Cromatografa.
- cientficos tratan de combatir la enfermedad, la cromatografa se ha revelado
La ciencia que se encarga de estudiar los diferentes componentes de una
sustancia es la qumica analtica. Una de las tcnicas ms usadas para separar
los distintos componentes de una mezcla para su posterior estudio, es la
cromatografa. Esta forma de separar componentes de una mezcla se llama
separacin cromatogrfica. La cromatografa se aprovecha de que cuando
dejamos moverse una mezcla por un soporte, por ejemplo papel, tela, etc, los
elementos de la mezcla son retenidos por la superficie del soporte de diferente
manera, movindose por el a diferentes velocidades y se separan.
Que es la Cromatografia? Es la tcnica para separar componentes de una
mezcla y su posterior anlisis, basada en que las distintas sustancias que forman
los componentes de una mezcla se dejan arrastrar a diferentes velocidades sobre
un soporte. El soporte puede ser papel, un gas, otro lquido, etc. Es un mtodo
fsico de separacin de componentes. Cromatografia Ejemplos: Un ejemplo, si
sobre un mantel blanco se derrama un poco de vino tinto, transcurrido un tiempo
se observa que la mancha no es uniforme, sino que hay una zona con predominio
de tonos azules y otra en que la tonalidad es roja. Eso es porque se ha producido
una separacin cromatogrfica de los pigmentos del vino. Las tintas de los
rotuladores son una mezcla compuesta por algn disolvente (parte lquida de la
mezcla) y diferentes pigmentos. Algunos colores, como el negro, suelen ser
mezcla de dos o tres pigmentos diferentes. Para separar estos pigmentos
podemos realizar una cromatografa. Luego veremos como. Algunos de los
ejemplos en los que se usa la cromatografia a diario son:
- Se suele usar para tomar pruebas de la escena de un crimen (el anlisis de
muestras de sangre o de telas).
- Verificacin de incendios provocados (identificacin de las sustancias qumicas
responsables de un fuego).
- Anlisis de sangre despus de la muerte o en vida para determinar los niveles
de alcohol, drogas o sustancias venenosas en el cuerpo.
- Tambin se utiliza para determinar la composicin de los alimentos.
- Para mirar los niveles de contaminacin, por ejemplo, del agua o del aire.
- Para el estudio de mezclas complejas en cosas tales como alimentos, perfumes,
petroqumica, y produccin farmacutica.
- Tambin puede ser fundamental para salvar millones de vidas. El mortal virus del
bola, que se ha cobrado ms de 5.000 vidas desde su aparicin a finales del ao
pasado, ha causado pnico en los medios y en los pases de Sierra Leona,
Guinea y Liberia, en los que se ha limitado en gran medida. A medida que los
como muy til para determinar qu anticuerpos son ms eficaces en la
neutralizacin de bola.
Por qu se separan los componentes? Dejamos que se mueva la mezcla por
un soporte y los componentes se separan por que se mueven a diferentes
velocidades, debido a las diferentes fuerzas de adsorcin que ejerce el soporte
sobre cada elemento, as de fcil.
Si si, no nos hemos equivocado es adsorcin, que puede confundirse con
absorcin pero no es lo mismo. Vamos a explicarlo.
La absorcin es cuando una sustancia se introduce en la estructura de otra.
Ejemplo: una esponja absorbe agua, entonces si cortamos la esponja en pedazos
vamos a encontrar agua en todas partes de la estructura de la esponja
La adsorcin es un fenmeno superficial, la sustancia adsorbida no se introduce
en el volumen del cuerpo, sino solo se adhiere a la superficie.
Queda claro la diferencia? Pues ahora que ya sabemos lo que es la adsorcin
veamos otra definicin de cromatografa qumica:
La cromatografa quimica es una separacin fsica de los componentes de una
mezcla basado en la adsorcin selectiva de los componentes de la mezcla al
moverse por un soporte.
Imaginemos el rotulador anterior, si pintamos sobre una tira de papel de filtro o
secante con el rotulador un poco ms arriba de la base de la tira de papel (el
papel ser el soporte) y ahora lo metemos en un recipiente con alcohol en la base
del recipiente, el alcohol moja la base de la tira de papel, asciende por las tiras de
papel y al llegar a la tinta del rotulador que pintamos, disuelve la tinta y sigue
subiendo hasta provocar la separacin de los pigmentos.
Esto se produce por las distintas velocidades a las que se mueven los pigmentos
por el papel cuando se mojan con el alcohol y se mueven. Abajo hay un video con
ejemplo ya realizados para que los puedas ver.
Como vemos hay una fase fija que ser la colocacin de la mezcla en el papel y
otra mvil que ser la subida del alcohol por el papel. La fase fija se hace con
papel (slido) y la mvil se hace con un lquido, el alcohol. Ms adelante
explicaremos las fases cromatografas. Aqu tienes una imagen del ejemplo de la
tinta del rotulador. cromatografia ejemplos
Para qu se utiliza la Cromatografia?
La cromatografa se utiliza tanto para lograr la separacin de los componentes de
una mezcla como para medir la proporcin de cada elemento en la mezcla.
Fases de la cromatografa
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Las cromatografas se hacen en dos fases. Una esttica y otra mvil.
En la fase esttica o estacionaria, la mezcla se coloca sobre un soporte fijo, por
ejemplo papel. En esta fase tenemos ya la mezcla sobre un soporte, en nuestro
ejemplo un papel.
En la fase mvil se hace mover otra sustancia sobre la mezcla que ya est sobre
el soporte de la fase esttica, por ejemplo un lquido que se mueve por el papel
con la mezcla. En la fase mvil empezar el proceso de separacin de los
componentes de la mezcla al moverse a distintas velocidades por el lquido los
distintos componentes de la mezcla sobre el papel.
Tipos de Cromatografia
Aunque hay muchas y variadas tcnicas cromatogrficas, el objetivo de todas es
separar las sustancias que forman una mezcla y enviarlas secuencialmente a un
detector para que las determine y cuantifique.
Todas se basan en el mismo fenmeno: permitir que las sustancias que forman
una mezcla entren en contacto con dos fases (un lquido y un gas, un slido y un
lquido, etc.). Una de las fases es esttica (no se mueve) y tender a retener las
sustancias en mayor o menor grado; la otra, fase mvil, tender a arrastrarlas.
Cada sustancia qumica tiene distinta tendencia a ser retenida y a ser arrastrada.
Dependiendo de la naturaleza de la fase esttica y de la fase mvil se pueden
distinguir distintos tipos de cromatografa
a) Cromatografa slido-lquido. La fase esttica o estacionaria es un slido y la
mvil un lquido.
b) Cromatografa lquido-lquido. La fase esttica o estacionaria es un lquido
anclado a un soporte slido.
c) Cromatografa lquido-gas. La fase esttica o estacionaria es un lquido no
voltil impregnado en un slido y la fase mvil es un gas.
d) Cromatografa slido-gas. La fase estacionaria es un slido y la mvil un gas.
Segn el tipo de interaccin que se establece entre los componentes de la mezcla
y la fase mvil y estacionaria podemos distinguir entre.
a) Cromatografa de adsorcin. La fase estacionaria es un slido polar capaz de
adsorber a los componentes de la mezcla mediante interacciones de tipo polar.
b) Cromatografa de particin. La separacin se basa en las diferencias de
solubilidad de los componentes de la mezcla en las fases estacionaria y mvil,
que son ambas lquidas.
c) Cromatografa de intercambio inico. La fase estacionaria es un slido que
lleva anclados grupos funcionales ionizables cuya carga se puede intercambiar
por aquellos iones presentes en la fase mvil
CROMATOGRAFIA.-
La cromatografa es una tcnica muy utilizada en diferentes reas de la ciencia,
pues permite la separacin de los distintos componentes de una mezcla gracias a
dos efectos contrarios que gobiernan la tcnica, estos son:
La retencin: es el efecto que se ejerce sobre los componentes de una mezcla por
medio de una fase estacionaria, la cual puede ser de naturaleza slida o un
lquido que se encuentre anclado en un soporte slido.
Desplazamiento: Es el efecto que se ejerce sobre los componentes de una mezcla
por la fase mvil, la cual puede ser de naturaleza lquida o gaseosa.
Para realizar la cromatografa, la mezcla que se desea separar se coloca sobre la
fase estacionaria, y la fase mvil atravesar el sistema arrastrando y desplazando
a los distintos componentes a distintas velocidades, esto depender de la
magnitud de las interacciones relativas con ambas fases.
Cuando se repiten sucesivamente las operaciones principales de retencin y
desplazamiento a lo largo del soporte o sistema de la cromatografa, tendremos
como resultado la separacin de la mezcla original.
El fenmeno que hace referencia a la migracin de los distintos componentes de
una mezcla a lo largo de la fase estacionaria, empujada por la fase mvil, se le
conoce con el nombre de elucin.
La cromatografa se puede usar tambin, adems de para separar, para conocer
el nmero de componentes que tiene la mezcla para poder posteriormente
identificarlos a travs de la comparacin de diferentes patrones (cromatografa
analtica). Como ya habamos comentado, se usa principalmente para la
separacin de mezclas, ya sean estas a pequea o gran escala, adems de cmo
mtodo para purificar, conocido como cromatografa preparativa.
Existen diferentes tipos de cromatografas, las cuales se diferencian y dependen
de las fases estacionarias (ya sea slida o lquida), as como de la fase mvil (ya
sea lquida o gaseosa), as podremos diferenciar diferentes tipos de
cromatografa, donde sus nombres indican la naturaleza de las diferentes fases
que la forman:
Cromatografa slido-lquido: donde la fase estacionaria es un slido y la mvil un
lquido.
Cromatografa lquido-lquido: donde la fase estacionaria es un lquido que se
encuentra anclado en un soporte slido y la fase mvil es un lquido tambin.
Cromatografa lquido-gas: La fase estacionaria es un lquido de tipo no voltil que
se encuentra impregnado en un slido y la fase mvil es un gas.
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Cromatografa slido-gas: donde la fase estacionaria es un slido y la fase mvil,
como su nombre indica, es un gas.
Por otro lado, dependiendo del tipo de interaccin que se consiga establecer entre
los componentes de la mezcla, la fase mvil y estacionaria, podemos hablar de:
Cromatografa de adsorcin: donde la fase estacionaria es un slido de tipo polar,
el cual es capaz de absorber a los diferentes componentes de la mezcla a travs
de interacciones polares.
Cromatografa de particin: donde la separacin se basa en las diferentes
solubilidades de los componentes que conforman la mezcla en las distintas fases
estacionarias, y mviles, que en este caso, son ambas lquidas. Cuando la fase
estacionaria es menos polar que la fase mvil, esta se llamar cromatografa en
fase inversa.
Cromatografa de intercambio inico: La fase estacionaria es un slido que tiene
anclados distintos grupos funcionales fijos ionizables, cuyas cargas se encuentran
contrabalanceadas por distintos iones mviles que pueden ser intercambiados por
los iones presentes en la fase mvil.
Segn el tipo de soporte utilizado en la tcnica, en la fase estacionaria, podemos
establecer otra clasificacin:
Cromatografa en columna: donde el absorbente se coloca en el interior de una
columna de cristal.
Cromatografa en capa fina: donde una capa de absorbente con un espesor
uniforme se coloca en una placa de vidrio, o tambin de otros materiales como el
aluminio o plstico.
Tipos de cromatografa
La cromatografa es un mtodo fsico que se utiliza para separar e identificar
compuestos. El fundamento de esta tcnica consiste en que cualquier sustancia,
al ser disuelta en dos disolventes distintos no miscibles, se reparte entre ambos
atendiendo a su solubilidad. La relacin entre las solubilidades de dicha sustancia
en cada uno de los disolventes se denomina Coeficiente de Reparto.
Si uno de los disolventes se mantiene fijo (Fase Estacionaria) se puede hacer
desplazar el otro disolvente (Fase Mvil) sobre el primero. Las sustancias a
cromatografiar se vern sometidas a una distribucin entre las fases estacionaria
y mvil de modo que las ms solubles en la fase mvil avanzarn ms que las que
sean retenidas por la fase estacionaria.
De acuerdo con el mecanismo que produce la separacin, se puede hablar de
distintos tipos de cromatografa:
- Cromatografa de reparto. La fase estacionaria suele ser mantenida fija mediante
un soporte inerte poroso (papel o celulosa). La fase mvil suele ser una mezcla de
disolventes medianamente miscibles con el agua. Cuanto ms soluble en agua
sea la sustancia a cromatografiar, ms retenida y retrasada quedar en el
desarrollo cromatogrfico.
- Cromatografa de adsorcin. La fase estacionaria retiene con ms o menos
poder a la sustancias a cromatografiar por un fenmeno de adsorcin en
superficie. Para ello se utiliza almina, gel de slice, etc. La cromatografa de
afinidad es un tipo de cromatografa de adsorcin en la que la fase estacionaria
tiene afinidad biolgica por la sustancia que se quiere separar. Se utilizan as
parejas antgeno-anticuerpo, enzima-inhibidor, etc. En la cromatografa de
intercambio inico, la fase estacionaria retiene a las sustancias por su carga
inica. Las sustancias con carga opuesta a la de la resina quedarn retenidas en
la fase estacionaria, mientras que las de la misma carga que la resina sern
arrastradas por la fase mvil. Las sustancias que quedan unidas a la resina
pueden eluirse cambiando las condiciones de la fase mvil (variando el pH, la
fuerza inica, etc.). Este tipo de cromatografa se hace slo en columna y los
soportes utilizados son polmeros tales como celulosa o poliestireno carboxilados
o poliaminados, etc.
De acuerdo con el soporte fsico sobre el que se realiza la separacin, se puede
hablar de dos tipos de cromatografa:
- Cromatografa en capa fina: la fase estacionaria se extiende sobre una placa.
- Cromatografa en columna: la fase estacionaria se empaqueta en una columna