Actividad enzimtica e inhibicin enzimtica

Bioqumica de alimentos
Josu Eduardo Barzola Prez
4to Semestre C

ACTIVIDAD ENZIMTICA
Las enzimas son molculas de naturaleza proteica que actan como
catalizadores en todas las reacciones del metabolismo, se forman o se
destruyen enlaces qumicos.

Aceleran la reaccin.
No afectan el equilibrio de la reaccin reversible.
Son especficas para determinada reaccin.
Son compuestos orgnicos producidos por los organismos vivos.
Pueden actuar al interior de la clula intracelulares-endoenzimas o al
exterior extracelulares-exoenzimas.
Estn determinadas por las condiciones ambientales de la clula y
por su constitucin gentica.

Actividad enzimtica
La sustancia sobre la cual acta una enzima se llama sustrato. Los sustratos
son especficos para cada enzima:

La sacarosa es el sustrato de la sacarasa que acta rompindola en

sus componentes.
Las enzimas actan de acuerdo con la siguiente secuencia: La enzima
(E) y el sustrato (S) se combinan para formar un complejo intermedio
enzima sustrato (E-S), el cual se descompone formando un producto y
regenerando la enzima se puede afectar por:

Concentracin de Sustrato
A mayor concentracin del sustrato, a una concentracin fija de la enzima
se obtiene la velocidad mxima. Despus de que se alcanza esta velocidad,
un aumento en la concentracin del sustrato no tiene efecto en la velocidad
de la reaccin.

Concentracin de la enzima
Siempre y cuando haya sustrato disponible, un aumento en la concentracin
de la enzima aumenta la velocidad enzimtica hacia cierto lmite.

Temperatura
El calor es un factor que desnaturaliza las protenas por lo tanto si la
temperatura se eleva demasiada, la enzima pierde su actividad.

pH
El pH ptimo de la actividad enzimtica es 7, excepto las enzimas del
estmago cuyo pH ptimo es cido. La mayora de los enzimas son muy
sensibles a los cambios de pH. Desviaciones de pocas dcimas por encima o
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por debajo del pH ptimo pueden afectar drsticamente su actividad. As, la

pepsina gstrica tiene un pH ptimo de 2, la ureasa lo tiene a pH 7 y la
arginasa lo tiene a pH 10. Como ligeros cambios del pH pueden provocar la
desnaturalizacin de la protena, los seres vivos han desarrollado sistemas
ms o menos complejos para mantener estable el pH intracelular.

Presencia de cofactores
Para las enzimas que tienen cofactores, la concentracin del cofactor debe
ser igual o mayor que la concentracin de la enzima para obtener una
actividad cataltica mxima. Los cofactores pueden ser iones inorgnicos
como el Fe++, Mg++, Mn++, Zn++ etc. Casi un tercio de los enzimas
conocidos requieren cofactores. Cuando el cofactor es una molcula
orgnica se llama coenzima. Muchos de estas coenzimas se sintetizan a
partir de vitaminas. Cuando los cofactores y las coenzimas se encuentran
unidos covalentemente al enzima se llaman grupos prostticos. La forma
catalticamente activa del enzima, es decir, la enzima unida a su grupo
prosttico, se llama holoenzima. La parte proteica de un holoenzima
(inactiva) se llama apoenzima, de esta forma.

Apoenzima + grupo prosttico= holoenzima

Presencia de inhibidores
Ciertas molculas pueden inhibir la accin cataltica de un enzima: son los
inhibidores. Estos inhibidores bien pueden ocupar temporalmente el centro
activo por semejanza estructural con el sustrato original (inhibidor
competitivo) o bien alteran la conformacin espacial del enzima, impidiendo
su unin al sustrato (inhibidor no competitivo)

Inhibicin enzimtica.
La actividad de una enzima puede ser disminuida o eliminada
completamente por la accin de ciertas sustancias a las cuales se las
conoce con el nombre genrico de inhibidores enzimticos. Debemos aclarar
que no deben ser incluidos en este grupo de sustancias, aquellos agentes
que producen simplemente una destruccin irreversible de la enzima, como
podran ser todos aquellos que conducen a su desnaturalizacin, como por
ejemplo los cidos fuertes.

La inhibicin enzimtica es de gran importancia fisiolgica, ya que a veces

la inhibicin de una sola enzima que forma parte de una cadena de
reacciones metablicas puede inhibir por completo a todo el proceso
metablico involucrado y ejercer en esa forma un efecto profundo y a veces
fatal sobre el organismo. De ms est recalcar la importancia que este
fenmeno tiene en farmacologa y toxicologa como as tambin en el
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desarrollo de herbicidas e insecticidas. De ah que el estudio del mecanismo

de accin de los inhibidores se haya constituido en una de las ms
exploradas de la enzimologa prctica.

Clasificacin.
Los inhibidores pueden clasificarse en dos grandes grupos:

1) Irreversibles.
2) Reversibles.
a. competitivos
b. no competitivos

En el primer caso la enzima no recobra su actividad por remocin del

inhibidor libre. Esto es debido a que el inhibidor irreversible, acta por lo
general modificando Irreversiblemente o aun destruyendo algunos de los
grupos esenciales del centro activo. En el segundo caso, la enzima recobra
su actividad por remocin del inhibidor libre (por Ejemplo por simple
dilisis). Lo cual demuestra que hay un equilibrio entre el inhibidor libre y la
enzima.

Inhibicin competitiva
En la inhibicin competitiva el inhibidor se combina reversiblemente con la
enzima en el sitio por el cual se debera unir el sustrato, impidiendo por lo
tanto la formacin del complejo activo enzima sustrato. De ah el nombre de
competitiva porque efectivamente tanto el inhibidor como el sustrato
compiten por el mismo sitio y tratan de desplazarse mutuamente de la
enzima. Las posibles formas de reaccionar del sustrato y el inhibidor con la
enzima pueden presentarse por las ecuaciones: Por ello este tipo de
inhibicin se caracteriza en que puede disminuirse considerablemente
aumentando la concentracin de sustrato.
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Inhibicin no competitiva
En la inhibicin no competitiva, se postula que el inhibidor se une con la
enzima en otro sitio, que no es aquel por el cual se une el sustrato. Por esa
razn la unin del sustrato con la enzima no es afectada por la presencia del
inhibidor y se puede formar entones un complejo enzima sustrato- inhibidor.
Pero este complejo es catalticamente inactivo y no puede escindirse en
productos de la reaccin y complejo enzima-inhibidor. En este caso, las
posibles formas de reaccionar del sustrato y el inhibidor con la enzima se
representan por las ecuaciones siguientes.

Este tipo de inhibicin se caracteriza entonces porque no puede ser

revertido por un aumento de la concentracin de sustrato. El sustrato no
puede desplazar al inhibidor unido a la enzima. Experimentalmente ambos
tipos de inhibicin pueden distinguirse fundamentalmente mediante la
aplicacin del mtodo de Lineweaver y Burk antes descripto a la reaccin
enzimtica con y sin inhibidor en cuyos respectivos casos se obtendrn los
grficos indicados en las figuras siguientes.

Inhibicin acompetitiva
En este tipo de inhibicin, cuya designacin no es muy adecuada, el
inhibidor no se combina con el enzima libre ni afecta a su reaccin con el
sustrato normal; sin embargo, el inhibidor se combina con el complejo en
enzima sustrato para formar un complejo inactivo enzima-sustrato-
inhibidor, el cual no experimenta su transformacin posterior en el producto
habitual de la reaccin.

ES + I = ESI
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Estas relaciones demuestran que el grado de inhibicin puede aumentar

cuando la concentracin de sustrato se ve aumentada.

Inhibicin mixta
En la inhibicin mixta, el inhibidor se puede unir a la enzima al mismo
tiempo que el sustrato. Sin embargo, la unin del inhibidor afecta la unin
del sustrato, y viceversa. Este tipo de inhibicin se puede reducir, pero no
superar al aumentar las concentraciones del sustrato. Aunque es posible
que los inhibidores de tipo mixto se unan en el sitio activo, este tipo de
inhibicin resulta generalmente de un efecto alostrico donde el inhibidor se
une a otro sitio que no es el sitio activo de la enzima. La unin del inhibidor
con el sitio alostrico cambia la conformacin (es decir, la estructura
terciaria o la forma tridimensional) de la enzima de modo que la afinidad del
sustrato por el sitio activo se reduce.