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Capa
Folha de rosto
copyright Pgina
ndice
Agradecimentos
Prefcio
Introduo
Part One: A importncia da levedura e fermentao
A Brief History of Yeast
Por fermentao to importante
Melhorar a Qualidade Fermentao
Os princpios de boa fermentao
Fermento
aucar
Oxignio
nutrientes
fermentao Sistemas
Controle de temperatura
Monitoramento de fermentao
Parte Dois: Biologia, enzimas e steres
Biologia de levedura
Gentica de S. cerevisiae
Estrutura levedura celular
Metabolismo
lcool
floculao
enzimas
Como que as enzimas funcionam?
Enzimas no malte
Enzimas em Mashing
Enzimas na fermentao
steres, lcoois, e mais
steres
fusel lcoois
diacetil
cidos orgnicos
compostos de enxofre
compostos fenlicos
Parte III: Como escolher o fermento direito
Critrio de seleo
Estilos de cerveja e seleo de leveduras
cepas de leveduras
Viso geral Strain Ale
Cepas Ale limpas
Frutados Ale Cepas
Cepas Ale hbridos
Fenlicos Ale Cepas
Excntricas Ale Cepas
lager Cepas
Mltiplas cepas em seu Brewery
Mltiplas cepas em uma cerveja
Brettanomyces
Preocupaes de contaminao
Brettanomyces Cepas
O que faz Brettanomyces especial?
Inoculao Preos e Outros Fatores
Capturar levedura selvagem
Parte IV: Fermentao
fermentao Timeline
Fase lag
Fase de crescimento exponencial
Fase estacionria
Wort Composio
Sugars
enzimas
Nutrio levedura
Arejamento para Fermentao
A necessidade de oxignio
Quanto oxignio?
De alta gravidade Beers
fermentao Sistemas
fermentadores Homebrewing
fermentadores comerciais
Uso de Antiespumante
As temperaturas de fermentao
Controle de Temperatura de fermentao
Controle de Temperatura para o Homebrewer
Otimizando Flavor Fermentao
fermentao Endgame
Atenuao
floculao
diacetil Resto
lagering
garrafa Condicionado
Cask Condicionado
Parte V: o crescimento do fermento, manuseio e armazenamento
Pitching Rates
Propagao de levedura
Propagao Brewery comercial
Propagao homebrew
Fazendo um arranque
Qual o tamanho melhor kits?
Entradas escalonadas
Trabalhando com fermento seco
Manuseamento de levedura
Coleo de levedura
Top Recorte
O sincronismo O corte superior e Tcnicas
O corte inferior
O sincronismo O corte inferior e Tcnicas
Armazenamento de levedura e Manuteno
Navios de armazenagem
Validade
Reutilizar Yeast
Viabilidade e vitalidade
revitalizao
Lavagem
Lavando
transportar Yeast
Parte VI: seu prprio laboratrio de levedura Made Easy
Qualidade Desde o incio
Configurar o Lab
Consideraes ambientais
Segurana Lab
Equipamentos de laboratrio
Como Lab Much Does My Brewery precisa?
Esterilizao
calor hmido
Calor seco
Incinerao
tindalizao
Teste autoclave
A cultura de levedura
Placas e Slants
Preparando Agar Slants e placas
Listando uma placa
Listando um Slant
stabs
imerso em leo
imerso em gua
Congelando
escolher Colonies
A partir de uma placa de propagao
A manuteno de uma biblioteca de levedura
Captura de levedura
Na estrada
cerveja engarrafada
Levedura e cerveja Quality Assurance
Mtodos de chapeamento
filtrao por Membranas
Despeje Plates
placas de spread
Verifique Plates
swabbing
amostragem tanque
Teste Wort forado
Teste Ferment forado
Fora diacetil
Broad Spectrum Mtodo para VDK
Ensaios de fermentao
A estirpe de levedura de Oxignio
Teste de iodo para glicognio
Respiratria (Petite) Teste Mutant
YPD Mdio
bactrias testes
UBA Mdio
HLP Mdio
SDA Mdio
MacConkey Mdio
Gram Stain
Testes de leveduras selvagens
LWYM ou LCSM
lisina de mdia
Wallerstein mdia
diluio de srie
Contagem celular
Viabilidade
Azul de metileno (MB)
Citrato de azul de metileno (CMB)
Alcalina Azul de Metileno (AMB)
Alcalina de metileno Violet (AMV)
Contagem padro em placas (SPC)
Vitalidade
Teste de alimentao acidificao (AP)
Diferenciao de Ale e Lager Yeast
Por crescimento, a 37 C
Por crescimento em Melibiose
X-alfa-GAL Mdio
Levedura diferenciao das estirpes
Colony gigante
Deriva Multi-Strain
Parte Sete: Soluo de problemas
Lento, Entalado, e fermentao incompleta
Fermentao no inicia
Nenhuma atividade After Hours 'X'
Fermentao no termina
A fermentao parece incompleta
Alteraes de floculao
Sabores e Aromas
Carcter frutado e fusel lcoois
Enxofre
fenis
acetaldedo
diacetil
Azedar
excessivamente doce
excessivamente seco
autlise
carbonatao
A falta de carbonatao
carbonatao
Atenuao
baixa atenuao
Atenuao elevada
Problemas de levedura de armazenamento
Declnio ou Viabilidade Baixa Yeast
Prazo de conservao inadequada
Problemas de lavagem
Problemas de enxaguamento
Problemas de transporte
Propagao / Problemas de arranque
Malt Contaminao
Grficos de soluo de problemas
Lista de Figuras
Referncias
ndice
Fermento
O Guia Prtico de cerveja Fermentao
Todos os direitos reservados. Nenhuma parte deste livro pode ser reproduzida em
qualquer forma sem a permisso por escrito do editor. Nem o autor, editor, nem o editor
assume qualquer responsabilidade pelo uso ou uso indevido de informaes contidas neste
livro.
10 9 8 7 6 5 4 3
ISBN: 0-937-381-96-9
ISBN-13: 978-0-937381-96-0
TP580.W45 2010
641.8'73 - DC22
2010029741
Lista de Figuras
Referncias
ndice
Agradecimentos
Este um livro que eu queria escrever por um longo tempo. Eu escrevi sobre o fermento,
falou sobre o fermento, e trabalhou com levedura todos os dias para o que parece ser para
sempre. Eu queria colocar essa informao e muito mais em uma fonte. Comecei a escrever
o livro h trs anos com o meu irmo, Mike White. Ns colocamos um monte de material
em conjunto, mas ainda faltava alguma coisa. Quando Jamil Zainasheff entrou no projeto, o
livro realmente comeou a tomar forma. Jamil acrescentou um monte de informaes e um
toque profissional. Ele no apenas um grande escritor e cerveja, mas tambm um bom
amigo. A Associao Brewers era um lugar natural para mim para publicar o livro; Ray
Daniels foi muito til no incio, em seguida, Kristi Switzer assumiu e fez um grande
trabalho. Quero agradecer as pessoas que contriburam ou avaliao de material: Neva
Parker, Lisa brancas, Troels PRAHL, Mike White, Sharon Fernandez, Liz Strohecker, Lee
Chase, Yuseff Cherney, Dan afoga, e Craig Duckham.
Eu tambm quero agradecer s muitas pessoas que tm apoiado o livro, me deu
informaes, ou ajudou de outras maneiras: Jamie Reyes, John Schulz, Tomme Arthur, Jack
White, Justin irritada, Saskia Schmidt, John Branca, Tobias Fischborn, Graeme Walker ,
Sharon Heredia, Jay Prahl, Meg Falbo, Pam Marshall, Michael Lewis, Randy Mosher, Betsy
Komives, Barbara Maisonet, Joanne Carilli-Stevensen, Lyn Kruger, o Maynard A. Amerine
Viticultura e Enologia de quarto na Universidade da Califrnia em Davis Shields biblioteca,
onde eu fiz a maioria dos meus escritos, Chris Boulton e David Quain por sua grande
fermento livro Brewing Yeast & Fermentao e discusses pessoais, Brew sua prpria
revista, a revista Zymurgy e Nova Brewer para alguns dos artigos que tenho escrito, vinte
twos em Sudwerk Brewery, os muitos homebrewers e cervejarias comerciais que me
ensinaram muito, e, claro, meus apoiando e amando pais, Eric e Gina branco.
-Chris Branco
Eu no poderia ter terminado este livro sem o amor, assistncia e apoio da minha
famlia: Eu os amo mais do que cerveja ou cerveja, mas eles nunca me pea para provar
isso. Eles sabem o quo duro eu trabalho sobre esses livros e como ele tira tempo para a
famlia como o prazo se aproxima. Para este livro, eles at mesmo colocar-se com o pai
furiosamente editar e escrever durante a viagem de frias para a Disneylndia. Enquanto
meus filhos, Anisa e Karina, so muito favorveis, minha esposa, Liz, vai muito mais longe e
at mesmo ajuda a editar toda a minha escrita. Eu sei que minha esposa no acredite em
mim quando eu digo a ela: "Querido, todos os homebrewers tm o seu prprio laboratrio
de levedura," mas eu realmente aprecio que ela me permite gastar dinheiro em e ocupam
espao com um laboratrio, de qualquer maneira. Sim, eu sei, eu levar uma vida encantada.
Alm da minha famlia, este livro no existiria sem a ajuda de muitos amigos queridos.
Em particular, gostaria de agradecer a Peter Symons por sua dedicao reviso a cada
ltima palavra com um olhar crtico e deixar-me saber onde andava errado ou tinham
informaes desatualizadas. No posso expressar o quo forte o apoio e feedback de John
Palmer, John Tull, Gordon Strong, e Gary Angelo tem sido, no apenas para este livro, mas a
todos da minha escrita e cerveja pensamento.
Obrigado tambm para aqueles que acreditavam que eu tinha o conhecimento e
habilidade para conseguir este livro feito, especialmente Ray Daniels, Kristi Switzer, Chris
White, e Justin Crossley.
Um agradecimento especial ao Samuel Scott. Mesmo que ele estava no meio de
movimento, ele encontrou tempo para criar algumas grandes fotos para o livro. Ento eu
pedi mais, e ele enviou esses, tambm.
Como de costume, h muitos outros que ajudaram com informaes, fotos, ou suporte. I
evitar listando-os, no porque as suas contribuies foram menos significativas, mas minha
memria de m qualidade e eu sei que eu acidentalmente deixar algum fora da lista.
E obrigado meus amigos, meus irmos e irms cerveja, voc tem compartilhado suas
cervejas, suas casas, o seu conhecimento, e mais importante para mim, sua amizade. Eu sou
eternamente grato.
-Jamil Zainasheff
"O cerveja no tornar-se corretamente por si s. Leva um elemento de mistrio e de coisas que
ningum pode entender ".
- Fritz Maytag
Eu sempre gostei essas duas citaes, como acredito que ilustram perfeitamente os
mistrios da fermentao, a menos compreendida e muitas vezes a parte mais
negligenciada do processo de fermentao. Se voc ler receitas de cerveja fornecidos em
vrios sites de cerveja e em livros de cerveja, voc vai ver que muita ateno dada a coisas
como contas de gros, e mais significativamente nos dias de hoje, para hop contas.
Levedura parece um pouco como uma reflexo tardia, e talvez isso porque ele tem sido
assim ao longo de grande parte da histria.
Leia livros de cerveja histricos e voc vai encontrar muitas referncias a maltagem,
qualidade do malte, lpulo crescente, a qualidade hop, e at mesmo a qualidade da gua.
Estes processos foram bem compreendidos bastante no incio do jogo. Mas porque a
maioria dos fabricantes de cerveja de fermentao acreditava era um processo espontneo,
praticamente no h referncias a levedura em textos histricos. Isto apesar do fato de os
fabricantes de cerveja percebeu como fermento crtico o processo de fabricao de
cerveja, chamando levedura "godisgood", "berme" e "Yeste." A levedura muitas vezes
apenas mencionado de passagem em receitas e textos processuais. Mesmo a primeira
verso da lei alem de pureza, Reinheitsgebot, no conseguiu incluem leveduras como um
ingrediente na cerveja. E nas ocasies em que a levedura explorado exaustivamente em
textos histricos, uma leitura difcil, porque a informao dolorosamente impreciso.
O que ainda mais surpreendente que, apesar desta falta de conhecimento,
compreenso ou de vontade para corrigir a incluso de levedura como um ingrediente vital,
cervejeiros sabia levedura era importante, e eles sabiam bastante cedo que eles tinham que
colher fermento e repitch-lo para a prxima fermentador para assegurar a transformao
bem sucedida de mosto para cerveja. cepas de leveduras ter sobrevivido por centenas, se
no milhares, de anos, e foram mantidos com sucesso e cuidadosamente selecionados para
se tornar o grande nmero de estirpes maravilhosas que esto disponveis para fabricantes
de cerveja em todos os lugares hoje. Ao longo da histria os processos de fabricao de
cerveja evoludo que favorecia a manuteno de linhagens de leveduras. Tcnicas como a
corte superior, reinoculao, lagering e cerveja sazonal para manter uma boa temperatura
de fermentao foram todos desenvolvidos para assegurar fermentaes completas e
deliciosa cerveja, apesar de fabricantes de cerveja que tm nenhuma compreenso real do
que o fermento era e como funcionava. Mesmo recentemente, em finais dos anos 1800,
depois de Louis Pasteur provou que a fermentao um resultado do metabolismo de
levedura, um organismo vivo, literatura cerveja foi repleto de referncias "marketing falar"
com fermento: "leveduras deve ser da mais alta qualidade, "" levedura deve ser excelente
"," levedura deve ser excepcionalmente bem ", todos os quais realmente no significa nada,
mas do a impresso conveniente que o fabricante de cerveja trata o seu fermento com
cuidado.
pesquisa levedura comeou no final de 1600, logo aps a inveno do microscpio, mas
realmente decolou no final de 1700 e incio de 1800. Vrios cientistas veio com teorias que
estavam perto do que hoje conhecemos como realidade, postulando que a levedura eram
organismos unicelulares e foram responsveis por fermentao alcolica, mas ningum
realmente pousou no fato fundamental que a levedura foram metabolizar os acares para
a produo de lcool e dixido de carbono. No final dos anos 1830, a pesquisa de levedura
foi incidindo sobre o facto de a actividade de clulas de levedura era a fonte de lcool e de
produo de CO2. Esta discusso promissora de pesquisa foi descarrilou um pouco pela
publicao da seguinte descrio pejorativa de fermentao celular por orgnicos qumicos
Liebig e Wohler, que favoreceu reao qumica como a explicao para a fermentao:
... Nmeros incrvel de pequenas esferas so vistas, que so os ovos de animais. Quando colocados em soluo de
acar, eles incham, exploso, e os animais se desenvolvem a partir deles, que se multiplicam com rapidez
inconcebvel. A forma destes animais diferente de qualquer um dos descritos at aqui 600 espcies. Eles tm a
forma de um balo de destilao Beindorf (sem o dispositivo de arrefecimento). O tubo da lmpada algum tipo
de um tronco de suco, que coberta dentro com cerdas longas finas. Dentes e olhos no so observados. A
propsito, pode-se distinguir claramente o estmago, o tracto intestinal, o nus (como um ponto-de-rosa), e os
rgos de excreo de urina. Desde o momento do surgimento do ovo, pode-se ver como os animais engolir o
acar do meio e como ele entra no estmago. digerido imediatamente, e este processo reconhecido, com
certeza, da eliminao dos excrementos. Em suma, estes infusrios coma acar, eliminar o lcool a partir do
tracto intestinal e do CO2 a partir dos rgos do aparelho urinrio. A bexiga urinria no seu estado cheio tem a
forma de uma garrafa de champanhe, no estado vazio um pequeno boto. Depois de alguma prtica, observa-se
que dentro de uma bolha de gs formado, o que aumenta o seu volume at dez vezes; por alguma toro
screwlike, que os controlos de animais por meio de msculos circulares em torno do corpo, o esvaziamento da
bexiga realizado. ... A partir do nus de um animal pode ver o surgimento incessante de um fluido que mais leve
do que o meio lquido, e de seus enormemente grandes rgos genitais uma corrente de CO2 esguichada a muito
curto intervalo de tempo. ... Se a quantidade de gua no for suficiente, ou seja, a concentrao de acar
demasiado elevada, a fermentao no ocorre no lquido viscoso. Isso ocorre porque os pequenos organismos no
pode mudar o seu lugar no lquido viscoso: eles morrem de indigesto causada pela falta de exerccio (Schlenk,
1997).
Mitch Steele
Cabea Brewer / Gerente de Produo
Pedra Brewing Company
Introduo
A levedura crtica para cerveja, o que faz com que seja crtico para cervejeiras. Se
cervejeiros realiz-lo totalmente ou no, a funo de fermento envolve muito mais do que
converter acares em lcool. Mais do que qualquer outra bebida fermentada, a cerveja
depende de levedura para o sabor e aroma. Nosso objetivo era escrever um livro de
levedura que incidiu sobre a perspectiva de cerveja, e ns rapidamente percebeu que
existem apenas como muitas perspectivas sobre o fermento, pois h fabricantes de cerveja.
Enquanto um fabricante de cerveja pode ter interesse em explorar a fermentao nativa
com leveduras selvagens, outro est preocupado com a manuteno de uma cultura pura e
minimizando sabores incomuns, e ainda outro quer saber todos os detalhes da bioqumica
levedura. No final, fizemos o nosso melhor para cobrir o mximo de informao possvel do
ponto de vista de um fabricante de cerveja prtico.
Este no um livro para o fabricante de cerveja regional ou maior do grande sucesso
que j tem vrios laboratrios e um doutorado em microbiologia. Este um livro para
aqueles que esto nos estgios iniciais de seu amor de levedura e que ele pode fazer para a
sua cerveja. E quando usamos a palavra "cerveja", estamos falando no apenas sobre os
profissionais, mas tambm amadores. Homebrewers (que se chamam cervejeiros
artesanais em algumas partes do mundo) amo o processo de fabricao de cerveja, tanto
quanto suas contrapartes profissionais fazem. Assim como cervejeiros profissionais, eles
variam de excntrico para altamente cientfica, mas todos compartilham uma paixo para
criar algo do nada. Claro, se formando com sucesso em um nvel profissional tem uma
grande dose de dedicao e risco financeiro que homebrewers pode evitar. Se voc um
profissional ou amador, cerveja excelente cerveja requer um toque artstico e, s vezes, a
capacidade de pensar como um engenheiro. Na verdade, os engenheiros parecem apreciar
homebrewing mais do que a maioria e tem uma paixo por tomar o passatempo ao seu
limite. Talvez por isso, muitos fabricantes de cerveja profissional comeou como
homebrewers. Eles queriam levar a sua criatividade e paixo para o pblico.
Desde o incio, decidimos que este no seria um livro de levedura biologia. No um
livro sobre os conceitos bsicos de fabricao de cerveja, tambm. Voc j deve saber como
fabricar cerveja, e se voc no fizer isso, obter-se uma cpia do How to Brew por John
Palmer e voltar a este livro mais tarde. Se a sua paixo para a biologia do fermento, h
muitos bons livros de cincia de levedura disponveis tambm. Em alguns casos, ns
discutir o que est acontecendo dentro da parede celular, mas apenas para mostrar como
isso afeta a sua cerveja. Queramos escrever um livro que era acessvel e til para
fabricantes de cerveja de todos os nveis de experincia. Ns cobrimos informaes
levedura desde o bsico para alguns procedimentos avanados e mesmo para alm de
algumas reas para um estudo mais aprofundado. Uma coisa que sabemos sobre
cervejeiros que eles sempre querem saber mais, ento ns esperamos que este livro
satisfaz o seu interesse, estende seus horizontes, e tem voc pensar em levedura a cada vez
que voc pensa sobre a cerveja.
Fermentador vs. fermentador
Fermentador ou fermentador, o que certo? Voc v as duas palavras usadas de forma intercambivel, mas tecnicamente
isso no correto. Neste livro ns seguimos a diferenciao encontrado em muitos dicionrios:
Usamos fermentador quando se fala de um vaso de fermentao, tais como um fermentador cylindroconical.
Usamos fermentador quando se fala sobre a prpria levedura, tais como, "WLP001 um fermentador forte".
Fermento
A parte mais importante da fermentao a levedura. Levedura converter o acar de
lcool, dixido de carbono, e outros compostos que influenciam o sabor de alimentos e de
bebidas fermentadas. Levedura fazer isso, a fim de tornar a energia e obter material para
reproduo. Eles no se importam que voc est tentando fazer uma grande cerveja.
Que tipo de levedura que precisamos? Ah, isso onde fica interessante. Lotes de
levedura pode converter acar em lcool, mas voc vai querer usar uma estirpe que cria
os melhores sabores para a sua cerveja. s vezes a histria escolhe uma presso para voc.
Poderia ser uma cepa de levedura trazido para a cervejaria de cem anos atrs, ou pode ser
uma presso especificada em uma receita, para preciso estilstica. Se voc tem a
flexibilidade de escolher, voc pode fazer sua prpria investigao sobre a melhor linhagem
para usar ou obter aconselhamento de um fornecedor ou de cerveja colega.
Independentemente de qual linhagem escolhida, ele deve estar em boas condies de
sade e acamparam na quantidade correta para a fermentao ideal. Se voc comprar
fermento de um laboratrio, o laboratrio, muitas vezes garante um certo nvel de pureza e
pode fornecer quantidades necessrias para lanar diretamente em sua bebida. Se voc
est comprando uma menor quantidade pitchable que ou crescer o seu prprio fermento
de uma inclinao ou uma placa, uma ateno especial viabilidade, vitalidade e pureza da
cultura de levedura em todo o seu processo.
aucar
Levedura de alimentao em acares para criar lcool, mas as fontes de acar e a sua
complexidade ir resultar em condies de fermentao variadas. A maioria dos
fabricantes de cerveja sabem que o tipo de acares criados no mosto, presentes no
extracto de malte, ou adicionadas ao fermentador chaleira ou afectar o poder de
fermentao do mosto. Como regra geral, mais simples acares fermentveis so mais do
que de cadeia mais longa, acares mais complexos. Uma coisa que muitos cervejeiros no
sabem que o tipo de acares presentes tambm pode afetar sabores de fermentao. Por
exemplo, a fermentao do mosto alta da glicose produz cervejas com maior do que as
concentraes normais de steres (particularmente acetato de etilo, que tem gosto de
adesivo ou solvente e acetato de isoamilo, que tem gosto de banana). Por outro lado, erva
de alta no resultado de maltose em concentraes mais baixas destes steres. Quanto maior
a gravidade de partida, mais forte ser o efeito.
A fonte dos acares, tambm pode afectar a fermentao atravs de diferenas em
nutrientes e precursores de aromas. Enquanto a fonte mais comum de cerveja cevada
maltada, cervejeiros em todo o mundo usam muitos amidos diferentes. Por exemplo, o
sorgo bastante popular na frica, e est ganhando interesse na Amrica do Norte como
um ingrediente alternativa para os consumidores com alergias do trigo. Brewers tambm
utilizam trigo, milho, arroz e pr-processados acares e xaropes.
A adio de um amido de adjuvante tais como arroz ou milho ao mosto ainda resulta nos
mesmos tipos de acares (principalmente maltose), uma vez que as mesmas enzimas que
convertem o malte de cevada maltada vai converter os amidos adjuntas. A preocupao
quando se utiliza grandes pores de malte nonbarley que o amido adjuvante muitas
vezes no tem os mesmos nutrientes e precursores de aromas como malte de cevada,
afectando, assim, a fermentao e o sabor da cerveja.
Oxignio
O oxignio um factor crtico para o crescimento da levedura, e muitas vezes o factor
limitativo. Levedura uso de oxignio para a sntese de esteris. A utilizao de levedura
esteris para manter as paredes celulares flexvel, o que importante para o crescimento
celular e da sade global da clula. Antes da fermentao, gaseificar o mosto refrigerados
necessria para promover o crescimento do fermento. Consideramos 8-10 ppm de oxignio
ao nvel mnimo, com a quantidade de oxignio variando necessrio pela cepa de levedura e
outros fatores, incluindo a gravidade especfica. Cervejas com demandas de levedura mais
altas, como lagers e cervejas de alta gravidade, tendem a exigir mais oxignio.
Ao contrrio do que muitos cervejeiros acredito, possvel overoxygenate seu mosto ao
usar oxignio puro. Se voc fornecer um excesso de oxignio, muito crescimento pode
ocorrer, criando um excesso de fermentao subprodutos, resultando em menos de um
personagem de fermentao ideal.
nutrientes
As clulas de levedura precisa de 100 por cento de suas vitaminas e minerais essenciais
(nutrientes) para torn-lo atravs de uma fermentao bem nutrido e estar pronto para
trabalhar novamente outro dia, da mesma forma que os humanos.
Uma erva de todo-o malte uma excelente fonte de nitrognio, minerais e vitaminas. Ele
fornece a maior parte da necessidade vitaminas levedura para fermentao adequado, tal
como riboflavina, inositol, e biotina. A levedura tambm requerem vrios minerais
essenciais, tais como o fsforo, enxofre, cobre, ferro, zinco, potssio, clcio, e de sdio.
Como o fermento ocupam minerais e vitaminas do mosto, eles comeam a fabricar as
enzimas necessrias para o crescimento e fermentao. Podemos facilmente melhorar a
sade eo desempenho da levedura, assegurando eles tm os nveis adequados de
nutrientes. Se voc estiver reutilizando fermento, isso especialmente importante para a
continuao do fermento sade. Vrios levedura comercialmente disponvel suplementos
nutricionais tornar mais fcil para garantir o mosto contm os minerais adequados e
vitaminas para a sade de levedura.
fermentao Sistemas
sistemas de fermentao diferentes criar resultados muito diferentes. Tradicionalmente, os
fabricantes de cerveja utilizada, grandes recipientes de fermentao que foram abertas,
vantajosa por vrias razes. Uma delas que eles ofereceram cervejeiros a capacidade de
colher de fermento para muitas, muitas geraes, porque cervejeiros poderia colher o
fermento da superfcie. Estes navios so ainda bastante popular na Inglaterra. Muitos anos
atrs, fabricantes de cerveja fermentar cervejas com uma combinao de levedura nativa e
levedura de cerveja, reutilizados de lote para lote. Voc ainda pode encontrar esses tipos de
cervejas de hoje, embora a maioria das cervejas modernas so feitas com cepas individuais.
No entanto, estas grandes recipientes de fermentao abertas no esto sem o seu
prprio conjunto de questes. Eles podem ser difceis de limpar, e eles no so to sanitria
como moderna, fechada equipamento de fermentao. A maioria dos navios de cervejeiros
hoje uso de fermentao com fundo em forma de cone, que tm suas prprias vantagens e
desvantagens. Estes navios oferecem tecnologia no local limpo e excelente controle de
temperatura, mas fermentadores extremamente altas pode colocar presso adicional sobre
levedura. O aumento das presses parciais dos gases em soluo pode afectar o
desempenho de levedura e o sabor da cerveja. Homebrewers tm a vantagem de tempo e
liberdade econmica, para que eles possam utilizar tudo de fermentadores abertos para
verses menores de fermentadores cylindroconical comerciais.
Controle de temperatura
O controlo de temperatura essencial para a cerveja consistente e de alta qualidade. Isto
muito mais importante do que a diferena entre fermentadores cnicas inox e baldes de
plstico. Uma das coisas mais importantes a tirar deste livro a importncia da
temperatura de fermentao na qualidade da cerveja. Quando surge um problema, e no
um problema de contaminao, o primeiro lugar para procurar a temperatura da cerveja
ao longo de todas as fases de fermentao, a partir de lanamento atravs do
condicionamento final. temperaturas altas ou baixas afecta a produo de diversos
precursores de aroma anormais no incio da fermentao. A temperatura tambm afecta a
capacidade da levedura para reduzir muitos compostos de aroma anormais no final da
fermentao. Grandes oscilaes de temperatura no controladas produzir maus
resultados, especialmente quando os tamanhos dos lotes so pequenos. Quanto menor o
tamanho do lote, o mais rapidamente que afectada por alteraes na temperatura
ambiente.
Monitoramento de fermentao
equipamentos e mtodos de monitorizao podem variar muito em custo e complexidade.
A cerveja pode conseguir um lote com algo to simples como o poder de observao, um
termmetro, e alguns testes manuais bsicos. Maiores cervejarias comerciais, muitas vezes
investir em sistemas de teste de computador sofisticados.
As medidas mais importantes durante a fermentao (em ordem de prioridade) so a
temperatura, gravidade especfica, pH, oxignio e dixido de carbono. A coisa importante a
salientar a necessidade de medies regulares e monitorar o progresso de fermentao.
Voc deve manter registros, e parte de cada registro deve incluir notas detalhadas sobre a
quantidade de fermento que voc armou, sua origem, a sua viabilidade, a gravidade e pH da
cerveja, volume de cerveja, temperaturas e notas de progresso dirios. atravs da sua
ateno rigorosa fermentao que voc ser capaz de identificar problemas no incio,
talvez reduo de custos considervel no produto perdido.
2Biology, enzimas e steres
Biologia de levedura
Ns dissemos que este no um livro de biologia, mas precisamos entender um pouco
biologia para trabalhar melhor com este minsculo organismo. Taxonomistas classificam
levedura como parte do reino fungo. Outros reinos incluem bactrias, animais e plantas. A
maioria dos organismos do reino fungos, tais como moldes e cogumelos, so multicelulares,
mas levedura um organismo unicelular. Isto significa que a levedura no tem formas de
proteco que tm organismos multicelulares, tais como a pele. No entanto, estes
organismos unicelulares pequenos so surpreendentemente resistente, tornando-se em
nmero e replicao rpida que lhes falta em proteo.
Uma nica clula de levedura de cerca de 5 a 10 micra de tamanho e rodada para
ovide. Uma clula de levedura dez vezes maior do que as bactrias, mas ainda
demasiado pequenas para serem vistas a olho nu. Na verdade, preciso mais do que dez
clulas de levedura para igualar o dimetro de um cabelo humano. Um pequeno, colnia de
levedura visvel sobre uma placa de Petri contm, pelo menos, 1 milho de clulas.
Existem mais de 500 espcies de levedura, e dentro de cada espcie so milhares de
diferentes estirpes de levedura. Encontramos levedura em todo o mundo-vida no solo, em
insetos e crustceos, em animais e em plantas. Nos primeiros dias, os taxonomistas
classificam levedura como parte do reino vegetal. Olhe para qualquer pea de fruta madura
e voc pode estar certo de que a levedura tudo sobre ele. Levedura pode viajar em p, e
correntes de ar carregam fermento para novas reas. A levedura se contentar em
praticamente todas as superfcies, ansioso para encontrar mais acares para fermentar
para que eles possam multiplicar. Olhe para aquela luz do sol que entrava pela janela da
cervejaria. Voc v as partculas de poeira? H uma boa chance de que eles esto
carregando levedura nativa, e as bactrias, tambm, apenas espera de uma oportunidade
para aterrar em sua cerveja. A maioria dos fabricantes de cerveja no quer levedura nativa
em sua cerveja, e eles chamam estas leveduras selvagens. Mas o que dizer cepa de levedura
de um segundo de cerveja que acidentalmente acaba em nossa cerveja? Consideramos
qualquer levedura que no est no controle da cervejaria para ser uma levedura selvagem,
e vamos usar essa definio para o resto deste livro. No entanto, quando a maioria das
pessoas falam de leveduras selvagens eles so geralmente referindo-se a estirpes que no
so de levedura de cerveja.
Brewers, os produtores de vinho e os destiladores usar algumas espcies muito
especficas de levedura para seus produtos. genus do fabricante de cerveja
Saccharomyces, que derivado de latinizado grego e significa que existem duas principais
espcies de leveduras, ale de cerveja e lager "fungo acar.": S. cerevisiae (levedura ale) e S.
pastorianus (leveduras lager). Taxonomistas ir e voltar sobre se S. pastorianus um
membro da espcie S. cerevisiae ou sua prpria espcie. Atualmente eles consider-los
como separados, e isso concorda com o mundo da fabricao de cerveja. leveduras lager
passou por outros nomes no passado, S. uvarum e S. carlsbergensis. Enlogos mais
comumente usar tanto de S. cerevisiae ou S. bayanus, e interessante notar que o fermento
lager parece ter evoludo atravs da rara hibridao destas duas espcies (Casey, 1990).
gentica de S. cerevisiae
Um gene codifica uma protena, e a levedura tem cerca de 6000 genes. Sabemos disso
porque levedura foi o primeiro organismo eucaritico a ter seu genoma sequenciado, por
uma comunidade internacional de cientistas em 1996. Os genes so parte dos
cromossomos, e fermento tem dezesseis cromossomos diferentes. Em comparao, as
bactrias tm um cromossomo, e as clulas humanas tm vinte e trs. Normalmente, as
clulas de levedura e humanas so diplides, o que significa que eles contm duas cpias de
cada cromossoma; clulas haplides conter apenas uma nica cpia de cada cromossomo.
Fermento na natureza geralmente diplide e contm trinta e dois cromossomos, duas
cpias de cada um dos cromossomos dezesseis. forma de levedura esporos no selvagem,
que uma parte fundamental do seu ciclo de acasalamento. Este cruzamento entre clulas
de levedura selvagem leva a mudana evolucionria e bom para a diversidade de
levedura e de sade. No entanto, ns, como fabricantes de cerveja quer consistncia a
partir de levedura, no a diversidade e mudana gentica rpida. Felizmente para ns,
fabricantes de cerveja do passado trabalhou diligentemente, a seleo e reutilizao de
levedura, a ponto de levedura de cerveja acabou perdendo a capacidade de formar esporos
e perdeu a capacidade de acasalar. Perder a capacidade de acasalar seriamente ameaada
mudana evolutiva, e hoje cervejeiros pode contar com o fermento para ser mais
consistente lote para lote. Alm disso, a levedura de cerveja desenvolvido mais do que duas
cpias de cada gene, uma ocorrncia conhecida como poliploidia. Apesar de cpias de um
cromossoma no so necessariamente isognica (idnticos), a beleza de poliploidia que
uma mutao em um gene no incapacitar a clula; a levedura tem mltiplas cpias do gene
para tornar o produto de protena necessria. Poliploidia na levedura de cerveja
possivelmente o resultado de cervejeiros aplicando presso evolutiva por selecionar
apenas o fermento que comportou-se como o ltimo lote para reutilizao.
Yeast Genetics determinar se uma clula de levedura uma levedura de ale ou lager.
Gentica tambm determinam tudo o mais sobre uma clula. Embora saibamos a sequncia
de DNA (cido desoxirribonuclico) de S. cerevisiae, ns ainda no sabemos o que cada
gene faz. pequenas diferenas na expresso do gentipo e ambiente que determinam
fentipo da levedura. O fentipo todas as caractersticas da clula: o que os acares que
come, o que produz, o que nutricional e oxignio exige que ele tem. Os cientistas esto a
estudar formas de ver quais genes esto ativos em um determinado momento, mas at
agora, isso resultou em pouca ajuda para os cervejeiros. Brewers hoje ainda dependem de
as mesmas tcnicas como fabricantes de cerveja do passado: olhando para o que o
fermento faz durante a fermentao (fentipo), a fim de determinar a identidade, a
condio, o desempenho ea pureza da levedura.
Figura 2.2: Detalhe da membrana plasmtica da clula de levedura. Cortesia da ilustrao de Mariana Ruiz.
Vacolo.O vacolo uma estrutura ligada a membrana que armazena nutrientes. Esta
tambm onde a clula quebra as protenas. Levedura de cerveja tem grandes vacolos,
grandes o suficiente para ns para v-los por microscopia de luz. No entanto,
anormalmente grandes vacolos so um sinal de stress.
Ncleo.O ncleo armazena o ADN da clula. Uma membrana lipdica, semelhante
membrana do plasma, envolve o ncleo da clula. As clulas eucariticas, tais como
leveduras e clulas humanas, usar este organelo como o "centro nervoso." O DNA no ncleo
armazena informao para a clula. A clula usa ARNm para transferir a informao para
fora para o citoplasma para usar na sntese de protenas.
Retculo endoplasmtico.O retculo endoplasmtico uma rede de membranas, e ,
geralmente, onde a clula produz protenas, lipidos, e hidratos de carbono. H muito pouco
retculo endoplasmtico em levedura de cerveja.
Metabolismo
clulas de levedura individuais no crescem significativamente maior durante a sua vida.
No entanto, eles ficam um pouco maior medida que envelhecem. Geralmente, quando
falamos sobre o crescimento do fermento, estamos nos referindo ao processo de fazer
novas clulas de levedura. Quando dizemos que a levedura est crescendo, queremos dizer
a populao de leveduras est aumentando em nmero. A levedura pode derivar a energia
e nutrientes para o crescimento por meio de vrias vias diferentes, embora alguns so mais
fceis e mais benfico para a levedura do que outros.
Aps a inoculao em mosto, as clulas primeira utilizar suas reservas de glicognio e
qualquer oxignio disponvel para revitalizar as suas membranas celulares para a
permeabilidade ideal e transferncia de nutrientes e acares. As clulas absorvem
rapidamente oxignio e, em seguida, comear a pegar o acar e nutrientes do mosto.
Alguns destes compostos facilmente difundir atravs da membrana celular e alguns
requerem mecanismos de transporte de levedura. Porque o fermento utilizar alguns
acares mais facilmente do que outros, eles ocupam o acar em uma ordem especfica,
com acares simples primeiros: glicose, frutose, sacarose, maltose e, em seguida,
maltotriose. A maior parte do acar em um tpico mosto de malte tudo-maltose, com
menores quantidades de glicose e maltotriose. Levedura tomar glicose para dentro da
clula atravs de difuso facilitada, sem despender qualquer energia metablica. por isso
fcil para a levedura de utilizar a glicose que a presena de glicose suprime realmente a
capacidade da levedura para utilizar a maltose e a maltotriose. Todos levedura de cerveja
pode utilizar maltose, mas nem todos eles podem utilizar maltotriose na mesma medida. A
capacidade de utilizar diferentes acares, as propores relativas dos acares no mosto,
e os nutrientes presentes no mosto determinar muito do metabolismo da levedura. O
metabolismo da levedura por sua vez determina a taxa de fermentao e o grau de
atenuao.
Figura 2.3: acar, oxignio, nitrognio, minerais entrar na clula. Etanol, dixido de carbono, e o sabor / aroma compostos
vazar.
lcool
Uma das coisas mais importantes levedura fazer para bebidas fermentadas produzir
lcool. Se a indstria gosta de admitir ou no, sem lcool, e seus efeitos sobre os seres
humanos, cerveja e vinho seriam meros bebidas culturais regionais, como a malta
refrigerante. No mundo inteiro, as pessoas consomem bebidas alcolicas em grandes
quantidades porque contm lcool. A equao geral que descreve a converso de levedura
de acar em etanol :
H muitas etapas individuais Nesta equao, mas que pode dividir a equao em duas
partes principais: glicose para piruvato, em seguida, piruvato em etanol. A primeira parte
a quebra de uma molcula de glicose em duas molculas de piruvato nesta reaco:
A glicose de ADP + 2 + 2 + 2 + NAD Pi 2 Piruvato + 2 ATP + 2 NADH + 2 H +
Qual o caminho que voc prefere, gua ou etanol? Bem, fermento prefere no tornar o
etanol e eles s produzi-lo em condies especiais, tais como nveis elevados de acar ou
nveis muito baixos de oxignio. Levedura obter mais energia da converso de piruvato em
gua e CO2 na presena de oxignio. Para tornar a levedura produzir etanol precisamos de
fermentao anaerbia.
As principais clulas de levedura razo preferem respirao aerbica que ele permite-
lhes obter o mximo de energia a partir de uma molcula de glicose. Durante a fermentao
anaerbia, quando produzem etanol, levedura comea somente 8 por cento mais energia de
cada molcula de glicose. fcil ver por que uma cultura fermento capaz de brotar mais
clulas filhas com o oxignio disponvel. Ento, por que o fermento produzir etanol em
tudo, se to ineficaz? Porque ser capaz de produzir etanol d-lhes uma maneira de
sobreviver em mais um meio ambiente: um ambiente anaerbico.
Levedura invocar o dinucletido de nicotinamida de co-enzima adenina (NAD + e NADH)
para reaces de oxidao-reduo (onde nicotinamida-adenina-dinucletido aceita ou doa
electres) e como um substrato da enzima. utilizao de levedura NAD + na repartio
inicial de glicose. Se houver oxignio, o piruvato a partir deste passo vai para as
mitocndrias, onde entra no ciclo de Krebs. O ciclo de Krebs produz um composto rico em
energia chamada adenosina trifosfato (ATP). O ATP importante para a clula, pois fornece
energia clula para a sntese de protenas e a replicao do ADN, que crtico para o
crescimento da populao. Se a clula , sem oxignio, o piruvato a partir de passo que no
atravessa o ciclo de Krebs. Isto leva a uma acumulao de piruvato, nenhuma energia (sob a
forma de ATP), e no mais de NAD +. Na verdade, muitos passos compem esta sequncia,
mas a linha de fundo que, sem NAD + voc no pode chegar criao de piruvato e ATP. A
levedura precisa "ficar NAD + back", quando no h oxignio, e eles fazem isso da seguinte
maneira.
floculao
Floculao a capacidade quase mgica de levedura para se aglutinarem. um importante
e desejvel caracterstica nica de levedura de cerveja, pois ajuda-os a subir para o topo ou
afundar at o fundo do fermentador. Perto do final da fermentao, as clulas individuais
agregar-se em aglomerados de milhares de clulas. Estirpes diferentes tm diferentes
caractersticas de floculao. Algumas estirpes flocular anterior e tendem a no atenuam o
mximo, enquanto que outros no floculam to prontamente e tendem a atenuar mais.
Floculantes muito cedo tende a resultar em uma cerveja que underattenuated e doce. No
entanto, quando a levedura falhar para flocular completamente, isso resulta numa cerveja
que turva com um sabor a levedura.
A maioria das estirpes de levedura selvagem no flocular bem e permanecer em
suspenso durante perodos prolongados. Na natureza, a maioria das clulas de levedura
no quer cair fora da suspenso, porque em suspenso tm nutrientes e acar disponvel
para eles. Todos levedura acabar por cair para fora de um lquido com a ajuda da
gravidade, mas isso pode levar meses, ea maioria dos fabricantes de cerveja no tem esse
tipo de tempo. Na verdade, foi presso seletiva por cervejeiros ao longo de muitos sculos
que melhoraram floculao na levedura de cerveja. Atravs da produo de levedura a
partir de qualquer parte inferior ou superior do fermentador para reinoculao, cervejeiros
deixado para trs as clulas de levedura que no floculam bem. A levedura deixado para
trs na cerveja no teve a chance de se replicar no prximo lote, retirando-os da populao.
As linhagens de leveduras floculantes que usamos hoje so descendentes desse processo de
presso seletiva.
Os cientistas estudaram a bioqumica da floculao por muitos anos, e at hoje, o
mecanismo exato ainda debatido. composio da parede celular um factor chave na
capacidade de clulas adjacentes adiram uns aos outros. A levedura tem uma parede
celular de espessura composta de protenas e polissacridos com uma carga de superfcie
negativa lquida devido aos fosfatos na parede celular. A extenso da carga negativa
depende da estirpe de levedura, fase de crescimento, a disponibilidade de oxignio, a fome,
nmero de gerao, desidratao, e da idade da clula (Smart, 2000). As clulas de levedura
tambm so hidrofbicos, devido exposio de pptidos hidrofbicos (Hazen e Hazen,
1993). O grau de hidrofobicidade dependente da estirpe de levedura, fase de crescimento,
capacidade para formar cadeias, inanio, nmero de gerao, incio a floculao, e a
formao de fibrila (Smart, 2000). paredes das clulas de levedura tambm tem
manoprotenas, protenas com um grande nmero de grupos de manose ligados, para
ajudar a regular a forma da clula, porosidade, e das interaces clula-clula, incluindo
aqueles envolvidos em floculao.
O principal determinante da floculao a prpria cepa de levedura. Cada estirpe de
levedura tem a sua prpria sequncia de ADN original, o qual determina o conjunto exacto
de protenas exibidas na superfcie da clula. Estas diferenas mnimas na composio da
parede celular desempenham um papel fundamental no comportamento floculao e
determinar o grau de floculao para uma estirpe. Factores que influenciam o grau de
floculao incluem a gravidade original do mosto, a temperatura de fermentao, a taxa de
lanamento, e o teor inicial de oxignio. Tenha em mente qualquer coisa que afete a taxa de
sade e crescimento da levedura afeta floculao.
Figura 2.8: As diferenas de classificao de floculao.
Brewers classificar levedura como alta, mdia ou baixa floculadores (Figura 2.8). cepas
Ale abrangem cada categoria, enquanto cepas de lager so floculadores
predominantemente mdios. Por exemplo, as estirpes comercializados como cepas ale
Ingls / Londres so muitas vezes elevados floculadores. Sculos de corte superior na Gr-
Bretanha tiver selecionado para a levedura altamente floculantes. Curiosamente, apesar de
sculos de cultivo superior fez essas linhagens floculantes assim, nos ltimos tempos
cervejeiros ter colocado presso seletiva sobre eles para torn-los croppers melhor
inferiores. Hoje eles so to flocculent, mas muitas vezes eles tambm so excelentes
croppers inferior.
Essas leveduras comercializados como California / cepas ale americanos so na maioria
das vezes floculadores mdias, e as tenses Hefeweizen so bons exemplos de baixos
floculadores. Enquanto alta floculao resultados rapidamente na cerveja clara, a filtragem
pode esclarecer uma cerveja ainda mais rapidamente, assim que um fabricante de cerveja
disposto a filtrar pode usar uma estirpe com quase qualquer nvel de floculao.
A alta floculador comea a aglutinar-se em trs a cinco dias. Quando ela cai para o fundo
do fermentador, forma-se um slido, o bolo de levedura compacto. Na verdade, algumas
estirpes so to flocculent que eles podem formar tampes apertados que bloqueiam
aberturas e entupir as vlvulas. Homebrewers que trabalham com pequenos
fermentadores s vezes agitar o bolo de levedura para manter a atividade de fermentao,
mas, mesmo assim, o bolo de levedura nica quebra em pedaos grandes. Produzir uma
cerveja totalmente atenuada com altos floculadores pode exigir ateno especial, como
despertando o fermento de volta para a cerveja. Mesmo com essas medidas, estirpes
altamente floculantes geralmente resultam em menor atenuao e aumento dos nveis de
diacetil e steres.
floculadores mdias tendem a produzir cervejas "mais limpos", com nveis mais baixos
de diacetil e steres. Uma vez que as clulas permanecem na suspenso mais longa, que
atenuam a cerveja mais e reduzir o diacetil e outros compostos de fermentao para um
grau maior. Em uma cervejaria comercial, eles so um pouco mais difcil do que trabalhar
com altas floculadores, porque muitas vezes requerem filtragem para uma rpida
reviravolta. Claro, a maioria dos fabricantes no filtrar, e com o tempo o suficiente
floculadores mdio vai resolver por conta prpria; eles simplesmente levar mais tempo do
que o fermento altamente floculantes. floculadores mdias, e sua tendncia em direo
caractersticas de fermentao limpas, torn-los adequados para cervejas altamente pulou
como muitas cervejas de estilo americano. Seus sabores limpos permitir que o aroma de
lpulo e sabor para passar.
Brewers raramente usam baixas floculadores, porque no resolver fora, criando
problemas de embaamento e filtragem. No entanto, alguns estilos de cerveja deve ter
levedura em suspenso. Por exemplo, os estilos Hefeweizen e Witbier belga alemo Ambos
exigem tenses baixas levedura floculante para criar a aparncia turva desejado. Algumas
cervejarias ir filtrar a sua hefeweizen e, em seguida, adicionar novamente leveduras lager
em tempo de embalagem. Porque estirpes lager so menos flocculent e tendem a ficar em
suspenso mais longa, eles so mais capazes de limpar uma cerveja durante um processo
de fermentao e lagering estendida. H algumas cepas de lager com muito p, que
funcionam bem para fornecer essa aparncia levedura nublado.
Um fator importante na floculao o clcio. A levedura exigem certos nveis mnimos
de clcio presente para floculao de ocorrer. Wort tem geralmente bastante clcio, eo
fabricante de cerveja no precisa adicionar mais. Se voc estiver trabalhando com gua
muito macia, tenha em mente a exigncia de clcio. Na maioria dos casos, 50 ppm do clcio
suficiente para atender as necessidades da levedura.
enzimas
Levedura no o nico ingrediente da cerveja que as cervejeiras deixar de apreciar
totalmente enzimas so um segundo prximo. Considere o seguinte: sem enzimas, no
haveria cerveja. Existem enzimas envolvidas em todas as fases do processo de fabricao
de cerveja: malte, macerao e fermentao. Na sua essncia, fabricao de cerveja um
processo enzimtico. Quanto mais um fabricante de cerveja sabe sobre enzimas, mais ele
pode solucionar problemas.
As enzimas so uma classe especial de protenas que aceleram reaes qumicas. Eles
so essenciais vida e esto presentes em todos os seres vivos. Uma enzima uma protena
criado por organismos vivos (ou sinteticamente) que actua como um catalisador em
reaces qumicas, iniciar ou acelerar a taxa a que uma reaco prossegue, sem alterar-se
no processo.
Em meados do sculo XIX, os qumicos que estudam o processo de fermentao provou a
existncia de enzimas. Em 1897 Eduard Buchner foi o primeiro a preparar um extracto de
clulas que ainda exibiu uma actividade cataltica. Ele mostrou que o licor filtrado, livre de
clulas a partir de clulas de levedura esmagadas poderiam converter o acar em dixido
de carbono. Buchner ganhou o Prmio Nobel de 1907 em Qumica por seu trabalho. As
enzimas foram por muitos anos chamados "fermentos", um termo derivado da palavra
latina para levedura. Em 1878, os investigadores introduziram a "enzima", nome das
palavras gregas que significam "em levedura."
Louis Pasteur fez as mais famosas descobertas relacionadas com a fabricao de cerveja.
Embora no seja creditado com a descoberta do papel das enzimas, ele provou que a
levedura foram responsveis pela converso de acar do mosto em lcool. Os qumicos no
momento inflexivelmente declarou que a levedura organismo vivo no teve nenhum papel
na transformao do acar. Eles insistiram que o processo era estritamente qumico, no
biolgica. Eles assumiram que era algo no mosto, tais como oxignio, que catalisou a
transformao. Os qumicos foram parcialmente correcta, tal como levedura contm
enzimas para a fermentao, que actuam como o catalisador para muitas partes da
converso de acar em lcool. Do ponto de vista da fermentao, as clulas de levedura
so apenas sacos de enzimas.
Enzimas so protenas, e protenas so feitas de aminocidos, um dos principais
componentes biolgicos em sistemas vivos. Centenas de aminocidos formam uma nica
molcula de protena. As protenas so cerca de dez vezes o tamanho das molculas de
acar, e cerca de 1000 vezes menor do que as clulas de levedura. Nem todas as enzimas
so do mesmo tamanho; eles podem variar de cerca de cinquenta aminocidos de 500.000
e muitas vezes so maiores do que os substratos eles agem sobre. A parte da enzima que
mais importante o local activo na enzima. O stio activo uma regio da enzima com
aminocidos na orientao correcta para facilitar uma reaco qumica dada sobre um
substrato muito semelhante a uma chave e fechadura. Cada enzima pode catalisar uma
reaco qumica nica, mas que pode catalizar a reaco em ambas as direces. A direo
depende das condies e do substrato disponvel. Vejamos a enzima lcool desidrogenase e
a reao de acetaldedo a etanol.
Enzimas no malte
A maioria dos fabricantes de cerveja esto familiarizados com a converso do amido em
acar atravs de reaces enzimticas durante o processo de macerao, mas tambm
enzimas desempenham um papel importante durante o processo de maltagem. degradao
do amido durante a maltagem crtica para a produo de malte de alta qualidade. O
embrio da cevada (gro) precisa de acar para crescer. Enzimas no embrio em
crescimento quebrar o amido e protenas em fraces menores, solvel em preparao
para o crescimento do embrio. Trs tipos de enzimas so responsveis por esta ao:
Enzimas em Mashing
No apenas -amilase e -amilase que pode afetar a fermentao; mosto de cerveja inclui
a vrios outros tipos de enzimas activas, incluindo beta-glucanases, proteases e esterases.
Por exemplo, realizando um resto de cido ferlico em torno de 110 F (43 C), pode
aumentar o nvel de cido ferlico no mosto, que algumas estirpes de levedura que podem
ser transformadas para guaiacol 4-vinilo, um componente de sabor e aroma caracterstico
de weizen alemo.
descansos protena pode ter um impacto sobre a fermentao, tambm, porque podem
aumentar os nveis de aminocidos no mosto. Isto no necessrio quando se utiliza malte
bem modificado, mas maltes undermodified ou seis filas podem exigir um resto de
protena.
A nica coisa que a maioria dos fabricantes de cerveja entender que o controle da
temperatura da massa para efetuar a atividade da enzima afeta o equilbrio de acares
mais simples em comparao com mais acares complexos. Wort com uma percentagem
mais elevada de acares complexos (dextrina) menos fermentvel. Enquanto algumas
estirpes podem ter mais sucesso com maltotriose, o efeito relativo. Como regra geral,
quanto maior a temperatura da massa, a menos fermentvel do mosto.
Quando um fabricante de cerveja ferve mosto, o calor desnatura a maioria das enzimas
presentes, e muitos precipitar para fora da soluo como parte de ambos a ruptura quente
e fria.
Enzimas na fermentao
Agora a parte do dinheiro comea. No haveria um grande mercado para a cerveja se de
levedura no criar lcool durante a fermentao. A converso de acar em lcool pode ser
simplesmente definido como:
steres
steres desempenhar um grande papel no carter de cerveja, especialmente em ales. Um
ster um composto voltil formado a partir de um cido orgnico e um lcool, e steres
que proporcionam os aromas e sabores frutados que encontra na cerveja. Mesmo os "mais
limpa de vinhos" cervejas contm steres, com algumas cervejas tendo como muitos como
cinquenta (Meilgaard, 1975). Sem steres, uma cerveja parece bastante sem graa.
Podemos medir steres por cromatografia gasosa, e os perfis de ster so uma boa maneira
de diferenciar cervejas. produtoras de ster varia de acordo com as condies de
fermentao e a estirpe de levedura. Exemplos de steres so comuns acetato de etilo
(solvente), caproato de etilo (ma), e acetato de isoamilo (banana).
O processo de combinar um cido e um lcool para formar um ster leva algum tempo,
uma vez que a levedura necessita para criar os lcoois em primeiro lugar. steres de ter
mais de um impacto sabor do que os cidos e lcool de forma independente (sabores
Bamforth, Cerveja: steres, 2001). As enzimas acetiltransferase lcool AATase I e formao
de ster II catalyse. Estas enzimas combinam um lcool com um cido activado. Em cerveja,
o cido activado mais abundante a acetil-CoA. Pr-fermentao, quando a cervejaria
adiciona oxignio, os esteris de levedura produzem em preparao para brotamento
novas clulas. Esta produo de esterol tira de acetil-CoA a partir de ster de produo, o
que resulta em nveis mais baixos de ster na cerveja (Bamforth, sabores de cerveja:
steres). Esta uma explicao do efeito de oxignio, em que os nveis mais elevados de
arejamento resultar em nveis inferiores de ster. Outra explicao pode ser que reprime
oxignio directamente a expresso dos genes que codificam AATase (Fugii, 1997). Muitos
outros fatores afetam a produo de steres, mas fatores que aumentam o crescimento do
fermento e tirar-acetil-CoA, muitas vezes minimizar a sntese de steres. Trs factores
principais controlam a produo de ster de: a concentrao de acetil-CoA, a concentrao
de lcool de fusel, e a actividade total de certas enzimas.
fusel lcoois
Podemos usar cromatografia gasosa para medir lcoois superiores, ao mesmo tempo que
medimos steres. A cerveja pode conter qualquer combinao de aproximadamente
quarenta lcoois fusel (Meilgaard, 1975). lcoois superiores tais como n-propanol, lcool
isoamlico, isobutanol e sabor semelhantes ao etanol, embora possam adicionar o
aquecimento, a quente, ou sabores solvente para cerveja, dependendo do tipo e da
concentrao. No h estilos de cerveja, onde quente e solventy so desejadas
caractersticas. No entanto, muitas cervejas bom-gosto contm lcoois fusel em
quantidades iguais ou um pouco acima dos limiares de sabor, por isso so importantes
componentes de sabor derivado de levedura de cerveja. Dos lcoois fusel, a cerveja contm
principalmente amilo lcoois, tais como o lcool isoamlico. No vinho, lcool isoamlico
pode representar mais do que 50 por cento de todos os lcoois superiores (Zoecklein, et al.,
1999). As pessoas geralmente atribuem dores de cabea para os lcoois fusel em bebidas
alcolicas. Altos nveis de lcoois superiores quentes em uma cerveja-resistncia mdia so
uma verdadeira falha. Mesmo em cervejas maiores, eles devem ser, no mximo, uma nota
de fundo. No h desculpa para a produo de cerveja que tem gosto de solvente de tinta.
Durante a fase de latncia da fermentao, a levedura comea a formar fusel lcoois,
quer a partir de piruvato e acetil-CoA, durante a sntese de aminocidos ou de captao de
aminocidos (azoto). A formao dos lcoois superiores envolve a reoxidao de NADH a
NAD + na etapa final, e alguns cientistas acreditam que os lcoois de levedura produzem
fusel para fazer NAD + novamente disponvel para a gliclise (Kruger, 1998).
cepas de leveduras variar na produo de lcool fusel, com cepas ale geralmente
produzindo concentraes de lcool fusel mais elevadas do que as estirpes lager.
Pesquisadores muitas vezes atribuem isso ao temperatura de fermentao mais elevado de
cervejas. verdade que as concentraes de lcool de fusel aumentam com a temperatura
de fermentao; No entanto, outras condies de fermentao ter um efeito sobre a
produo de lcool, bem fusel. Por exemplo, com mosto ou muito pouco ou demasiado
azoto tambm pode resultar na produo de lcoois superiores. Em geral, as condies de
fermentao que promovem o crescimento celular, tais como a temperatura, arejamento, e
azoto, resultar em nveis mais elevados de lcoois fusel. Quando existe mais do substrato
lcool fusel, h uma maior oportunidade para a formao de ster com qualquer acetil-CoA
presente. Fazendo uma cerveja de ster inferior um ato de equilbrio de controlar os
fatores que ajudam a prevenir a formao de steres, mas tambm aumentar a produo de
lcool fusel.
diacetil
Mesmo que muitos estilos de cerveja clssicos permitir a baixos nveis de diacetil, e alguns
consumidores acham agradvel, muitos fabricantes de cerveja consideram diacetil uma
falha em qualquer quantidade. Diacetil, mesmo em nveis baixos, pode contribuir esperteza
ou escorregadio para o paladar de uma cerveja. Em quantidades maiores, diacetil d
cerveja amanteigada um ou butterscotchlike aroma e sabor. Diacetil um composto
orgnico pequeno que pertence ao grupo cetona qumica. Outra cetona comumente
encontrado em cerveja 2,3-pentanodiona. Ele to semelhante ao diacetil que, quando
um laboratrio mede nvel de diacetil uma cerveja ele relata um nvel vicinal dicetona
(VDK) em vez disso, o que inclui tanto diacetil e 2,3-pentanodiona. O limiar de sabor do
diacetil de 0,1 ppm na cerveja "light". cerveja caseira e fabricado-craft muitas vezes
podem ter nveis de 0,5 a superior a 1,0 ppm.
Uma razo muitos fabricantes de cerveja no gosta da presena de diacetil em sua
cerveja porque um indicador de uma possvel fermentao ou contaminao problema.
No entanto, h excepes onde diacetil uma caracterstica pretendida para a cerveja. Isso
mais provvel devido cepa de levedura ea fermentao perfil das prticas de cervejaria.
Algumas cepas de leveduras, particularmente altamente floculantes estirpes ale Ingls, so
produtores de diacetil pesados. Falhando o incio de temperatura de fermentao, o que
mantm a levedura de reduo de diacetilo, outra forma de cerveja termina-se com um
nvel detectvel de diacetil. Basta lembrar, quanto maior a permanncia de levedura em
suspenso, mais tempo eles tm de reduzir muitos compostos de fermentao
intermedirios. Felizmente, a levedura vai reabsorver diacetil e reduzi-la a acetona para
regenerar NAD.
A via de diacetilo na cerveja relativamente simples. Valina um dos aminocidos de
levedura produzem durante a fase lag e exponencial. Um composto intermedirio na
produo de valina acetolactato. Nem todos os produtos de levedura acetolactato torna-
se valina, como algumas fugas para fora da clula e na cerveja. A acetolactato que escoa a
partir da clula para a cerveja oxida quimicamente em diacetilo. Embora isto seja verdade
para todas as estirpes de levedura, diferentes estirpes ir produzir diferentes nveis de
diacetil sob as mesmas condies.
cidos orgnicos
Durante a fermentao, a levedura tambm produzir diferentes nveis de cidos orgnicos
tais como cido actico, lctico, butrico, caprico e. Na maioria das fermentaes, as
concentraes produzidos esto abaixo do limiar de sabor, que geralmente uma coisa
boa. Estes cidos tm sabores e aromas de vinagre, vmito, e os animais domsticos. No
entanto, estes cidos so necessrias, uma vez que desempenham um papel fundamental
na formao de ster.
compostos de enxofre
Quem peidou? Muitos fabricantes de cerveja lager pela primeira vez pode fazer essa
pergunta. Lager cerveja produz mais compostos de enxofre do que cerveja ale. A
temperatura mais baixa da fabricao de cerveja lager um fator chave para nveis mais
elevados de enxofre (Bamforth, cerveja de sabor: substncias de enxofre, 2001). Levedura
produzem compostos de enxofre em grandes quantidades durante a fermentao, mas
estes compostos geralmente so volteis suficiente para que a atividade de fermentao
forte leva-os a partir da soluo, juntamente com o CO2, reduzindo os nveis de enxofre no
momento em que voc (ou um cliente) beber a cerveja. As temperaturas mais baixas de
fermentao lager geralmente resultam na fermentao menos vigorosos (menos
movimento fsico do mosto) e menos a evoluo de gases, devido maior solubilidade do
gs a essas temperaturas. Portanto, cervejas lager tendem a reter quantidades detectveis
de aroma de enxofre e sabor, embora seja incomum encontrar enxofre na maioria das
cervejas.
Os compostos de enxofre normalmente encontrados na cerveja so sulfureto de dimetilo
(DMS), dixido de enxofre, sulfureto de hidrognio, mercaptanos e. Alguns destes
compostos de enxofre provenientes de malte, enquanto outros vm de levedura ou uma
combinao de ambos. Por exemplo, sulfxido de dimetilo (DMSO) est presente no mosto
em nveis variveis, dependendo da fonte de malte. O nvel deste composto DMS oxidada
no afectada pela fervura como DMS e o seu precursor, S-metilmetionina (SMM).
Infelizmente, a levedura tem a capacidade de reduzir DMSO volta para DMS durante a
fermentao, o aumento do nvel daqueles milho enlatado e tipos de couve cozida de
aromas e sabores na cerveja.
Levedura produzir dixido de enxofre, que no s sabores da cerveja, mas confere-lhe
propriedades antioxidantes. As pessoas muitas vezes descrever o aroma do dixido de
enxofre como semelhante a um fsforo queimado. O dixido de enxofre reduz facilmente
para outro composto de enxofre, sulfureto de hidrognio, que o composto com um cheiro
de ovo podre. Felizmente, o CO2 libertado a partir da fermentao realiza a maior parte do
sulfureto de hidrognio para fora da cerveja. A chave para a reduo destes compostos de
enxofre na cerveja ter uma fermentao saudvel, activo.
compostos fenlicos
Os compostos fenlicos, que so anis de carbono aromticos hidroxilados, pode vir a
partir de ingredientes e da fermentao. anti-spticos base de fenol cont-los, o que por
isso que muitas vezes as pessoas descrevem compostos fenlicos como degustao
medicinal. Os compostos fenlicos so tambm descritos como plstico, Band-Aid, smoky e
picante. Os compostos fenlicos so menos volteis do que os lcoois superiores, o que
significa que eles ficam na cerveja durante todo o envelhecimento. Uma vez que os
compostos fenlicos esto presentes em um nvel detectvel, voc provavelmente sempre
prov-los.
Na maioria dos estilos de cerveja, sabores fenlicos so uma falha, embora haja algumas
excees bvias. hefeweizen Bavarian deve ter cravo, Rauchbier deve ter fumaa, e algumas
cervejas belgas tm outros personagens fenlicos, mas quando fenis transformar-se de
forma no intencional, pode ser um desastre.
Figura 2.9: O fenol, um anel aromtico hidroxilado.
A principal composto fenlico mais produtos levedura guaiacol 4-vinil (4 VG). Malte e
lpulo cido ferlico oferta, e fermento produzir 4 VG da descarboxilao do cido ferlico
pela enzima descarboxilase do cido ferlico. (A descarboxilao a reduo qumica de
um composto com a evoluo de CO2.) Aqueles de levedura que produzem fenis tem uma
fenlico intacta off-flavor gene (POF), que necessria para a codificao de descarboxilase
do cido ferlico.
cepas de leveduras mais de cerveja tm uma mutao natural no gene POF impedindo-os
de produzir 4 VG. De facto, a produo no intencional de um carcter fenlico uma boa
indicao de que a levedura selvagem contaminaram a cerveja. Em circunstncias raras,
possvel que uma mutao em levedura de cerveja para fazer com que a levedura para
produzir um carcter fenlico novamente.
Voc pode perguntar, o que acontece com as cepas de levedura para fazer hefeweizen
Bavarian-estilo? Estes so bons exemplos de estirpes de leveduras selvagens, uma vez que
as cervejeiras purificada e cultivadas ao longo do tempo, sem selecionar contra compostos
fenlicos. O gene POF permanece intacta nestas estirpes e que produzem os fenis
caractersticos para o modelo.
Brettanomyces outro gnero de levedura que muitos fabricantes de cerveja e os
tomadores de vinho consideram um contaminante, enquanto alguns vem como um gnero
nico capaz de produzir sabores e aromas que no so possveis com a levedura de cerveja
mdia. Brettanomyces naturalmente abundante no ambiente, muitas vezes encontrados
vivendo em cascas de frutas. Ele no se importa de condies adversas de fermentao, e
o lcool tolerante. Pode produzir sabores e aromas que lembram de um curral, cobertor de
cavalo, suor, e uma grande variedade de outros compostos aromticos, incluindo 4 VG. A
sua presena na cerveja facilmente detectada e mesmo desejado em alguns estilos de
cerveja, como lambic belga, Flandres vermelho, e muitas criaes de cerveja mais recente
de artesanato.
A fermentao no a nica fonte de compostos fenlicos. s vezes, um fabricante de
cerveja adiciona-los intencionalmente, usando maltes defumados, por exemplo. No vinho,
carter fenlico vem do fermento, mas tambm pode vir de contas de carvalho e do fruto
utilizado. Whiskey tambm recebe fenis a partir de ingredientes, leveduras e
envelhecimento barril. Cerveja produzida com certas frutas e envelhecimento em madeira
pode pegar compostos fenlicos, tambm.
3Como escolher o fermento direito
Quando confrontados com a oportunidade de criar uma nova cerveja, muitos cervejeiros
ficar com o que eles sabem. A cepa de levedura que eles tm usado para inmeros lotes o
que eles vo usar para esta nova criao tambm. Em muitos casos, utilizando a estirpe
casa a nica opo. Isso compreensvel, mas quando um fabricante de cerveja tem a
opo de escolher qualquer estirpe ele ou ela quer, uma vergonha para ficar com apenas
um. Muitas vezes no que estas cervejeiras falta criatividade ou um interesse em explorar
novas cepas, mas sim que eles no tem certeza como selecionar os melhores candidatos
para produzir o caractere desejado.
Critrio de seleo
Ao tentar selecionar uma nova cepa para a fermentao, vale a pena saber suas prioridades.
como construir uma casa; voc sabe que precisa de fixao, mas o tipo de fecho depende
do tipo de casa que voc est construindo. Townhouse, casa de bonecas, dependncia,
todos eles tm requisitos de fixao semelhantes, mas diferentes. O que que voc est
tentando construir? importante comear com um conceito da cerveja voc est tentando
criar. seco e hoppy? Doce e maltado? Limpe ou estery? Alta em lcool ou baixa? Uma vez
que voc tem uma sensao de que voc est criando, ento voc pode comear a encontrar
cepas que podem funcionar. Certamente, possvel e at provvel que voc no vai
encontrar uma nica estirpe que atende todas as suas necessidades, mas no se esquea de
que tambm possvel utilizar mltiplas estirpes de uma cerveja. No mnimo, sempre
considerar os seguintes critrios ao selecionar uma nova cepa de levedura:
Atenuao
perfil de sabor
Floculao
confiabilidade do fornecimento
Temperatura de funcionamento
cepas de leveduras
The Fix George tarde desenvolveu um sistema exclusivo para categorizar levedura de
cerveja que voc pode achar til. Fix dividida cepas de leveduras em cinco categorias, em
uma tentativa de organiz-los em termos de caractersticas de sabor. Ele dividiu leveduras
ale em Limpe / Neutro, maltado / Ester produo e especializada. Ele dividiu leveduras
lager em seco / Crisp e Full / Malte (Fix e Fix, 1997). O ncleo interessante e muito til do
conceito de Fix que ele no se concentra sobre a regio e estilo para o agrupamento, mas
sim no carter de fermentao. Isto torna mais fcil para pensar fora da caixa.
Aproximando-se linhagens de leveduras, desta forma liberta o fabricante de cerveja para
fazer algo diferente, como o uso de levedura cervejeira europeia num pale ale-americano,
em vez de as mesmas velhas estirpes americanas quase todo mundo usa. cepas de
leveduras no conhecem fronteiras de estilo, eo fabricante de cerveja que reconhece isso
tem uma escolha muito maior de cepas para abastecer sua criatividade.
Ns gostamos abordagem de Fix e vamos cepas do grupo de caracteres para nossa
discusso:
cerveja
Limpe
frutado
hbrido
fenlica
Excntrica
lager
seco
Cheio
lager Cepas
Alm da capacidade para fermentar a melibiose (pp. 254-256), Quais so as diferenas
entre ale e leveduras lager? Brewers s vezes se referem ao fermento lager como "baixa
fermentao", porque durante a fermentao a maioria das cepas de lager no subir ao
topo ou subir apenas minimamente. Claro, sempre h excees, e algumas verdadeiras
linhagens lager no subir ao topo como o fermento ale. Mesmo que a maioria das cepas de
lager so fermentadores de fundo, eles no so altos floculadores. Muitos fabricantes
muitas vezes pensam erroneamente de floculao como o processo de deixar cair levedura
para o fundo do fermentador, e de uma estirpe que no subam para o topo durante a
fermentao deve ser uma estirpe altamente floculento. Como mencionado anteriormente,
a floculao a agregao de levedura em aglomerados de levedura, no o processo de
deixar cair para o fundo. O floculante mais de uma estirpe, mais ela tende a subir em bolhas
de CO2 durante a fermentao. Porque a maioria das cepas de lager no so muito
flocculent, eles no tendem a subir ao topo. Em vez disso, eles permanecem em suspenso
durante perodos mais longos do que a maioria das estirpes de ale, permitindo-lhes reduzir
mais dos subprodutos formados durante a fermentao.
Lager trabalho levedura mais lentamente e produzem menos steres e lcoois
superiores a temperaturas de fermentao mais frios, geralmente de 50 a 55 F (10 a 13
C), mas a fermentao lenta e temperaturas frescas tambm manter mais de enxofre em
soluo e tornar mais difcil para o levedura para reabsorver diacetil. Embora todas as
cepas geralmente produzem menos steres a temperaturas mais baixas, alguns fabricantes
de cerveja pode perguntar por que a maioria das cepas de lager produzir menos steres do
que a maioria das cepas de ale mesma temperatura. Uma razo que a excreo de
steres depende da membrana celular, e a maioria das estirpes de lager ir reter mais
steres no interior da clula (Mussche, 2008).
cepas Lager se dividem em dois grupos bsicos: aqueles que produzem um mais seco,
mais limpo, batata frita, refrescante qualidade e aqueles que, embora ainda limpo e
lagerlike, produzir um sabor maltado, arredondado, e complexo. Selecione uma das
estirpes batata frita, seca, quando se formando mais algumas cervejas de estilo americano
alemo, escandinavo e. Em comparao, usar as cepas maltado para estilos de Helles
Munique para Munique Dunkel e todos os outros estilos lager malte. Alm de um carter de
malte aumentou, estas estirpes, muitas vezes produzir uma cerveja com mais de enxofre e
um ligeiro sabor frutado. Os fabricantes muitas vezes rotular essas leveduras lager como
alemo ou Munique lager, ea descrio enfatiza o carter de malte.
Por exemplo, doze cervejas por ms seria igual a quatro possveis tenses. Isto d a
cervejaria de nove a dez dias a partir do incio da fermentao para quando ele ou ela
precisa de fermento para reinoculao. Normalmente fermentaes ale esto completas em
cinco dias, com quatro a cinco dias para levedura para resolver, a cerveja a amadurecer, eo
fabricante de cerveja para recolher o fermento. estirpes altamente floculantes, como o
Ingls ale, estar pronto mais rapidamente, enquanto cepas de lager vai demorar mais
tempo. Veja este nmero de estirpes como um limite superior, e s cervejeiros experientes
devem tentar manter o controle de quatro estirpes, enquanto formando trs dias por
semana. Voc no vai usar todas as estirpes da mesma forma, porque suas cervejas mais
populares, como pale ale ou mbar, vai vender mais rpido.
O custo pode ser outra preocupao para alguns fabricantes de cerveja que esto
considerando usar mais de uma estirpe, mas no muito diferente do que usando uma
nica estirpe, uma vez que voc pode reutilizar cada um para cinco a dez geraes, assim
como no uso de uma nica cepa. Desta forma, a cervejaria est recebendo os benefcios do
aumento das taxas de pitching e se espalha o custo de fermento ao longo de muitos lotes.
Considere-se tambm que ter uma maior variedade de cervejas nicas pode resultar na
captao de mais clientes e mais vendas em toda a sua linha de produtos. Se esse for o
resultado, vrias cepas seria bem a pena o custo e esforo.
A contaminao cruzada outra preocupao comum de fabricantes de cerveja que
nunca usaram vrias cepas. H alguma verdade a esta preocupao, porque a concentrao
desses "outros" estirpes alta no uso cervejaria. Quanto mais elevada for a concentrao de
um organismo na sua fbrica de cerveja, o maior a possibilidade de contaminao
cruzada. No entanto, como com qualquer coisa relacionada fermentao, ateno
limpeza e prticas sanitrias determina grande parte do seu sucesso. Com as boas prticas
de limpeza, cervejeiros experimentar problemas com a contaminao cruzada de mltiplas
estirpes. Brewers que fazem usar vrias estirpes muitas vezes sentem que, se os actuais
procedimentos no resultar na contaminao, adicionando mais estirpes no ser um
problema. Tenha o seguinte em mente quando se trabalha com vrias cepas, ao mesmo
tempo:
Ser consistente. Sempre tentar recolher o seu levedura na fase ideal para que a tenso e armar uma contagem de
clulas consistente ou peso celular molhado. Consistncia ajuda a identificar problemas antes que eles se tornam
significativos.
Use "apenas levedura" recipientes de armazenamento. Use um recipiente diferente para cada estirpe e rotul-los
claramente. Ao armazenar fermento, lembre-se de armazen-lo frio, manter o ar para fora, e manter a presso de
CO2 de baixo.
Armazenar os recipientes de levedura em sua prpria rea limpa, refrigerado. Evite usar a outras reas multi-uso
alimentar walk-in ou.
fresco melhor. Manter o tempo de armazenamento para um mnimo. Levedura armazenado a 33 a 36 F (1-2
C) e utilizado no prazo de sete dias aps a colheita o objetivo. Considere 14 dias, o tempo mximo de
armazenamento.
Monitorar o pH da enquanto levedura pasta no armazenamento. Um aumento de mais de 1,0 pH indica morte
celular significativa, e voc deve descartar a lama.
Documente tudo e manter bons registros. Voc deve prestar especial ateno s temperaturas de fermentao,
horrios, padres de floculao e atenuao de cerveja a cerveja. No se esquea de gravar dados, tais como
qualidades sensoriais da cerveja, fonte da levedura, nmero de geraes, temperaturas de armazenamento, tempo
de armazenamento, etc.
Saiba as necessidades e comportamentos de cada estirpe em sua cervejaria. Cada cepa um pouco diferente.
Use um painel de provadores, e realizar sesses semanais. Tendo algumas pessoas de confiana de degustao
cada cerveja a cada semana d-lhe uma vara de medio consistente para identificar problemas mais cedo.
Certifique-se de saborear cerveja dos fermentadores para evitar um problema potencial antes da reutilizao do
fermento.
Como sempre, limpar e higienizar a fundo, incluindo acessrios, sempre que fizer uma ligao. Regularmente
monitorar pontos comuns de problemas, como o trocador de calor e superfcies fermentador. Alterar bens no
durveis, como juntas de borracha, antes de surgirem problemas.
Um fabricante de cerveja pode secar uma cerveja de outra forma muito doce, adicionando um maior-atenuante,
tenso neutro para o lote. Desta forma, ele mantm o perfil de sabor da estirpe mais complexo, mas de baixa
atenuao, enquanto ganha o poder de atenuao da estirpe neutro.
Um fabricante de cerveja pode misturar duas estirpes com diferentes mas complementares perfis de sabor para
obter um sabor mais complexo.
A cervejaria poderia criar um perfil de assinatura sabor nico para as suas cervejas que seria difcil para outros
fabricantes de cerveja duplicar.
Um fabricante de cerveja poderia usar uma estirpe de lcool tolerante em conjunto com a estirpe casa, para lidar
com cervejas de alta gravidade sazonais.
Um aspecto a ter em mente que as clulas de levedura produzem a maior parte dos
seus compostos de fermentao de sabor nas primeiras 72 horas. Portanto, se um
fabricante de cerveja quer misturar sabores de diferentes cepas de leveduras, ele ou ela
precisa adicionar todas as estirpes no incio da fermentao.
Isso diferente da adio de uma estirpe de maior atenuao ou tolerncia ao lcool.
Neste caso, o fabricante de cerveja adiciona o lcool estirpe tolerante ou alta-atenuante no
final da fermentao, e que acrescenta pouco, em termos de compostos de sabor, embora
possa trabalhar com os restantes acares para alcanar a atenuao desejada. A
desvantagem deste mtodo que voc no pode repitch a levedura sem a segunda estirpe
tendo um impacto maior sobre o sabor lotes subsequentes.
Existem alguns truques para a adio de levedura para uma fermentao j em curso.
Uma vez que a fermentao desprovido de oxignio e o lcool est presente, a levedura
necessita de estar num estado muito activo. Eles devem estar passando por uma
fermentao ativa, quer a partir de um motor de arranque, propagao, ou a partir de um
de um a dois dias de fermentao ativa quando lanados para a cerveja.
Muitos fabricantes de cerveja evitam usar fermentao de vrios tenso, preocupados
que as tenses iro competir uns contra os outros e um vai ganhar fora. Curiosamente,
cepas de leveduras de mais cervejeiro crescer a uma taxa semelhante na fermentao da
cerveja, assim que a competio raramente um fator quando a mistura de duas ou mais
estirpes. Muitas cepas de leveduras em estado selvagem competem uns contra os outros, e
alguns at tm matar fatores, mas levedura de cerveja no. Talvez isso se deva s geraes
de fabricantes de cerveja que protegem sua casa levedura de estirpes concorrentes.
Brewers preocupado com uma cepa superando outro pode fazer um experimento simples
para comparar a taxa de crescimento de cada estirpe separadamente e misturados para
determinar se as cepas de leveduras crescem bem juntos.
A preocupao mais relevante sobre fermentaes de cultura mista a diferena de
floculao. Mesmo que cepas mal floculantes ser co-floculado com uma estirpe floculante
superior, melhorando a sua floculao, ainda haver algumas diferenas na floculao
geral. Colheita e reinoculao de uma fermentao mista-deformao requer alguma
ateno a essas diferenas, caso contrrio, ele pode afetar a porcentagem de cada cepa de
levedura colhida. Por exemplo, se a cultura mista composta por uma estirpe altamente
floculantes e uma estirpe de baixo floculante, a recolha de levedura a partir do fundo do
fermentador aumenta a percentagem da estirpe altamente floculento. Em uso cervejaria do
mundo real, temos visto a variao percentual em apenas cinco geraes. Neste caso, a
mistura passou de uma distribuio igual a uma estirpe que compem 90 por cento do
campo. Curiosamente, a cerveja ainda estava vendo o benefcio de ambas as cepas de
leveduras e foi surpreendido ao saber da magnitude da deriva.
Voc no deve estar muito preocupado com a possibilidade de deriva, uma vez que
relativamente fcil de controlar um passo para a deriva tenso. Este livro inclui vrias
tcnicas para monitoramento de fermento em "seu prprio laboratrio de levedura Made
Easy". O mtodo mais fcil de verificar o desvio semelhante s tcnicas utilizadas para
determinar a pureza de uma cepa de levedura. Simplesmente o plaqueamento em levedura
Wallerstein Nutriente (WLN) placas faz com que a quantidade de cada estirpe numa cultura
mista visveis sem o uso de um microscpio ou de anlise gentica.
No interesse de explorar a eficcia de cepas mistas em uso cervejaria do mundo real,
White Labs fornecida culturas mistas a um nmero de cervejarias. As respostas dos
fabricantes de cerveja foram positivos.
Figura 3.3: resultados do teste Brewery multistrain.
Brettanomyces
A maioria dos cervejeiros experientes sabem que Brettanomyces a levedura, embora
novos cervejeiros muitas vezes pensam nisso como uma bactria. Como cepas ale e lager,
estirpes Brettanomyces so uma levedura no formador de esporos. Brewers muitas vezes
se referem a ele como "Brett", e para alguns, uma maldio, enquanto outros adoram.
Em 1904, N. Hjelte Claussen, diretor do New Carlsberg Brewery em Copenhaga,
Dinamarca, isolado e introduzido Brettanomyces para o mundo. Ele mostrou que a cerveja
forte Ingls stock passou por uma segunda fermentao lenta de Brettanomyces, e isso
fermentao secundria sabores caractersticos de alta gravidade cervejas britnicas
produzido. Na verdade, o nome Brettanomyces vem da palavra grega para "fungo
britnico." Ele era capaz de duplicar este sabor atravs da inoculao de cerveja com uma
cultura pura de esta Brettanomyces recm-nomeados.
Antes do trabalho de Hansen e seu desenvolvimento da tcnica de cultura pura,
Brettanomyces estava presente em muitas cervejas. O incio da cultura cervejeira pura foi o
incio da idade das trevas para Brettanomyces, que cervejeiros eliminados em cada turno.
Enquanto a maioria vincolas e cervejarias hoje de ainda evitar Brettanomyces, alguns
abra-lo, e um novo dia est amanhecendo para esta levedura muito criticado. Os
descritores para compostos de fermentao Brettanomyces ler como Farm Old MacDonald:
cobertor de cavalo, barnyard, cavalo suado, Band-Aid, couro, l molhada, entrico, feijo
queimados, plstico queimado, apimentado, mousey, e muito mais. fcil ver por que
muitos cervejeiros v-lo como uma influncia negativa em vez de uma forma positiva. No
entanto, um componente crtico do Lambic e algumas outras cervejas de tipo belga. Hoje,
muitas cervejarias esto abraando Brettanomyces. cervejeiros artesanais ousadas e
homebrewers tambm esto experimentando com ele, alguns com enorme sucesso.
considerado parte integrante da produo sabor de tais cervejas como Rodenbach Grand
Cru, Orval, Cuve de Tomme, lambic, e uma srie de outros de cervejarias como Lost Abbey
Brewing Company de San Marcos, Califrnia, e Russian River Brewing Company de Santa
Rosa, Califrnia.
Por que essas cervejarias usar esta levedura estranho se os sabores som to
desagradvel? porque estes sabores so como a adio de especiarias de uma mercearia
indiana para seu supermercado local (a menos que voc vive na ndia, claro). De repente,
voc tem muitos novos sabores e aromas para usar quando elaborar o prximo grande
cerveja. Com a habilidade direita e o equilbrio certo, estes sabores criar uma cerveja que
complexo e delicioso.
Preocupaes de contaminao
A nica coisa que impede muitos cervejeiros de experimentar com Brettanomyces a
preocupao com a contaminao cruzada. Se voc no tiver cuidado, voc pode encontrar
rapidamente carter Brettanomyces em desenvolvimento em todas as suas cervejas.
Brettanomyces se espalha facilmente, assim como outros organismos, atravs da poeira do
ar, madeira, moscas de fruta, linhas de transferncia, e outros equipamentos. A
caracterstica que faz Brettanomyces um pouco mais problemtico que ele pode formar
um biofilme, que requer limpeza adequada antes de higienizar a superfcie. No entanto, a
ateno para a limpeza adequada e procedimentos de higienizao vai um longo caminho
para prevenir problemas. Se voc tambm manter os bens macios separados, um conjunto
de Brettanomyces e um para todas as outras cervejas, voc nunca deve ter um problema.
Brettanomyces cepas
Brettanomyces um gnero no-formadoras de esporos de fungos na famlia
Saccharomycetaceae. Os tipos formadoras de esporos constituem o gnero Dekkera. O
grupo Brettanomyces cresceu como pesquisadores acrescentaram muitas novas cepas ao
longo do sculo passado. Os investigadores identificaram cinco espcies, com base em
homologia de sequncia de ADN ribossomal:
H apenas trs Brett estirpes cervejeiros usam regularmente para fabricao de cerveja:
B. bruxellensis uma grande presso para a fermentao secundria. Orval utiliza esta estirpe para produzir
sabor secundrio na sua ale Trappist. New Belgium, Southampton e Mackenzies tambm tm utilizado esta estirpe
em cervejas de produo.
B. lambicus mais frequentemente encontrada em lambic-estilo e Flanders vermelho e cervejas castanhos.
Russian River est usando esta estirpe em vrias cervejas, mais notavelmente Santificao.
B. anomalus no to conhecido como os outros dois, mas tem a fama de ser uma cepa de B. bruxellensis. Esta
talvez a cepa isolada a partir das cervejas de malte da Inglaterra e da Irlanda. Seu sabor muito mais sutil do que a
das outras estirpes, tendendo mais para frutado.
Ao trabalhar com leveduras nativas pode ser interessante, a realidade que a obteno
de bons resultados no trivial. Dependendo do meio utilizado, tambm potencialmente
perigoso. Em condies de aerobiose e com um pH suficientemente elevado pode suportar
o crescimento de agentes patognicos. Tenha cuidado ao degustao qualquer fermentao
nativa, especialmente se ele no cheira a cerveja. Mesmo que isso no funky, poderia ser
perigoso. Voc pode querer evitar degustao qualquer fermentao espontnea,
esperando at que voc tenha isolado as leveduras e cresceu uma cultura pura a partir
deles.
4Fermentation
A fermentao onde fazemos cerveja. O ditado, "Brewers fazer mosto, levedura fazer
cerveja", verdade, mas como fabricantes de cerveja, temos um monte de controle sobre
como levedura fazer a nossa cerveja. Embora possa parecer que uma cepa especfica vai
lutar nossos desejos ao longo do tempo, aprendendo o que faz um carrapato tenso, e
aproveitando esse conhecimento, nos d alguma medida de controle sobre o nosso
fermento. Uma grande parte do que faz um grande fabricante de cerveja a compreenso e
manipulao de fermentao para o resultado ideal. Enquanto voc no pode fazer uma
estirpe de fazer algo que no fisiologicamente capaz de fazer, voc pode faz-lo responder
com o melhor de sua capacidade.
fermentao Timeline
Depois de lanar o seu fermento, o que que as clulas fazer? A resposta comum: eles
consomem acar do mosto e transform-lo em novas clulas de levedura, etanol, dixido
de carbono e compostos de aroma.
Para que voc para maximizar os compostos aromatizantes corretos, til saber como
levedura proceder atravs de fermentao de cerveja. Alguns especialistas dividem
fermentao em quatro ou mais fases: lag, o crescimento, a fermentao, e sedimentao. A
verdade que grande parte da atividade de leveduras no segue fases distintas com a
empresa iniciar e parar pontos; em vez disso, h muita sobreposio. Por exemplo, no
crescimento e fermentao comeando ocorrem ao mesmo tempo. Dizer que as clulas
esto na fase de uma ou de outra, em qualquer momento dado no necessariamente
verdade, como clulas individuais vai progredir atravs de fermentao em taxas
diferentes.
Vamos simplificar e dizer fermentao em mosto de cerveja segue trs fases: fase de
retardo de zero a 15 horas, fase de crescimento exponencial de um a quatro dias, ea fase
estacionria de trs a dez dias. As fases exactas no so importantes; em vez disso, o
fabricante de cerveja deve entender o que o ganho de levedura da fermentao e que eles
fazem para a cerveja.
Wort Composio
composio mosto muito importante para a fermentao, a partir dos nutrientes para as
percentagens de acares. Sem uma nutrio adequada e o equilbrio certo de acares, a
fermentao no vai acabar como a cervejaria espera, ea cerveja vai sofrer.
Sugars
A maioria dos fabricantes de cerveja sabem que h uma correlao entre a temperatura
pur e os tipos de acares criados no mosto. As temperaturas mais elevadas favorecem os
enzimas que tornam mais complexo, menos facilmente fermentveis acares, e o
resultado que a cerveja atenua menos do que uma com menos acares complexos.
espessura Mash tambm desempenha um papel muito pequeno na fermentao resultante
do mosto, mas o fabricante de cerveja pode facilmente superar o seu efeito com um ligeiro
ajustamento da temperatura funde.
O tempo ea temperatura so os principais parmetros que a cerveja deve usar para
ajustar a fermentao do mosto. Enquanto converso poder ocorrer rapidamente, ainda
mais a actividade da enzima pode ainda afectar a capacidade de fermentao do mosto.
Executando um teste de fermentao do mosto forado barato, fcil, e d-lhe
informaes valiosas sobre o que voc pode esperar de sua fermentao. Tendo este
pedao de dados que o torna muito mais fcil para determinar se o seu problema de
fermentao o lado frio ou lado quente relacionado. Adquira o hbito de realizar um teste
de mosto de fermentao cada vez que voc preparar uma nova cerveja e testar
periodicamente para aquelas cervejas j em produo. Voc pode encontrar mais sobre
este teste em "seu prprio laboratrio de levedura Made Easy".
Uma coisa que muitos fabricantes de cerveja foram levados a acreditar que as
temperaturas mais elevadas pur resultar em cervejas "maltado". Isto quer dizer que a
cerveja tem mais malte doura. As temperaturas mais elevadas de mash no desenvolvem
mais carter de malte ou sabor, nem realmente resultar em muita doura. As dextrinas de
cadeia longa criados em altas temperaturas de mash so, no mximo, apenas muito
ligeiramente doce. possvel preparar duas cervejas, uma com uma temperatura pur mais
elevado e uma densidade alta final, e outro com uma temperatura mais baixa pur e uma
gravidade inferior de acabamento, mas a cerveja com a gravidade final mais alta gosto mais
seco (menos doce) do que o segundo Cerveja. H muitos exemplos de gravidade
acabamento cervejas muito baixas de estilo belga que ainda tm um upfront carter doce.
H muitos fatores na doura relativa de uma cerveja para alm de fermentao, incluindo
lcoois, compostos de amargor, taninos, carbonatao e acares a levedura no
consomem.
enzimas
Homebrewers so conhecidos por seu desejo de fazer cervejas extremas, empurrando os
limites em cada turno. Aqueles que fabricam cerveja cervejas gigantes s vezes se voltam
para over-the-counter produtos de enzimas que quebram os amidos. O problema
fundamental com a adio de enzimas para fermentao (alm do risco de contaminao
bacteriana) que, sem ponto de ebulio, as enzimas retm a sua actividade completa. Eles
vo continuar a quebrar os amidos e as dextrinas, completamente secar uma cerveja e
degradar a qualidade do sabor da cerveja. A nica maneira razovel para um fabricante de
cerveja para parar a actividade da enzima para pasteurizar a cerveja a uma temperatura e
durao capazes de desnaturar a enzima. cervejeiros artesanais poucos e menos ainda
homebrewers pasteurizar a sua cerveja, ento isso no uma opo em muitas cervejarias.
cervejas de alta gravidade, especialmente os all-malte, comear com uma elevada
percentagem de acar no fermentvel. O problema que a fermentao, muitas vezes fica
aqum da meta da cervejaria. Adio de enzimas alfa-amilase a uma fermentao de alta
gravidade parado muitas vezes reinicia fermentao. Como esperado, as enzimas
continuam a funcionar, mas a elevada concentrao de lcool impede a levedura de
trabalho, mesmo quando as enzimas fazer acar fermentvel novo disponvel. Alguns
fabricantes de cerveja tm relatado sucesso com este mtodo, embora os resultados podem
ser menos do que o desejado beerlike. Enquanto a popularidade de cervejas de alta lcool
continua a aumentar, mais cervejeiros tem certeza de experimentar com enzimas.
Deficincias nutricionais tambm podem causar a fermentao prosseguir lentamente.
Ao usar mosto contendo uma grande parte dos acares no-malte ou utilizando maltes
undermodified, importante para assegurar que no de azoto adequado no mosto para o
desenvolvimento de clulas adequada e a fermentao. Sub-modificado maltes devem ser
submetidos a um descanso de protenas para garantir o mosto contm aminocidos
suficientes, e mosto utilizando uma elevada percentagem de acar extra-malt pode exigir
suplementar de azoto. s vezes, a razo para uma fermentao sem brilho uma
deficincia mineral. Para funcionar, ou funcionar de forma eficiente, muitas enzimas
precisam de certos minerais como co-fatores. Por exemplo, mosto de cerveja muitas
vezes zinco limitado. O zinco um co-factor para a enzima lcool desidrogenase, a enzima
responsvel pela produo de lcool em levedura. A enzima no pode utilizar outros ies
de metal no lugar de zinco.
As enzimas podem vir de vrias fontes, incluindo fontes base de plantas, tais como
malte. A maioria dos fabricantes comerciais produzem os seus produtos de enzimas a
partir de micro-organismos. economicamente eficiente para crescer grandes quantidades
de microrganismos (tanto as bactrias ou fungos), em fermentaes de elevada densidade
celular. Os organismos normalmente excretar a enzima de interesse, de modo que eles s
precisam de remover as clulas e concentrar os meios circundantes, que contm a enzima.
especificao de cada produto e uso pretendido determina se continua com purificao
adicional. Os produtos no purificar a maioria das enzimas completamente, pois isso seria
muito caro. Assim, cada preparao normalmente contm um nmero de diferentes
enzimas. Os fabricantes tambm podem produzir enzimas a partir de fontes de DNA
recombinante (organismos geneticamente modificados, ou transgnicos), mas a sua
utilizao na fabricao de cerveja hoje ainda muito raro. Brewers so conservadores e
conscientes de reao potencialmente adversa cliente a adio de produtos OGM cerveja.
Um produto OGM, Maturex, da Novo Nordisk, ganhou a aprovao Federal Drug
Administration para uso em cerveja. uma acetolactato-descarboxilase, que converte
directamente a acetolactato acetona sem produzir diacetilo, eliminando a necessidade de
um resto de diacetilo. No entanto, no possvel remover Maturex diacetil que est
presente como resultado de qualquer metabolismo da levedura ou Pediococcus. A linha
inferior que a utilizao desta enzima pode eliminar a espera para um descanso de
diacetil, mas encurtando o tempo de maturao da cerveja pode ter outras consequncias
para o sabor da cerveja.
Quando voc compra estes produtos enzimticos, no ser surpreendido com o quo
pouco voc comea. Desde catalisar uma reaco no consome a enzima, voc s precisa de
uma quantidade muito pequena. as taxas de uso exatos variam, mas geralmente, eles esto
perto de 1 grama por barril EUA. O produto que voc compra mais provvel embalado em
forma lquida ou em p. Se voc comprar enzimas em forma de p, melhor usar
preparaes "dustless" para ajudar a evitar o contacto inadvertido com a pele, olhos ou
pulmes. As proteases presentes nas misturas, e a elevada concentrao de enzimas, pode
causar irritao da pele. Voc pode estender a vida de prateleira 'enzimas, mantendo-frio. A
vida de prateleira para a maioria das preparaes de um ano quando armazenadas a 40
F (4 C).
Nutrio levedura
Levedura precisa de um fornecimento adequado de acar, nitrognio, vitaminas, fsforo e
traos de metais. requisitos de nutrientes exactas variam entre ale (Saccharomyces
cerevisiae) e cerveja (Saccharomyces uvarum) clulas de levedura, e para cada estirpe
dentro da espcie. exigncias nutricionais tambm podem variar entre os fabricantes de
cerveja, mesmo quando eles esto usando a mesma cepa de levedura.
Uma erva de todo-o malte contm toda a necessidade de nutrientes de levedura para a
fermentao, exceto oxignio e zinco. Adjuntos como milho, arroz ou xaropes de acar no
contm muitos nutrientes essenciais, tais como nitrognio, minerais e vitaminas. Mesmo
com todos os mostos-malte, cerveja podem encontrar vantagem em adicionar nutrientes
para melhorar e ajustar o desempenho de fermentao bem. Vrios produtos de levedura
de nutrientes disponveis fornecem uma fonte equilibrada de nitrognio, minerais e
vitaminas. Brewers tambm pode adicionar nutrientes especficos individualmente, mas
tenha em mente que uma quantidade excessiva de nutrientes tambm pode causar
problemas. Seu objetivo encontrar o equilbrio ideal para as suas condies de
fermentao.
Azoto constitui cerca de 10 por cento do peso seco de clulas de levedura. O azoto no
mosto de cerveja principalmente na forma de aminocidos. H vinte tipos diferentes de
aminocidos, e de levedura podem fazer os aminocidos que necessitam ou assimilar-los a
partir do mosto. Ambos os aminocidos de mosto e suplementos de azoto inorgnico afetar
sabor, que pode ser bom ou ruim dependendo de seus objetivos.
Semelhante forma como abordagem de levedura diferentes acares, assimilar
leveduras e utilizar aminocidos wort to rpida e eficientemente quanto possvel.
Levedura ocupar e utilizar alguns cidos erva-de-amino (Grupo A) no primeiro dia,
enquanto outros (Grupo B) so retomadas gradualmente durante a fermentao. Levedura
no ocupam alguns outros (Grupo C) at depois de um atraso substancial. E leveduras no
utilizam o aminocido mais abundante no mosto, prolina (Grupo D), em todos os. A
especificidade do que os cidos permeases de transporte de aminocidos atravs da
membrana plasmtica controlar as taxas de utilizao. A maneira mais rpida para o
fermento para utilizar nitrognio atravs de transaminao. Neste processo, um
aminocido dador d-se o seu azoto alfa-amino com o cido ceto para formar o aminocido
desejado. Portanto, para a maior parte, cidos aminados mosto so convertidos em cidos
alfa-ceto. por isso que levedura no utilizam prolina, uma vez que a de um aminocido
em que o grupo alfa-amino uma amina secundria (ligado a dois tomos de carbono) e
no pode ser transaminado.
Este processo tem implicaes profundas para o sabor. Os cidos alfa-ceto formadas so
descarboxilado para formar um aldedo, o qual subsequentemente reduzida ao lcool, e
esta a fonte de lcoois fusel. Isto porque os suplementos de aminocidos podem afectar
a quantidade e tipo de lcool de fusel formado. Alm disso, as alteraes no perfil de lcool
de fusel afectar o perfil de ster. Esta uma razo pela qual suplementos de aminocidos
no so necessariamente superior ao de azoto inorgnico.
fontes de azoto inorgnico comuns so sulfato de amnio e diaminophosphate (DAP).
DAP tornou-se, de longe, a fonte de azoto o mais preferido na indstria do vinho, uma vez
que tambm fornece fosfato. O fsforo um componente essencial de cido
desoxirribonucleico (ADN), bem como fosfolpidos dentro de membranas celulares. O
fsforo faz-se 3 a 5 por cento do peso seco de clulas, a maioria do qual o armazenamento
de fermento em vacolos. Se a levedura no tm fosfato, problemas de fermentao podem
surgir devido a problemas com a replicao de ADN, e isto tambm pode resultar em
fermentaes preso e incompletas. Em fermentaes em que fosfato limitantes, tais como
adjuvantes de cervejas ou mostos no baseados em cevada, a adio de fosfato pode ser
benfico.
As vitaminas so essenciais em muitas reaes enzimticas, ainda fermento no pode
sintetizar muitas das vitaminas essenciais. vitamina requisitos tpicos incluem biotina,
cido nicotnico, e cido pantotnico. A biotina a vitamina mais importante para a
levedura. Ele est envolvido nas reaces enzimticas quase todos os compostos que criam
crticos de levedura: protenas, ADN, hidratos de carbono e cidos gordos. biotina
deficincia resulta em crescimento de levedura lento e fermentaes preso.
minerais necessrios incluem clcio, potssio, magnsio, zinco, e muitos mais ies
metlicos vestigiais. reaes enzimticas usar minerais como co-fatores. Minerals facilitam
a captao celular de materiais e uso de leveduras minerais no material estrutural celular.
O clcio importante para floculao de leveduras e metabolismo, mas os pesquisadores
no acho que isso normalmente um fator limitante para o crescimento de leveduras e
fermentao em mosto base de malte. Brewers vezes, adicionar sais de clcio para
fermentaes para ajustar o pH e melhorar a floculao. O mangans, o que pode estimular
o crescimento da levedura, frequentemente adicionado a muitas formulaes de
nutrientes de levedura. O potssio tem muitas funes no interior da clula e representa-se
a 2 por cento do peso seco de uma clula de levedura, o que muito elevado para um
mineral (a maioria so abaixo de 0,1 por cento). O magnsio importante na sntese de
ATP, que a forma de energia utilizada no prazo de clulas. Na verdade, a levedura no
pode crescer na ausncia de magnsio. Com magnsio limitado, clulas de levedura deve
tentar produzir compostos que podem compensar algumas de suas funes. Os
investigadores tm mostrado que o magnsio melhora a capacidade de uma clula para
suportar o esforo e desempenha um papel na preveno da morte de clulas quando o
etanol se acumula no interior da clula (Walker, 2000).
Como mencionamos anteriormente, erva muitas vezes zinco limitado. O zinco
importante no ciclo celular (reproduo) e um co-factor para a lcool desidrogenase, a
enzima responsvel pela produo de lcool. Apesar de outros ons metlicos podem estar
presentes, no h substituto para o zinco. O intervalo ideal para a fermentao de 0,1 a
0,15 miligramas por litro. Voc pode usar qualquer produto comestvel (FCC) ou de grau
farmacutico (UPS) de sulfato de zinco ou cloreto de zinco. Uma coisa a ter em conta ao
determinar a dosagem e custo que o grau de FCC ou USP de sulfato de zinco
invariavelmente Sal de zinco hepta-hidratado (ZnSO4 7H2O), que de apenas 23 por
cento de zinco em peso. Por outro lado, o cloreto de zinco de 48 por cento em peso de
zinco. Alm disso, mantenha em mente que algumas das zinco absorvido pela quebra
quente, e voc vai precisar adicionar mais do que o valor-alvo para a fermentao. A adio
de aproximadamente 0,2 a 0,3 mg / L de zinco perto do final da fervura deve conduzir a um
nvel suficientemente elevado de zinco no fermentador.
Curiosamente, a levedura de cerveja tambm tem nveis muito elevados de crmio,
quando comparado com outras leveduras. Ns ainda no sabemos qual o papel que o
cromo tem na fermentao, mas os nveis de cromo so to altos que a levedura de cerveja
muitas vezes includo em muitos produtos nutricionais e cosmticos unicamente para a
sua contribuio cromo.
Mesmo quando mosto tem uma composio mineral tecnicamente suficientes, ele no
garante os minerais so bio-disponvel para as clulas de levedura. Os ies metlicos
tendem a quelao, o que significa que se ligam a protenas ou outros compostos, tornando-
os disponveis para levedura. Mesmo quando os metais introduzir com sucesso de clulas
de levedura, que pode quelar dentro do citoplasma. Este na verdade um mecanismo de
defesa natural para levedura, e isso ajuda a manter os metais txicos de fermentaes
feridas. Por exemplo, o csio, ltio, e levar todos inibir o crescimento de levedura.
Um suplemento nico que pode resolver este problema Servomyces, que Branca Labs
representa na Amrica do Norte. O fabricante utiliza um processo patenteado, pelo qual ela
cresce levedura de cerveja, na presena de ies de metais, incluindo zinco e magnsio.
ensaios fluorescentes mostram que o processo de fabrico se liga a maioria dos minerais
dentro da parede da clula, que pode impedi-los de quelao, quando adicionado ao mosto.
Quando um fabricante de cerveja acrescenta Servomyces, ele fornece zinco e magnsio
necessria junto com o outro valor nutricional das clulas de levedura mortas. Por
conseguinte, o efeito da adio de Servomyces maior do que adicionando apenas a mesma
quantidade de sais nutrientes (McLaren, et ai., 2001).
Figura 4.1: nveis de oxignio dissolvido com vrios tempos de aerao em 20 litros de mosto. 18,7 P mosto a 75 F (24 C).
injeco de oxignio puro a 1 litro por minuto, utilizando uma pedra de 0,5 micron sinterizado.
fermentao Sistemas
Podemos fermentar a cerveja, em qualquer contentor, desde que ele pode conter lquido,
certo? Voc pode usar todos os tipos de embarcaes, em todos os volumes diferentes e em
todas as dimenses diferentes, mas nem todos os fermentadores so criados iguais. Hoje, os
recipientes de fermentao comuns em uso abrange a gama de baldes de plstico para alta
tecnologia fermentadores cylindroconical comercial porte.
Por que faz uma diferena que tipo de sistema de fermentao voc usa? Fermentar a
mesma cerveja em dois tipos diferentes de fermentadores, e mais frequentemente do que
no, voc ter duas cervejas diferentes. A mecnica de fluidos de fermentao so nicos
para cada tipo de fermentador. A cervejaria usando dois tipos diferentes de fermentadores
vai encontr-lo obtm dois resultados de fermentao diferentes. Os resultados, em alguns
casos diferir mais amplamente do que em outros. Na maioria das vezes, se os
fermentadores so da mesma forma e tamanho em geral, os resultados encontram-se perto
o suficiente para que o fabricante de cerveja pode misturar as duas cervejas em um
produto comercialmente aceitvel.
Pode uma cervejaria ajustar as fermentaes para fazer as cervejas vir o mesmo? Isso
possvel, mas, geralmente, leva alteraes no processo de fermentao, e s vezes at
mesmo requer ajustes na produo de mosto. Vejamos dois lotes drasticamente diferentes
tamanhos para ilustrar um ponto. Se voc fermentar um lote de 10 hectolitro a 70 F (21
C), pode ser necessrio para fermentar uma verso de 20 litros a 66 F (19 C) para obter
o mesmo perfil de ster. caractersticas fermentador, tais como a presso hidrosttica, o
ponto de saturao de certos gases, gradientes de temperatura, e todos os pontos mortos
tornam necessria a utilizao de uma temperatura mais baixa em um balde de plstico em
comparao com um grande fermentador cnico. Voc pode pensar que isso no se aplica
sua fermentao da cervejaria-j que a maioria cervejarias comerciais no fermentar em
baldes de plstico, mas as diferenas de concepo fermentador pode ter impacto. Muitas
vezes, quando uma cervejaria adiciona novos fermentadores, ele precisa experimentar com
diferentes condies de fermentao at que as cervejas produzidas so idnticos. Sierra
Nevada cabea cerveja Steve Dressler disse que quando a empresa abriu sua mais nova
fbrica de cerveja em 1997, demorou um ms de testes para combinar o sabor nos novos
fermentadores. A cervejaria descobriu que o tamanho fermentador foi uma varivel maior
do que o previsto. Ele tambm investigou a fermentao com a presso de topo, diferentes
esquemas de aerao, e lanando as taxas antes que pudesse obter o caractere de
fermentao desejado. Muitas vezes cervejeiros no antecipar as variaes entre diferentes
fermentadores. Recomendamos executando lotes de teste com as novas fermentadores.
fermentadores Homebrewing
A grande maioria dos homebrewers fazer cerveja em cerca de lotes de 20 litros usando
baldes de plstico ou garrafes de vidro. Muitos homebrewers comear com baldes de
plstico, mas, eventualmente, migrar para garrafes de vidro, porque eles so mais fceis
de manter livre de contaminao. Infelizmente, garrafes de vidro so pesados e so
perigosos quando molhado. garrafes de vidro tm gravemente ferido mais do que alguns
homebrewers quando quebrado. baldes de plstico so mais propensas contaminao
porque o plstico bastante suave e facilmente arranhada. Arranhes no plstico podem
abrigar e se esconder contaminao de limpeza e desinfeco regimes. Enquanto o
fabricante de cerveja substitui regularmente seus baldes, eles trabalham muito bem. Uma
recente adio cena homebrew um garrafo feito de plstico chamado o Better-Garrafa.
Feita a partir de PET, este fermentador menos suscetvel a arranhes do que um balde de
plstico, mais leve do que o vidro, e essencialmente inquebrvel. um bom
compromisso entre dois velhos favoritos populares.
Homebrewers tambm fermentar em todos os tipos de outros navios, a partir de barris
de grau alimentcio para o lixo latas para a direita na chaleira fervendo. Um nmero de
homebrewers so mesmo experimentando com fermentaes abertos, tomando as tampas
fora de seus baldes de plstico. Homebrewers so criativos e muitos so tremendamente
apaixonados pelo seu hobby. Alguns usam pequenas verses de fermentadores cnicas
profissionais. Alguns modelos vm com aquecimento de alta tecnologia e refrigerao,
portas de prateleiras, acessrios sanitrios, e muito mais.
Figura 4.6: fermentadores tpicas homebrew: Melhor garrafa, balde de plstico, garrafo de vidro. Fotos cortesia de
MoreBeer.com.
Figura 4.7: Homebrew porte, de alta tecnologia, fermentadores cylindroconical com refrigerao termoeltrica /
aquecimento e outras opes. Fotos cortesia de MoreBeer.com.
fermentadores comerciais
Cervejarias historicamente usado fermentadores abertos de madeira, fermentadores de
pedra abertos, e fermentadores de cobre abertas. Eventualmente, eles comearam a usar
tanques de ao inoxidvel que ainda estavam abertas para a atmosfera. Estes tanques eram
muito mais fceis de limpar e higienizar do que a madeira ou outros materiais. Em
fermentadores abertos, ato levedura rapidamente, e fabricantes de cerveja pode facilmente
colher de levedura a partir do topo. (Veja "Top recorte" na seco "Manuseamento de
levedura",pp. 149-152).
ainda um pouco raro nos Estados Unidos, mas h um nmero crescente de fbricas de
cerveja artesanal utilizam fermentao aberta. Sierra Nevada mantm alguns dos seus
fermentadores abertos originais e usa-los para cervejas especiais. Ela produz o famoso Ale
Bigfoot Barleywine-Style em 100 de barril fermentadores abertos. Estes so quase dez
vezes menor do que seus maiores fermentadores, mas Sierra Nevada acredita que as
fermentaes nos fermentadores menores, abertas do mais personalidade e exclusividade
para a cerveja. O mesmo verdadeiro para Jolly Pumpkin Artisan Ales, onde proprietrio
Ron Jeffries se esfora para criar cervejas de carter nico. Anchor Brewery, em San
Francisco diz fermentao aberta fundamental para o carter de Anchor Beer Steam.
Figura 4.8: Open fermentao a Magic Hat Brewery, South Burlington, Vermont. Foto cedida por Teri Fahrendorf.
Eles exigem menos espao, o que importante quando voc paga aluguel por p quadrado.
Voc pode usar sistemas de limpeza no local (CIP), que so muito mais fceis do que os seres humanos com
escovas de lavar.
fermentadores Cylindroconical oferecer uma boa higiene, uma vez que eles so selados do ambiente.
O fundo cnico e carcter vertical tirar partido da dinmica de fluidos para assegurar uma boa mistura e
fermentao rpida.
Para a coleta de levedura, s esperar e abra uma vlvula na parte inferior.
Eles so geralmente revestido, ento controlar a temperatura apenas um boto de distncia.
Figura 4.9: fermentadores Cylindroconical em Goose Island Beer Company. Foto cedida por Peter Symons.
Um dos pontos de venda iniciais de tanques cylindroconical foi que a cerveja poderia
us-los tanto para fermentao e condicionado uma vez que a levedura tinha deixado cair.
Raramente vemos que hoje, como a maioria das pequenas cervejarias usam tanques
condicionado separados, mas este um dos pontos de venda agora associados com as
verses homebrew de tanques cylindroconical.
O aspecto mais interessante destes fermentadores a sua geometria. O mais vertical do
fermentador, mais rpida a fermentao. A dinmica de fluidos do cone criar CO2
movimento bolha a partir do fundo do cone para cima atravs do centro do tanque. O mais
alto do tanque, quanto maior for a bolha formada medida que alcana para a superfcie. O
movimento de CO2 ajuda a transportar a cerveja ao topo, onde migra para baixo mais uma
vez ao longo dos lados do fermentador. A posio das camisas de arrefecimento pode at
mesmo melhorar este efeito e pode afetar a taxa de fermentao.
Brewery de Fuller em Londres agora usar fermentadores cylindroconical, mas e muitas
outras cervejarias britnicas costumava usar tanques com um "sistema caindo" (Figura
4.10). A cervejaria iria transferir o mosto para um tanque aberto, em seguida, depois de 24
horas iria "soltar" o mosto para outro tanque abaixo. Isso ajudou a remover quebra de frio
e pegou o oxignio para as fases iniciais da fermentao. O tanque foi superficial, e um
"Griffin corredia" dirigiria a levedura a partir do topo do tanque em vasos de recolha.
Figura 4.10: Vista para baixo em um vaso cair na cervejaria de Fuller. Foto cedida por Peter Symons.
Durante meados do sculo XIX, fabricao de cerveja foi crescendo em Burton upon
Trent, na Inglaterra. The Bass Brewery foi em Burton, e desenvolveu um mtodo de
fermentao e levedura coleo chamada do sistema da Unio Burton. Os fabricantes de
cerveja colocada uma srie de tambores de madeira em linha, com cada uma contendo um
pescoo de cisne que sai do topo do barril. O pescoo de cisne esvaziado em uma calha. A
cerveja fermentada nos barris, e o CO2 a partir da fermentao da cultura de levedura
empurrou-se o excesso atravs do pescoo de cisne, onde recolhida na calha e permitiu a
cerveja para retornar para o barril. Naquela poca, este foi pensado para ser uma tima
maneira de "limpar" a cerveja.
Figura 4.11: sistema da Unio Burton de Marston. Foto cedida por Matthew Brynildson.
Infelizmente, este foi um sistema caro, uma vez que se formando volumes de cerveja
comerciais necessrios muitos pequenos barris de madeira e empregando uma cooper para
atend-los. Baixo utilizado este sistema, at a dcada de 1980 e quase extinto agora.
Marston est em Burton ainda a usa para fermentar cerca de 10 por cento do Pedigree de
Marston (Figura 4.11). Esta coleta de levedura suficiente para armar tudo o mosto feita na
casa de preparar e mantm tradio e sabor vivo. Mesmo essa quantidade modesta de
produo na Sindicatos Burton necessrios milhes de dlares em investimento e
manuteno contnua.
Firestone Walker Brewery de Paso Robles, Califrnia, usa uma verso modificada da
Unio Burton, que chama Firestone Unio (Figuras 4,12-4,14). Em vez de o pescoo de
cisne complexo e calha, ele usa tubo flexvel correndo para baldes. H ainda a custa dos
barris, mas muito menos dispendioso do que uma Unio Burton. Brewer Matt Brynildson
diz que a cervejaria tem melhor atenuao, reduo mais rpida diacetil, e excelente
desenvolvimento do sabor nos barris. As cervejas iniciar a fermentao em fermentadores
cylindroconical inoxidvel sob temperaturas controladas para o desenvolvimento do sabor
adequada. Aps 24 horas, as cervejarias transferir a cerveja fermentar activamente para as
unies, que no so de temperatura controlada. Embora a fermentao pode alcanar
temperaturas elevadas, as primeiras 24 horas sob controlo da temperatura de fermentao
garantir qualquer quente nos barris no resulta em caractersticas tpicas de fermentao
quentes. Fermentao nos sindicatos empurra uma quantidade considervel de levedura
marrom dos barris, deixando uma cerveja mais limpo. A cerveja terminar a fermentao e
reduo de diacetilo (maturao) nos barris, antes de ser transferido para um tanque de
ao inoxidvel com temperatura controlada para a estabilizao de frio e aps remoo de
levedura.
Figura 4.12: sistema da Unio Firestone. Foto cedida por Arie Litman.
Figura 4.13: Enchendo o sistema da Unio Firestone. Foto cedida por Matthew Brynildson.
Figura 4.14: O sistema da Unio Firestone empurra levedura marrom fora dos barris, resultando em cerveja mais limpo. Foto
cedida por Matthew Brynildson.
Figura 4.15: O Black Sheep Brewery em Masham, North Yorkshire, utiliza um moderno, Yorkshire quadrado redondo feito de
ao inoxidvel. Fotos cortesia do Black Sheep Brewery.
Qual o futuro dos sistemas de fermentao? Grandes tanques de ao inoxidvel so
caros e requerem produtos qumicos perigosos para manter limpo, para que possamos ver
sistemas de fermentao mais baratos, descartveis no futuro. A indstria biofarmacutica
tem abraado sacos estreis para a fermentao. Eles so usados por muitas razes, tais
como a confiar menos em procedimentos de limpeza e saneamento. Bag-alinhado tanques
de cerveja servindo j existem, e armazena-lo para o BREW na Amrica do Norte usam
sistemas de fermentao forrado de saco descartvel. Talvez estes forros poderia mesmo
ser feita biodegradvel?
Outra inovao pode ser agitada fermentaes. fermentadores agitados so populares na
indstria biofarmacutica para a sua fermentao mais rpido, mas a indstria da cerveja
tem se esquivado de-los por causa do medo de captao de oxignio e formao de ster.
Mais cervejarias tm estado a olhar para estes recentemente, e h um crescente interesse
em fermentadores agitados para melhorar a velocidade de fermentao, mas a que custo
para dar sabor a cerveja?
Uso de Antiespumante
A fermentao gera uma grande quantidade de CO2 e isso cria uma grande quantidade de
espuma. Este um problema particular quando uma cervejaria est tentando tirar o
mximo de sua capacidade fermentador, deixando muito pouco espao livre. Garantir que
voc tenha espao livre suficiente pode ser caro, uma vez que alguns fermentadores
precisaria de mais de 25 por cento de capacidade extra para acomodar a formao de
espuma, por isso a opo mais cervejarias olhar a adio de anti-espuma.
Brewers costumam acrescentar antiespumante perto do final da fervura. Isto corrige-o e
misturando-o no mosto. A maioria destes produtos so base de silicone, e voc gostaria
de acrescentar cerca de 5 mililitros por barril US ou 1 mililitro por 20 litros. Alm de
permitir um preenchimento fermentador mais completa e prevenir blowoff (que tambm
ir melhorar a utilizao do hop), produtos anti-espuma pode realmente melhorar a
reteno de cabea, impedindo protenas de espuma-positivo de desnaturante na espuma.
No final da fermentao e antes da embalagem, a cervejaria quer filtra o antiespumante ou
permite que ele resolver fora atravs de gravidade.
Tendo em conta estes atributos positivos, por que muitas cervejarias evitar anti-
espuma? Muitos fabricantes de cerveja no quero acrescentar nada sua cerveja diferente
do malte, lpulo, gua e fermento. Por estas cervejeiras, antiespumante no uma opo.
Alguns cervejeiros tambm se preocupam com o efeito de anti-espuma sobre a sade de
levedura, embora parea que os produtos anti-espuma actualmente no mercado tm pouco
ou nenhum impacto sobre a sade de levedura ou desempenho.
As temperaturas de fermentao
Quando o fermento fermento de cerveja, que geram calor a partir da energia de
metabolismo. O calor de fermentao ir elevar a temperatura do mosto, e se a
temperatura no est contido, de levedura pode:
cepas Lager no pode tolerar as mesmas temperaturas elevadas como as estirpes de cerveja. Na verdade, as cepas de
lager morrer em temperaturas muito mais baixas do que as estirpes ale, por isso importante manter lager cepas mais
frio durante o manuseio, transporte e armazenamento. Um mtodo de laboratrio para diferenciar ale e lager levedura
aproveita desse fato atravs da incubao de clulas de levedura acima de 90 F (32 C). Se as clulas crescem, eles so
de levedura de cerveja.
Vamos falar sobre o fermento ale em mais detalhes. Do ponto de vista de sabor,
importante para manter a fermentao s temperaturas correctas, geralmente cerca de 68
F (20 C). Esta no uma temperatura baixa para os seres humanos; a maioria das pessoas
que tm dificuldade em distinguir entre uma cerveja a 68 F e uma a 72 F (20 C e 22 C).
No entanto, para uma estirpe de levedura na cerveja submersa, que uma grande
diferena. Lembre-se que a levedura so clulas individuais. Uma pequena diferena de
temperatura algo que facilmente notar. Se a temperatura sobe acima de 68 F (20 C), as
clulas iro acelerar o seu metabolismo at atingir mxima da clula. Se a temperatura
continuar a subir, as clulas comeam a expressar protenas de choque trmico para
proteger suas membranas celulares. O mesmo acontece com uma queda significativa de 68
F (20 C) temperatura. As clulas mudar de metabolismo para expressar protenas de
choque trmico para proteger a sua membrana celular. No se deixe enganar pelo nome,
fermento expressam protenas de choque trmico em resposta ao estresse, e que o estresse
pode vir de uma srie de fatores ambientais. Estas protenas ajudam a manter outras
protenas de desdobramento sob a condio estressante. Infelizmente, expressando as
protenas de choque de calor tira de a capacidade da clula para exprimir outras protenas
necessrios para a diviso celular, a fermentao, ou outras funes celulares.
Do ponto de vista do fabricante de cerveja, mais baixa a temperatura de fermentao,
mais lenta a actividade da levedura. Excessivamente baixas temperaturas resultar em
fermentaes lentas, lentas, e possivelmente paralisadas. As temperaturas mais elevadas
resultam em aumento da actividade de levedura-se a um ponto. Temperaturas
excessivamente altas, acima de 95 F (35 C) para a levedura de ale, ir parar a
fermentao. Tenha em mente que as temperaturas de fermentao mais altas tambm
aumentar a produo de metablitos secundrios e compostos ativos de sabor.
Branca Labs utilizada cromatografia gasosa para comparar duas cervejas do mesmo
mosto, tanto fermentado com WLP001 California Ale levedura. O laboratrio mantido uma
fermentao a 66 F (19 C) e o outro a 75 F (24 C), uma temperatura normalmente
encontradas em muitas fbricas de cerveja.
Figura 4.16: Gs comparao cromatografia de dois cervejas a partir do mesmo mosto e levedura, fermentado a diferentes
temperaturas.
15 20 0,1018 = 30,54 W
No entanto, a realidade que voc vai precisar de um aquecedor maior do que isso.
Esses aquecedores no so 100 por cento eficaz na converso de energia eltrica em calor,
ea classificao aquecedor pode no representam de forma realista a sua sada real. Voc
tem uma boa quantidade de margem de manobra na escolha de um aquecedor de potncia
adequada, e difcil ficar muito grande de um aquecedor. No entanto, se voc ficar muito
mais aquecedor do que voc precisa e o controlador interno deve ficar, voc pode acabar
matando o fermento com temperaturas excedendo o seu limite superior.
resfriamento evaporativo outro mtodo popular da luta contra o calor em
fermentadores de tamanho homebrew-. Neste mtodo, o fabricante de cerveja define o
fermentador num tabuleiro de gua e cortinas uma cobertura pano sobre o fermentador,
com a extremidade pendurada na gua. O efeito wicking transporta a gua at o tecido,
onde se evapora. A converso da gua em estado lquido para estado gasoso requer energia
considervel, o que ajuda a arrefecer o fermentador. Alguns materiais de pano funcionar
muito melhor do que outros. O nosso conselho evitar tecidos sintticos e ir com algodo.
tecidos altamente texturizadas, como veludo, pode funcionar melhor ou pior do que os
tecidos de baixa sesta. Um pequeno ventilador soprando sobre o pano vai ajudar a
aumentar a velocidade de arrefecimento, mas este mtodo no muito eficaz quando a
umidade alta. Mais uma vez, a grande desvantagem deste mtodo controlar
precisamente as temperaturas ao longo de todo o curso da fermentao. Leva muita
ateno para manter a temperatura de balanar em vrios graus, ao longo de um dia. Essa
falta de preciso no apenas bom o suficiente se voc quiser fazer a melhor cerveja
possvel.
Aquecimento e resfriamento ficar significativamente mais fcil se voc adicionar um
controlador de temperatura de comutao. Eles vm em todos os tamanhos e tipos, de
analgico para digital, com vrias configuraes e graus de preciso. A grande coisa sobre
um controlador que ele ajusta automaticamente o aquecimento ou arrefecimento quando
a levedura gerar mais ou menos calor durante as diferentes fases de fermentao. A
desvantagem para o homebrewer frugal o custo, mas a maioria dos homebrewers, uma
vez que adquirir um, acredito que eles so bem vale o investimento.
Com um controlador, aquecimento torna-se muito mais fcil. lojas de homebrew vender
envoltrios de aquecimento especiais, ou voc ainda pode usar uma almofada de
aquecimento. Voc no quiser usar qualquer dispositivo que concentra o calor em uma rea
pequena, porque, como os ciclos de aquecimento, pode potencialmente quebrar um
garrafo de vidro.
Homebrewers pode facilmente refrigerar seus fermentadores usando um frigorfico de
reposio ou freezer e um controlador de temperatura. Muitos homebrewers logo perceber
o valor de ter um frigorfico de reposio na garagem. Alguns cervejeiros preferir usar um
congelador em vez de um frigorfico. Freezers, muitas vezes tm um melhor isolamento de
refrigeradores e vm em configuraes que podem fornecer mais espao utilizvel. Evite os
freezers de carregamento superior, a menos que voc tem uma volta muito forte.
Carregando fermentadores em tal congelador pode ser um desafio na melhor das hipteses.
A principal desvantagem para freezers que eles no so projetados para funcionar a
temperaturas de fermentao tpicas. Correndo freezers a temperaturas ale, e at mesmo
temperaturas lager, geralmente resulta em um problema de umidade. O freezer, com sua
alta capacidade de refrigerao e bom isolamento, acaba no funcionando com uma
frequncia suficiente para lidar com a umidade. Humidade acumula-se no congelador e
ferrugem segue. Muitos homebrewers com freezers gastar dinheiro e tempo lidando com o
problema de umidade. (DampRid ou um ventilador de computador livre para mover o ar
interior ao redor pode ajudar.) Outro problema com capacidade de refrigerao excessiva
o potencial de fazer a temperatura de fermentao vacilar, aplicando demasiada
arrefecimento rpido demais.
Muitos homebrewers inicialmente pensar em usar um freezer porque querem cerveja
lager em temperaturas-32 perto de congelao F (0 C). No entanto, isso ainda mais
quente do que um congelador normalmente executado, e ainda no a melhor opo. A
maioria dos frigorficos pode ficar frio o suficiente para lager uma cerveja corretamente.
Ao executar uma geladeira ou freezer em um controlador, importante para evitar
ciclos curtos do compressor. ciclagem curta est executando a geladeira ou ciclo de
arrefecimento do congelador, deslig-lo, e depois inici-lo novamente antes de presses
tiveram a chance de igualar no sistema. Isso pode danificar o compressor e vai encurtar sua
vida til. Alguns controladores tm uma definio de ciclo de anti-curta, o que atrasa o
reincio do compressor para um determinado perodo de tempo. Esta uma tima opo
para aqueles que comprarem um controlador para um frigorfico ou congelador. Se voc
tiver um controlador sem esse recurso, voc quer ter certeza de que voc no est
deixando a sonda controlador pendurado no ar por si s. Utilizar a massa de fermentao
da cerveja para ajudar a evitar o ciclo rpido de o controlador, quer por fixao da sonda
para o lado de fora do fermentador ou usando uma bainha termomtrica.
H uma srie de outras maneiras, muito criativo para refrigerar ou aquecer um
fermentador. Um dos mtodos mais interessantes o uso de estado slido de refrigerao
termoeltrica e aquecimento nos fermentadores cylindroconical tamanho homebrew-de
MoreBeer de Concord, Califrnia. A empresa construiu aquecimento e resfriamento em um
dispositivo que est fixada na parte externa de seus fermentadores. O homebrewer, muito
parecido com o seu homlogo comercial, s precisa selecionar a temperatura adequada no
controlador. A principal desvantagem deste mtodo o custo.
Em todos estes mtodos, crtico que a medir a temperatura da cerveja. Voc quer
controlar a temperatura da cerveja, no a temperatura do ar. Muitos homebrewers
cometem o erro de ver uma temperatura de fermentao recomendada e pensando que a
temperatura da sala onde eles colocar o fermentador. A temperatura do ar na sala pode
variar muito ao longo do dia. Ele pode at mesmo mudar drasticamente em apenas alguns
minutos, mas isso no significa que a cerveja est fermentando mesma temperatura.
Quanto maior for o lote de cerveja, o que leva mais tempo a temperatura da cerveja para
alterar a partir do ar circundante. Por outro lado, o fermentador pode ser o aquecimento
devido actividade de levedura, mas a temperatura de um lote de cerveja pouco faz para
alterar a temperatura de uma grande sala ou refrigerador.
Existem vrias maneiras de medir a temperatura da cerveja. As tiras termmetro vara-
on funcionam muito bem. Eles so bastante precisos, mas eles se deterioram ao longo do
tempo e, eventualmente, precisam ser substitudos. Se voc estiver usando um controlador
de temperatura, uma opo popular uma bainha. A bainha ou construdo como parte do
fermentador ou inserida atravs de um bujo na cerveja. colocar a sonda do controlador
no interior da bainha, e mede com preciso a temperatura da cerveja. Uma opo menos
dispendiosa e menos invasiva apenas gravando a sonda controlador para o lado de fora
do fermentador. Se voc fizer isso, voc deve cobrir a sonda com algum tipo de isolamento.
Isso pode ser qualquer coisa de vrias camadas de plstico bolha, com um pano dobrado-
up, a um bloco de isopor. Isopor uma excelente opo, pois geralmente gratuita e
altamente eficaz. Com o lado exposto da sonda coberto, a leitura ir coincidir com a
temperatura da cerveja no interior do fermentador de muito perto. Enquanto houver
qualquer actividade de fermentao no fermentador, a temperatura ser a mesma ao longo
da cerveja.
Muitos controladores de temperatura tm configuraes para diferencial, que a
diferena entre o ponto de ajuste do controlador e o ponto onde ele desliga ou liga. Para a
fermentao, geralmente voc quer usar um cenrio to apertado como o controle permite.
configurao diferencial A 1 F (0,5 C) o melhor, mas s se voc est medindo a
temperatura da cerveja. Com alguns controladores, um pequeno diferencial possvel.
Utilizando uma configurao de menos de 1 F (0,5 C), pode fazer com que o controlador
de ciclo rpido. Se o controlador no tem proteo contra um ciclo curto, em seguida,
aumentar o diferencial para evitar ciclagem rpida. Alguns controladores tambm
permitem-lhe controlar o aquecimento e arrefecimento a partir do mesmo controlador, que
uma boa opo, especialmente em reas com veres extremos e invernos.
Figura 4.18: Aumento de vrios fatores de fermentao e como eles ster de impacto e produo fusel na cerveja. (Laere, et
al., 2008)
Figura 4.19: compostos de fermentao e o seu limiar de sabor na cerveja. gamas tpicas em cerveja, vinho e usque
(Meilgaard, 1975; Saison, et al, 2008;.. Reed, et al, 1991).
cepa de levedura e condio tambm afetar o carter hop de uma cerveja. Por exemplo,
comparaes de White Labs California Ale (WLP001) e fermentao Ingls Ale (WLP002)
mesma taxa pitching e temperatura mostrar os resultados anteriores em um nvel mais
elevado IBU acabado do que o ltimo. Muitos fatores determinam a IBUs final de uma
cerveja, e leveduras so um grande jogador. Diferenas na superfcie celular, o tamanho das
clulas, as taxas de lanamento, as taxas de crescimento e caractersticas de floculao,
todos desempenham um papel na determinao da quantidade de cidos isomerizados de
lpulo que passem para a cerveja acabada.
fermentao Endgame
Atenuao
Na fabricao de cerveja, a atenuao a medida de quo completamente a levedura do
mosto fermentado, e usualmente expressa em percentagem. Quanto mais acar a
levedura quebram durante a fermentao, maior a atenuao.
Para calcular a atenuao, o fabricante de cerveja verifica a gravidade especfica do
mosto, com um densmetro ferramenta ou outro capaz de medir a densidade da cerveja,
antes de ser lanado a levedura e novamente ps-fermentao. A gravidade especfica da
gua pura 1,000 a 4 C, e mosto tem uma densidade mais elevada em relao gua por
causa dos acares presentes. Os mais acares dissolvidos no mosto, quanto maior a
densidade da soluo. medida que a levedura consumir os acares, a densidade da
soluo diminui. Cervejeiras expressar a diferena na medio de partida e a medio
termina como uma percentagem da atenuao aparente. A maioria dos hidrmetros
modernos tm uma escala de gravidade especfica, mas diferentes indstrias tm
historicamente utilizado outras escalas, como Plato na produo de cerveja e Brix para
vinicultura. Qualquer escala aceitvel, desde que o fabricante de cerveja utiliza a mesma
escala para as medies antes e depois da fermentao.
Voc deve sempre registrar a partida ou gravidade original (OG), o terminal ou
acabamento gravidade (FG) e quaisquer outras medies de gravidade especfica,
juntamente com as datas e horrios das medies. A cerveja pode aprender muito sobre o
progresso e qualidade de fermentao por verificaes dirias de gravidade especfica da
cerveja, embora seja fundamental para garantir qualquer amostragem no contamina a
cerveja. Uma vez que a gravidade permanece a mesma durante trs dias consecutivos, a
fermentao mais provvel completa. Ao medir a atenuao usando a gravidade
especfica, voc pode calcular porcentagem de atenuao usando a seguinte equao:
floculao
sempre possvel que a levedura ir se recusar a cair ou se flocular muito cedo. Algumas
cepas altamente floculantes podem cair prematuramente, causando problemas para a
cervejaria. Por que usar uma estirpe altamente floculantes se ele pode resultar em cerveja
underattenuated? Por que usar baixa leveduras floculantes se um aborrecimento para
fazer cerveja clara? Em ambos os casos, a resposta sabor. Algumas das cepas mais difceis
e de temperamento pode ser o mais interessante em termos de sabor.
Em geral, as condies mais frios favorecer floculao, enquanto que os nveis mais
elevados de acar, na presena de oxignio, e pobre levedura inibio sade floculao. Na
maioria dos casos, algo que o fabricante de cerveja, de laboratrio, ou manipulador fez
durante a vida da cultura que causou uma mudana de floculao. Levedura no decidem
por conta prpria para alterar os padres de floculao. Qualquer um dos seguintes pode
fazer uma mudana de cultura padres de floculao:
diacetil Resto
A levedura tem a capacidade de reduzir enzimaticamente diacetil. Durante o crescimento
de levedura produz acetolactato, o precursor de diacetil. Mais tarde, durante a fase
estacionria, levedura reabsorve diacetil e converte-o para acetona e subsequentemente
em 2,3-butanodiol. Ambos acetona e 2,3-butanodiol pode escapar da clula, mas ambos
tm um limiar de alta sabor e contribui pouco em termos de sabor.
lagering
Parece que cada cerveja melhora com algum perodo de condicionamento frio. Quanto
tempo e como frio parece variar de acordo com a cerveja. O tempo de condicionamento
para ales tende a ser mais curto do que os tempos para cervejas.
Frio fermentao lager tem muitas consequncias para uma cerveja. Em um ambiente
fresco, geralmente 50 a 55 F (10 a 13 C), o trabalho de levedura mais lentamente e
produzem menos steres e lcoois superiores. No entanto, a fermentao lenta e
temperatura fria tambm manter mais de enxofre em soluo e reduo diacetil lenta.
Jean De Clerck publicou uma lista de objetivos lagering em 1957 que ainda so vlidas
hoje:
Uma vez que a fermentao est completa, incluindo todas as etapas, como um descanso
de diacetil, voc precisa baixar a temperatura da cerveja. Isto encoraja a floculao de
qualquer levedura remanescente. Voc pode condies de frio ambas as ales e lagers em
perto de temperaturas de congelamento. Muitas pessoas perguntam se eles podem falhar a
temperatura da cerveja, ou devem baix-la lentamente? A preocupao vem enviando o
fermento em um estado dormente, assim, impedindo-os de continuar a absoro de
compostos durante o longo perodo de frio-condicionado. A realidade que muito pouco
acontece depois de tomar o fermento abaixo de 40 F (4 C). Se quiser que o fermento para
ser ativo e para continuar a reduo da fermentao subprodutos, isso acontece muito mais
rpido em temperaturas mais altas. Com relao atividade de levedura vai, batendo a
temperatura ou baixando-a lentamente faz pouca diferena sabor se voc est soltando a
cerveja abaixo de 40 F (4 C). No entanto, muito rpida reduo na temperatura (menos
de 6 horas) no final da fermentao podem causar a levedura de excretar mais compostos
ster em vez de ret-los. Alm disso, se voc planeja usar o fermento para reinoculao,
voc deve evitar mudanas de temperatura muito rpidas (para cima ou para baixo), como
eles podem causar o fermento para expressar protenas de choque trmico.
lager condicionado tradicional utiliza uma reduo de temperatura lento. Como a
fermentao e retarda a levedura comeam a flocular, o fabricante de cerveja iniciado o
processo de arrefecimento lento a cerveja a uma taxa de 1 a 2 F (0,5 a 1 C) por dia. Eles
usam essa taxa de arrefecimento lento para evitar o envio o fermento em dormncia.
Depois de alguns dias a cerveja atingiu uma temperatura prxima de 40 F (4 C) e ainda
existem alguns acares fermentveis restantes, cerca de 1 a 2 P. Neste ponto, o
fabricante de cerveja transfere a cerveja para os tanques de lagering. Os tanques esto
fechados, ea cerveja constri presso de CO2, controlada por uma vlvula de purga para
evitar carbonatao ou danificar o fermento com uma presso excessiva. Embora caro em
termos de capacidade de armazenamento, algumas cervejarias ainda lager sua cerveja
durante meses para obt-lo em condio adequada. A coisa a lembrar se voc quiser usar
esta tcnica que ele depende do controle preciso da temperatura de modo que a
fermentao continua lentamente ao longo do perodo lagering. A levedura precisa para
permanecer ativo por um longo tempo se eles esto indo para reduzir qualquer
fermentao subprodutos.
garrafa Condicionado
Ns pensamos geralmente de levedura para o seu papel na fermentao, mas tambm pode
ter um papel aps a fermentao quando a cerveja carbonatao na garrafa. Brewers pode
carbonato a cerveja por dois mtodos: atravs de levedura ou atravs de carbonatao
forada. A maioria das cervejarias comerciais forar carbonato sua cerveja, mas um nmero
surpreendente ir para a dificuldade de garrafa condicionado. Brewers tambm se referem a
garrafa condicionado como refermentao, fermentao em garrafa, fermentao
secundria, ou a fermentao final.
Voc pode ter ouvido as pessoas afirmam que a carbonatao do frasco condicionado
de alguma forma diferente da carbonatao da fora de carbonatao. Se isso verdade ou
no, uma coisa certa: o dixido de carbono o mesmo em ambos. Mesmo que o dixido de
carbono o mesmo, alguns grandes cervejeiras recolher a partir da fermentao de CO2 e
em seguida inject-lo de volta para a cerveja no engarrafamento tempo. H uma srie de
razes para esta prtica, incluindo os ambientais, mas, no passado, a Reinheitsgebot
alemo proibiu cervejeiros de nada acrescentar cerveja, mas gua, malte, lpulo e
levedura. Recolhendo o CO2 da fermentao, que poderiam depois injet-lo de volta, uma
vez que fazia parte da cerveja.
Tradicionalmente, os fabricantes de cerveja gaseificada toda a cerveja atravs de um
perodo de condicionamento com o fermento. Continua a ser o mtodo para algumas
homebrewers, pequenos fabricantes de cerveja, produtores de cerveja barril, e inmeras
especialidades e regionais cervejeiros, como Coopers na Austrlia e Sierra Nevada. mais
caro, mas os benefcios podem ser substanciais. Fermento na ajuda garrafa scavenge
oxignio, que muito prejudicial para o sabor da cerveja. cervejarias menores tm
dificuldade em manter o oxignio fora de suas garrafas, de modo que muitas vezes
beneficiar mais de garrafa condicionado. As desvantagens so que os resultados podem
variar, os consumidores tm uma reaco negativa ao aparecimento de fungos na garrafa, e
o potencial de destruio autoltico de clulas de levedura, que pode libertar compostos de
sabor desagradvel na cerveja.
Os resultados de acondicionamento em garrafa pode variar porque est a depender de
levedura a fermentar uma segunda vez num ambiente j cheio de lcool, a um pH mais
baixo, e na presena de pouca comida. cervejas mais elevado de lcool pode apresentar um
problema para o acondicionamento em garrafa, como o lcool torna-se cada vez mais
txicos com o aumento da concentrao. Cervejeiros pode tambm encontrar cervejas que
utilizam bactrias, Brettanomyces, ou levedura selvagem difceis de carbonato
adequadamente, uma vez que estes micrbios podem utilizar uma variedade de hidratos de
carbono que permanecem em uma cerveja atenuada por levedura de cerveja, causando
carbonatao.
Usar a menor quantidade de levedura que permita atingir a carbonao. Quanto maior a
quantidade de fermento, maiores sero as eventuais sabores autlise. O mesmo vale para a
sade de levedura. Se voc tivesse uma fermentao primria problemtico, ou se houver
alguma razo para duvidar da sade da levedura no final da fermentao, ento voc vai
querer adicionar fermento fresco na hora do engarrafamento. Uma boa regra de ouro 1
milho de clulas por mililitro de cerveja filtrada, que de dez a vinte vezes menos do
fermento que usamos para a fermentao. Normalmente, a cerveja cervejarias filtrar em
primeiro lugar, em seguida adicionar 1 milho de clulas por mililitro de volta para a
cerveja. Para a cerveja no filtrada, alm de sade de levedura, a cervejaria deve levar em
conta a populao de levedura existente. Aps a levedura tem resolvido fora na garrafa,
deve olhar como no mais do que uma camada de levedura na parte inferior. Se houver
uma camada espessa ou monte de levedura do fundo da garrafa, muito usada. Lembre-se,
voc s precisa o suficiente para carbonato a cerveja, e qualquer excesso no serve a
nenhum propsito bom. cervejas de alta gravidade vai exigir mais fermento para
carbonatao, at 5 milhes de clulas por mililitro, devido aos nveis elevados de lcool.
cerveja caseira, se voc no filtr-la, geralmente tem mais de levedura suficiente em
suspenso (1 milho de clulas por mililitro pode olhar claro) em carbonato a cerveja. Se a
cerveja sentou-se por um ms ou mais antes do engarrafamento, ou se o fabricante de
cerveja acrescentou um monte de multas ps-fermentao, pode justificar alguns levedura
adicional no engarrafamento. No entanto, na maioria dos casos, desde que a sade de
levedura boa, a simples adio de um pouco de acar no momento do engarrafamento
deve ser suficiente para o carbonato de cerveja.
Ao adicionar o fermento, ele deve estar na melhor sade possvel, livre de
contaminantes, e colhida de uma gerao precoce (at a terceira gerao). Em uma
cervejaria comercial, o laboratrio deve verificar a condio de levedura antes da sua
utilizao no frasco condicionado.
Ser que o pequeno refermentao na garrafa contribuir sabor? Geralmente no,
especialmente se voc usar a mesma cepa que fermentado a cerveja. Sabemos de um
fabricante de cerveja utilizando uma estirpe weizen alemo para carbonato uma pale ale
neutro, sem qualquer sabores beerlike trigo. No entanto, todo o fermento fermento tempo,
eles vo produzir alguns steres e lcoois superiores, de modo que a quantidade de
carbonatao, o tipo de cerveja, e a cepa utilizada determina se o bebedor ir encarar esses
compostos refermentao ou no. Se voc um fabricante de cerveja comercial, voc
precisa estar ciente se tiver adicionado sabor durante a garrafa condicionado. Isso pode ser
o seu objetivo, mas voc precisa entender isso. Fazer prova cega da cerveja antes e depois
da garrafa condicionado usando um painel de provadores estatisticamente vlida porte. Se
voc detectar problemas de sensao bucal ou sabores como earthiness, papelo ou outros
compostos de sabor indesejveis, preciso investigar. Use uma cepa de levedura diferente,
usar diferentes quantidades de fermento, ou alterar seus mtodos.
Quando voc garrafa de condicionar a sua cerveja, h sempre uma chance de que alguns
ou talvez todos os frascos no vai desenvolver carbonatao. leveduras vivas nem sempre
se comportam! Como um fabricante de cerveja comercial, consider-lo obrigatrio que
voc segurar a cerveja e confirmar carbonatao antes do lanamento. Isto envolve
geralmente uma a duas semanas de tempo de armazenamento na fbrica de cerveja.
Segurando o inventrio at que carbonatada aumenta o custo de acondicionamento em
garrafa e um dos seus inconvenientes.
A maneira como voc armazenar a cerveja tambm afeta o grau de carbonatao. Se
voc armazenar as garrafas de muito frio, o fermento no metabolizam ativamente acar e
criar CO2. Se voc armazenar as garrafas muito quente, a levedura pode morrer antes de
criar CO2. Segure a sua cerveja em 65 a 69 F (18 a 21 C) para carbonatao, e prestar
ateno forma como as garrafas so armazenadas. Os resultados inconsistentes podem
ocorrer quando no h circulao de ar suficiente em torno das garrafas.
Se voc garrafa condicionado uma nova cerveja para o seu lineup, ou usando uma nova
cepa de levedura, melhor fazer um teste com dez a vinte garrafas antes do
engarrafamento um lote inteiro. muito difcil para abrir todas as garrafas de uma corrida
e refazer as adies fermento eo acar!
Tecnicamente falando, voc pode usar quase qualquer esforo para engarrafar
condicionar sua cerveja. Voc pode usar a mesma levedura usada na fermentao principal,
ou voc pode filtrar e adicionar uma cepa de levedura diferente. Ao longo dos anos, muitas
cervejarias tm reclamado eles filtram a sua levedura primria a tenso e condio de
garrafa com uma segunda estirpe, a fim de proteger o sigilo de sua matriz, mas em muitos
casos, a histria apenas um mito.
A melhor opo usar uma estirpe com propriedades de atenuao semelhantes que
forma um sedimento fino. Por exemplo, WLP002 uma cepa altamente floculante, e muitas
pessoas assumem que seria timo para cerveja em garrafa. O problema que ele to
floculento, forma-se aglomerados. Quando voc derrama a cerveja, os aglomerados podem
ficar juntos e estatelar-se em sua cerveja, que no muito agradvel para o bebedor.
Compare isso com WLP001. Enquanto esta estirpe no flocular to facilmente como
WLP002, ele flocula bem quando est frio e paus para vidro. Mais importante ainda, forma-
se uma fina e uniforme camada na parte inferior da garrafa em vez de aglomerados.
A menos que voc empacotar o cerveja enquanto ele ainda tem acar suficiente
esquerda para a carbonato, que vai exigir o acar adicional para carbonatao. Brewers
muitas vezes debater a melhor acar para o acondicionamento em garrafa, ea maioria dos
homebrewers usar acar de milho. Alguns juram por extrato de malte seco. Algumas
cervejarias usar mosto fresco. Um estudo descobriu que o acar utilizado tem um impacto
sobre o acondicionamento em garrafa. Constatou-se de glucose, frutose, sacarose e
fermento em propores iguais, mas a maltose no fermenta completamente. Os
pesquisadores acreditavam que isso era devido presso CO2 criado nas garrafas, o que
teve um impacto maior sobre a captao de maltose que os outros acares (van
Landschoot, et al., 2007). teor de acar residual tambm afeta floculao, de modo a no
consumir todo o acar engarrafamento poderiam afetar sedimentao. Na maioria dos
casos, voc quer usar acares simples quando garrafa condicionado.
Cask Condicionado
Barril condicionado ao nvel Brewery um processo simples. A cervejaria configura a
cerveja para carbonatao e clarificado e depois depende do publicano para lidar com o
resto da tarefa. Ao discutir barril condicionado, o termo "condicionamento" no o mesmo
que "condio", que a quantidade de CO2 na cerveja. Condicionado realmente parte do
processo de maturao da cervejaria ao vidro. Grande barril cerveja depende fortemente
da manipulao adequada uma vez que a cerveja deixou a cervejaria.
O papel do fabricante de cerveja, que no se formando uma grande cerveja, para
acumular a cerveja para os cascos limpos e desinfectados uma vez que atinge cerca de 2 P
acima de sua gravidade previu acabamento. Embora o fermento continuar a consumir os
acares residuais e criar lcool e outros subprodutos, o principal objetivo do acar
carbonato a cerveja no barril. Se a sua cerveja atenuou mais do que o previsto, voc pode
adicionar o acar priming, contanto que isso no vai resultar em carbonatao excessiva.
O objectivo uma cerveja carbonatada para um contido de 1 a 1,2 volumes de CO2. Sua
cerveja deve ter uma contagem de clulas em torno de 1-3 milhes por mililitro por barril
condicionado. Como a maioria dos bebedores preferem uma cerveja clara, voc adicionaria
isinglass para acelerar a resoluo do fermento e outros slidos. Voc deseja adicionar os
isinglass e quaisquer lpulo seco apenas antes de selar o barril durante vrios dias. Uma
vez fechado, rolar o barril para misturar a cerveja com os finings, em seguida, deix-lo
sentar no carbonato e resolver.
Um aspecto importante da cerveja em barril a temperatura. No s importante para o
sabor e aroma ao beber a cerveja, mas tambm para a eficcia dos finings e carbonatao.
Mesmo que a cerveja carbonatou mais rpida a temperaturas mais mornas, ictiocola
funciona melhor abaixo de 59 F (15 C). Se a temperatura se torna muito alta, ictiocola
torna-se menos eficaz, e a uma temperatura suficientemente elevada que desnatura. Ao
trabalhar com cerveja barril, um dos principais benefcios do isinglass sobre a gelatina
que cola de peixe bom para reassentar se perturbado. Mas isinglass perde esta
propriedade, se foram desnaturados. A cervejaria precisa manter barril cerveja na
temperatura adequada, que resulta no nvel certo de carbonatao na quantidade certa de
tempo. Este pode estar na gama 50-57 F (10-14 C). Se esta sua primeira vez
trabalhando com o barril condicionado, tente uma temperatura prxima de 54 F (12 C).
5Yeast, Crescimento, manuseio e armazenamento
Pitching Rates
Consistente, cerveja de alta qualidade requer medies precisas. Uma das medidas mais
importantes, especialmente em termos de fermentao, est lanando taxa. Sem taxas de
pitching consistentes, o sabor pode mudar significativamente de lote para lote.
Quais so as consequncias de overpitching ou underpitching? Em geral, underpitching
afeta sabor mais, enquanto overpitching afeta negativamente a sade de levedura mais ao
longo de geraes. No entanto, ambos podem resultar em menos de fermentao ideal com
elevados nveis de diacetil, acetaldedo, e baixa atenuao. uma taxa demasiado elevada
lanando tambm pode resultar em steres de baixa ou inesperadas, sabores autlise de
leveduras, e reteno de cabea baixa. Demasiado baixo uma taxa de inoculao pode
tambm resultar em mais lento fermentao e tempos de espera muito longos, que
permitem que as bactrias e leveduras concorrentes selvagem para crescer no mosto. Se
voc tiver que escolher entre underpitching ou overpitching, overpitching um pouco mais
tolerante antes defeitos de fermentao so evidentes.
Muitos fabricantes de cerveja preocupar com a determinao de uma contagem de
clulas exato. Embora sabendo a contagem exata ajuda, a consistncia mais importante.
Depois de ter determinado a quantidade (independentemente de como voc est medindo-
lo) que funciona bem para a sua cerveja, que pretende utilizar a mesma quantidade de cada
vez. O mtodo mais simples para determinar a quantidade de levedura atravs da
medio do volume ou do peso da lama. Depois de ter uma medida da suspenso de
levedura, voc pode usar um microscpio ou espectrofotmetro para contar as clulas, e
ento determinar quantas clulas voc tem em toda a pasta. A coisa agradvel sobre o uso
de um microscpio que ele mais barato, e voc tambm pode us-lo para verificar a
viabilidade das clulas. (Consulte a "sua prpria Lab Yeast Made Easy" para mais detalhes.)
Uma taxa lanando frequentemente citada de 1 milho de clulas por mililitro de
mosto por grau Plato.
Enquanto muitos fabricantes de cerveja ficar com esta frmula, mais de uma
orientao do que uma regra dura e rpida. Ns preferimos taxas ligeiramente mais baixas
para ales (0,75 milhes) e ligeiramente mais elevada para lagers (1,5 milhes). No entanto,
voc deve determinar a taxa de pitching ideal para cada cerveja em sua programao.
Muitas cervejas ser ideal em 0.75 milhes e muitas cervejas em 1,5 milhes. Algumas
cervejas pode exigir mais ou menos antes de voc sentir que seu produto perfeito. taxas
lanando variam de acordo com cepa de levedura e estilo de cerveja. Voc vai descobrir que
cervejas lager exigem taxas de pitching mais elevados, aproximadamente o dobro do que
voc arremesso para uma cerveja. Quando voc preparar algumas cervejas de estilo
britnico e weizen de estilo alemo, que voc pode achar que a taxa ideal um pouco
menor, muitas vezes em torno ,5-0.750.000.
Tenha em mente estas taxas sugeridas so para reinoculao levedura colhida, porque
isso que os cervejeiros esto fazendo a maior parte do tempo. Ao lanar, uma cultura de
laboratrio frescos cultivados com arejamento e uma boa alimentao, um fabricante de
cerveja pode usar at uma taxa de pitching 50 por cento menor. Para homebrewers que
pode ser que trabalham com culturas de levedura que tm sido nas prateleiras das lojas por
algum tempo, a necessidade de revitalizar o fermento ou aumentar a velocidade do pitching
entra em jogo.
Vamos fazer um exemplo do clculo da taxa do pitching para 12 P ale mosto. Uma vez
que uma erva de ale, usaremos uma taxa de 0,75. Multiplique sua taxa de pitching (0,75)
pela gravidade especfica do mosto em Plato (12) para determinar quantos milhes de
clulas que voc quer por mililitro de mosto. Neste exemplo voc quer 9 milhes de clulas
por mililitro. Clulas por mililitro (clulas / ml) se torna a sua unidade padro de medida.
Em seguida, multiplicar o nmero (9 milhes de clulas / ml) pelo volume de mosto (em
ml), para determinar o nmero total de clulas de campo. Se esta uma 5,3 gales (20 L)
em lotes de fermentao home:
Neste exemplo, voc precisaria de 180 bilhes de clulas para lanar o seu lote
homebrew a uma taxa de 0,75 milhes. E se fosse um lote comercial de 10 hectolitro em vez
disso?
Se voc quiser ter uma idia do que diferentes densidades da suspenso de olhar como, obter um frasco de White Labs
levedura e tente fazer essa experincia. O volume total do frasco 47 ml, e cada um tem um nvel mdio de enchimento de
36 mililitros. Esse nvel de enchimento est ao virar da curva perto do topo, onde o frasco torna-se em linha reta. Depois
do frasco ter sentou-se na vertical e estvel para um bom tempo, a levedura pacotes para baixo dentro da poro de fundo
do frasco, cerca de 14 mililitros de espao. Quando isso acontece, a levedura (excluindo o lquido acima dele) a uma
densidade muito elevada, em algum lugar de cerca de 8 mil milhes de clulas / ml. Se agitar o frasco, de modo que a
levedura se mistura uniformemente para o lquido, que vai ter uma densidade de cerca de 3 mil milhes de clulas / ml.
Se voc misturar o contedo do frasco com um adicional de 16 mililitros de gua, agora voc tem uma idia do que a 2 mil
milhes de clulas / ml suspenso parece. Adicionar mais 50 mililitros de gua e que uma pasta 1 bilho / mililitro.
Tenha em mente que a levedura colhida de fermentao, muitas vezes tem material mais nonyeast nele do que o fermento
propagou-lab, ento voc vai precisar para permitir que, em seus clculos.
H um outro truque til para estimar a densidade sem um microscpio. Num tubo de ensaio padro de 13-por-cem
milmetros de vidro, uma suspenso de levedura de menos de 1 milho de clulas / ml no visivelmente turva. Acima de
1 milho de clulas / ml visivelmente turva. Voc pode ajustar a densidade de clulas atravs de diluio em srie at
que a amostra pouco visvel. Ao rastrear o nmero de diluies, voc deve ser capaz de calcular a densidade original e
usar diluies em srie para obter outras concentraes.
Voc vai encontrar algumas outras densidades comuns durante o processo de fabricao de cerveja. No incio da
fermentao, a densidade de clulas de cerca de 5-15 milhes por mililitro, e que de cerca de 25 a 60 milhes por
mililitro, no final. Uma vez que voc colher o fermento da parte superior ou inferior, voc provavelmente ter entre 0,8
bilho e 2 bilhes de clulas por mililitro.
Se voc estiver trabalhando com levedura seca, determinar o quanto de arremesso relativamente fcil. A maioria de
fermento seco contm cerca de 7000 a 20000 milhes de clulas por grama, dependendo do tamanho das clulas e outro
material nonyeast, mas que no o nmero de clulas viveis por grama vai ter uma vez que o fermento re-hidratar. Isso
depende de um nmero de factores, tais como tcnicas de armazenamento e de re-hidratao. Encontrar para fora de seu
fornecedor quantas clulas viveis por grama voc pode esperar (que pode ser to baixa quanto 5 bilhes), em seguida,
basta dividir o nmero de clulas necessrias pelo nmero de clulas viveis, e voc vai saber o peso em gramas de seca
levedura necessrio. Claro, isso assume toda a levedura est ativo e que voc hidratar-lo corretamente seguindo as
recomendaes do fabricante antes de pitching. A falha para hidratar adequadamente levedura seca vai resultar na morte
de cerca de metade das clulas.
Depois de saber a densidade de sua pasta, dividir as clulas totais exigidas pela
concentrao de clulas / ml no recipiente tanque de reteno ou armazenamento de
levedura para determinar quantos mililitros de suspenso de levedura que voc precisa.
Para o nosso exemplo tamanho homebrew-, precisamos de 180 bilhes de clulas. Se
determinarmos ou assumir que temos uma pasta contendo 2 bilhes de clulas por
mililitro, ento precisaramos de 90 mililitros de suspenso. Se for um 1 bilho / pasta ml,
em seguida, seria preciso o dobro.
Muitas cervejarias comerciais Pitch com base no peso. Para alguns volumes de levedura,
que s vezes pode ser consideravelmente mais fcil de medir. Cada clula de levedura pesa
cerca de 8 x 10-11 gramas (Haddad e Lindegren, 1953), de modo a 100 bilhes de clulas
pesam apenas cerca de 8 gramas sem qualquer lquido para a pasta. Dependendo de vrios
factores, uma densidade de 2 mil milhes de clulas por mililitro pesa no estdio de 1,02
gramas por mililitro (gua pesa 1 g / mL e leveduras 1,087 g / ml). Para o nosso exemplo
homebrew, se queramos para medir a nossa pasta em peso, precisaramos de cerca de 92
gramas de pasta. Para o nosso exemplo comercial, precisaramos de 9 litros de lama a uma
densidade de 1 bilho de clulas por mililitro. Em peso, ou seja cerca de 20 libras (9,1 kg).
Voc pode ver como pequenos erros na estimativa da densidade da suspenso poderia
ter um impacto significativo em sua taxa de pitching. Idealmente, voc deve primeiro fazer
uma contagem de clulas precisas para descobrir a densidade da lama. Na verdade, a
contagem das clulas requer uma medida de preciso em trabalhar com pequenos volumes
de lquidos e tcnicas de contagem. Qualquer erro multiplicado muitas vezes e pode fazer
por uma margem substancial de erro, fazendo a medio por peso ou volume no um
mtodo to ruim. Portanto, se voc no pode contar a densidade celular com um
microscpio, no se desespere. Lembre-se que o nome do jogo a consistncia. Se voc
acha que pode ser lanando muito pouco ou muito, tente aumentar ou diminuir a
quantidade a medir. Em teoria, enquanto a sua densidade de suspenso permanece a
mesma e seu mtodo de medio permanece consistente, voc deve ser capaz de discar a
taxa ideal para a sua cerveja com base no sabor. Independentemente disso, muito mais
fcil de manter a coerncia, se voc tem a capacidade de medir com preciso e inspecionar
seu fermento. Uma coisa tambm repetir: importante usar a mesma quantidade e a
mesma taxa de crescimento de cada vez para assegurar o mesmo sabor produo de lote
para lote. O nmero de clulas, a quantidade que crescem, e a velocidade em que eles
crescem todos influenciar a sua cerveja.
Quando chega a hora de lanar o fermento, a manipulao um campo de tamanho
homebrew- fcil. Numa escala comercial, pode ser difcil. O problema com a arrastar em
baldes abertos de lama ao redor o potencial para o aumento da contaminao.
Muitas cervejarias comerciais, utilizando fermentadores cylindroconical usar uma
transferncia "cone-to-cone" para lanar o fermento para o prximo lote. A transferncia
de levedura de cerveja a partir do fundo de um fermentador cnico para outra atravs da
tubagem mole ou duro. Muitos fabricantes de cerveja como este mtodo, uma vez que evita
a exposio a levedura a quaisquer contaminantes transportados pelo ar, e que no requer
armazenamento de levedura separada. Se voc estiver indo para transferir cone-to-cone,
mantenha em mente o seguinte:
Defina o brao trasfega para a melhor localizao no cone de levedura safra (acima do trub e abaixo clulas
nonflocculent), conforme determinado pela experincia.
Tomar uma amostra de levedura antes de bombear cone-to-cone. Avaliar a amostra fsica (aspecto, cheiro), e em
caso de dvida, enviar uma amostra para o laboratrio para a viabilidade e celulares contagens antes de bombear
o fermento sobre.
Use uma unidade de freqncia varivel (VFD) -controlado bomba de deslocamento positivo e calibr-lo atravs
do bombeamento de levedura em uma configurao de energia padro para um recipiente inoxidvel calibrado
(uso de anti-espuma para matar a espuma). Depois de calibrar a bomba, voc ser capaz de lanar um volume
preciso da levedura.
Se voc no pode transferir o fermento para um novo lote de mosto dentro de um ou dois dias de liquidao,
melhor para remover o fermento e armazen-lo frio.
Uma outra pergunta comum sobre lanando taxas envolve fermentadores maiores que
requerem vrios preenchimentos. Se voc calcular sua taxa de pitching com base no
primeiro enchimento ou o volume total no final? A regra de ouro , se voc estiver indo
para encher o tanque em um dia bebida, ento voc deve lanar a quantidade de levedura
para o tanque cheio. Se o seu preenchimento se estende ao longo de dois dias, voc deve
determinar a altura com base na quantidade de mosto adicionado durante o primeiro dia
de fermentao. O mosto e oxignio que lhe adicionar durante o primeiro dia de fazer com
que a levedura cresa, muitas vezes, duplicando o fermento dentro de 24 horas. Se voc
adicionar mosto e oxignio adicional no segundo dia, sem fermento adicional ou um passo
de reduo tudo o que necessrio.
Propagao de levedura
Uma das grandes coisas sobre a levedura que, com a devida ateno s prticas sanitrias
e de sade de levedura, quase qualquer um pode crescer levedura de tamanhos pequenos
em volumes pitchable.
Quando propagao de levedura, as necessidades de saneamento e oxignio so muito
mais elevados do que quando se formando. Os resultados de propagao pode afetar o
sabor da cerveja, mas no se preocupam com o sabor da propagao. Propagao no
apenas sobre o crescimento de massa de levedura, mas sim sobre o crescimento do
fermento mais saudvel possvel. Uma menor quantidade de levedura muito saudvel far
uma cerveja muito melhor do que um nmero muito grande de levedura insalubre.
Contanto que voc pode trabalhar de uma forma sanitria, a propagao da levedura
simples, e tem ainda pegou na comunidade dos homebrewers, quando se refere
propagao como "entradas".
Tcnica assptica. O pessoal de laboratrio deve ser competente em tcnicas asspticas, para garantir a pureza da
cultura.
meios de crescimento estril. Brewery mosto no estril. Crescer culturas de baixa contaminao requer mdia
estril. Cada passo no processo amplifica qualquer contaminao a partir da etapa anterior.
Nunca exceda incrementos apropriados no volume step-up. taxas de inoculao apropriadas garantir o
crescimento saudvel e uso eficiente dos meios de comunicao.
Aerao
Temperatura. Ligeiramente maior do que em fermentao normal, 68-77 F (20-25 C), aumenta as taxas de
crescimento.
Uma vez que o laboratrio de propagao sanitria, outras ferramentas podem ajudar
a prevenir a contaminao de ser trazidos para dentro. luzes ultravioletas, pedilvios, uma
cmara ou portas duplas, e um ambiente de presso positiva todos ajudar a manter fora
organismos indesejveis.
Um laboratrio pode propagar levedura ale por sua cervejaria utilizando estes passos:
Figura 5.2: A propagao de laboratrio tpico para o fermento ale.
Uma vez que o laboratrio conclui propagao em pequenas etapas, ele transfere a
cultura da cervejaria. O processo de laboratrio geralmente pelo menos cinco dias,
embora possa variar at duas semanas ou mais. Mesmo depois de o laboratrio transfere a
cultura para a cervejaria, que deve continuar a monitorar e testar o fermento medida que
progride atravs da cervejaria.
O objectivo Brewery semelhante ao laboratrio de: a crescer biomassa de levedura o
suficiente em bom estado fisiolgico de arremesso para uma lote de produo de cerveja. A
levedura neste momento tm crescido a um tamanho tal que eles podem agora
efetivamente outcompete outros organismos, de forma mais cervejarias fazer nada mais do
que ferver o mosto que eles usam para a propagao. Uma tpica cervejaria scale-up
poderia ser:
Figura 5.3: etapas e temperaturas para as estirpes ale e lager tpicos de propagao cervejaria.
A cervejaria comprou uma cultura de levedura de White Labs para lanar em 10 de barris. O plano era para comear em
10 barris e depois cultiv-la por etapas ao 500 o barril comprimento bebida final. A cervejaria verificou a contagem de
clulas no dia seguinte e descobriu que era apenas com 400.000 clulas por mililitro. Onde estava o fermento? A
cervejaria passou a semana seguinte lutando para crescer mais fermento, mas acontece que o fermento j estava l, era-se
na espuma. Mais tarde, aps a mistura, o contedo do tanque, a contagem de clulas foi de 6 milhes por mililitro a 35
milhes por mililitro.
Isso acontece muito com as cepas de levedura de cerveja. A cervejaria recolhe levedura do fundo de um tanque e no
encontrar muito levedura. Se voc no consegue encontrar o fermento no fundo, verifique o topo. Voc pode ter que
transferir a cerveja para chegar levedura, e se a propagao ainda est em curso, mistur-lo de volta para a cerveja.
sempre uma boa idia para verificar a gravidade da cerveja e usar a diminuio da gravidade como uma forma de
monitorar o sucesso de propagao.
A empresa dinamarquesa, Scandi Brew (agora propriedade da Alfa Laval), ainda faz um
navio chamado de "Carlsberg Flask." Hoje faz-los de ao inoxidvel, e os frascos tm
conexes para fazer transferncias sanitrias para dentro e fora do navio. Carlsberg frascos
tipicamente vender por US $ 5.000 a US $ 8.000.
sistemas de propagao maiores consistem habitualmente em uma a quatro vasos, com
arejamento. Alfa Laval Scandi Brew, Frings, e Esa & Hueber so trs fornecedores bem
conhecidos. Seus sistemas comeam em US $ 100.000 a US $ 150.000 para um sistema de
10 hectolitro de capacidade, que pode lanar em fermentadores de 100 a 150 Hecto litros.
Todos os trs sistemas de estes fabricantes produzem alta de aerao e elevada contagem
de clulas. Enquanto os altos nveis de aerao pode causar a formao de espuma, voc
pode usar produtos anti-espuma para minimizar o acmulo de espuma ou comprar um
agente anti-espuma mecnica.
Estes sistemas utilizam um processo de fermentao em lotes. O fabricante de cerveja
adiciona todo o mosto para o depsito de uma s vez, e o crescimento de levedura
limitada para que o volume dos meios de comunicao. Isto diferente do processo
descontnuo com alimentao, que os fabricantes utilizam para produzir levedura seca
mais, a levedura de padeiro, e levedura para as necessidades farmacuticas.
No processo fed-batch, o operador inocula media baixa gravidade (tipicamente 2 P)
com fermento. O incio fermento para crescer, e o nvel de glicose to baixo o fermento
evitar o efeito de Crabtree (vejap. 26). Como o fermento prazo de carbono (acar), o
sistema apresenta mais a um ritmo lento. Os medidores do sistema de entrada de carbono
para manter a fase de crescimento. No to simples como o bombeamento do acar
lentamente; o processo deve monitorar os nveis de oxignio ou etanol dissolvidos para
garantir a levedura permanecer limitada de carbono. Caso contrrio, torna-se um processo
normal Crabtree. Se os nveis de oxignio dissolvido subir, ento o fermento no esto a
consumir todo o oxignio disponvel porque o seu crescimento tenha abrandado. Se etanol
comea a aumentar, a levedura j no est em crescimento aerbio so. De qualquer
maneira, o sistema tem de limitar o fluxo da fonte de carbono.
Deve cervejeiros usam um processo fed-batch? Estas so peas caras de equipamentos e
sistemas precisam estar no local para garantir que a levedura permanece limitado em
carbono, caso contrrio, os benefcios so desperdiados. H uma vantagem definitiva para
produzir mais leveduras por tanque, mas a maioria dos fabricantes de cerveja esto
preocupados que a levedura no se comportam da mesma em fermentao. Levedura de
um processo descontnuo com alimentao esto em um estado metablico diferente do
que o fermento feita a partir de um processo de fermentao em lotes. A preocupao da
cervejaria que isso poderia levar a anomalias de fermentao e um conjunto diferente de
compostos de aroma. Talvez seja possvel utilizar um processo descontnuo com
alimentao, se a levedura passou por um passo adicional de lote no final. Claro, ento voc
precisa levar em considerao adicional equipamentos, despesas e tempo.
Muitos fabricantes tm tentado adotar o processo fed-batch, mas poucos empreg-lo.
David Quain, co-autor do Brewing Yeast & Fermentao e de longa data Baixo / Coors
levedura guru, foi uma vez perguntou se eles nunca usaram um processo em batelada
alimentada. Sua resposta, "Fed lote no tem lugar na fabricao de cerveja." (Conversa
pessoal com Chris White.)
Propagao homebrew
propagao Homebrew um pouco mais fcil, porque voc no precisa de tanta levedura
como uma cervejaria comercial; essencialmente toda a escala de laboratrio. O maior
desafio para a maioria dos fabricantes est a cumprir os requisitos de saneamento. A escala
laboratorial, a partir de planos inclinados ou placas, o mesmo que para cervejarias
comerciais. No entanto, em vez de propagao a 10 litros, voc pode parar em dois, que
voc pode usar diretamente em sua bebida.
A maioria dos homebrewers no passar por todo o processo de propagao de
inclinaes. Em vez disso, eles realizam o "cervejaria" etapa de propagao final, crescendo
uma cultura porte homebrew-. Homebrewers chamam esse processo de "fazer um
acionador de partida." Inicialmente, o domnio de homebrewers mais avanados, o motor
de arranque tornou-se uma tcnica popular para muitos homebrewers ao longo dos
ltimos anos.
Um motor de arranque um pequeno volume de mosto que o uso de levedura como um
passo inicial para multiplicar-se e preparar-se para fermentar um lote de cerveja. O
propsito do motor de arranque criar levedura suficiente limpo e saudvel para
fermentar o seu lote, em condies ideais. O foco principal de um motor de arranque deve
ser sempre fermento sade em primeiro lugar e aumentou segundo o crescimento celular.
Muitos fabricantes de cerveja por engano focar no crescimento celular em detrimento da
sade de levedura. muito mais prefervel ter um nmero menor de clulas muito jovens
saudveis, do que est a ter um grande nmero de clulas fracos. Voc deve fazer sempre
uma partida se voc suspeitar que a viabilidade ou a vitalidade do seu levedura pode estar
baixo. Por exemplo, se voc tem um pacote de fermento lquido que se encontre em trnsito
durante o calor do vero para muitos dias, voc deve fazer um acionador de partida.
Voc nunca deve fazer um acionador de partida se voc no consegue lidar com os
passos de uma forma sanitria ou voc no pode fornecer alimentao adequada para a
levedura. Se voc pode amadurecer com xito um lote no contaminada de cerveja, voc
deve ser capaz de fazer com sucesso um motor de arranque.
Alm disso, mesmo que voc pode achar que fcil de crescer mais fermento, no se
empolgue. Overpitching pode resultar em menos de um perfil ideal de fermentao (por
exemplo, steres, baixos ou inesperados, sabores autlise de leveduras, e a reteno de
cabea fraca), em comparao com uma taxa de inoculao apropriada.
Outro caso em que voc normalmente no quer fazer um acionador de partida com
levedura seca. levedura seca barato, e geralmente mais barato, mais fcil e mais seguro
para comprar mais de fermento seco do que para fazer uma grande partida. Muitos
especialistas sugerem que a colocao de levedura seca em uma partida apenas esgota as
reservas celulares que o fabricante de levedura tenta construir em seu produto. Para
fermento seco fazer uma re-hidratao adequada na gua da torneira; no faa um
arranque.
Fazendo um arranque
A partida fcil de fazer. como um mini-lote de cerveja, com o foco no crescimento de
levedura e de sade, no potabilidade. Voc vai precisar de um recipiente limpo,
higienizado capaz de manter o motor de arranque mais algum espao livre, folha de
alumnio, secas luz extracto de malte (DME), nutrientes de levedura e gua. Ao fazer
arranque mosto, que pretende equilibrar sade de levedura, o crescimento do fermento, e
convenincia. Entradas feitas em muito baixo resultado gravidade no crescimento mnimo.
Se voc acabar com vrias etapas iniciais por causa de um mosto de menor gravidade, em
seguida, a manipulao extra menos conveniente e mais propensos a apresentar
contaminao. Voc tambm no quer fazer um arranque de alta gravidade para crescer
levedura. Quanto maior a gravidade, a mais presso que exerce sobre a levedura. Brewers
no deveria acreditar no mito de que a levedura se aclimatar fermentao de alta
gravidade a partir de um motor de arranque de alta gravidade. Em geral, quando se trata de
levedura razoavelmente saudvel, manter a densidade do mosto de arranque entre 1.030 e
1.040 (7 a 10 P). Se voc est tentando reviver uma levedura sublinhou, como por cultura
se levedura de cerveja acondicionada em garrafa ou a partir de um vis de idade, use um
mosto de arranque menor gravidade, cerca de 1.020 (5 P). arrancadores de menor
gravidade so mais fceis sobre a levedura mas resultam em menos crescimento.
arrancadores de alta gravidade resultar em mais crescimento, mas so mais estressante
para o fermento.
A maneira mais fcil de fazer pequenos lotes de mosto de arranque com medidas
mtricas, usando uma proporo de 10 para 1. Adicionar 1 grama de DME para cada 10 ml
de volume de mosto final. Por exemplo, para fazer 2 litros de mosto de partida, adicione
gua at 200 gramas de DME at que voc tenha 2 litros de volume total. Adicione 1/8
colher de ch de fermento nutriente, ferver 15 minutos, arrefecer temperatura ambiente,
a transferncia para um vaso sanitrio, e adicione o fermento.
Ao usar uma garrafa de Erlenmeyer de vidro de borosilicato (como Pirex ou Bomex)
ainda mais fcil. Coloque o DME e gua no Erlenmeyer, coloque um pedao de papel
alumnio por cima, cair em seus nutrientes, e colocar o frasco diretamente sobre o
queimador do fogo. Ferver lentamente durante 15 minutos, deixe esfriar e adicione o
fermento. Se voc quiser usar mosto estril, voc pode usar uma panela de presso fogo
ou uma autoclave para preparar o mosto, em vez de ebulio.
Seguindo este resultados bsicos do processo no tipo de nmeros de crescimento
mostrado na Figura 5.5 (p. 140). No entanto, bastante simples para aumentar a
quantidade de crescimento da levedura atravs da adio de oxignio e agitao.
Se voc tem oxignio puro acessvel, voc pode adicionar uma dose de oxignio para o
seu arranque no incio. Voc vai ter de levedura muito mais saudvel e muito mais o
crescimento do fermento se voc fornecer uma pequena fonte, contnuo de oxignio
durante todo o processo. O oxignio fundamental para o crescimento do fermento, e no
fornecer qualquer oxignio para a levedura pode ter um impacto negativo de longo prazo
sobre a sade de levedura. Levedura utilizao de oxignio para sintetizar os cidos gordos
insaturados e esteris, que so crticas para a criao de uma membrana celular e o
crescimento de clulas saudveis boa. Com o oxignio presente, o fermento crescer
rapidamente. Sem oxignio, o fermento crescer muito mais lentamente e atingem uma
massa total menor de clulas.
H vrias maneiras de adicionar oxignio: agitao intermitente, agitao contnua, uma
placa de agitao, oxignio puro, ou uma bomba de ar com um filtro estril. Se voc tem
uma placa de agitao, que talvez o mtodo mais eficaz. A placa de agitao proporciona
uma boa troca gasosa, mantm a levedura em suspenso e expele dixido de carbono, o que
aumenta o crescimento de leveduras (cerca de duas a trs vezes mais levedura como um
motor de arranque n agitada) e melhorar a sade de levedura. No entanto, h duas
coisas a ter em conta quando se utiliza uma placa de agitao. A primeira que algumas
placas stir pode gerar calor suficiente para empurrar o motor de arranque para uma gama
de temperaturas que prejudicial para a levedura, em especial se for utilizado num
ambiente quente. Uma pequena placa de agitao que testamos adicionados 5 F (3 C) at
temperatura ambiente, de modo que voc vai querer explicar essa coliso na temperatura
ao fazer um acionador de partida. A segunda coisa a ter em conta que a aco da placa de
agitao de desenho do ar para o lquido pode causar a temperatura do motor de arranque
para espelhar mudanas na temperatura do ar circundante. Grandes flutuaes de
temperatura na sala ir resultar em grandes flutuaes na temperatura do motor de
arranque, e grandes variaes de temperatura de arranque causa resultados menos do que
estelar. Ao utilizar um placa de agitao, no conecte-se o vaso de partida com uma cmara.
Um pedao de papel alumnio higienizado, tampo de algodo, ou uma rolha de espuma
respirvel tudo que voc precisa. Bactrias e leveduras selvagens no pode rastrear, e
uma capa folgada vai permitir uma melhor troca gasosa. Voc pode encontrar informaes
sobre como fazer o seu prprio prato barato celeuma na internet, ea maioria das lojas de
homebrew avanados vender modelos com preos razoveis.
Figura 5.4: Entrada na placa de agitao caseiro. Foto cedida por Samuel W. Scott.
Se voc no tem uma placa de agitao, sacudindo o motor de arranque, tanto quanto
possvel faz uma grande diferena na quantidade de crescimento de levedura e de sade.
Por esta razo, alguns homebrewers na Austrlia comearam a usar garrafas de plstico de
refrigerante de 2 litros para comear. O fabricante de cerveja pode facilmente evacuar
qualquer construdo dixido de carbono a partir da garrafa, retirando a tampa e apertar,
em seguida, puxando o ar fresco novamente como um substituto. (Voc vai precisar de
trabalhar em um ambiente livre de poeira para evitar puxando em p, juntamente com sua
carga de leveduras selvagens e bactrias.) Este tambm um vaso til para agitar o motor
de arranque. Nossos testes mostraram que vigorosamente agitando uma partida a cada
resultados hora em aproximadamente o dobro do nmero de clulas criadas quando se usa
um motor de arranque que no abalada.
ar contnua a partir de uma bomba e filtro estril pode ser bastante eficaz, tambm. Os
principais problemas esto a ser capaz de controlar o fluxo de ar para evitar a formao
excessiva de espuma e a evaporao do motor de arranque. Neste caso, agitando quase
to eficaz como arejamento intermitente, com uma bomba. Se voc pode configurar o seu
arejamento para ser estril, no espuma sobre e para misturar o volume total do mosto de
arranque continuamente, ento ele pode ser to eficaz como uma placa de agitao. O
fermento faz melhor quando a configurao de arranque libera continuamente o dixido de
carbono que eles criam, os mantm em suspenso e uniformemente distribudo em toda a
soluo, e lhes fornece acesso a quantidades razoveis de oxignio.
Cada vez que fizer uma entrada, tenha em mente os quatro principais fatores que afetam
o crescimento do fermento e de sade: nutrientes, temperatura, acares e pH. nutrientes
essenciais incluem oxignio, zinco, aminocidos, e azoto. O oxignio um dos muitos
fabricantes de cerveja ignoram as coisas, mas essencial para a sobrevivncia e o
crescimento de leveduras e tende a ser o factor mais limitativo para a maioria das entradas.
Quase todo mundo pergunta se eles devem adicionar saltos para iniciantes. Em um nvel
de cerca de 12 IBUs ou superior, lpulo adicionar alguma proteo antimicrobiana. A aco
antimicrobiana um resultado de trans-isohumulone, um componente de alfa-cidos
isomerizados, o que permite que os compostos de lpulo "invadir" bactrias gram-positiva
e retardar a absoro da clula de nutrientes (Fernandez e Simpson, 1993). Apesar de
bactrias do cido lctico so bactrias gram-positivas, algumas estirpes so resistentes
hop, da a sua contaminao de cerveja. Mesmo que a adio de lpulo confere alguma
atividade microbiana, discutvel o quanto isso ajuda, uma vez que os cidos alfa
isomerizados tambm afetam negativamente a viabilidade das leveduras. Talvez seja
melhor ter menos material por a, com menos despesa e menos etapas para se preocupar.
Se voc precisa confiar em lpulo para manter a sua propagao puro, ento voc deve
rever o seu processo.
Use mosto all-malte para comear. O acar no arranque deve ser maltose acar, no
simples. Leveduras provenientes exclusivamente de acares simples parar de fazer a
enzima que lhes permite quebrar maltose. Desde mosto de cerveja , principalmente, a
maltose, a fermentao com levedura cultivada em simples acar resulta em uma cerveja
que no atenuam adequadamente.
O pH de um motor de arranque tem de ser em torno de 5, mas se voc no pode test-lo,
no se preocupe. mosto tpica varia entre 4 a 6 pH, portanto, use um DME decente
qualidade, e contanto que voc no tem gua extremo, o pH deve ser fino. Se voc tem um
muito elevado fonte de gua pH, voc pode considerar o uso de pelo menos uma parte de
gua destilada ou gua de osmose reversa em suas entradas.
Ao adicionar o fermento para o motor de arranque, trabalhar em uma rea sem
correntes de e tentar manter os recipientes aberto para um tempo to curto quanto
possvel. O modelo de embalagem Branco Labs mantm a levedura para fora do contacto
com as superfcies externas do frasco. No entanto, possvel que leveduras selvagens
dustborne e bactrias para resolver no lbio saliente perto do topo, por isso uma boa
idia para higienizar a parte superior do frasco para manter qualquer poeira baixou de cair
para o seu arranque. Depois de agitar o frasco para soltar o fermento dentro, deixe
descansar alguns minutos, e abrir lentamente a parte superior para evitar a formao de
espuma excessiva.
Os pacotes Wyeast no necessitam de "bater" o pacote antes de fazer uma entrada,
embora certamente no faz mal. A levedura no na pequena parte que voc pop, mas em
vez disso est no pacote principal. No entanto, ainda recomendamos popping o pacote
dentro. O lquido no pequeno pacote uma fonte de alta qualidade nutricional e acar, e
isso ajuda a lavar a levedura fora do bloco principal. Mesmo que a chance de contaminao
ao derramar extremamente baixo, voc deve higienizar o exterior da embalagem Wyeast
antes da abertura, bem como tesoura, se voc us-los para abrir a embalagem.
entradas mais quentes (at 98 C, 37 C) igual crescimento do fermento mais rpida,
mas h limites prticos sobre a forma como alto voc pode ir, e leveduras lager tendem a
ser especialmente sensveis a altas temperaturas. Usando temperaturas muito elevadas de
propagao afecta negativamente a viabilidade e estabilidade da levedura resultante. Outro
problema com o crescimento muito rpido ou o crescimento excessivo que pode resultar
em membranas celulares mais fracas devido s concentraes de cidos gordos un-
saturada inferiores. Por outro lado, tambm frios um motor de arranque resulta em um
crescimento mais lento e muitas vezes menos, por isso recomendamos contra a propagao
frio levedura. Uma boa regra manter entradas entre 65 F (18 C) e 75 F (24 C).
Alguns cervejeiros gosto de manter entradas de leveduras lager alguns graus mais frios e
leveduras ale alguns graus mais quentes, mas a temperatura em torno dos anos 70 baixas
(72 F, 22 C) consegue um bom equilbrio da sade e propagao eficiente de ambos lager
e ale leveduras.
Alguns cervejeiros esperar at o fermento consumir todos os acares do mosto inicial e
resolver fora dos soluo antes lanando. Eles decantar o mosto usado e lanar apenas o
fermento em seu lote de cerveja. Isto particularmente vantajoso quando se utiliza grandes
entradas submetidos a arejamento contnuo ou a placa de agitao. O lquido de partida,
neste caso, muitas vezes, no gosto muito, e voc deve evitar adicionar ao seu cerveja. Se o
tamanho do motor de arranque for maior do que 5 por cento do volume de cerveja, que o
fermento resolver em primeiro lugar, em seguida, apenas o passo de levedura. Se voc usar
esse mtodo, certifique-se o fermento estabilize completamente antes de decantao do
mosto gasto. Armazenar o fermento no mesmo navio por um perodo adicional de oito a 12
horas depois de atingirem a gravidade do terminal permite-lhes construir suas reservas de
glicognio. Separar o mosto passou da levedura muito cedo descarta seletivamente os
indivduos menos floculante, de maior atenuantes na populao de leveduras. Voc pode
acabar com um passo de levedura que no vai atenuar a cerveja plenamente. Permitir que a
propagao de arranque, para completar o ciclo de fermentao, antes de ser decantado.
Outros fabricantes de cerveja gostaria de lanar o motor de arranque, logo que a fase de
crescimento principalmente completo e o fermento ainda esto no auge da atividade.
Alguns consideram este o tempo ptimo para utilizar a levedura para o passo seguinte de
um motor de arranque ou por fermentao de um lote de cerveja. O pensamento que a
levedura no tem que vir para cima a partir da fase dormente novamente, garantindo assim
a atividade de leveduras mais rpido na cerveja. Se voc estiver indo para lanar um motor
de arranque de alto kraeusen, melhor para manter o motor de arranque dentro de 5 a 10
F (3-6 C) da temperatura do mosto do lote principal. Lanando uma muito quente,
fermento activo no mosto frio pode atordoar as clulas, e com cepas de lager isso pode
eventualmente afectar a atenuao, floculao, e aumentar a produo de sulfureto de
hidrognio. Enquanto voc pode lentamente arrefecer o motor de arranque ao longo do
tempo, que muitas vezes vai derrotar o propsito de lanar a alta kraeusen. Qualquer
levedura tempo sentido uma grande queda na temperatura, eles diminuem a velocidade e
cair fora, ento se voc quiser lanar, no auge da atividade, melhor manter o motor de
arranque mais perto de temperaturas de fermentao desde o incio.
Enquanto h vantagens e desvantagens de ambos os mtodos, o alto mtodo kraeusen
o nico a usar se voc est tentando reiniciar uma fermentao interrompida ou reduzir a
atenuao de uma cerveja mais alguns pontos. A presena de lcool e o baixo nvel de
acares impede levedura da vinda acima da dormncia para a fermentar o que resta. Por
inocular levedura j em alto kraeusen, as clulas iro continuar a consumir as restantes
acares.
A maioria das entradas neste gravidade, temperatura e taxa de inoculao especfica
chegar a sua densidade celular mxima dentro de 12 a 18 horas. taxas de inoculao e
baixas temperaturas pode estender tanto tempo para que 36 horas ou mais, mas a maior
parte do crescimento deve sempre estar completa em menos de 24 horas.
Por exemplo, se inocular um motor de arranque 1 litro com 100 mil milhes de clulas,
que de 100 milhes por mililitro. Se kits que cresce a 152 mil milhes de clulas, tem 152
milhes por mililitro, no final. Comeando com 9 P mosto e terminando com 2 P de
acar aps o motor de arranque estiver concluda, significa que a levedura utilizada at 7
P de acar.
A forma mais eficiente a levedura cresce, quanto maior for o factor de rendimento. Um
factor de rendimento maior do que vinte indica o crescimento aerbio, e um nmero menor
do que tpico de fermentao anaerbia. A maioria dos homebrewers fazendo entradas
nunca atingem esse nvel de crescimento. Ela exige um controle muito preciso de acares
e oxignio por todo o ciclo de atingir tais altas taxas de crescimento. No se preocupe, em
uma escala cervejaria homebrew ou pequena, no fundamental para obter todos os bits
de crescimento possvel. fermento sade e manter a cultura pura muito mais importante.
No entanto, til para entender em que ponto voc no est crescendo muito fermento, em
que ponto voc est maximizando o seu crescimento, e em que ponto voc est realmente
apenas fazendo cerveja.
Um fator que torna difcil para homebrewers para obter um bom rendimento que eles
so muitas vezes fazendo um motor de arranque de uma grande populao de leveduras. O
pacote de levedura lquida mdia para homebrewers tem cerca de 100 bilhes de clulas.
Com esse tipo de cultura, voc precisa de um grande arranque para obter um crescimento
substancial.
Corremos experimentos utilizando 100 bilhes de clulas de White Labs WLP001 em
diferentes tamanhos iniciais. Ns usamos vasos do mesmo material e proporo entre
altura e largura para cada partida. Ns adicionou nenhum oxignio suplementar ou
agitao do motor de arranque, e todos estavam mesma temperatura de 70 F (21 C) e
uma gravidade especfica de 1,036 (9 P). A gravidade final, aps o motor de arranque foi
concluda, era 1.008 (2 P).
Figura 5.5: Efeito da taxa de inoculao em factor de rendimento para as taxas de propagao tpicos, comeando com 100
bilhes de clulas.
Figura 5.6: Curva factor de rendimento atravs taxas de inoculao.
Figura 5.8: Uma experincia semelhante utilizando a mesma cepa de levedura, a taxa de lanamento, a gravidade de partida
e temperatura como em Figuras 5.5 e 5,7. Esta mostra os resultados de 100 mil milhes de clulas para entradas de
aumentar o tamanho, at ao tamanho de lote tpico fermentao home. A curva mostra a forma como o possvel nmero de
duplicaes e o crescimento torna-se limitada em virtude da taxa de inoculao cai.
Figura 5.9: tamanho de arranque necessria para produzir um determinado nmero de clulas. Os nmeros na grade
representam o nmero de embalagens de levedura lquida (~ 100 mil milhes de clulas) para adicionar a um arranque. Por
exemplo, a crescer cerca de 400 bilhes de clulas, voc faz uma partida de 4 litros com dois pacotes ou uma partida 9- litro
usando um pacote.
Se voc estiver usando uma placa de agitao, tremores, ou aerao, o rendimento ser
maior. Uma maneira fcil de determinar a quantidade adequada de levedura para o seu lote
e como um grande acionador de partida que voc precisa a livre Pitching Rate Calculator
emwww.mrmalty.com.
Entradas escalonadas
Como vimos anteriormente, existe um limite para a quantidade de crescimento a partir de
um determinado propagao. Voc pode ir maior, mas voc no vai necessariamente ficar
mais levedura. Para crescer grandes volumes de fermento, voc precisa mover os
resultados de propagao para outro volume de mosto. Ou utilizar um volume maior de
mosto para o prximo passo, ou a colheita de uma poro da levedura a crescer novamente,
afastar o restante no armazenamento. A regra popular de ouro que cada passo deve ser
exatamente dez vezes o volume da etapa anterior, mas isso no uma regra dura e rpida.
H uma abundncia de margem de manobra no tamanho dos degraus. Certamente, a
proporo do tamanho de um passo para o seguinte podem afectar a sade do fermento e a
quantidade de crescimento celular. Fazendo os passos desnecessariamente pequenas
exigir mais passos, mais transferncias, e aumenta a quantidade de trabalho. Cada
transferncia, cada alimentao, cada bit de lidar com voc tambm aumenta a chance de
contaminao. Por outro lado, muito grandes etapas no podem crescer todo o fermento
adicional. Uma vez que a taxa de arranque do pitching cai abaixo de um certo nvel, a curva
de crescimento atinge um patamar (Figura 5.8, p. 142). Isso s desperdia mosto, a menos
que o motor de arranque realmente um lote de cerveja. Em geral, voc quer atingir um
aumento em cada etapa de cinco a dez vezes o tamanho do passo anterior, mas no se
esquea as consideraes prticas de manipulao, saneamento e crescimento celular.
Aqui est um exemplo simples de preparar um arranque escalonado. Suponha que voc
est tentando crescer um pacote de fermento lager lquido para fornecer clulas suficientes
para lanar 5 gales (19 L) de 1.048 (11,9 P) lager mosto. Voc comea com cerca de 100
bilhes de clulas, mas voc quer faz-los crescer at 337 bilhes. Tenha em mente que a
taxa de inoculao afeta a quantidade de crescimento possvel. Neste caso, voc precisaria
de cerca de 6 litros de mosto de partida para crescer muito levedura. Se voc estava
limitado a um tamanho menor para a sua propagao, voc usaria vrias etapas para
crescer o seu fermento. Vejamos um exemplo com um 2-litros tamanho mximo de
arranque:
1. Faa uma partida com 200 g DME, adicionando gua para fazer 2 litros de volume de terminar.
2. Adicionar o frasco de levedura e crescer durante 24 a 48 horas.
3. Agora voc deve ter um pouco mais de 200 bilhes de clulas. Voc criou o equivalente de um outro frasco de
fermento. Refrigerar at que todos os liquida de levedura e decanta-se o mosto gasto.
Se voc fosse adicionar mais 2 litros de mosto de arranque, voc no iria dobrar o
fermento para 400 bilhes. Lembre-se o efeito de aumentar a taxa de inoculao. Se voc
adicionou 2 litros a mais, voc s criaria cerca de 100 bilhes de clulas adicionais. Isso faz
com que voc muito perto do 337.000.000.000 desejado. Isso menos do que os 6 litros de
mosto que teria normalmente necessrio. Isso por causa dos retornos decrescentes sobre
baixas taxas de inoculao em grandes entradas. Voc comea a fazer cerveja em vez de
levedura, mas entradas maiores so mais seguros porque eles exigem menos
transferncias.
Agora, o que se voc tivesse um navio que s permitiu-lhe fazer uma partida de 1 litro?
1. Faa uma partida com 100 gramas DME, adicionando gua para fazer 1 litro de volume de terminar.
2. Adicionar o frasco de levedura, e crescer durante 24 a 48 horas.
3. Voc agora deve ter cerca de 150 bilhes de clulas. Voc criou 50 mil milhes de novas clulas.
4. Refrigerar at que toda a levedura liquida, e decanta-se o mosto gasto.
Aqui onde as pessoas ficam confusas. Se voc fosse para adicionar outro litro de mosto
de arranque, voc no iria criar mais 50 mil milhes de clulas. Em vez disso, voc criaria
apenas 18 bilhes. Lembra-se o efeito de aumentar a taxa de inoculao (Figura 5.5, p.
140)? Voc alcanou uma taxa de inoculao inicial que gera menor crescimento. Se voc
fosse para colher a levedura cresceu e, em seguida, adicionar 1 litro de mosto, voc iria
crescer mais levedura.
Cada estirpe de levedura tem o seu prprio processo de re-hidratao ptima, mas o
processo de base a seguinte:
Manuseamento de levedura
O fato de que fabricantes de cerveja pode levar um subproduto da produo de cerveja,
salv-lo e reutiliz-lo em fermentaes sucessivas nico. Ns podemos fazer isso porque o
fermento ainda est vivo e saudvel aps a maioria das fermentaes de cerveja. No vinho,
o nvel de lcool aps a fermentao to elevado que a levedura no reutilizvel. Na
maior parte da produo de cerveja, o nvel de lcool presente aps a fermentao
relativamente baixo eo fermento no morrem, como acontece na produo de vinho. Na
verdade cervejeiros comerciais fermentar a maioria de seus lotes com levedura colhida. O
problema para a maioria dos fabricantes de cerveja comerciais no se a reutilizao de
levedura, mas como armazen-la e mant-lo saudvel para sesses de cerveja futuras.
Muitos homebrewers nunca sequer considerou a reutilizao de levedura como uma
possibilidade, mas na verdade no to difcil como alguns podem acreditar.
manipulao de leveduras refere-se s melhores prticas quando se trabalha com
fermento. O aspecto mais importante do trabalho com levedura a manuteno de uma
cultura pura. Uma boa cerveja:
Evita correntes de ar
Utiliza quer um ambiente estril ou uma chama aberta durante transferncias
Minimiza vertendo de um recipiente para outro
Utiliza papel alumnio ou outras coberturas sanitrias
Utiliza 70% de pulverizao de lcool ou outro desinfetante apropriada
Prticas de limpeza geral em todas as oportunidades
Coleo de levedura
Como discutimos, prtica comum na fabricao de cerveja comercial para levedura
colheita para re-uso. Brewers geralmente colher o fermento uma vez a fermentao est
completa, mas essa no a nica vez que um fabricante de cerveja pode colh-la. Em alguns
casos, o fabricante de cerveja pode colher a levedura floculante precoce antes da
fermentao estar completa 100 por cento, de modo a separar a cerveja a partir da
levedura que pode quebrar atravs de autlise. levedura floculante incio conter mais
clulas mortas e mais trub. Quando a colheita precoce, o fabricante de cerveja geralmente
descarta a levedura ou usa-lo como um nutriente na caldeira de cerveja. A cervejaria no
guarde-o para re-uso, porque reinoculao levedura floculante precoce muitas vezes
resulta em menor atenuao com cada re-uso.
Existem dois locais no fermentador onde a levedura rene numa quantidade
suficientemente grande para colheita: o fundo e o topo. Todas as estirpes de levedura
chegar a atingir o fundo do fermentador, se for dado tempo suficiente, e na maioria dos
casos, mais fcil para um fabricante de cerveja para recolher levedura a partir do fundo.
Coleta de levedura a partir do topo nem sempre possvel, uma vez que nem todas as
estirpes so bons principais cultivadores e nem todos os projetos fermentador permitem
corte superior.
Top Recorte
cepas Ale tambm so conhecidos como leveduras top-fermentao. Durante a
fermentao, a superfcie hidrofbica da levedura de ale faz com que os floculantes de
levedura para aderir ao CO2 e subir para a superfcie da cerveja. No passado, os fabricantes
de cerveja que utilizam estirpes de levedura de ale sempre recolhidos por desnatao-lo a
partir da parte superior de fermentaes. bastante provvel por isso que uma cervejaria
poderia reutilizar levedura durante centenas de anos. Enquanto os fabricantes de cerveja
praticada bom saneamento e recolheu o fermento muito saudvel a partir do topo, as
cervejas mantido a sua qualidade.
Hoje, a recolha de fundo a norma, com a maioria dos fabricantes de cerveja usando
fermentadores cylindroconical que ajudam na limpeza e recolha de levedura. Enquanto
esses navios ajudar a levedura a colheita a partir do fundo, a qualidade da levedura
recolhida no to boa quanto a coletadas de corte superior. levedura top-cropped sobe
em um momento em fermentao quando se tem uma alta viabilidade, alta vitalidade, e
relativamente livre de trub. Quando o fermento cai para o fundo de um fermentador cnico
se mistura com levedura morta, trub, e bactrias. O perodo de tempo que leva para que o
fermento para assentar no fundo tambm coloca a levedura sob o esforo adicional, e que
se encontra sob presso hidrosttica em fermentadores de altura. Mutaes e clulas
mortas construir mais rpido nestas condies, por isso hoje em dia cervejarias nica
reutilizar sua matriz uma mdia de cinco a dez geraes antes de iniciar a partir de uma
nova cultura.
Embora existam algumas excees especficas de tenso, geralmente o mais floculantes
uma cepa de levedura, maior sua tendncia a subir superfcie durante a fermentao.
Aps as primeiras 12 horas de fermentao, muitas estirpes de levedura de ale subir
superfcie e fermentar a partir do topo da cerveja durante trs a quatro dias, durante a
altura de produo de CO2. Durante este tempo, o fabricante de cerveja pode recolher
levedura a partir do topo do fermentador. Alm de obter uma grande safra de levedura, a
reviravolta a partir lanando a coleo muito mais rpido. Voc no tem que esperar para
o fermento para liquidar o fundo antes que voc possa reutiliz-lo. A desvantagem reside
na exposio da cerveja para o meio ambiente. Se voc tem um sanitrio, sala de
fermentao controlada, ento tcnicas como corte superior e fermentao aberta pode ser
muito benfico. projeto fermentador tambm um factor de corte superior. Grande e plana,
fermentadores abertos tornar a colheita fcil com baldes, ps, ou em menor escala com um
copo ou colher grande. Fechado-top fermentadores, com pequenas aberturas de acesso,
requerem equipamento especializado para "vcuo" a levedura a partir da superfcie da
cerveja. Embora poucas cervejarias comerciais fora da Gr-Bretanha cultura superior, hoje,
o processo est ganhando uma pequena, mas apaixonada seguidores entre cervejeiros
artesanais e homebrewers, porque sob as condies certas, corte superior uma tcnica de
gesto de levedura muito bem sucedido e eficaz.
voc pode top cortar a levedura favorito ou no? Enquanto voc pode cultura superior a
maioria das cepas de ale, o nvel de sucesso no depende apenas do fermento, mas tambm
do equipamento utilizado, o timing ea geometria fermentador. Por exemplo, Branco Labs
Ingls Ale (WLP002) uma levedura muito floculante. Parece clumpy, mesmo antes da
fermentao. Este um grande fermento top-corte na escala de homebrew menor, ainda
nos fermentadores cylindroconical altas encontradas na fabricao de cerveja comercial,
vrios relatrios do estado de campo que a levedura no consegue criar uma cabea
suficientemente substancial para o cultivo superior bem sucedido e o fermento s pode ser
colhidas a partir do fundo do fermentador. Talvez seja o tamanho das bolhas, a presso
hidrosttica, ou qualquer outro factor, mas importante lembrar que o ambiente
desempenha um papel quase to grande no topo sucesso de corte tal como a estirpe de
levedura.
Mesmo muitas cepas de leveduras lager estar no topo da colheita se a cervejaria tem os
fermentadores certas. Sudwerk Restaurant & Brewery, em Davis, Califrnia, iniciou a
produo em 1989, com equipamento de fermentao aberta da Alemanha. Em 1998,
mudou a maioria de seu equipamento de fermentao para cylindroconicals fechados, mas
manteve quatro fermentadores abertos. Os fabricantes de cerveja recolher com sucesso da
levedura a partir do topo por utilizao de uma p de ao inoxidvel em dois dias de
fermentao.
Outras boas top-cultivo estirpes ale so do tipo belga e cepas Weizen alemes. Estas
estirpes como a fermentar a partir do topo e no so muito floculento. Porque eles no so
muito flocculent, eles no so bons cepas corte inferior. Quando um fabricante de cerveja
repetidamente recolhe-los a partir do fundo do fermentador, ele est a recolher apenas o
mais floculao das clulas. Ao longo de apenas alguns repitchings, a populao de levedura
tende a tornar-se mais flocculent, abandono clara ao invs de permanecer em suspenso. A
menos que voc est preparando um kristallweizen, que certamente no uma
caracterstica desejada. Ao recortar topo voc pode obter muitas geraes fora destas
estirpes nicas com deriva mnima em nveis de floculao e de atenuao.
Figura 5.11: Dispositivo de corte superior Homebrew. Fotos cortesia de Samuel W. Scott.
O corte inferior
A maioria dos homebrewers e cervejarias nos Estados Unidos coletar levedura do fundo
fermentador. Mesmo que a cervejaria est fazendo ale usando cepas top-corte, raramente
as prticas de cultivo superior. uma pena, uma vez que o corte superior pode resultar em
uma excelente safra de levedura para o prximo lote.
corte inferior tornou-se popular porque fcil com o equipamento que est em uso hoje.
A maioria dos fabricantes de cerveja comerciais fermentar em fermentadores
cylindroconical, que so fechadas na parte superior. No interior do fermentador, a levedura
pode ou no pode subir para a superfcie quando a fermentao, mas o fabricante de
cerveja tem pouco acesso a ele se faz. Eventualmente, todas as leveduras comear a
resolver e que eles soltar e compacta no fundo cnico do fermentador, onde a cerveja pode
abrir uma vlvula para despejar o fermento. No entanto, toda esta facilidade tem um custo:
H uma elevada percentagem de trub em levedura recolhidas-bottom; em comparao com
o corte superior, leva mais tempo antes do fabricante de cerveja pode recolher o fermento;
a levedura est sob presso hidrosttica; maus e bons levedura est presente no cone; e
muitas vezes h refrigerao inadequada do cone.
Se a coleta de fundo to ruim, por que fazer isso? Bem, em alguns casos, o fermento
no so boas levedura top-colheita, mas ainda so muito bons em produzir o perfil de
cerveja desejado. Em outros casos, o projeto do equipamento requer a coleta de fundo.
Nestes casos, necessrio optimizar o momento e processo de colheita de levedura a partir
do fundo do fermentador para garantir a qualidade da cerveja ptima.
Navios de armazenagem
Idealmente, voc usaria levedura colhida imediatamente. Isto permite pouco tempo para
que as clulas morrem e enfraquecer e para o crescimento de bactrias. No entanto, se
formando no mesmo dia nem sempre possvel, como voc pode no ter os recursos para
preparar outra cerveja imediatamente. Um mtodo comum para o armazenamento de
fermento em fbricas de cerveja em 5 litros, barris de refrigerante de ao inoxidvel. Eles
esto facilmente disponveis, o tamanho conveniente para muitas cervejarias, voc pode
modificar a tampa para atender s suas necessidades, e desde que eles so construdos
principalmente de ao inoxidvel, um fabricante de cerveja pode limpar e higienizar-los
usando fontes existentes. Enquanto barris de soda funcionar bem para a maior parte dos
casos, eles no so o reservatrio de armazenamento de levedura ideal. Eles tm duas
falhas significativas. Uma delas que eles tm peas pequenas e juntas, que podem abrigar
bactrias e pode ser difcil de limpar perfeitamente. A outra que as tampas de ventilao
no de presso at atingir um nvel muito elevado. O dixido de carbono pode acumular-se
rapidamente em suspenso de levedura e presses to baixo quanto 20 libras por polegada
quadrada pode ser fatal para levedura. necessrio deixar a vlvula de presso aberta (e
coberto com papel alumnio) ou para desabafar e agitar o barril, pelo menos uma vez por
dia para limpar o excesso de presso manualmente.
Um navio pode ser melhor num balde de ao inoxidvel com uma tampa que se encaixa
sobre o rebordo do balde, que mantm as partculas em suspenso a partir de recolha de
onde podem cair para dentro do balde, quando o fabricante de cerveja abre. Homebrewers
s vezes pode encontrar verses menores desses navios em lojas de utenslios de cozinha
bem abastecido. A vantagem destes tipos de recipientes de armazenamento que eles
tambm so feitos de ao inoxidvel e de ventilao excesso de CO2 facilmente. Contanto
que a tampa no demasiado pesada ou selada por meio de um fixador de algum tipo, o
aumento de presso mnima. A desvantagem que estes navios podem ser difceis de
armazenar ou transportar, e muito mais fcil para bater a tampa fora acidentalmente e,
possivelmente, contaminar o campo.
A cervejaria pode usar outros recipientes para armazenamento de fermento. Alguns
cervejeiros evitar plstico, porque risca com facilidade e arranhes podem abrigar
bactrias, mas pode realmente ser uma boa escolha. Certifique-se de usar um de alta
qualidade, plstico de qualidade alimentar, tais como polietileno ou polipropileno, e no se
esquea de usar a embarcao s para armazenamento de fermento. A vantagem de
plstico que uma seco transversal da suspenso de leveduras visvel, para que possa
avaliar a condio e a quantidade de levedura de vista. Por exemplo, se voc retirar
suspenso de leveduras e muito congestionado, voc no vai saber o quanto de levedura
para usar no prximo lote sem contar com um microscpio. Usando um recipiente de
plstico transparente ou translcido para armazenar o fermento, voc pode ver o quanto
de levedura resolve fora e passo nesse sentido. Claro que, quando usando baldes de
plstico com tampas que vedam, voc vai precisar para desabafar-los tal como faria ao usar
barris.
Para o homebrewer, menor de meio litro, 1-, e recipientes de polipropileno de boca larga
de 2 litros tem uma vantagem na medida em que so baratas e a cerveja pode esterilizar em
autoclave. Muitos homebrewers usar vidro frascos de Mason ou gales para armazenar
levedura. Eles so baratos, fceis de higienizar, e ver a pasta em si muito mais fcil do que
atravs de plstico. No entanto, a grande desvantagem de vidro que ele to fcil de
quebrar; sob presso, pode ser perigoso. Se voc usar qualquer navio com uma tampa de
rosca, deixe a tampa solta. Envolver-se apenas o primeiro par de fios, que permite a
qualquer presso para escapar facilmente, mas seguro o suficiente que a tampa no vai
cair. Em todos os casos, possvel ganhar alguma proteco adicional cobrindo o topo do
recipiente com um pedao de folha de alumnio.
No importa qual o tipo de recipiente que voc usa, design-lo como uma "nica
levedura" container. Use um recipiente separado para cada estirpe e etiquetar cada
claramente. Armazenar o fermento em uma rea refrigerada limpa. Se voc puder, evite
usar a comida walk-in ou o refrigerador da famlia. Parece que cada cozinheiro, barman, ou
membro da famlia curioso vai abrir qualquer recipiente que diz: "NO ABRIR." Uma
geladeira dedicado, mesmo um usado, um bom investimento.
Um passo importante que muitos cervejeiros ignorar a documentao. Documentar
tudo e manter bons registros. Voc deve prestar especial ateno s temperaturas de
fermentao, horrios, padres de floculao e atenuao de cerveja a cerveja, e manter
essa informao juntamente com a levedura colhida. No se esquea de gravar dados, tais
como qualidades sensoriais da cerveja, fonte da levedura, nmero de geraes,
temperaturas de armazenamento, tempo de armazenamento, etc. Confie em ns; voc vai
esquecer que o fermento que e quando voc colhidos-lo, muito menos se a cerveja
atenuada corretamente.
Validade
Cada cervejaria pergunta: "Quanto tempo posso guardar minha matriz antes que seja
demasiado longe para reutilizar?" Isso depende de muitos fatores. Muitas vezes cervejeiros
vo perguntar, "I colhidos esta levedura" X semanas "atrs do nosso pale ale. OK para
reutilizar hoje "Voc realmente precisa ser capaz de responder a uma srie de perguntas
antes que voc possa adivinhar uma ideia aproximada da condio de levedura?:
levedura seca s dormente, no morto ou inerte. Armazenamento de fermento seco, a temperaturas de refrigerao
aumenta grandemente a sua vida de prateleira. Armazenadas a 75 F (24 C) de fermento seco perde cerca de 20 por
cento da sua viabilidade por ano. Armazenada sob temperaturas de refrigerao tpicas de 38 F (3 C) s perde cerca de
4 por cento da sua viabilidade por ano.
Reutilizar Yeast
Brewers sempre reutilizado levedura (repitched), muito antes de eles sabiam levedura foi
responsvel pela produo de cerveja. Na verdade, contnua re-utilizao de levedura de
cerveja levou impressionante variedade gentica de estirpes de cerveja, e sua
adequao para fabricao de cerveja. Com ateno cuidadosa colheita e re-uso, um
fabricante de cerveja deve obter pelo menos cinco a dez geraes de levedura de alta
qualidade a partir de cada cultura inicial. A chave para a reutilizao de levedura com
sucesso para colet-lo na fase ideal para que a tenso e para lanar uma contagem de
clulas consistente ou peso celular molhado. Consistncia ajuda a identificar problemas
antes que eles se tornam significativos.
Quando a produo de cerveja, de primeira gerao de fermentao com levedura
retirado do laboratrio normalmente leva um a trs dias mais tempo para concluir que um
repitch de levedura saudvel. A nova cultura de laboratrio tem de se adaptar a novos
ambientes. A mudana de uma cultura de laboratrio para uma cultura cervejaria
fermentao leva um par de geraes. A maioria dos fabricantes de cerveja denunciar o
fermento "se instala" e tem o melhor desempenho pela terceira gerao. Uma das
principais razes para isso que, quando a reutilizao de levedura, que geralmente se faz
isso com mais clulas, produzindo uma fase de latncia mais curto e fermentao mais
rpido em geral. A cultura de laboratrio tem com frequncia menos clulas, mas a
viabilidade e vitalidade tende a ser muito mais elevado. Brewers repitch com mais clulas
por causa de dois problemas. A primeira que a levedura colhida e armazenada muitas
vezes tm menor viabilidade de uma cultura de laboratrio, especialmente se o fundo
cervejeiro colheitas seu levedura. A segunda questo possvel a contaminao, uma vez
levedura colhida raramente so to limpo como uma cultura de laboratrio. Desde
condies estreis raramente existem em uma cervejaria, o campo pode aumentar na
contagem de levedura bacteriana e selvagem com cada passo subsequente. Por lanando
uma contagem de clulas mais elevada, a fermentao prossegue mais rpido, mas tambm
afecta o sabor. Grandes cervejarias muitas vezes se misturam a cerveja de primeira gerao
com outros lotes para manter sabores consistentes, mas a maioria das cervejarias menores
encontraram diferenas de sabor com cervejas de primeira gerao a ser dentro das
tolerncias gerais.
Brewers reutilizar leveduras no apenas para economizar dinheiro ou tempo, mas
tambm para criar melhores e mais interessantes bebidas alcolicas. Muitos acadmicos
dizem que as pessoas comearam a reutilizao de levedura no sculo XII, mas parece
improvvel que as pessoas faziam cerveja para 7.000 anos sem reutilizao de levedura;
talvez fosse apenas que ningum documentou-lo. A singularidade de levedura de cerveja de
hoje indica uma prtica muito mais antiga de reutilizao de levedura. Quanto tempo leva
para domesticar leveduras selvagens em levedura de cerveja? Deve ter levado milhares de
anos de reinoculao. Michael Lewis, professor de cerveja na Universidade da Califrnia,
em Davis, disse uma vez que ele pensou que seria uma tese interessante para um estudante
para determinar quanto tempo leva a domesticar a levedura de cerveja. (Conversa pessoal
com Chris White.) Se voc fosse comear com fermento recolhidos a partir de uma planta
no seu quintal, quantas geraes que seria necessrio para aqueles levedura selvagem para
assumir as caractersticas de levedura de cerveja de hoje? Talvez vamos descobrir algum
dia se algum leva Lewis acima em sua sugesto tese, mas por agora, temos de fazer um
palpite.
Parece razovel acreditar que civilizaes anteriores descobriram que alguns dos
melhores cerveja vem durante a segunda e terceira geraes de levedura, porque a
levedura passou por um processo de seleo natural, onde as clulas mais fortes
sobrevivem. Naquela poca, a primeira cerveja decente um fabricante de cerveja feita foi,
provavelmente, quando ele descobriu que ele poderia reiniciar a fermentao atravs da
reutilizao de alguns dos a cerveja de seu ltimo lote, mesmo que ele no tinha noo de
leveduras vivas.
Ento, quantas vezes pode um cervejeiro reutilizar um passo de fermento? A vida de
uma cultura de leveduras depende em parte das condies de fabricao de cerveja e a
estirpe envolvido. Por exemplo, um fabricante de cerveja usando fermentadores de hoje
geralmente pode reutilizar ale cepas de oito a dez vezes, enquanto lagers ir de trs a quatro
geraes. tanques de ao inoxidvel altas com fundo cnico tornar mais fcil para recolher
o fermento, mas eles colocaram presso sobre o fermento, reduzindo o nmero efetivo de
re-usos. Estes dias, mesmo que no use fermento para centenas de geraes por causa de
equipamentos modernos, que ainda deseja obter o melhor cerveja possvel, reutilizando o
fermento.
Enquanto muitos fabricantes de cerveja achar que pela terceira gerao sua matriz est
no seu melhor, alguns podem achar que seu levedura pra de funcionar. Muitas vezes, o
problema com tcnicas de coleta ou armazenamento inadequado. Isso no quer dizer que
a prpria levedura no pode ser um problema. Se a cultura de levedura no era saudvel ou
instvel das propagaes de laboratrio, ele pode mostrar problemas mais tarde na
fermentao. por isso que os laboratrios precisam ter cuidado ao fazer a propagao da
levedura. Eles devem prestar ateno rigorosa seleo, condies de crescimento, tempo
de propagao, e pureza aps a propagao. Quando um laboratrio no respeitar as
necessidades da levedura, fermentao pode prosseguir normalmente na primeira gerao,
mas ir apresentar problemas apenas um par de geraes mais tarde. Levedura funcionam
bem para as geraes, mas falhas ou potencial fraqueza nos procedimentos de levedura de
manuseio de uma cervejaria tambm pode mostrar depois de apenas algumas
fermentaes. No apenas um conjunto de melhores prticas, ea maioria dos fabricantes
de cerveja esto fazendo um bom trabalho, caso contrrio, mais cervejarias seria ter muito
mais frequentes e graves problemas. Ainda assim, problemas de levedura depois de vrias
geraes so muitas vezes devido a algo sob o controle da cervejaria, como o tempo de
armazenamento, condies de armazenamento, ou tcnicas de colheita.
Homebrewers tambm pode reutilizar o fermento com excelentes resultados, e para
alguns estilos de cerveja, reinoculao a nica maneira para fermentar-los
adequadamente. Muitos homebrewers entrar em levedura reutilizao no para poupar
dinheiro, mas sim porque reinoculao e fermentao adequada pode fazer a diferena
entre uma boa cerveja e excelente cerveja. Claro, se voc no prestar muita ateno para os
fundamentos do saneamento, coleta, tempo de armazenamento, e as taxas de pitching,
levedura re-uso a mesma probabilidade de terminar em fracasso, uma vez que sucesso.
O lugar onde a grande maioria dos homebrewers que comeam dar errado a falta de
saneamento. Eles acreditam que sua tcnica impecvel, mas a realidade est muito
aqum. Em muitos casos, a diferena entre maus e bons homebrew apenas saneamento.
(Isso se aplica a muitas cervejarias artesanais de inicializao tambm.) No ponha a culpa
em seu levedura, equipamento ou receita se o problema o seu saneamento. Mesmo se
voc acha que o saneamento no o culpado, comear por rever os seus procedimentos
sanitrios e prestar ateno estrita ao detalhe.
tcnica de coleta outra rea problemtica para muitas homebrewers. A colheita de
leveduras muito cedo, recolhendo apenas o fermento altamente floculante um erro
comum. Outros homebrewers descartar a maior parte do fermento em uma "transferncia
para o secundrio" e, em seguida, recolher apenas os menos flocculent e levedura mais
attenuative. O resultado uma cultura que na prxima reutilizao no floculam em tudo.
Pense sobre o que a presso seletiva voc est introduzindo quando voc recolher o
fermento para reutilizao. (Consulte a "Coleo de levedura,"pp. 148-156.)
tempo de armazenamento tambm crtica e uma rea comum para homebrewers a
tropear. muito fcil para atrasar a fabricao de cerveja para uma semana ou duas,
quando voc no preparar para a vida. Lembre-se que fungos so organismos vivos. Deix-
los morrer de fome durante um ms ou mais, no a melhor maneira de trat-los. Se voc
quiser reutilizar fermento, forar-se a preparar novamente dentro de duas semanas, se no
mais cedo. Seu levedura e sua cerveja ir apreci-lo.
Um nmero de cervejeiros adoptaram a prtica da transferncia da cerveja a partir de
um fermentador no final da fermentao e, em seguida, adicionar um novo lote de mosto
em cima do bolo de levedura. Esta uma prtica ruim. Pode esta prtica fazer uma boa
cerveja? Absolutamente. Ser que vai fazer a melhor cerveja possvel? Absolutamente no.
A levedura no final da fermentao de levedura no apenas saudvel. H uma abundncia
de clulas mortas presente, bem como todo o material pausa e pedaos de lpulo a partir
do mosto anterior. Voc deve coletar o fermento, olhe para a populao, remover as clulas
mortas e material de nonyeast por lavagem, e depois reutilizar apenas a quantidade
adequada de clulas no prximo lote. No seja preguioso. Sempre limpar e higienizar o seu
fermentador entre os lotes, e sempre garantir que voc est lanando o nmero correto de
clulas para a cerveja que est se formando. o crescimento da levedura importante para o
sabor da cerveja, e o excesso de lanamento (especialmente com trub excessiva) pode ter
um efeito negativo.
Idealmente, voc s quer reutilizar levedura que mais do que 90 por cento vivel, mas
a maioria dos fabricantes de cerveja apenas compensar a menor viabilidade usando mais
lama. Isto pode ser bem sucedido, mas tambm pode levar a problemas fermentaes. A
sade geral da levedura pode ser baixo, de modo que a pasta pode no produzir o intervalo
esperado de compostos de sabor e aroma e no podem atenuar corretamente,
independentemente de quanto o fermento que voc adicionar. Para verificar a viabilidade,
uma cervejaria precisa de um microscpio, mas mesmo sem um, voc pode, pelo menos,
realizar um teste rpido e fcil. Comeando o dia antes da infuso, adicione 10 ml de
suspenso de levedura grosso para 1 litro de mosto. Prestar ateno ao incio da
fermentao; que est a verificar para ver se a fermentao comea com um tempo normal
lag para que a tenso (4 a 12 horas). Se o intervalo de tempo maior do que voc j viu em
fermentaes anteriores com que a tenso em sua cervejaria, voc pode tentar compensar
usando mais fermento. Claro, usando esta abordagem tambm afetar carter de
fermentao. Reutilizar uma cultura de baixa viabilidade acrescenta um nmero
significativo de clulas de levedura mortas ou a morrer, que podem afetar carter cerveja.
Se o teste mostra um intervalo de tempo muito longo (mais de 24 horas), melhor do que a
cultura demonstrar tentar adicionar levedura o suficiente para compensar. Voc deve
sempre manter o fermento extra, no utilizado, saudvel na mo no caso de voc encontrar
um problema com o fermento que voc pretende usar.
Outra boa prtica monitorar o pH de suas pastas armazenados. Se voc tiver medido
um aumento de mais de 1,0 pH desde a colheita da levedura, que indica morte celular
significativa, e voc deve descartar a lama.
Para testar a contaminao, necessrio para a chapa a pasta na mdia especializada
trs a cinco dias antes da infuso. Voc deve verificar a pasta de bactrias aerbias,
bactrias anaerbias e leveduras selvagens. Dos trs, bactrias anaerbias so os mais
difceis para um cervejeiro de erradicar. As bactrias anaerbias mais comuns so as
bactrias de cido lctico Lactobacillus e Pediococcus. Se contagem de bactrias so
superiores a 1 por mililitro, e leveduras selvagens mais do que 1 por 0,1 mililitros, voc
no deve amadurecer com essa cultura de levedura. Ns cobrimos os procedimentos para
estes testes em "Yeast and Beer Quality Assurance" (p. 209).
Se voc tiver armazenado o fermento por duas semanas ou mais, mas ainda testa limpa,
voc pode querer considerar a revitalizao da levedura antes de usar. Veja a seo sobre
"Revitalizao" (pp. 167-168) para detalhes.
Viabilidade e vitalidade
Como as cervejarias medem a qualidade do fermento? Brewers usar dois termos para
discutir a sade de levedura: viabilidade e vitalidade. Usamos a viabilidade a longo prazo
para se referir a levedura estar vivo ou morto, e expressar esta como uma percentagem de
clulas vivas na populao. Se todas as clulas de uma cultura de levedura est vivo, ns
chamamos isso de viabilidade 100 por cento. Se metade do fermento em uma cultura viva,
que a cultura apenas 50 por cento vivel.
Mencionamos anteriormente que, devido a consideraes de sabor, voc no deve
reutilizar o fermento, a menos que a viabilidade de 90 por cento ou mais. importante
notar que alguns mtodos de teste de viabilidade so imprecisos quando a viabilidade for
inferior a 90 por cento, de modo que a viabilidade real de uma cultura antiga pode ser
questionvel. O que faz a viabilidade nos dizer sobre a condio das clulas de levedura em
uma populao? Que nos diz se a levedura saudvel ou no? No, ele s nos diz se a
levedura est vivo ou morto.
Se queremos saber a condio de fermento, chamamos isso de vitalidade. Vitalidade
uma medida da actividade metablica da levedura. Se uma cultura de levedura muito
saudvel, forte e pronto para a fermentao, chamamos isso de alta vitalidade. Se as clulas
so antigos, cansado, faminto, e no capaz de boa fermentao, chamamos isso de baixa
vitalidade. Vitalidade correlaciona-se com o desempenho de fermentao. Voc quer
levedura de alta vitalidade para a fermentao. Enquanto voc pode superar inferior a
viabilidade ideal, com um aumento na quantidade de fermento, voc no pode superar a
baixa viabilidade com mais clulas. Antes de usar clulas de baixa de vida, voc deve fazer
um esforo para devolv-los a um estado saudvel.
Os mtodos para a viabilidade celular testes e centro de vitalidade em torno de trs
princpios gerais: perda da capacidade de replicao, perda de atividade metablica e
danos s clulas. Ns vamos cobrir os procedimentos de acesso viabilidade e vitalidade em
"Easy seu prprio laboratrio de levedura Feito", mas importante para introduzir o
conceito aqui porque voc deve levar em considerao a sade da levedura quando
reinoculao. Dependendo do nvel de sade de levedura, pode ser necessrio para lanar
mais fermento no incio da fermentao, oxigenar mais, ou talvez executar uma partida de
levedura ou propagao para revitalizar as clulas.
Figura 5.13: Mtodos para a viabilidade e testes de vitalidade.
clulas de levedura difcil, com corantes vitais o padro para o teste de viabilidade.
colorao com corante vital testa a integridade da parede celular, bem como a capacidade
da clula para reduzir ou extrudir o corante e permanecer incolor. O padro para avaliar a
viabilidade do fermento desde 1920 tem sido a colorao azul de metileno. No entanto, os
pesquisadores questionam se este o melhor mtodo, dada a sua fraca reprodutibilidade e
impreciso com viabilidades abaixo de 90 por cento. Alguns investigadores introduziram
outros corantes, tais como violeta de metileno, como uma alternativa a colorao
melhorada, ao passo que outros tm explorado modificando o mtodo de azul de metileno
por adio de citrato para melhorar a preciso.
Pode haver casos em que voc medir a viabilidade de mais de 90 por cento em seu
campo, mas voc ainda encontrar uma fermentao que se arrasta lentamente ao longo.
Como isso possivel? perfeitamente possvel para um campo para medir alta viabilidade
s para ter uma fermentao fraca. No se esquea de levedura pode ter uma alta
viabilidade, mas ainda tem uma vitalidade baixa. Se a condio fisiolgica (vitalidade) da
levedura pobre, voc provavelmente vai ter m fermentao. Infelizmente, a maioria dos
testes de vida ainda so caros, demorados, controverso, e no amigvel. Um mtodo
simples para determinar se um campo de fermento vivel lanar uma poro ( taxa de
pitching apropriado) em uma fermentao teste porte lab-. Se a fermentao comea
dentro do tempo esperado, em seguida, a levedura o mais provvel de vitalidade
suficientes para utilizao num lote de cerveja.
revitalizao
Se o teste revela que o fermento baixa em vitalidade aps o armazenamento, voc pode
revitalizar-lo com a erva fresca. Geralmente, no recomendamos a revitalizao levedura
esgotados por ms condies de armazenamento ou armazenamento de longo prazo. A
cervejaria comercial deve sempre obter uma nova cultura de alto vitalidade em vez disso.
Certamente, um homebrewer tem um pouco mais liberdade, se ele ou ela est disposto a
aceitar menos do que os resultados ideais. Para revitalizar uma cultura de leveduras:
1. Voc pode iniciar este processo na manh do dia de fermentao. Em primeiro lugar, determinar a quantidade de
fermento que voc precisa para lanar e coloc-lo em um recipiente adequado, tal como um vaso inoxidvel.
2. Que o aumento de temperatura do fermento a 70 a 75 F (21 a 24 C). Se voc precisa aplicar calor, evitar a
aplicao de altas temperaturas ou irregulares.
3. Adicionar assepticamente estril (ou o mais prximo possvel esterilizada), de alta densidade (1,080 SG, 20 P)
do mosto a um caudal de 0,50 ml para cada 10 ml de volume de suspenso de levedura. Por exemplo, voc
poderia adicionar 10 ml de mosto para 200 mililitros de suspenso de levedura.
4. Manter a 70 a 75 F (21 a 24 C) durante 4 a 12 horas sem arejamento ou de agitao.
5. A levedura viva, ativa deve virar a leitosa mosto. As clulas mortas e outras matrias nonyeast deve cair para o
fundo do recipiente. Decantar a parte ativa, leitoso em seu mosto, deixando para trs as clulas que afundaram
para o fundo.
Lavagem
A pergunta que muitos homebrewers tm : "Como fao para selecionar apenas o melhor
levedura se colhendo todo o contedo do fermentador?" A resposta est na lavagem de
levedura. Enquanto ele no pode substituir completamente a seleo da levedura ideal com
uma p, ele pode ajudar a separar o trub, clulas mortas e lcool a partir do seu campo.
Enxge tambm pode ser til em ambientes comerciais, especialmente para levedura
colhida de uma cerveja de alta gravidade. Levedura no armazenam bem em um ambiente
de alta lcool. Enquanto voc geralmente no quer reutilizar fermento das cervejas de alta
gravidade (acima de 1.070), algumas cervejarias belgas e pequenas cervejarias comerciais
no tm escolha, porque isso tudo que eles fazem!
Figura 5.14: Fermento enxaguar com um passo relativamente limpa de levedura. Comeando com uma suspenso colhidas
que se estabeleceu ( esquerda) decantar a cerveja, adicionar novamente gua estril, agitar vigorosamente e, em seguida,
deixar repousar durante 10 a 15 minutos. Uma camada de material forma nonyeast no topo e abaixo dele uma grande
camada de levedura limpos (meio). Na parte inferior, a camada de clulas mortas, pedaos de lpulo e outras trub resolve
fora ( direita). Decantar a camada superior e lanar a camada do meio em seu mosto.
Depois de ter colhido o fermento, coloque-o em um recipiente estril ou higienizado
grande o suficiente para os slidos de levedura mais pelo menos quatro vezes mais gua
estril. Taller contentores, mais estreitas permitir uma melhor separao. Quanto maior for
a proporo de gua para slidos de levedura, o que mais fcil para separar o fermento.
Adicionar gua fria e estril para os slidos de levedura, mas reter cerca de 10 por cento
espao superior no recipiente. Este espao superior ajuda a quebrar os flocos de levedura e
para misturar a levedura com a gua. Selar o recipiente e agitar vigorosamente. A ideia
quebrar os flocos. Depois de alguns minutos de agitao, definir o recipiente baixo e deixe o
fermento e trub settle. Dentro de minutos voc ver uma pequena camada de clulas
mortas, leveduras marrom, e pedaos de lpulo para liquidar o fundo. A camada de cima
que deve ser o maior, com uma camada de creme de levedura e gua. Se voc esperar mais
tempo, uma camada comea a se formar na parte superior que principalmente gua com o
mais leve de clulas, protenas e outras substncias. Depois de ver alguns estratificao,
geralmente dentro de 10 minutos, descarte a camada superior aquosa, decantar a camada
intermediria da boa levedura para outro recipiente estril ou higienizadas, e descartar a
camada inferior. Se voc achar que a levedura ainda parece ter quantidades excessivas de
trub, voc pode repetir esse processo quantas vezes for necessrio. No entanto, evite
sobrecarregar o seu levedura sem razo. Quanto maior o nmero de transferncias, maior
o contato com mais recipientes, mais a exposio aos contaminantes do ar, os mais
bactrias e leveduras selvagens que voc est adicionando ao seu campo.
Lavando
A lavagem muito diferente de enxaguar. Na lavagem de levedura, voc est usando
diluio de uma pasta para incentivar uma melhor estratificao do trub e fermento, o que
lhe permite separar os dois. Em levedura de lavar roupa, que est a utilizar acidificao ou
outros meios qumicos para reduzir o nmero de bactrias activas, enquanto no danificar
muitas clulas de levedura. lavagem cida tem efeitos diferentes em diferentes cepas de
leveduras, e faz reduzir o desempenho da levedura e viabilidade. Recomendamos reiniciar
a partir de uma cultura fresco quando confrontado com um campo contaminado.
lavagem cida no remover completamente as bactrias. No uma soluo completa, e
voc no deve confiar nela para limpar um campo contaminado. Considere-a apenas como
uma medida preventiva contra a pequenas quantidades de bactrias. frequentemente
menos eficazes contra bactrias produtoras de cido lctico e ineficaz contra levedura
selvagem e do molde. Aps um ou dois repitchings, o nmero de bactrias pode, mais uma
vez atingir nveis que afectam o sabor.
Estes so os passos para a lavagem cida:
1. Colocar o fermento para 36 a 40 F (2-4 C), e manter esta temperatura durante todo o processo.
2. Determinar o quanto de levedura que voc precisa para a fermentao, e coloc-lo em um recipiente adequado,
tal como um vaso inoxidvel. Iniciar o procedimento de lavagem cida 120 minutos antes da hora que voc
armar o fermento.
3. Adicionar cido de qualidade alimentar fosfrico, misturando muito bem, at que o pH da suspenso situa-se
entre 2,0 e 2,5 de pH. Voc deseja manter o fermento neste pH durante 60 a 90 minutos, mexendo
continuamente.
4. Adicione toda a mistura para o fermentador. Voc quer alimentar o fermento com a erva mais rapidamente
possvel.
Adicionando levedura frio para mosto quente pode resultar em choque de temperatura,
mas importante que voc mantenha a lavagem cida frio ou ele ir danificar o fermento.
lavagem cida adequada em si j provoca danos levedura, mas deixando que o aumento da
temperatura aumenta o impacto sobre as clulas.
lavagem cida tem sido em torno de algum tempo, mas uma alternativa mais recente,
mais eficaz lavar com dixido de cloro. A maioria das cervejarias usar DioxyChlor de
Birko ou Star-Xene Five Star. Algumas lojas de homebrew comearam transportando
comprimidos dixido de cloro, que so uma forma conveniente para homebrewers.
Independentemente do produto que voc usa, voc deve seguir as instrues do fabricante
para a lavagem de levedura. Aqui est uma viso geral:
1. Mais uma vez, trabalhando a uma temperatura de 36 a 40 F (2-4 C), acidifica-se a gua at pH 3, utilizando um
cido de qualidade alimentar.
2. Adicione DioxyChlor ou Star-Xene gua acidificada. Voc est direcionando uma concentrao de cloreto de
sdio de 20 a 50 ppm, uma vez misturado com a suspenso de levedura voc est tratando.
3. Aps 15 minutos, adicionar suspenso de levedura voc pretende lanar, misturando bem.
4. Deixe a sentar-se para um mnimo de 30 minutos.
5. Adicione a mistura inteira para o fermentador.
transportar Yeast
Para a maioria dos fabricantes de cerveja, um fator crtico que raramente pensar "o que
acontece ao seu fermento em entre o laboratrio ea cervejaria?" Obviamente, o fermento
vivo e saudvel quando sai do laboratrio, mas ele comea a deteriorar-se e morrer no
transporte. Transporte leva tempo, e atrasos s vezes acontecem, o que nunca uma coisa
boa para uma cultura viva. A temperatura tambm um factor de transporte, com
temperaturas quentes acelerando o processo metablico da levedura e temperaturas muito
baixas, possivelmente, as clulas congelao. Tudo isso faz chegar levedura para a
instalao de produo de cerveja crtico para cervejarias de todos os tamanhos se a
levedura vem do seu prprio laboratrio ou de um terceiro.
Grandes cervejarias abordar estas questes em uma srie de maneiras. Anheuser-Busch,
por exemplo, lojas e cresce toda a sua levedura em um local, em parte, para fins de
segurana, e os navios a levedura lquida para cervejarias satlite em todo o mundo. Outros
grandes cervejarias propagar fermento em vrias instalaes, tornando o transporte menos
de um problema, mas criando o potencial para qualidade varivel levedura de lugar para
lugar.
laboratrios de propagao de levedura enviar levedura para mltiplos e variados
clientes em todo o mundo, tornando o transporte no apenas um aspecto crtico do
negcio, mas tambm uma dor de cabea incrvel, s vezes. Sucesso no transporte de
leveduras depende de vrios fatores, incluindo a velocidade de entrega, cruzando
fronteiras internacionais, os regulamentos do Estado e / ou nao, e a taxa de atrito de
levedura, que depende da tenso e da sade inicial da levedura.
Se voc precisar enviar fermento, existem passos que voc pode tomar para garantir
suas chances de transporte bem sucedido. Comece com o fermento mais saudvel possvel.
Fermento com reservas de glicognio mais elevados usar esse glicognio para ajudar a
suportar os rigores do transporte. Deixando o seu fermento na etapa de propagao ou de
fermentao por um perodo adicional de oito a 12 horas aps a gravidade terminal
alcanado permitir o fermento para reconstruir suas reservas de glicognio.
Tentar enviar a menor quantidade de clulas possveis e ter o destino crescer a levedura.
Os menos clulas que voc enviar, o mais barato, embalagem e transporte. inclinaes de
envio ou placas podem ser bem sucedido, porque a levedura tem um pronto fornecimento
de alimentos para ajud-los atravs da viagem, e o peso total mnima e no probabilidade
de fugas. Completamente isolar suas expedies contra flutuaes de temperatura. Em
outra coisa seno o tempo frio, adicionar pacotes de congelador de gelo suficientes ou
compressas frias qumicos para manter a temperatura mais baixa durante todo o
transporte possvel. melhor evitar a utilizao de gelo seco, uma vez que ir congelar a
levedura. Como voc pode imaginar, mantendo um grande frio suspenso pode ser
problemtico. A massa trmica maior no ajuda a lama ficar legal, mas concentraes
densas de levedura construir rapidamente o calor interno.
A temperatura um grande problema com o fermento de transporte que voc pode
querer anexar um tempo-temperatura ou um indicador de congelamento para o recipiente
de levedura. Pode dizer-lhe que tipo de temperaturas a cultura vivida no seu trnsito. Os
indicadores de temperatura-tempo de mostrar o tempo que estava a uma temperatura
superior ao ponto de controlo. indicadores de congelamento mostrar baixas temperaturas
para um determinado perodo de tempo, para que possa ver se era o suficiente para
congelar a levedura ou no. O valor destes indicadores, em um ou dois dlares cada um,
que eles vo te dizer se a cultura questionvel antes de voc perder um lote de mosto. Se
voc tem uma leitura positiva, voc deve validar a sade e viabilidade da cultura antes do
uso.
Recomendamos embalagem todas as culturas de levedura em recipientes inquebrvel.
Ns preferimos plstico, como o ao inoxidvel pode dent, vazamento, e pesado para
enviar. Garantir a abertura do recipiente para o transporte, e coloc-lo dentro de um saco
de plstico para pegar todas as fugas acidentais durante o transporte. Use o mais rpido
meio de transporte possvel. Se o seu carregador permite-lo, use "Cultura Viva" e "Proteger
da congelao e ao calor" etiquetas na caixa. Se o plano para o transporte atravs do seu
prprio veculo em uma base regular, em seguida, investir em termeltricas caixas de gelo
"auto-arrefecimento", que funcionam com energia de 12 volts, pode valer a pena. Apenas
30 minutos a temperaturas elevadas, tais como um carro estacionado ao sol, podem reduzir
drasticamente a viabilidade da cultura.
6Your prprio laboratrio Yeast Made Easy
Qualidade Desde o incio
Se voc fazer cerveja para si mesmo ou da fermentao de vender para milhares de
consumidores, voc quer fazer o melhor cerveja possvel. Quando Sierra Nevada Brewing
Company construiu sua primeira cervejaria em 1980, ele no tem um monte de dinheiro ou
equipamentos de fabricao de cerveja sofisticada. A cervejaria s fez uma pequena
quantidade de cerveja no primeiro ano, mas uma coisa que no poupam em qualidade foi-
que tinha um laboratrio desde o incio (Grossman, 2009).
Muitas pequenas cervejarias considerar um laboratrio muito avanado ou
desnecessrio quando eles abrem. Eles dizem a si mesmos que eles vo adicion-lo mais
tarde. Mas quando? Quando atingem 3.000 barris, 10.000 barris, 100.000 barris? Sierra
Nevada percebeu que se prestou ateno qualidade, desde o incio, faria melhor cerveja.
Logo no incio, a cervejaria medida contaminao e oxignio captador mas usou isso como
uma base para adicionar novas etapas de controle de qualidade medida que crescia.
Sierra Nevada tem agora trs laboratrios e reinveste continuamente em equipamentos de
laboratrio high-end e de pessoal.
Ao longo dos anos, temos ouvido de muitas startups cervejaria que eles querem fazer
uma cerveja to bom quanto Sierra Nevada Pale Ale, mas eles raramente conseguem. Por
qu? Uma razo que a maioria no coincidir com o rigoroso controle de qualidade
praticado em Sierra Nevada.
A criao de um laboratrio e desenvolver um programa de controle de qualidade
robusta no precisa ser complicado. Na verdade, algumas prticas de laboratrio muito
simples podem melhorar drasticamente a sua qualidade de cerveja sem custar um monte
de tempo ou dinheiro.
Configurar o Lab
Existem dois principais papis para um laboratrio de cervejaria: microbiologia e anlise
analtica. Microbiologia no laboratrio cervejaria centra-se na cultura de levedura e de
garantia de qualidade tanto para levedura e cerveja. anlise analtico envolve testar os
ingredientes crus e cerveja terminou por parmetros, como a frescura, nveis de lpulo, cor
da cerveja, e muito mais. A maioria das grandes cervejarias tm a sua microbiologia
aperfeioado e concentrar espao de laboratrio adicional e pessoal na anlise analtica.
Eles precisam se certificar de que eles esto mantendo a mesma consistncia de lote para
lote e de pacote para pacote. Depois de ter dominado as necessidades microbiolgicos da
sua cervejaria, consistncia depende da anlise analtica.
cervejarias artesanais e cervejeiros caseiros tendem a se concentrar mais em
microbiologia, porque este tem mais impacto sobre as suas cervejas. Os consumidores
podem aceitar alguma variabilidade com cerveja artesanal de lote para lote, mas no falhas
na microbiologia. O controle sobre microbiologia pode ser mais difcil quando a produo
de cerveja em restaurantes, cozinhas, armazns abertos, ou seu quintal.
Consideraes ambientais
O ambiente de um laboratrio de levedura crtica para a produo de culturas de
qualidade e reduzindo o risco de introduzir contaminantes. O aspecto mais importante a
criao de um espao com um ambiente de ar limpo. Um laboratrio avanado muitas
vezes definido como uma "sala limpa": Ele est fechado, e o ar fornecido atravs HEPA ou
ULPA unidades de filtrao que eliminam os microorganismos no ar e proporcionar uma
presso positiva, mantendo-se fora do ar no filtrado. capelas de fluxo laminar oferecem
proteo semelhante em um pacote menor, proporcionando uma bancada continuamente
banhado em ar limpo. Quando voc no pode empregar uma sala limpa ou bancada, voc
ainda pode tomar medidas para melhorar o seu ambiente de laboratrio.
Muitos cervejeiros artesanais e homebrewers no tm um espao de laboratrio
dedicado. Enquanto isso no ideal, muitas vezes possvel encontrar um local na casa ou
cervejaria e torn-lo aceitvel. Seu laboratrio pode estar em qualquer lugar, desde que
voc est ciente de possveis contaminantes e pode controlar sua fonte. Rascunhos, fs de
sopro, armrios areos empoeirados e sujos bancadas so todas as ameaas tcnicas de
cultura pura. Todas as superfcies de laboratrio deve ser limpa o suficiente para comer
fora e livre de coisas que vo ficar no caminho. Nem sempre precisa ser livre de poeira,
como voc pode limpar a rea com lcool isoproplico a 70% antes de trabalhar, mas tenha
cuidado, uma vez que voc tambm vai precisar para trabalhar com uma chama aberta.
Figura 6.1: A corrente ascendente de um bico de Bunsen cria uma zona de trabalho limpa.
Antes de trazer para fora todas as culturas e comear a trabalhar, garantir que voc
tenha removido a fonte de quaisquer correntes de ar. Fs e vento pode soprar
contaminantes do ar na rea de trabalho. Feche janelas e desligue fs na rea, incluindo
aquecimento central e ar. Mesmo que voc j eliminou a circulao do ar, bactrias e
leveduras selvagens ainda esto descendo constantemente. Para contrariar esta situao,
acender uma chama, como uma lmpada de lcool ou um bico de Bunsen, e trabalhar perto
da corrente ascendente que cria (Figura 6.1). Esta uma barreira barato e eficaz que
empurra bactrias e leveduras para cima e longe culturas e meios estreis.
O fogo uma ferramenta muito til, porque podem matar microorganismos em contato.
Flamejante a abertura de um recipiente de vidro por passagem atravs de uma chama mata
os microorganismos sobre e em torno da abertura. Voc deve obter o hbito de flamejante
tanto a tampa e a abertura de um recipiente imediatamente aps a abertura e
imediatamente antes de selar.
Tenha cuidado ao trabalhar com uma chama aberta, e no exagere; alguns passes
rpidos atravs da chama ir fazer o truque. tubos de ensaio de vidro e frascos Erlenmeyer
so geralmente feitos de Pyrex ou Bomex e ir suportar o aquecimento, mas tenha cuidado
com o outro vidro e peas de plstico e os dedos!
Claro, existem outras consideraes de como voc se aproxima de seu espao de
laboratrio e trabalho. Certifique-se de que voc tem iluminao adequada, porque grande
parte do trabalho que voc vai fazer com pequenas culturas. Manter o cabelo e roupas
para longe do trabalho e quaisquer chamas abertas. Um jaleco adequada de ajuste no
apenas uma questo de moda. Ele mantm materiais de laboratrio de suas roupas e
mantm o material de suas roupas fora da superfcie do trabalho. Voc tambm deseja
configurar em uma rea onde h o mnimo de trfego de p, vibrao e rudo. Pessoas
andando atravs de uma rea gerar correntes de ar, girando-se o p de superfcies.
Vibrao e rudo torn-lo difcil de trabalhar. Excessivamente altas ou baixas temperaturas
no apenas torn-lo desconfortvel para trabalhar, mas tambm pode tornar mais difcil
trabalhar com certos meios de comunicao.
Vamos recapitular os aspectos importantes de sua bancada:
limpeza geral
Nenhuma ou muito baixo fluxo de ar
trfego de p Minimal, rudo e vibrao
Use roupas adequadas e manter o cabelo para trs.
Temperaturas de iluminao e ambientes adequados
Limpe as superfcies antes de iniciar o trabalho.
Fornecer um ambiente livre de micrbios dentro do espao de trabalho.
Segurana Lab
Durante o manuseamento e transferncia de culturas de leveduras vivas, tcnicas de
trabalho sanitrias exigem frequentemente a utilizao de chamas e / ou de produtos
qumicos. Prestando ateno rigorosa segurana no apenas para o benefcio do
fermento, mas tambm para o indivduo que trabalha no laboratrio. Falta de ateno
segurana no laboratrio pode rapidamente levar a ferimentos ou morte. Se no tiver
certeza de como trabalhar com segurana, voc no deve tentar o trabalho.
Na cervejaria e laboratrio, ns geralmente usam vrios produtos qumicos para
esterilizar recipientes e equipamentos antes de transferir cultura. Estes podem incluir
iodoforo, solues clorados e bromados, solues de cido peractico, e lcoois
(isopropanol ou etanol). Pelas mesmas razes que estes produtos qumicos so eficazes
como sanitizantes, eles podem ser perigosos para os seres humanos. importante seguir as
instrues do rtulo de usar esses produtos qumicos com segurana e para garantir a sua
eficcia mxima, como desinfetantes. Considere o seguinte:
S use produtos qumicos devidamente rotulados. Leia os rtulos ou fichas de dados de segurana de material
(MSDS) para compreender os efeitos na sade de desinfetantes utilizados no laboratrio. Alguns so riscos de
inalao; outros podem causar efeitos irritantes ou corrosivos para os olhos e pele. Garantir a ventilao e
utilizao de equipamento de proteco individual adequado. Manter cpias de MSDS para todos os produtos
qumicos.
Leia os rtulos para evitar a mistura de produtos qumicos incompatveis e evitar armazen-los em recipientes
com os quais eles no so compatveis. Se voc transferir qualquer quantia a um recipiente secundrio, garantir
que voc rotular adequadamente esse recipiente bem. Isto evita confuso e permite a segregao de materiais
incompatveis.
Seguir as instrues do fabricante para a diluio. Utilizao de algumas substncias qumicas em plena fora
pode ser mais perigosa, no pode aumentar a eficcia, e pode aumentar os custos.
Certifique-se de eliminao adequada dos recipientes e usado solues de higienizao. Estes requisitos iro
variar dependendo dos requisitos legais por localizao.
Certifique-se de manter os recipientes lquidos a granel em um local separado do estoque de trabalho. Um local de
armazenamento aprovado fundamental quando se trabalha com volumes maiores.
Certifique-se de que voc adequadamente avaliado extintores de incndio no pronto em reas onde voc usar ou
armazenar lquidos inflamveis. Saber o procedimento para activar o extintor de incndio antes de ocorrer um
incndio.
Trabalho em uma superfcie selada, resistente ao fogo, sem armrios baixos ou outros custos indiretos de material
inflamvel.
recipientes de metal so preferidos para a manipulao e o armazenamento da maioria dos lquidos inflamveis,
uma vez que pode ser ligada terra para evitar fascas estticas durante a transferncia de lquido, e eles no so
to susceptveis aos efeitos de um incndio externo.
Assegurar uma ventilao adequada ao dispensar ou usar lquidos inflamveis. Isto ajuda a proteger o utilizador
da inalao de vapores e reduz a probabilidade de criao de vapor que podem resultar em uma atmosfera
inflamvel.
Fontes de ignio, tais como fascas ou chama aberta, no deve estar presente onde voc usa ou dispensar lquidos
inflamveis. Voc deve tomar cuidado especial se esterilizao chama e inflamveis desinfetantes lquidos so
usados em estreita proximidade.
Eliminar ou reduzir a presena de materiais combustveis, como cortinas, toalhas de mesa, bancada de laboratrio
absorventes, lenos, contentores de lixo, etc.
Certifique-se de armazenamento e descarte de materiais utilizados para trabalhar com ou limpar lquidos
inflamveis adequada. trapos inflamveis encharcada de solventes ou toalhas de papel em um cesto de lixo so um
perigo grave incndio.
Equipamentos de laboratrio
Setup Lab
Equilbrio, feixe triplo ou eletrnico, quando se trabalha com quantidades sub-gram
Pesar papel ou pesar barcos
agitador ou mexer placa Orbital com barras de agitao magnticas
Microondas
tocha de propano
bico de Bunsen w / fonte de gs, lmpada de lcool, ou tocha de propano
inoculao circuito para a transferncia de pequenas quantidades de clulas a partir de um meio para outro.
Disponvel como esterilizado, um tempo de uso ou como um lao de arame reutilizvel feita de ao inoxidvel,
cromo-nquel, platina ou outro fio. Voc esterilizar as alas de metal por chamas antes de cada transferncia. loops
de metais requerem arrefecimento antes da transferncia, o que pode ser feito por imerso do lacete em gua
estril ou tocando no circuito quente para uma superfcie de gar antes de escolher-se uma colnia. Loops vm em
diferentes tamanhos e espessuras de arame. aquece fio mais fino e esfria mais rpido do que um fio mais grosso.
Alguns laos tem dois tamanhos diferentes sobre as extremidades opostas de um nico identificador. Em geral,
voc usaria os loops maiores para placas e os laos menores ou fios para inclinaes.
Balces de tubo de ensaio
tubos de ensaio com tampa de rosca (vidro e estril descartvel, 16 x 120 mm, 16 x 150 mm)
placas de Petri estreis (100 x 15 mm e 60 x 15 mm)
bales Erlenmeyer (50 ml, 100 ml, 250 ml, 500 ml, 1 L)
garrafas de vidro Pyrex (500 ml e 1 L)
cilindros graduados (100 ml, 500 ml)
proveta graduada (1 L)
rolhas de algodo respirvel ou espuma
pipetas estreis (1 ml, 10 ml)
pipetas de vidro Pasteur ou pipetas de transferncia estreis
lmpada pipeta ou pipeta
termmetro Lab
Cotonetes de laboratrio
envoltrio Parafilm-laboratrio usado para manter pratos e inclinaes de secar
Papel alumnio
Vesturio (jaleco, sapato cobre, tampa de cabelo, mscara, proteco para os olhos)
Luvas de borracha nitrlica
culos de segurana
luvas de isolamento trmico de proteo
autoclave ou panela de presso. Usado para esterilizar os equipamentos e meios de comunicao utilizados em
cultura
fita indicador de Esterilizao
medidor de pH ou pH tiras (medidor de pH requer solues de calibrao e solues de limpeza /
armazenamento)
microscpio (10X, 40X e 100X objectiva de imerso em leo com 10X ou 16X oculares)
Slides
As lamelas
leo de imerso
kit de limpeza da lente
Agar. Usado para solidificar media mosto em slants e pratos. agar Lab-grade no muito caro, mas se voc estiver
em um oramento apertado, o p de gar vendido em mercados da especialidade e ervanrias funciona bem.
meio de cultura ( base de malte, esterilizado 1.040 mosto)
Incubadora (comercial ou improvisados, como caixa de isopor com almofada de aquecimento e ventilador do
computador)
Banho de gua (comercial ou alternativas, tais como beb limpe aquecedor quente ou aqurio)
Extintor de incndio
Kit de primeiros socorros
estao de lavagem dos olhos
Folhas de dados de segurana (MSDS) em todos os produtos em uso
Deteco de contaminao
aparelho de filtrao por membranas
Os filtros de membrana (dimetro dos poros 0,45 microns para testes, 0,2 microns para filtro estril)
almofadas de membrana
A bomba de vcuo (pode ser uma bomba de mo manual de baixo custo)
pinas metlicas
esptula de metal
media testes seletivos (vrios, com base em teste)
Recipiente de lavagem de isopropanol e gua
placas de Petri estreis (100 x 15 mm)
sacos de recolha estril ou recipientes
Agar
meio de cultura ( base de malte, esterilizado 1.040 mosto)
espalhadores de celulares
kit de colorao de Gram (requer microscpio, lminas e lamelas)
cmara anaerbia (ou anaerbias pacotes em um recipiente grande, hermtico). Embora existam meios
anaerbios, uma cmara anaerbia o mtodo preferido para testes regulares para os organismos anaerbicos.
fermentao Testing
meio de cultura ( base de malte, esterilizado 1.040 mosto)
garrafas de vidro Pyrex (500 ml e 1 L)
bales Erlenmeyer (50 ml, 100 ml, 250 ml, 500 ml, 1 L)
Cilindros graduados
pipetas estreis (1 ml, 10 ml)
lmpada pipeta ou pipeta
placa Shaker ou stir
Esterilizao
Enquanto muitos fabricantes de cerveja freqentemente usam a palavra "esterilizar", eles
so muitas vezes usando a palavra incorretamente (Figura 6.2). Quando a produo de
cerveja, raramente esterilizar nada. Em vez disso, limpar e higienizar. No entanto, o
laboratrio de levedura requer um nvel mais elevado de pureza, e ns precisamos
esterilizar. Voc no quer crescer uma cultura de levedura apenas para descobrir que voc
tambm cresceram bactrias ou leveduras selvagens ao mesmo tempo. Um ponto chave a
ter em mente que voc no pode desinfectar ou esterilizar algo que no limpo. Um
laboratrio de sucesso um laboratrio limpo. Voc deve ter protocolos e procedimentos
que for-lo a manter as operaes limpas e sanitrias em seu laboratrio e fbrica de
cerveja.
calor hmido
O mtodo de esterilizao mais comum alguma forma de calor: molhada, seca, ou chama.
O tipo de objeto que voc est esterilizao muitas vezes determina o melhor mtodo. Uma
das melhores ferramentas para isso o autoclave. Um autoclave utiliza vapor sob presso
para alcanar temperaturas na faixa de 250 a 273 F (121-134 C). No mnimo, um objecto
exige um tempo de reteno de 15 minutos a 250 F (121 C) ou 3 minutos, a 273 F (134
C) para esteriliz-lo. tempo de espera comea quando a cmara e os itens que atingiram a
temperatura alvo, assim que seu tempo total ir ultrapassar o tempo de reteno. Certos
itens, tais como lquidos ou itens densas ou volumosos, podem exigir tempos de espera
mais longos para garantir que os objectos tenham atingido a temperatura correta e tempo
mnimo.
Para o laboratrio de mdia em uma pequena cervejaria, voc s precisa esterilizar em
uma escala relativamente pequena, o que voc pode fazer em uma panela de presso de
bancada. Voc pode usar uma panela de presso de material de laboratrio de pequena
escala, tais como utenslios de laboratrio ou de mdia para placas, barras, e propagao de
levedura. Estas panelas de presso so ideais para uso domstico cervejaria, uma vez que
so baratos e fceis de usar. autoclaves verdadeiros vm em todos os tamanhos e tendem a
ser consideravelmente mais caro medida que ficam maiores e mais automatizado. A
principal vantagem destes autoclaves maiores que eles tm cmaras maiores, permitindo
que mais ou maiores itens a passar por um ciclo de uma s vez. Eles muitas vezes vm com
algum nvel de automao ou ciclos especiais desaquecimento que torna possvel executar
mais ciclos com menos esforo. Ao selecionar uma autoclave, determinar o maior item que
voc acreditar que voc vai precisar para esterilizar e depois encontrar uma unidade com
um tamanho da cmara que vai acomod-lo.
Para a esterilizao eficaz, o vapor precisa entrar em cada canto e recanto. Um autoclave
superlotadas uma autoclave ineficaz. Se voc estiver usando uma simples autoclave ou
panela de presso, voc vai precisar para purgar ar manualmente a partir da cmara no
incio do ciclo. importante que voc se preparar adequadamente os objetos que vo para
a autoclave. Todos os recipientes apertado-selagem precisam de suas tampas entreaberta,
pois eles podem implodir ou explodir com as mudanas de presso do autoclave. Alm
disso, se voc estiver esterilizao de lquidos, no final do ciclo que voc no quer para
ventilar o autoclave rapidamente, uma vez que far com que o lquido para ferver
rapidamente e brotar dos recipientes. Voc precisa limpar todos os objetos corretamente,
como qualquer grime tem o potencial para proteger organismos. Se a sua autoclave tem
medidores ou grficos, gravar os dados de cada corrida ou incluir a impresso, juntamente
com qualquer outra documentao, como os logs de laboratrio dirias. Voc tambm pode
usar fita indicadora de mudana de cor para marcar itens antes da autoclavagem. til,
pois d uma indicao rpida e visual de que um objeto estril. No entanto, adquirir o
hbito de remover a fita em uso, para que algum mais tarde, no acha que um navio no
estril estril.
Calor seco
O calor seco outra opo para a esterilizao de objetos, mas requer maior calor e tempos
de espera mais longos, que so muitas vezes inadequados para alguns materiais. O calor
seco requer pelo menos duas horas a 320 F (160 C) para esterilizar um objecto. Quanto
maior calor e tempos mais longos so necessrios para transferir energia trmica suficiente
para inactivar quaisquer organismos presentes. Entrar em contacto com o vapor muito
mais eficaz em transferir a energia necessria para inactivar um organismo. Alguma vez
voc j acidentalmente colocou sua mo sobre uma panela de ebulio da gua? Alguma vez
voc j chegou em um forno a 212 F (100 C)? Se voc tem, ento voc estar
familiarizado com o quanto mais quente o vapor a sua pele, por causa da energia contida
na gua vaporizada. Quando o vapor se transforma em lquido em sua pele, libera enormes
quantidades de calor.
Ainda assim, o calor seco tem algumas vantagens. Para muitos com um oramento
apertado, a esterilizao seca tem suas vantagens no custo e a capacidade de esterilizar
objetos grandes, como voc pode usar um forno domstico comum. Se voc estiver usando
um tal dispositivo, perceber que o ajuste de temperatura pode ser extremamente
impreciso. Toda vez que voc usar um forno domstico, guard-lo com um bom
termmetro de laboratrio-grade. Claro, que a poupana em custos de equipamento inicial
muitas vezes rapidamente perdido no tempo adicional necessrio para cada ciclo de
esterilizao. possvel utilizar tempos mais curtos com fornos de ventilao forada ou
temperaturas mais elevadas.
Incinerao
Alguns objetos no necessitam de esterilizao completa. Por exemplo, quando se utiliza
uma ansa de inoculao s esterilizar o comprimento do fio, no o punho. No laboratrio,
flamejante o mtodo de escolha para inoculando loops e fios retos, mas voc poderia,
teoricamente, us-lo em qualquer pequeno objeto no destrudo pelo fogo. Quando
flamejante um lao ou fio reto, trabalhar a partir da ponta de volta para a ala e, em
seguida, volta para a ponta, garantindo que a parte sob a chama brilha em vermelho. Se
houver uma grande quantidade de material sobre o fio e voc coloc-lo diretamente para a
chama, pode "pop", como o lquido dentro ferve. Alm de ser um perigo para o utilizador,
este pode enviar o material a voar para outras superfcies, o que no boa tcnica
assptica. uma boa idia para limpar o fio antes de fogo, ou a primeira segurar a ala
acima da chama at qualquer material sobre o loop seque antes de baix-lo para a chama.
Uma vez inflamado, voc pode resfriar o circuito tocando-a ao meio estril antes de tomar
uma levedura ou outra amostra.
Figura 6.3: Antes de cada transferncia, chama o loop de inoculao at que brilha vermelho para esterilizar.
Outra prtica que envolve chama mergulhar o objeto ou limpar lcool a 70% sobre ele,
ento inflamar o lcool, queim-lo. Isso deixa menos resduos do que chama o objeto at
vermelho. No entanto, a mxima cautela quando se trabalha com lcool e chama aberta,
como os resultados podem ser mortais.
tindalizao
Novos fabricantes de cerveja, muitas vezes pensam que podem esterilizar algo pela fervura
por 15 minutos. Um objecto de ebulio em gua ou um lquido em ebulio durante 15
minutos mata a maioria das bactrias vegetativas e pode inactivar os vrus, mas ineficaz
contra muitos esporos bacterianos e fngicos. Ebulio no esterilizao, mas pode matar
a maioria dos micrbios que dizem respeito cervejeiros. Se voc tem mais tempo em suas
mos do que dinheiro, voc pode tentar tindalizao, um processo em que voc ferver por
20 minutos um dia, em seguida, novamente no dia seguinte, e assim por diante at que voc
tenha fervido os lquidos quatro vezes. O perodo de incubao entre cada fervura d
quaisquer esporos resistentes ao calor apresentam uma chance para germinar, ea prxima
fervura mata-los. Infelizmente, isso no vai esterilizar a gua, como meio de fervida seria
necessrio para suportar o crescimento do organismo. Vai comprar um bom fogo panela
de presso em vez disso.
Teste autoclave
Ser capaz de esterilizar meios de comunicao uma funo crtica de um laboratrio.
importante para o laboratrio para verificar periodicamente que a autoclave est
executando corretamente. A maneira mais comum de fazer isto por meio de um indicador
biolgico, geralmente um organismo (fornecido numa cpsula de vidro) que muito
difceis de matar. O usurio executa a cpsula atravs de um ciclo de esterilizao para ver
se ele foi bem sucedido.
materiais
3M Attest cpsula indicador biolgico (ou produto similar)
autoclave ou panela de presso
procedimento
1. Coloque 3M Attest Biolgica cpsula Indicador em uma garrafa de teste de meio. Voc tambm pode incluir uma
cpsula indicador em qualquer dos outros itens que esto sendo autoclavado.
2. Permitir que o ciclo de autoclave cheia para executar.
3. Quando o ciclo est terminado, aguarde at que o medidor de presso l 0 psi e ventilao cuidadosamente a
autoclave. Deixe o contedo arrefecer durante pelo menos 10 minutos.
4. Retire cuidadosamente o indicador biolgico da garrafa lquido e / ou onde quer que ele foi includo.
5. Verifique o rtulo do frasco indicador para uma mudana de cor do rosa ao marrom ou quaisquer que sejam as
especificadas pelo fabricante.
6. curvatura da cpsula suavemente para quebrar o interior e liberte o lquido. Faa o mesmo para um no-
autoclavado, controle marcado para o crescimento bacteriano.
7. Coloque os indicadores biolgicos em um F 133 (56 C) incubadora.
8. Examine o tubo indicador em 8, 12, 24 e 48 horas para qualquer mudana de cor. A mudana de cor amarela
indica o crescimento bacteriano.
9. Comparar frasco para o controlo no-autoclavadas a cada ponto de tempo. Quer que a cpsula de permanecer a
cor original, indicando que o ciclo matou as bactrias.
10. Depois de verificar os resultados, descartar todo o material utilizado na execuo de teste.
A cultura de levedura
Sempre que voc trabalha com levedura viva, voc est trabalhando com uma cultura de
levedura. Quando voc fermentar um lote de cerveja, voc pode considerar que uma
cultura de levedura. Quando voc propagar fermento, voc est cultivando fungos. No
entanto, muitas pessoas usam a cultura fermento termo para significar as etapas menores
de slants e pratos que voc iria executar antes de propagao.
Tenha em mente que o isolamento e propagao de levedura de tamanhos pequenos
colnia requer condies estreis e mdia estril. Ou voc ter de comprar a mdia pr-
esterilizadas, ou voc vai precisar de uma panela de presso ou autoclave.
Figura 6.4: Uma placa adequadamente riscadas iro resultar em colnias isoladas cultivadas a partir de uma nica clula.
Foto cedida por Samuel W. Scott.
Placas e Slants
Labs usar pratos e inclinaes em todos bactrias e leveduras trabalho. Tradicionalmente,
os laboratrios fez placas com placas de Petri de vidro. Hoje a maioria dos laboratrios
utilizam plsticos descartveis de Petri pratos pr-esterilizadas que vm 20 a uma manga.
Voc pode compr-los em vrios tamanhos de 60 a 120 mm de dimetro. Foram
encontradas 100 mm um tamanho conveniente para a maioria dos trabalhos. As placas e
inclinaes so feitas com agar, uma substncia gelatinlike que liquefeito a temperaturas
acima de 107 F (42 C) e forma um gel de menos de 99 F (37 C). Uma vez solidificado, a
levedura ou outros organismos podem crescer sobre a superfcie.
Um prato e inclinao tm o mesmo material no interior, mas uma inclinao tem uma
vida til mais longa, porque ele tem uma tampa com tampa de rosca e no secar to rpido.
As tampas com juntas de vedao melhor do que aqueles sem, prolongando a vida til de
armazenamento. Voc deve selar tampas no-junta, quer com fita de vinil (eltrica ou fita
isolante) ou Parafilm. Uma placa no vedada tem uma vida til mais curta, especialmente
na armazenagem de baixa humidade. Voc pode estender a vida til de uma placa, selando-
a em torno da circunferncia com fita isolante ou Parafilm. fita de vinil muito mais barato
e vem em uma variedade de cores, que voc pode usar para ajudar cdigo de cor o seu
trabalho. Outra vantagem da vedao placas com fita de vinilo que ela mantm a placa em
conjunto, reduzindo o risco de contaminao durante o manuseamento das placas.
Uma inclinao (tambm chamado de inclinao) pode durar at um ano, mas voc deve
cultura demonstrar inclinaes cada quatro a seis meses, para evitar mutaes. A
inclinao a sua cultura-me, que deve permanecer puro devido ao seu uso frequente.
Quando voc contaminar uma inclinao, voc perde sua cultura me. Voc pode fazer
backups ou novas inclinaes de mais velhos, seguindo tcnicas de transferncia estreis.
Voc pode usar outras tcnicas de armazenamento para proteger as culturas a longo prazo. laboratrios comerciais e
universidades usam culturas ultracongelados como culturas me permanentes, mas isso est fora do alcance da maioria
dos pequenos fabricantes de cerveja ou homebrewers. Alguns homebrewers relatam sucesso com congelamento culturas
em um freezer padro, embora o comprimento de tempo que voc pode armazenar uma cultura desta forma no pode ser
por mais tempo do que com uma inclinao bem preparado; que depende bastante em sua tcnica e a tenso. Voc
tambm pode armazenar uma inclinao sob leo, que era os laboratrios mtodo usado antes do congelamento e uma
opo decente para a pequena cervejaria. DentroFigura 6.5listamos a vida til estimada de cada mtodo. A diferena entre
a vida til mxima e vida til confivel a taxa de mutao. Embora seja possvel armazenar uma cultura quente durante
muitos anos e tm clulas vivas, que no o verdadeiro objectivo de levedura armazenamento a longo prazo. O que voc
est se esforando para uma cultura livre de mutao. O aquecedor de armazenar uma cultura, a cultura cresce mais um,
quanto maior for a taxa de mutao. Calor, oxignio e nutrientes disponveis todos aumentar a incidncia de mutao, e
isso que impede a maioria destes mtodos de ser verdadeiras opes de armazenamento de longo prazo. Dessecao no
uma boa opo, como o prprio processo pode introduzir mutaes.
Figura 6.5: Resumo dos mtodos de conservao de levedura. O problema com o armazenamento a longo prazo no
viabilidade, mas a manuteno de uma cultura livre de mutao.
A placa a sua cultura de trabalho. Ele tambm fornece um olhar para a pureza do seu
fermento, desde que no sejam fermento que vai contaminar sua cerveja tambm pode
crescer na placa como uma colnia visvel microorganismos. Isto permite-lhe identificar a
presena de possveis contaminantes sem um microscpio de alta potncia. Claro, este
mtodo no ir garantir a pureza de uma cultura, mas se voc ver mais de um tipo de
colnia, voc pode estar certo de que a cultura no puro. Se voc detectar qualquer
crescimentos estrangeiros no seu prato, ela est contaminada e voc deve descart-lo.
1. Prepare 1 litro de 1.040 SG mosto, sem saltos e com todos os nutrientes que voc gostaria de adicionar, como
Servomyces. Ferver o mosto at as formas de quebra quente, fresco, e filtrar o material pausa.
2. Mea 15 gramas de p de gar, e polvilhe sobre a superfcie do mosto. Permitir que o p para hidratar durante
alguns minutos. No mexa at que o gar aparece totalmente hidratado.
3. Mexa ou agite para misturar, em seguida, o calor em um forno de microondas ou lentamente em um fogo para
derreter o agar e deixar ferver por alguns minutos at que o gar esteja completamente dissolvido (verificar a
parte inferior para os gros translcidos de agar).
4. Neste ponto, voc pode pipetar a soluo em tubos adequados para inclinaes. Pretende adicionar uma
quantidade de soluo de modo que quando desviado em ngulo, que se desenvolve de uma superfcie de
trabalho de bom tamanho no tubo, mas no tanto que o agar mais estreita do que alguns centmetros a partir
da abertura do tubo. melhor testar primeiro com gua para determinar o ngulo e volume de quanto voc
precisa por tubo. Em geral, o melhor ngulo entre 20 e 35 graus, mas no crtica. Depois de determinar o
quanto mdio for preciso, voc pode comear a encher os tubos com uma pipeta. No se preocupe sobre o
trabalho estril, neste ponto, uma vez que as inclinaes vai para o autoclave. Coloque as tampas vagamente
sobre os tubos, colocar os tubos na posio vertical em um rack, e coloque a cremalheira no autoclave.
5. Transferir a soluo agar restante para um recipiente adequado com uma tampa solta, ou cubra com papel
alumnio e coloque na autoclave a vapor esterilizar.
6. Aps a esterilizao, deixe a mistura se tornar fresco bastante para segurar, mas ainda derramar facilmente.
7. Tome as inclinaes para fora e coloc-los para baixo em um ngulo, com a extremidade da tampa apoiado para
fazer a inclinao adequada.
8. Se voc pode manter o balo confortavelmente com as mos nuas, segur-la at o seu rosto, e ele deve se sentir
muito quente, mas no desconfortvel. Neste ponto, o agar est perto de configurao, e voc precisa agir
rapidamente. Se voc tentar deitar com o gar muito frio, ele vai sair irregular e no se contentar em placas. Se
voc deitar com ele muito quente, as placas vai acabar com um monte de excesso de condensao sob a tampa.
9. Defina as suas placas estreis com as plpebras fechadas.
10. Trabalhando sob o cap ou utilizando uma tcnica assptica, em sucesso rpida remover a folha ou tampa do
frasco, inclinar a tampa sobre uma das placas, e derramar (geralmente 15 a 20 ml) em cada placa.
11. Voc vai notar que as formas de condensao nas tampas. Uma vez que as placas tenham arrefecido e o gar se
ter definido, voc pode empilh-los vrias alta, enrole uma faixa de borracha em torno deles, e lan-los sobre
em suas tampas. No enrole-os em Parafilm ou fita de vinil at se dissipar condensao. Coloque-os em uma
rea quente (80 F / 27 C) por um dia ou dois, e a condensao deve evaporar.
12. As placas e inclinaes esto prontos para usar neste momento. Aperte as tampas sobre as inclinaes antes de
guardar. Se voc deseja armazenar placas sem secar, enrole uma pea contnua de fita de vinil em torno da
borda ou envolva toda a placa em Parafilm para sel-lo.
13. placas loja invertidas em um recipiente fechado.
procedimento
1. Para comear, limpar uma rea e acender uma lmpada de lcool ou bico de Bunsen.
2. Coloque a placa perto da chama, com a tampa e a superfcie do gar a raia apontando para baixo. Voc sempre
armazenar suas placas com a poro de agar-cheia no topo; a superfcie do gar para estrias apontando para
baixo. Isso mantm qualquer material transportado por via area de aterrar na superfcie da placa.
3. Escolha um circuito descartvel estril, ou esterilizar o seu ciclo na chama.
4. Mantendo o lao na rea limpa perto da chama, abra a inclinao ou outra fonte de levedura e passar a abertura
atravs da chama.
5. Coloque o loop inoculao dentro do tubo de inclinao, e toc-lo para a superfcie de agar para esfriar o loop.
Apenas tocar a ala para a colnia de levedura, no tome uma ansa. Voc quer que uma pequena quantidade de
fermento. Remova o loop, tendo o cuidado de mant-lo na rea limpa em volta da chama, mas no to perto de
prejudicar a levedura.
6. Rapidamente re-chama e fechar a inclinao.
7. Defina a inclinao para baixo e pegar o lado agar da placa, apenas a entreg-lo na rea limpa perto da chama.
8. Com a ponta da ansa e para trs diversas vezes, em uma pequena seco. Chama o loop. Rode a placa de 90 graus,
e raia o loop atravs da seo apenas riscado e raia uma nova seo. Vire a placa novamente e repita o estrias. O
objectivo a primeira a depositar as clulas na placa, em seguida, para puxar menor nmero de clulas para
outra rea limpa, ficando algumas clulas mais distantes de cada vez. Se voc ver levedura na placa, ento voc
tomou muito do inclinao. Voc quer espalhar a apenas algumas clulas, invisveis a olho nu, em toda a
superfcie. Colocar demasiada levedura em uma rea faz com que seja impossvel crescer e escolha a partir de
uma nica clula, que o seu objetivo (Figura 6.6).
9. Ligue a superfcie do gar de volta para baixo e coloque de volta na tampa.
10. Incubar a placa durante dois a trs dias temperatura ambiente (72 F, 22 C), a placa de gar-cheia em cima, a
superfcie do agar que aponta para baixo. A cultura de levedura densa vai crescer na primeira rea que voc
listado, ficando mais fina na estrias mais tarde. Se o seu processo no resultou em colnias isoladas, que deveria
raia um novo prato.
11. Uma vez que voc tem um crescimento suficiente, selar as bordas da placa com fita isolante ou Parafilm e leve
geladeira.
Figura 6.6: Streak, ento gire para acabar com clulas individuais espalhados pela placa a passo 4.
Listando um Slant
Para criar novas inclinaes voc s precisa de uma pequena quantidade de fermento para
transferir para a superfcie do agar, ento um pequeno lao pode ser mais eficiente quando
voc raia uma inclinao nova. Ao selecionar fermento para uma inclinao, voc quer
escolher a partir de uma colnia de levedura pura, e uma placa pode fornecer uma fonte
pura de levedura. Em uma placa adequadamente preparada, as colnias crescem a partir de
uma nica clula. Antes de selecionar uma colnia de usar para sua inclinao, voc deve
inspecionar todos eles para se certificar de que eles no tm uma cor estranha, so
translcidos, ou ter uma forma estranha. Se o permetro de uma colnia no lisa, mesmo,
e consistente, no use essa colnia.
procedimento
1. Limpe uma rea e acender uma lmpada de lcool ou bico de Bunsen. Lembre-se de seguir a tcnica estril,
chama todas as aberturas, e trabalhar rapidamente na rea limpa de uma chama aberta.
2. Selecione um circuito descartvel estril, ou esterilizar o seu ciclo na chama.
3. Abra a placa ou outra fonte de levedura.
4. Toque no loop para a superfcie de agar para esfriar. Use o lao para pegar o fermento de uma colnia pura na
placa. Voc s precisa de um pouco de tamanho alfinetada-de levedura.
5. Defina a placa para baixo e pegar a inclinao.
6. Abra a inclinao, insira o loop inoculao, e manchar o fermento em uma linha serpentina no meio da superfcie
do gar. No h necessidade de quebrar a superfcie do agar ou de manchar cada bit da superfcie. Colocando
menor nmero de clulas para a inclinao e dando-lhes comida e quarto para o crescimento pode estender a
vida da inclinao. Uma pequena quantidade vai um longo caminho, ento use muito pouco fermento.
7. Re-chama e fechar a inclinao. Deixar a tampa solta durante o seu crescimento, e as colnias devem aparecer ao
longo de dois ou trs dias a 72 F (22 C).
8. Uma vez que o crescimento completo, aperte a tampa, e a inclinao est pronto para armazenamento a frio.
Se voc quiser adquirir uma cultura mestre de cerveja engarrafada, primeira raia-lo em
um prato. Se o resultado for colnias puras, ento voc pode fazer uma inclinao a partir
dessa placa. No entanto, no pode haver mais do que uma estirpe, e mesmo levedura
selvagem, em que a cerveja. Voc vai querer fazer vrias inclinaes, selecionando a partir
de diferentes colnias. Voc tambm deve fazer alguns ensaios de fermentao em pequena
escala a partir da levedura antes de cometer um lote inteiro para uma cultura
desconhecida. Para criar uma inclinao de cpia de segurana ou para transferir de
inclinao-se inclinada, rapidamente mergulhar o circuito para a levedura na superfcie da
primeira inclinao e deposit-la sobre o segundo plano inclinado.
procedimento
1. Coloque duas inclinaes em um rack.
2. Solte as duas tampas.
3. Pick up e abrir a inclinao fonte, chama a abertura, pegar fermento, tampa e substitua a acumular.
4. Pegue e inclinao de destino aberto, mantendo-circuito dentro da rea estril.
5. Chama a abertura e fermento depsito na superfcie.
6. Recap frouxamente e deixar a 72 F (22 C).
7. Coloque a inclinao original de volta na geladeira com a tampa apertado e selado. Deixe a inclinao nova
crescer, e coloc-lo na geladeira, uma vez por glob creme branco de levedura aparece na superfcie.
stabs
Stabs so teis para os organismos que fazem melhor sob condies anaerbias, tais como
algumas bactrias. Um Stab um tubo parcialmente cheio de agar, cerca de 3 centmetros
de profundidade e deixado a solidificar verticalmente. Para inocular um Stab, usar uma
agulha ou um loop e facada-o para baixo para o centro do agar, at que se atinge o fundo do
tubo. Puxe o lao ou fio de volta e selar o tubo. Se voc tiver problemas para empurrar seu
loop para o fundo da facada, as chances so de que voc est usando muita agar em seu
meio.
imerso em leo
imerso em leo prolonga a vida do inclinaes. Antes do armazenamento congelado-
cultura tornou-se comum, este foi o mtodo de um laboratrio de levedura usaria para
armazenamento a longo prazo. A ideia a de sobrepor a superfcie do plano inclinado com
leo mineral estril, de modo a que permanea sob leo e fora do alcance de oxignio em
todos os momentos. A vida til aumenta para um mnimo de dois anos, embora haja
informaes que afirma algumas amostras de Saccharomyces tm sido viveis aps 14 anos
na conservao temperatura ambiente. Claro, a viabilidade no garante a cultura livre
mutao. O aquecedor de armazenamento, maior a incidncia de mutao, ento
armazenar suas culturas frio (38 F / 3 C).
procedimento
1. Depois de inocular as suas inclinaes e incubando-os, adicionar uma camada de leo mineral estril.
2. Loja em torno de 38 F (3 C).
imerso em gua
Armazenando levedura sob a gua, ao invs de sob cerveja, est se tornando mais popular.
de armazenamento de gua destilada estril coloca levedura num estado de repouso, e
alguns relatos sugerem levedura pode ser armazenado nesta forma durante anos sem
refrigerao. Voc geralmente s fazer isso com pequenas quantidades de levedura, que
depois se propagam em seu laboratrio. No entanto, possvel que este ir trabalhar com
lamas maiores. Alguns cervejeiros esto agora a tentar isso. A chave a utilizao de gua
destilada estril e lava-se a suspenso de leveduras vrias vezes em gua destilada estril
para remover quaisquer vestgios de cerveja.
procedimento
1. Adicionar 2 a 3 mililitros de gua destilada para um tubo com tampa de rosca, e esterilizar na autoclave ou panela
de presso. Arrefecer at temperatura ambiente antes de usar.
2. Utilizando uma ansa estril, transferir uma colnia a partir de uma placa para a gua. Voc s quer uma pequena
quantidade de fermento, aproximadamente do tamanho de uma cabea de fsforo. Evitar pegar qualquer um dos
meio slido por baixo.
3. Cap bem o tubo. Se as tampas no tem uma junta, enrole a tampa com fita isolante ou todo o tubo em Parafilm
para selar.
4. Voc pode armazenar esses frascos em temperatura ambiente por meses, apesar de refrigerao pode prolongar
o armazenamento ainda mais.
Congelando
Voc pode ter ouvido que os bancos levedura profissionais armazenar seus estoques
congelados a -80 C, e eles podem armazenar levedura adequadamente congelados
indefinidamente. Embora o armazenamento -80 C a melhor maneira de prevenir a
mutao, tambm possvel armazen-los a -20 C e obter melhores resultados sobre o
armazenamento de temperatura do frigorfico. A evidncia anedtica sugere que possvel
alcanar tempos de armazenamento de at cinco ou mais anos com mutao mnima. A
dificuldade que os resultados podem variar dependendo da sade da levedura quando
congelado, estirpe de levedura, controlo de temperatura, e muitas outras condies de
armazenamento. Seu objetivo fazer com que o fermento no pico da sade e para
armazen-los a -20 C com danos mnimos.
Quanto melhor for a condio de quando a levedura congelada, a melhor sua condio
aps a descongelao. Recolher o fermento para o armazenamento de uma propagao
laboratrio limpo. Voc quer usar o fermento que esto em seu pico de sade, com uma
grande reserva de glicognio e trealose. De facto, a capacidade das clulas para suportar
congelamento se correlaciona com nveis de glicognio e trealose celular (Kandror, et al.,
2004).
Quanto mais elevada for a temperatura de congelao, quanto menor for o prazo de
validade e a estabilidade da cultura. importante que uma vez que voc congelar sua
levedura, voc no deix-lo descongelar. Se voc no tiver um C congelador -80 , voc vai
precisar de um bem isolado congelador non-frost-free confivel,,. Voc pode usar um
freezer frost-free, mas tem um ciclo de aquecimento para evitar o acmulo de gelo. Depois
de congelar seus culturas, coloc-los em uma caixa de isopor dentro do congelador. Isto ir
ajudar a estabilizar as flutuaes de temperatura e melhorar a vida de armazenamento.
Voc vai precisar adicionar alguma forma de cryoprotectant ao seu levedura antes do
congelamento, tal como o glicerol. Cryopreservants tais como o trabalho de glicerol,
impedindo a lise osmtica. Normalmente, tal como a forma em torno das clulas congela h
cada vez menos gua lquida na superfcie da clula, o que cria um gradiente osmtico. Isto
puxa a gua para fora da clula por osmose, e mata a clula. Adicionando um crioprotector
impede que isso acontea.
Pode ser complicado para obter bons congela levedura que no vai morrer aps a
descongelao aps o armazenamento. Alguns laboratrios micrbios de resfriamento
rpido usando nitrognio lquido, embora nem todos os laboratrios de levedura
consideraram necessrio ou benfico quando se trabalha com fermento e apenas colocar as
culturas na -80 C congelador. Alguns homebrewers ter usado gelo seco / etanol ou banhos
de gelo seco / acetona a de congelamento rpido suas amostras antes de coloc-los no
congelador.
Usando um frost-free resultados frigorfico constantes oscilaes de temperatura que
vai congelar e descongelar a cultura, causando danos repetido para as clulas. Ao
armazenar a -20 C, pode ser benfico para aumentar a quantidade de crioprotector
utilizado, de modo que a cultura no congelar slido. Isto fornece as vantagens de a
temperatura baixa, mas evita a perda de viabilidade de congelao e ciclos de
congelamento / descongelamento. Alm disso, a adio de 1 grama por litro de cido
ascrbico como antioxidante para impedir a oxidao de lpidos da membrana pode
melhorar a viabilidade bem (Sidari e Caridi, 2009).
materiais
glicerol estril
soluo estril YPD
tubos de microcentrfuga estril criotubos ou screw-cap
Centrfuga
pipetas esterilizadas
pipetter Mecnica
Congelador
caixa de isopor (para armazenamento -20 C)
O cido ascrbico (para armazenamento -20 C)
escolher Colonies
seleco colnia adequada uma parte vital da cultura de levedura. Este onde tudo
comea, e se voc se descuidar na escolha de colnias, que pode potencialmente levar a
propagao do fermento insalubre. Para comear, retire a placa de agar de seu
armazenamento e deixe aquecer naturalmente at temperatura ambiente. Este o mesmo
princpio que voc usa quando lanando fermento em recm-feitos mosto. Voc sempre
quer ter a certeza de que a levedura aproximadamente a mesma temperatura como meio
de crescimento, o que impede o choque de levedura relacionada com a temperatura.
Aps a placa de cultura atingir a temperatura ambiente, examinar cuidadosamente as
colnias de leveduras. Olhe para a placa de ambos os lados em uma rea bem iluminada.
Mentalmente seleccionar as colnias que voc quer crescer. Digitalizar a superfcie do agar
para colnias de aparncia incomum ou quaisquer reas mofados. Mold s vezes aparece
como uma substncia clara alastrando ao longo da placa, por isso pode ser difcil de ver.
Outras vezes o molde bvio e se parece com um crescimento peludo, de aparncia
semelhante aqueles que crescem no po, queijo e frutas. Ainda outras vezes, o molde
uma mistura dos dois. Se voc notar qualquer molde em sua placa, voc deve comear de
novo com uma placa diferente. Se voc insistir em usar essa placa, por algum motivo,
selecionar cuidadosamente uma colnia e re-raia em um novo prato.
Figura 6.7: Examinar as colnias na placa ou inclinao antes da transferncia. Trabalhar na rea limpa da chama.
Selecionar apenas colnias que esto separados dos seus vizinhos.
As bactrias so mais difceis de identificar, pois eles podem olhar como colnias de
leveduras no incio, mas geralmente acabam mais translcido e s vezes colorido. colnias
brilhantes geralmente so indicativos de uma infeco bacteriana, enquanto colnias
deformados, muitas vezes acabam por ser leveduras selvagens. colnias de leveduras
cultivadas a partir de uma nica clula so redondos, cremoso off-branco- ou leitosa discos
Manila-coloridas com um pico no centro. Diferentes estirpes ir exibir diferentes
morfologias e texturas, e voc deve se familiarizar com a consistncia e aparncia das cepas
que voc est trabalhando para que voc so mais propensos a notar quaisquer alteraes.
Em geral, evite qualquer crescimentos anormais de aparncia.
Se voc determinar o seu prato livre de contaminantes, o prximo passo escolher
qual colnias para transferir. Na maioria dos casos, voc vai querer escolher mais de uma
colnia para iniciar a sua cultura para manter a diversidade gentica. Cada colnia contm,
pelo menos, 1 milho de clulas, todos os gerados a partir da mesma clula me. Isso
significa que quaisquer mutaes que tinham clula, aberrantes ou de outro modo, existem
em todas as clulas filhas enxertadas. Quando comear a crescer uma cultura, voc quer ter
uma boa quantidade de gentica variedade presente. Em teoria, as clulas de levedura mais
fortes sobrevivem e proliferam no ambiente que voc fornecer-lhes, ea cultura que se
seguiu ser mais saudvel e mais vivel. As clulas de levedura passar por muitas divises
celulares em um curto espao de tempo, o que acelera o processo de seleo natural. Com
levedura, seleco natural ocorre durante alguns dias de propagao, por oposio aos
sculos que pode exigir para outras espcies.
Recomendamos que voc selecionar cerca de dez colnias individuais. Em outras
palavras, escolher dez colnias que voc pode facilmente distinguir as colnias como
individuais que no compartilham qualquer fronteira com quaisquer outras colnias. Isto
ajuda a assegurar que a colnia no foi nutrientes privada durante o seu crescimento.
Colnias que partilham uma fronteira com outras colnias de leveduras esto em
concorrncia directa de nutrientes dos seus vizinhos. O seu acesso aos nutrientes
necessrios limitado quantidade de nutrientes da levedura pode lutar longe de seu
vizinho. Esta no uma situao ideal para o crescimento de clulas de levedura, e as
colnias que crescem sem competio so menos susceptveis de ser fisicamente deficiente.
O tamanho relativo de uma colnia para outra tambm uma parte importante dos seus
critrios de seleo. As colnias que voc escolher no deve ser nem muito grande nem
muito pequeno, mas estar ciente de que quando as colnias esto juntos, eles tendem a ser
menores. No entanto, uma colnia que muito pequeno em comparao com os outros em
uma placa indicativo de um mutante respiratria. mutantes respiratrias so clulas que
possuem uma mutao na sua via respiratria, e que no podem utilizar o oxignio. Isto faz
com que formam colnias mais pequenas, uma vez que no possvel utilizar os nutrientes
da mesma maneira como as clulas normais. Estas clulas no podem crescer to rpido ou
competir por nutrientes, e eles vo ter dificuldade para metabolizar os acares e
nutrientes encontrados no mosto. Isto leva a todos os tipos de problemas em fermentao,
como a fermentao lento ou lento ou atenuao incompleta, bem como baixos nveis de
crescimento do fermento.
Voc tambm deve ser suspeito de colnias que so demasiado grandes. Estas colnias
podem ser grandes, porque eles tm se fundiu com uma outra colnia ou porque esto
cobrindo uma colnia mutante respiratria que eles tenham ultrapassado. Alm disso,
estas colnias maiores no so to saudveis porque esgotaram o fornecimento de
nutrientes ao seu redor e gasto todos os seus recursos. As clulas de levedura nestas
colnias dividiram mais vezes que as clulas de colnias de tamanho mdio e so mais
fracos. O tamanho real das colnias depende de muitas variveis. Geralmente voc vai
selecionar a partir de colnias que variam de 1/8 a de uma polegada (3-5 mm), mas vamos
experincia ser seu guia. Preste ateno para as colnias selecionadas e que resultados
voc comea a partir de uma propagao crescido a partir deles. Documentar tudo (fotos
so uma boa idia), e usar essa informao ao analisar os dados de seus painis gustativas.
Captura de levedura
Temos certeza de que no somos os nicos que transportam em torno de um par de frascos
de transferncia estril 50 mililitros apenas no caso que funciona atravs de um fermento
que queremos levar para casa. Na vida de um bebedor de cerveja, h muitas oportunidades
para pegar cepas de leveduras interessantes.
Na estrada
Quando voc est na estrada, voc precisa ser um pouco mais de guerrilha do que voc est
no laboratrio. Leve um par de frascos, talvez algumas compressas estreis embalados
individualmente, e uma butano barato isqueiro. Se voc se deparar com uma superfcie que
pode ter um fermento interessante ou bactrias nele, apenas limpe-lo e coloc-lo de volta
na embalagem. Se os cotonetes so curtos o suficiente, voc pode coloc-lo em um dos
frascos para mant-lo de secar. Se voc acha que vai ser esfregar muito, voc pode incluir
alguns mililitros de gua estril em cada frasco.
Se voc se deparar com uma cerveja engarrafada com sedimentos, apenas colher o
fermento como se apoiaria no laboratrio por agitao do sedimento, ardor as aberturas, e
rapidamente transferir para o frasco. Uma vez que voc chegar em casa, placa o contedo
para que voc possa analisar a amostra para a pureza e uniformidade.
Embora existam muitos contos de aprontar uma amostra desta cervejaria ou que
cervejaria durante uma turn, no consideramos que a etiqueta apropriada. Pea em
primeiro lugar, mesmo se voc acha que eles vo recusar.
cerveja engarrafada
A maior parte de sedimentos cerveja pode ser uma boa fonte de levedura. No entanto, s
vezes pode ser um sucesso ou perder, dependendo da cerveja, e voc deve sempre test-lo
para a pureza antes de cometer um lote de cerveja para fermentao. H alguns desafios,
como tentar recuperar levedura de cerveja filtrada ou pasteurizado. Apesar de cerveja
filtrada pode ter algum levedura nela, difcil cultivar essas pequenas quantidades. Se voc
est determinado, filtrao por membrana de uma ou mais garrafas podem produzir
clulas vivas o suficiente para comear. Se a cerveja pasteurizada, suas chances so
extremamente reduzidas. Mesmo se existem clulas na cerveja, eles so provavelmente
mortos.
O lcool, a presso (CO2), a temperatura, o manuseamento, a contaminao e, em todos
os tempos de trabalho contra a sobrevivncia da levedura e a possibilidade de cultivando-
as a partir de uma garrafa. Como levedura sentar em uma garrafa de cerveja, eles
lentamente tira a cerveja de quaisquer minerais, elementos e alguns acares residuais.
Uma vez que a levedura correr para fora, eles recorrem a alimentao fora material de
clula de levedura morta. Se voc medir o pH de uma cerveja acondicionada em garrafa ao
longo do tempo, voc vai notar um aumento como as clulas morrem e liberam compostos
alcalinos na cerveja.
Alm disso a morte celular, de levedura viva pode sofrer mutao. As mutaes
acontecem quando fragmentos de DNA de levedura reorganizar. Apesar de levedura de
cerveja bastante resistente mutao, as mutaes podem construir ao longo do tempo e,
eventualmente, tornar-se visvel na populao de leveduras. O resultado que voc no
deve sempre esperar levedura colhida de uma cerveja engarrafada para executar
exatamente o mesmo que ele fez no original cervejaria. muito difcil obter levedura
qualidade de classe comercial de cerveja acondicionada em garrafa, mas voc pode obter
algum bom fermento, diversificada para usar em alguns lotes homebrew.
O processo de cultura de levedura de uma garrafa fcil quando se trabalha com cerveja
no filtrada ou acondicionada em garrafa.
1. Refrigerar a garrafa durante uma semana para obter uma boa levedura sedimento no fundo da garrafa.
2. Retirar o frasco do frigorfico, esterilizar todo o topo da garrafa, especialmente na rea do rebordo, e tem um vaso
de recolha de levedura estril pronto. Trabalhar em seu banco de laboratrio em um ambiente limpo.
3. Retire a tampa de garrafa com um abridor higienizado, chama a abertura do frasco, e decantar cuidadosamente a
cerveja em um copo, que voc pode beber depois que voc est feito.
4. Pare de derramar quando voc chegar perto do sedimento, agite a cerveja restante para movimentar as
leveduras, reflame a abertura do frasco, e despeje em seu recipiente de recolha estril.
5. Se a cerveja que voc est trabalhando tem uma mistura de fermento, voc tem duas escolhas. Voc pode crescer
a cultura como est e amadurecer com isso ou placa-la e tentar descobrir o que as colnias representam a
mistura adequada voc est tentando copiar.
6. Se voc est trabalhando com uma nica estirpe, placa-la e usar as tcnicas de laboratrio neste livro para
purificar e testar a tenso.
Mtodos de chapeamento
Ao verificar se h contaminao, a fonte e a concentrao da amostra determina o mtodo
de ensaio.
Quando se trabalha com cerveja ou gua filtrada, o melhor mtodo de filtrao por
membrana de uma amostra de 100 mililitros crescido sobre uma placa. Quando a
concentrao de organismos baixa, filtrao por membrana permite provar um volume
maior. Chapeamento de fora alguns mililitros de cerveja j filtrada ou gua sem filtrao
por membrana seria muito sucesso ou perder, e voc provavelmente no encontrar
qualquer contaminao.
Ao trabalhar com cerveja no filtrada, cerveja acondicionada em garrafa, ou uma cerveja
em fermentadores, a contagem de leveduras muito maior e filtrao por membrana,
muitas vezes no vai funcionar, uma vez que ele vai entupir facilmente. Neste caso, o
derrame mtodo da placa melhor, uma vez que voc pode provar at 10 mililitros de 100
milmetros de pour plate.
Quando se trabalha com a suspenso de leveduras, teste tpico envolve a remoo de
uma amostra de 10 mililitros, diluindo-o a 1: 100 com gua estril, e usando o
espalhamento em placa ou derramar mtodo da placa e um meio adequado. (Se contagem
de bactrias so mais do que 1 por mililitro, e leveduras selvagens mais do que 1 por 0,1
mililitro, voc no deve usar a pasta de levedura).
materiais
100 ml de cerveja ou amostra de gua
aparelho de filtrao por membranas
A bomba de vcuo (bombas manuais ou bombas de aspirador de gua so opes baratas)
Filtro pad (47 mm de dimetro)
membrana (0,45 micron de tamanho de poro)
Placas de mdia
esptula de metal ou frceps
Anti-espuma
Incubadora (cmara anaerbia se testes para bactrias anaerbias)
procedimento
1. Remova placas de meio apropriadas (consulte Figura 6.10 para escolhas seletivas de mdia) de armazenamento a
frio, e permitir-lhes para se aquecer temperatura ambiente.
2. Monte aparelho de filtrao por membrana sob uma capela de fluxo laminar ou perto de um bico de Bunsen.
uma. Se voc estiver trabalhando com um aparelho reutilizvel, use uma pina esterilizada e coloque uma
almofada e da membrana estril em cima da base do filtro. Se voc estiver usando um filtro de membrana em
grade, coloque grade de membrana para cima.
b. Se voc estiver trabalhando com uma amostra de cerveja gaseificada, voc pode querer adicionar algumas gotas
de anti-espuma para a parte inferior da unidade de filtro.
c. Cuidadosamente substituir parte de filtro superior na base.
3. Para cada amostra, despeje 100 ml de cerveja no superior (graduado) copo na unidade de filtro. Marque a tampa
da unidade de filtrao com o tipo de amostra.
4. Coloque a tampa de volta para o copo superior.
5. Prenda a bomba de vcuo para a unidade de filtro e lig-lo. Permitir que a sua amostra lquida a transferir a
partir da poro superior da unidade de base inferior.
6. Desligue a bomba e solte cuidadosamente a vcuo. Retire o filtro de membrana, com uma pina esterilizada e
coloque a membrana (no pad) lado da rede para cima, diretamente no topo do seu suporte seleccionado. Tente
colocar a membrana o mais plano possvel, e evitar bolhas de captura sob a membrana. Voc pode remover e
reaplicar a membrana se necessrio. Colocar a tampa sobre a placa, e etiqueta com o nome da amostra e data.
7. Repita o procedimento com todas as outras amostras. Voc deve usar uma nova unidade de filtrao por
membrana para cada amostra. Para garantir o seu processo e equipamentos slida e estril, voc pode querer
realizar execues de controle com gua estril.
8. Uma vez que todas as amostras esto completos, inverter as placas e coloque em uma incubadora. Voc pode
verificar as placas a cada dia para o crescimento. Normalmente, leva de trs a cinco dias na incubadora para a
contagem de colnias.
Despeje Plates
O derrame mtodo da placa envolve a mistura de uma amostra (tipicamente 1 a 10 ml) em
com o meio, enquanto ele ainda est quente o suficiente para ser lquido, mas no to
quente que mata os organismos que voc quer crescer. Uma vez que as mdias solidifica, a
placa invertidas e incubadas.
H algumas questes para assistir ao fazer verter nas placas. O erro mais comum
misturar a amostra e o meio antes que o meio ter arrefecido suficientemente, matando
algumas ou todas as bactrias e afectar o resultado. Outro problema comum no misturar
a amostra suficientemente com o meio. Se voc no agite a mistura suficiente, voc no vai
conseguir uma distribuio uniforme das colnias, o que torna difcil contar com preciso.
Voc tambm quer evitar misturar uma amostra muito frio com o meio, j que pode cair a
temperatura suficiente para causar o meio solidificar em torno gotas da amostra.
materiais
amostra de cerveja
placas de Petri estreis
Medium em forma ainda lquido, 113-122 F (45-50 C)
Pipeta
Incubadora (cmara anaerbia se testes para bactrias anaerbias)
procedimento
1. Prepare meio apropriado e garantir a temperatura correta (consulte Figura 6.10, p. 212, Para escolhas meios
seletivos).
2. com uma pipeta uma ali quota da amostra para a placa. possvel testar amostras de 1 a 2 mililitro em placas de
60 milmetros e at amostras de 10 mililitro em placas de 100 milmetros. Se a concentrao de organismos
elevada, pode ser necessrio preparar uma diluio da amostra para obter uma contagem exacta.
3. Deitar a forma continua-lquido para dentro da placa a uma profundidade de, pelo menos, vrios milmetros
durante a agitao do prato para distribuir uniformemente a amostra. Alternativamente, voc pode misturar a
amostra e meio em um balo Erlenmeyer e, em seguida, despeje em um prato.
4. Aguarde at que o meio solidificar, e inverter.
5. Coloque em uma incubadora (anaerbio se necessrio), lado mdio-se, a 86 F (30 C) durante trs dias.
6. Resultados Record, incluindo o nmero, tipo, tamanho e cor das colnias observadas. Algumas bactrias podem
crescer sobre a superfcie, enquanto outros se formam colnias em forma de lente dentro do gar. Para provar
colnias submersas, facada por meio do agar com um loop.
placas de spread
O mtodo de espalhamento em placa envolve a diluio da amostra e, em seguida, a
transferncia de uma pequena quantidade para a superfcie de uma placa de agar. Voc,
ento, espalhar a amostra e quaisquer organismos uniformemente sobre toda a superfcie
com uma esptula. Esta tcnica limitada quantidade de lquido que a superfcie do gar
pode absorver uma quantidade razovel de tempo, geralmente no mais do que 0,1
mililitro em uma placa de 100 milmetros.
materiais
amostra de suspenso de levedura
Placas de mdia
pipeta estril
difusor de vidro
fonte Chama
lcool isoproplico de 70% na proveta profunda o suficiente para submergir final espalhador
Incubadora (cmara anaerbia se testes para bactrias anaerbias)
procedimento
1. Diluir a amostra para baixo para proporcionar uma concentrao adequada de organismos. Voc pode precisar
preparar vrias diluies para obter colnias devidamente separados para a contagem. Pipetar 0,1 ml da
amostra sobre o centro da superfcie do agar.
2. Remova o espalhador do banho de lcool e passar rapidamente atravs da chama, queimar o lcool. Se voc
manter a haste na chama por muito tempo, ele vai ficar quente e pode queimar a mo. Permitir que o espalhador
para AIRCOOL na rea em torno da chama ou de tocar a superfcie do gar de distncia a partir da amostra.
3. Espalhar a amostra atravs da superfcie de agar com o espalhador. Mova o difusor frente e para trs, de cima
para baixo ao longo da placa vrias vezes. Ao contrrio de estrias com um loop para isolar colnias, que pretende
recuar muitas vezes em toda a superfcie para distribuir a amostra o mais uniformemente possvel. Rode a placa
de 90 graus e repita. Rode a placa de 45 graus e repita. No esterilize o difusor entre cada volta do prato.
4. Substituir a tampa da placa, e esperar vrios minutos at que o lquido da amostra absorvida no agar. Fixar a
tampa e ligue a placa de cabea para baixo, mdio lateral-se, antes de colocar na incubadora.
5. Incubar (anaerbio se necessrio) com o lado mdio-se a 86 F (30 C) durante trs dias.
6. Resultados Record, incluindo o nmero, tipo, tamanho e cor das colnias observadas.
Verifique Plates
Labs usar chapeamento para a cultura de levedura e para testes de contaminao de
amostras lquidas, mas voc tambm pode usar o chapeamento para testar seu ambiente de
cervejaria. Voc pode definir placas abertas para fora e inspecionar qualquer crescimento
para determinar como limpo ou sujo o ar est em uma rea particular. Chamamos esses
"chapas de seleo." Aqui est um exemplo onde isso vai ser til.
Uma cervejaria informou jorrando em algumas de suas garrafas, que soa como uma
contaminao leveduras selvagens, mas no tinha testado as garrafas completamente.
Partimos placas de seleo em muitas reas da rea de fabricao de cerveja e
engarrafamento e alguns fora. Tal como acontece com muitas pequenas cervejarias,
manteve a maioria das portas abertas (incluindo as portas roll-up) durante todo o dia. A
maioria das pequenas cervejarias tambm no colocar as suas linhas de engarrafamento
em uma sala limpa em separado, ento eles esto sujeitos ao ambiente externo. As placas
externas mostraram elevados nveis de leveduras selvagens, assim como as placas no
interior. Esfregando as garrafas vazias e a cultura da cerveja mostrou a mesma levedura
selvagem como do lado de fora.
materiais
WLN e WLD placas (ver seco media Wallerstein, pp. 242-244)
Incubadora
procedimento
1. Permitir WLN e WLD placas para aquecer.
2. Separe um conjunto de placas de controlo. No abri-los, uma vez que elas so para testar a esterilidade das
placas.
3. Etiqueta de uma placa e uma placa WLN WLD para cada zona a ser testada, juntamente com a data actual.
4. Coloque os WLN e WLD rotulados placas em reas como a cervejaria, rea de fermentao, rea de laboratrio,
rea de pitching de levedura, a rea de engarrafamento, etc., com as tampas removidas e a superfcie exposta.
5. Deixe cada placa aberta por 60 minutos.
6. Aos 60 minutos, perto e recolher todas as placas, incluindo os controles, e coloque em uma incubadora, lado
mdio-se, a 86 F (30 C) durante trs dias.
7. Resultados Record, incluindo o nmero, tipo, tamanho e cor das colnias observadas.
swabbing
Este um teste mais direto do que placas de seleo. Em vez de verificar o que cai sobre a
placa do ar, voc raia um cotonete estril em uma rea, transfira para um prato, e ver o que
cresce. Esta uma tima maneira de verificar o interior de tubos, tanques, gaxetas e
trocadores de calor.
materiais
Placas de mdia
compressas estreis
Incubadora
procedimento
1. Permitir placas aquecer at temperatura ambiente.
2. Placas etiqueta com a rea swabbed ea data. Use WLD ou placas SDA para testar bactrias. Use placas LCSM ou
outras placas de levedura selvagem para testar a levedura selvagem.
3. Pegue um cotonete estril e raia uma placa. Rotular esta placa "Control". Isso garante que seus cotonetes so
estreis e o meio bom.
4. Aqui outra mecha de algodo estril, e limpe a rea a ser testada.
5. Streak as placas adequadamente rotuladas.
6. O mesmo swab podem ser semeadas em duas ou mais placas se forem utilizados vrios tipos de mdia.
7. Coloque em uma incubadora, mdio lateral-se, a 86 F (30 C) durante trs dias.
8. Resultados de registro, inclusive nmero, tipo, tamanho e cor das colnias observadas.
amostragem tanque
Muitas vezes, a cerveja que voc deseja testar ainda est no fermentador. Voc deseja obter
uma amostra limpa para evitar leituras falsas no laboratrio. importante que todo o
pessoal de recolha de amostras utilizando o mesmo mtodo. Falta de ateno a limpeza e
desinfeco pode resultar em testes microbianos inconsistente e fermentadores
contaminados.
O mtodo simples: o trabalho como assepticamente possvel. importante que voc
est pronto o seu material antes de sair para a coleo. Remova todas as jias das mos e
antebraos e lave bem. Se possvel, usar luvas de ltex e usar isopropanol em suas mos
enluvadas. Para melhores resultados, trabalhar nas proximidades de uma chama. Voc
pode usar uma chama de gs porttil para esterilizar o ponto de amostragem. Trabalhar o
mais rpido possvel, uma vez que voc abriu seu recipiente estril.
materiais
vasos de recolha estril, marcado com o tipo de amostra e data
Cotonetes de amostragem de algodo ou espuma
toalhetes 70% isopropanol ou asspticas
chama de gs porttil
procedimento
1. Ter o seu, garrafa de recolha rotulado estril nas proximidades, com a tampa desenroscada (no remover a
tampa ainda).
2. Limpe o interior do espigo / torneira com um cotonete embebido em isopropanol. Repita at impecavelmente
limpos.
3. Use um toalhete anti-sptico ou isopropanol para limpar fora da torneira.
4. Chama a torneira com a chama porttil, se possvel.
5. Abra a vlvula e deixe cerca de 12 onas (0,33 L) de fluxo de cerveja atravs da torneira antes de recolher para o
frasco estril. Recolha um mnimo de 120 mililitros para testes microbianos completa. Feche a tampa com
segurana.
6. Repita o procedimento de limpeza aps a coleta da amostra, e tomar as amostras de volta para o laboratrio para
processamento. O tratamento pode incluir filtrao por membrana ou chapeamento.
materiais
recipiente de recolha do mosto estril
Incubadora ou local quente
mesa Shaker (opcional)
procedimento
1. assepticamente recolher uma amostra de mosto a partir do fermentador antes lanando o fermento.
2. Coloque na incubadora a 86 F (30 C) durante trs dias, num agitador de tapete, se disponvel.
3. Verifique se h embaamento, bolhas, off-odores, comeando no primeiro dia.
4. Consulte Figura 6.11 para os resultados.
Voc tambm pode verificar a estabilidade do mosto, para ver se o processo de tom ou
arremesso introduziu qualquer contaminao.
materiais
recipiente de recolha do mosto estril
soluo Cycloheximide
Incubadora ou local quente
mesa Shaker (opcional)
procedimento
1. assepticamente recolher uma amostra de mosto a partir do fermentador aps lanando o fermento.
2. Adicionar uma soluo cicloheximida mililitro por 100 mililitros de amostra. Claramente marcar amostra como
veneno.
3. Coloque na incubadora a 86 F (30 C) durante 3 dias, num agitador de tapete, se disponvel.
4. Verifique se h nvoa, bolhas, off-odores, mas no gosto, como venenosa.
5. Consulte Figura 6.11 para os resultados e comparar com resultado no-frequncia.
6. Elimine amostra de uma forma segura e adequada.
Voc pode executar os mesmos testes na cerveja embalada para verificar a estabilidade
do seu processo de embalagem. Se voc garrafa de cerveja, basta definir um par de lado a
86 F (30 C) e inspecionar sua condio ao longo do tempo. Voc tambm pode tratar
algumas amostras com cicloheximida, mas tenha muito cuidado para impedir que algum
provar o cerveja por acidente.
materiais
recipiente de recolha do mosto estril
Incubadora ou local quente
mesa Shaker ou placa de agitao (opcional)
procedimento
1. assepticamente recolher uma amostra de mosto a partir do fermentador.
2. Coloque na placa de agitao ou mesa agitador, se voc tiver um, a 80 F (27 C).
3. Uma vez que toda a atividade pra, fazer uma leitura gravidade especfica. Esta a gravidade mnima, o limite de
atenuao possvel que com a combinao de levedura e mosto.
Esta fermentao teste deve chegar a gravidade final, mais rpido do que a sua
fermentao principal. Voc pode usar essas informaes para ajudar a tomar decises
sobre a sua fermentao principal. Se a fermentao principal parece parar cedo, voc j vai
saber o nvel de atenuao foi possvel. Se voc precisar fazer ajustes de temperatura na
fermentao principal com base numa percentagem de atenuao, voc vai saber o valor
representa 100 por cento da atenuao.
Fora diacetil
Grandes cervejarias medir os nveis de diacetil com cromatografia gasosa (ou nveis como o
total vdk com um espectrofotmetro). Um cromatgrafo a gs ou espectrofotmetro est
alm do escopo de muitas pequenas cervejarias e a maioria dos fabricantes, mas h uma
maneira simples, no quantitativa para ver se sua cerveja tem potencial diacetil.
precursores diacetil transformar em diacetil atravs de oxidao. Voc pode forar esta
converso no laboratrio, usando o calor e oxignio para mudar precursores sem sabor em
sua cerveja para diacetil em um curto espao de tempo.
materiais
Dois copos
Papel alumnio
Banho de gua quente
banho de gua gelada
Termmetro
procedimento
1. Aquecer o banho de gua a 140 a 160 F (60-71 C).
2. Recolha de cerveja em cada copo e cobrir com folha de alumnio.
3. Colocar um vidro no banho de gua quente, enquanto mantm o outro temperatura ambiente.
4. Aps 10 a 20 minutos, remover a cerveja a partir do banho quente, e arrefece-se mesma temperatura que a
outra amostra. Um banho de gua gelada eficaz para o arrefecimento.
5. Retire o papel alumnio e cheirar cada amostra. Se voc sentir o cheiro do personagem amanteigado de diacetil
numa ou em ambas as amostras, voc sabe que a sua cerveja tem o precursor diacetil.
reagentes
a) Soluo de -Naphthol. Dissolve-se 4 gramas -naphthol (C10H7OH) em 100 mililitros de isopropanol, 99,6%.
Adicionar cerca de 0,5 gramas de carbono vegetal, e agitar mistura durante cerca de 30 minutos, seguida de
filtrao. filtrado loja no escuro na garrafa mbar.
b) Uma soluo de KOH-creatina. Dissolve-se 0,3 grama de creatina em 80 mililitros soluo de KOH a 40%
(aquoso) e filtrar. Armazenar em um recipiente de polietileno sob refrigerao.
c) O diacetil, soluo de estoque. Preparar uma soluo aquosa contendo 500 miligramas por litro. Armazenar num
frasco mbar no frigorfico.
d) Diacetil, soluo de trabalho. Preparar imediatamente antes da utilizao, diluindo soluo de 1 mililitro de 100
ml com gua; concentrao de 5,0 miligramas por litro.
Aparelho
Colormetro ou espectrofotmetro
Equipamento de destilao, de preferncia todos os vidros
Bales volumtricos, 10 ml
Cilindros graduados, 50 ml
Manta de aquecimento para o frasco de ebulio
calibragem
Prepara-se uma curva padro de 0,5, 1,0, 1,5, 3,0, e 4,0 mililitros de soluo de trabalho de
diacetilo em 10 ml de frascos volumtricos. Adicionar gua para levar o volume em cada
um com cerca de 5,0 mililitros. Use 5 mililitros de gua para branco de reagente.
Desenvolver cor como no passo 2 abaixo.
procedimento
1. destilar 100 mililitros descarbonificado cerveja em um 50-mililitro cilindro graduado contendo 5 mililitros de
gua. Recolher cerca de 15 mililitros de destilado e diluir para 25 ml com gua. Pipetar uma alquota de 5-
millimiter para um balo volumtrico de 10 ml.
2. O desenvolvimento da cor. Adicionar soluo -naphthol 1 mililitro (reagente a) a cada frasco e agite. Adicionar
uma soluo de KOH-creatina 0,5 mililitro (reagente b) a no mais do que 4 ou 5 frascos de cada vez. Encha para
marcar e agitar vigorosamente durante 1 minuto. Deixe repousar, e medir a absorvncia a 530 nm contra o
branco de reagente entre 5 e 6 minutos aps agitao. Repita este procedimento at que todas as amostras foram
medidos.
os valores de absoro 3. enredo para normas contra miligramas por litro diacetil. Leia incgnitas do grfico e
calcular o contedo diacetil de cerveja.
Ensaios de fermentao
O propsito de um teste de fermentao em escala de laboratrio para imitar a
fermentao de produo em uma escala muito menor; 1,5 litros um tamanho que
funciona bem. Este teste permite que um fabricante de cerveja de experimentar com uma
nova cepa de levedura ou mltiplas estirpes, no apenas para a atenuao, mas para a taxa
de fermentao e compostos de sabor bem. Voc pode executar vrios testes ao mesmo
tempo sem que se torne demasiado pesado. Recolha 1,5 litros de mosto quente (fervida e
pulou como de costume), para cada ensaio que voc deseja realizar, em um recipiente
grande, estril. Resfriar o mosto para a temperatura de fermentao desejado, em seguida,
oxigenar acordo com as suas normais padres Brew House. Voc tambm pode adicionar
uma quantidade muito pequena de anti-espuma esterilizado ao mosto neste momento para
evitar a espuma-over. Transferir 1,5 litros de mosto para vasos de fermentao, utilizando
tcnicas asspticas.
Agora voc est pronto para lanar o fermento em suas taxas de pitching corretas.
fundamental que voc use uma taxa de arremesso to preciso quanto possvel, uma vez que
as fermentaes de menor escala so mais propensas a erros no lanamento da taxa. Tal
como acontece com todas as fermentaes, em escala laboratorial ou de produo
principal, voc deve gravar e monitorar temperaturas de fermentao a partir lanando ao
fim. Alm disso, manter um registro de leituras de gravidade dirias de cada fermentao
durante sete dias. O controle de temperatura o parmetro mais importante para
aperfeioar; caso contrrio, a cerveja julgamento de fermentao no provar como a
principal cerveja de fermentao. Grficos de estas leituras de gravidade ao longo do tempo
fornece uma comparao visual de atenuao entre os diferentes fermentaes. Alm disso,
voc pode analisar a cerveja resultante para coisas como compostos de amargor e sabor.
Este mtodo permite escala laboratorial amplo de volume para as leituras de gravidade
dirios, bem como anlises ps-fermentao.
materiais
medidor de oxignio dissolvido
placa de agitao
equipamento de fermentao de teste
Materials
Visible spectrum spectrophotometer
1 cm cuvettes
Pipettes
If you do not have a spectrophotometer, you can estimate glycogen visually. The reagent
will stain cells rich in glycogen (approximately 1 mg/ml) very dark brown and cells low in
glycogen (0.1 mg/ml) yellow.
Materials
Malt agar plates
Agar
2 sterile 250 ml glass bottles
Distilled water
Triphenyltetrazolium chloride (TTC)
NaH2PO4 (anhydrous, mol. wt. 120.0)
Na2HPO4 (anhydrous, mol. wt. 141.96)
NOTE: You must wear gloves, goggles, and face mask when handling TTC.
Procedure
1. Dilute yeast sample to 500 to 1000 cells/milliliter. Plate 0.1 milliliter of this yeast solution onto a small malt agar
plate. For reproducibility, make five plates for each yeast sample.
2. Let the plates incubate for two to three days at 80 F (27 C).
3. Prepare overlay solutions:
Solution A
Place in a sterile 500 ml bottle:
1.26 g NaH2PO4
1.16 g Na2HPO4
3 g agar
Fill with distilled water up to the 100-milliliter mark, swirl contents, and place cap loosely.
Solution B
Place in another 500 ml bottle:
0.2 g TTC
Fill with distilled water up to the 100-milliliter mark, swirl contents, and place cap loosely.
4. Autoclave or pressure-cook each solution at 250 F (121 C) for 15 minutes. Combine the two solutions when
they reach about 131 F (55 C).
5. Overlay each plate with about 10 milliliters of the TTC solution, making sure the colonies are completely covered.
Let the plates incubate for 1 to 3 hours at 80 F (27 C), and record the results immediately. Leaving the plates to
incubate longer or putting the plates into cold storage to count later allows the TTC to oxidize and compromises
the results of the test.
6. Colonies that stain a pink or red color are normal. Colonies that do not change color are respiratory deficient.
7. Count the number of stained and nonstained colonies to determine the percentage of respiratory mutants in the
culture. An acceptable level is less than 1 percent.
Materials
Yeast extract
Agar
Peptone
Distilled water
Dextrose
Sterile bottle
Bacteria Tests
The number of detrimental organisms capable of destroying your beer is actually quite
small, but the effects of these few can be horrendous. Due to the presence of hop resins
(which act as antibacterial agents), low pH, high cooking temperatures, ethanol, and an
anaerobic fermentation, beer is a hostile environment with limited resources for most
organisms. However, there are a few organisms that thrive in beer. Although none of these
can cause death or serious illness, they can do great damage to your beer.
Lactobacillus: The most common beer spoiling bacteria. Lactobacillus are resistant to
hop compounds and will perform under anaerobic conditions. They abound in your mouth
and on grain, which is one of the reasons you do not want to mill your grain where the dust
can reach the cold side of your process. Evidence of Lactobacillus are a tart sourness
similar to spoiled milk as well as possible diacetyl flavors. They usually create a haze
similar to nonflocculent yeast.
Pediococcus: Sometimes found in the late stages of beer production, especially in lagers.
They can be similar to Lactobacillus and will produce acidity, diacetyl flavors, and
sometimes viscosity and ropiness.
B. coagulans and B. stearothermophilus: These lesser-known microorganisms can cause
wort spoilage when a brewer leaves wort for long periods at higher temperatures (150 to
175 F, 65 to 80 C) and can create high levels of lactic acid.
Acetic acid bacteria: Acetobacter and Gluconobacter function mainly in aerobic
conditions and oxidize ethanol to carbon dioxide and water, resulting in vinegar.
Obesumbacterium proteus: These bacteria are able to tolerate a wide pH range (4.4 to 9)
but lack resistance to hop compounds. They are responsible for dimethyl sulfide, dimethyl
disulfide, diacetyl, and fusel oils. These produce vegetative or cooked vegetable flavors.
Zymomonas: These bacteria can ferment glucose or fructose to ethanol and produce
acetaldehyde and hydrogen sulfide. This can produce a rotten-egg aroma in the finished
beer.
UBA Medium
Universal Beer Agar (UBA) is a medium containing nutrients and agar. You add beer to it
during preparation, which purportedly makes UBA closer than other media to the natural
environment found in a brewery. By using beer to prepare the medium, it becomes more
selective for microorganisms that have adapted themselves to the presence of beer
compounds, such as hops and alcohol. This reduces the chance of false positives from non-
beer-spoiling organisms. You can also add cycloheximide (1 mg/L) to suppress yeast
growth when testing yeast slurries for bacterial contamination.
Materials
UBA medium
Distilled water
Beer
Cycloheximide (optional)
Autoclave or pressure cooker
500 ml Erlenmeyer
Foam or cotton stopper
Procedure
1. Weigh out 5.5 grams of UBA into the Erlenmeyer.
2. Add 75 milliliters distilled water (and cycloheximide, if you wish to suppress yeast growth). Close with a foam or
cotton stopper, and bring the contents to a boil for 1 minute with constant agitation to dissolve.
3. While medium is hot, mix in 25 milliliters of beer without de-gassing.
4. Autoclave at 250 F (121 C) for 10 minutes. Higher temperatures or longer durations are detrimental to the
medium.
5. After autoclaving you can either use for pour plates when it reaches 113 to 122 F (45 to 50 C) or pour 12- to 15-
milliliter aliquots of the medium into sterile Petri dishes and allow to solidify. You can use the solidified plates
for other testing methods.
6. Store unused plates in the refrigerator and protect from daylight. The shelf life of prepared plates is
approximately one week, and two months for medium stored in bottles.
7. Once samples are plated, close and invert the plates. Place in an incubator at 86 F (30 C) in either an anaerobic
environment to detect beer-spoiling bacteria or an aerobic environment to detect yeast- and wort-spoiling
bacteria.
8. Examine plates daily for three days for growth. Select identical and typical colonies for further identification via
gram staining or other methods.
HLP Medium
Hsus Lactobacillus Pediococcus medium, as the name suggests, tests for the presence of
Gram-positive lactic acid bacteria of the genera Lactobacillus and Pediococcus. HLP
contains cycloheximide, which kills yeast but allows anaerobic bacteria to grow.
Inoculating the medium while it is still in liquid form (113 F, 45 C) allows it to solidify
around the sample, creating an anaerobic environment. HLP also contains oxygen
scrubbers to rid the medium of any remaining oxygen. Anaerobic, heat resistant, and hop
resistant, Lactobacillus and Pediococcus are the most common beer spoilers. This makes
HLP one of the most popular media used in brewing laboratories.
Materials
HLP medium
Distilled water
Agar
Sterile pipettes
Mechanical pipetter
16 x 150 mm sterile screw-cap culture tubes
500 ml Erlenmeyer
Foam or cotton stopper
Incubator
Procedure
CAUTION: Wear goggles, gloves, and face mask when weighing HLP.
1. Weigh out 7 grams HLP medium and 2 grams agar. Mix with 100 milliliters distilled water in the Erlenmeyer.
2. Close the flask with a permeable foam stopper or cotton plug.
3. Heat to boiling, swirling the contents frequently until the HLP dissolves completely.
4. Allow to cool in a hood or lab bench. If you are going to use the mixture at a later time, let it cool to room
temperature, then place in cold storage for no more than two weeks.
5. If you will use the mixture right away, take a reading to assure it is at the correct temperature of 113 F (45 C)
before pouring tubes.
6. Pipette 1 milliliter of the sample for testing into a sterile 16 x 150 mm screw-cap tube. Mark each tube with a
sample number and date.
7. Transfer 17 milliliters HLP medium to each tube, and close the caps tightly.
8. Gently invert twice to distribute the sample evenly through the tube.
9. Place the tubes in an incubator at 86 F (30 C) for 48 hours.
10. Perform a preliminary count. Lactobacillus appear as white, inverted teardrop-shaped colonies and Pediococcus
appear as white spherical colonies.
11. Place back in the incubator at 86 F (30 C) for an additional 24 to 48 hours.
12. Perform a final count.
SDA Medium
You can use Schwarz Differential Agar (SDA), also known as Lees Multi-Differential Agar
(LMDA), to detect the presence of aerobic and/or anaerobic bacteria. SDA contains calcium
carbonate (CaCO3) to help identify acid-producing bacteria, bromocresol green to
differentiate colony characteristics by color, and, optionally, cycloheximide to kill yeast
growth. Acetic acid bacteria (Acetobacter, Gluconobacter) will display a halo zone around
the colonies and will appear greenish blue on the underside. Because these organisms are
often resistant to the negative effects of alcohol, acid, and hops, beer is a hospitable
medium. Turbidity, ropiness, and off-flavors are results of even a small amount of
Acetobacter or Gluconobacter contamination.
You can use the same medium under anaerobic conditions to detect Lactobacillus and
Pediococcus. Lactobacillus colonies will display a halo zone and appear greenish-white
with a dark green center and yellow underside. Pediococcus grow slower than the other
organisms. They will appear smaller with a narrow halo zone.
Materials
SDA medium
Cycloheximide (optional)
Distilled water
Autoclave or pressure cooker
Sterile pipettes
Mechanical pipetter
Sterile Petri dishes
500 ml Erlenmeyer
Foam or cotton stopper
Incubator
Procedure
1. Weigh out 8.3 grams SDA into a 500 ml Erlenmeyer.
2. Add 100 milliliters distilled water and 10 percent cycloheximide if you wish to suppress yeast growth. Close with
a foam or cotton stopper and bring the contents to a boil for 1 minute with constant agitation to dissolve.
3. Autoclave at 250 F (121 C) for 10 minutes. Higher temperatures or longer durations are detrimental to the
medium.
4. After autoclaving, swirl the flask frequently while it cools to keep the CaCO3 suspended, but avoid creating foam.
5. Once the medium reaches 113 F (45 C), pour 12- to 15-milliliter aliquots of the medium into sterile Petri dishes
and allow it to solidify. To insure even distribution of CaCO3, avoid moving the dishes after you pour them.
6. If there is any foam on the surface after pouring, flame with a Bunsen burner to break the bubbles.
7. Once the plates become firm, invert and let dry overnight in an incubator at 86 F (30 C). Avoid drying hotter or
longer than necessary.
8. Dilute the sample for testing to a concentration between 100 and 900 bacterial cells per milliliter. Your goal is to
have about 25 to 50 colonies per plate. You may want to prepare several different dilutions to improve your
chances of getting the right concentration.
9. Pipette 0.1 milliliter of the sample onto an SDA plate and spread with a sterile cell spreader.
10. Close and invert the plates. Place in an incubator at 86 F (30 C) in either an anaerobic environment to detect
beer-spoiling bacteria or an aerobic environment to detect yeast- and wort-spoiling bacteria.
11. While you may see colonies forming earlier, it takes four to seven days for the bacterial colonies to develop
enough to identify the organism.
MacConkey Medium
MacConkey is a differential medium that selects for Gram-negative bacteria (such as
Escherichia coli) and inhibits the growth of Gram-positive bacteria due to crystal violet and
bile salts. It contains two additives that make it differential: neutral red (a pH indicator)
and lactose (a disaccharide).
Materials
MacConkey medium
Distilled water
Autoclave or pressure cooker
Sterile Petri dishes
500 ml Erlenmeyer
Foam or cotton stopper
Incubator
100 ml beer or water sample
Membrane filtration apparatus
Vacuum pump
Filter pad (47 mm diameter)
Membrane (0.45 micron pore size)
Metal spatula or forceps
Incubator
Procedure
1. Weigh out 5 grams MacConkey agar into the Erlenmeyer.
2. Add 100 milliliters distilled water. Close with a foam or cotton stopper and bring the contents to a boil for 1
minute with constant agitation to dissolve.
3. Autoclave at 250 F (121 C) for 15 minutes.
4. Once the medium reaches 113 F (45 C), pour 12- to 15-milliliter aliquots of it into sterile Petri dishes and allow
it to solidify.
5. Follow the process for membrane filtration of the 100-milliliter sample.
6. Invert the plate and place in an incubator at 86 F (30 C). You can check the plate each day for growth. Usually it
takes three to five days in the incubator for the enumeration of colonies. Lactose-fermenting colonies appear red
to pink. Other bacteria form colorless colonies.
Gram Stain
Danish scientist Hans Christian Gram invented the Gram stain in 1884 in an effort to aid the
taxonomy of bacteria. Gram staining allows you to separate unidentified bacteria into two
groups: Gram-positive and Gram-negative. While the separation may not appear to be
significant in the classification of bacteria, it has great value for brewing labs. Six of the
approximately eighteen common brewery bacterial contaminants are Gram-positive.
Although this does not provide a definitive identification of the bacteria, it is a useful tool in
narrowing the field of possible beer spoilers.
The Gram stain procedure consists of a primary stain, a trapping agent, a decolorizing
agent, and a counter-stain. Gram-positive cells retain the crystal violet stain and appear
violet. Gram-negative cells do not retain the crystal violet stain and retain the pink safranin
counterstain instead. While both Gram-positive and Gram-negative cells can take up the
crystal violet dye, only the Gram-positive cells can retain it. The decolorizing agent partially
destroys the Gram-negative cell wall, inhibiting its ability to retain the crystal violet dye
and allowing the safranin to take hold instead.
In addition to bacterial identification aid, Gram staining increases the definition of cell
structure and pattern. You can supplement Gram staining with other tests, such as catalase
reaction and oxidase reaction, to pinpoint the microbe in question.
Materials
Slides
Rinse bottle filled with water
Crystal violet
Grams iodine
95% ethyl alcohol
Safranin
Preparing a Smear
1. Using an inoculation loop, transfer a drop of the culture to the slide. If the culture contains too much bacteria, the
smear will be too dense, which makes good staining almost impossible.
2. The proper amount of bacteria will be a barely visible dot of material on the loop.
3. Spread the drop out to a diameter the size of a dime (about 18 mm) and allow to air dry.
4. Hold the slide with forceps or a clothespin, and fix it over a gentle flame for a couple of seconds. Keep the slide
moving over the flame to avoid hot spots. This helps adhere the culture to the slide without burning it and
causing morphological changes.
Procedure
1. Prepare a bacterial smear of the culture in question.
2. Using forceps or a clothespin to hold the slide, flood the smear with five drops or so of crystal violet and wait for
60 seconds.
3. Pour off the stain and very gently rinse under the faucet or with a rinse bottle. You only want to rinse off the
excess stain, not remove the smear from the slide. Do not rinse excessively.
4. Flood the slide with five drops or so of Grams iodine for 60 seconds.
5. Pour off the iodine and rinse.
6. Decolorize by adding drops of 95% ethyl alcohol onto the smear until the solution runs clear. Wait too long or
rinse too much, and you will remove too much stain from the cells. This is one of the most important steps. If you
always get Gram-negative results even when staining Gram-positive bacteria, then you are overrinsing.
7. As soon as it runs clear, rinse immediately with water.
8. Flood slide with five drops or so of safranin counterstain for 30 seconds.
9. Pour off the counterstain and rinse.
10. Shake off the excess water or gently blot with paper towel and let air dry.
11. Examine under a microscope. Gram-positive is blue or purple and Gram-negative is pink or red.
LWYM or LCSM
Lins Wild Yeast Medium (LWYM) uses crystal violet to inhibit the growth of brewers yeast
while still allowing Saccharomyces wild yeast to grow. If you want to screen for non-
Saccharomyces wild yeast, then Lins Cupric Sulfate Medium (LCSM) uses cupric sulfate to
allow non-Saccharomyces wild yeast growth. By plating on either of these media, you can
determine if there is wild yeast in with your brewers yeast. Certain brewers yeast strains
will still display microcolonies on wild yeast media, so it is important to know their typical
morphology and be aware of any abnormal differences.
Materials
LWYM or LCSM
Distilled water
Sterile pipettes
Mechanical pipetter
16 x 150 mm sterile culture tubes
500 ml Erlenmeyer
Foam or cotton stopper
Incubator
Autoclave or pressure cooker
Procedure
1. Measure 4 grams LWYM or LCSM into 100 milliliters of distilled water in a 500 ml Erlenmeyer flask.
2. Add 1 milliliter of crystal violet solution (LWYM) or cupric sulfate solution (LCSM).
3. Dissolve the medium by heating to a boil. Swirl frequently.
4. Autoclave or pressure cook at 250 F (121 C) for 15 minutes.
5. Pour sterile plates with 12- to 15-milliliter aliquots of the medium, and allow it to solidify.
6. Refrigerate LWYM plates for 24 to 48 hours before use, but use within five days. You can use LCSM plates
immediately or refrigerate, but use them within three days.
7. Dilute the yeast culture to approximately 5 million cells per milliliter. Pipette 0.2 milliliter of the diluted sample
onto LWYM or LCSM. Disperse the culture over the surface, using a sterile cell spreader.
8. Place in an incubator and hold at 82 F (28 C) for four to six days. You can assume any distinct colonies (ignore
microcolonies) that form may be wild yeast.
Lysine Media
Lysine media uses L-Lysine to provide organisms with a nitrogen source. Most
Saccharomyces yeast cannot use lysine as their only source of nitrogen, making them
lysine-negative. Many other yeast strains (non-Saccharomyces) utilize lysine-N and grow
on lysine medium, making them lysine-positive.
Materials
Distilled water
Yeast extract
Lysine monohydrochloride
Agar
500 ml Erlenmeyer
Sterile 100 x 15 mm Petri plates
Sterile pipette
Sterile cell spreader
Foam or cotton stopper
Autoclave or pressure cooker
Sterile filtration membrane
Procedure
1. Dissolve 2.35 grams yeast extract in 100 milliliters distilled water, and sterile filter.
2. Add 0.5 gram lysine and 4.0 grams agar to 100 milliliters distilled water, and autoclave at 250 F (121 C) for 15
minutes. While still liquid, add the liquid from the previous step.
3. Cool to 113 to 122 F (45 to 50 C). Thoroughly mix 1 milliliter of test sample with 12 to 15 milliliters of the
lysine medium in a sterile plate and allow to solidify.
4. Dilute the yeast culture to approximately 5 million cells per milliliter. Pipette 0.2 milliliter of the diluted sample
onto the plate. Spread evenly over the surface using a sterile cell spreader.
5. Incubate at 80 F (27 C) for two to six days, and determine the number of wild yeast per milliliter of the original
sample.
Wallerstein Media
Wallerstein Laboratories Nutrient media come both with and without cycloheximide.
Wallerstein Laboratories Differential medium (WLD) contains cycloheximide, which is an
antibiotic that kills most brewing yeasts and mold while allowing common brewery
bacteria to grow. Wallerstein Laboratories Nutrient (WLN) does not contain cycloheximide
and is nonselective, allowing the growth of brewers yeast, wild yeast, bacteria, and mold.
Both WLN and WLD contain bromocresol green indicator, which will cause the media to
lighten in color from blue to yellow or light green in the presence of acid-secreting bacteria.
Voc tambm pode incubar as placas Wallerstein aerbia e anaerbia. condies
aerbicas vai ajudar a identificar bactrias do cido actico e entricas, enquanto as
condies anaerbias ir ajudar a identificar Lactobacillus e Pediococcus.
materiais
gua destilada
WLN ou mdio em p WLD
Erlenmeyer de 500 ml
estril de 100 x 15 mm de placas de Petri
rolha de espuma ou algodo
autoclave ou panela de presso
procedimento
1. Pesar 8 gramas WLN ou mdio WLD e coloque no Erlenmeyer de 500 ml.
2. Adicione 100 ml de gua destilada, deixe de molho por 10 minutos e, em seguida, agite para misturar. Feche com
uma espuma ou algodo rolha, e trazer o contedo para ferver por 1 minuto com agitao constante para
dissolver.
3. autoclave a 250 F (121 C) durante 15 minutos.
4. Deixe o fresco meio ligeiramente (cerca de 20 minutos) antes de derramar placas. Como alternativa, uma vez que
o mdio tenha arrefecido, pode fechar bem a tampa e coloc-lo em cmara fria para reaquecer e derramando
mais tarde.
5. Enquanto o meio arrefecimento, marcar as placas estreis com o tipo mdio e data.
6. Despeje placas estreis com alquotas de 12 a 15 mililitros do meio, e deixe-a solidificar.
7. Dilui-se a cultura de levedura a cerca de 5 milhes de clulas por mililitro. Pipetar 0,2 ml da amostra diluda na
placa. Dispersa-se a cultura atravs da superfcie, usando um espalhador de clulas estril.
8. Colocar numa incubadora e segurar 48 horas aerobicamente a 86 F (30 C) para que as bactrias ou
anaerobicamente a 80 F (27 C) para levedura.
9. bactrias do cido lctico colnias vai crescer anaerobicamente. As colnias tero a mesma aparncia, mas ser
menor quando cultivada aerobicamente. colnias Pediococcus aparecem verde-amarelado e so suaves,
enquanto as colnias de Lactobacillus aparecem em verde oliva e pode ser lisa ou spera.
10. Voc s ver bactrias do cido actico (Acetobacter, Gluconobacter) em placas aerobicamente cultivados. As
colnias aparecem em azul-verde na cor e na textura suave. O meio que rodeia as colnias vai mudar de cor
tambm, devido ao cido das bactrias produzem.
11. bactrias entricas (Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella, Obesumbacterium) variam de azul-verde para
amarelo-verde e so, por vezes translcida. Eles tm uma textura lisa e viscoso, mas a forma em torno das
colnias no mudar de cor, uma vez que no produzem cido.
diluio de srie
Muitas vezes o seu trabalho de laboratrio vai exigir uma concentrao especfica de
clulas de levedura. Por exemplo, impossvel contar as clulas sem primeiro obter a
concentrao de direito de levedura. Muito pouco ou muito, e voc no ser capaz de obter
uma contagem precisa. Claro, a quantidade de diluio necessria depende da concentrao
de partida e a concentrao final desejada. Se voc precisar de fazer mais do que uma
diluio de 1:10, o melhor fazer uma diluio em srie de preciso.
materiais
estril, tampado 13 x 100 ml tubos com 9 ml de gua estril em cada
pipeta estril
bomba Pipeta
procedimento
1. Ajuste os tubos de ensaio em uma cremalheira por diluies sucessivas (dependendo da sua taxa de diluio
desejada).
2. Identifique a taxa de diluio de cada tubo e soltar os caps.
3. Agite-se o fermento e pipeta de 1 mililitro de levedura para dentro do tubo de gua 9 mm. Bombear a pipeta
vrias vezes no tubo para misturar o fermento e gua. Isto cria uma diluio de 1:10.
4. Usando a mesma pipeta, remova 1 mililitro desta levedura diludo e colocar no tubo de gua ao lado. Isto cria
uma diluio de 1: 100.
5. A diluio seguinte faz 1: 1000, que a diluio habitual para a contagem de suspenso de leveduras.
6. Voc pode continuar com mais diluies, se necessrio.
Contagem celular
Uma das formas mais comuns para contar o nmero de clulas de levedura de uma
suspenso lquida com um microscpio e hemocitmetro. tambm conveniente, porque
possvel adicionar corantes para a amostra de levedura e determinao da viabilidade ao
mesmo tempo.
Antes de executar uma contagem de clulas, voc precisa ter a concentrao correta de
levedura. Muito poucas clulas em suspenso, e voc no ver clulas suficientes para uma
contagem precisa. Muitas clulas em suspenso, e o campo hemocitetro ser tambm
cheia para obter uma contagem precisa.
Algumas fontes fngicas precisam de mais diluio do que outros. Aqui est um guia
para contagem de clulas:
materiais
microscpio com uma amplificao de 400X mnimo para a contagem de levedura. Voc quer iluminao
embutida, condensador ajustvel com controle de abertura do diafragma, fase mecnica e ocular binocular. Sem x
/ controles fase mecnica y, quase impossvel contar clulas. Enquanto um microscpio de contraste de fase
pode ser melhor para imagiologia os detalhes finos, um muito menos dispendioso brilhante microscpio de campo
mais do que adequado para contagem de clulas.
hemocitetro
cobertura hemocitetro deslizamento (mais espessa do que lamela standard)
pipetas de vidro de ponta fina
contra Handheld
pipetas de transferncia
Kimwipes (ou similar)
metileno soluo de azul (viabilidade se tambm a verificao)
Preparao de amostra
1. O passo mais crtico deste processo est a preparar uma amostra adequadamente diluda. A amostra altamente
concentrada pode ser muito difcil de contar, e uma amostra muito diluda pode dar resultados errados. Voc
quer que a menos de 100 clulas por campo de microscpio (5 x 5 quadrado) no 400X. Certifique-se de anotar o
fator de diluio (ver "Diluio de srie,"pp. 244).
2. Ao preparar a amostra, voc pode usar gua destilada. Tufos de levedura tambm levar a imprecises. Se voc
estiver trabalhando com uma estirpe altamente flocculent, tente primeiro a tremer violentamente. Se ele ainda
no vai quebrar, pode ser necessrio usar uma soluo de H2SO4 0,5 por cento em vez de gua destilada ou
adicionar EDTA, que se ligam ao clcio e permitir que a levedura se separar. Para utilizar EDTA, centrifugar a
levedura e remover o lquido. Adicionar volta o mesmo volume de uma soluo de EDTA (100 g / L, 0,268 M) e
proceder como normal.
4. Se voc est combinando celular contando com o teste de viabilidade celular da levedura, o seu passo de diluio
final deve ser para misturar 1 mililitro de sua amostra de fermento com 1 mililitro de soluo de azul de
metileno. Misture e deixe descansar por cerca de um ou dois minutos antes de encher a cmara de
hemocitmetro. Mais uma vez, certifique-se a amostra bem misturado.
4. imperativo que voc misturar o seu poo de amostra (sem a introduo de bolhas). Depois de ter preparado a
diluio correta, misturar a amostra invertendo e / ou agitao durante vrios minutos. Voc pode ter para
desabafar a amostra para evitar o acmulo de presso.
5. importante que a amostra contm o mnimo de bolhas de ar possvel. De gs-se possvel.
procedimento
1. Certifique-se de que o seu hemocitetro est limpo e seco antes de usar. Voc pode limp-lo com gua. Se
necessrio, voc pode esfregar a cmara de contagem cuidadosamente com um toalhete sem fiapos (Kimwipe),
mas lavagem adequada aps cada utilizao deve impedi-lo de ter que esfregar a cmara.
2. Coloque uma lamela para que o vidro abrange ambas as reas de contagem de forma igual.
3. Coloque a ponta de uma pipeta de vidro para dentro do lquido de amostra, e deix-lo encher atravs da aco
capilar (desenhada para cima automaticamente). Apagar qualquer excesso da ponta numa toalha de papel antes
de encher a cmara de hemocitmetro. Suavemente definir a ponta da pipeta na borda da cmara na corte
gravado e dispensar (Figura 6.16). Tenha cuidado para no encher demais a cmara; a amostra no deve fluir
para dentro do fosso. Se a cmara mostra bolhas de ar, tem todas as reas secas (underfilled), ou est
transbordando, voc deve limpar o hemocitmetro e recomear.
4. Coloque cuidadosamente o hemocitetro no palco microscpio. Comece com uma ampliao de baixo para
centralizar a hemocitmetro (Figura 6.20). Trabalhar at aumento de 400X, observando a distribuio de clulas
de levedura na cmara. Se as clulas parecem uniformemente distribuda, ento voc pode usar o mtodo de
contagem de clulas curta. Se as clulas aparecem agrupados ou aglutinados, voc pode precisar usar o mtodo
de contagem de clulas longa ou preparar outra amostra. Se parece que voc tem muito poucas clulas ou mais
de 100 clulas por pequena grade de 5 x 5, ento voc precisa para preparar uma nova amostra. Idealmente,
deve ser de cerca de 50 clulas por pequena grade 5 x 5.
5. Voc ser contagem de clulas nas praas localizadas centralmente dentro de 1 mm2 a rea da pronunciou-se
sobre a cmara (Figura 6.17). til para estabelecer um protocolo de contagem de todas as contagens de clulas.
Por exemplo, ns no contar clulas tocar ou deitado na parte superior e certas linhas de fronteira, enquanto
fazemos contagem de clulas que tocam ou que encontram-se na parte inferior ou fronteiras esquerda (Figura
6.21). Contamos brotos emergentes clula de levedura a partir de clulas me apenas se o boto , pelo menos,
metade do tamanho da clula me.
6. Se realizar contagens de viabilidade, as clulas mortas da mancha azul escuro, como eles no podem metabolizar
o corante intruso (Figura 6.22). clulas azuis plidos e clulas de brotamento que mancha azul no esto
mortos. Se voc estiver realizando uma contagem de clulas e viabilidade contar, simultaneamente, melhor
para contar todas as clulas (ambos vivos e mortos) no balco de mo e gravar observou clulas mortas em um
registro escrito ou um segundo dispositivo de contagem.
Figura 6.18: grade de contagem, nmeros acrescentou.
Por exemplo, se voc dilui o fermento por um fator de 200 e contadas 220 clulas dentro
dos 5 quadrados numerados, voc calcular:
As clulas de levedura / mililitro = 220 x 5 x 200 x 10.000 = 2.200 milhes ou 2,2 mil
milhes de clulas / mililitro
Mtodo de contagem longa, por clulas distribudas de forma desigual
1. Contar as clulas dentro de todos os 25 quadrados (Figuras 6.18 e 6.19). Este o nmero total de clulas em toda
a grelha.
Figura 6.20: cmara de hemocitmetro inteiro de 25 quadrados de contagem no aumento de 10x. As clulas so distribudas
uniformemente, e voc pode usar o mtodo curta, contando apenas cinco dos quadrados.
Figura 6.21: levedura clulas so facilmente vistos e contados a 400X. Trub aparece como bolhas, visto aqui no topo e meio
da grade, corado por corante. Usar o mesmo protocolo de contagem (regras) para quando voc contar uma clula ou no.
Voc no conta clulas tocar ou deitado na parte superior e certas linhas de contorno triplos. Voc contar as clulas que
encontram-se na parte inferior ou linhas restantes. Voc s contam botes de levedura se eles so, pelo menos, metade do
tamanho da clula me. Nesta imagem voc contaria 69 clulas totais, com um morto.
Figura 6.22: Clulas mortas mancha azul escuro. As clulas que ainda so azul claro ou plido ainda esto vivos ( esquerda
do centro). clulas de brotamento podem manchar azul escuro, mas ainda esto vivos (centro). clulas de brotamento esto
ocupados com o metabolismo de crescimento e no metabolizar o corante.
2. A cmara de todo segura uma quantidade precisa de lquido. Para calcular o nmero de clulas seria em um
mililitro, multiplicar as clulas totais na grelha por 104 (ou 10000).
3. A frmula :
Por exemplo, se voc dilui o fermento por um fator de 200 e contadas 1.100 clulas dentro
dos 25 quadrados, voc poderia calcular:
Calculando a viabilidade.
A frmula para calcular a viabilidade:
Viabilidade
O mtodo de longa aceite para estudo de viabilidade est colorao com azul de metileno.
Enquanto o azul de metileno o mtodo mais aceito na indstria, a maioria no consider-
lo um teste vlido quando os valores se situarem abaixo de 90 por cento, e algumas pessoas
preferem outros corantes tambm descritos abaixo. As condies alcalinas (10,6 pH) da
Alkaline azul de metileno e resultado Violet na penetrao celular mais rpida e so disse a
fornecer uma avaliao mais realista da viabilidade da levedura. Consulte "Counting Cell"
(pp. 245-250) Para mais detalhes sobre a contagem e calcular a percentagem de
viabilidade.
Vitalidade
No existe um mtodo padro para testes de vitalidade. A indstria continua a procurar um
mtodo rpido, fcil, reprodutvel. Atualmente, o mtodo mais popular o teste de potncia
de cido. A ideia que a levedura ativa ir conduzir o pH de um meio para baixo (acidificar-
lo), ento quanto mais rpido o fermento acidifica o meio, maior ser a sua vitalidade.
procedimento
1. Calibrar o medidor de pH, utilizando o mtodo 2-buffer antes de cada srie de ensaios.
2. Ajuste a gua deionizada a cerca de 6,5 pH.
3. Colocar 15 ml de gua desionizada estril num tubo de centrfuga cnico de 50 ml contendo uma barra de
agitao cnica.
4. Monitor de o pH da gua com agitao constante durante cinco minutos.
5. Ao fim de cinco minutos, o pH gravar a leitura (AP0) e adicionam-se 5 ml da suspenso de leveduras enxaguado e
concentrada (1 x 109cells / ml) para o tubo de centrfuga.
6. Agitar durante 10 minutos e registrar o pH (AP10).
7. Imediatamente adicione 5 mililitros de 20 por cento de glicose.
8. Agitar durante 10 minutos e fazer uma leitura de pH final (AP20). A fonte de acidificao a diferena entre as
leituras AP20 e AP0.
9. Repita mais duas vezes e calcular a mdia dos resultados.
Por crescimento, a 37 C
leveduras lager tm uma tolerncia temperatura mais baixa do que as estirpes de cerveja.
cepas Ale pode crescer a 99 F (37 C), mas leveduras lager no pode.
materiais
Micropipeta
pontas de pipetas estreis
Luvas
Bico de Bunsen
Isqueiro
espalhador de celular
placas de YPD grandes
Tubos de ensaio com 9 ml de gua estril
Incubadoras
procedimento
1. O primeiro passo diferente dependendo do tipo de amostra. Se o fermento armazenado em um prato, coloque
5 a 10 colnias de leveduras em 9 mililitros de gua estril usando tcnicas asspticas. Se a amostra de levedura
uma soluo em malte, fazer uma diluio de 1:10 utilizando uma tcnica assptica.
2. Agitar o tubo de ensaio para que nenhum fermento na parte inferior.
3. Voc vai precisar para preparar duas placas de YPD por amostra de levedura: um para incubao a 77 F (25 C)
e um a 99 F (37 C). Rotular os tubos de ensaio e placas de YPD com o nome da amostra ou o nmero e a data.
4. Traga amostras e placas de YPD perto de chamas. Abrir a tampa e pipeta de 150 microlitros de uma diluio de
levedura em cada placa de YPD.
5. Espalhar a diluio de levedura uniformemente sobre a placa. (Certifique-se de usar um espalhador de clulas
esterilizado.)
6. Repita este procedimento para todas as amostras.
7. Deixe as placas seco durante cerca de uma hora. Coloque uma placa de YPD num incubador de 99 F (37 C) e o
outro em F 77 ( C 25) da incubadora durante trs dias.
8. Resultados da ficha para o crescimento ou no crescimento, a ambas as temperaturas. Ambos cerveja lager e
levedura pode crescer a 77 F (25 C), mas apenas as leveduras de ale pode crescer a 99 F (37 C).
materiais
Extracto de levedura
Peptona
Glucose
gua destilada
verde de bromocresol
tubos de ensaio com tampa de rosca (150 x 12 mm)
tubos de Durham (60 x 5 mm)
Melibiose
Os filtros de membrana, tamanho de poro de 0,45 um
Incubadora
Balano
Autoclave
ansa de inoculao
Pipettes
isopropanol
gua esterilizada
procedimento
1. Preparar um extracto de levedura-peptona de caldo de fermentao por dissoluo de 4,5 gramas de extracto de
levedura, 7,5 g de peptona e 30 mililitros verde de bromocresol em 1 litro de gua destilada. Distribuir aliquotas
de 2 mililitros em tubos de ensaio com tampa de rosca de 150 x 12 mm, cada um contendo um tubo de 60 mm x 5
Durham invertido. Colocar em autoclave a 250 F (121 C) durante 15 minutos para esterilizar.
2. Preparar uma soluo de 12 por cento melibiose por dissoluo de 12 gramas a melibiose em 100 mililitros de
gua destilada. filtrao estril da soluo.
3. Prepara-se uma soluo de glucose a 6 por cento por dissoluo de 6 gramas da glucose em 100 ml de gua
destilada. filtrao estril da soluo.
4. Retire as placas de levedura para o teste.
bancada do laboratrio 5. Sanitize e as luvas usando isopropanol. Obter chama pronto.
6. Voc vai preparar trs tubos para cada estirpe a testar: melibiose, glicose e extrato de levedura-peptona.
7. Preparar 4 por cento de fermentao melibiose tubos de caldo. Um de cada vez, elevar cada extrato de levedura-
peptona fermentao tubo de caldo perto de chamas. Pipetar 1 mililitro de soluo de 12 por cento melibiose
para dentro do tubo. Feche a tampa e reserve.
8. Preparar 2 por cento de glucose tubos de caldo de fermentao. Traga extrato de levedura-peptona tubos de
caldo de fermentao perto de chamas. Pipetar 1 ml da soluo de glucose a 6 por cento em tubos de ensaio. Este
o seu controlo positivo.
9. Preparar extracto de levedura-peptona tubos de caldo de fermentao. Traga extrato de levedura-peptona tubos
de caldo de fermentao perto de chamas. Pipetar 1 mililitro de gua estril para o interior dos tubos de ensaio.
Este o seu controle negativo.
10. Usando um loop de inoculao estril, tomar 2 a 4 colnias de leveduras (dependendo do tamanho) fora da
placa.
11. Tome um tubo de cada cultura caldo e coloque cuidadosamente as colnias para o caldo. Certifique-se a chama
da ansa de inoculao de cada vez antes de voltar para a placa para mais colnias.
12. Colocar na incubadora a 77 F (25 C).
13. Verifique nos dias 1, 2, 3 e 7. Grave as alteraes do indicador de tinta para amarelo e a produo de gs no tubo
de Durham. O controle negativo (extrato de levedura-peptona tubo de caldo de fermentao) deve mostrar
nenhuma mudana de cor e sem produo de gs. O controlo positivo (glicose tubo de caldo de fermentao)
deve mostrar uma clara mudana para amarelo, indicando produo de produo de cido e gs no tubo de
Durham. Se estes controlos no mostram estes resultados, ento o teste no vlido.
14. Trata-se os tubos de caldo de fermentao melibiose que indicam se a estirpe uma ale ou uma levedura de
lager. Se no houver a produo de cido e gs, em seguida, voc pode supor que a estirpe uma levedura lager.
Se no h nenhuma indicao de cido (cor amarela) e sem produo de gs (preso no tubo de Durham), ento
voc pode assumir a estirpe uma levedura de cerveja.
X-alfa-GAL Mdio
Este um outro mtodo para testar levedura para ver se uma amostra de levedura tem a
capacidade de fermentar a melibiose. Vai usar X-alfa-gal (5-bromo-4-cloro-3-indolilo alfa-
D-galactsido), que um substrato cromognico para a alfa-galactosidase. Alfa-
galactosidase a enzima que faz com que seja possvel para uma clula de utilizar
melibiose. leveduras lager tm atividade alfa-galactosidase, o fermento ale no.
materiais
N, N-dimetilformamida ou sulfxido de dimetilo
5-bromo-4-cloro-3-indolil-alfa-D-galactsido (X-GAL-alfa)
O glicerol
D-galactose
Extracto de levedura
Bactopeptona
Agar
Etanol
Tubos de ensaio
hemocitetro
placas de Petri
ansa de inoculao
Micropipeta
pontas de pipetas estreis
Luvas
Reagente
balo de 2 litros
gua destilada
Bico de Bunsen
espalhador de celular
placas de YPD grandes
Microscpio
procedimento
1. Prepare uma soluo estoque X-alfa-GAL por dissoluo de 25 miligramas X-alfa-GAL com 1,25 ml de N, N-
dimetilformamida ou sulfxido de dimetilo em um frasco de reagente. Armazenar a 39 F (4 C), no escuro.
2. Esterilizar bancada de laboratrio e preparar chama.
3. Etiqueta cada placa de agar YPD com nome da amostra de levedura adequado e data.
4. Pipeta-se 100 microlitros de soluo-me de X-GAL-alfa em cada placa de agar YPD. Espalhe uniformemente com
espalhador de celular. Chama o espalhador entre cada utilizao. Permitir que a placa de suporte em escuro
durante 30 a 60 minutos.
5. Determinar o nmero de clulas da amostra, utilizando um hemocitmetro e um microscpio.
6. Configure tubos de ensaio 9 mililitros de gua em um rack. Diluir a amostra de levedura de 100 a 200 colnias
por 100 microlitros.
7. Traga uma placa YPD e diluir a amostra perto da chama. Abra a placa de YPD, pipeta 100 microlitros, e espalhar
uniformemente usando um difusor de celular. Repita o processo para todas as amostras de levedura, flamejante
do espalhador entre cada utilizao.
8. Deixe secar. Incubar as placas no escuro a 77 F (25 C) durante 6 dias.
9. Contar as colnias. Grave o nmero de colnias azul-esverdeadas (lager) e o nmero de colnias brancas (ALE).
As mutaes tambm causar colnias gigantes para assumir uma aparncia diferente, de
modo que este pode ser um mtodo til para garantir que as mutaes no est
construindo-se em uma populao de leveduras.
materiais
cultura de levedura ou chorume
gua estril e tubos
pipetas esterilizadas
Placas WLN
espalhador de celular
procedimento
Este protocolo colnia gigante uma verso modificada dos mtodos tradicionais, que
podem envolver tempos de incubao de 30 dias e meios especializados. Isto requer uma
incubao de sete dias e um meio WLN.
1. Use diluio em srie para diluir a amostra de levedura de 100 clulas por mililitro.
2. De acordo com a chama, a transferncia estril de 30 microlitros da suspenso de leveduras diluda para o centro
de uma placa WLN. Seu objetivo a placa de apenas 1 a 3 clulas.
3. Usando um espalhador de clulas esterilizado, difundir a cultura em torno da placa.
4. Colocar em uma incubadora a 82 F (28 C).
5. Permita que o crescimento de 5 a 7 dias ou at que forma colnias gigante.
Deriva Multi-Strain
mdio WLN contm bromocresol verde, que um corante que levedura Saccharomyces
assumir e normalmente no metabolizar. O meio inicialmente azul-verde e torna-se claro
como as colnias de leveduras em desenvolvimento absorver o corante. Diferentes estirpes
assumir o corante de maneiras diferentes, e voc pode usar esse conhecimento para
diferenciar as estirpes na cultura.
materiais
cultura de levedura ou chorume
gua estril e tubos
pipetas esterilizadas
Placas WLN
espalhador de celular
procedimento
1. Utilizao de diluio em srie para diluir a amostra de levedura a 500 a 1000 clulas por mililitro.
2. Transferir 0,1 ml desta soluo de levedura na placa WLN e espalhar com um espalhador de clulas esterilizado.
3. Deixe as placas incubar durante 2 a 3 dias a 80 F (27 C).
4. Inspecione as colnias com cuidado para determinar o nmero de cepas presentes e percentagens relativas na
cultura. As diferenas podem ser bastante sutis, assim voc pode precisar usar outros testes para diferenciar
cepas. Se voc comeou com duas cepas em quantidades iguais, a cultura deve mostrar uma mistura igual de
duas colnias diferentes para o futuro. Se a sua cultura estirpe mista mudou substancialmente a composio,
voc deve considerar comear uma nova cultura.
7Troubleshooting
s vezes, apesar dos melhores esforos de um cervejeiro em fazer tudo certo, a
fermentao simplesmente no funciona como planejado. Ns sentimos que melhor se
voc entender por que um problema ocorreu, ento ao invs de entregar-lhe apenas uma
soluo nesta seo, ns tambm oferecer sugestes sobre como pensar sobre a origem dos
problemas de fermentao comuns.
1. Foi mortos fermento, ou ele tem muito baixa viabilidade ou a vitalidade antes de voc armou?
uma. O senhor checou a sade do fermento?
b. Qual foi a fonte da levedura?
c. Como foi transportada, armazenada e tratada antes de ser lanado? Congelamento pacotes de fermento,
entradas, ou lamas mais comum do que voc imagina.
3. Poderia condies tm sido to desfavorveis para o crescimento do fermento que a levedura no poderia
comear em tudo?
uma. Isso bastante raro, bem como, contanto que voc est seguindo as diretrizes gerais e lanando levedura
saudvel. Com tempo suficiente, eles vo fazer alguns progressos.
b. Foi a temperatura excessivamente frio? baixas temperaturas muito pode impedir o fermento de se tornar
ativo, especialmente se elas foram tiradas em um estado dormente de um ambiente frio e acamparam em
mosto frio. A menos que voc est muito familiarizado com uma cepa e suas necessidades de temperatura,
para manter as faixas de temperatura recomendados para uma estirpe. Voc pode no notar uma pequena
queda na temperatura, mas levedura muito mais sensvel s mudanas de temperatura.
c. Ser que quis fornecer oxignio suficiente para o fermento?
d. O mosto foi suficiente em nutrientes para o fermento? A utilizao de gua destilada como uma fonte de
fermentao sem a adio de sais minerais para trs, ou fazendo mosto com uma grande percentagem de
acares no-malte, pode impedir que a levedura cresa.
4. Tem trub preso a levedura no fundo do fermentador? cepas ingls muito floculantes lanados para mosto com
grandes quantidades de material pausa e lpulo pode impedir o fermento seja iniciado. Considere limitar a
quantidade de material transitar para o fermentador. Se voc acha que esta a causa, agitar o fermentador a
cada 15 minutos para a primeira vrias horas ps-campo.
1. Voc j esperou uma quantidade adequada de tempo? A fase de latncia de doze horas para uma cerveja e mais
tempo para uma lager bastante normal. A temperatura fria provoca lager inferior metabolismo da levedura.
2. Se for um lager, ter mais pacincia. Quanto mais frio o lquido, o mais dixido de carbono que preciso antes de a
cerveja atinge o ponto de saturao e as bolhas comeam a formar e subir para a superfcie. Se voc estiver
trabalhando com um fermentador que lhe permite ver a superfcie da cerveja, chegar perto da superfcie e
brilhar uma forte lanterna sobre a cerveja em um ngulo baixo. Se houver quaisquer bolhas minsculas
comeando, voc vai ver um espumante na superfcie.
3. Verifique a sua temperatura de fermentao, e certifique-se que voc est medindo a temperatura da cerveja com
preciso. Se assim for, a temperatura num intervalo aceitvel para a levedura? Considerar o aumento da
temperatura, especialmente se voc j so 24 horas em fermentao.
Depois de ter resolvido o problema, determinar por que ocorreu, em primeiro lugar:
1. Voc comeou com um passo saudvel de levedura na quantidade adequada para o lote de cerveja?
2. Foi a sua propagao ou procedimento de armazenamento de som, favorecendo a sade da levedura, no apenas
a contagem de clulas?
3. Ser que quis fornecer o oxignio, a taxa de lanamento, e os nutrientes que a necessidade de levedura para o
bom crescimento e fermentao?
4. Alm disso, considerar que a temperatura inicial do mosto. Embora exista algum benefcio a partir de uma
temperatura de fermentao ligeiramente inferior e deixando a temperatura a subir ao longo do primeiro ou
dois dias, isto vlido apenas para levedura muito saudvel no mosto fornecendo nveis de oxignio e de
nutrio adequada. Se voc no est fornecendo essas condies, ento melhor comear com uma temperatura
de fermentao mais quente.
5. Tem mutao em suas alteraes colhidas ou levedura propagada causadas no comportamento?
Fermentao no termina
Fermentaes que no terminam tendem a ter vrias causas: m sade inicial de levedura,
ambiente levedura pobres, taxas de pitching baixos, ou contaminao. Antes de tomar
qualquer ao, fazer uma leitura gravidade especfica e compar-lo com os resultados do
teste fermento forados (pp. 222-223). Se a cerveja a uma densidade mais baixa do que a
fora de teste, em seguida, h uma contaminao bacteriana ou de levedura selvagem.
Muito provavelmente, a cerveja deve ser despejado, embora ainda possam ser potvel para
um curto perodo de tempo, dependendo do tipo de contaminantes organismo.
Se a leitura gravidade especfica est perto ou que corresponde ao teste de fora, ento
ele pode ser apenas um caso de m interpretao da evoluo do dixido de carbono como
fermentao. S porque uma cmara, bubbler, ou mangueira blowoff est borbulhando
muito lentamente, isso no significa que a cerveja est ainda em fermentao. Se voc est
aquecendo a cerveja, ele far com que o ponto de saturao de CO2 da cerveja para mudar,
e CO2 vai sair da soluo. O mesmo vale para qualquer tipo de movimento ou vibrao, que
tambm pode causar uma soluo saturada de bolha, assim como apertando um
refrigerante.
Se a gravidade especfica muito maior do que a fora de teste indica, em seguida, a
fermentao pode ser de facto ainda progredir lentamente. Se voc no fazer um teste de
fora, ento voc no pode ter certeza de que a cerveja no atingiu a gravidade do terminal
adequado para que a erva. Mesmo que uma receita pode sugerir que a gravidade terminal
de sua cerveja deve atingir, ainda bastante dependente do seu processo de produo de
mosto.
Se ainda houver levedura activa, aumentar a temperatura de fermentao por um
perodo mnimo de 5 F (3 C) para aumentar a taxa metablica da levedura. Voc tambm
pode despertar a levedura ou lanar alguma levedura adicional que est no auge da sua
actividade de fermentao. Se isso no ajudar, voc pode considerar a adio de mais
oxignio tambm. Consulte a seo de soluo de problemas "Atenuao" (pp. 272-275)
Para mais idias.
Alteraes de floculao
mudanas de floculao em culturas de levedura podem ocorrer de forma rpida e pode ser
um indicador de muitos outros problemas de sade e de levedura fermentaes
problemticas. Uma das causas mais comuns de mudana de floculao a presso
selectiva pelo fabricante de cerveja. Se a sua colheita de levedura e reutilizao favorece
sempre o mais flocculent ou leveduras floculantes menos, voc vai descobrir que a
populao de leveduras desloca rapidamente em direo contendo apenas essas clulas.
Quando voc v uma mudana, suspeitar-se como a causa mais provvel.
A prxima causa provvel de mudanas de floculao a mutao de levedura. Mutaes
normalmente aumentam com cada gerao e pode resultar em alteraes fisiolgicas na
levedura que inibem a floculao. Por exemplo, a levedura mutante respiratria (mutante
petite) menor do que flocculent levedura sem que a mutao. Se o fermento alta em
mutantes petite, ento o fabricante de cerveja geralmente a culpa.
Outras possveis razes para a falta de floculao incluem altos nveis de acar
restantes na cerveja, a turbulncia insuficiente no fermentador durante a fermentao
(possivelmente projeto fermentador ou baixo vigor fermentao), e deficincia de clcio. O
clcio desempenha um papel fundamental na floculao clula de levedura. Enquanto leva
apenas uma pequena quantidade de clcio para floculao de ocorrer (nveis inferiores a
10-8 molar pode impedir a floculao), garantindo um mnimo de cinquenta partes por
milho de clcio em sua gua cervejeira vai evitar problemas de floculao relacionados
com o clcio. Se voc estiver fazendo o seu prprio gua de gua destilada ou tratamento
por osmose reversa, este pode ser o problema.
Uma das razes para floculao prematura levedura pode ser malte relacionado. Embora
os investigadores ainda no conseguiram determinar a causa exata, h uma ligao
potencial entre malte mal modificado, cevada contaminada e floculao. A pesquisa
mostrou que a contaminao fngica malte pode criar co-factores que se ligam a clulas de
levedura e lev-los a cair fora da soluo prematuramente. Este continua a ser o foco de
grande parte da pesquisa cervejeira atual relacionada com padres de floculao.
Excessivamente baixas ou altas temperaturas tambm pode afetar floculao, de modo a
manter isso em mente tambm.
Sabores e Aromas
Pode haver um nmero de causas para a problemas de sabor e aroma de fermentao, que
variam de contaminao para o controle de temperatura e mais. importante conhecer e
controlar todos os seus parmetros de fermentao para alcanar taxas de crescimento e
fermentao consistentes. Voc deve saber o quanto de levedura voc est lanando e
quanto crescimento voc est conseguindo atravs da medio da quantidade de levedura
no final da fermentao. Isso um grande passo em direo a consistncia da fermentao.
Enxofre
importante para assegurar a fermentao vigorosa e deixou fermentao ficar completa
antes de capping do fermentador. Alguns cervejeiros gostaria de limitar o fermentador
perto do final da fermentao para carbonato a cerveja, prendendo o CO2 restante. Ao fazer
isso, a cervejaria tambm armadilhas qualquer enxofre na cerveja, que no vai embora sem
esforos extraordinrios. Isso se aplica tanto cerveja e cerveja lager. Demora cerca de 24
horas aps a fermentao a temperatura de fermentao para a evoluo de CO2 para
esfregar fora todo o enxofre.
Se voc achar que voc tem uma cerveja embarrilado com enxofre substancial, voc
pode forar o carbonato de cerveja, ento sangrar a presso uma vez por hora durante um
dia, recarbonating a cerveja cada noite. Depois de dois ou trs dias, verificar o carter da
cerveja novamente. Se existe ainda uma necessidade de reduo de enxofre, continuar at
reduzir para nveis aceitveis. Tenha em mente que voc est espumando a cerveja usando
este processo, e isso pode afetar a reteno de cabea se voc levar isso por muitos dias.
fenis
Algumas estirpes de levedura de cerveja e compostos fenlicos aromticos mais nativa de
levedura produzem atravs de uma reaco de descarboxilao dos cidos fenlicos
naturalmente encontrado no malte, tais como o cido ferlico.
agentes aromticos fenlicos sem inteno so mais frequentemente uma consequncia
da contaminao de levedura selvagem, quer seja a partir de levedura nativas ou
contaminao cruzada de outras estirpes utilizadas na fbrica de cerveja. Geralmente, se a
fonte foi de levedura nativo, ele ir tambm resultar em superattenuation da cerveja.
contaminao levedura nativa tambm tende a resultar em levedura muito p que se
recusa a floculao. Em condies normais, mutao em levedura de cerveja nonphenolic
no deve ser um problema, embora seja uma outra possvel fonte de compostos fenlicos
off-flavors, e seria um indicador de que hora de re-cultura da levedura pitching. Muitas
vezes cervejeiros assumir mutao foi a causa, quando era mais provvel que eles
introduziram o fermento fenlica em algum lugar no seu processo.
tambm possvel para outros organismos de deteriorao mosto para produzir
compostos fenlicos. Em geral, uma boa idia para examinar seus processos de
saneamento e limpeza se voc encontrar fenis no intencionais em sua cerveja.
Quando se trabalha com a levedura produtora de fenlico, a quantidade de compostos
fenlicos da produo de levedura relacionada com as taxas de sade e crescimento das
clulas. De um modo geral, os factores que aumentam o crescimento aumentam a produo
de compostos fenlicos.
Tenha em mente que o cloro presente na gua de fabricao ou introduzido atravs
sanitizantes clorados ou produtos de limpeza ir combinar com fenis malte para criar
clorofenis. Estes podem produzir poderosos sabores medicinais e aromas. No confunda
isso com um problema de levedura.
acetaldedo
O acetaldedo um passo intermedirio na produo de etanol. Em uma fermentao
saudvel permisso para executar at a concluso, o fermento, eventualmente, assumir e
converter o acetaldedo. H vrias razes para altos nveis de acetaldedo:
diacetil
Diacetil uma parte natural de fermentao, e algumas estirpes produzem mais do que
outros. No entanto, o fermento, naturalmente metabolizar o diacetil em compostos inspido
durante a fermentao ativa. Diversos fatores determinam a quantidade de diacetil que
permanece aps a fermentao:
fermentao incompleta pode deixar altos nveis de diacetil na cerveja, porque no havia tempo de contato
insuficiente entre o fermento e mosto para assumir o diacetil produzido durante a fermentao.
uma temperatura mais quente no incio da fermentao, enquanto que a levedura crescente, cria nveis mais
elevados de precursor de diacetilo. Se seguir esta com fermentao sem brilho, talvez atravs da reduo
temperaturas, que resulta em nveis mais elevados de diacetilo no final da fermentao. Este um padro comum
para muitos homebrewers-lanando levedura morna para compensar baixa contagem de clulas ou m sade de
levedura e, em seguida, permitindo que a cerveja a fermentar mais frio como atividade de leveduras cai. levedura
saudvel determinado tempo e temperatura adequada, no final dos resultados de fermentao em cerveja com
nveis muito baixos de diacetil.
aerao insuficiente no pitching.
Algumas bactrias produzem diacetil. bactrias lcticas tambm produzem cido lctico, por vezes, criando um
sabor manteiga ranosa. Algumas pequenas fbricas de cerveja e muitos homebrewers tm dificuldade engarrafar
cerveja de uma maneira que elimina bactrias lcticas. Esta uma razo pela qual uma cervejaria pode garrafa
grande degustao de cerveja, apenas para t-lo desenvolver presso, acidez e sabores diacetil em menos de oito
semanas.
Azedar
A contaminao bacteriana a causa mais comum de sabores e aromas em cidos cerveja.
Brewers na maioria das vezes correr em uma bactria de cido lctico ou bactrias do cido
actico. Lactobacillus geralmente produz uma torta, caracterstico amargo na cerveja,
enquanto Acetobacter produz sabores Vinagre-like. H outros organismos, tais como
Brettanomyces, que podem produzir o cido actico sob condies especficas.
Se a sua cerveja azedar, rever os testes de contaminao na seo de laboratrio para
ajudar a determinar onde em seu processo voc est introduzindo os organismos de
deteriorao e tomar medidas adequadas para resolver o problema.
excessivamente doce
formulao de receita pobres responsvel por muitas cervejas muito doce, mas o que
voc procurar quando uma receita confivel Acontece muito doce? Na maioria das vezes,
quando uma cerveja acaba excessivamente doce, um problema de atenuao. Quando um
teste de fermento forado mostra que no um problema de atenuao, em seguida,
existem algumas outras causas possveis.
Enquanto ele no pode fazer para uma cerveja excessivamente doce, uma questo que
cervejeiros muitas vezes ignoram que a rea de superfcie das clulas de levedura na
fermentao afeta significativamente o nvel IBU. De um modo geral, quanto maior for o
material total da superfcie celular, menor ser a quantidade de alfa-cidos isomerizados
que tornam a cerveja acabada. taxa de levedura pitching, a taxa de crescimento de levedura,
tenso, fermento sade, gerao de pitching, e outros fatores resultar em mais ou menos
IBUs na cerveja final. A cervejaria deve esforar-se para as taxas consistentes pitching, as
taxas de crescimento consistentes, e excelente sade de levedura em cada lote de cerveja.
Ao controlar esses fatores, os ajustes para a sua receita ter um impacto mais controlada na
relao amargor / doura.
Outra explicao possvel que alguns lcoois tm um carcter doce, e esses lcoois
podem ser produzindo os sabores doces. No entanto, quando esta a causa, provando a
cerveja d uma doura inicial que se desvanece. No produz uma doura enjoativa. Se voc
provar uma doura inicial que desaparece e deixa uma sensao de cerveja mais seca,
indicativo de doura relacionados com o lcool.
doura enjoativa indicativo de underattenuation ou formulao receita pobres.
Cervejas que so muito doce, mas no enjoativo poderia ser de questes da receita ou o
fermento tirando compostos mais amargor que o previsto. Para problemas
underattenuation, consulte "Atenuao".
excessivamente seco
Tal como acontece com cervejas que so muito doce, formulao de receita pobre
provavelmente um dos problemas mais comuns. No entanto, se voc estiver trabalhando
com uma receita confivel e ter um problema com carcter excessivo de cerveja seca, em
seguida, existem algumas outras possibilidades. Mais uma vez, um ensaio de fermento
forado uma boa ferramenta para descobrir a origem do problema. Frequentemente
organismos contaminantes bacterianos ou outros pode causar uma cerveja para
overattenuate.
Se a cerveja no overattenuating, ento ele pode ser um problema de processo
relacionado:
Tenha em mente que na maioria das vezes a temperatura mosto no determina a doura
de uma cerveja. Os acares de cadeia mais longa no so muito doce. Se a levedura ter
fermentado para uma cerveja de alta temperatura mash- completamente, em seguida, a
gravidade de acabamento da cerveja pode ser bastante elevado, mas o carcter global da
cerveja pode ser completamente seca. Por outro lado, uma cerveja com uma gravidade
baixo acabamento pode vir muito mais doce. Existem muitos factores, incluindo a rea de
superfcie da clula de levedura e os lcoois produzidos durante a fermentao, que
afectam o carcter final da cerveja.
autlise
Para a maioria dos homebrewers que trabalham com fermentadores de grande fundo e
levedura saudvel, autlise no deve ser um grande problema. Algumas cepas so sujeitas a
autlise mais rpido do que outros, mas no geral, se voc manter a cerveja / fermento em
temperaturas razoveis e colher o fermento em uma quantidade razovel de tempo, voc
no deve ter quaisquer problemas com autlise.
O mesmo no verdade para os cervejeiros comerciais que trabalham em uma escala
muito maior. fermentadores muito altas que se concentram fortemente na levedura um
cone tendem a aumentar a taxa de autlise. Se isto representa a sua configurao,
certifique-se de fornecer refrigerao adequada ao cone (ou parte superior do
fermentador, se top corte) e colher o seu fermento, logo que possvel, depois de ter feito o
seu trabalho.
Um fator que pode afetar tanto homebrewers e profissionais a embalagem da cerveja
com quantidades excessivas de levedura. Ele requer apenas 1 milho de clulas por
mililitro no carbonato adequadamente uma cerveja. Mais do que isso acabar por produzir
altos nveis de sabores autlise em sua cerveja.
carbonatao
A falta de carbonatao
No preciso muito mais fermento para carbonato uma cerveja. No entanto, para
consistente, carbonatao oportuna voc quiser usar o fermento saudvel em quantidade
adequada em temperaturas consistentes. Se voc estiver trabalhando com cervejas de alta
lcool, benfico para filtrar o fermento e repitch com fermento fresco, ativo para
carbonatao garrafa.
carbonatao
Carbonatao o resultado de qualquer excesso de acar presente no momento da
embalagem, ou a presena de um organismo que capaz de consumir hidratos de carbono
complexos e produzir gs.
Leve em conta a quantidade de CO2 dissolvido presente na cerveja no clculo da quantidade de acar. Consulte
"Apndice D: penetrantes Tarifas e CO2 Volumes" em estilos de cerveja clssico para grficos teis para
determinar a quantidade de CO2 presente em uma determinada cerveja e a quantidade de priming necessrio.
O teste fermento forada deve lhe dar uma boa idia se sua cerveja atenuou totalmente antes da embalagem.
Se o problema a contaminao, geralmente vai resultar numa alterao no sabor da cerveja, bem como
carbonatao excessiva.
Atenuao
Muitas vezes, um fabricante de cerveja define sua expectativa de atenuao com base em
uma receita ou os valores de atenuao dadas para uma determinada cepa de levedura. Isto
pode ou no ser realista. Independentemente do que voc faz para preparar a sua levedura
para a fermentao, o fato que a composio do mosto supera tudo quando se trata de
obter levedura para atenuar uma quantidade desejada. Se voc executar um teste de
fermento forado, voc vai saber o nvel mximo de atenuao voc deve esperar para que
a erva. Se o teste de fermentao mostra que a cerveja s vai atenuar at 1.020 (5 P) com
o fermento que voc est usando, em seguida, esperando que ele caia para 1.012 (3 P)
irrealista. Pela mesma lgica, se o seu lote de cerveja cai abaixo de 1,020 (5 P), voc tem
algum tipo de problema de contaminao, tais como a levedura selvagem ou bactrias. Se
voc encontrar-se com problemas de atenuao, o teste de fermento forado uma
ferramenta valiosa.
baixa atenuao
comum para a fermentao do lote principal a cair um ou dois pontos de curto a
atenuao mxima indicada pelo teste de agitao forada. Quanto maior a gravidade de
iniciar, o mais longe da atenuao mxima a sua cerveja provavelmente ir acabar. Se a
cerveja est consideravelmente aqum da atenuao esperada, e voc eliminou mosto de
fermentao como a questo, em seguida, houve algum tipo de problema de fermentao.
Investigar as seguintes possibilidades:
A temperatura de fermentao foi muito baixa, e o fermento no era suficientemente activa para completar a
fermentao. tambm importante para evitar variaes de temperatura, especialmente no incio durante a fase
de retardamento e que se aproxima do fim da fermentao. A levedura so muito sensveis a pequenas mudanas
na temperatura. Quando o fermento comear a abrandar na velocidade de fermentao, eles vo produzir menos
calor, e se a temperatura muito baixa, eles vo parar / desacelerar de repente, o que torna muito difcil chegar a
gravidade terminal.
taxa de Pitching foi muito baixo, por isso no havia clulas suficientes para completar a fermentao. Sem clulas
suficientes para realizar a fermentao, as clulas de levedura em soluo tem que trabalhar mais do que o
habitual, a fim de concluir o trabalho. Estas clulas ficar cansado e sobrecarregado de trabalho e muitas vezes vai
sair antes que eles esto acabados. Levedura na fermentao da cerveja raramente atingem mais de trs a um
crescimento de quatro vezes.
overpitching crnica tambm pode resultar em m atenuao mesmo na primeira gerao. Geralmente, a
fermentao comear rapidamente e terminar normalmente, mas sucessivas geraes vo comear a apresentar
problemas de sade. Viabilidade diminui ao longo do tempo, e da populao em geral fica lento, uma vez que a
fermentao a produo de algumas clulas novas.
A falta de oxignio no incio da fermentao restrita crescimento e sade das clulas afetadas. Lembre-se que as
cervejas de alta gravidade pode se beneficiar de uma dose adicional de oxignio em torno da marca de 12 horas.
Tal como acontece com as taxas de pitching incorrectas, o impacto de underoxygenation crnica pode ser mais
aparente em geraes sucessivas, como a levedura no esto equipados com os blocos de construo adequados
para a sntese de lpidos slidas para a reproduo e crescimento das clulas. Isso tambm pode contribuir para o
baixo rendimento quando a colheita de levedura.
mutao de levedura tambm pode afetar a atenuao. Geralmente, o teste de fermentao forado deve revelar
estes problemas, mas possvel que a mutao no afecta o teste agitada, quente, mas ainda tem um efeito sobre a
fermentao principal.
A falta de sade de levedura e falta de nutrientes essenciais como zinco pode causar fermentao de parar antes
que ele atinja a gravidade terminal.
mistura imprpria no fermentador pode resultar na estratificao e underattenuation. Quando qualquer multi-
preenchimento de um fermentador ou diluir mosto altamente concentrado, voc precisa misturar as duas solues
corretamente. A alta velocidade de enchimento e orientando o mosto entrado a partir do fundo do fermentador
para cima em vez de cima para baixo vai ajudar a misturar os dois.
Se voc estiver reutilizando o fermento e colher muito cedo, voc pode estar colocando presso seletiva sobre a
populao, causando underattenuation. A levedura que a queda primeira so os menos attenuative da populao.
Se o seu processo favorece-los, em seguida, o campo vai se tornar cada vez menos attenuative ao longo do tempo.
Tambm pode afectar negativamente a sade levedura, deixando a levedura na cerveja por longos perodos de
tempo, e que tambm pode afectar a atenuao de lotes futuros.
Aqui esto alguns mtodos comuns cervejeiros usar para tentar conduzir uma cerveja
para atenuar um pouco mais:
Rouse o fermento. Ou cuidadosamente explodir dixido de carbono atravs do fundo do tanque de fermentao
ou ao usar um fermentador homebrew menor, voc pode inclin-lo na borda e agite a cerveja. Isto deve obter
algum fermento de volta para o cerveja, e ele vai expulsar o CO2, o que pode estar inibindo o fermento.
Transferir a cerveja ou o fermento. Transferir a cerveja ou tomar levedura fora do fundo e lanando-o novamente
em cima faz as mesmas coisas como despertando o fermento, mas tambm adiciona um pouco de oxignio e
garante o fermento e restantes acares do mosto so uniformemente misturado.
Aumente a temperatura. Temperaturas mais elevadas aumentam a actividade do fermento. Dentro de limites
razoveis, esta uma das melhores maneiras de ajudar a levedura chegar a gravidade final de alvo.
Adicione mais levedura. Muitos fabricantes de cerveja perguntar se eles podem atirar apenas em algumas
leveduras Champagne seco para terminar a fermentao. Aqueles que dizem que funciona provavelmente estavam
lidando com uma cerveja que tinha grandes quantidades de acares simples restantes, como o fermento
Champagne no vai consumir os acares do mosto mais longos. Voc pode adicionar o fermento mais de cerveja,
mas difcil para reiniciar uma fermentao que pra. Uma cerveja parcialmente fermentado no um lugar ideal
para levedura, j que tem lcool e no h oxignio, no nutrientes suficientes, e no acar suficiente. Apenas
adicione o fermento que est em seu pico de atividade. Adicione o fermento em um pouco de mosto, deix-la
atingir alta kraeusen, e em seguida, atirar a coisa toda para a cerveja. Se voc adicionar o fermento suficiente em
seu pico de atividade, voc no deve precisar adicionar oxignio para a cerveja.
Adicionar enzimas. Se o problema era com a composio de acares do mosto, este, muitas vezes, ajudar. No
entanto, se um problema de fermentao, em seguida, esta no ir ajudar.
Atenuao elevada
Se a sua cerveja atenua mais do que o mximo indicado pelo teste de fermento forado,
voc tem um problema de contaminao. imperativo que voc localize a fonte da
contaminao e elimin-lo de sua cervejaria. Fechar os olhos no resolve o problema.
Analise a seo de laboratrio para obter informaes sobre como proceder para testar o
fermento e seu ambiente de cervejaria.
presso de dixido de carbono, mesmo uma pequena quantidade, mau para a levedura durante o
armazenamento. danifica CO2 paredes das clulas de levedura e pode facilmente construir com fermento no
armazenamento.
Na maioria dos casos, as temperaturas de armazenamento mais baixos resultam em maior vida de prateleira, a
menos que voc acidentalmente congelar a levedura. A onda de frio pode causar temperaturas de armazenamento
de levedura para mergulhar abaixo de zero. Isto especialmente verdadeiro quando se utiliza refrigeradores mais
velhos que podem no ser capaz de acompanhar a demanda durante o dia. medida que a temperatura ambiente
cai, o mesmo acontece com a temperatura do refrigerador. Neste caso, melhor guardar o seu levedura alguns
graus mais quente, se houver um perigo de congelamento acidental.
Em alguns casos, voc no deve reutilizar levedura de alta lcool ou cervejas muito elevadas-IBU, que salientam a
viabilidade do fermento e impacto.
Segurando o fermento na cerveja para um adicional de oito a 12 horas aps a fermentao lhes permite construir
suas reservas de glicognio antes do armazenamento.
O equipamento de armazenamento limpa e sanitria? Isso inclui mant-los livres de contaminantes qumicos e
altos nveis de desinfetantes que podem afetar a sade de levedura.
Problemas de lavagem
O problema mais comum com lavagem cida ou lavagem de dixido de cloro ou est
usando o pH errado ou a concentrao errada. Voc precisa medir o pH com preciso. Vale
a pena investir em um medidor de pH decente e as solues de calibrao para garantir que
voc obtenha o pH certo.
Problemas de enxaguamento
O erro mais comum cometido quando a lavagem de levedura no est usando um volume
grande de gua suficiente ou no saber qual camada a levedura. Se voc no usar pelo
menos trs a quatro vezes mais gua como slidos de levedura, a suspenso ser
demasiado densa para permitir que os bits mais pesadas a cair para o fundo em uma
quantidade razovel de tempo. Quanto mais fina a suspenso, melhor ser a separao.
No confunda a camada mais fina no topo, como fermento. Pode haver algumas clulas
em l, mas principalmente protenas e talvez outro material celular leve, que voc pode
descartar.
Problemas de transporte
A maioria dos problemas com o centro de transporte em torno da temperatura. Comece
com o fermento saudvel possvel, monitorizar a temperatura, e testar a levedura na
extremidade de recepo.
Iniciar a partir de uma fonte de levedura saudvel. Se voc comear com uma cultura mutante, a propagao
resultante pode manter essa mutao. possvel que as clulas nonmutated outcompete para os mutantes, mas
no h garantia. Em caso de dvida, use tcnicas de cultura pura de recomear.
Use apenas fontes de acar ricos em maltose. Utilizar uma fonte com base em malte, que fornece nutrientes
crticos para a levedura. Crescer fermento em simples acar resulta em levedura que no pode fermentar
maltose.
aerao Fornecimento e uma mistura de nutrientes adequado que inclui zinco.
Propagar levedura quente, cerca de 72 F (22 C).
Use uma placa de agitao, agitador orbital, ou frequentemente agitar o navio para retirar CO2 e ajudar misture o
fermento com o acar restante.
Malt Contaminao
Malt tem um bom nmero de organismos na sua superfcie, tais como Lactobacillus. A
fervura mata a grande maioria destes organismos, e o fabricante de cerveja no precisa se
preocupar. No entanto, existem moldes e fungos que podem produzir micotoxinas que iro
sobreviver fervura. Isso raramente um problema com o malte, uma vez que vem do
maltster, mas causada por ms condies de armazenamento na cervejaria. Quente,
climas hmidos so especialmente problemticos e pode causar o crescimento de fungos
rpida e altos nveis de micotoxinas. Enquanto o mash elimina uma grande parte de
micotoxinas presentes, as micotoxinas que atingem a chaleira ferver no so desnaturadas.
As micotoxinas tais como tricotecenos (Flannigan, et ai., 1985) inibem o crescimento de
Saccharomyces cerevisiae, que por sua vez pode afectar atenuao. Vrias toxinas tambm
pode interagir com a parede da clula de levedura e afectar floculao. Este exatamente o
que estas toxinas so suposto fazer na natureza: ajudar um organismo outcompete
levedura.
Figura 7.1: A '' indica o Fator uma causa potencial do problema. Um '' indica o factor a causa mais comum do problema.
* Muitos fatores levam a problemas de sade de levedura, tais como deficincia mineral, overpitching, baixa DO, mosto de
alta gravidade, alta concentrao de etanol, coleta de levedura atrasado, refrigerao insuficiente de cone fermentador, o
acmulo de CO2 no fermentador, mistura incompleta do fermentador.
Problemas de sabor
Figura 7.2: A '' indica o Fator uma causa potencial do problema. Um "+" indica que o factor provoca um aumento e '-'
indica uma diminuio. * Muitos fatores levam a problemas de sade de levedura, tais como deficincia mineral,
overpitching, baixa DO, mosto de alta gravidade, alta concentrao de etanol, coleta de levedura atrasado, refrigerao
insuficiente de cone fermentador, o acmulo de CO2 no fermentador, mistura incompleta do fermentador.
Figura 7.3: A '' indica o Fator uma causa potencial do problema. Um "+" indica que o factor provoca um aumento e '-'
indica uma diminuio. * Muitos fatores levam a problemas de sade de levedura, tais como: deficincia mineral,
overpitching, baixa DO, mosto de alta gravidade, alta concentrao de etanol, coleta de levedura atrasado, refrigerao
insuficiente de cone fermentador, o acmulo de CO2 no fermentador, mistura incompleta do fermentador.
Lista de Figuras
Figura 1.1, P. 8: Bustos de Louis Pasteur (esquerda) e Emil Christian Hansen (direita) que
decoram a antiga cervejaria Carlsberg em Copenhague.
Figura 2.3, P. 23: Acar, oxignio, azoto, sais minerais entrar na clula. Etanol, dixido de
carbono, e o sabor / aroma compostos vazar para fora.
Figura 4.1, P. 79: Os nveis de oxignio dissolvido com vrios tempos de aerao em 20
litros de mosto.
Figura 4.2, P. 80: Comparao de como os nveis de oxignio (ppm) afetam o progresso da
fermentao longo do tempo (horas).
Figura 4.4, P. 82: Velocidade de fermentao de uma cervejaria mostrando atual versus
mosto enriquecida com oxignio.
Figura 4.8, P. 87: Open fermentao a Magic Hat Brewery, South Burlington, Vermont.
Figura 4.14, P. 92: O sistema da Unio Firestone empurra levedura marrom fora dos barris,
resultando em cerveja mais limpo.
Figura 4.15, P. 93: The Black Sheep Brewery em Masham, North Yorkshire, utiliza um
moderno, redondo Yorkshire quadrado feito de ao inoxidvel.
Figura 4.18, P. 105: Aumento de vrios fatores de fermentao e como eles ster de
impacto e produo fusel na cerveja.
Figura 4.19, Pp. 106-107: Compostos de fermentao e o seu limiar de sabor na cerveja.
Figura 5.3, P. 129: Etapas de propagao cervejaria tpica e temperaturas para as estirpes
ale e lager.
Figura 5.5, P. 140: Efeito da taxa de inoculao em factor de rendimento para as taxas de
propagao tpicos.
Figura 5.6, P. 141: Fator de curva de rendimentos atravs taxas de inoculao.
Figura 5.7, P. 142: Efeito da taxa de inoculao em factor de rendimento para as taxas de
fermentao de cerveja tpicos.
Figura 5.8, P. 142: Uma curva descreve o possvel nmero de duplicaes e crescimento.
Figura 5.14, P. 168: Fermento enxaguar com um passo relativamente limpa de levedura.
Figura 6.1, P. 175: A corrente ascendente de um bico de Bunsen cria uma zona de trabalho
limpa.
Figura 6.3, P. 187: Antes de cada transferncia, chama o loop de inoculao at que brilha
vermelho para esterilizar.
Figura 6.4, P. 190: Um prato devidamente riscadas iro resultar em colnias isoladas
cultivadas a partir de uma nica clula.
Figura 6.6, P. 196: Streak, ento gire para acabar com clulas individuais espalhados pela
placa a passo 4.
Figura 6.15, P. 245: Requisitos de diluio comum para vrias fontes de levedura.
Figura 6.23, P. 258: Diferentes linhagens exibir diferentes morfologias gigante colnia.
Parte 1
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causes of, 268, 280, 281
and conversion to ethanol, 24, 25, 26, 31
and pitching rate, 121
acidification power test. See vitality
aeration, 13, 21, 7584, 7983, 105. See also fermentation, oxygen
and New Belgium olive oil experiment, 77
alcohol (ethanol), 9, 34, 107, 279, 280, 282. See also fermentation, fusel alcohols
and Crabtree effect, 26
and ester production, 35
and fermentation temperature, 96
e produo de levedura, 24-26
e prazo de validade de levedura, 159-160
Anchor Brewing, 87
Anheuser-Busch (AB InBev), xviii, 54, 171
agente anti-espuma, 93-94, 131
aroma, 35. Veja tambm steres, off-flavors e off-aromas
e cepas de leveduras, 45-50
Arthur, Tomme, perdeu Abbey Brewing, 61
atenuao, 34, 107-109, 272-275
Alto, 275
baixo, 121, 273-275
e oxignio, 66-67
e cepas de leveduras, 29, 47, 49, 55
autoclave. veja a esterilizao
testes de autoclave. veja a esterilizao
autlise, 271, 280, 281
carbonatao, 271-272
carbonatao, 272, 282, 283
compostos de carbonilo. Veja acetaldedo, diacetil
Carlsberg Brewery e Laboratories, 8, 8, 130. Ver tambm Claussen, N. Hjelte
balo Carlsberg, 130, 131
barril condicionado, 118-119
de contagem de clulas, 245, 245-250, 247, 248, 249. Veja tambm testes de viabilidade
Chimay (cervejaria), 49
Cilurzo, Vinnie, Russian River Brewing, 61
Claussen, N. Hjelte, 58, 61. Veja tambm Carlsberg Brewery
condicionado. Veja garrafa condicionado, barril condicionado, lagering
contando as clulas de levedura. Ver contagem de clulas
efeito de Crabtree, 26, 131
efeito Custer, 60
tanques cylindroconical.
Vejo sistemas de fermentao
off-flavors e off-aromas, 7, 98-99. Ver tambm acetaldedo, diacetilo, steres, sabor, lcoois
superiores, mutantes pequeno, compostos fenlicos, compostos de enxofre
acidez, 269
muito seco, 270-271
muito doce, 27, 269-270
cidos orgnicos, 38, 60
carbonatao. veja carbonatao
oxignio, 12-13. Veja tambm aerao, a fermentao
e uma garrafa condicionado, 116
e Brettanomyces, 60
dissolvido, 77-83, 279, 280
e ensaio Branco Labs, 79-83
e cervejas de alta gravidade, 66-67, 83-84
efeito de oxignio, 35-36
em um motor de arranque, 134-136
e esteris, 12, 35, 66, 76, 77
e cidos gordos insaturados, 20, 77
e mosto, 66-67
e o metabolismo das clulas de levedura, 22-24, 23, 25, 26
e cepa de levedura teste de demanda de oxignio, 226-228, 228
Palmer, John
Brewing estilos clssicos,4
Como Brew,2
Pasteur, Louis, xvi, xvii-xviii, 6-7, 8, 24, 30
teste mutante petite. veja teste
mutantes pequeno, 22, 147, 229, 266. Veja tambm off-flavors e off-aromas
pH, 11, 32, 105, 137
compostos fenlicos, 39, 39-40, 104. Veja tambm off-flavors e off-aromas
causas, 39-40, 267-268, 282, 283
guaiacol 4-vinilo, 33, 39, 39-40, 106
e cepas de leveduras, 39-40, 47-49
pitching, 125-126, 279, 280, 282
um iniciante, 138
taxas de pitching, 104, 105, 121-125, 126. Veja tambm leveduras
e atraso de fase, 67-68
placas e inclinaes. Ver leveduras, cultura de
propagao, 126-148. Veja tambm motor de arranque
comercial, 127-132
problemas com, 277-278
yeast, 1112. See also fermentation, flocculation, pitching rates, species of yeast, strains of
yeast
biology of. See yeast biology
capturing of, 207209
collecting of, 45, 148156
bottom cropping, 153156
too late or too early, 279, 281, 283
top cropping, 45, 149152, 152
culturing of, 189206, 190
freezing, 199201
plates and slants, 190197, 192.
See also testing
and oil immersion, 192, 198
preparing, 193194
selecting colonies, 201204, 202
stabs, 197198
streaking, 190, 195197, 196
water immersion, 192, 198199
dehydration of, 279, 281, 283
dry, 146, 146148, 160
handling of, 148
history of, xvxviii, 59, 162
maintaining a library of, 206207
mutation, 279, 283
propagation of. See propagation
re-use of, 161170
rinsing, 168, 168169, 277
storage of, 156161, 191, 192
and documentation, 158159
and shelf life, 159161, 276
and problems, 275277
transport of, 171172, 277
viability of. See viability
vitality of. See vitality
washing, 169170, 277
yeast biology, 1740
and cell structure, 1922, 20, 21
and enzymes, 21, 24, 3032
and flocculation, 2630
genetics of, 1819
and metabolism, 9, 2224, 23
and production of alcohol, 2426, 2426
yeast cells, counting. See cell counting
yeast laboratory. See also sterilization
commercial, 127132, 128, 129
setting up, 174184
environmental considerations, 174176
equipment, 175176, 178182
safety, 176179
yeast nutrients. See nutrients
yield factor. See starter
YPD medium. See testing