UNIDAD II.

- AGLUTINACIN
GUA DE ESTUDIO
1.- Qu son las reacciones de aglutinacin?
La aglutinacin es un agregado de clulas o partculas debido a una formacin
entrelazada. El fundamento de la aglutinacin es una reaccin inmunoqumica que
produce la agregacin de partculas o clulas recubiertas de antgeno o
anticuerpo.
La reaccin de la aglutinacin se divide en dos fases, la primera en la que se
produce el contacto antgeno-anticuerpo sobre la superficie de la partcula (o
clula) empleada, y la segunda en la que las partculas se agregan y se puede
visualizar la aglutinacin.
En esta reaccin se utilizan partculas como el ltex, o glbulos rojos capaces de
fijar artificialmente antgenos bacterianos, de tal manera que en el momento que la
reaccin del suero del paciente esas partculas pueden ser aglutinadas y formar
agregados visibles. Los sueros de los pacientes y los controles positivos y
negativos se diluyen en forma seriada hasta encontrar la dilucin ms alta que
todava produce aglutinacin fcilmente identificable.
Los resultados se expresan como ttulo de aglutinacin que corresponde a la
recproca de la dilucin ms alta que produce aglutinacin. (Gonzlez- Amaro R,
1999).
2.- Cules son los factores que influyen en una reaccin de aglutinacin?
Especificidad: capacidad de los anticuerpos para distinguir entre dos ligandos de
estructura similar. La unin dada por la especificidad es muy precisa y permite
distinguir entre grupos qumicos con diferencias mnimas.
Rapidez: la velocidad con que ocurre la primera etapa de la reaccin Ag-Ac es del
orden de milsimas de segundo, y est limitada nicamente por la difusin. La
segunda etapa, que es ms larga, incluye todas las manifestaciones que se
presentan como consecuencia de la interaccin, tales como precipitacin,
aglutinacin, neutralizacin, etctera.
Espontaneidad: la reaccin Ag-Ac no requiere energa adicional para efectuarse y
es factible explicarla en trminos de la ley de accin de masas:

Reversibilidad: dado que la reaccin se debe a fuerzas no covalentes, es

reversible y, en consecuencia, se ve afectada por factores como la temperatura, la
proporcin de Ag-Ac, el pH y la fuerza inica. En pruebas de laboratorio que usan
la aglutinacin como punto final, la alteracin de las condiciones fsicas del
sistema puede incrementar o reducir la sensibilidad de la prueba.1
Temperatura: tiene efectos inversamente proporcionales con la constante de
equilibrio y la velocidad de reaccin si uno se aleja de los puntos ideales de
trabajo.
ph: se dice que entre 6 y 7.3 se detecta a la mayora de los antgenos eritrocitarios
clnicamente significativos, con excepcin del anti-M, el cual acta mejor a pH ms
bajo.
Almacenamiento de reactivos: entre los que figura principalmente la solucin
salina isotnica, la cual despus de un largo periodo de almacenamiento el pH
baja a 5.0, por lo que algunos tcnicos prefieren la utilizacin de soluciones
amortiguadas en las pruebas serolgicas.
La fuerza inica: est directamente relacionada con el potencial Z.
Tiempo de incubacin: se hace alusin al tiempo necesario para alcanzar el
equilibrio; vara para la mayora de los anticuerpos y su medio de reaccin.
Concentracin de antgeno-anticuerpo: aunque est muy relacionada, un exceso
de anticuerpos puede inhibir la aglutinacin.( Bautista JJ, 2004)
3.- Cmo se clasifican las reacciones de aglutinacin?
Aglutinacin directa
Un antgeno celular o de partculas insolubles es aglutinado directamente por el
anticuerpo. Un ejemplo de esto es la aglutinacin de los eritrocitos del grupo A por
antisueros antiA, la aglutinacin de los eritrocitos RH positivos por el antisuero
anti-D o la aglutinacin del antgeno brucelar por anticuerpos anti-Brucella. Gran
cantidad de partculas como pueden ser eritrocitos, bacterias, hongos y virus
pueden ser aglutinados por anticuerpos sricos, algunas veces de manera
inespecfica y otras muy especfica, siendo sta ltima, respuesta a una previa
inmunizacin del organismo productor de los anticuerpos sricos.
Aglutinacin indirecta
Se refiere a la aglutinacin de las clulas recubiertas de antgeno o a las partculas
inertes que son portadoras pasivas de antgenos solubles. Se tienen ejemplos de
lo anterior en la utilizacin de partculas de gelatina en la bsqueda de anticuerpos
contra Treponema pallidum por aglutinacin pasiva (TPPA), la fijacin del ltex
para VDRL en la sfilis y en la utilizacin de eritrocitos en la prueba de
hemaglutinacin indirecta (HAI) en la bsqueda de anticuerpos contra
Tripanosoma cruzi, agente causal de la enfermedad de Chagas. De manera
alterna, el antgeno puede ser localizado recubriendo partculas de ltex o
eritrocitos con anticuerpo purificado y practicando la llamada aglutinacin inversa.
Inhibicin de la aglutinacin
La inhibicin de la aglutinacin, si se arregla de manera cuidadosa con antgenos
altamente purificados, puede ser usada como un indicador sensible de la cantidad
del antgeno en diversos lquidos de los tejidos.
Hemaglutinacin viral
Otra categora de aglutinacin que involucra la aglutinacin espontnea de los
eritrocitos por ciertos virus, es la reaccin de hemaglutinacin viral, la cual puede
inhibirse de manera especfica en presencia de anticuerpos. Por lo tanto, la
hemaglutinacin viral puede emplearse para medir la cantidad de virus o para
determinar, por inhibicin homloga, el ttulo de los anticuerpos dirigidos en contra
de los virus hemaglutinantes.
Hemaglutinacin indirecta (pasiva)
Este tipo de aglutinacin se lleva a cabo utilizando eritrocitos recubiertos de
antgenos, o anticuerpos acoplados de manera espontnea (adsorcin pasiva) o
mediante un acoplamiento qumico, utilizando diversas sustancias para este fin,
tales como Acido tnico Bencidina bisdiazoada (BDB), Cloruro crmico (CrCIs),
Glutaraldehdo, clorurocianrico entre otros.
Inhibicin de la hemaglutinacin
El principio de este anlisis es que, el anticuerpo incubado previamente con
antgenos homlogos solubles o de reaccin cruzada, es inactivada cuando se
incuba con eritrocitos recubiertos de antgeno. Este mtodo de inhibicin de la
hemaglutinacin ha resultado muy til para la identificacin de HBsAg en la
hepatitis y para la identificacin del antgeno factor VIII en la hemofilia y trastornos
afines de la coagulacin. (Daniel p: Stites, 1998).

Bibliografia:
Gonzlez- Amaro R, Snchez- Madrid F Cell. Adhesin molecules: selectins and
integrins. Crit Rev Immunol 1999; 19:389
Bautista JJ. Factores que intervienen en la reaccin antgeno-anticuerpo. Gac
Med Mex 2004;140 (Supl 3):S28-S30.
Inmunologa Bsica y Clnica, autor Daniel p: Stites y H. Hugh Fuden 9 Edicin
1998. 2. Engvall E, Perlmann.