos de salinidad reflejan variaciones entre sitios, campaas y dentro de los
das, para un mismo ambiente, sin embargo no se observa un patrn en estas fluctuaciones
(Ver fig.8), el valor ms bajo registrado fue de 33,48 (PSU) y el ms alto 34,98 (PSU)

20
(ver tabla 4) en los ambientes poza, mientras que en los ambientes control la mnima fue
de 32,87 (PSU) y la mxima de 34,61 (PSU) (ver tabla 4).

Al comparar los rangos de variacin promedio que present la presin parcial de

dixido de carbono (pCO2) en los 2 ambientes estudiados, se observa que las mayores
fluctuaciones se encontraron en el ambiente poza (ver fig. 9) (en todas las pozas
contrastadas con sus controles) con una variacin mxima en un da de 3198 matm en la
maana hasta las 68,7 matm (ver tabla 4) en la tarde estos a su vez tambin fueron los
valores mnimos y mximos hallados en estos ambientes para este parmetro, esto ocurri
en la poza 3 durante la tercera campaa de muestreo.

21
Figura 7: Variacin promedio del pH, oxgeno y temperatura durante las 3 campaas de
muestreo en 3 sitios con 2 ambientes. P1, P2, P3 poza 1, 2 y 3 respectivamente, C1, C2 y
C3 control 1, 2 y 3 respectivamente, medidos en 2 horarios sealados como H7 (07:00) y
H19 (19:00).

22
 En contraste, lo que se evidenci en los ambientes control fue una mxima de 1439
matm en la maana vs 348,8 matm en la tarde, estos valores se registraron en das, sitios
y campaas diferentes. Comn fue que los valores altos de pCO2 encontrados se suscitaron
en ambos ambientes durante la maana y los bajos durante la tarde (ver fig. 9).

Los rangos de variacin promedio en el estado de saturacin del carbonato de

calcio est representado en dos de sus formas calcita (CA) y aragonita (Ar) (ver fig. 9)
en donde queda de manifiesto que al igual que en los parmetros mencionados en los
prrafos anteriores las mayores variaciones se registraron en los ambientes poza, aqu
alcanza en varias ocasiones valores mnimos <1 (subsaturacin) durante la maana y
valores mximos durante la tarde, los valores mnimos registrados fueron 0,56 Ca y 0,36
Ar y los mximos 9,83 Ca y 6,76 Ar. Ahora bien con respecto a los valores
determinados referentes a este parmetro en los ambientes control no se registraron niveles
de subsaturacin en el ndice Ca y solo en 3 ocasiones se encontraron valores <1 en el
ndice Ar. Los valores mnimos calculados tambin se hallaron durante la maana en los
ambientes control y estos fueron 1,17 Ca y 0,75 Ar y en la tarde los mximos 4,06 Ca
y 2,55 Ar. En relacin a lo que sucedi con la variacin en este parmetro entre las pozas
se ve un patrn a travs de las campaas pues para ambos ndices (CA y Ar) los rangos
de variacin promedio fueron mayores en la poza 3, seguida por la poza 1 y por ltimo la
poza 2, en oposicin a lo que sucedi en los ambientes control en donde dichos rangos de
variacin promedio fueron heterogneos en los diferentes sitios entre las campaas (ver
fig. 9).

En el ambiente poza el coeficiente de correlacin entre el pH y la pCO2 fue de -

0,999 y un valor de P<<0,001 N=36, mientras que para el ambiente control el coeficiente
de correlacin fue de -0,999 y el valor de P<<0,001 N=36. Por lo que se asume que existe
una relacin lineal inversamente proporcional entre el pH y la pCO2 en ambos ambientes
(ver fig. 13-14).

Como queda reflejado en los dos anlisis de ANDEVA realizados, en ambos casos
el valor de fue P<<0,01 por lo que se rechaza la hiptesis nula. Adems las pruebas de

23
Tukey ejecutadas en cada ANDEVA indican que las diferencias no se encuentran entre
los sitios si no que entre los diferentes ambientes (ver tabla 8, 9, 10 y 11), solo la poza 2
y la poza 3 presentaron diferencias significativas cuando se compar la variacin delta de
pH.

TABLA 5
Rangos de variacin en Pozas y Controles durante todas las campaas de muestreo
en los parmetros fsico-qumicos caracterizados.

pH p CO2 AT CID Oxgeno Salinidad

Ambiente Rango -1 -1
Ca Ar T (C) -1
(escala NBS) (matm) (mmol*KgSW ) (mmol*KgSW ) (mg*L ) (PSU)
Mn 7,335 49,358 1985,6 1435,897 0,569 0,361 10,075 1,49 33,557
Poza
Mx 8,821 3206,248 2358,8 2440,993 10,4 6,737 20,917 22,897 34,987
Mn 7,65 348,843 2291,3 2011,59 1,169 0,745 11,133 8,715 32,87
Control
Mx 8,209 1442,676 2314,3 2277,3 4,036 2,589 15,325 11,303 34,627

24
Figura 8: Variacin promedio de la Alcalinidad total (AT) y salinidad durante las 3
campaas de muestreo en 3 sitios con 2 ambientes. P1, P2, P3 poza 1, 2 y 3
respectivamente, C1, C2 y C3 control 1, 2, 3 respectivamente, medidos en 2 horarios
sealados como H7 (07:00) y H19 (19:00).

25
Figura 9: Variacin promedio de la presin parcial de dixido de carbono (pCO2) calcita
(Ca) y Aragonita (Ar) durante las 3 campaas de muestreo en 3 sitios con 2 ambientes.
P1, P2, P3 poza 1, 2 y 3 respectivamente, C1, C2 y C3 control 1, 2 y 3 respectivamente,
medidos en 2 horarios sealados como H7 (07:00) y H19 (19:00).

26
 Figura 10: Variacin promedio del carbono inorgnico disuelto (DIC) durante las 3
campaas de muestreo en 3 sitios con 2 ambientes. P1, P2, P3 poza 1, 2 y 3
respectivamente, C1, C2 y C3 control 1, 2 y 3 respectivamente, medidos en 2 horarios
sealados como H7 (07:00) y H19 (19:00).

27
Caracterizacin de parmetros biolgicos

Cobertura biolgica

Figura 11: Porcentaje de cobertura vegetal (CV) y animal (CA) en pozas intermareales
durante las 3 campaas de muestreo.
Los datos de cobertura biolgica muestran un patrn en los porcentajes de cobertura
vegetal registrados, pues en las 3 campaas la poza 2 fue la que present un mayor
porcentaje de cobertura vegetal, seguido por la poza 1 y por ltimo la poza 3 (ver fig. 11).

En la poza 1 la macroalga que presento un mayor porcentaje de cobertura durante

las 3 campaas pertenece al gnero Ulva, para la poza 2 pertenece a Lythophyllum y para
la poza 3 al gnero Gelidium. Por otra parte los datos de cobertura animal no reflejan la
dominancia permanente de un gnero a lo largo de las campaas en ninguna de las pozas,
pero se pude destacar que los organismos bivalvos representan gran parte de la comunidad
de macroinvertebrados registrados en todas las pozas (ver tabla 5, 6 y 7).

28
 TABLA 6
Porcentaje de cobertura vegetal y animal categorizada a nivel de gnero y familia
en las 3 pozas intermareales en la primera campaa de muestreo.
Cobertura biolgica
1a campaa

Poza 1

Alga roja Cobertura Cobertura

Lithophyllum Mytilidae Ulva Gelidium Actinia Tegula Acantina Corallina Chiton Jehlius
crustosa vegetal animal

4,6 3,6 27,8 4 0,2 1 0,2 1,8 9,6 0,2 1,6 47,8 6,8

Poza 2
Cobertura Cobertura
Chaetomorpha Jehlius Ulva Mytilidae Gelidium Actinia Tegula Acantina Lithophyllum Patella Corallina Fisurella Chiton
vegetal animal

8,8 1,2 3,2 4,8 6,6 0,4 0,6 0,6 24,6 0,4 5 0,4 1,6 48,2 10

Poza 3

Alga roja Cobertura Cobertura

Lithophyllum Mytilidae Ulva Gelidium Tegula Acantina Jehlius Chiton Mazzaella
crustosa vegetal animal

2,2 4,2 1,2 31,8 1,6 4,8 2 1,2 7 2 44,2 13,8

TABLA 7
Porcentaje de cobertura vegetal y animal categorizada a nivel de gnero y familia
en las 3 pozas intermareales en la segunda campaa de muestreo.
Cobertura biolgica
2a campaa
Poza 1

Alga roja Cobertura Cobertura

Chaetomorpha Lithophyllum Mytilidae Ulva Gelidium Acantina Corallina Chiton Jehlius Mazzaella
crustosa vegetal animal
0,1 4 3,1 32,6 11,7 0,8 2,4 0,4 1,7 15,7 0,2 66,7 6

Poza 2

Alga roja Cobertura Cobertura

Chaetomorpha Lithophyllum Mytilidae Ulva Gelidium Acantina Corallina Patella Jehlius Mazzaella Fisurella Chiton
crustosa vegetal animal

11,6 38,8 1,8 2,8 4 1,3 2,8 0,1 0,7 7,9 2,1 0,1 1,4 70 5,4

Poza 3

Alga roja Cobertura Cobertura

Chaetomorpha Lithophyllum Mytilidae Ulva Gelidium Actinia Tegula Acantina Jehlius Mazzaella Fisurella Chiton
crustosa vegetal animal

0,4 1,5 4 2,9 36,5 0,2 0,3 3,3 0,4 10,1 1,7 0,2 0,5 53,1 8,9

29
 TABLA 8
Porcentaje de cobertura vegetal y animal categorizada a nivel de gnero y familia
en las 3 pozas intermareales en la tercera campaa de muestreo.
Cobertura biolgica
3acampaa
Poza 1
Alga roja Cobertura Cobertura
Lithophyllum Mytilidae Ulva Gelidium Actinia Acantina Corallina Chiton
crustosa vegetal animal
14 2,75 19,875 8,625 0,125 0,625 2,375 1,375 6,875 51,75 4,875

Poza 2
Alga roja Cobertura Cobertura
Chaetomorpha Mytilidae Ulva Gelidium Tegula Acantina Lithophyllum Corallina Chiton Patella Mazzaella
crustosa vegetal animal

5,25 0,75 3,25 2,25 1,25 4,375 46,5 5,875 4,375 1,625 0,125 0,875 68,375 8,125

Poza 3

Alga roja Cobertura Cobertura

Lithophyllum Mytilidae Ulva Gelidium Tegula Acantina Jehlius Fisurella Chiton Mazzaella
crustosa vegetal animal

3,875 1,875 1,5 35,125 0,125 4,125 0,5 0,25 9,75 1,125 0,375 40,875 8

Concentracin de pigmentos fotosintticos

8

6
[] de pigmentos (mg*m-3)

0
CHL a FEOP CHL a FEOP CHL a FEOP CHL a FEOP CHL a FEOP CHL a FEOP
Poza 1 Poza 2 Poza 3 Control 1 Control 2 Control 3

Noche Da

Figura 12: Variacin promedio de la concentracin de pigmentos fotosintticos,

clorofila-a (Chl-a) y feopigmentos (Feop), entre las 2 primeras campaas en los
ambientes poza y control contraste entre el da (19:00) y la noche (07:00).

30
 Los datos obtenidos de la concentraciones de pigmentos fotosintticos muestran que
todos los promedios tanto de clorofila a como de feopigmentos calculados en los
ambientes poza indican que existe una mayor cantidad de pigmentos fotosintticos durante
la tarde (19:00) en comparacin con los valores encontrados en la madrugada (07:00).
Este hecho no se retrata en los datos de concentracin promedio de pigmentos
fotosintticos encontrados en los ambientes control aqu la relacin es inversa, pues los
valores promedios altos se registraron en la noche y los bajos en la tarde (ver fig. 12).

Anlisis estadsticos

Regresiones
2,2 y = -0,0454x + 2,3606
R = 0,9979

2,15

2,1
Log pH

2,05

1,95
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9
Log pCO2

Figura 13: Regresin entre el logaritmo natural de presin parcial de dixido de

carbono (Log pCO2) y logaritmo natural de pH (Log pH) en los ambientes poza en las 3
campaas de muestreo.

31
 2,11 y = -0,0491x + 2,3935
R = 0,9982
2,1

2,09

2,08
Log pH

2,07

2,06

2,05

2,04

2,03
0 1 2 3 4 5 6 7 8
Log pCO2

Figura 14: Regresin entre el logaritmo natural de presin parcial de dixido

de carbono (Log pCO2) y logaritmo natural de pH (Log pH) los ambientes control en las
3 campaas de muestreo.

Anlisis estadstico ANDEVA anidado delta de pH

TABLA 9
Resumen del ANDEVA

Pruebas univariadas de significacin para el pH del delta (Hoja de clculo1)

Modelo sobre parametrizado
Descomposicin tipo III

SC Grad lib CM F p
Intercepto 17,36074 1 17,36074 814,2951 0,000000
Sitio 0,22541 2 0,11271 5,2864 0,010797
Ambiente(Sitio) 7,43866 3 2,47955 116,3020 0,000000
Error 0,63960 30 0,02132

32
 TABLA 10
Resumen prueba de Tukey HSD

Prueba Tukey HSD, Variable pH del Delta (Hoja de clculo1) Probabilidades aproximadas
para las pruebas post-hoc Error: Entre MSE =, 02132, df = 30.000
Sitio 1 2 3
1 0,285625 0,219381
2 0,285625 0,007885
3 0,219381 0,007885

El anlisis de ANDEVA realizado con los deltas de pH muestra que existen

diferencias significativas entre los sitios y entre los ambientes, adems la prueba a
posteriori de Tukey indica que los sitios que presentan diferencias son el sitio 2 y 3.

Anlisis estadstico ANDEVA anidado delta de pCO2

TABLA 11
Resumen de ANDEVA

Pruebas univariadas de significacin para el pH del delta (Hoja de clculo1)

Modelo sobre parametrizado
Descomposicin tipo III
SC Grad lib CM F p
Intercepto 40726,78 1 40726,78 1121,798 0
Sitio 138,26 2 69,13 1,904 0,166519
Ambiente(Sitio) 6824,86 3 2274,95 62,662 0
Error 1089,15 30 36,3

El anlisis de ANDEVA realizado con los deltas de pCO2 muestra que existen
diferencias significativas entre los ambientes, no as entre los sitios.

33
 DISCUSIN

Para nuestro conocimiento, ste podra ser el primer trabajo en caracterizar las
variaciones de pH y AT y con ello los dems parmetros de sistema de carbonatos (pCO2)
en ambientes intermareales en Chile, adems de las condiciones del intermareal rocoso de
Cocholge localizado en la Baha de Concepcin. Las particularidades de esta zona
asociada a procesos de surgencias, perturbaciones antropognicas y descargas de agua
dulce, hace de alguna forma difcil el poder encontrar estudios que permitan llevar a cabo
comparaciones con nuestros resultados, sin embargo sern discutidos en un contexto un
poco ms amplio.

Como se esperaba los rangos de variacin diarios de pH y pCO2 en pozas

intermareales fueron significativamente mayores a los encontrados en los ambientes
control (columna de agua) con un valor de p<<0,001 en los dos ANDEVAs realizados con
los deltas de pH y pCO2, as tambin lo indica la prueba de Tukey realizada pues establece
que, los sitios son similares y solo los promedios de delta de pH entre el sitio 2 y 3 difieren,
lo que se condice con su distribucin espacial en la playa de Cocholge pues estos sitios
eran los que estaban ms alejados entre s, ya que la numeracin de los sitios se determin
al azar y no de forma correlativa. Sin embargo, debemos considerar que los anlisis
estadsticos indican de forma general que las diferencias observadas ocurren entre los
diferentes ambientes, no as entre los diferentes sitios, lo que sugiere que los rangos de
variacin diarios de pH y pCO2 durante marea baja en las pozas intermareales estn
fuertemente determinados por la fotosntesis y la respiracin. Junto con lo anterior
podemos sealar que los rangos de variacin de las pozas seleccionadas en la playa de
Cocholge son similares.

Los valores mnimos y mximos registrados de pH fueron 7,335-8,821 y 3198-68,7

atm de pCO2 en las pozas, en contraste con 7,650-8,209 de pH y 1439-348,8 atm de
pCO2 registradas en los ambientes control. Si comparamos estas variaciones con las
encontradas por Cornwall et al., (2013), quienes evaluaron la variacin diaria del pH del
agua de mar en bosques de macroalgas poco profundos (1-2 m), vemos que las

34
fluctuaciones en ambos trabajos presentan un patrn comn, el cual es que el pH del agua
aumenta en los periodos en que las macroalgas se encuentran fotosintticamente activas
(da) y disminuye en la noche (cuando estos organismos no estn fijando el CO2 del
medio), sin embargo los valores mnimos encontrados en el presente trabajo son an ms
bajos que los registrados en el trabajo antes mencionado (pH ms bajo 7,9) a pesar de que
en la investigacin desarrollada por el grupo de investigacin de Corwall et al., (2013)
hicieron un seguimiento continuo del pH durante toda la noche. Lo anterior, puede deberse
a que la toma de datos en el trabajo de estos autores se realiz en la estacin de verano, en
donde las aguas son ms clidas y por ello presentan una menor solubilidad, o al menor
volumen de agua que presentan las pozas pues como indican Middelboe y Hansen (2007)
la variacin del pH esta mayormente determinada por la profundidad y el volumen de agua
de la poza intermareal, que por la altura del intermareal. Tambin es importante destacar
que los datos de pCO2 obtenidos en m investigacin muestran que durante marea baja en
la tarde el CO2 se vuelve limitante para los organismos fotosintticos que habitan en pozas
intermareales registrndose en varias ocasiones valores menores a las 100 atm de pCO2.

Sin embargo no solo los valores de pH y pCO2 fueron los que presentaron una
enorme variabilidad diaria, si no que los dems parmetros fsico qumicos detallados en
este trabajo, como temperatura, AT, y oxgeno disuelto, tambin mostraron grandes
variaciones, acentuadas en las pozas intermareales. Se puede observar en los resultados
de esta investigacin que, al contrario de lo que sucedi con la pCO2, en los muestreos
realizados el oxgeno se vuelve limitante en pozas intermareales durante la madrugada
(ver tabla 4 y fig. 7) y se reporta una gran concentracin de oxgeno en los muestreos de
la tarde. Valores similares fueron reportados por Truchot & Duhamel (1980), quienes
encontraron que las variaciones en la cantidad de oxgeno disuelto en pozas intermareales
durante periodos en los cuales estas se encuentran aisladas del ocano son
extremadamente grandes, con valores extremos superiores a los presentados en esta
investigacin (mn 0,08 mg*L-1-mx 26,752 mg*L-1), esto probablemente se debe a que
ellos realizaron un seguimiento de pozas intermareales en marea baja durante todo el da
y la noche, y que adems los muestreos fueron realizados durante mareas equinocciales,

35
lo que provoca que el tiempo por el cual las pozas permanecieron desconectadas del
ocano fue mayor. Ellos tambin utilizaron como punto de comparacin lo que suceda en
el ocano, lo interesante de esto es que todos los registros de oxgeno disuelto que
encontraron en el ocano fueron menores a los detallados en este trabajo, incluso el valor
ms alto hallado por estos investigadores fue de 9,92 mg*L-1 inferior al promedio de
oxgeno disuelto calculado entre todos los datos de las 3 campaas en los ambientes
control (columna de agua) (10,617 mg*L-1).

Sumamente relevantes fueron los resultados que se evidenciaron en los ndices que
cuantifican la disponibilidad del carbonato de Calcio (Ca ) ( Ar) en las pozas (calculados
a partir de los datos obtenidos de pH y AT), pues todos los das de las tres campaas de
muestreo estos ndices indicaron una subsaturacin del CaCO3 ( <1) en este ambiente
en los muestreos realizados a las 07:00. Esto resultados sugieren una condicin
desfavorable para organismos calcificadores, pues como indican Kroeker et al., (2013) en
un estudio de meta-anlisis, los organismos que se ven mayormente afectados cuando
disminuye la disponibilidad de CaCO3 producto de la disminucin del pH, son los
moluscos, quienes ven mermada su tasa de calcificacin, abundancia y probabilidad de
sobrevivencia. Sin embargo, esto no se condice con la comunidad constituyente que habita
estos ambientes pues en todas las pozas la mayor parte de los invertebrados descritos
pertenecen a este Phyllum (ver tablas 5, 6 y 7). Es ms, los valores de pH en los trabajos
utilizados por el grupo de trabajo de Kroeker et al., (2013) (pH 7,6) no fueron tan bajos
como los que se encontraron en las pozas intermareales de Cocholge, por lo que en este
escenario debiesen estar en condiciones an ms desfavorables. Adems encontramos
otros organismos que tambin utilizan esta molcula para generar sus esqueletos o
estructuras e.g. cirripedios, mitlidos, crustceos zooplanctnicos, y macroalgas como
Corallina que segn Kroeker et al., (2013) tambin se veran afectados negativamente al
estar inmersos en aguas en que exista una subsaturacin del carbonato de calcio. Lo que
indica que organismos que habitan en pozas intermareales han desarrollado mecanismos
para protegerse o aislarse en situaciones en que el medio se vuelve menos alcalino. Segn
algunos estudios (Metalpa et al., 2011; Ries et al., 2009) al trasplantar a organismos

36
calcificadores como crustceos a elevados niveles de pCO2 estos pueden engrosar su
epicutcula para recubrir sus estructuras de carbonato de calcio (esqueleto), algo similar
sucede con los moluscos quienes aumentan el grosor de la capa protectora externa
(periostracum), en ambos casos estos mecanismos tienen un costo energtico para los
organismos pero a su vez generan que la tasa de calcificacin neta aumente en condiciones
de pH bajo. Tambin es importante el periodo de tiempo por el cual los organismos estn
expuestos a estas condiciones, pues en este trabajo por motivos logsticos se efectuaron
los muestreos cuando la marea baja se produjese cerca de las 07:00 y las 19:00, pero
cuando las mareas bajas suceden a mitad de la noche es probable que los organismos se
vean sometidos a condiciones mucho ms acidas y durante ms tiempo que en los
muestreos realizados en el actual trabajo.

Los datos recopilados en este trabajo muestran que durante periodos de marea baja
en pozas intermareales con un alto porcentaje de cobertura biolgica las variaciones que
ocurren en los parmetros fsico-qumicos estudiados son grandes y veloces, ya que estas
permanecen aisladas del ocano por un periodo de al menos 4 horas con una marea de 0,3
y es probable que en el momento en cual quedan aisladas del ocano las condiciones del
agua sean muy similares en todos los parmetros caracterizados a las que registre la
columna de agua. As lo indican los resultados obtenidos Truchot & Duhamel (1980)
quienes encontraron que cuando pozas intermareales se separan del mar las que presentan
una mayor biomasa de organismos son las que presentan una mayor variacin en cuanto
a pH, pCO2 y oxgeno, tambin es relevante la altura del intermareal a la cual se encuentre
pues esto puede determinar fuertemente el tiempo por el cual permanecen desconectadas.

Si bien no se observa un patrn claro asociado a la cobertura animal o vegetal al

observar la composicin de las comunidades de las pozas (ver tabla 5, 6 y 7) y contrastarlas
con los valores de Ca y Ar (ver fig. 9) salta a la vista que las pozas que presentaron los
ndices ms bajos en la cuantificacin de esta molcula en los muestreos realizados
durante la tarde fueron la 2 y la 1 (orden decreciente), las cuales ostentan una gran cantidad
de algas de tipo Corallina y Lithophyllum (la poza 2 presenta un mayor porcentaje de estas
algas que la poza 1), estos organismos fotoauttrofos segn el trabajo realizado por Steller

37
et al.,(2007) son capaces de fijar grandes cantidades de CaCO3, llegando a representar
cerca del 90% del peso seco del talo de estas macroalgas, adems el aumento de la
temperatura genera un incremento de la tasa fotosinttica, lo que a su vez provoca que la
fijacin del CaCO3 por parte de las algas del gnero Lithophyllum y Corallina aumente.

Las concentraciones promedios de pigmentos fotosintetizadores muestran que en

los ambiente poza la concentracin de estos fue mayor durante la tarde en comparacin
con lo que sucedi en los datos calculados para la madrugada, Contrario a esto fue lo que
sucedi en los ambientes control en donde los valores altos se registraron durante la
maana y los bajos durante la tarde en los diferentes sitios. El hecho que exista una mayor
concentracin de pigmentos fotosintetizadores durante la tarde indica que la biomasa
microalgal es mayor (Barocio et al., 2007), por lo que es de esperarse que la fijacin de
CO2 sea mayor y esto conlleve a un aumento en la escala de pH en estos ambientes. Sin
embargo estos valores pueden estar influenciados por haberlos calculado como
promedios.

En numerosos trabajos previos se exponen a organismos marinos como microalgas,

cnidarios, moluscos, equinodermos y crustceos, a elevados niveles de pCO2 (400-2000
mamt) en condiciones de laboratorio (Navarro et al., 2016;Ramajo et al., 2016; Dufault
et al., 2012; Byrne.2011; Byrne et al., 2009; Berge et al., 2006) para con ello intentar
dilucidar la respuesta de los mismos frente a potenciales escenarios de cambio climtico
respecto a la disminucin del pH en cerca de 0,3 unidades en el ocano abierto proyectada
para finales de siglo. Sin embargo como se observa en los resultados de este trabajo
algunos invertebrados marinos y algas presentes en pozas intermareales durante algunas
horas del da se encuentran en condiciones de pH y pCO2 mucho ms extremas que las
esperadas para el 2100. Es ms, todos los dems parmetros descritos en este trabajo
excepto la salinidad muestran rangos de variacin de gran magnitud en una escala
temporal sumamente corta (semidiurna) en pozas intermareales, por lo que las condiciones
recreadas en laboratorio en muchos trabajos que abordan la posible acidificacin del
ocano no estaran ms que exponiendo a los organismos a niveles de variabilidad natural
medio ambiental esto puede provocar un sesgo en los resultados obtenidos. Por lo que si

38
se desea desarrollar una investigacin en la que se exponen a organismos marinos a
elevadas concentraciones de CO2 y con ello bajo pH en el medio lo primero que se debe
hacer es conocer los rangos de variabilidad real y los niveles de los parmetros fsico-
qumicos a los cuales estn insertos de forma natural, pues como muestra este trabajo
organismos que habitan en pozas intermareales podran mostrar una mayor plasticidad en
cuanto a la respuesta frente a condiciones acidas del medio o situaciones en las cuales el
dixido de carbono (para las plantas) o el oxgeno (para los animales) se vuelve limitante
en estos ambientes.

Sera interesante que estudios posteriores analicen la variabilidad que presentan

ambientes intermareales a lo largo de un ao pues es de esperar que en periodos de
invierno en donde la fotosntesis est restringida a un periodo ms corto pues la noche es
ms larga los valores de pH en periodos de marea baja sean menores en contraste con lo
que pueda suceder por ejemplo en la estacin de verano.

Otros estudios podran adems considerar el abarcar ciclos mareales completos (24
horas), pues en este trabajo por razones logsticas solo se muestre 2 veces al da en la
maana y en la tarde, lo que no permite tener certeza de cules son los valores mnimos y
mximos que pueden llegar a alcanzar estos ambientes en los valores de pH y pCO2 y los
dems parmetros del sistema de carbonato.

Finalmente cabe mencionar que: sera relevante conocer el mecanismo que han
desarrollado los organismos calcificadores marinos para ser capaces de hacer frente a
condiciones en las que el pH del medio se vuelve casi neutro y como han podido adaptarse
a rangos tan amplios de variabilidad en los parmetros fsico-qumicos reportados en este
trabajo.

39
 CONCLUSIONES

Este estudio permite concluir que los ambientes de pozas intermareales presentan
rangos de variacin diarios de pH y pCO2 significativamente mayores a los
registrados en los ambientes control (columna de agua litoral) durante la estacin
de primavera. Cabe mencionar que todos los dems parmetros del sistema de
carbonatos junto con temperatura y oxgeno disuelto tambin muestran rangos de
variacin muy amplios en comparacin con el ocano, lo cual pudiera estar
determinado por la fotosntesis, respiracin y el ciclo de las mareas pues en
periodos de marea baja durante la madrugada, cuando los fotoauttrofos no estn
fijando el CO2 del agua los valores de pH son bajos y los valores de pCO2 altos, y
lo contrario sucede durante la tarde en marea baja.
Organismos calcificadores habitantes de pozas intermareales estn adaptados a la
variabilidad que presentan estos ambientes con respecto a la disponibilidad de
CaCO3, el cual oscila de forma directamente proporcional a las fluctuaciones de
pH, alcanzando valores de subsaturacin en periodos de marea baja durante la
noche en los ndices que cuantifican la disponibilidad de esta molcula. Sin
embargo la manera en la cual organismos calcificadores hacen frente a estas
condiciones adversas no fue investigada en este trabajo.
Para estudios posteriores que intenten determinar los impactos que tendr la AO
(en escenarios predichos a ocurrir para finales de siglo) sobre organismos
calcificadores se deber como primera medida caracterizar la variabilidad natural
del medio en el cual los organismos estn inmersos, pues como se observa en esta
investigacin lugares como pozas intermareales y aguas someras de la zona litoral
registraron valores inferiores y similares respectivamente de pH a los proyectados
para el ao 2100.

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