RESUMEN DE MICROBIOLOGIA

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Estudio de los hongos

Los mohos

Los hongos carecen de clorofila. Los hongos se pueden diferenciar de las

bacterias porque las clulas fngicas son mucho mayores y contienen ncleo,
vacuola, mitocondrias, tpicas de las clulas Eucarintas. Se presentan tres
grupos de hongos tienen una gran importancia prctica: los mohos, las
levaduras y las setas.

LA IMPORTANCIA DE LOS HONGOS

Los hongos son hetertrofos pues como saprofitos obtiene su alimento de la

materia orgnica muerta o como parsitos se alimentan de huspedes vivos,
destruyen plantas y restos de animales degradndolos a formas qumicas
simples que pasan a formar parte del suelo y, finalmente, son absorbidas por
otras generaciones de plantas.

La ciencia que estudia los hongos se denomina Micologa, estos

microorganismos deben estudiarse fundamentalmente como entidades
biolgicas.

CARACTERISTICAS DESTINTIVAS DE LOS HONGOS

Los hongos son organismos eucariticosquimioorganotrficos. Se reproducen

de manera natural por medio de esporas, aunque hay algunas excepciones.
Casi todas la partes de un hongo son, en potencia, capaces de desarrollarse;
un pequeo fragmento es suficiente para iniciar un individuo nuevo. No tienen
clorofila. Sus cuerpos por lo general son alargados o filamentosos.

La mayor parte de los hongos son inmviles, si bien pueden tener clulas
reproductoras mviles.

Las esporas se reproducen de dos maneras en casi todas las clases de

hongos: sexuales y asexuales.

MORFOLOGIA DEL TALO(THALLUS)

El talo de los hongos se propone caractersticamente de filamentos tubulares

microscpicos llamados hifas. El conjunto de hifas se denomina micelio. La
pared de las hifas es semirrgida.

Los mohos, al igual que los hongos, pueden tener uno de los tres tipos de hifas:

1. No septada (cenoctica): estas hifas no presentan tabiques

transversales o septos derivados de sus paredes.

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 2. Septados con clulas mononucleadas: los tabiques se encuentran a
todo lo largo de las hifas, se forman del crecimiento interno de la pared
de las hifas que forman un anillo perifrico en la hifa.
3. Septado con clulas multinucleadas: se encuentra ms de un ncleo
en cada compartimiento.
El micelio forma tejido de malla floja o compacta como en las setas. El micelio
es vegetativo o reproductor. El reproductor es el responsable de la produccin
de esporas y generalmente se extiende en el aire, lejos del medio de cultivo.

ESTRUCTURA REPRODUCTORA

Esporas asexuales

La estructura productora de esporas se denomina esporoforo y cuando su

porcin terminal forma un saco llamado esporangio, el esporoforo se denomina
esporangioforo. Las esporas que se producen dentro de un esporangio se
llama: esporangiospora. Cuando el esporangio hace errupcion, las
esporangiosporas son puestas en libertad; si tienen flagelo son mviles y se les
denomina zoosporas. Las esporangiosporas que no se mueven se conocen
como aplanospora.

En algunos gneros se forman ms de un tipo de conidias en el mismo talo es

decir, se producen dos clases de conidias de tamaos diferentes. Las
pequeas, formadas generalmente por una clula se llaman microconidias. Las
grandes, casi siempre multicelulares, se denominan macroconidias. Las
microconidias pueden ser redondas, ovales, en forma de pera, de maza o
clava. Las macroconidias pueden ser alargadas o en forma de maza y resultan
por la fabricacin transversal de dos o ms clulas.

Adems de las esporas mencionadas, hay otras que se llaman talosporas por
formar parte de la hifa vegetativa. Las talosporas son caractersticas de las
levaduras y los microorganismos levaduriformes.

- Las blastosporas: son clulas germinativas de pared delgada que se

forman por la gemacin de una pseudohifa las cuales se observan en las
especies de Candida.
- La clamidospora: son redondas, de pared gruesa, y se les encuentra en
las hifas en forma terminal, lateral o intercalada.
- Clamidosporas u odio: se forman por la fragmentacin de las hifas,
dando como resultado la formacin de esporas rectangulares.
Esporas sexuales

Las esporas sexuales son el resultado de la reproduccin sexual que se

efecta en tres pasos:

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 1. El primero es la plasmogamia, mecanismo por medio del cual se juntan
dos ncleos compatibles para formar un solo protoplasto de varias
maneras.
2. El segundo la cariogamia, es la fusin efectiva de los dos ncleos. La
cariogamia da lugar al zigoto de ncleo diploide.
3. El tercer paso es la meiosis, que reestablece el estudio haploide del
ncleo.
Las esporas sexuales se reproducen con menor frecuencia y cantidad que las
sexuales. Por lo regular, solo se producen bajo ciertas condiciones especiales,
a tal grado, que cuando se cultivan los hongos en medios ordinarios pueden no
aparecer.

Un tipo de esporas sexuales son las que se forman por la fecundacin del
contenido de estructuras femeninas especiales (oosfera) por el esperma
masculino.

Otro tipo de reproduccin sexual ocurre cuando las puntas de dos hifas se
juntan y funden sus contenidos, desarrollndose un cuerpo grande de pared
gruesa llamado zigosporas.

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Los ascocarpos presentan grandes variaciones de tamao y forma y cada tipo
tiene un nombre propio. Cuando las esporas sexuales (casi siempre en nmero
de 4) se desarrollan de la parte terminal de una estructura en forma de clava
llamada basidio, las esporas se denominan basidiosporas. En muchas especies
los basidios y sus basidiosporas se organizan en estructuras muy desarrolladas
que originan setas, bejines y hongos en candelabro que crecen en rboles.
Algunos de los mecanismos sexuales de los hongos:

1. Copulacin por gametos

fusin en pares de las clulas sexuales o gametos
2. Copulacin gameto-gametangio
fusin de gametos de un sexo con gametangios de otro sexo
3. Copulacin somtica
fusin sexual de clulas vegetativas indiferenciadas (las hifas se fusionan)
4. Copulacin gametngica
fusin directa de gametangios sin diferenciacin de gametos.

Fisiologa y Nutricin de los hongos

Los mohos se adaptan a condiciones ms severas que los otros

microorganismos, estas son algunas de sus caractersticas fisiolgicas:

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1. Se desarrollan en sustratos con altas concentraciones de azucares que las
bacterias no toleran
2. Se desarrollan en condiciones de acides considerablemente altas
3. Pueden sobrevivir en ambientes deshidratados (gracias a que son
esporuladas)
4. La mayora de mohos son estrictamente aerobios
5. La abundancia de oxigeno aumenta su crecimiento
6. Crecen a temperaturas variadas, la temperatura ptima es entre 22 y 30 C,
pero existen algunos que crecen a 0 C.
7. Algunos mohos producen esclerotia (cuerpos inactivos duros) son muy
resistentes al calor.
8. La nutricin de los hongos hablando de forma general, y asumiendo que no
todas necesitan los mismos nutrientes consta de:

Carbohidratos (glucosa, maltosa, sacarosa, almidn, celulosa)

Nitrgeno inorgnico
Sustratos con nitrgeno orgnico
Pequeas cantidades de Fe, P, K, Zn, Cu, Mn, Mb
Vitaminas
Los hongos parsitos penetran la clula husped con sus hastorias
(hifas ramificadas) y obtienen alimento del citoplasma.

Cultivo de hongos

para estudiar a los mohos se utilizan los mismos mtodos generales de cultivo
que las bacterias, pero por desarrollarse estas en un tiempo menor que los
mohos, se hace necesario utilizar medios de cultivo que favorezcan a los
mohos, por lo que se utilizan medios cidos con concentraciones relativamente
altas de azucares, estos factores inhiben a muchas bacterias.

Medios de cultivo

medios naturales, como pedazos de fruta o infusiones de fruta o

vegetales, cereales, tejidos animales.
Medios de cultivo preparados con peptonas, extractos de plantas, agar y
otros compuestos de composicin variable o desconocida.
Medios de cultivo sintticos de composicin qumica definida.

Examen morfolgico de los hongos

la identificacin de los hongos depende en gran parte a las caractersticas

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morfolgicas, como el tipo y la agrupacin de las esporas. Por lo cual el cultivo
en medios lquidos no es satisfactorio para la identificacin.

En una preparacin para determinar el tipo de hongo, se beben examinar las

hifas para ver si hay tabiques, estructuras de las esporas, y otras partes del
hongo, sin embargo en una preparacin donde se toma una parte del hongo, se
rompe y desorganiza las estructuras del organismo, un mejor mtodo es la
tcnica de cultivo en portaobjetos, ya que permite manejar y observar las
especies sin modificar su desarrollo, y el arreglo y acomodo de sus partes se
mantiene intacto.

Clasificacin de los hongos

para fines de referencia todos los hongos se clasifican bajo el phylum Mycota
la clasificacin de los hongos se basa en las caractersticas de las esporas
sexuales y los cuerpos fructificantes presentes en sus estadios sexuales en sus
ciclos biolgicos. En consecuencia aquellos hongos en los cuales no pueden
ser clasificados por sus estadios sexuales son provisionalmente colocados en
una clasificacin llama Deutoromycota, hasta que sean encontrados sus
estadios sexuales y se permita realizar una reevaluacin, se ha encontrado que
la mayor parte de esta clase son ascomicotas, pero tambin existe las
basidiomycotas.

Caractersticas de las divisiones de los hongos

el esquema tradicional taxonmico agrupa a los hongos en 4 divisiones:

Zygomycota:
la mayora viven sobre materia vegetal y animales en descomposicin en el
suelo, algunos son parasitos de plantas, insectos, animales y seres humanos.
Su reproduccin es sexual, pueden producir cigotos duros de pared gruesa
llamados Zigosporas.

Ascomycota:
comnmente denominados hongos de saco, muchas de estas especies son
bastante conocidas y de importancia econmica. Por ejemplo la
Neurosporacrassaha sido usada como una herramienta de investigacin
gentica y bioqumica de gran importancia.

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Muchos ascomicetos son parsitos de plantas superiores. El ergotismo, es un
trastorno txico de los seres humanos y animales que comen grano infectados
por el hongo, se acompaa a menudo de gangrena. Durante la edad media, el
ergotismo, llamado tambin fuego de San Antonio, causaba miles de muertos.

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Los ascomicetos reciben este nombre por su estructura reproductora, el asca
en forma de saco. El micelio de los ascomicetos est formado por hifas
tabicadas. En este hongo la reproduccin asexual, que tiene lugar mediante
conidiosporas. La reproduccin sexual de los ascomicetos conlleva la
formacin de un asca que contiene dos o ms ascosporas haploides.

Aunque se emplea el trmino levaduras, en sentido general, para designar

todos los hongos unicelulares que se reproducen por va asexuales por
gemacin o fisin binaria, muchos gneros de levaduras se clasifican de forma
especfica en los ascomicetos por su reproduccin sexual. Existen levaduras
tanto en hbitats terrestres acuticos, si disponen de una fuente de carbono
adecuada.

Divisin Basidomycota

La divisin Basidiomycota contiene los basidiomicetos. Los basidiomicetos

reciben su nombre por la estructura o clula caracterstica, el basidio, implicada
en la reproduccin sexual. En basidio se produce en la punta de las hifas, y los
basidios pueden ser sostenidos por cuerpos de fructificacin llamados
basidiocarpos.

Los basidiomicetos afectan de muchas maneras a los seres humanos. La

mayora son saprofitos que descomponen restos vegetales, en especial
celulosa y liginina. Muchas setas se emplean como alimento en todo el mundo.
As mismo tambin muchas setas producen alcaloides especficos que pueden
actuar como venenos o alucingenos.

Divisin Deuteromycota

En gran medida, la taxonoma clsica de los hongos se basa en patrones

especficos de reproduccin sexual. Cuando un hongo carece de fase sexual
(etapa perfecta), o esta fase no ha sido observada, se adscribe a la divisin
Deuteromycota, llamados comnmente hongos imperfectos o deuteromicetos
(hongos secundarios).

La mayora de los hongos imperfectos son terrestres, y slo se han descrito

algunos de agua dulces o hbitats marinos. La mayora son saprofitos o
parsitos de las plantas. Unos parasitan pocos parasitan otros hongos.

Muchos hongos imperfectos afectan directamente a la salud humana. Las

actividades qumicas de muchos hongos imperfectos son importantes en la
industria.

Sintetizan los conocidos antibiticos penicilina y griseofulvina

Confieren aromas caractersticos a quesos como el gorgonzola, el
Camembert y el Roquefort.

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 Se emplean para fermentar la salsa de soja y producir cido ctrico.
Divisin Chytridiomycota

Los hongos verdaderos ms sencillos pertenecen a la divisin

Chytridiomycota. Sus miembros se conocen familiarmente como quitridos. Son
hongos terrestres y acuticos simples que se reproducen asexualmente,
formando zoosporas dotadas de flagelos nicos, posteriores, que presentan
movimiento, en latigazo. El conjunto del organismo es de tamao microscpico
y pueden consistir en una nica clula, una pequea masa multinucleada, o un
verdadero micelio. Habitualmente, el componente fundamental de la pared
celular de los quitridos es la quitina.

Los quitridos tienen diversos ciclos vitales. Cuando se producen la

reproduccin sexual, generan un zigoto que generalmente se convierte en una
espora latente o esporangio.

Mohos mucosos y mohos acuticos

Los mohos mucosos y los mohos acuticos slo se parecen a los hongos en el
aspecto y el modo de vida. En su organizacin celular, reproduccin y ciclos
vitales son filogenticamente diferentes.

Divisin Myxomycota(hongos mucosos acelulares)

En condiciones apropiadas, los mohos plasmodiales (acelulares) mucosos

existen como masa fluida de protoplasma de colores que se arrastran de modo
ambiente amebiode. Se alimentan por fagocitosis. Debido a que esta masa que
fluye carece de paredes celulares, recibe el nombre de plasmodio.

Cuando el plasmodio madura o existe escasez de alimento, humedad, o

ambos, migra a una zona luminosa y desarrolla cuerpos fructferos
delicadamente adornados. Al madurar, estos forman esporas con pared de
celulosa resistente a condiciones ambientales extremas. Las esporas germinan
en presencia de un grado de humedad adecuado para liberar mixiamebas o
clulas nadadoras flageladas.

Divisin Acrasiomycota (mohos mucosos celulares)

La fase vegetativa de los hongos mucosos celulares consta de clulas

individuales ameboides denominadas mixiamebas. Las mixiamebas se
alimentan de bacterias y levaduras por fagocitosis. Cuando abunda el alimento,
se dividen repetidass veces por mitosis y citocinesis, produciendo nuevas
mixamebas hijas. Cuando se agota su suministro de alimentos, las mixamebas
comienzan a secretar monofosfato de adenosina cclico (cAMP). Esto atrae a
otras mixamebas hacia la fuente de cAMP quimiotctico, y stas a su vez
secretan ms AMP.

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DIVISION OOMYCOTA
Los miembros de la divisin Oomycota se conoce colectivamente como
oomicetos o mohos acuticos. Los oomicetos solo se parecen a los hongos
verdaderos en el aspecto y consisten en filamentos finamente ramificado
llamados hifas. Mientras que las paredes de la mayora de los hongos estn
compuestos como quitina a diferencia de los hongos verdaderos los oomicetos
poseen crestas mitocondriales tubulares, oomycota (hongos de huevos) es una
referencia a las formas de reproduccin sexual de los mohos acuticos, esta es
fecundada por una celula espermtica o un anteridio ms pequeo para
producir un zigoto, los mohos acuticos, como saprolegniay achlya son
saprovistos que crecen en masas algodonosas sobre algas muertas y
pequeos animales.
ALGUNOS HONGOS DE INTERES MICROBIOLOGICOS
Mucor: Los miembros de este gnero abundan en el suelo, estircol,
frutas y vegetales en cambio otros son utilizados para elaborar quesos y
otros productos alimenticios, especies comunes son: M. racemosus y M
rouxii, morfolgicamente sus mincendios son: por lo regular blancos y
grises, sin tabiques. La columella (estructura esteril en el esporangio, es
redonda y cilndrica) las espigas son negras o cafes y de apariencia lisa.
Rhizopus: Son hongos comunes del pan que daan mucho a otros
alimentos, se desarrollan en el pan, vegetales, frutas y otros. La especie
mas frecuente es R. stolonifer. Del punto de vista morfolgico presenta
micelio algodonoso con esporangiosporas que emergen de los modulos
donde se forman los rizoides muy grande y negros. Tienen forma de
copa estos mohos producen racimos de hifas parecidas a races de
sostn rizoides. La produccin sexual necesita dos talos de diferentes
tipos para aparearse.
Estn ampliamente distribuidos en la naturaleza, frutas, vegetales u otros
que le sirven de alimento, que se hayan involucradas en el deterioro de los
alimentos tienen importancia econmica porque se les usa en muchas

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industrias de la fermentacin que incluyen la produccin del acido ctrico y
el gluconico.
Penicillium los miembros de este grupo, tambin deuteronomicota se
encuentran muy difundidos en la naturaleza. Algunas especies pudren o
descomponen las frutas, vegetales, conservas, granos y pastos, otras se
usan en el licuado de los quesos. Ejemplo en el rocketford, con azul y
camenvert, algunos se emplean en la industria de la fermentacin y uno de
los antibiticos ms conocidos, penicilina. Algunos se producen
sexualmente por formacin de ascosporas.
Neurospora:este gnero de ascomicota tiene inters para los bilogos
por el gran uso que se le ha dado a los estudios genticos y
metablicos. Dos de las especies mejor conocidas son: N. crassa y N
sitophila, algunas especies descomponen los alimentos y otras son
utilizadas en la industria de la fermentacin.
Sporotrichum: este gnero de deutoronomicota se caracteriza porque
su micelio claro y tadicado presenta conidia, pequeas, colocadas
lateralmente en las puntas de los conioforos. Las conidia que
generalmente estn solas pueden desarrollarse congromerados pero
nunca en cadena.
Trichoderma: una de las especies deutoronicoma ms comn es T
viride, hongo del suelo activo en los procesos de amonestacin y
descomposicin de la celulosa, toman color verde brillante y se forman
en las puntas de las hifas.
Cladosporium: miembro de este gnero de los deuteromicetos se
encuentran en productos vegetales en descomposicin y en el suelo.
Como contaminante de los medios de cultivo forman colonias discretas
con micenio y conidias gruesas, es aterciopelado negro o verde oliva.
Alternarias: es una especie frecuente en el suelo, las hojas, semillas y
frutos, muchas veces provocan la descomposicin de los alimentos y
otras son patgenas de las plantas.
Fusarium: estos se hayan muy difundidos en la naturaleza y
frecuentemente contaminan los medios de cultivos bacteriolgicos
tambin abundan en el suelo materia vegetal y alimentos en
descomposicin.

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 LOS MOHOS LIMOSOS:por los menos 4 tipos de mohos limosos son
diferentes en su estructura, fisiologa y tiene historias, caracterstico
moho limosos celulares,
moho limosos enredecia
Moho limosos endoparacitos
Y los verdaderos moho limosos plasnodialis

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LOS HONGOS Y SU ASOCIACIN CON OTROS ORGANISMOS

Algunas de las asociaciones biolgicas ms interesantes comprenden los

mohos o a los mohos y otros organismos. En estas asociaciones los
organismos son dependientes unos de los otros y obtienen algn beneficio de
tal consistencia (como proteccin, facilidades para conseguir alimento,
transportacin, etc.) por lo que no pueden vivir separados, en muy pocas los
individuos pueden valerse por s mismos.

Lquenes:Asociacin microbiana de hongos y algas en la que cada uno

contribuye al beneficio de los dos. Las algas obtienen alimento mediante
fotosntesis y usan agua y minerales de los hongos. Los hongos dependen de
las algas para obtener carbono orgnico.

Hongos y nemtodos: Los nemtodos son gusanos redondos; La mayor parte

pequeos y patgenos de las plantas. Algunos parasitan al hombre u otros
animales. Tambin hay unos saprfitos (que se alimenta de materias orgnicas
en descomposicin). El hongo puede capturar nemtodos formando lazos con
sus hifas aprisionando el cuerpo del gusano perforando la cutcula con sus
haustorias. Tambin puede hacerlo mediante un micelio pegajoso o formando
una red de micelio, deteniendo al gusano cuando trata de perforar la barrera
fngica.

Hongos parsitos de insectos: Son asociaciones perjudiciales para los

insectos ya que resultan infectados por los hongos, y de esta clase de
asociaciones se conocen ms de 50. Algunasveces parecen como epidemias
ya que acaban gran cantidad de insectos.

Mycorrhizas: Una micorriza es un sistema de races infectadas que surgen de

las raicillas de las plantas que producen semillas. La palabra mycorrhiza
significa hongos de la raz. Generalmente son benficas para el husped y el
simbionte. Las Mycorrhizas aumentan la absorcin de minerales de las plantas
verdes, mientras que la planta construye un recipiente para el hongo.

Trufas: Son cuerpos fructifican ts subterrneos de ciertos Ascomycetes que

se desarrollan en asociacin con algunos rboles como robles y bayas y son

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simbiontes comunes en estas asociaciones micorrizales. El hongo proporciona
ciertos nutrientes al rbol que, en reciprocidad, proporciona sustancias
esenciales para el desarrollo del hongo.

UNIDAD VIII

ESTUDIO DE LAS LEVADURAS

Las levaduras al igual que los mohos, son hongos, pero se distinguen de los
mohos porque su forma dominante es unicelular. Generalmente se reproducen
por gemacin como clulas solas, crecen y se reproducen ms aprisa que los
mohos filamentosos. No son protozoos ya que poseen una pared celular rgida,
no realizan fotosntesis. Algunas son esporgenas y se les reconoce como
miembros de los Fungi imperfecti. Otras forman esporas sexuales y de esta
manera muestran relacin clara con los ascomicetos o basidiomicetos.

LAS LEVADURAS Y EL HOMBRE

Las levaduras han servido durante muchos aos para fermentar jugos de
frutas, para elaborar pan y otros alimentos. En la actualidad se utiliza para
procesos fermentativos y para sintetizar vitaminas, grasas y protenas a partir
de azucares simples y amonaco.

CLASIFICACIN DE LAS LEVADURAS

La sistemtica y la taxonoma de las levaduras constantemente cambian. Han

sido descritas nuevas especies y propuestas nuevas caractersticas en las
guas taxonmicas.

ESQUEMA GENERAL DE CLASIFICACIN DE LEVADURAS

1. Las levaduras ascoporgenas y ascomicticas (esporas resultantes de

la cariogenia y meiosis que nacen en ascas).
2. Las levaduras basidiomycota (las esporas son el resultado de la
cariogamia y meiosis que nacen en basidios).
3. Las levaduras que no tienen estadios perfectos pertenecen a los hongos
imperfectos (Deuteromycota).
ECOLOGA DE LAS LEVADURAS

Las levaduras se encuentran muy difundidas en la naturaleza y son

diseminadas por los insectos o el viento. La mayora son saprofitas que viven
sobre la materia orgnica muerta, pero algunas son parasitas dependientes de
huspedes vivos o son parasitas facultativas u obligadas que producen
enfermedades a las personas, animales o plantas. Las levaduras son capaces

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de sobrevivir en ambientes tan distintos en los que varan la composicin del
suelo, temperatura, luz, humedad y otros factores.

MEDIOS ACUTICOS

Muchos estudios en agua dulce o saladas han demostrado que las levaduras
tambin estn en estos ambientes, en distintos lugares, segn donde
encuentren los nutrientes necesarios para desarrollarse.

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MORFOLOGIA DE LAS LEVADURAS

En general, las clulas de las levaduras son ms grandes que las de la mayora
parte de las bacterias, pero las ms pequeas no son tan grandes como las
bacterias mayores. Las levaduras varan considerablemente de tamao,
pudiendo tener entre 1-5 micrmetros de ancho por 5 a 30 micrmetros o ms,
de largo. Generalmente son ovoides, si bien algunas son esfricas y otras
alargadas. Cada especie tiene su aspecto caracterstico, pero aun en cultivo
puro existen variaciones de tamao y forma de las clulas individuales,
dependiendo de la edad y del medio. Las levaduras no tienen flagelos u otros
organelos de locomocin.

EXAMEN MICROSCOPICO

La forma de las levaduras se determina mediante las tcnicas de tincin que

ordinariamente se usan para las bacterias, pero como muchas tinciones
enmascaran el contenido celular, se emplean mtodos especiales para
demostrar las estructuras especficas.

El sudan 3 pone de manifiesto los glbulos de grasas, el rojo neutro hace que
los grnulos meta cromticos y las vacuolas aparezcan de color rosa dbil o
rojos; en clulas teidas con cloruro de zinc-yodo la celulosa se ve azul; los
colorantes policromos de azul de metileno tien el material nucleoproteico; el
yoduro de potasio tie los granos de almidn de azul y los de glucgeno.

CITOLOGIA DE LAS LEVADURAS

Las levaduras, como los hongos, son organismos eucariticos y las estructuras
que las forman son bsicamente la misma que las de otras eucariotes. Las
forma y estructura de las levaduras vara segn especies. Casi toda la
informacin con que contamos se base en losestudios realizados con
saccharomyces cerevisiae, pero ya se han incorporado a estos los resultados
obtenidos de trabajos con especie como Hansenula, Rhodotorula y otras. Se
han ampliado las tcnicas para estudios citolgicos con el uso del microscpico
electrnico. Ahora, mediante cortes ultra finos de clulas intactas, se puede

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examinar la pared celular, cada una de las estructuras, localizarlas y predecir la
funcin de los componentes celulares de las levaduras.

CAPSULAS

Algunas levaduras estn cubiertas con un material extracelular limoso, viscoso,

grueso, que es la sustancia capsular. La mayor parte de las capsulas de las
levaduras se componen de polisacridos, incluyendo heteropolisacaridos,
precursores insolubles del manan y sustancias del tipo del almidn.

PARED CELULAR

La pared celular de las levaduras es fina cuando las clulas son jvenes y se
engruesa con la edad. Las microgrficas de cortes ultra finos de levaduras
descubren una cubierta externa de la clula que mide aproximadamente la
sptima parte de su dimetro. Los constituyentes principales de la pared celular
en S. cerevisiae son dos polisacridos, glucano (30 a 40 %) y manan (30%). El
glucano (compuesto por unidades de D-glucosa) es el nico polisacrido que
se ha encontrado en todas las levaduras examinadas.

COMPONENTES DEL PROTOPLASMA

La clula tpica de levadura contiene citoplasma en estado semilquido

compuesto por materiales granulares finos, ribosomas ricos en RNA y
organelos limitados por membranas. El sistema de membranas en el
citoplasma es el reticuloendoplasmatico, el cual est conectado a la membrana
nuclear externa o en contacto ntimo con la membrana citoplasmtica. En el
citoplasma tambin se encuentran numerosas enzimas.

NUCLEO

Estudios de corte ultra finos mostraron que le ncleo de las levaduras es un

organelo bien definido por una membrana nuclear semipermeable, la que es
funcional en el metabolismo y reproduccin de los organismos.

MITOCONDRIAS

Las mitocondrias se presentan como organelo rodeados de membranas que

examinadas al microscopio electrnico tienen la aparicin de filamentos
doblados. Las mitocondrias se componen en gran parte de lipoprotena y una
pequea cantidad de RNA DNA (diferente del RNA nuclear). Como las
mitocondrias contienen las enzimas respiratorias, se las ha llamado centrales
de energa las clulas ya que su funcin principal es convertir la energa
aerobia.

VACULAS

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Cada clula de levadura contiene en su citoplasma una o ms vacuolas o
gotas transparentes. En las clulas que se encuentran en desarrollo
exponencial, el contenido interior de las vacuolas no presenta elementos
estructurales. Una vez que las clulas alcanzan la fase estacionaria del
desarrollo, las vacuolas contienen cantidad creciente de material granular que
en su composicin qumica suelen ser metafosfatos, polifosfatos o lpidos. Las
sustancias aisladas de las vacuolas muestran actividad por varias enzimas
hidrolticas como proteasas, ribo nucleasas y estearasas.

CARACTERISTICAS DE CULTIVO DE LAS LEVADURAS

Cuando se desarrollan en medios de cultivos adecuados, las colonias de

levaduras varan en aspecto, textura y margen, como las bacterias. As,
algunas son lisas, otras rugosas; algunas son aplanadas, otras elevadas,
tienen bordes bien definidos o irregulares, las colonias jvenes tienen
consistencia comparable a la de una pasta, cual con el tiempo, se vuelve ms
espesa y seca. Puede producir pigmentos. El tipo de desarrollo en caldo de
cultivo tambin proporciona informacin significativa. Algunas colonias se
desarrollan en el fondo del lquido a manera de sedimento, otras crecen
uniformemente en todo el caldo y otras crecen solo en la superficie como una
pelcula o nata.

REPRODUCCION DE LAS LEVADURAS GEMACION

Las levaduras se reproducen por esporulacin, gemacin o fisin. El mtodo

ms comn es la gemacin. En este procedimiento se proyecta un tbulo a
partir de la vacuolanuclear adyacente al ncleo de la clula madre hacia el
punto de la pared celular cercana a la vacuola. Ah se forma una pequea
protuberancia en la superficie externa de la clula producida por debilitamiento
local de la pared celular. El tbulo pasa entonces por la protuberancia, la cual
se alarga y se llena con material nuclear y citoplasmtico procedente de la
clula madre. La pared de la yema recin formada contiene solo material
recientemente sintetizado. Cuando la yema ha crecido casi al tamao de la
clula madre, al aparato nuclear de las dos clulas se reorienta de tal manera
que los centrosomas de cada clula queden distantes del punto de unin.

FISION

La fisin binaria, que es un tipo vegetativo o asexual de reproduccin, es

similar al que utilizan las bacterias para reproducirse. La levadura se hincha o
alarga, el ncleo se divide y se reproducen dos clulas nuevas como sucede
con saccharomyces cuando se reproduce por fisin transversal. Durante los
periodos de multiplicacin rpida, las clulas se dividen sin separarse y se
forman cadenas de clulas.

COMBINACION DE GEMACION Y FISION

15
Otro mtodo de reproduccin de las levaduras es el conocido como gemacin-
fisin, que es una combinacin entre la gemacin y la fisin binaria. En este
proceso, que ocurre en saccharomycoides y Nadsonia, las yemas se forman en
las puntas (polos) de las clulas y aparece en un tabique entre la clula madre
y las clulas hijas por crecimiento centrpeto de la parte interna de la pared
celular.

ESPORULACION

Cuando no se especifica y se aplica a las levaduras, generalmente se refieren

a la formacin de esporas sexuales (ascosporas o basidiosporas) asociadas
con clulas diferenciadas (ascas o basidios) mediante un proceso que se
supone divisin-reduccin (meiosis). La esporulacin asexual o vegetativa
acurre con la formacin de esporas tales como conidias, artrosporas,
blastosporas, balistosporas y clamidosporas.

Paginas 404 413

En las levaduras basidiomicticas, se han descrito tres esquemas en relacin al
ciclo sexual.

ESQUEMA UNO: Clulas haploides de signos opuestos se fusionan para

formar micelio dicariotico con conexiones de sostn.

ESQUEMA DOS: las clulas gemantes del promicelio no se conjugan, pero a

partir de cada una de ellas se puede desarrollar nuevamente todo el ciclo,
estas clulas se denominan, levaduras autoesporulantes.

ESQUEMA TRES: No se forma micelio diacrtico, pero las clamidoesporas

estn en micelios uninucleados sin conexiones de sostn. Las clulas de
levaduras son autoesporulantes y se presume que en la clamidosporas se
produce meiosis.

8.8 HIBRIDACION

Como las levaduras son importantes en la industria por su capacidad de

fermentar u oxidar sustratos y producir sustancias tiles, es conveniente usar la
cepa de microorganismos que proporcione la mayor cosecha. En el pasado,
era una prctica encontrar un cultivo para el pan, cerveza o vino, y en muchas
ocasiones provocaba enfermedades. Despus se descubri que las leyes
mendelianas, gobiernan la herencia de las levaduras, y fue posible conseguir
nuevos cultivos con algunas de las caractersticas deseadas en los
laboratorios.

8.9 FISIOLOGIA DE LAS LEVADURAS.

16
El catabolismo de azucares como la glucosa:

Anaerobio (fermentacin): Es el proceso ms tpico, el ms conocido

es la fermentacin alcohlica; si los cultivos se airean durante el
desarrollo, la fermentacin se reprime a favor de las vas oxidativas.

Las levaduras son fuente de otras enzimas como:

Lactasa
Invertasa Son de importancia comercial
Catalasa

Aerobio (respiracin): Algunas utilizan

Pentosas: (D-Xilosa, D-Ribosa)
Polisacridos: (almidn)
Alcoholes de azucares: (manitol, sorbitol)
cidos orgnicos: (lctico, actico, ctrico)
Algunos sustratos orgnicos

Nitrgeno: Las levaduras obtienen el nitrgeno de fuentes orgnicas e

inorgnicas, casi todas las especies utilizan el ion amonio. La diferencia en la
capacidad de utilizar nitratos y nitritos y para desaminar aminocidos ayuda a
diferenciar las cepas o las especies.

Azufre: La necesidad de azufre en las levaduras, se satisface por la

disponibilidad de sulfatos en el sustrato, pero algunas se favorecen de azufre
organico como la cistena y metionina.

Otros minerales necesarios: Potasio, magnesio, sodio y calcio; trazas de

boro, cobre, zinc, magnesio, hierro, yodo y molibdeno.

Temperatura: Pueden desarrollarse en un rango de 0 47 C, otras no se

desarrollan a mas de 15C otras lo pueden hacer a mucha menor temperatura.

La ptima para la mayor parte es entre 20 y 30 C y las variedades patgenas

crecen bien entre 30 y 37 C.

pH: Crecen entre 3.5 y 3.8, donde se inhiben casi todas las bacterias.

La tolerancia de los cidos vara segn la cepa y la especie, desde 2.2 a 8.0.

8.10 TORULA

Se ha aplicado este nombre a muchas levaduras no esporuladas, pero es

incorrecto en al punto de vista taxonmico, todava es usada ampliamente.

Rhodotorula: Forman grandes cantidades de pigmentos.

17
 Torula Histolytica: Muy patgena para el hombre y animales.
Candida albicans: Se encuentra en la mucosa de la boca en la
enfermedad conocida como afta.
Candida utilis: Es una levadura nutritiva, utilizada como suplemento
alimenticio de ganado.

Elaboracin del pan.

El origen de la fermentacin del pan con levadura se realizo de forma

accidental. Hoy esta altamente estandarizada siendo el agente mas frecuente
usado para hacer crecer el pan. La levadura crece en el pan formando bixido
de carbono y alcohol a partir de los azucares existentes en la masa, la
disminucin del peso del pan se debe a las burbujas de bixido de carbono.
Durante el proceso de horneo y coccin, muere la levadura y se pierde la
mayor parte de levadura y alcohol.

8.11 COMO OBTENER LAS ENZIMAS.

Por compresin de clulas es factible obtener una preparacin enzimtica

cruda capaz de fermentar la glucosa a alcohol y bixido de carbono.

Este producto conocido como: zimasa, aunque generalmente se considere

como enzima es una mezcla de muchas enzimas. La energa liberada queda
disponible para el crecimiento respecto a la fisiologa celular de otros
microorganismos, animales y plantas superiores.

UNIDAD IX

CONTROL DE LAS POBLACIONES MICROBIANAS.

9.1 FUNDAMENTOS DEL CONTROL.

IMPORTANCIA DEL CONTROL MICROBIANO.

Las razones principales para controlar los microorganismos se resumen as:

1. Prevenir la transmisin de la infeccin y la enfermedad

2. Prevenir la contaminacin o la proliferacin de microorganismos
perjudiciales
3. Prevenir el deterioro o destruccin de materiales por los
microorganismos

Los microorganismo se eliminan, inhiben o matan por medios de agentes

fsicos, o agentes qumicos.

Paginas 404 -423

DEFINICION DE TERMINOS

18
Esterilizacin: proceso de destruir todas las formas de vida microbiana. Una
sustancia o un objeto estn estriles o no, pero no semiestriles o casi
estriles.
Desinfectante: es un agente, por lo regular qumico, que se aplica
comnmente a objetos inanimados, capaz de matar las formas en desarrollo,
pero no necesariamente las esporas resistentes de microorganismos
patgenos.
Antisptico: sustancia que impide el desarrollo o accin de los
microorganismos, ya sea por destruirlos o inhibir su crecimiento y actividad,
generalmente se refiere a sustancias aplicadas al cuerpo.
Saneamiento: consiste en reducir la poblacin microbiana a niveles no
peligrosos por medio de un agente, segn los requerimientos de salud pblica.
Por lo regular es un agente qumico que mata el 99% de las bacterias en
crecimiento y se aplican en objetos inanimados como equipos y utensilios.
Germicida (microbicida): agente que mata las formas en desarrollo pero no
forzosamente las esporas resistentes. Se utilizan para todo tipo de grmenes
(microbios) y en cualquier tipo de aplicacin.
Bacteriostasis: supresin del desarrollo de bacterias (bacteriosttico). Los
fungistticos se refieren a los hongos y los que inhiben el desarrollo de
microorganismos, se designan microbiostticos.
Agentes microbianos: son los que interfieren en el crecimiento y actividad de
los microbios. Si se refiere a grupos determinados de organismos se emplean
los trminos antibacteriano y antifngico. Los agentes antimicrobianos que se
utilizan en el tratamiento de las infecciones se denominan agentes
teraputicos.
Curva de velocidad de muerte bacteriana: para determinar la muerte se
requieren tcnicas de laboratorio que revelen el crecimiento cuando se siembra
la muestra en medios de cultivo slidos o lquidos. Cuando se colocan unas
gotas de una suspensin bacteriana en un recipiente con acido caliente o un
incinerador, seguramente mueren todas instantneamente que no es posible
medir la curva de mortalidad. Con un tratamiento menos drstico morirn en un
periodo de proporcin exponencial constante que, en esencia, es la inversa de
su patrn exponencial de desarrollo.
El nmero de sobrevivientes se representa grficamente frente al tiempo
mediante dos curvas, en las que se observa que alguna porcin de la poblacin
bacteriana muere durante una unidad de tiempo determinada. La curva A es
aritmtica y la curva B es logartmica y revela que la proporcin de muerte es
constante. Los puntos sobre la recta y la inclinacin de la curva nos dan la
velocidad de muertes.
Si las clulas de esa poblacin varan en edad o estado fisiolgico del
desarrollo, presentan diferencia de susceptibilidad al agente, por lo que las
sobrevivientes no se colocan sobre la lnea recta; as pues, la forma e
inclinacin de la curva de muerte est afectada por la especie de
microorganismo y por la homogeneidad de las clulas consideradas.

19
CONDICIONES QUE INFLUYEN EN LA ACCIN ANTIMICROBIANA
Muchas caractersticas biolgicas de los microorganismos influyen en la
proporcin en que son muertos o inactivados por diversos agentes, por lo que
hay que considerar muchos factores:
Temperatura: un aumento de la temperatura con un agente qumico, apresura
la destruccin de los microorganismos. As, una mnima cantidad del agente
qumico a temperatura alta ser igual que una cantidad mayor del mismo
agente a temperatura baja.
Clases de microorganismos: las clulas vegetativas en desarrollo que forman
esporas son mucho ms susceptibles que las esporas, que son formas
orgnicas ms resistentes pues son capaces de sobrevivir en condiciones
fsicas o qumicas muy adversas.
Estado fisiolgico de las bacterias: Las clulas jvenes, por tener intenso
metabolismo, son ms vulnerables que las viejas, en el caso de un agente que
cause dao por interferir en esa funcin, afectando a las clulas en desarrollo.
Otras diferencias se explican por cambios en la membrana celular porque el
envejecimiento afecta la permeabilidad de estas.
Ambiente: las propiedades fsicas y qumicas del medio, tienen una gran
influencia en la velocidad y eficacia de la destruccin microbiana. As, el calor
es ms eficaz en medios cidos que alcalinos, la consistencia (viscosidad)
influye en la penetracin del agente, la alta concentracin de carbohidratos
aumentan la resistencia trmica de los organismos y la presencia de materia
orgnica reduce la eficacia de un agente qumico.
La mezcla desinfectante-materia orgnica conduce a los siguientes resultados:
1. Forman un producto que no es microbicida.
2. Forman un precipitado, apartando as al desinfectante de su posible
combinacin con el microorganismo.
3. Acumulacin de materia orgnica sobre la superficie celular, formando
una capa que impide el contacto desinfectante-clula, necesitando
mayor cantidad de desinfectante para lograr la desinfeccin.

MODO DE ACCION DE LOS AGENTES MICROBIANOS

Los muchos procedimientos y sustancias usados como agentes
antimicrobianos manifiestan su actividad de diferentes modos. Conocer la
manera de actuar de un agente en particular, hace posible predecir las
condiciones bajo las cuales ser ms eficaz.
Dao de la pared celular: algunos agentes inhiben la formacin de los
componentes de la pared celular en un cultivo de bacterias en desarrollo,
dando por resultado la formacin de protoplastos. El protoplasto es susceptible
a la lisis a menos que se le provea de condiciones ambientales especiales. Por

20
ejemplo, el efecto de la penicilina se atribuye a la inhibicin de la sntesis de la
pared celular.
Alteraciones de la permeabilidad celular: la actividad antimicrobiana de los
compuestos fenlicos, detergentes sintticos, jabones y compuestos
cuaternarios de amonio se atribuyen a sus efectos sobre la permeabilidad
celular. Estas sustancias anulan la permeabilidad selectiva de la membrana,
permitiendo la salida de los constituyentes celulares. La membrana celular que
tiene varias capas es el asiento de diversas enzimas y su alteracin afecta
adversamente la funcin de estas.
Alteracin de las molculas de protena y de cidos nuclecos: toda
situacin o sustancia que altere su estado natural, daa irreparablemente a la
clula. Las altas temperaturas o fuertes concentraciones de algunos agentes
qumicos causan la coagulacin irreversible (desnaturalizacin) de estos
constituyentes protoplasmticos vitales.
Inhibicin de la accin enzimtica: cada una de las enzimas que hay en una
clula es un blanco potencial para un inhibidor. La disminucin de las
reacciones que suministran energa son particularmente dainas; muchos
agentes afectan las enzimas que son vas claves en procesos como el ciclo de
Krebs, entre otros. Los agentes como los halgenos o perxido de hidrgeno
daan tanto a los constituyentes celulares que ya no efectan sus funciones
metablicas normales. La inactivacin de ciertas enzimas es el resultado de su
combinacin con iones metlicos como Ag, Cu y Hg.
Antimetabolitos: en algunos casos de inhibicin, la lesin inicial es una
interferencia con una biosntesis especfica. Un ejemplo clsico es el bloqueo
de la sntesis del acido flico por sulfanilamida.

Paginas 424 433

ANTIMETABOLITOS

Los antimetabolitos o anlogos metablicos son sustancias estructuralmente

relacionadas, aunque ligeramente diferentes con el metabolito normal, esto
permite interferencia con una biosntesis especifica.Un ejemplo clsico es el
bloqueo de la sntesis del cido flico por sulfanilamida, uno de los
componentes de la molcula de cido flico es cido p-aminobenzoico, cuya
estructura qumica es muy similar a la de la sulfanilamida, la sulfanilamida
compite con el cido p-aminobenzoico por la superficie de la enzima,
impidiendo la sntesis del cido flico esencial.

INHIBICIN DE LA SNTESIS DE CIDOS NUCLEICOS

Hay dos categoras de sustancias que inhiben la sntesis del cido nucleico:

a) Compuestos que interfieren con la formacin de los bloques

estructurales de los cidos nucleicos, los nucletidos y pirimidina.

21
 b) Compuestos que interfieren con la polimerizacin de los nucletidos en
cido nucleico.

9.4 CONTROL DE LA POBLACIN MICROBIANA

AGENTES FSICOS

CALOR

El calor es uno de los mtodos ms comunes para destruir microorganismos.

Se puede aplicar hmedo o seco.

El calor hmedo destruye rpidamente los virus, bacterias y hongos. Una

exposicin a agua en ebullicin durante 10 min es suficiente para destruir
clulas vegetativas y esporas de eucariotas, pero la temperatura de ebullicin
(100C) no es suficiente para destruir endosporas bacterianas. Este mtodo
puede utilizarse para desinfectar agua potable y objetos que so se daen con el
agua pero no esteriliza.

Como el calor es tan eficaz para destruir microorganismos, es esencial

disponer de una medida precisa de su eficacia destructiva. En la actualidad se
emplea ms el trmino de tiempo de muerte trmica (TMT). Se define como el
tiempo ms corto necesario para destruir todos los organismos de una
suspensin microbiana, a una temperatura y en condiciones definidas.

Sin embargo, esta destruccin es logartmica y tericamente no es posible

destruir completamente los microorganismos de una muestra. Por ello, la figura
de tiempo de reduccin decimal (D) o valor D es ms precisa y tiene ms
aceptacin. El tiempo de reduccin decimal es el tiempo necesario para
destruir el 90% de los microorganismos o esporas en una muestra, a una
temperatura especfica. Otro mtodo para describir la eficacia del
calentamiento es el valor F, que es el tiempo, en minutos y a una temperatura
determinada (normalmente 121C), necesario para destruir una poblacin de
clulas o esporas.

La esterilizacin con calor hmedo debe realizarse a temperaturas superiores a

100C para destruir las endosporas bacterianas; esto requiere la utilizacin de
vapor saturado bajo presin. La esterilizacin con vapor se realiza en una
autoclave. Se piensa que el vapor hmedo destruye eficazmente al degradar
los cidos nucleicos y desnaturalizar las enzimas y otras protenas esenciales.
Tambin puede alterar las membranas celulares.

Muchas sustancias, como la leche, se tratan con calor controlado, a

temperaturas por debajo del punto de ebullicin, proceso denominado
pasteurizacin. Este mtodo no esteriliza una bebida, pero destruye cualquier
agente patgeno que contenga y disminuye en gran medida la putrefaccin, al
reducir el nivel de microorganismos alterantes no patgenos.

22
Muchos objetos se esterilizan mejor en ausencia de agua mediante
esterilizacin por calor seco. Los objetos que se van a esterilizar se colocan en
una estufa a una temperatura de 160 a 170C durante 2 a 3 horas. La
destruccin microbiana se produce aparentemente como consecuencia de la
oxidacin de los constituyentes celulares y la desnaturalizacin de las
protenas. El calor seco no corroe utensilios de cristal ni metlicos, como lo
hace el calor hmedo y puede emplearse para esterilizar polvo, aceite y otros
materiales diversos. A pasar de estas ventajas, la esterilizacin por calor seco
es lenta e inapropiada para materiales termosensibles, como muchos objetos
de plstico y goma.

BAJAS TEMPERATURAS

Una tcnica de control de microorganismos ms conveniente es inhibir su

multiplicacin mediante el empleo de la refrigeracin o congelacin. Este
enfoque es particularmente importante en microbiologa de los alimentos. Una
de las causas por la que, en general, los microorganismos no se multiplican en
las temperaturas de congelacin es la usencia de agua lquida libre. Incluso
estas temperaturas algunos microorganismos son destruidos por los cristales
de hielo que rompen sus membranas, aunque no destruir todos. La
congelacin es un buen procedimiento para la conservacin de
microorganismos por largos periodos de tiempo si se realiza apropiadamente.

La refrigeracin reduce enormemente el crecimiento microbiano pero no lo

detiene completamente. Afortunadamente, la mayora de los patgenos son
mesfilos y no s multiplican bien a temperaturas prximas a los 4C. Los
productos refrigerados pueden deteriorarse por el crecimiento de
microorganismos psicrfilos y psicrotrofos, particularmente si est presente el
agua. Por lo tanto la refrigeracin es un buen sistema para la conservacin de
alimentos u otros productos pero solo durante periodos cortos de tiempo.

FILTRACIN

Es un mtodo excelente para reducir, incluso esterilizar, la poblacin

microbiana en soluciones termosensibles. Ms que destruir directamente los
microorganismos los retira. Existen dos tipos de filtros:

Filtros de profundidad: consisten en materiales fibrosos o granulosos

que forman una capa gruesa rellena de canales retorcidos de un
dimetro pequeo. SE pueden fabricar con tierra de diatomeas,
porcelana no vidriada, asbestos o materiales similares.
Filtros de membrana: filtros circulares, son membranas porosas, con una
grosor de aproximadamente de 0.1 mm, de acetato de celulosa, nitrato
de celulosa, policarbonato, fluoruro de polivinilo u otros materiales
sintticos. Estos filtros eliminan los microorganismos crinndolos. Un
ejemplo de esterilizacin por filtracin es la esterilizacin del aire en

23
 mascarillas y los tapones de algodn en los tubos de cultivo que
permiten el paso del aire pero sin microorganismos.

Paginas 434 443

Radiacin: En general, la luz es perjudicial para los microorganismos que
carecen de clorofila o cualquier otro pigmento que les permita utilizar la energa
de las radiaciones en proceso de fotosntesis.

Tipos de radiacin y sus efectos sobre los microorganismos

Radiacin ultravioleta: es bastante letal, pero no atraviesa eficazmente

el cristal, las pelculas de suciedad, el agua ni otras sustancias.
Radiacin ionizante: agente esterilizante puede destruir endosporas
bacterianas y clulas vegetativas tanto procariotas como eucariotas.
Radiacin gamma: se utiliza para esterilizar en frio: antibiticos,
hormonas, suturas y suministros desechables de plstico, como jeringas
la radiacin gamma se ha empleado para esterilizar y pasteurizar carne
y otros alimentos.

Electricidad: el paso de una corriente alterna a travs de un lquido donde hay

microorganismos en suspensin produce cambios fsicos y qumicos que
pueden ser antispticos e incluso desinfectantes, la produccin de calor es el
principal cambio fsico ocasionado por la corriente y el principal causante de
sus efectos letales.

Agitacin y ultrasonido: el efecto de cada uno de estos agentes es

desintegrar las clulas de los micoorganismos.

Separacin de los microorganismos de un gas o liquido: los

microorganismos son ms pasados que el agua o el aire y acaban por
depositarse o sedimentarse si el medio esta en reposo.

Agentes qumicos:principales factores que deben considerarse cuando se

haya de utilizar un agente qumico para inhibir o matar a los microorganismos.

1. Clase de microorganismo.
2. Numero de microorganismos.
3. Edad e historial previo de los microorganismos.

24
 4. Tejido o sustancias en que se encuentran los
microorganismos.
5. Propiedad venenosa del agente qumico.

6. Tiempo que dispone el agente qumico para actuar y

concentracin que puede ser empleada.
7. Influencia de la temperatura sobre el agente qumico y el
tejido o sustancia en cuestin.

Tipos de desinfectantes: Existe un espectro aproximado de sensibilidad de

los microorganismos a los desinfectantes.

Los ms sensibles son las bacterias vegetativas, los hongos y los virus que
contienen lpidos. Las mycobacterias y los virus que no contienen lpidos son
menos sensibles y las esporas son por lo general resistentes.

En la eleccin de los desinfectantes, deben de tenerse en cuenta algunas

consideraciones a cerca de su toxicidad y de los efectos perjudiciales que
pueden tener sobre la piel, ojos y las vas respiratorias.

Los desinfectantes utilizados ms corrientemente en los trabajos de

laboratorio son:

Fenoles lquidos y los hipocloritos

Los aldehdos tienen una aplicacin limitada y el alcohol y las

mezclas de alcohol son menos populares.

Los compuestos yodoforos y de amonio son ms populares en

EE.UU que en Gran Bretaa.

Los compuestos mercuriales son los menos utilizados.

Paginas 444 454

JABONES Y OTROS DETERGENTES.

Los jabones actan principalmente produciendo la separacin mecnica de los

microrganismos de la piel, utensilios diversos, pavimentos, vestidos, etc.
Tambin tienen cierta accin antisptica debido a uno o ms de los siguientes
efectos:

25
 1. Reduccin de la tensin superficial.
2. Produccin de una reaccin alcalina
3. Liberacin de cidos grasos antispticos
4. Accin de alcohol u otros antispticos mezclados con el jabn.
Se conocen dos tipos de generales de agentes tensioativos o detergentes:

Detergentes aninicos: los detergentes en los cuales el hidrocarburo de

cadena larga tiene carga negativa, recibe el nombre de aninico. Los
detergentes sintticos tienen ventajas de solubilidad y costo sobre los jabones
naturales.

Detergentes Catinicos: Puede ser que el residuo soluble en grasa tenga una
carga positiva combinndolo con un tomo de nitrgeno cuaternario.

Compuesto de amonio cuaternario. Son detergentes catinicos eficaces

contra bacterias vegetativas y algunos hongos, aunque no contra la
mycobacterias o esporos. Los compuestos de amonio cuaternario no son
txicos y son inofensivos para la piel y los ojos.

GASES ESTERILIZANTES.

El xido de etileno (OE) es tanto microbicida como esporicida; destruye los

microorganismos al combinarse con las protenas celulares, Es particularmente
eficaz como agente esterilizante porque penetra rpidamente a travs de
materiales embalados, incluso envolturas de plstico. La concentracin de
xido de etileno, la humedad y la temperatura influyen sobre la velocidad de
esterilizacin. Es necesario airear extensamente los materiales esterilizados
para eliminar el OE residual porque es toxico.

Betapropiolatona (BPL)se emplea a veces como gas esterilizante. En forma

lquida se ha empleado para esterilizar vacunas y sueros. Tambin destruye
los microorganismos ms rpidamente que el xido de etileno, pero no penetra
tan bien los materiales y puede ser cancergeno.

AGENTE QUIMIOTERPICOS.

Para que un compuesto sea un agente quimioterpico til, debe ser

bacteriosttico o bactericida in vivo y al mismo tiempo permanecer inocuo para
el husped.

26
Precauciones con el uso de desinfectantes.

Deben utilizar guantes de un solo uso y lentes protectores, gafas o un visor

quienes estn manejando desinfectantes fuertes, por ejemplo, cuando preparan
diluciones para su empleo.

9.5 TRATAMIENTO Y ELIMINACIN DE LOS MATERIALES INFECTADOS.

Es una regla fundamental que ningn material infectado debe salir del
laboratorio.

Hemos credo siempre que la desinfeccin es una primera lnea de defensa y

para desechar el material de trabajo contaminado es una medida temporal, que
debe ir seguida, tan pronto como sea posible, por el esterilizado en la autoclave
o la incineracin.

Recipientes para material infectado desechado

debe haber en el laboratorio 4 tipos importantes de recipientes para productos

infectados desechados:

1) Cestos o bolsas de un solo uso para recibir cultivos y muestras.

2) Vasijas de un solo uso para recibir portaobjetos, pipetas pasteur y
pequeos artculos a desechar.
3) Pipeteros para pipetas graduadas(recuperables)
4) Bolsas de plstico para materiales combustibles tales como cajas para
muestras y envoltorios que puedan estar contaminados.7

Cestos y bolsas de un solo uso. Los cestos de un solo uso tendrn fondos
macizos para que no goteen; en caso contrario se diseminar material
contaminado.

Eleccin del recipiente. Las vasijas de desechos deben ser fuertes y

esterilizables por autoclave y los recipientes ms adecuados son los bocales de
1 litro de polipropileno o los tarros del mismo material con tapa a rosca.

Dilucin correcta. Un recipiente de desecho de 1 litro debe contener 750 ml de

desinfectante diluido, dejando espacio para que ascienda el nivel sin que se
derrame ni que gotee cuando se traslade.

Uso razonable. Los supervisores de laboratorio deben asegurarse de que no se

ponen en las vasijas de desecho cosas inapropiadas. Nunca deben aadirse
grandes volmenes de lquido a los desinfectantes diluidos.

27
Vaciado regular. Ningn material debe dejarse en el desinfectante de la vasija
de desecho durante ms de 24 horas, ya que en caso contrario se
desarrollarn las bacterias supervivientes. Por tanto todas las vasijas deben
vaciarse una vez al da, aunque es una cuestin particular si se vacan al final
del da o a la maana siguiente.

Pipeteros. Las vasijas para las pipetas recuperables deben estar hechas de
polipropileno o de goma.

Mtodos de tratamiento y eliminacin.

Existen 3 mtodos prcticos para el tratamiento de los materias de laboratorio

desechados y de los desechos contaminados:

1) La esterilizacin por autoclave

2) La incineracin
3) La desinfeccin qumica

Organizacin del tratamiento.

Los diseos de una cocina para tratar los materiales de laboratorio desechados
debe incluir autoclaves, un triturador, una unidad de eliminacin de basura
conectada por tubera de plomo alcantarillado pblico, fregaderos hondos,
mquinas para lavar material de vidrio, estufas de desecacin, estufas de
esterilizacin y grandes bancadas.

Estas habitaciones deben tener disposicin adecuada para evitar cualquier

posible mezcla de materiales contaminados y descontaminados.

Tras la esterilizacin en el autoclave, los contenedores se llevan a la zona de

separacin, en donde el contenido se separa en:

1) Desechos para incineracin, que se ponen en bolsas de color codificado.

2) Desechos para la basura, que se ponen as mismo en bolsas de color
codificado.
3) Desechos adecuados para la esclusa unidad de eliminacin de
desperdicios.
4) Material recuperable que pasa a la seccin o habitacin siguiente para
su lavado y esterilizacin.

Material de vidrio contaminado.

Despus de esterilizarlos, los medios pueden verterse o extraerse y los tubos,

frascos, etc. Se lavan a mano o mecnicamente con un detergente adecuado.

28
El tipo de lquido o polvos de lavado que se utilice depender de la dureza del
agua suministrada y del mtodo del lavado. Deben tenerse en cuenta las
recomendaciones de varios fabricantes de detergentes de laboratorio.

Vasijas de desecho.

Despus de dejarlas toda la noche para permitir que acte el desinfectante,

debe verterse cuidadosamente el contenido de las vasijas a travs de un
colador de polipropileno. Deben utilizarse guantes de goma para estas
operaciones.

Pipetas reutilizables.

Tras sumergirlas en desinfectantes y detergentes durante toda la noche, deben

retirarse las pipetas con las manos aguantadas.

Incineracin.

Los problemas con este mtodo de eliminacin son asegurase de que los
desechos llegan realmente al incinerador y que son totalmente esterilizados,
ya sea como material incombustibles fabricados de polipropileno, o que escape
por la chimenea.

29