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dutilisation/]
Textiles dyes as a source of wastewater contamination: screening of the toxicity and treatment methods
Hedi Ben Mansoura,b,c*, Oualid Boughzalaa, dorra Dridic, Daniel Barilliera, Leila Chekir-Ghedirab,
Ridha Mosratia
a
quipe de Recherche en Physico-Chimie et Biotechnologie (ERPCBEA3914), IUT-UFR Sciences, Universit de Caen,
Basse Normandie, France
b
Laboratoire de Biologie Cellulaire, Facult de Mdicine Dentaire, Rue Avicenne, 5000 Monastir, Tunisie
c
Institut Suprieur de Biotechnologie Technopole Sidi Thabet, Universit Manouba, Manouba, Tunisie
Colorant azoque
Rouge ractif 2
Colorant azoque
Jaune mordant 10
Colorant anthraquinone
Bleue de ractif
Figure 1
Figure 1. Exemples des groupes chromophores et auxochromes des colorants de types azoques
et anthraquinones.
Example of the chromophoric and auxochromic groups of azo dyes and anthraquinone.
Groupes auxochromes
Groupes chromophores
Groupes donneurs dlectrons
Azo (-N=N-) Amino (-NH2)
Nitroso (-N=O) Mthylamino (-NHCH3)
Carbonyle (>C=O) Dimthylamino (-N(CH3)2)
Vinyle (-C=CH2) ou mthine (>C=) Hydroxyle (-OH)
Nitro (NO2) Alkoxy (-OR)
Thiocarbonyle (>C=S)
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2001; Seyewetz et Sisley, 1896; Welham, 2000; obtenus par raction du dicyanobenzne en prsence dun
Zhenwang et al., 2000). halognure mtallique (Cu, Ni, Co, Pt, etc.).
Les colorants anthraquinoniques sont, dun point de vue Les colorants basiques ou cationiques: Classe des colorants
commercial, les plus importants aprs les colorants azoques. porteurs dions positifs et reconnus pour leurs nuances
Leur formule gnrale drive de l'anthracne montre que le brillantes. Les colorants basiques se composent de grosses
chromophore est un noyau quinonique sur lequel peuvent molcules et ce sont des sels solubles dans leau. Ils ont
s'attacher des groupes hydroxyles ou amino. une affinit directe pour la laine et la soie et peuvent tre
utiliss sur le coton. La solidit des colorants basiques sur
Les colorants indigodes tirent leur appellation de lindigo ces fibres est trs faible. Ces colorants ont bnfici dun
dont ils drivent. Ainsi, les homologues slni, soufr et regain dintrt avec lapparition des fibres acryliques, sur les
oxygn du bleu indigo provoquent dimportants effets quelles ils permettent des nuances trs vives et rsistantes.
hypsochromes avec des coloris pouvant aller de lorange au
turquoise. Les colorants de cuve sont des colorants insolubles dans
leau, appliqus sur la fibre aprs transformation par rduction
Les colorants xanthnes, dont le compos le plus connu alcaline en leucodrivs. La teinture se termine par la roxydation
est la fluorescine, sont dots d'une intense fluorescence. in situ du colorant sous sa forme insoluble initiale. Rputs
Peu utiliss en tant que teinture, leur usage est bien tabli pour leur bonne rsistance aux agents de dgradation (lavage,
comme marqueurs lors d'accidents maritimes ou comme rayons solaires), les colorants de cuve sont largement utiliss
traceurs d'coulement pour des rivires souterraines, des flux sur le coton, le lin, la rayonne et autres fibres cellulosiques,
de rejets, etc. limage de lindigo pour la teinture des articles jean ou denim.
Les phtalocyanines ont une structure complexe base sur Les colorants directs contiennent ou sont capables de former
l'atome central de cuivre. Les colorants de ce groupe sont des charges positives ou ngatives lectrostatiquement attires
Les colorants source de contamination de leau
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par les charges des fibres. Ils se distinguent par leur affinit pour tat insoluble dans la fibre. Les colorants au soufre sont
les fibres cellulosiques sans application de mordant, lie la gnralement employs sur le coton pour produire des
structure plane de leur molcule. teintes fonces conomiques, dont la solidit au lavage et la
lumire va de moyenne bonne.
Les colorants mordants contiennent gnralement un
ligand fonctionnel capable de ragir fortement avec un sel
d'aluminium, de chrome, de cobalt, de cuivre, de nickel 2.5 Les colorants azoques
ou de fer pour donner diffrents complexes colors avec le
textile. On peut distinguer deux types: Cest en 1863 que Mitscherlich a dcouvert l'azobenzne
C6H5N = NC6H5, mais c'est Peter Griess qui a effectu les
Colorants complexe mtallifre type 1:1 : colorants premiers travaux systmatiques partir de 1858 en dcrivant
ayant un ou des lments mtalliques dans leur structure la mthode de prparation trs gnrale de ces produits. Les
molculaire. Requirent lutilisation de lacide sulfurique. colorants azoques constituent la famille la plus importante
tant sur le plan des applications qui reprsentent plus de
Colorants complexe mtallifre type 1:2 : deuxime 50% de la production mondiale de matires colorantes, soit
gnration des colorants acides traits avec des mtaux de 800000tonnes (Bauer et al., 2001; Ganech et al., 1994;
mordanage tels que le chrome. Ce type de colorant teint ONeill et al., 1999; Pandey et al., 2007), que sur celui
les fibres beaucoup plus solidement que les colorants acides de la multiplicit des structures tudies, soit 60 70% des
courants. Ils sont appliqus en milieu lgrement acide, soit colorants synthtiques (Zollinger, 1987).
en pH4,5 5.
Le nombre de colorants azoques a connu une
Les colorants ractifs contiennent des groupes chromophores volution importante et a atteint, dans les annes 90, plus
issus essentiellement des familles azoque, anthraquinonique de 10 000 molcules commercialises. Ces colorants sont
et phtalocyanine. Leur appellation est lie la prsence
impliqus dans un large ventail de domaines : textile,
dune fonction chimique ractive, de type triazinique ou
imprimerie, alimentaire, cosmtique et pharmaceutique
vinylsulfone, assurant la formation dune liaison covalente
(Zollinger, 1987). Lindustrie textile reprsente la partie
forte avec les fibres. Solubles dans leau, ils entrent de
plus en plus frquemment dans la teinture du coton et majeure du march de ces colorants (Galindo, 1998).
ventuellement dans celle de la laine et des polyamides.
On nomme azoques les composs caractriss par le
Les colorants dvelopps ou azoques insolubles, appels groupe fonctionnel azo (N=N) unissant deux groupements
aussi colorants au naphtol, sont forms directement sur alkyles ou aryles identiques ou non (azoque symtrique et
la fibre. Au cours dune premire tape, le support textile dissymtrique). Ces structures, qui reposent gnralement sur
est imprgn dune solution de naphtol ou copulant. Les le squelette de lazobenzne, sont des systmes aromatiques
prcurseurs de la molcule suffisamment petits pour diffuser ou pseudo-aromatiques lis par un groupe chromophore azo
dans les pores et les fibres sont ensuite traits avec une solution (N=N).
de sel de diazonium qui, par raction de copulation, entrane
le dveloppement immdiat du colorant azoque. Puisque le L'introduction de groupes azo entre deux noyaux
compos phnolique est dissous dans une solution basique, aromatiques dplace le spectre d'absorption du benzne vers les
ces colorants ne sont utiliss que sur les fibres cellulosiques grandes longueurs d'onde de telle sorte que la couleur apparat
bien que dautres fibres soient susceptibles dtre teintes en (effet bathochrome). Le plus simple des colorants azoques,
modifiant le procd. l'azobenzne, est jaune-orang. L'introduction de groupes
amines ou phnols a galement un effet bathochrome, de
Les colorants disperss appels aussi plastosolubles sont trs
mme que la multiplication des groupes azoques, aussi peut-
peu solubles dans l'eau et sont appliqus sous forme d'une
on obtenir presque toutes les nuances du spectre. La prsence
fine poudre disperse dans le bain de teinture. Ils sont en
mesure, lors dune teinture haute temprature, de diffuser dans un tel difice de substituants sulfons, nitrs ou halogns,
dans les fibres synthtiques puis de s'y fixer. Les colorants accepteurs ou donneurs dlectrons n ou dlocalisables sur
disperss sont largement utiliss dans la teinture de la plupart le(s) cycle(s) aromatique(s), permet d'augmenter le phnomne
des fibres manufactures, surtout le polyester. de rsonance. C'est ainsi que l'on peut jouer sur la couleur et
sur les qualits de teinture. En gnral, plus le systme de la
Les colorants au soufre sont insolubles dans leau mais molcule est conjugu, plus la longueur d'onde qu'il absorbera
appliqus sous forme dun driv soluble aprs rduction sera grande. Cependant la complexit des molcules diminue
par le sulfure de sodium. Ils sont ensuite roxyds leur la vivacit des nuances.
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Les colorants azoques forment une gamme tendue 2.6.2 Les dangers long terme
de nuances (du jaune au bleu, au vert et mme au noir) et
se rencontrent dans diverses classes tinctoriales: les colorants La persistance : les colorants organiques synthtiques, en
basiques, acides, directs et ractifs solubles dans l'eau, les particulier azoques, sont des composs trs rsistants la
azoques disperss et mordant non ioniques insolubles dans dgradation biologique naturelle (Pagga et Brown,
l'eau. 1986). Cette persistance est en troite relation avec leur
ractivit chimique:
lissue du procd de coloration, une quantit non - Les composs insaturs sont moins persistants que les
ngligeable (10 15 %) des colorants engags se retrouvent saturs;
dans les eaux uses (Bauer et al., 2001). Or ces composs - Les alcanes sont moins persistants que les aromatiques;
organiques cancrignes sont rfractaires aux procds de - La persistance des aromatiques augmente avec le nombre
traitement habituellement mis en uvre et sont trs rsistants de substituants;
la biodgradation (Pagga et Brown, 1986). - Les substituants halognes augmentent la persistance des
colorants tels que les groupements alkyles.
2.6 Le traitement des effluents textiles (chargs en colorants en Bio-accumulation : Si un organisme ne dispose pas de
particulier azoques) mcanismes spcifiques, soit pour empcher la rsorption
dune substance telle quun colorant, soit pour lliminer une
2.6.1 Les dangers vidents fois quelle est absorbe, alors cette substance saccumule. Les
espces qui se trouvent l'extrmit suprieure de la chane
alimentaire, y compris l'homme, se retrouvent exposes des
Eutrophisation: Diffrents ions peuvent tre vacus dans
teneurs en substances toxiques pouvant tre jusqu mille
le milieu naturel tels que le phosphate, utilis comme
fois plus leves que les concentrations initiales dans l'eau.
dtergent lors du processus dennoblissement (Yusuff
et Sonibare, 2004) ou le nitrate libr sous laction des Sousproduits de chloration (SPD): Le chlore utilis pour
microorganismes sur les colorants (Kaushik et al., 2010). liminer les microorganismes pathognes ragit avec la
Ces ions minraux introduits en quantit trop importante matire organique pour former des trihalomthanes (THM)
peuvent devenir toxiques pour la vie piscicole et altrer la (Sant canada, 1999) dont les concentrations
production deau potable. Leur consommation par les plantes peuvent atteindre plusieurs centaines de mgL1. Les SPD
aquatiques acclre la prolifration anarchique de celles-ci et sont responsables du dveloppement de cancers du foie, des
conduit lappauvrissement en oxygne par inhibition de la poumons, des reins et de la peau chez l'homme (Mills et
photosynthse dans les strates les plus profondes des cours al., 1998; Sant Canada, 1999).
d'eau et des eaux stagnantes.
N,N-dimthyl-4-aminobenzne et N-mthyle-
Trs mutagnes et carcinognes
4-aminoazobenzne YAHAGI et al. (1975)
3. TRAITEMENT DES EAUX USES Par exemple, dans des conditions alcalines (pH=912),
une concentration en sel de 40 100gL1 et des tempratures
Le secteur textile fait partie des six branches dactivits leves (30 70 C), les colorants ractifs tels que la vinyl-
gnrant la moiti des flux industriels de pollution. Les effluents sulfone (RSO2CH=CH2) et le chlorotriazinyl forment des
issus de ce secteur peuvent tre trs colors et difficiles traiter. liaisons avec la fibre sous cette forme. Cependant, les colorants
La coloration de ces eaux uses est de plus en plus perue comme ractifs subissent dans leau une raction spontane dhydrolyse
une nuisance importante. La plus grande part des effluents est qui diminue laffinit de ces colorants visvis de la fibre. Par
reprsente par lennoblissement qui englobe les prtraitements consquent, une quantit leve de colorant mis en oeuvre se
(dsencollage, blanchissement), la teinture ou limpression et dcharge dans leau use (Hao et al., 2000).
les oprations qui confrent aux fibres textiles des proprits
particulires (Figure 2). La plupart de ces traitements sont L'efficacit de fixation change avec la classe du colorant
des grands consommateurs deau (200 Lkg1 en moyenne). azoque utilise, qui est autour de 98 % pour les colorants
En France, selon la Fdration de lEnnoblissement Textile basiques alors quelle ne dpasse pas 50% pour les colorants
(FET), la branche traite 500000tonnes de tissu par an avec ractifs comme le montre le tableau3.
une production deaux uses de lordre de 100millions de m3.
Le traitement des eaux pollues par ces types de colorants
Au cours des diffrentes tapes du procd de teinture, des est donc devenu une priorit dans notre monde moderne.
quantits plus ou moins importantes de colorants sont perdues La mise au point de mthodes et loptimisation des procds
Eau use Eau use Eau use Eau use Eau use Eau use
Produit final
Les colorants source de contamination de leau
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Tableau 3. Taux de fixation sur la fibre textile pour les diffrentes classes tinctoriales de colorants azoques (ONeill et
al., 1999; Azbar et al., 2004).
Table 3. Rate of fixation on the textile fiber for the various tinctoriales classes of azo dyes (ONeill et al., 1999;
Azbar et al., 2004).
existants, qui doivent tre aussi efficaces que peu coteux, font chargent les rejets finaux en nombreux sous-produits chimiques
donc lobjet dun nombre considrable de travaux. de raction.
En effet, le traitement des rejets textiles, compte tenu de la Il apparat donc intressant de mettre au point des
composition trs htrogne de ceux-ci, conduira toujours la traitements alternatifs, notamment par voie biologique, qui
conception dune chane de traitement assurant llimination ont lavantage dtre moins coteux, moins polluants et plus
des diffrents polluants par tapes successives. La premire tape efficaces car plus spcifiques. Les procds les plus couramment
consiste liminer la pollution insoluble par l'intermdiaire rencontrs seront abords succinctement dans les paragraphes
de prtraitements (dgrillage, dessablage, dshuilage, etc.) suivants. Nous prendrons soin d'voquer la fois leurs avantages
et/ou de traitements physiques ou physico-chimiques assurant et leurs inconvnients visvis du traitement des colorants.
une sparation solideliquide. Les techniques de dpollution Enfin, la dgradation des colorants par des bactries, qui fait
intervenant le plus couramment en deuxime tape dans les lobjet de notre travail, sera aborde plus spcifiquement parmi
industries textiles, d'aprs Hao et al. (2000) et Dos Santos ces traitements biologiques.
et al. (2007) se divisent en trois types: physiques, chimiques
et biologiques.
3.1 Mthodes physiques
Les procds les plus simples et les plus anciens dlimination
3.1.1 Filtration sur membrane
des polluants rfractaires aux traitements biologiques sont
des mthodes physiques de transfert de masse : en gnral,
La filtration sur membrane pilote par pression hydraulique
la floculation et ladsorption sur charbon actif. Mais, dune se dcline en microfiltration, ultrafiltration, nanofiltration
part, ces mthodes dplacent simplement la pollution dans les et osmose inverse. Leffluent passe travers une membrane
grandes quantits de boues ainsi cres et, dautres part, elles semi-permable qui retient en amont les contaminants de
ne sont pas suffisamment actives pour rsoudre les problmes taille suprieure au diamtre des pores, pour produire un
lis la coloration. La coagulation et la floculation sont, par permat purifi et un concentr qui reoit les impurets
ailleurs, inefficaces en ce qui concerne les colorants basiques, organiques (Robinson et al., 2001). Parmi les quatre
et la rcupration des colorants de cuve par adsorption sur types de procds, la nanofiltration et losmose inverse sont
charbon actif est mdiocre. les plus adapts la rtention partielle de la couleur et des
petites molcules organiques (Taylor et Jacobs, 1996)
Cest pourquoi les mthodes physiques sont remplaces et losmose inverse reste la plus rpandue (Calabro et al.,
par des procds chimiques de destruction. Ces derniers sont 1990). La nanofiltration sapplique surtout au traitement
bass sur loxydation des colorants par des agents chimiques des bains de teinture de colorants ractifs en agissant comme
qui sont gnralement des systmes gnrateurs de radicaux un filtre molculaire tandis que la microfiltration retient les
libres, en particulier du radical hydroxyle. Malgr leur rapidit, matriaux collodaux tels que les colorants disperss ou de cuve
les mthodes chimiques se sont avres peu efficaces compte grce une membrane cran (Van Der Bruggen et al.,
tenu des normes exiges sur les rejets. Ces mthodes ne sont pas 2003). Lultrafiltration ne sapplique qu la rduction de DCO
universelles pour tous les colorants, elles sont trs coteuses et et des solides en suspension (Anselme et Jacobs, 1996)
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et ne se montre rellement efficace quen combinaison avec la traitement chimique, les procds doxydation avance (AOP)
coagulation/floculation. restent les plus frquemment utiliss. Ceux-ci sont fonds sur
la formation dune entit radicalaire extrmement ractive :
Ces procds, limits dans leurs applications, ncessitent le radical hydroxyle (OH) qui possde un temps de vie trs
des investissements importants (Van Der Bruggen et al., court, un potentiel doxydation lev et une forte ractivit
2003) et le retraitement du concentr est jusqu six fois plus visvis de nombreux composs organiques. Les principaux
cher que celui de leffluent originel. procds de production du radical hydroxyle sont prsents.
3.1.2 Adsorption (sur charbon actif ) 3.2.1 Quelques procds doxydation avance (POA)
Lors de ladsorption, le colorant est transfr de la phase 3.2.1.1. Ractif de Fenton (H2O2/Fe2+)
liquide vers la phase solide. Le charbon activ est le plus
communment utilis pour rduire la couleur, mais cette Fenton avait dcrit la fin du XIXe sicle que le fer ferreux
technique nest efficace que sur certaines catgories de colorants favorisait fortement loxydation de lacide malique par le
(cationiques, mordant, disperss, de cuve et ractifs (Hao et peroxyde dhydrogne en milieu acide (Fenton, 1894). Des
al., 2000 ; Raghavacharya, 1997; Robinson et al., travaux ultrieurs ont montr que la combinaison de H2O2 et
2001). De plus, ces techniques non destructives requirent des de Fe2+, nomme ractif de Fenton, tait un oxydant efficace
oprations postrieures de rgnration et de post-traitement pour une grande varit de substrats organiques, notamment
des dchets solides onreuses. Dans la plupart des cas, les les phnols, les pesticides, les aromatiques polycycliques et des
rsidus solides sont rpandus en dcharges et des dispositions colorants, en particulier les azoques (Benitez et al., 2001;
particulires doivent tre prises lgard des composs De Heridia et al., 2001; Kondo et al., 2002; Wang
organiques qui peuvent lixivier avec le temps. et al., 2005). Quarante ans plus tard, Haber et Weiss
(1934) identifiaient le radical hydroxyle comme tant lespce
oxydante de la raction prsente ci-dessous et communment
3.1.3 Mthode physico-chimique de coagulation - floculation appele raction de Fenton:
Tableau 4. Comparaison de technologies physiques et chimiques, de dpollution des effluents textiles chargs de
colorants synthtiques (Galindo, 1998).
Table 4. Comparative study of physical and chemical technology for the depollution of textile effluents charged by the
synthetic dyes (Galindo, 1998).
ct de P. chrysosporium, dautres champignons de types Bien que les champignons soient les premiers
White rot fungi ont t tests rcemment et se sont rvls microorganismes identifis capables de dgrader les colorants
capables de simplifier les molcules colorantes. Eichlerova synthtiques et qu'ils se soient montrs efficaces dans certains
et al. (2005), en testant un ensemble de 30souches, ont observ cas compars aux autres microorganismes, le traitement des
lefficacit de ces microorganismes visvis des colorants rejets textiles chargs en colorants par les champignons pose
synthtiques, en particulier celle des souches Dichomitus beaucoup de problmes. En effet, leffluent textile nest pas
squalents, Ischnoderma resinosum et Pleurotus calyptratus lenvironnement adquat pour la croissance et la conservation
identifies trs actives visvis de lorange G et du bleu de de la biomasse fongique (Robinson et al., 2001), car le
rmazole brillant (RBBR). traitement des colorants dans un volume deau important
(unit de traitement biologique) tant trs difficile, il est
Harazono et Nakamura (2005) ont montr ncessaire de concentrer les colorants en rduisant la quantit
que la souche Phanerochaete sordida est capable de dcolorer deau (Nigam et Marchant, 1995; Nigam et al., 1996).
un mlange de quatre colorants ractifs : bleu 5, orange 14,
rouge120 et vert5 avec un pourcentage de dcoloration de En outre, lactivit de la lignine peroxydase, meilleure un
90% aprs 48h dincubation. pH acide (pH=4,5 5), exige une acidification de leau use
qui est gnralement trs alcaline. Outre un cot dacidification
Loxydation des colorants synthtiques (notamment lev, cela inhibe la croissance des autres microorganismes
azoques) par les champignons de putrfaction blanche utiles, tels que les bactries, surtout si le traitement est
impliquerait lexpression denzymes lignolytiques ralis avec un consortium de microorganismes (Swamy et
extracellulaires non spcifiques : les peroxydases telles que la Ramsay, 1999). Par ailleurs, d'autres polluants de leau use,
lignine peroxydase (LiP) et la manganse peroxydase (MnP) ou particulirement les composs aromatiques, peuvent interfrer
les phnoloxydases tels que la laccase. avec la dgradation fongique des colorants.
Tableau 5. Quelques tudes sur la rduction de colorants azoques par des bactries arobie incubes dans des
conditions limites en oxygne.
Table 5. Some studies on the azo dyes reduction by anaerobic bacteria incubated in the limited oxygen conditions.
% de dcoloration
Bactrie Colorants Rfrence
(temps daction)
2-carboxy-4 dimthyl-
Bacillus subtilis IFO 13719 100 YATOME et al. (1991)
aminobenzne
Pseudomonas pseudomallei
Bleue directe 6 100 YATOME et al. (1981)
13NA
Acide orange 63
GHORPADE et
Pseudomonas putida Acide rouge 114 -
SPENCER (1993)
Acide orange 51
Rouge de mthyle
Rouge de Congo
Pseudomonas sp. PR41-1 Azobenzne - SUGUIRA et al. (1999)
p-aminoazobenzne
p-dimthylaminoazobenzne
Les colorants source de contamination de leau
224
capacit des actinomyctes dcolorer mais aussi minraliser blancs de putrfaction et Streptomyctes, dcolorer et
les colorants textiles, notamment azoques, a t tudie minraliser des colorants textiles. Dans cette tude, 14souches
initialement par trois groupes de chercheurs. de Streptomyctes se sont rvles efficaces sur la dgradation
de deux colorants: le PolyB411 et le PolyR478. Les auteurs
Ball et al. (1989) ont test 20souches dactinomyctes, ont suggr limplication de peroxydases dans le processus de
reprsentant un large ventail de ce genre, pour leur capacit dcoloration (Pasti et al., 1990). Le mme groupe (Burke
dcolorer le Poly R. Ces auteurs ont observ que seulement et Crawford; 1998) a partiellement purifi la peroxydase
trois souches (Streptomyces badius 252, Streptomyces sp. extracellulaire de S. viridosporusT7A dans lobjectif didentifier
souche EC22 et Thermomonospora fusca MT800) dcolorent la classe de peroxydase responsable de la dgradation des
significativement le colorant. colorants par les Streptomyctes. Les auteurs ont observ que
la peroxydase purifie tait similaire et prsentait une grande
Zhou et Zimmermann (1993) ont test sparment homologie avec la manganse peroxydase de Phanerochaete
laptitude de 159 actinomyctes dgrader les colorants chrysosporium.
synthtiques. Cette tude a t ralise,dans des conditions
arobie sur des effluents textiles similaires contenant
sparment des colorants ractifs de structures diffrentes (le 3.3.3 Dcoloration par des algues
rouge ractif147 et le bleu ractif116). Les auteurs ont isol
83souches capables de dcolorer et de minraliser ces colorants. Laction dcolorante des algues a fait lobjet dun nombre trs
limit de travaux. Une tude ralise par Jinqi et Houtian
Enfin, un groupe de lUniversit de lIdaho a test la (1992) a montr que les espces Chlorella, Oscillatoria et Spirogyra
capacit des microorganismes ligninolytiques, champignons taient capables de dgrader les colorants azoques. Leur action
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dcolorante drive de lexpression dune azorductase (enzyme Dans les paragraphes qui suivent nous allons porter une
responsable de la fission de la liaison azoteazote) aboutissant attention plus particulire sur les travaux effectus avec des
la production des amines aromatiques correspondantes qui bactries du genre Pseudomonas.
sont par la suite compltement oxydes.
3.3.5.1 Dgradation des colorants azoques par des bactries dans des
conditions limites en oxygne
3.3.4 Dcoloration par les levures
Dans la littrature, les tudes portant sur la dgradation La dgradation des colorants azoques par les bactries,
des colorants azoques par des levures sont trs limites. dans des conditions anarobie, a t trs largement tudie :
Rcemment, Ramalho et al. (2002) ont test la souche de on y distingue des bactries, strictement anarobies (Bacteroides
levure Candida zeylanoides pour rduire des colorants azoques sp., Eubacterium sp., Clostridium sp., Fusobacterium sp., etc.),
modles. En 2004, cette mme quipe a pu caractriser lactivit anarobies/arobies facultatives (Proteus vulgaris, Streptococcus
enzymatique responsable de la dgradation des colorants faecalis, etc.) et arobies (Bacillus sp., Aeromonas hydrophia,
azoques chez Issatchenkia occidentalis et prsenter un an plus Pseudomonas sp., etc.).
tard le systme enzymatique dazorduction impliqu dans un
travail avec Saccharomyces cerevisiae (Ramalho, 2005). Les conditions de dgradation dans la digestion anarobie
sont adaptes la rduction des colorants azoques par clivage
Le nombre de travaux raliss sur les levures reste trs limit de la double liaison N=N, appele azorduction, entranant
en raison de la difficult les manipuler et des inconvnients une destruction subsquente des groupes chromophores (celle
du systme dlectrons largement dlocalis) mais pas une
majeurs quelles procurent. En effet, outre la difficult les
minralisation complte. Les amines aromatiques rsultantes
cultiver, lefficacit des levures visvis des colorants est trs
tant gnralement incolores, la rduction azoque du colorant
faible (la cintique de dcoloration est lente et peut prendre
est aussi dsigne dans ce cas par dcoloration.
plusieurs dizaines de jours) car les levures ncessitent de
sadapter, c'estdire de sacclimater avant daborder la Brohm et Frohwein (1937) ont isol, ds 1937,
dcoloration proprement dite. la premire souche bactrienne lactique intestinale capable
de rduire les colorants azoques alimentaires. Comme la
formation des amines aromatiques toxiques chez l'homme est
3.3.5 Dcoloration par les bactries un problme majeur, la recherche sur une rduction bactrienne
des colorants azoques a t la plupart du temps concentre sur
De nombreuses tudes ont montr la capacit des bactries l'activit des bactries anarobie (facultatives) des intestins des
dgrader les colorants. Contrairement aux champignons mammifres (Chung et al., 1978; Chung et al., 1981;
et aux actinomyctes, qui dgradent les colorants par voie Chung et al., 1992; Manning et al., 1985; Rafii et al.,
extracellulaire (implication des LiP, MnP, laccases, etc.), les 1997; Rafii et Cirniglia, 1993; Walker, 1970).
bactries agiraient plutt par voie intracellulaire. Laction
dcolorante dpendrait alors non seulement de lactivit Horitsu et al. (1977) ont isol de la boue active,
enzymatique cytoplasmique mais aussi de la filtration des Bacillus subtilis, la premire bactrie non intestinale capable
molcules travers la membrane cellulaire. de dgrader les colorants azoques. Le genre Bacillus a t,
par la suite, trs largement tudi, savoir : Bacillus cereus
Dans la littrature, la dgradation complte ou (Wuhrmann et al., 1980), Bacillus subtilis (Yatome et al.,
minralisation de colorants azoques par les bactries est 1991), Bacillus sp.OY1-2 (Suzuki et al., 2001), Bacillus sp.
souche SF (Maier et al., 2004). Les tudes ont aussi concern
dcrite par la succession de deux tapes essentielles : une
dautres bactries: Idaka et Ogawa (1978) ont montr en
azorduction anarobie suivie dune oxydation arobie des
particulier que la souche Aeromonas hydrophila var 24B tait
amines aromatiques formes lors de ltape prcdente.
capable de dgrader les colorants azoques. Dautres souches
Lazorduction est dcrite comme ltape cl de la minralisation dAeromonas hydrophila ont t par la suite testes sur une
des colorants, notamment cette tape est suffisante pour la gamme plus tendue de colorants (Chen et al., 2003; Ren
dcoloration des molcules. et al., 2006).
Certaines souches chappent cependant cette condition Les Pseudomonas ont enfin fait lobjet dun nombre
danarobiose et sont capables de rduire les colorants azoques important dtudes et ont rvl une grande capacit simplifier
en prsence doxygne. On distingue alors deux catgories de les molcules colorantes (Tableau 5) comme Pseudomonas
bactries dcolorantes selon leur comportement visvis de pseudomallei 13NA (Yatome et al., 1981), Pseudomonas
loxygne: arobie et anarobe. luteola (Chang et al., 2001; Hu, 1994), Pseudomonas putida
Les colorants source de contamination de leau
226
(Abraham et al., 2003; Ghorpade et Spencer, similitudes respectivement de 53,3, 53,9 et 53,3% avec celle
1993); Pseudomonas sp. PR411 (Suguira et al., 1999); de Bacillus sp.OY12 (Suguira et al., 2006). Lazorductase
Pseudomonas desmolyticumNCIM2112 (Kalme et al., 2007); isole de Staphylococcus aureus ATCC 25923, forme de
PseudomonasGM3; PseudomonasQ3 et PseudomonasZ1 (Yu 188acides amins, a t compare celle de Bacillus sp.OY12
et al., 2001). Dix souches de Pseudomonas ont aussi t testes et a rvl un degr dhomologie qui ne dpasse pas 32 %
sparment puis en mlange et se sont rvles trs actives sur la (Chen et al., 2005).
rduction des colorants azoques (Fang et al., 2004).
On peut constater que, malgr le fait que les azorductases
isoles de diffrentes souches ne soient pas spcifiques
3.3.5.1.1 Azorduction au colorant substrat, ces enzymes ne sont pas tout fait
homologues.
On appelle azorduction le clivage de la double liaison
azoque (N = N). Ce phnomne ncessite un transfert de
quatre lectrons en deux tapes. Dans chaque tape on donne 3.3.5.1.2 Influence des paramtres physico-chimiques sur la cintique de la
deux lectrons au colorant azoque qui est en fait un accepteur dcoloration
final dlectrons (Dos Santos et al., 2007):
Effet de loxygne : De nombreuses tudes ont montr
R1 N = N R 2 + 2 e + 2 H +
tape 1 r R 1 NH NH R 2 (4) que loxygne est un facteur limitant de la biodgradation
uuuuuuuu
des colorants azoques (Chang et Lin, 2000; Hu,
1994). Selon Chang et al. (2001), cet effet est d une
R 1 NH NH R 2 + 2 e + 2 H + tape
uuuuuuu2r R 1 NH 2 + R 2 NH 2
comptition pour le cofacteur NADH entre la respiration
(5) et lazorduction. Ces auteurs, en tudiant lactivit
( amines aromatiques incolores )
azorductase de lextrait cellulaire brut issu de P. luteola dans
des conditions arobie, ont prouv que loxygne ne prsente
Cette raction est catalyse par une enzyme cytoplasmique aucun effet direct sur lactivit azorductase.
non spcifique appele azorductase. Afin de comprendre si
laction de lazorductase tait intra- ou extracellulaire, Yu et Effet du glucose : Le glucose a t dcrit comme un
al. (2001) ont arrt la raction de dcoloration au bout de substrat prfr pour la biodcoloration dans des conditions
2h dincubation en prsence de Pseudomonas sp. et ont repris strictement anarobie, alors quil ne lest pas pour la
ensuite lexprimentation sparment, soit avec la biomasse biodgradation des colorants dans des conditions limites
bactrienne, soit avec le milieu de culture. Les auteurs ont en oxygne par les bactries arobie, mme si, dans ce
observ une faible dcoloration (3%) avec le milieu de culture cas, sa prsence amliore la cintique de dcoloration. En
alors que les colorants disparaissent compltement en prsence effet, la dcoloration de jaune mordant3 par Sphingomonas
de biomasse cellulaire. Ils ont conclu, par consquent, que xenophoga soucheBN6 est considrablement augmente par
lazorduction est intracellulaire. Lidentification des produits la prsence de glucose.
issus de lazorduction dans le milieu extracellulaire indique
que les colorants sont transfrs lintrieur de la cellule o ils Cependant, des concentrations seuils, le glucose constitue
seront rduits par une azorductase puis les amines drives, un facteur limitant de la dcoloration. Il a t montr quune
rsistant loxydation, sont rejetes dans le milieu extrieur concentration de 5 gL1 de glucose est inhibitrice de la
(Chang et al., 2001; Hsueh et Chen, 2007). dcoloration de certains diazoques par P. luteola.
Lazorductase ncessite, pour son action, la prsence dun Selon Chen et al. (2003) et Pandey et al. (2007), leffet
cofacteur tel que le NADH, NADPH ou FMN jouant le rle ngatif du glucose sur la dcoloration anoxique peut tre
dun donneur dlectrons (Figure4). attribu soit la chute de pH due la formation dacide,
soit une rpression catabolique. Chang et al. (2001) ont
Suzuki et al. (2001) sont les premiers dcrire la squence expliqu ce phnomne par la rpression catabolique exerce
de gnes codants pour lazorductase de Bacillus sp.OY12. La par le glucose sur lexpression de certains gnes. En effet,
protine de lazorductase exprime par Bacillus sp.OY12 est le glucose inhibe la transcription des gnesAMP cycliques-
compose de 178acides amins constituant alors une nouvelle dpendants (White, 1995) dont font partie les gnes
enzyme de la famille des rductases. Maier et al. (2004) ont codants pour les azorductases (Chang et al., 2001).
identifi lazorductase de Bacillus sp. souche SF, enzyme de
faible poids molculaire (62,6 KDa). Les azorductases isoles Effet de la source dazote : La rgnration du NADH,
de Bacillus subtillisATCC6633, Bacillus subtillisISW1214 et cofacteur de lazorduction, ncessite une source dazote
Geobacillus stearotherophilusIFO13737 sont formes chacune comme de lextrait de levure, de la peptone, du tryptone, du
dune squence de 174 acides amins et prsentent des KNO3, (NH4)2SO4, NH4Cl, etc.
H. Ben Mansour et al./ Revue des Sciences de lEau 24(3) (2011) 209-238
227
OCH3 OCH3
OH
OH azorductases NH-NH
N=N
R-O2S R-O2S
NADH NAD+
SO3H
SO3H
NaO3SCH2CH2 - = R
NADH
OCH3 OH NAD+
H2N
NH2 +
R-O2S
SO3H
Figure 4. Rduction du rouge ractif 22 par Pseudomonas luteola (Chang et al., 2001).
Reduction of reactive red 22 by Pseudomonas luteola (Chang et al., 2001).
Figure 4
Yu et al. (2001) ont test linfluence de diffrentes sur la cintique apparente de dcoloration. Ces auteurs ont
sources dazote sur la dcoloration de lacide violet 7 par compar la biodgradation de colorants azoques par des
Pseudomonas GM3. La peptone sest rvle comme la cellules intactes celle obtenue par des cellules permabilises
meilleure source dazote pour la rgnration de NADH, de Bacillus cereus. Ils ont notamment observ que la
alors que le KNO3 limite la cintique de dcoloration et dcoloration tait plus rapide avec les cellules permabilises
inhibe compltement celle-ci des concentrations leves. quavec les cellules natives.
Parmi de nombreuses tudes, signalons la seule ralise avec Si la biodgradation des colorants azoques dans des
un consortium form de deux Pseudomonas (Figure5), qui conditions anarobie a t trs largement tudie, la bio-
fait lexception et qui a abouti la minralisation totale du dcoloration en culture are (bien oxygne) reste encore
Jaune mordant3 (Haug et al., 1991). peu tudie et limite certaines espces de bactries. Ces
dernires chappent aux conditions gnrales dazorduction
Un systme de racteur anarobie/arobie intgr: Dans ce en anarobiose (Tableau6).
systme, des microorganismes anarobie et arobie peuvent
collaborer pour une minralisation des colorants azoques
(Libra et al., 2004; Van der Zee et Villaverde, Certaines de ces bactries, telles que Enterobacter agglomerans
2005). Un des problmes majeurs est le dsquilibre entre (Moutaouakkil et al., 2003; Moutaouakkil et al.,
le cosubstrat et loxygne; ceci est susceptible dinhiber, 2004) et Pseudomonas fluorescens NCIM 2100 (Pandey et
notamment dans ltape arobie, la dgradation des amines Upadhyay, 2006) se limitent lazorduction, premire
aromatiques. tape de la biodgradation.
Anarobie
Souche
BN6
Arobie
Figure 5. Minralisation du colorant azoque jaune mordant 3 (MY3) laide dun systme
Figure 5 de racteur squentiel anarobie/arobie (Haug et al., 1991).
Mineralization of azo dye mordant yellow 3 (MY3) by the sequential anaerobic/
aerobic reactor (Haug et al., 1991).
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Tableau 6. Principaux travaux portant sur la biodgradation des colorants azoques dans des conditions oxygnes.
Table 6. Main works concerning the biodegradation of azo dyes in oxygenated conditions.
Niveau de
Bactrie Colorant Rfrences
dgradation
4-carboxy-4-
Hydrogenophaga palleronii minralisation BLMEL et al. (1998)
sulfoazobenzne
Klebsiella pneumoniae RS-13 Rouge de mthyle minralisation WONG et YUEN (1998)
NACHIYAR et RAJAKUMAR
Pseudomonas aeruginosa Bleu rapide de navitan minralisation (2004) ; LIN et LAI (2006); LIN et
al. (2008)
Acide orange 52
Pseudomonas putida mt-2 minralisation BEN MANSOUR et al. (2009a,b)
Acide violet 7
Dautres sont capables dutiliser les amines aromatiques groupements lectrophiles dans la rsistance du colorant
formes comme sources uniques de carbone, aboutissant ainsi lattaque enzymatique. Ils ont tudi, notamment, les effets des
une dgradation complte ou minralisation des colorants colorants, dune part en tant quinducteur, et, dautre part, en
azoques. Ces bactries dgradent les molcules colorantes par tant que substrat sur respectivement lexpression et lactivit de
la succession de deux tapes enzymatiques: une azorduction, lazorductase.
non sensible loxygne, suivie dune mtabolisation oxygne
dpendant (Blmel et al., 1998; Wong et Yuen, 1998).
Les Pseudomonas sont les plus cites et ont montr une grande Aprs lazorduction vient loxydation : les amines
aptitude la conversion arobie de colorants azoques. aromatiques issues de lazorduction sont directement
prises en charge par un systme de cascade enzymatique
Ces bactries expriment des azorductases non impliquant des oxygnases et aboutissant leur dgradation
sensibles la prsence de loxygne. En effet, lorange I totale (minralisation). Des amines aromatiques sulfoniques,
azorductase [NADH(P)H:1-(4-sulfophenylazo)-4-naphtol connues comme tant trs rsistantes lattaque bactrienne
oxydorductase] et lorange II azorductase [NADH(P)H:1- cause de leur faible transfert travers la membrane cellulaire
(4-sulfophenylazo)-2-naphtol oxydorductase], azorductases (Feigel et Knackmuss, 1993; Tan et al., 2005), ont
non sensibles leffet de loxygne, ont t purifies et t facilement biodgradables par des bactries de genre
caractrises chez la souche Pseudomonas KF46 (Kulla Pseudomonas (Figure6).
et al., 1983; Zimmermann et al., 1982). En 2002, une
quipe allemande a identifi la squence des acides amins de
lorangeII azorductase de PseudomonasKF46 (Blumel et al.,
2002) dont la structure tait compltement diffrente de celle 3.3.6 Rsum de procds biologiques et analyse critique
de Bacillus sp.OY12. Il a t montr par ailleurs que lactivit
de cette azorductase dpend fortement de la structure des La dgradation des colorants synthtiques a t dcrite
colorants azoques. En effet, Zimmermann et al. (1982) au moyen de microorganismes tels que les champignons, les
ont tabli une corrlation entre lactivit de lazorductase et la algues, les actinomyctes, les levures et a montr un certain
structure chimique du colorant et ont soulign le rle de certains nombre davantages parmi lesquels on peut citer:
Les colorants source de contamination de leau
230
OH
2 OH
HO OH
HSO3 NH2
ouverture
de cycles
cycle de Krebs
Figure 6. Mcanisme de dgradation de lacide orange 20 par Pseudomonas K24 (Kulla et al., 1983).
Degradation mechanism of acid orange 20 by Pseudomonas K24 (Kulla et al., 1983).
Figure 6
Lefficacit dans la dgradation des colorants azoques Ce constat a beaucoup contribu lorientation de beaucoup
sulfons connus comme tant trs rsistants lattaque de chercheurs vers le traitement des colorants synthtiques
bactrienne (Banat et al., 1996); par les bactries qui soit plus efficace et qui prsente moins
dinconvnients. Les bactries se sont rvles trs efficaces sur
La dgradation extracellulaire des colorants qui limine la les colorants, en particulier les azoques. Toutefois, certaines
difficult lie la filtration de la molcule colorante par la bactries se limitent la premire tape de la dgradation
membrane cellulaire. azorduction donnant naissance des amines aromatiques
gnralement plus toxiques que la molcule mre alors que
Le peu dinfluence sur ces microorganismes des paramtres dautres sont capables demmener la biodgradation jusqu
physico-chimiques connus comme facteurs limitants dans le la fin minralisation. Pour cela, plusieurs procds ont t
cas des bactries. dvelopps afin damliorer la biodgradabilit de colorants, en
optimisant les conditions de culture en oxygne, temprature,
Mais elle est aussi caractrise par un certain nombre pH et la richesse en sources de carbone (glucose) et dazote
dinconvnients: (extrait de levure, peptone, tryptone etc.).
Parmi les nombreuses familles de colorants synthtiques, les Abraham T.E., R.C. Senan, T.S. Shaffiqu, J.J.
colorants azoques sont les plus largement utiliss (60 70%). Roy, J.J., T.P. Poulouse et P.P. Thomas (2003).
Ces colorants constituent un groupe de composs caractriss Bioremediation of textile azo dyes by an aerobic bacterial
par une ou plusieurs liaisons azoques (R1N = NR2) en consortium using a rotating biological contactor. Biotechnol.
association avec un ou plusieurs groupements aromatiques, Progr., 19, 1372-1376.
ce qui les rend trs stables et relativement peu biodgradables.
Beaucoup dtudes ont montr, dautre part, des effets toxiques Adedayo O., S. Javadpour, C. Taylor, W.A.
et/ou carcinognes de colorants azoques (Medvedev et Anderson et M. Moo-Young (2004).
al., 1988; Miller et Miller, 1961; Umbuzeiro et Decolorization and detoxification of methyl red by aerobic
al., 2005; Yahagi et al., 1975), ce qui contraint traiter les bacteria from a wastewater treatment plant. World J.
effluents contenant ces colorants avant de les rejeter dans le Microbiol. Biotechnol., 20, 545550.
milieu naturel.
Les traitements physico-chimiques traditionnels Alvares A.B.C., C. Dlaper et S.A. Parsons (2001).
(adsorption, coagulation/floculation, prcipitation etc.) Partial oxidation by ozone to remove recalcitrance from
sont couramment utiliss pour la dpollution des effluents wastewaters a review. Environ. Technol., 22, 409-427.
industriels; bien quelles soient rapides, ces mthodes savrent
gnralement peu efficaces en regard des normes exiges sur Alves de Lima R.O., A.P. Bazo, D.M. Favero
les rejets. Elles sont trs coteuses et chargent les rejets finaux Salvadori, C.M. Rech, d. De Palma Oliveira
en nombreux produits chimiques. Il apparat donc intressant et G. de A. Umbuzeiro (2007). Mutagenic and
de mettre au point des traitements alternatifs, notamment carcinogenic potential of a textile azo dye processing plant
par voie biologique, qui ont l'avantage d'tre moins coteux, effluent that impacts a drinking water source. Mutation
moins polluants et plus efficaces car plus spcifiques Res., 626, 53-60.
(Moutaouakil et al., 2004).
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anarobies) et des champignons. Ces derniers ont gnralement
des croissances et des cintiques de dcoloration lentes, ce Azbar N., T. Yonar, T. et K. Kestioglu (2004).
qui limite leurs performances visvis de ces colorants. Par Comparison of various oxidation processes and chemical
contre, il a t rapport (Basibuyuk et Forester, treatment methods for COD and color removal from a
1997; Nachiyar et Rajakumar, 2004) que la polyester and acetate fiber dyeing effluent. Chemosphere
dgradation complte (minralisation) des colorants azoques 55, 1, 35-43.
par les bactries ncessite la succession de deux tapes : une
azorduction (anarobie) suivie doxydations arobies des Balan D.S.L. et R.T.R. Monteiro (2001). Decolorization
amines aromatiques formes lors de ltape prcdente. of textile indigo dye by ligninolytic fungi. J. Biotechnol.,
Certaines bactries se limitent cependant la premire tape 89, 141145.
de la biodgradation ou azorduction donnant naissance
des amines aromatiques qui saccumulent dans le milieu Ball A.S., W.B. Betts et A.J. McCarthy (1989).
de culture. Des colorants qui sont parfois non toxiques Degradation of lignin-related compounds by Actinomycetes.
l'origine peuvent ainsi voluer par ce processus en mtabolites Appl. Environ. Microbiol., 55, 1642-1644.
toxiques: mutagnes, voire cancrignes (Rafii et al., 1997).
Nanmoins, les Pseudomonas sont des bactries trs actives sur Banat I.M., P. Nigam, D. Singh et R. Marchant
ce type de molcules et expriment fortement des azorductases (1996). Microbial decolorization of textile-dye-containing
(Chang et al., 2001; Hu, 2001). Parmi ce genre bactrien, effluents: A review. Bioresour. Technol., 58, 217-227.
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