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Contenido
12.1 Vinculacin entre la ciencia y medicina de animales de laboratorio.
1. Conceptos y desarrollo histrico de la especialidad
2. Principales especies utilizadas
3. Caractersticas generales
4. Legislacin y normatividad
En la mayor parte de los pases donde se utilizan animales de laboratorio en
gran escala, existen mecanismos de regulacin, los cuales pueden ocurrir a
diferentes niveles y extensin territorial. La unin Europea tiene una ley de
bienestar animal con efectividad en todos los pases miembros, que contempla
los estndares mnimos que se deben proporcionar a los animales de
laboratorio. Los Estados Unidos de Amrica cuentan con leyes federales: Ley
para el Bienestar de los Animales de Laboratorio, 1966; Ley para el Bienestar
Animal, 1970 con sus enmiendas de 1976 y 1985; Ley de investigacin en
Salud, 1985; Ley para el Aseguramiento de los Alimentos, 1985; as como,
leyes estatales. Por otra parte se cuenta con La Gua para el Cuidado y Uso de
los Animales de Laboratorio, el cual es sin ser una ley es el principal
documento de referencia para el manejo de estos animales, as como para la
certificacin de bioterios en ese pas. De igual forma Canad cuenta con el
Manual sobre el Cuidado y Uso de los Animales de Experimentacin, el cual es
el equivalente de la gua americana antes mencionada y es utilizado en
Canad para certificar a los bioterios.
En Mxico se cuenta con la Norma Oficial Mexicana, NOM-062-ZOO-1999, Para
la Produccin , Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio. Adems de captulos
ms generales en la Ley General de Salud y su reglamento, y de legislaciones
locales como la ley para la prevencin de la crueldad en los animales del D.F., y
el proyecto de Ley General de Bienestar Animal. La Gua para el Cuidado y Uso
de los Animales de Laboratorio de los Estados Unidos de Amrica fue traducida
al espaol por la Academia Nacional de Medicina y se usa tambin como
referencia.
Asimismo, existen directrices internacionales enfocadas a favorecer el
bienestar de los animales de laboratorio considerando a su vez las necesidades
propias de la investigacin, como las emitidas por el Consejo Internacional para
los Animales de Laboratorio (ICLAS).
Mega y Macroambientales.
Aire: la calidad del aire en un bioterio varia dependiendo de una serie de
factores como son nmero y tipo de partculas suspendidas en l, la variacin
en la proporcin de gases que lo forman, la calidad del aire en un cuarto y la
calidad de ste en la caja; varan en la concentracin y tipos de partculas,
vapores y humos que los forman, algunos incluso pueden causar dao al
sistema respiratorio de los animales.
Humedad: la cantidad de humedad en un bioterio se sujeta a su relacin con
la temperatura; humedades mayores al 70% pueden traer como consecuencia
una mayor susceptibilidad a las enfermedades por los animales, y menores del
40% pueden propiciar la presentacin de resequedad y problemas de la piel.
Temperatura: la temperatura ambiental es un componente muy importante
del ambiente, ya que afecta el metabolismo y la conducta al estimular el uso
de mecanismos de regulacin de la temperatura propia del animal.
Cuando la temperatura ambiental se eleva o disminuye del nivel termoneutral,
es decir cuando el nivel de temperatura en el cual el consumo de oxgeno de
un animal es mnimo e independiente de los cambios de la temperatura
ambiental, existen ciertos mecanismos de adaptacin ante estos cambios,
stos son: la piloereccin, la postura de "feto" para reducir la prdida de calor,
el jadeo, aumento o disminucin de ingesta de alimento, agua, etc.
Iluminacin: puede ser natural o artificial, la luz artificial debe ser lo ms
parecida a la luz natural. La intensidad o cantidad de luz en una habitacin o
cuarto de trabajo debe ser uniforme y suficiente para no slo cubrir las
necesidades fisiolgicas de los animales, sino tambin para permitir al personal
el desempeo adecuado de sus actividades e inspeccin de los animales. Otro
aspecto importante de la iluminacin es el fotoperodo es decir la duracin del
periodo de iluminacin, el cual influye en la calidad e intensidad de la
actividad reproductiva, el consumo de alimento y la conducta general de los
animales.
Ruido: se sabe que los animales que estn expuestos al ruido, ya sea originado
por el movimiento de anaqueles, carros de transporte, personas, as como del
lavado del equipo trae consigo malestar en el animal, llegndoles a causar
lesiones. Es as que la exposicin continua a ruidos excesivos mayores a 85 dB
( decibeles ), daan el odo y producen cambios negativos en el nivel de clulas
sanguneas y aumento de peso de las glndulas adrenales de roedores.
Productos qumicos: muchos de los presentes en el bioterio pueden inducir
cambios en la actividad enzimtica del hgado, o afectar el sistema inmune, la
conducta, otros son alegenos, mutgenos, teratgenos y carcinognicos. Los
efectos son modulados por la interaccin entre factores qumicos
(concentraciones, propiedades fisico-qumicas, duracin, frecuencia, va de
exposicin e interaccin con otros agentes) y factores del uesped (especie,
edad, sexo, cepa, estado nutricional, funcin inmunitaria y condicin
microbiolgica). Estos productos qumicos llegan al microambiente por el aire,
agua, cama, alimento, superficies de contacto (cajas) y el personal del bioterio.
El contaminante ms frecuente es el amoniaco.
Microambiente
Tipo de Cajas: la caja o jaula influye directamente en las respuestas
biolgicas del animal cuando se lleva a cabo un experimento. Adems se debe
considerar en el diseo y construccin de una caja la influencia en la cantidad
de aire, luz y sonido que el animal recibe y la cantidad de calor, humedad y
gases.
Las cajas deben ser construidas de materiales no ingeribles o que tengan
alguna reaccin con los productos de desecho.
Hay cajas o jaulas de diferente tamao y forma, individuales y colectivas, con
cama directa o indirecta, de compresin (cepo), metablica, de transporte, etc.
La eleccin de la caja va a depender de las necesidades de investigacin o del
sistema de reproduccin que se requiera.
Los materiales pueden ser: madera, lmina, alambre, acrlico, policarbonato,
etc.
Su eleccin tambin depender del nmero de animales a alojar.
Material de cama y nido: Se le llama cama a los materiales que se utilizan para
ocupar el piso de las cajas. La cama puede ser de: viruta de madera, madera
picada, olote de maz picado, papel tratado (sin tinta o contaminantes), arena,
bagazo de caa, pajas de trigo, etc.
Algunas cepas de ratones y hmsteres hacen nidos, por lo que es necesario
ofrecerles un material adecuado (viruta de madera, pajas, papel , etc.).
Es recomendable el cambio de cama con frecuencia para evitar que se
acumulen desechos amoniacales, humedad y temperatura, los cuales irritan el
aparato respiratorio del animal y predisponen al padecimiento de
enfermedades.
Comederos y Alimento: los comederos deben ser funcionales, con una
dimensin de acorde al tamao de la caja o jaula y con un diseo adecuado
que facilite el acceso del animal de laboratorio al alimento. Los hay simples y
automticos, lo ms recomendable es que los comederos sean durables (de
acero inoxidable), esterilizables y fciles de limpiar.
El alimento es elaborado comercialmente de acuerdo a los requerimientos
nutricionales y por lo general son fabricado en forma de bolos o pelets. El
alimento necesita cumplir los siguientes requisitos:
1. Nutricionalmente balanceado y biodisponible
2. Tener un adecuado abasto de alimento que se recambie peridicamente,
porque un alimento viejo es bajo en nutrimentos.
3. Vigilar la eventual presencia de moho, gusanos o insectos.
4. Evitar que este pulverizado (causa trastorno respiratorios en los animales)
5. Preferir el alimento extrudo o expandido
Bebederos: al igual que los comederos, deben ser funcionales, con una
dimensin de acuerdo al tamao de la caja y con un diseo adecuado que
facilite el acceso del agua por el animal. Los hay de diseo simple, como son
las botellas de plstico, policarbonato o de vidrio de 250, 500 y 1000 ml (8, 16
o 32 onzas) con tapn de hule o de plstico, con o sin tubo de acero o aluminio.
Para su colocacin pueden requerir de un portabotellas; existen tambin
automticos acoplados a la caja. Se recomienda que sean fciles de limpiar,
durables y esterilizables.
Densidad de poblacin e interaccin con otros animales: cuando se
coloca una hembra y un macho por motivos reproductivos, una hembra con sus
hijos o dos o ms animales con fines de investigacin. Es importante recordar
que el microambiente cambia cuando se introducen nuevos animales en la
caja, cada animal es diferente, esto se nota ms en los animales exogmico, y
reaccionan de manera diferente a otro animal cuando estn en una misma
caja, de igual forma se establece una interrelacin especial con el ambiente de
la caja, siendo diferente este ambiente al de otras cajas.
La densidad de poblacin influye en el estado fisiolgico y emotivo de los
animales por lo que afecta profundamente la respuesta experimental.
Enriquecimiento ambiental: Los animales deben de contar con elementos
que favorezcan su bienestar, les permitan jugar, ejercitarse y explorar su
ambiente, reducir el tiempo de ocio, estimular su desarrollo neurolgico y
simular actividades propias de su naturaleza, estos elementos debern ser de
materiales durables, lavables, esterilizables y no txico.
Desechos: los residuos de alimento, cama, heces y orina del animal
conforman los desechos que existen en una caja. Si no se realiza una adecuada
limpieza de la caja en forma diaria, estos elementos se sumarn y sern
factores predisponentes para que un animal presente problemas en su aparato
respiratorio o digestivo. Ya que al conjugarse entre ellos o por si solos
producirn sustancias irritantes (como amoniaco) y crearn adems un medio
favorable para el crecimiento de microorganismos dainos para el animal.
Debidos al Personal: las caractersticas del personal en cuanto a la salud,
carcter, disciplina para efectuar su trabajo y para hacer un manejo adecuado
de los animales harn un medio ambiente ms o menos favorable para los
animales de laboratorio.
Debidos al sistema de produccin: si el fin de produccin en un bioterio es
el de producir cepas endogmicas el medio ambiente necesitar un mayor
control que si se requiere obtener cepas exogmicas, ya que las primeras
requieren una variacin mnima del medio ambiente .
Debidos a los procesos experimentales: ya sea debido al uso de
sustancias, microorganismos, o bien a causas iatrognicas (de la propia
persona) durante el desarrollo de un experimento, se modificar el medio
ambiente, alterando la vida del animal dentro de su microambiente.
Cuarentena y acondicionamiento.
El bioterio debe contar con un sector especfico e independiente para este
propsito, el cual debe evitar el contacto con colonias ya establecidas y la
posible transmisin de enfermedades por animales recin llegados. Sus
dimensiones dependern de la cantidad y variedad de animales adquiridos de
fuentes externas. Este cuarto (s) debe permitir la separacin fsica de especies
y la realizacin de evaluaciones y tratamientos cuarentenarios, indispensables
para favorecer un periodo de acondicionamiento ptimo en los animales, previo
a su uso experimental, durante el cual se logra su estabilizacin y se
familiarizan con sus nuevas instalaciones.
Cuartos para produccin y mantenimiento de los animales.
Cualquier local destinado para mantener animales de laboratorio por 24 horas
o ms, es considerado un cuarto de alojamiento. Las diferentes especies de
animales de laboratorio deben alojarse en cuartos independientes, a menos
que el CICUAL autorice lo contrario, de acuerdo a las caractersticas del
protocolo de investigacin o el propsito experimental o reproductivo al cual
estn sujetos. Los bioterios deben contar con cuartos especiales para el
alojamiento y/o aislamiento de sujetos inoculados con radioistopos, agentes
infecciosos o bien sustancias txicas.
Cuarto para procedimientos diversos de uso mltiple.
Es un rea independiente en donde se realiza la manipulacin experimental de
animales, sus tratamientos, recoleccin de fluidos corporales o necropsias,
identificacin, preparacin quirrgica u otros sin afectar a otrosanimales.
rea de ciruga.
Sector del bioterio destinado para y equipado de acuerdo con el desarrollo de
procedimientos experimentales, analticos o de enseanza que requieran el
empleo de tcnicas quirrgicas con supervivencia del animal en condiciones
aspticas. Sus dimensiones y equipamiento estarn en funcin de las
necesidades de la institucin. Si se realiza ciruga mayor con supervivencia del
animal, tiene que existir un quirfano. Otras cirugas slo requieren tcnicas
aspticas. Si no hay supervivencia slo se sugieren tcnicas limpias.
rea de recuperacin.
Destinada y equipada de acuerdo con las necesidades de atencin de sujetos
sometidos a procedimientos invasivos, de conformidad con el criterio
veterinario. Sus dimensiones y equipamiento estarn en funcin de las
necesidades de la institucin.
reas de apoyo.
Dependiendo del programa de trabajo, los servicios de los bioterios deben
integrarse a travs de diferentes sectores de apoyo a la operacin, mismos que
permiten un funcionamiento armnico.
Almacn de consumibles.
Debe existir un almacn para guardar el material de cama limpia de los
animales de bioterio, como viruta de madera u otros. Este depsito
conjuntamente con el del alimento debe mantener una independencia efectiva
(a prueba de fauna nociva y contaminacin) de los insumos destinados para
animales de laboratorio, a fin de evitar la infestacin con roedores silvestres.
Almacn de equipo.
Los bioterios deben contar con un almacn de equipo que permita guardar
caja, jaulas y accesorios de uso rutinario.
rea de preparacin de dietas.
En bioterios donde el programa de trabajo lo justifique o a juicio del mdico
veterinario se requiera. Su diseo debe permitir el mantener los insumos en un
lugar independiente, fresco y libre de contaminacin o fauna nociva
indeseable.
rea de lavado.
Debe ubicarse independiente a las reas de alojamiento animal, evitando que
el ruido generado en sta disturbe secciones ocupadas por animales o
humanos. Contar con el equipo necesario para satisfacer los requerimientos
de limpieza y desinfeccin del bioterio.
Depsito y eliminacin de desechos del bioterio.
Debe encontrarse independiente a las reas de alojamiento de los animales y
debe contar con equipos como refrigeradores, trituradores, contenedores y
otros equipos, de acuerdo con la necesidad de mantener un manejo higinico
de los desechos. Los cadveres, rganos o sus partes, tejidos, lquidos
corporales, materiales punzocortantes, jeringas y agujas hipodrmicas, entre
otros, considerados residuos peligrosos biolgico-infecciosos, sern manejados
y eliminados de acuerdo con la Norma NOM-087-ECOL-94, as como a la Ley
General del Equilibrio Ecolgico y la Proteccin al Ambiente (bolsas de color
rojo o amarillo segn el caso y depositarse en contenedores especiales). Los
desechos de los bioterios que no son contaminantes o biolgicos infecciosos
(desechos municipales), deben colocarse en bolsas transparentes en el
depsito general de basura.
5. Control de la reproduccin
A. Mtodos de identificacin.
Para llevar un eficiente control de la produccin y en particular del control
gentico de una poblacin es necesario contar con un mtodo de identificacin
de los animales que sea adecuado tanto para la especie como a las
necesidades del sistema de produccin establecido. La identificacin puede
realizarse a nivel de la caja, grupo, jaula o directamente en el cuerpo del
animal. Los mtodos de identificacin pueden ser:
a. Temporales: pintura sobre el pelaje o la piel, identificacin de
particularidades, cicatrices, etc.
b. Permanentes: identificacin de particularidades (patrn del pelaje, pigmento,
huellas, nasograma, etc.), muescas en las orejas, aretes numerados, tatuajes,
microchips, entre otros.
Por ningn motivo se recomienda la amputacin de falanges o partes de la cola
u otras partes del cuerpo.
B. Registros y Control estadstico de la produccin.
Se basa en el sistema de registros, fichas o similar, se debe considerar los
siguientes parmetros:
Origen individuos de los individuos reproductores, edad y peso
N y periodicidad de los partos
Fecha de nacimiento
N de animales nacidos vivos / muertos
Tasa de supervivencia
Tasa de mortalidad
Proporcin de sexos
C. Control fenotpico de la produccin.
La evaluacin de las siguientes caractersticas fenotpicas proporcionan
informacin sobre la calidad de nuestra produccin, los parmetros son:
Tiempo a la apertura de los ojos
Tiempo a la aparicin de la capa de pelo
Incidencia o % de malformaciones (ponderar su aparicin al nacer o al
destete).
D. Homogeneizacin de camadas o reparticin de hurfanos.
Es un mtodo para uniformar el tamao del las camadas por el cual se
distribuyen las cras excedentes, hurfanas, seleccionadas o derivadas por
cesrea en el caso de animales gnotobiticos.
El procedimiento consiste en reunir a las cras de distintas hembras con la
misma
fecha de parto, proporcionarles una H nodriza ya sea mezclndolas entre sus
cras o sustituyndolas, segn sea el caso, con el objetivo final de uniformizar
el nmero de cras por camada, sexos, o rescatar animales seleccionados
(extincin, banco gentico, derivados por cesrea, etc.).
6. Seleccin de reproductores
La seleccin de reproductores se basa en la seleccin de las hembras (H) ms
adecuadas para formar la colonia reproductora, este es un aspecto
fundamental en el xito del abastecimiento de animales y maximizacin de
material, equipo y trabajo del personal tcnico. Su seleccin se basa en la
productividad de la hembra, la cual se mide con el ndice Q (se expresa como
IQ), el cual es un indicador matemtico que representa el nmero de cras
producidas por das de manejo y se ilustra a continuacin:
IQ= CP X 100 das / DA
En donde: CP corresponde al nmero acumulado de cras producidas, DA son
los das acumulados de la primera cruza al ltimo destete. Este valor tiene la
ventaja de homogeneizar a todas las hembras reproductoras, con lo cual se
pueden comparar entre si.
En el caso de las ratas se consideran se debe estimar este ndice en dos
periodos de vida econmicamente productiva de las hembras, a las 15 y a las
30 semanas.
El primero,
IQ15 semanas= CP x 105 / DA
Permite evaluar la productividad de las hembras entre el segundo y el tercer
parto, es decir se seleccionan las cras de cada hembra para formar la
siguiente generacin.
El segundo,
IQ25 semanas= CP X 210 / DA
Evala en forma terica la productividad de las hembras en la totalidad de su
vida econmicamente productiva (desde la primera cruza hasta el ltimo
destete).
Los siguientes parmetros determinan la seleccin:
-> IQ 15 semanas -2 = No seleccionados
-2 > IQ 15 semanas < promedio = Seleccin de una hembra
Promedio > IQ 15 semanas +2 = Seleccin de dos hembras y un
macho +2> IQ 15 semanas < = No seleccionados
El uso de estos parmetros tiende a mantener la variacin normal entre
generaciones y a su vez homogeniza las caractersticas de los animales de la
colonia.
Se proponen valores de 35 das en ratn, 63 das en rata.
FIGURAS
Figura 4. Rata
Figura 5. Jerbo
Figura 6. Hmster
Figura 7. Cobayo
Figura 8. Conejo Nueva Zelanda