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Determine NOTAS:

HIV-1/2 Ag/Ab Combo El resultado de la prueba es positivo aunque las barras del paciente sean de un color ms claro o ms oscuro que la barra de control.
Si un resultado de prueba no vlido se produce varias veces o si desea obtener asistencia tcnica, pngase en contacto con su
distribuidor local o llame a Technical Support.
ES LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
Alere Determine HIV-1/2 Ag/Ab Combo est diseado para detectar simultneamente anticuerpos de HIV-1 y/o HIV-2 y antgenos
Estas instrucciones de uso deben leerse atentamente antes de realizar pruebas. Las instrucciones se deben seguir en consecuencia. (Ag) no inmunocomplejos HIV-1 p24 en forma libre, en suero humano, plasma y sangre entera. Otros fluidos corporales o especmenes
No se puede garantizar la fiabilidad de los resultados del ensayo si existen desviaciones con respecto a estas instrucciones de uso. agrupados puede que no arrojen resultados y no deberan ser usados.
La intensidad de las barras Ab y Ag no tiene correlacin con el ttulo [proporcin; N.T.] de anticuerpo y antgeno en el espcimen.
NOMBRE Y FINALIDAD PREVISTA
Ninguna prueba provee seguridad absoluta de que un espcimen no contiene niveles bajos del antgeno HIV-1 p24 y/o anticuerpos de
El Alere Determine HIV-1/2 Ag/Ab Combo es un inmunoensayo in vitro, con lectura visual y cualitativo para la deteccin simultnea del HIV-1 y HIV-2, tales como los que estn presentes en una etapa muy temprana de la infeccin.
antgeno (Ag) no inmunocomplejo HIV-1 p24 en forma libre y anticuerpos (Ab) de HIV-1 y HIV-2 en sangre humana. La muestra puede ser
suero, plasma, sangre obtenida por un pinchazo en el dedo o sangre total. La prueba est destinada a servir como ayuda en la deteccin Un resultado negativo tanto para anticuerpos de HIV como antgeno p24 no impide la posibilidad de haberse expuesto a o infeccin con
del antgeno HIV-1 p24 y anticuerpos de HIV-1/HIV-2 de personas infectadas. viruses de HIV-1 o HIV-2.
Un resultado positivo para anticuerpos de HIV con un resultado negativo para antgeno p24 no impide la posibilidad de una infeccin
RESUMEN Y EXPLICACIN DE LA PRUEBA aguda.
El SIDA (Sndrome de Inmunodeficiencia Adquirida) se caracteriza por cambios en la poblacin de linfocitos de clulas T. En un individuo Los resultados positivos deberan ser confirmados usando otro mtodo y los resultados deberan ser evaluados a la luz de la evaluacin
infectado, el virus provoca una disminucin de las clulas T colaboradoras, lo que deja a la persona expuesta a infecciones oportunistas clnica total antes de realizar un diagnstico.
y a algunos tumores. El virus que provoca el SIDA existe como dos tipos relacionados denominados HIV-1 y HIV-2. La presencia de HIV
provoca en primer lugar la secrecin del antgeno p241,2 seguida de la produccin de anticuerpos especficos a HIV-1 o HIV-2.3,4,5 Se ha demostrado que en algunas personas infectadas por el VIH que toman medicamentos antirretrovirales se producen resultados
falsos negativos al realizar un test rpido. 10,11,12
FUNDAMENTOS BIOLGICOS DEL PROCEDIMIENTO
El Alere Determine HIV-1/2 Ag/Ab Combo es una prueba inmunocromatogrfica para la deteccin cualitativa del antgeno p24 y CARACTERSTICAS DEL RENDIMIENTO DE LA PRUEBA
anticuerpos de HIV-1 y HIV-2. El espcimen es aadido a la almohadilla de la muestra. El espcimen se mezcla con un anticuerpo anti-p24 El rendimiento del Alere Determine HIV-1/2 Ag/Ab Combo ha sido determinado probando especmenes de donantes de sangre
biotinilado, un conjugado coloide de selenio-antgeno y un anticuerpo coloidal de selenio-anti p24. Esta mezcla contina migrando aleatorios, de pacientes infectados con HIV, pacientes con riesgo de infeccin con HIV o en otras categoras clnicas y paneles comerciales
a travs de la fase slida hacia el avidin inmovilizado, antgenos recombinantes y pptidos sintticos en los sitios de la ventanilla del de sero-conversion. Adems, 30 muestras frescas aparejadas confirmaron positivo para aquellos probados para HIV-1. Las evaluaciones
paciente. del rendimiento fueron realizadas en nueve estudios clnicos en Europa, frica, Asia y Suramrica.
Si los anticuerpos HIV 1 y/o HIV 2 estn presentes en la muestra, los anticuerpos se unen al coloide de selenio-antgeno y a los antgenos
recombinantes inmovilizados y los pptidos sintticos, formando una barra roja en el sitio de la ventanilla de anticuerpo HIV del paciente. SENSIBILIDAD
Si los anticuerpos de HIV-1 y/o HIV-2 estn ausentes, el coloide de selenio-antgeno fluye ms all de la ventanilla del paciente y no se La sensibilidad se ha evaluado probando muestras positivas de anticuerpos a HIV, paneles de seroconversin comerciales y especmenes
produce una barra roja la ventanilla de anticuerpo HIV del paciente. de pacientes con infeccin de HIV primaria (aguda).
Si el antgeno (Ag) no-inmunocomplejo HIV-1 p24 en forma libre est presente en el espcimen, el antgeno se une al anti-p24 biotinilado 1. Especmenes positivos a anticuerpos del HIV:
de la almohadilla de la muestra y al anticuerpo anti-p24 coloide de selenio y se combina al avidin inmovilizado formando una barra roja en Tabla I
el sitio de la ventanilla de anticuerpo HIV del paciente. Si el antgeno p24 no est presente, tanto el anti-p24 biotinilado como el anticuerpo
anti-p24 coloide de selenio fluyen ms all de la ventanilla del paciente y no se produce una barra roja en el sitio de la ventanilla de Sensibilidad de Alere Determine HIV-1/2 Ag/Ab Combo
anticuerpo HIV del paciente. Para asegurar la validez del ensayo el dispositivo del ensayo tiene incorporada una barra de control del
procedimiento. Tipos Nmero de especmenes Positivo por Alere Sensibilidad
a prueba Determine HIV 1/2 Ag/
CONTENIDO Ab Combo
Alere Determine HIV-1/2 Ag/Ab Combo para 20 pruebas (7D2646) o 100 pruebas (7D2647) HIV-1 885 885 100.00 %
Tarjeta de prueba Alere Determine HIV-1/2 Ag/Ab Combo, para 2 o 10 tarjetas (10 pruebas/tarjeta) recubiertas con antgeno HIV-1/2
recombinante y pptidos sintticos, anticuerpos anti-p24 y avidina.
Grupo O de HIV-1 7 7 100.00 %
Subtipos no B de
ACCESSORIOS (necesarios pero no incluidos) 154 154 100.00 %
HIV-1*
Para realizar pruebas en muestras de sangre total. HIV-2 133 133 100.00 %
CHASE BUFFER 1 botella de (2.5 ml) de buffer de deteccin (7D2243) preparado en buffer fosfato.
Total 1179 1179 100.00 %
Conservantes: agentes antimicrobianos.
*Subtipos: A, C, D, F, G, H, J, K y CRF AE, AG, AD, BD, 06, 09 y 011.
Sangre total (ensayo por puncin digital)
Se realizaron pruebas en un total de 1179 especmenes positivos de anticuerpos a HIV confirmados (tabla I). Se ha calculado que la
EDTA CAPILLARY TUBES (7D2227) sensibilidad del diagnstico de Alere Determine HIV-1/2 Ag/Ab Combo en esta poblacin de especmenes sea del 100%.
Lancet
Tabla II
ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES Comparacin de resultados obtenidos con Alere Determine HIV-1/2 Ag/Ab Combo con especmenes
Slo para su uso en diagnstico in vitro. emparejados de suero, plasma y sangre total (venopuncin y puncin digital).
Slo para uso profesional.
Correlacin
Hoja de datos de seguridad disponible para usuarios profesionales previa solicitud. Especmenes entre matrices
Pacientes con niveles elevados de triglicridos pueden producir resultados falsos positivos con el Alere Determine HIV-1/2 Ag/Ab Combo.
Tipo de espcimen
PRECAUCIN:
Se deben seguir las prcticas7,8 sobre seguridad de la biotecnologa adecuadas para la manipulacin de especmenes y reactivos. Entre N de especmenes Sangre total Sangre total
Suero Plasma
estas precauciones se incluyen entre otras: emparejados a prueba (venopuncin) (puncin digital)
Lleve guantes.
91 91 91 91 - 100 %
No pipetee ningn material con la boca.
No coma, beba ni fume, ni se aplique cosmticos ni manipule lentillas en la zona en las que se manipulan estos materiales. 20 - - 20 20 100 %
Limpie y desinfecte todas las salpicaduras de especmenes o reactivos con un desinfectante adecuado, como hipoclorito de sodio al 0.5%, 9 - 9 9 - 100 %
u otro desinfectante adecuado.6
22 22 22 - 22 100 %
Descontamine y elimine todos los especmenes, reactivos y otros materiales posiblemente contaminados de conformidad las normas
locales.7,8 Nmero total de especmenes a prueba

ALMACENAMIENTO 142 113 122 120 42 100 %

Las tarjetas de prueba y el buffer de deteccin de Alere Determine HIV-1/2 Ag/Ab Combo se deben guardar a temperaturas entre 2 y Varios especmenes (emparejados):
30 C hasta la fecha de caducidad.
Se realizaron pruebas de especmenes positivos de un total de 142 individuos de frica, Europa y Sudamrica. Se obtuvieron varios
Cuando se manipulan y guardan segn las instrucciones, los componentes del kit se mantienen estables hasta la fecha de caducidad. especmenes (emparejados) de varios de estos donantes. De estos 142 individuos, se obtuvieron 113 especmenes de suero, 122
No utilice los componentes del kit despus de la fecha de caducidad. especmenes de plasma, 120 especmenes de sangre total (venopuncin) y 42 especmenes de sangre total (puncin digital) en diversas
Vuelva a guardar inmediatamente las pruebas no utilizadas en la bolsa de aluminio que contiene el desecante presionando el cierre de combinaciones.
un extremo a otro para cerrarla. Especmenes de sangre total (venopuncin):
No utilice dispositivos que se hayan mojado ni en caso de que el envoltorio se haya estropeado. Se realizaron pruebas en 120 especmenes de sangre total (venopuncin). De estos especmenes, 91 estaban emparejados con suero
y plasma, 9 pares estaban emparejados con plasma y 20 pares estaban emparejados con sangre total (puncin digital).
RECOGIDA DE ESPECMENES
Especmenes de sangre total (puncin digital):
Recogida de suero, plasma y sangre total por venopuncin.
Se realizaron pruebas en 42 especmenes de sangre total (puncin digital). De estos especmenes, 22 estaban emparejados con suero
Las muestras humanas de suero, plasma y sangre total recogidas por venopuncin se deben recoger de manera asptica con objeto de
y plasma 20 pares estaban emparejados con sangre total (venopuncin).
evitar que se produzca hemlisis.
Separe cuanto antes el suero del cogulo o el plasma de las clulas del paquete para evitar que se produzca hemlisis. Los resultados obtenidos de todas las matrices de especmenes mostraron una correlacin del 100%, demostrando as que Alere
Determine HIV-1/2 Ag/Ab Combo arroja resultados idnticos para estos tipos de matrices de especmenes.
NOTA: En el caso de especmenes de sangre total y plasma, se deben utilizar tubos de recogida EDTA.
2. Especmenes de seroconversin a HIV:
Recogida de sangre total por puncin digital6 Tabla III
Pueden utilizarse EDTA CAPILLARY TUBES Paneles de seroconversin
Antes de recoger un espcimen por puncin digital, coloque un tubo capilar EDTA en una superficie seca y limpia.
Resultados de Alere Determine HIV 1/2 Ag/Ab Combo en comparacin con Alere
1. Seleccione la punta del dedo medio, anular o ndice (la que est menos encallecida). Cuando sea necesario, caliente la Determine HIV 1/2
mano con una toalla hmeda y tibia o agua tibia para aumentar el flujo sanguneo.
2. Limpie la punta del dedo con alcohol; djela secar al aire. 33 paneles de Deteccin temprana Deteccin equivalente Deteccin tarda
seroconversin (una extraccin como (misma muestra reconocida como
3. Coloque la mano con la palma hacia arriba. Coloque la lanceta en la punta del dedo, no en el centro. Oprima con
firmeza la lanceta contra el dedo y puncione la piel. Elimine la lanceta en un recipiente adecuado para residuos de mnimo) positiva)
riesgo biolgico con bordes afilados. Nmero de paneles
4. Seque la primera gota de sangre con una compresa de gasa estril. de seroconversin 23 10 0
5. Sujete el dedo a menor altura que el codo y aplique varias veces una presin suave e intermitente en la base del dedo Se estudio un total de 33 paneles de seroconversin y los resultados de Alere Determine HIV-1/2 Ag/Ab Combo se compararon con los
puncionado. Toque la punta del tubo capilar EDTA a la altura de la gota de sangre*. Evite la formacin de burbujas de
resultados de Alere Determine HIV-1/2 con marca CE (tabla III).
aire.
*Si se utilizan tubos capilares EDTA (N 7D2227), llene el tubo de sangre hasta un nivel en medio de las dos lneas Con la excepcin de un panel, hubo como mnimo un espcimen y hasta cinco (5) especmenes reactivos en la barra Ag, y reconocidos
marcadas. como infeccin aguda (verificados como positivos en Ag segn la hoja de datos del panel). Alere Determine HIV-1/2 Ag/Ab Combo
detect infeccin de HIV entre 2 y 20 das antes que la prueba de anticuerpos de Alere Determine HIV-1/2 (3a generacin), en funcin
ALMACENAMIENTO DE ESPECMENES del panel sometido a pruebas.
Los especmenes de suero y plasma se deben guardar a temperaturas entre 2 y 8 C si la prueba se va a realizar en los siete (7) das 3. Seroconversin temprana:
siguientes a la recogida. Si la prueba se retrasa ms de siete (7) das, el espcimen se debe congelar (a temperaturas de -20 C o ms Se probaron 40 muestras de HIV de sero-conversin temprana. Los resultados estn de acuerdo con lo ms avanzado en el campo.
fras).
4. Especmenes con infeccin de HIV primaria:
Evite los ciclos repetidos de congelacin y descongelacin. No se pueden utilizar especmenes que se hayan congelado y Se realizaron pruebas en un total de 117 especmenes de pacientes con infeccin de HIV primaria (antes o durante la seroconversin).
descongelado ms de tres (3) veces. Alere Determine HIV-1/2 Ag/Ab Combo detect 108 (92.31%) de las muestras en comparacin con EIA comercial de 4a generacin
Todos los especmenes congelados se deben centrifugar a 10.000g durante cinco (5) minutos a temperatura ambiente. Con cuidado, con marca CE.
retire la muestra de la prueba de 50 l del lquido sobrenadante. Si se forma una capa de lpido en la superficie del lquido, asegrese 5. La sensitividad analtica del Alere Determine HIV-1/2 Ag/Ab Combo ha sido evaluada probando sangre completa, suero y plasma
de que la muestra se toma del lquido transparente que queda debajo. EDTA segn el Estndar Internacional 1993 HIV-1 p24 Ag (NIBSC cdigo 90/636) de la Organizacin Mundial de la Salud. Se lleg a un
La sangre total recogida por venopuncin se debe guardar a temperaturas entre 2 y 8 C si la prueba se va a realizar en los siete (7) lmite de deteccin de 2 UI/ml.
das siguientes a la recogida. No congele los especmenes de sangre total.
ESPECIFICIDAD
Si se guarda a una temperatura entre 2 y 8 C, lleve el espcimen a temperatura ambiente antes de realizar la prueba. Mezcle bien el
espcimen dndole la vuelta al tubo con cuidado justo antes de realizar la prueba. Se realizaron pruebas en un total de 2343 especmenes confirmados negativos de suero, plasma o sangre total con Alere Determine
La sangre entera recogida por puncin digital se debe someter inmediatamente a la prueba. HIV-1/2 Ag/Ab Combo y se determin la especificidad para las bandas de pruebas de anticuerpos y de antgenos (tabla IV). En ambas
pruebas, la especificidad es mayor del 99%.
PROCEDIMIENTO DE LA PRUEBA Tabla IV
Se puede extraer el nmero de unidades de prueba que se desee de la tarjeta de 10 pruebas doblando y rasgando por la lnea perforada. Especificidad de Alere Determine HIV-1/2 Ag/Ab Combo
NOTA:
Poblacin Nmero de Negativa por Especificidad Negativa por Especificidad
La extraccin de las unidades de prueba debe empezar por la derecha de la tarjeta de pruebas para conservar el nmero de lote que especmenes banda de prueba (%) de la banda banda de prueba (%) de la banda
aparece a la izquierda de la tarjeta de pruebas. a prueba Ab de Alere de prueba de Ag de Alere de prueba de
El ensayo debe comenzar en las dos (2) horas siguientes a la retirada de la cubierta de aluminio protectora de cada prueba. Determine HIV anticuerpos Determine HIV antgeno
1/2 Ag/Ab Combo 1/2 Ag/Ab Combo
1. Retire la cubierta de aluminio protectora de cada prueba.
2. En el caso de muestras de suero o plasma: Especmenes 1783 1769 99.21 % 1776 99.61 %
seronegativos
a. Aplique 50 l de muestra (con una pipeta de precisin) a la almohadilla para la muestra (marcada con el smbolo de flecha).
b. Espere 20 minutos como mnimo (hasta 30 minutos como mximo) desde el momento de adicin de la muestra y lea el resultado. Mujeres embarazadas 200 200 100.00 % 199 99.50 %
3. En el caso de muestras de sangre total (venopuncin):
Condiciones
a. Aplique 50 l de muestra (con pipeta de precisin) a la almohadilla para la muestra (marcada con el smbolo de flecha). patolgicas distintas 360 356 98.89 % 360 100.00 %
b. Espere un minuto y aplique una (1) gota del buffer de deteccin a la almohadilla para la muestra. al HIV y sustancias que
c. Espere 20 minutos como mnimo (hasta 30 minutos como mximo) desde el momento de adicin del buffer de deteccin y lea el pueden interferir*
resultado. Total 2343 2325 99.23 % 2335 99.66 %
4. Para muestras de sangre total (puncin en el dedo) usando un tubo capilar EDTA, realice las siguientes tareas:
a. Deposite el tubo capilar que contiene la muestra de sangre en la almohadilla para la muestra (marcada con el smbolo de flecha). *Infecciones en consumidores de drogas IV, factor reumatoide, cncer, cirrosis alcohlica, anticuerpos antinucleares (ANA), colesterol alto,
b. Espere hasta que toda la sangre se transfiera del tubo capilar a la almohadilla para la muestra y aplique inmediatamente una (1) gota lipmicas, bilirrubina alta, hemolizadas, IgG anti-ratn y otras infecciones virales o bacterianas, multparas, (HBV, HCV, HTLV, CMV, Toxo
del buffer de deteccin a la almohadilla para la muestra. IgG, sfilis, HSV 1/2, EBV, pacientes vacunados contra la gripe y clamidia IgG/IgM).
Precaucin: no eleve el tubo capilar de la muestra hasta que se transfiera toda la sangre, ya que podra formarse una burbuja que no Se realizaron pruebas en un total de 1783 especmenes negativos (incluidos en la tabla IV) en nueve centros clnicos distintos de cuatro
permitiese la transferencia completa de la muestra e invalidara la prueba. importantes zonas geogrficas y se determin la especificidad para las bandas de pruebas de anticuerpos y de antgenos (tabla V).
c. Espere 20 minutos como mnimo (hasta 30 minutos como mximo) desde el momento de la adicin del buffer de deteccin y lea el
resultado. Tabla V
CONTROL DE CALIDAD Comparacin de la especificidad de Alere Determine HIV-1/2 Ag/Ab Combo por zona geogrfica
Para garantizar la validez del ensayo, se incorpora una barra de control del procedimiento al dispositivo, que se identifica con la etiqueta Zona Nmero de Negativa por banda Especificidad Negativa por banda Especificidad
Control. Si, al finalizar el ensayo, la barra de control no se ha vuelto de color rojo, el resultado de la prueba es no vlido y es necesario especmenes de prueba Ab de (%) de la banda de prueba Ag de Alere (%) de la banda
volver a realizar la prueba de la muestra. a prueba Alere Determine de prueba de Determine HIV 1/2 de prueba de
HIV 1/2 Ag/Ab Combo anticuerpos Ag/Ab Combo antgeno
INTERPRETACIN DE RESULTADOS
Europa 237 236 99.58 % 237 100.00 %
POSITIVO A ANTICUERPOS (dos barras: la barra de control y la de anticuerpos)
frica 1383 1370 99.06 % 1376 99.49 %
Aparecen barras de color rojo en la ventana de control (identificada con la etiqueta Control) y en
la ventana de la barra de anticuerpos (identificada con la etiqueta Ab) de la tira. Cualquier color Asia 82 82 100.00 % 82 100.00 %
claramente rojo (o rojo grisceo) en la ventana del paciente se debe interpretar como un resultado Sudamrica 81 81 100.00 % 81 100.00 %
positivo.
Total 1783 1769 99.21 % 1776 99.61 %
POSITIVO AL ANTGENO (p24) (dos barras: la barra de control y la de antgeno)
Aparecen barras de color rojo en la ventana de control (identificada con la etiqueta Control) y Tabla VI
en la ventana de la barra del antgeno (identificada con la etiqueta Ag) de la tira. Cualquier color Comparacin de la especificidad de Alere Determine HIV-1/2 Ag/Ab Combo en especmenes
claramente rojo (o rojo grisceo) en la ventana del paciente se debe interpretar como un resultado de sangre total y emparejados con suero y plasma
positivo. La presencia nicamente de una respuesta al antgeno indica que la infeccin se encuentra
en una fase temprana. Se pueden proponer pruebas complementarias para hacer el seguimiento de la
futura deteccin de anticuerpos prevista. N de individuos Suero Plasma Sangre total (venopuncin)

POSITIVO A ANTICUERPOS Y POSITIVO AL ANTGENO (p24) (TRES BARRAS: las barras 64 64 64 64

Control, Ab y Ag)
Aparecen barras de color rojo en la ventana de control (identificada con la etiqueta Control), la 20 - 20 20
ventana de la barra de anticuerpos (identificada con la etiqueta Ab) y la ventana de la barra del
antgeno (identificada con la etiqueta Ag) de la tira. Cualquier color claramente rojo (o rojo grisceo)
en las ventanas de la barra de anticuerpos y de la barra del antgeno se debe interpretar como un Total
resultado positivo. La presencia de una respuesta al antgeno indica que la infeccin se encuentra en
una fase temprana. 84 64 84 84
NEGATIVO (una barra)
Varios especmenes (emparejados):
Aparece una barra de color rojo en la ventana de control de la tira (identificada con la etiqueta Control)
y no aparece ninguna barra de color rojo en las ventanas del paciente de la tira (identificadas con la Se realizaron pruebas en especmenes seronegativos de un total de 84 individuos de frica y Sudamrica. Se obtuvieron varios
etiqueta Ag y Ab). especmenes (emparejados) de varios de estos donantes. Se realizaron pruebas en un total de 84 especmenes de sangre total
(venopuncin). De estos especmenes, 64 estaban emparejados con suero y plasma y 20 pares estaban emparejados con plasma.
NO VLIDO (ninguna barra) Los resultados obtenidos de todas las matrices de especmenes mostraron una correlacin del 100%, demostrando as que Alere
Si no hay una barra roja en la ventanilla de control de la franja, e incluso si aparece una barra roja en Determine HIV-1/2 Ag/Ab Combo arroja resultados idnticos para estos tipos de matrices de especmenes.
una de las ventanillas del paciente en la franja, el resultado es invlido y debera ser repetido.
Lnea de consulta (consulte la ltima pgina)

BIBLIOGRAFA (consulte la ltima pgina)

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