448 UNIDAD 3 FB La diversidad microbiena hasta NO.” por las bacterias nitrosificantes, producien- do ast el sustrato para las bacterias oxidantes del nitrito (Secci6n 20.12), Ecologia, aislamiento y cultivo Las bacterias nitrificantes estan ampliamente distribui- das en suelos y aguas. Son mas abundantes en habitats con una considerable concentracién de amonfaco, como por ejemplo lugares donde se produce mucha descompo- icin de proteinas (amonificacibn) y también en plantas le tratamiento de aguas residuales (Seceién 36.2). Las bacterias nitrificantes se desarrollan especialmente bien cen lagos y corrientes de agua que reciben aportes de aguas residuales porque éstas suelen ser ricas en amoni- aco (Figura 23.9), Los cultivos de enriquecimiento de bacterias nitrifi- canes se consiguen usando medios con sales minerales {que contienen amoniaco o nitrito como donante de elee- trones y bicarbonato (HCO5) como tiniea fuente de carbo- no, Debido al inefieaz crecimiento de estos organismos (Scceién 20.12), es posible que no se observe turbidez-in- cluso cuando ya se haya producido intensa nitrificacién. Por tanto, una forma sencilla de supervisar su crecimien- toes ensayar la produccién de nitrito (usando amonfaco ‘como donanie de electrones) 0 el consumo de nitrito y la produccién de nitrato (usando nitrito como donante de electrones). La mayorfa de las bacterias nitrificantes son quimiolitétrofos y aerobios estrictos. Las especies de Ni- trobacter son una excepci6n ya que son capaces de crecer de modo quimioorganstrofo usando acetato 0 piruvato ‘como tinica fuente de carbono. Existe un grupo, los onga- nismos Anammox (Seccién 20.13) que son filogenética- mente distintos y oxidan amonfaco anaerdbicamente. Bacterias oxidantes del azufre y el hierro Géneros clave: Thiobecilus, Acilthiobacilis, Achromatium, Beggiatoa La capacidad de crecer quimiolitotréficamente sobre compuestos reducidos de azure es una propiedad earac- teristica de un variado grupo de las proteobacterias (T bla 15.5). Existen dos amplias clases ecol6gicamente dis- tintas de bacterias oxidantes del azufre, aquellas que viven a pH neutro y aquellas que viven a pH Acido. Aleu- nos de estos acidéfilos también son capaces de crecer guimiolitotr6ficamente utilizando ién ferroso (Fe) como donante de electrones. Analizaremos la blogeoqut- mica de las bacterias oxidantes de hierro y azufre en las Seciones 24.4-24.6 y la bioguimica de estos procesos en. las Secciones 20.10 y 20.11. Tabla 15.5 Caracteristicas fisiolégicas de procariotas quimiolitétrofos que oxidan azufres Donader inorgénico Grupo Géneros y especies de electrones Rango de pH para crecer_flogenstico” species que crecen poco o nada en medio orgénico: Thiobacilus thioparus HS sulfates, $,07 68 Bota Thiobscilus denitrificans? HS, S%,5,02 68 Bota Halothiobacilus neapolitarus 51,5,02 68 Gamma Aciithiobacilusthicoxidans st 24 Gamma Acicithiabacilus ferrooxidans %,sulfétos metilicos, Fes 24 Gamma species que cracen bien en medio orgénico: Starkeya novella 5,0 68 Ala Thiomonas intermedia 5,02 a7 Bota Quimilalitstrofos del azure, flamentosos: Beggiatoa HS, 5,08 os Gamma Thiothrie HS 68 Gamma Thioploca Hs.) = Gamma Otros géneros: Achromatium as =) Gomme Thiomirospira 5,048 68 Gamma Thiosphaerat HS,5,0F, H, 68 Alle Thermothrix HS, S,0F, S05 6575 Beta Thiovulm Hs.s! 68 Epsilon * araeobiosfaeutavor van NOS’ came aeptar de lecvonesanerbicns ‘Nowe depone de cos puro, “Thsphoor pantoophs tne a ima sacuncaen el gen dl NA 16S que Paracocusdontifcane eeThiobacillus y Achromatium EL género Thiobacillus y sus parientes cercanos inchuyen varios bacilos gramnegativos, morfologicamente indistin- guibles del resto de bacilos gramnegativos (Figura 15.93); son los mas estudiados de los quimiolitétrofos del azu: fre, Filogenéticamente las especies de Thiobacillus estén esparcidas entre las proteobacterias, con diversas espe- cies incluidas entre las alfa, beta y gammaproteobacteria, (Tabla 15.5). Los compuestos de azufre mas habitualmen- te utilizados como donantes de electrones en el metabo- lismo quimiolit6trofo de los Thiobacillus son el H.S, el S° yel S,0F. Mediante el uso de estos compuestos pueden obtenerse grandes cantidades de energia y veremos en la SecciGn 20.10 que parte de esta energia puede almace- narse en forma de ATP a partir de reacciones de trans- Figura 15.9 Quimiolitétrofes sulfurosos no filamentosos. {@) Microfotografia con microscopio electinica de transmision de células de Helothiobacllus neapolitanus, un quimialitetrofo| coxidador del szufe. Cada célula mide aproximademente 05 um de didmetro. Obsérvense los cuerpes poliédricos (carboxisornas) distrbuides por toda la céula(lechas).(b) Achromatium, Células 2isladss de un pequatio lago en Alemania y otografiadas por microscopia Nomarski. Las pequefias estucturas globulares en la poriferia de las céluls fecha) son azufre elemental y los grénulos ‘grandes estén compuestas de carbonato de calcio, Una eélula de ‘Achromatium mide aproximadamente 25 um de diémetro, Capitulo 15 # Dominio Bacteria: las proteobacterias 449 porte de clectrones que generan fuerza protén-motriz, Ademés, el uso de estos sustratos genera grandes canti- dades de Acido sulfirico, lo que implica que muchos Thiobacillus son acidéfilos. Una especie acidéfila, Acidi- thiobacillus ferrooxidans, también puede crecer quimio- litoméficamente mediante la oxidacién del ién ferroso y es uno de los principales agentes biol6gicos implicados en la oxidacién de dicho metal. La pirita de hierro (FeS;) es una importante fuente de Fe® asi como de sulfuro, La oxidacion del FeS;, especialmente en explotaciones mi- neras, puede ser tanto beneficiosa (porque el lavado del mineral en bruto libera el hierro de la pirita) como ecol6- ‘gicamente desastrosa (ya que el medio ambiente se acidi- fica y se contamina con metales pesados asociados ala pirita) (Secciones 24.5 y 24.6). Achromatium es un quimiolit6trofo esférico oxidador de azufre habitual en sedimentos sulfurados de agua dul- ce. Las células de Achromatium son grandes cocos de un didmetro entre 10-100 jm (Figura 15.96). El andlisis filo- ‘genético de poblaciones naturales de Achromarium de- ‘muestra la probable existencia de diferentes especies (po- siblemente cada una con distinto tamafto), pero todavia no se han conseguido cultivos puros de este organismo. Filogenéticamente Achromatium pertenece a las gamma- proteobacterias y esta emparentado especificamente con las bacterias rojas fototroficas, del tipo de su equivalente fototr6fico Chromatium (Seccién 15.2 y Figura 15.4a). Como Chromatium, las céhulas de Achromatium almace- nan en su interior azufre elemental (Figura 15.96); los zgranulos acaban desapareciendo conforme el azufre es oxidado hasta sulfato. Las eélulas de Achromatium tam- bien acumulan grandes grénulos de calcita (CaCOs) (Fi gura 15.9b), probablemente como fuente de carbono para el crecimiento autotréfico. Cultivo Algunos quimiolitétrofos del azufre son quimiolitétrofos estrictos, forzados a un estilo de vida basado en el uso de compuestos inorganicos en lugar de organicos como do- nadores de electrones, Cuando crecen de este modo, tam- bien son aut6trofos y transforman el CO, en material ce- lular mediante las reacciones del Ciclo de Calvin (Seccién. 20.6). Los earboxisomas estin presentes a menudo en las células de los quimiolitétrofos estrictos (Figura 15.9a). Estas estructuras contienen altos niveles de enzi- mas del Ciclo de Calvin y probablemente incrementan el ritmo de fijacién de CO; de estos organismos. Otros quimiolitétrofos del azufre son quimiolitétro- fos facultativos, en tanto que pueden crecer bien como quimiolit6trofos (y por tanto, autotréficamente) o bien como quimioorgandtrofos (Tabla 15.5). Sin embargo, la mayoria de las especies de Beggiaroa pueden obtener energia de la oxidacién de compuestos inorganicos de azufre, pero carecen de las enzimas del Ciclo de Calvin, Por tanto, requieren compuestos orgainicos como fuentes de carbono. Este estilo de vida nutricional se denomina mixotrofia.450 UNIDAD 3 # La diversidad microbiana Beggiatoa Los organismos de este género son bacterias filamento- sas, deslizantes y oxidantes de azufre. Los filamentos de Beggiatoa son habitualmente largos y de gran didmetro, formados por numerosas células cortas unidas por los ex tremos (Figura 15.10). Los filamentos flexionan y se re tuercen de manera que varios zados para formar un complejo manojo. En la naturaleza Beggiaroa se encuentra fundamental- ‘mente en habitats ricos en H,S, como los manantiales sulfurosos (Figura 15.10b), lechos de algas en putrefae- cién, capas cenagosas de lagos y aguas contaminadas con, aguas residuales. En este tipo de medio ambiente los fi lamentos de Beggiatoa estin habitualmente rellenos de grdnulos de sulfuros (Figura 15.10a). Las Beggiatoa son también habitantes habituales de las chimeneas hidroter- males (Seccién 24.11), Fue utilizando Beggiatoa como ‘Winogradsky demostré por vez primera que un organi mo puede oxidar H,S hasta $° y mas tarde hasta SO}, lo que llevé a proponer el concepto de quimiolitotrofia (In: formacién adicional, Capitulo 20). Aunque algunas cepas de Beggiatoa son auténticos quimiolitétrofos autétrofos, mentos acaban entrela @ Figura 15.10 Bacteriasfilamentosas oxidantes de azufr (2) Microfotogratia de contraste de fase de una especie de fen una planta de tratamiento de residuos abundantes granulo clus, (b) Bacterias oxidantes de azufe en ol agua de una jee fuente sulfuosa, Las eélula filamentosas se entelazan abundante cantenido en azutre elemental formar grussas serpentinas, cuyo color blanco se debe a su la mayorfa crecen mejor mixotréficamente utilizando compuestos reducidos de azufe como donantes de elec. trones y compuestos orgénicos como fuente de carbono. Un habitat interesante de las Beggiatoa es la rizosfera de plantas (arroz, Typha sp. y otras plantas de zonas en- charcadas) que viven en suelos inundados y en conse. cuencia carentes de oxigeno. Estas plantas bombean oxi- geno hacia sus raices, desarrollandose una interfase aerobia-anaerobia muy definida entre las raices y els lo. Las Beggiatoa (y probablemente otras bacterias del azufre) se desarrollan en esta frontera y jus beneficioso para la planta al oxidar (y por tanto detoxifi- car) el HS. Las Beggiatoa y otras bacterias filamentosas como Sphaerotilus (Secci6n 15.14) pueden causar graves alte raciones en la formacién de precipitados de plantas de tratamiento de aguas residuales y en depésitos de resi- duos liquidos industriales provenientes de papeleras, fa- bricas de cerveza, envasadoras 0 trituradoras. A este pro- an un papel blema se le denomina engrosamiento y ocurre cuando bacterias filamentosas como las Beggiaioa desplazan a la flora habitual de estos residuos y forman un floculado re- sidual poco denso en lugar del habitual floculado denso de facil precipitacién que se forma con organismos tipo Zooglea y otras bacterias propias de las aguas residuales (Seccién 36,2). Si se produce engrosamiento el agua resi- dual no queda tratada convenientemente ya que al ser de cantada sigue arrastrando materia orgnica y nutrientes inorganicos (Seccién 36.2) Thioploca y Thiothrix . (nas bacteria filamentosas oxidantes de azure son Thio- ploca y Thiothrix. Thioploca es un quimiolit6trofo oxida- dor de azufre filamentoso y de gran tamafo que forma ‘manojos de eélulas envueltas por una vaina tinica (Figura 15.11). Enel fondo ocesnico junto a las costas de Chile y Pert se han encontrado gruesos tapices de especies mari nas de Thioploca. El estudio sobre la ecologia de estos or- zganismos ha demostrado que evan a cabo la oxidacién en ausencia de oxigeno del HS asociada a la reduecién ‘marina de Thioploca grénulos de azufe ho, Figura 15.11 Células de una espec de gran tamafio. Las céulas contien (amarillo) y miden aproximadamente 40-50 wmsinravoWNO5 hasta amoriio WAH Secdion27)..as “Sulas de Thioploca acumulan enormes cantidades de ni- Sato intracelularmente y pueden utilizar este nitrato para ‘Bevar a cabo largos periods de respiracion anaercbiia wti- lizando H,S como donante de electrones. Se cree que es- fos tapices dle Thioploca tijan cantidades substanciales de ‘€O, y que también juegan un papel esencial en el ciclo del ssalfuro y del nitrégeno en el medio ambiente marino, En. ths chimeneas hidrotermales también se pueden encon- far tapices bacterianos formados fundamentalmente por Bezgiatoa (Seccién 24.11); en este caso la conexién con la sespiracién del nitrato no esta bien establecida, Thiothrix es un organismo filamentoso oxidador de ‘azuite en el cual los filamentos se agrupan uniéndose por sus extremos por medio de un anclaje para formar es- Smucturas celulares denominadas rosetas (Figura 15.12) Cy Figura 15.12 Thiothrix. (2) Un pozo artesiano que contiene sulfuros en Florida (USA). El exterior del pozo ests recubiert tn tapete de Thiothrs El tapete mide aproximadamente 1,5 m de dismetro. fb) Microfotografia de contraste de fase de una roseta de células de Thiothrx aislada del pozo y abtenida como cultivo puro. Obsérvense los globules internos de azure producidos por la oxidacion del sulfur, Cal flamento mide aproximadamente 4 wm de digmetro Capitulo 15 1 Dominio Bacteria: las proteobacterias 451 “Hisdiodicameme Miodarrx es un mixdiroo aersdsio es- tricto y tanto en este aspecto como en otros se parece a Beggiatoa. Bacterias oxidantes del hidrégeno Géneros clave: Ralstonia, Paracoccus Numerosas bacterias pueden crecer con H, como tinico donante de electrones y con O; como aceptor de electro- nes utilizando como metabolismo energético la reaccién knallgas» es decir la reduccién de 0, con Hy: H+10,+1,0 a6 =-2574j La mayoria de estos organismos también pueden cre- cer autovrifiicamente (utlizando las reacciones del Ciclo de Calvin para incorporar CO.) y aquf se agrupan junto con bacterias quimiolitétrofas oxidantes de hidrdgeno. Se conocen tanto bacterias grampositivas como gramnegati vas y sus representantes mejor estudiados se clasifican en los géneros Ralstonia (Figura 15.13), Pseudomonas y Pa- racoccus (Tabla 18.6). Las diferentes bacterias oxidantes del hidrégeno estén esparcidas entre las clases alfa, beta y gamma de las proteobacterias. Todas las bacterias oxi- antes de hidrgeno contienen una o mas enzimas hidro- genasas que funcionan uniendo H; y ulilizandoto bien para producir ATP (Seccién 20.9) o bien por su poder re ductor para el crecimiento autotr6fico (Tabla 15.6). Casi todas las bacterias del hidrgeno son quimiolit- trofos facultativos, lo que significa que también pueden erecer de modo quimioorganétrofo utilizando compues- Figura 15.13 Bacterias del hidrégeno. Microfotografia con microscopio electrénico de transmisién de células tefidas de Ralstonia eutropha, un quimiolittrofo axidador de hidrégeno. Cade célula mide aproximadamente 0 um de diémetro y posee varios flagelos.452 UNIDAD 3 8 La diversidad microbiana Gram-negativas Acidovorax fais > Reletonia eutropha ‘Achwomobacter rylosoxidans a + ‘Aquaspiilum autotrophicu Pseudomonas carboxydovorans a a Hychogenophage Nave - if Paracoccus denitrificans Aauifex pyrophiue a # Beta Hidrogenasa unida @ membranas Beta Hidrogenasa unids 2 membranasy toplasmica Beta Hidrogenasa unida a membrane y Cctoplésmicas hydragenases Bota Hidrogenasa unida a membranas Gamma Hidrogenasa unida a membranas: tambien oxidan CO Beta CColorias de un amarilo brillant Afe Hideogenasa urids a membranat: esnitiicedor fuerte Grupo Aquitex® Hipertermétio, coca microserofficamente © anaerSbicamete con NOS). uml ee tanbn tea ‘250% como donadordelectiones ‘Como Aquifex, pero aerébio estricto (icroaeroiy Grupo Aquifex® {as actors aerobis del hikgana son Protecbacaria excepto cuando sis icin, * Weare Saccin 15.20, «Vase Session 102, ‘ Vasee Sees 1 * Vane Saccén Wo. tos orgénicos como fuente de energia. Esta es una dife- rencia importante entre quimiolitétrofos del hidrégeno y muchos quimiolitétrofos del azufre 0 bacterias nitrifican- tes. La mayorfa de los miembros de estos grupos son qui- miolit6trofos estrictos —no pueden crecer.en ausencia de una fuente de energfa inorginica. En contraposici6n, los quimiolit6trofos del hidrégeno pueden alternar entre sus modos metabélicos quimiolitotréticos y quimioargano- twoficos segiin lo requieran las condiciones reinantes en sus habitats. Fisiologia y ecologia de las Bacterias del hidrégeno Cuando crecen quimiolitotréficamente utilizando Hy Ia ‘mayorfa de las bacterias del hidrégeno crecen mejor en condiciones de microaerobiosis (5-10% O;) porque nor- malmente las hidrogenasas son sensibles al oxigeno. Para el crecimiento quimiolitotrofico también es necesaria la presencia de niquel en el medio, porque practicamente todas las hidrogenasas requieren Ni** como cofactor csencial. Unas pocas bacterias del hidrégeno son también capaces de fijar nitrégeno molecular, lo que hace posible su crecimiento en un medio con sales minerales provisto tan s6lo de Hy, 0;, CO; y Nz como fuentes de carbono, energia y nitrégeno. El enriquecimiento de un cultivo en bacterias oxidan- tes del hidrégeno se consigue inoculando las muestras de suelo o agua en un medio con una pequefa cantidad de sales minerales que incluya trazas de metales (especial- mente Ni?" y Fe) e incubsndolo en un recipiente grande sellado con una atmésfera del 5% Os, 10% COs y 8546 H.. Cuando el medio Iiquido desarrolla turbidez se aislan co- lonias en placas del mismo medio y se incuban en an contenedor de cristal que contenga la misma mezcla de zases (que debe manejarse con precaucién va que la me2- ‘la de O, y H; presenta cierto riesgo de explosién), Oxidacién del CO ‘Algunas bacterias del hidrogeno pueden crecer con mo- néxido de carbono, CO, como donante de electrones. Electrones procedentes de la oxidaci6n del CO hasta CO; entran en la cadena de transporte de electrones y gene- ran fuerza protén-motriz. Las bacterias oxidantes de CO, amadas bacterias carboxidotréficas, crecen autotrofica- mente usando el Ciclo de Calvin (Seccién 20.6) para fijar el CO; generado por la oxidacién del CO. El monéxido decarbono es oxidado a CO; por la enzima deshidrogenasa ddel monéxido de carbono, una enzima que contiene mo- libdeno, EI molibdeno en la deshidrogenasa de CO esti unido a un cofactor formado por una estructura de miil- tiples anillos denominada pterina, algo parecido al caso de la enzima nitrato reductasa (Seecién 21.7). En la naturaleza el consumo de CO por las bacterias carboxidotréficas es un proceso con relevancia ecolégica. Aunque los seres humanos y otras fuentes generan mu- cho CO, los niveles de CO en la atmésfera no se han incre- mentado de manera significativa en muchos anos, Dado que la méxima iberacién de CO se produce en ambientes aerobios (fundamentalmente por los gases de escape de automéviles, la combustién parcial de combustibles fosi- les y por el catabolismo de la lignina) las bacterias carbo- xidotréficas en las capas superiores del suelo representan el principal sumidero de CO en la naturaleza. ‘Al menos un tipo de bacteria carboxidotéfica puede erecer anaerdbicamente en CO usando nitrato como aceptor de electrones, aunque esta no parece ser una ca- racteristica generalizada del grupo. Como las bacterias del hidrogeno, practicamente todos los aislamientos de bacterias carboxidotroficas también pueden crecer como uimiorganstrofos usando compuestos orgiinicos 0 CO. Los quimiolitétrofos son bacterias que pueden oxidar donadores de electrones inorgénicas y que en numerosos casos utlizan CO; como tinica fuente de carbon. 1 Compare y contraste las bacterias nitrficantes con las bacterias del azufre, del hier y del hidrégeno en uanto @ sus donadores inorganicos de electrones y 3 sus fuentes de carbono y en cuanto a sus habitats principales. 4 Qué ruta metabélica para la asimilacién del CO; esté presente en muchos quimiolitétrofos? Bacterias metanstrofas y metilétrofas Géneros clave: Methylomonas, Methylobacter E| metano (CH) es muy abundante en la naturaleza. Se produce en ambientes anacrobios por accién de arqueas ™etanogénicas (Secciones 17.4 y 21.10) y esta presente en gran cantidad en cienos, marismas (Figura 17.5), lagos, el rumen y en el tracto intestinal de mamiferos, El metano €s un componente principal del gas natural y también se ‘encuentra en numerosos yacimientos de carbén. E] metano es una molécula quimicamente estable pero ciertas bacterias, los metandtrofos, son perfecia mente capaces de oxidarlo. Estas bacterias usan el meta- no y algunos otros compuestos de un solo carbone como Capitulo 15 # Dominio Bacteria: las proteobacterias 453 donadores de electrones para la generacién de energia y como tiniea fuente de carbono.Estas bacterias son aero- bias y estén muy extendidas en la naturaleza, tanto en. suelos como en agua. Presentan diversas morfologias y estan relacionadas entre sf tanto en el sentido filogenéti- £0 como en su capacidad para oxidar metano. El metano es poco abundant en sedimentos marinos, en los que la forma principal de respiracién es la reduccin anaersbi- a de sulfatos y no la metanogénesis (SecciGn 24.2). Metabolismo C1 La Tabla 15.7 enumera los compuestos procesados por el catabolismo de los metanétrofos. Desde un punto de vis- ta bioquimico, estos compuestos comparten una carac- terfstica clave: carecen de enlaces carbono-carbono. Por tanto, todos los compuestos ongénicos de la célula deben sintetizarse a partir de precursores C;. Aquellos organis- mos que pueden crecer usando compuestos de carbono que carecen de enlaces C—C se denominan metilétrofos. ‘Muchos de los metilétrofos, aunque no todos, son tam- bién metanotrofos. Sin embargo los metanstrofos son nicos en tanto que pueden crecer no slo utilizando al- gunos de los compuestos de un solo earbono mas oxida- dos (Tabla 15.7), sino también usando metano. Los metanétrofos tienen una enzima clave, la monoxi- genasa de metano, que introduce un étomo de oxigeno del O; en el metano, formando metanol (Seccién 21.16). La necesidad de O; como reactivo en la oxigenacién ini- cial del metano explica por qué los metanétrofos son ae- robios estrictos (en la Seccién 21.13 veremos que el me- tano también puede ser oxidado en ausencia de oxigeno Por un consorcio espectfico de organismos). Todos los |. Sustratos usados para crecer Metano, CH. Metancl, CH,OH Metilamina, CHNH, Dimetilamins, (CHJ,NH Tiimetlamine, (CH. Férmico, HOO, Formamide, HCONH, Mondxide de earbono, CO Dimetiétr (CH,.0 Dimet carbonato, CHOCOOCH, Tetrametiamonio, (CH).N°__Dimetilsulfxdo, (CH,.SO “Timetiamine N-oxido,(CH),NO Dimatileufato, (CH,),S “Un soo smart no usa odes, pero hay a manos una bactviemetiowdcs gus ura cad in de * Lor meiitrofo qe xian matano ee cerominan meando. whLos calculos de energia hacen posible predecir los ti- ‘pos de quimiolitdtrofos que se pueden encontrar en la na- furaleza. Como los organismos deben obedecer las leyes dela termodinamica, sélo las reacciones que son termo- dinamicamente favorables serdn capaces de liberar ener- ‘gia potencial. La Tabla 20.1 resume la produccién de -energia de algunas reacciones en los organismos quimio- Thtowofos, que se trataron en los capitulos 15 a 17. En el sapitulo 23 se examinaran los aspectos ecol6gicos de la imiolitotrofia, donde veremos que las reacciones qui olitétrofas son el centro de los ciclos de la mayorfa de nutrientes, EM Los quimiolitétrofos oxidan sustancias quimicas inorgénicas para conseguir energia y poder reductor. La mayoria de los quimiolitétrofos también pueden crecer autotréficamente. 1 2Con qué doble propésites utilzan los ‘quimiolitétrofos los compuestos inorgénicos? 1 GPor qué la oxidacién de He produce més energia con O, como aceptor de electrones que cuando es el sof? (20.9) Oxidacién del hidrégeno S| hidrégeno (H,) es un producto habitual del metaboli @ microbiano, y una serie de quimiolit6trofos son ca- ces de utilizarlo como donador de electrones en el me- bolismo energético. Se conocen anaerobios oxidadores H, en los dominios Bacteria y Archaea, que difieren en ceptor de electrones que utilizan (por ejemplo, nitra- », sulfato, hierro férrico y otros), que se explicaran en el ximo capitulo, Aqui consideramos s6lo las bacterias bias oxidadoras de Hs. SHPO} + SOF + H+ 4HPOP+ HS" Capitulo 20 8 Diversidad metabélica: fototrofis, autotrofia, quimiclitotrofiay fjacién del ritrégeno Becterias dol fosfto Pic claados do os valores de Esau ansrecon onal Apacs | avaons para Fel” sn a2 yas tos pH7ApH?, lvl parselgar Fe” Fe” esdeunos +02 Be escepcin defo tc raccones ils el, come soap’ da eectones Elio oidadr deta conclave apo s SOF coro scp de elearenes. $B eraniotrbn se puede aircon NO; cae sap" de lectones arin rgpnos amon Sesion 203} 659) Energética de la oxidacién del H, La generacisn de ATP durante la oxidacién del H, por cl 0, es resultado de la formacién de una fuerza protonmo- triz, La reaccién global H, + 10; > H,0 aG™ = ~237 kr es muy exergénica y, por lo tanto, sirve para sintetizar ATP. En esta reacci6n, catalizada por la enzima hidroge- nasa, los electrones del H, se transfieren inicialmente a tuna quinona aceptora. Desde aqui, los electrones pasan a twavés de una serie de citocromos para finalmente reducir 1 0, 8 agua (Figura 20.25), Algunas bacterias de hidrégeno tienen dos hidrogena- sas diferentes, una citoplésmica y otra integrada en la membrana, La enzima unida ala membrana participa en Ia energética, mientras que la soluble asimila H, y redu- ce el NAD" a NADH directamente (el potencial de reduc- ci6n del H,, ~0,42 V, es tan bajo que no se necesita el flu- jo inverso de electrones para fabricar el poder reductor, (Figura 20.25). El organismo Ralstonia eutropha se ha utilizado como modelo para estudiar la oxidacién aero- bia del H,. Aleunas de las propiedades de este organismo se describen en la Seccién 15.5. Autotrofia en las bacterias del H, Aunque la mayoria de las bacterias del hidrégeno tam- bién pueden crecer como quimioorgandtrofos, cuando lo hacen de forma quimiolitétrofa, fijan el CO, mediante el ciclo de Calvin (Seccién 20.6). La estequiometria es la si- guiente: (6H; + 20; + CO; + (CH,O) + 5H,0 donde (CH,0) representa el material celular. Sin embar- go, cuando hay compuestos organicos listos para usar, como la glucosa, en las bacterias del H, se reprime la sin tesis del ciclo de Calvin y de las enzimas hidrogenasa. En Ja naturaleza, la cantidad de H, en los ambientes éxicos es transitoria y baja en el mejor de los casos; la mayor parte de la produccién biolégica de H; se obtiene de las660 UNIDAD 4 1 Diversidad metabélica y ecologia microbiana Hicrogenasa intograda ‘nla membrana eee Material celular Figura 20.25. Bioenergética y funcionamiento de las dos hidrogenasas de las bacteria aerobias del H,.En Ralstonia eutropha hay dos hidrogenasas: ania a la membrana participa en laenergética, mientras que le hidrogenasa ctopldsmicafabrica NADH para el ccie de Calvin, Algunas bacterias del H tienen sda la hidrogenasa unica la membrana y en estos organismos el poder reductor se sinteiza mediante el fjo inverso de electrones desde (Qhacia el NAD” para formar NADH, Cyt: citocromo; Q: quinone, fermentaciones, que son procesos anéxicos. Por lo tanto, las bacterias aerobias del hidrégeno deben regular con, precisién sus enzimas catabilicas. Probablemente, estos, organismos cambian su metabolismo entre la quimioo1 ganotrofia y la quimiolitotrofia, segun la cantidad de compuestos orgénicos y H, utilizables en su habitat. Ade- mis, como muchas bacterias aerobias del H, crecen me- jor en condiciones microaerobias, es probable que estos organismos tengan mas éxito como quimiolitétrofos del H, en la interfase dxico-andxico, donde el metabolism fermentativo aportaré el H; en més cantidad, y més con- tinuamente, en habitats muy 6xicos. 20.10) Oxidacién de los compuestos reducidos del azufre Muchos compuestos reducidos del azufre se utilizan como donadores de electrones en las bacterias incoloras del azufre, llamadas incoloras para distinguirlas de las bacterias verdes (pigmentadas) y parpuras del azufre que contienen bacterioclorofila tratadas anteriormente en este mismo capftulo (Figura 20.17). Historicamente, el concepto de quimiolitotrofia proviene de los estudios rea- lizados por el gran microbidlogo ruso Sergei Win« gradsky con las bacterias del azufre (véase la Informacion, adicional «Winogradsky y la quimiolitoautotrofia») Energética de la oxidacién del azufre Los compuestos de azufre que se utilizan con mas fre- cuencia como donadores de electrones son el sulfuro de hidrégeno (H,S), el azufre elemental (S%) y el tiosulfato (S,0#>). En la mayor parte de los casos, el producto final de la oxidaci6n del azuire es el sulfato (SO}>) y el niime- ro total de electrones que se intercambian entre el HS (estado de oxidacién, ~2) y sulfato (estado de oxidacién, +6) es de ocho, Hay menos energfa disponible cuando se utiliza uno de los estados de oxidacién intermediarios del, azutre: HS + 20) SO?" + 2H* (producto final, sulfato) AG" = ~798,2 kreaccion (—99,75 Kile”) HS + Jo, +H +8" + 1,0 (producto final, azufre) AG" = ~209,4 ki/reaccion (—104,7 ki/e") S° + H,0 + 30: SO" + 2H* (producto final, sulfato) AG" = ~587,1 klireacci6n (—97,85 Kile") S,0%° + H,0 + 20, > 280} + 2H™ (producto final, sulfato) AG" = -818,3 kI/reacci6n (—102 ke“) La oxidacién del H,S se produce por etapas, y la pri- mera etapa de oxidaci6n produce azufre elemental, $°, Algunas bacterias que oxidan el H,S depositan este azu- fre elemental dentro de la célula (Figura 20.26), donde el azufre constituye una reserva de energia. Cuando se ha ® Figura 20.26 Bacterias del azufre, (2) Grénulos del azute intracelulares en Beggjatoa. (b) Adhesion de las células dela arquea oxidante de azuire Sulfolobus acidocaldarius un cristal de azufre elemental cbservada al microscopio de fluorescencia después de teirlascélulas con el calorante naranja de scricina, El cristal de azufre no emite fuorescencia,ado el suministro de H,S, se puede obtener mas ener- de la oxidacién del azufre a sulfato. Cuando se suministra externamente azufre elemental ‘como un donador de electrones, el organismo puede ad- Iperirse a la particula de azufre debido a la gran insolubi- del azufre elemental (Figura 20.266). Al adherirse a particula, el organismo puede retirar los dtomos de fre para la oxidacién a sulfato. Esto se produce a tra- ésde la actividad de las proteinas membranarias o peri- smicas que solubilizan el azufre, probablemente por reduccién del Sa HS", que se transporta al interior Jacélula y entra el metabolismo quimiolitétrofo (Figu- 20.27), Uno de los productos de las reacciones de oxidacién anufre reducido es el H’, y la produccién de protones ie el pH, por lo que un resultado de la oxidacién de compuestos de azufre reducido es la acidificacién del ‘medio. El écido formado por las bacterias del azufre es Acido fuerte, el acido sulfiirico (H,S0,) y debido a i, las bacterias del azufre a menudo son capaces de evar a cabo una notable disminucién del pH del medio. Algunas bacterias del azufre son realmente acidotoleran- Nes 0 incluso acidéfilas, El Acidithiobacillus thiooxidans, ‘por ejemplo, crece mejor a un pH por debajo de 3. Bioquimica de la oxidacién del azufre ‘Las ctapas bioguimicas en la oxidacién de varios com- “puestos del azufre se resumen en la Figura 20.27. Se co- focen varios sistemas de oxidacién en los quimiolittro- ‘fos del azufre. En dos de los sistemas, el sustrato de ‘partida, H,S, S,03° 0 S°, se oxida primero a sulfito {SOF ); al comenzar con el sulfuro, se liberan seis elec- frones. Luego, el sulfito se oxida a sulfato, que se puede Facer de dos maneras. El sistema més generalizado em- la enzima sulfito-oxidasa, que transfiere electrones tamente desde el $0} al citacromo ¢, y se forma a partir de esto durante el transporte de electrones y Js formacion de la fuerza protonmotriz (Figura 20.27) Por el contrario, algunos quimiolit6trofos del azufre oxi- dan el SO} a SO} mediante la inversion de la actividad ela adenosina-fosfosulfato-reductasa, una enzima esen- ial para el metabolismo de las bacterias reductoras de sulfato (Seccién 21.8). Esta reaccién, que tiene lugar en Jadireccion de la produccién de SO} en los quimiolité- ‘trofos del azufre, produce un enlace fosfato de gran ener- sia al convertir el AMP en ADP (Figura 20.272). Cuando «el tiosulfato es el donador de electrones para los quimio- lit6trofos del azufre, primero se escinde en S* y SOF, los cuales finalmente se oxidan a SO} Sox En Paracoccus pantotrophus y muchas otras bacterias del ‘azulre aparece un sistema de oxidacién de sulfuro y tio- ssulfato funcionalmente distinto, Este sistema, llamado el sistema Sox (por oxidacién del azufre, «sulfur oxidation» ‘en inglés) oxida compuestos reducidos de azufre directa- mente a sulfato, sin la formacién intermedia de sulfito Capitulo 20 & Diversidad metabslica: fototrofia, autotrofia, quimiolitotrofia y fijacién del nitrégeno 661 $203 Sistema de transports dewiectonee: Fiacion det CO, AP gy Figura 20.27 Oxidacién de compuestos reducidos por los quimiolitétrofos del azufre. (a) tapas de la oxidacién de clferentres compuestos. Se conocen tres vas distntas.(b) Los ‘lectrones de los compuestos del azute alimantan la cadena del transporte de slectrones pare obtener una fuerza protenmatis; los alectrones del tosulfto y del azutre elemental entran en el rivel del citocromo c. EI NADH tiene que sintetizarse con reacciones endergénicas de ujoinversa de electrones porque los donadores de electrones tienen un & més electropostivo que NAD*/NADH. Cyt: ctocromo; FP: flavoproteina; Q: quinona, Pars la estructura de la APS, véase a Figura 21.15, (Figura 20.27a). El sistema Sox comprende 15 genes que codifican varios citocromos y otras proteinas necesarias para la oxidaci6n de los compuestos reducidos del azu- fre directamente a sulfato. El sistema Sox esta presente en varios quimiolit6trofos del azufre y también esta pre- sente en algunas bacterias del azufre fotstrofas que oxi-concept de stot Eins reso Ree eee SogetWecgachy econ. Wnogredy ote as bats el Eig eti iste binlad delenit Begging, Tatra son may sraner Poy ichesdeineaton fcheoen vnc de cies pc Len oe ae inf comur ontoriel manda Ena Sto Bones Obrand Sua, se desaralonpoblciones nnereas do Beagitoy This en Io cages ln marartales sulcus cuter Winco letra odecnae ra lverudonrte-épcanytologee eeenesesres Stertons bread cies (err 188) 804 15.12y ee ite ere ieee | Wisc primer decries | bac nclore clei sto | Sai erencleaae Seek Haapeeeandone SiSabe del ere e Hse spa As ny 2g i] a Nous fap weetoat Bg 1 | A 4d Figura 1 Beggiatoay la quimiolitotrofa. Dibujes realizados por Winogradsky de Beggiatoa y traduccién (del francés) de la leyenda que acompafa a estas figuras, Figure 1». Extrema de un filamento de Beggiatoa alba: (a) en agua sulfurosa (que contiene sulfur, (b) después de 24h en agua sin H.5, (c)tras 48 h en agua sin HS (obsérvese el agotamiento de los grénulos de azufte con el tiempo). Figura 2. Extreme de un flamenta de Beggiatoa media, Figura 3. Extremo de un filamento de Beggiatoa minimas. De Winagradsky, S, 1949, Microbiologie du Sol. Maston, Paris. gradualmente y las bacterias del azufre deseparecian. Esto le sugiié que su desarrollo dependia de la presencia de HS. Winogradeky demostré después que cuando los filamentos de Beggiatoa se mantenian sin sufuro, perdian los grénulos de azufre. No obstante, encontré que los granules se recuperaban répidamente si se afadia una pequefia cantidad de H,S (Figura 1), Portanto, concluyé que el H:S se ‘estaba oxidando a szufre elemental. {Pero qué ocuria con los grénulos del azufre cuando se mantenian los filamentos sin H.5? Winagradghy demostré mediante pruebas rmicroquimicas ingeniosas que cuando cdesaparecian los grénulos del azufe, aparecia sulfato en el media. Concluyé que Beggiatoa (y por extensién otras bacterias incoloras del azufre) oxidabs e! HS a azuire elemental y posteriormente a sulfato (HS + $+ S02). Como este ‘organismo parecia requerir H,S para su desarrollo en los manantiales, postuls {que esta oxidacin erala fuente principal de energia para estos organismos. dan el H,S para obtener poder reductor para la fijacién del CO; (Figura 20.17). Por lo tanto, este mismo sistema bioquimico para la oxidacién del sulfuro se distribuye entre los procariotas que oxidan sulfuro por razones in- herentes a ellos, lo que sugiere de que los genes que lo codifican se pueden haber transferido entre especies me- diante un flujo de genes horizontal Energia a partir de la oxidacién del azufre Todos los electrones de los compuestos reducidos de azufre finalmente entran en la cadena de transporte de electrones tal y como se muestra en la Figura 20.27b. Se- atin el Ej del par, los electrones entran o bien al nivel de la flavoproteina (Es = ~0,2 V) o bien al del citocromo ¢ (Ej = +0,3 V) y se transportan por la cadena hasta el ,, lo que genera una fuerza protonmotriz.que conduce alla sintesis de ATP mediante la ATPasa. Los electrones para la fijacién aut6trofa de CO. vienen del flujo inver- 662 so de electrones (Seccién 20.4), que finalmente produce NADH. La autotrofia esta garantizada por las reaccio- nes del ciclo de Calvin (Figura 20.27b) o algunas otras vias aut6trofas. Aunque los quimiolitétrofos del azufre son principalmente un grupo aerobio (Secci6n 15.4), al- unas especies pueden crecer de modo anaerobio util zando el nitrato como un aceptor de electrones; Thioba~ cillus denitrificans es un ejemplo clasico de este estilo de vida. El hidrégeno (Hs) los compuestos reducidos de azufre, como H,S, $.03 y 5°, son excelantes donadores de clectrones para el metabolismo energético en los uimiolitétrofos. Los electrones de estas sustancias lentran en la cadena de transporte de electrones y producen una fuerza protonmetriz. Los quimiolitétrofos(continuacion) Porlo tanto, los estudios de Winogradsky sobre Beggiatoa jproporcionaron la primera prueba de ‘que un organismo podria oxidar una sustancia inorgénica como fuente de feneraia, lo que supuso el origen del eoncepto de quimiolitotofi, A partir de lentonces, Winogradsky se dedicé al estudio de las bacteriasnivificantes, en les que demostré que la fijacién sutétrofa del CO; estaba acoplada a la ‘xdacién de un compuesto inargénico, ‘ese conocia el proceso de ritificacién ‘antes del trabajo de Winogradky por tsstudios sobre el destino de las aguas fesiduales que se afiaden al suelo, Por emplo, al pasar las aguas residuales fas en amoniaco a través de un ccolumna de suelo, este compuesto se convertia a nitrato, Winagradsky procedié a ais'r bacteriasnitrficantes talizando medios de cultvo ‘completamente minerales en los que el CO, erala ‘nica fuente de carbono y el lemoniaco era el inico denador de lectrones. Como el amoniaco es uimicamente estable, resuto fécil 21 CO; mediante el ciclo de Calvin, del azufre y del hidrégeno también son autétrofosy fjan | ‘demostrar que la oxidacién de amoniaco anitritoy, pasteriormente, a nitrato, era ln proceso estrictemente bacteriano Winogradsky demos ademés que la ritriicacion era.un proceso de dos etapas, ‘con un grupo de organismos que cconveran el NH; en NOs y un segundo ‘grupo que convertia el NOz a NOs (Seceién 20.12). Como ne habe sustancias orgiinicas en el medio, también resuté posible demostrar que la materia lorgénica (el material celular bacterianc) se formabs a parte CO»: cuando se excluia el amoniaco ol nitrite del medio, las células no crecian. Los andlisie ‘quimicos cuidadosos demostraron quela Cantidad de materia orgénice formada por las bacterias era proporcional als cantidad de amoniaco o nitrite que ‘oxidaban, Winagredsky concluyé: «Esto (proceso) es contradictorio ala dectrina fundamental de a fisiologia que afirma {que en la naturalezano puede producirse la sintesis de materia orgénica sino esa través de las plantas con clorofilapor la ‘accién de a uz». Asinaciéel concepto de auimioltoautrfia, Actualmente, sabemos que, al menos en una de las formas, a autotrofia es similar en las mayoria de los uimialitétrofos y fotstrofes. En ambos ‘grupos, la via de la fijacién del CO, sigue las mismas etapas bioquimicas (e! ciclo de Calvin), que requieren la enzima ribulosa-bisfosfato-carboxilasa (Seccién 20.6). Otros quimialitétrofos Utilzan vias autotifas alternativas, ‘como el ciclo inverso del écido citico 0 el ciclo de! hidroxipropionato, ‘mecanismos que se descubrieron primero en los fotstrofos anoxigénicos. Tal como veremos en este capitulo, muchas bacterias y arqueas son ‘organismos quimiolit6trofes, si bien todos emplean la misma estrategia metabélica bésica: oxidan el compuesto inorgénico mediante una cadena de transporte de electrones que genera na fuerza protonmotra. Las distintas formas de quimiolitotrofia son sencillamente variaciones sobre un tema metabélico comtin descubierto por primera vez por Winogradsky en las bacterias del azutre. oxidacién (Tabla 20.1) y, por este motivo, las bacterias del hierro deben oxidar grandes cantidades de hierro para crecer: El hierro férrico obtenido forma hidréxido férrico 1 1Qué enzima especial se necesita para crecer en H.? 1 {Cudntos electrones estén disponibles de la oxidacién del HS si el producto finales el $°2 zY silo es el SOZ-? 1 {En qué se ciferencael sistema Sox, para oxidar eH, | de otros sistemas que oxidan el H,S? | 20.11) Oxidacién del hierro [Fe(OH),] insoluble, que precipita en el agua (Figura 20.28). Esto se debe, en parte, a que, a pH neutro, el hie- nro ferroso se oxida répida y espontdneamente al estado férrico, Por lo tanto, el Fe** es estable durante perfodos prolongados s6lo bajo condiciones anéxicas. Sin embar- 20, a pH Acido, el hierro ferroso es estable en condiciones ‘xicas. Esto explica por qué la mayor parte de las bacte rias que oxidan hierro son aciddfilas estrictas. Bacterias oxidadoras de hierro Las bacterias oxidadoras de hierro mejor conocidas, Aci- La oxidacién aerobia del hierro a partir del estado ferro- so (Fe’’) al férrico (Fe"*) es una reaccién quimiolit6tro- fa en algunos procariotas. A pH acido, s6lo se puede ex- traer una pequefia cantidad de energia a partir de esta dithiobacillus ferrooxidans y Leptospirillum ferrooxidans, pueden crecer de modo autétrofo utilizando hierro ferro- so (Figura 20.28) como donador de electrones. Los dos organismos pueden crecer a valores de pH por debajo de 663664 UNIDAD 4 1 Diversidad metabdlica y ecologia microbiana Figura 20.28 Bactetias oxidadoras de hierro. (a) Vertios {cidos mineros, que muestran la confluencia de un rio noxmal y un arroyo de drenaje de una zona minera de carb6n. El stroyo fide contiene mucho hiero feroso (Fe). A pH bajo, el hierco ferroso no se oxida esponténeamente en el aire, sino que Acicithiobacilus ferrooxidans lava a cabo la oxidacién. El hidréxido férico insoluble y la sales frrcas complejas precipitan, formando un precipitado que los mineros del carbén a S0,? (Figura 20.27) Algunas bacterias fot6trofas verdes del azufre (género Chlorobium; Seccién 16.15) pueden utilizar también Fe? ierro ferroso por los fotstrofos @ » Figura 20.31 Oxidacién del hierro ferroso por las bacterias fotétrofas anoxigénicas. (a) Oxidacion del Fe?” en cutivos i, medio inoculado, un cutive en crecimiento. E! color tea se debe principalmente al preciptado de Fe(OH), (6) Fotografia al microscopic de contraste de fase de una bacteria purpura ‘oxidadora de hier Las eas raractils bilantes dentro de las células son vesfculas de gas (Seccién 4.11), Los grénulos fuera de las céulas son precipitados de hiero, Este organismo ests relacionado flogenéticamente con la bacteria pirpura del azufre Chromatium (Seecién 15.2),666 UNIDAD 4 1 Diversidad metabélica y ecologia microbiana ‘como un donador de electrones para el crecimiento auts- trofo. Ademds, se han aislado varias bacterias desnitrifi- antes quimiétrofas capaces de acoplar la oxidacién del Fe con la reduccién del NO,” a Np y crecer en condi- ciones anéxicas. Sin embargo, al igual que las bacterias aerobias del hierro, en estos organismos el Fe** es un do- nador de electrones tanto para las necesidades energéti- ‘cas como para las del poder reductor. El descubrimiento de los fot6trofos oxidadores de Fe?" tiene implicaciones importantes a la hora de com- prender la evolucién de la fotosintesis v explicarlos gran- des depésitos de hierro férrico encontrados en los sedi- ‘mentos antiguos de la Tierra. Se supuso que el hierro férrico antiguo se habfa formado por la oxidacién del Fe mediante el 0; producido por los fot6trofos oxigéni- cos. Sin embargo, debido a la edad de tales sedimentos, ‘que en muchos casos datan de antes de la aparicién de Jas cianobacterias en la Tierra (Seccién 14.2), es més pro- bable que el hierro férrico se formara por laaccién de los fotétrofos anoxigénicos que oxidan el Fe” en ambientes anéxicos ricos en hierro. Las bacterias del hier son quimioltétrofes que oxidan e! hierro ferroso (Fe’*) como donador de electrones. La mayoria, de las bacteria del hierro crecen sélo a un pH cido y 3 menudo se presentan asociadas a la contaminacién écida derivada de actividades mineras de carbén y minerales. Algunas bacterias purpuras fotétrofas son capaces de oxidar el Fe a Fe” de forma anaerobia, 1 GPor qué a pH dcido se cbtiene sélo una cantidad muy ‘pequeria de energia a partir dela oxidacién del Fe®* a Fe? 1 Cual es la funci6n de la rusticianina y dénde se encuentra en la eélula? 1 Cémo se puede oxider el Fe en condiciones anéxicas? Nitrificacion Los compuestos nitrogenados inorgénicos, amoniaco (NH)) y nitrito (NO, ), son sustratos quimiolitétrofos. Es- tos compuestos se oxidan de forma aerobia mediante las, bacterias nitrificantes (Seccién 15.3) durante el proceso de nitrificaci6n. Las bacterias nitvificantes estan amplia- mente distribuidas en suelos y aguas. Un grupo, las mi- trosoficantes (Nitrosomonas es un género representativo, Seccién 15.3), oxida el amoniaco a nitrito, y otro grupo (Nitrospira es un género representativo, Secci6n 16.21) oxida el nitrito a nitrato. Por lo tanto, la oxidacién com- pleta del amonfaco a nitrato, una transferencia de ocho electrones, la llevan a cabo dos grupos de organismos que actiian secuencialmente mediante un proceso descubier- —EEE————— to por el microbislogo ruso Winogradsky (como se ha ob- servado en la seccién Informacién adicional). Bioenergética y enzimologia de la nitrificacién La bioenergética de la nitrificacion esté basada en los mismos principios que gobiernan otras reacciones qui- miolitotrofas: los electrones de sustratos inorgénicos re- ducidos (en este caso, compuestos nitrogenados reduci- dos) entran en una cadena de transporte de electrones el flujo de electrones establece una fuerza protonmotriz que impulsa la sintesis de la ATP. Las bacterias nitrificantes se enfrentan a problemas, bioenergéticos similares a los de la mayorfa de otros qui- iolitétrofos. El Ej del par NO;/NH, (Ja primera etapa en Ja oxidacién del NH,) es elevado: +0,34 V. El Ej del par NOj/NO¥ ¢s incluso mayor: unos +0,43 V. Estos potencia- les de reducci6n relativamente elevados hacen que las bac- terias nitrificantes donen electrones a potenciales acep- tores mas bien elevados en las cadenas del transporte de electrones, lo que limita la extensién del transporte de clectrones y la produccién de energia 0 ATP disponibles. Varias enzimas clave participan en la oxidacién de compuestos nitrogenados reducidos. En bacterias o dadoras ce amoniaco, el NH, se oxida mediante la amo- niaco-monooxigenasa (las monooxigenasas se explican en el Seccién 21.14), que produce NH,OH y H,0 (Fi- ‘gura 20.32). Una segunda enzima clave, la hidroxilam: na-oxidorreductasa, oxida entonces la NH;OH a NO3, Citoplasma Figura 20.32 Oxidacién del amoniaco y flujo de elactrones ten las bacterias oxidadoras de amoniaco. Se destacan los reactantas y os productos de esta serie de reacciones, El itoeromo c (Cyt en el periplasma es una forma diferente del Cyt cque el de la membrana. AMO: amoniaco-monooxiganass; HAO: hidroulamina-oxidorreductasa: Q: ubiquinona,