Laboratorio de Qumica Orgnica I 2010

Docente: Lic. Esp. Ronald Hosse S.

PRACTICA N 14
COMPUESTOS NITROGENADOS
PROTEINAS - AMINOCIDOS

OBJETIVOS ESPECIFICOS

Al trmino de la prctica el alumno ser capaz de:

Reconocer, describir o expresar con formulas el comportamiento qumico de

compuestos nitrogenados y protenas.

Conocer e interpretar algunas reacciones de aminas y protenas

FUNDAMENTO TEORICO

Los compuestos nitrogenados son compuestos orgnicos de formula general R-NH2,

Ar NH2. Son generalmente solubles en agua, pues por ser polares pueden formar
uniones de hidrgeno.

Las aminas tienen la misma relacin con el amoniaco que los alcoholes y los teres
con el agua. Las aminas se clasifican en primarias, secundarias o terciarias; esto
depende del nmero de tomos de hidrgeno del amoniaco que hayan sido sustituidos
por grupos alquilo o arilo:

H R R

R N H R N H R N R

amina primaria amina secundaria amina terciaria

CH3

CH3CH2NH2 (CH3)2NH2 CH3CH2CH2 N CH2CH3

etilamina dietilamina etilmetilpropilamina

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Las aminas de masas moleculares bajas son gaseosas, muy solubles en el agua y
tienen olores similares al del amoniaco. Las primarias pueden formar puentes de
hidrgeno parecidos a los que forman los alcoholes. Sin embargo la unin N H... N
no es tan fuerte como la O-HO debido a que el nitrgeno es menos electronegativo
que el oxigeno. La diferencia en la fuerza del puente de hidrogeno es la responsable
de la que existe entre los puntos de ebullicin de la metilamina (-6C) y del alcohol
metlico (65C). El hecho de que las tres clases de aminas puedan crear puentes de
hidrgeno con el agua, explica su alta solubilidad en la misma.

El par de electrones no compartido de las aminas, les permite comportarse como

bases en reacciones similares a la del amoniaco cuando este reacciona con un protn
para dar el ion amonio positivo.

H2O + NH3 NH4 + OH

H2O + CH3NH2 CH3NH3 + OH

Las aminas aromticas son bases ms dbiles que el amoniaco. Esta basicidad
disminuida esta de acuerdo con los hechos previamente presentados en el estudio de
las reacciones de sustitucin aromtica. El grupo amino es donador de electrones
respecto al anillo aromtico, activndolo hacia la sustitucin aromtica.
Consecuentemente, el par de electrones del nitrgeno esta deslocalizado en el anillo
aromticos y se halla menos disponible para asociarse con un protn.

H H H

N H N H N H
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PROTEINAS

Las protenas son los materiales que desempean un mayor nmero de funciones en
las clulas de todos los seres vivos. Por un lado, forman parte de la estructura bsica
de los tejidos (msculos, tendones, piel, uas, etc.) y, por otro, desempean funciones
metablicas y reguladoras (asimilacin de nutrientes, transporte de oxgeno y de
grasas en la sangre, inactivacin de materiales txicos o peligrosos, etc.). Tambin son
los elementos que definen la identidad de cada ser vivo, ya que son la base de la
estructura del cdigo gentico (ADN) y de los sistemas de reconocimiento de
organismos extraos en el sistema inmunitario.

Las protenas son molculas de gran tamao formadas por largas cadenas lineales
de sus elementos constitutivos propios: los aminocidos.

Los amino cidos son agentes de control, mantenimiento, crecimiento y reproduccin

de la vida estn formados aproximadamente por 20 compuestos que contienen un
grupo amino y uno carboxilo, llamados amino cidos. Estos se combinan entre s para
crear las protenas, que son, tal vez las molculas orgnicas ms complejas de la
naturaleza.

Existen unos 20 aminocidos distintos, que pueden combinarse en cualquier orden y

repetirse de cualquier manera. Una protena media est formada por unos cien o
doscientos aminocidos alineados, lo que da lugar a un nmero de posibles
combinaciones diferentes realmente abrumador (en teora 20200). Y por si esto fuera
poco, segn la configuracin espacial tridimensional que adopte una determinada
secuencia de aminocidos, sus propiedades pueden ser totalmente diferentes.

Los aminocidos contenidos en las plantas y animales a manera de protena, tienen un

grupo amino unido al tomo de carbono adyacente al grupo carboxilo. La posicin es
conocida como carbono alfa () y tales amino cidos se llaman amino cidos y la
frmula general es:
NH2

R C COOH

H
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La R de esta frmula general puede ser hidrgeno, un grupo alquilo, un anillo

aromtico o parte de un anillo heterocclico.

Todos los amino cidos contenidos en las protenas son reconocidos por sus nombres
comunes.
Ejemplos:

O NH2 NH2
O

H2 N CCH2 C COOH H2N CCH2CH2 C COOH

H H
asparagina glutamina

NH2

HO OH

O O

acido 2 - amino- pentano dioico

acido glutamico
acido - amino glutarico

H2 N CH C OH

CH2

OH
2-Amino-3-(4-hydroxy-phenyl)-propionic acid; compound with methane

cido - amino - ( p- hidroxifenil) propionico

TIROSINA
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Tanto los glcidos como los lpidos tienen una estructura relativamente simple
comparada con la complejidad y diversidad de las protenas.

En la dieta de los seres humanos se puede distinguir entre protenas de origen vegetal
o de origen animal. Las protenas de origen animal estn presentes en las carnes,
pescados, aves, huevos y productos lcteos en general. Las de origen vegetal se
pueden encontrar abundantemente en los frutos secos, la soja, las legumbres, los
championes y los cereales completos (con germen). Las protenas de origen vegetal,
tomadas en conjunto, son menos complejas que las de origen animal.

Puesto que cada especie animal o vegetal est formada por su propio tipo de
protenas, incompatibles con los de otras especies, para poder asimilar las protenas
de la dieta previamente deben ser fraccionadas en sus diferentes aminocidos. Esta
descomposicin se realiza en el estmago e intestino, bajo la accin de los jugos
gstricos y los diferentes enzimas. Los aminocidos obtenidos pasan a la sangre, y se
distribuyen por los tejidos, donde se combinan de nuevo formando las diferentes
protenas especficas de nuestra especie.

El recambio proteico

Las protenas del cuerpo estn en un continuo proceso de renovacin. Por un lado, se
degradan hasta sus aminocidos constituyentes y por otro, se utilizan estos
aminocidos junto con los obtenidos de la dieta, para formar nuevas protenas en base
a las necesidades del momento. A este mecanismo se le llama recambio proteico. Es
imprescindible para el mantenimiento de la vida, siendo la principal causa del consumo
energtico en reposo.

El organismo humano puede transformar unos aminocidos en otros de una forma

limitada. No puede fabricar ocho de los aminocidos que forman parte de sus
protenas, y en consecuencia debe tomarlos a partir de la dieta. Estos aminocidos se
llaman aminocidos esenciales, y son:

ISOLEUCINA
LEUCINA
LISINA
METIONINA
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FENILALANINA
TREONINA
TRIPTOFANO
VALINA

Adems hay otros dos aminocidos, la Cisteina y la Tirosina, que solo pueden
obtenerse o bien directamente de la dieta o bien a partir de los esenciales Metionina y
Fenilalanina (en cambio, a la inversa no es posible). La Histidina es tambin
probablemente esencial en los nios, ya que la sintetizan pero en una cantidad
insuficiente.

El valor nutricional de un alimento proteico depende de su composicin en

aminocidos. Si contiene un porcentaje menor que el necesario de alguno de los
aminocidos esenciales, su valor nutricional ser proporcionalmente menor que el que
tendra si contuviera una proporcin suficiente de todos ellos. Es necesario prestar
especial atencin a los contenidos de lisina y de metionina, ya que existen protenas
(sobre todo vegetales) seriamente deficientes en ellos. El triptfano y la treonina
pueden ser escasos en protenas muy peculiares (como la gelatina), mientras que los
dems aminocidos esenciales se encuentran en proporciones suficientes en todas las
protenas.

PARTE EXPERIMENTAL

1.- PREPARACION DE LA SOLUCION DE ALBUMINA

MATERIALES REACTIVOS
5 tubos de ensayo 5 huevos
Paos de 25 cm x 25 cm
Embudos de filtracin
soporte

PROCEDIMIENTO
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Batir las claras de cuatro o cinco huevos con 1 litro de agua destilada hasta
que la protena quede dispersa.

Filtrar la dispersin a travs de un lienzo doblado varias veces para eliminar las
materias fibrosas.

2.- COAGULACION DE LA ALBUMINA

MATERIALES REACTIVOS
Solucin de albmina Etanol
5 tubos de ensayo Agua destilada
goteros Ac. Clorhdrico conc.
Bao Maria Ac. Ntrico conc.
Sol. Hidroxido de sodio conc.

PROCEDIMIENTO

Ponga 2 ml de la solucin de clara de huevo en cinco tubos de ensayo.

Caliente uno de los tubos gradualmente y observe la temperatura aproximada a
la que tiene lugar la coagulacin.

Aada 4 ml de etanol al otro de lo tubos.

Aada al tercero unas gotas de acido clorhdrico concentrado
Aada al cuarto, acido ntrico.
Aada al quinto solucin concentrada de hidroxido de sodio.
Observe en que casos ocurre la coagulacin.

3.- PRECIPITACION DE UNA PROTEINA MEDIANTE CATIONES

MATERIALES REACTIVOS
Solucin de Albumina Agua destilada
6 tubos de ensayo Ac. Clorhdrico al 10%
Sol. De hidroxido de sodio al 10%
Sol. De sulfato de cobre al 10%
Sol. Cloruro mercrico al 10%
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PROCEDIMIENTO

Ponga en seis tubos de ensayo las siguientes soluciones:

a) 5 ml de agua
b) 5 ml de solucin de clara de huevo
c) 5 ml de agua y 4 gotas de cido clorhdrico al 10 por 100,
d) 5 ml de solucin de clara de huevo y 4 gotas de cido clorhdrico al 10 por
100.
e) 5 ml de agua y 4 gotas de solucin de hidroxido sdico al 10 por 100.
f) 5 ml de solucin de clara de huevo y 4 gotas de solucin de hidroxido sdico
al 10 por 100.
A continuacin, aada a cada tubo 2 ml de solucin de sulfato de cobre al 10
por 100 y observe los resultados.
g) Aada un poco de solucin de cloruro mercrico a 2 ml de solucin de clara
de huevo y observe los resultados.

4.- PRECIPITACION DE PROTEINAS MEDIANTE ANIONES

MATERIALES REACTIVOS
Solucin de albmina Agua destilada
3 tubos de ensayo Ac. Clorhdrico al 10%
Sol. De hidroxido de sodio al 10%
Sol. Ferrocianuro potsico

PROCEDIMIENTO

Prepare soluciones idnticas a las b), d) y f) del apartado precedente.

Aada a cada una 2 gotas de solucin de fericianuro potsico
Observe en que tubo se forma el precipitado ms fcilmente.
Explique estos resultados.

5.- REACCION COLOREADA DEL BIURET PARA PROTEINAS

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MATERIALES REACTIVOS
Solucin de albmina Sol. de hidroxido de sodio al 10%
Tubos de ensayo Sol. de sulfato de cobre al 1%
Gradilla

PROCEDIMIENTO

Aada a un cierto volumen de solucin de clara de huevo un volumen igual de

solucin de hidroxido de sdico al 10 por 100.
Aada a continuacin una gota de sulfato cprico al 1 por 100.
Observe el color que aparece.

6.- REACCION COLOREADA DEL FORMALDEHIDO CON LAS PROTEINAS

MATERIALES REACTIVOS
Solucin de clara de huevo (albmina) Ac. Sulfrico concentrado.
Tubos de ensayo
goteros
gradilla

PROCEDIMIENTO

Aada una gota de solucin diluida de formaldehdo a una pequea cantidad

de solucin de clara de huevo contenida en un tubo de ensayo..
Vierta cido sulfrico concentrado por la pared del tubo de manera que forme
una capa en el fondo.
Qu puede observar?
Repita el ensayo con gelatina.
Qu conclusiones deduce?.

7.- ENSAYO DE MILLON PARA LAS PROTEINAS

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MATERIALES REACTIVOS
Solucin de albmina Reactivo de Millon
Tubos de ensayo Gelatina
Bao Maria
Gradilla

PROCEDIMIENTO:

Coloque en un tubo de ensayo 3 cc de solucin de Albmina.

Aada 1 cc del reactivo de Milln (mezcla de HgNO3 + Hg (NO3)2 + HNO3).
Llevar a Bao Maria y observar.
Repetir el ensayo con gelatina.
Qu conclusiones deduce

Nota: Cuando se ensaya de esta forma una protena produce una coloracin rojo-
anaranjada siempre y cuando que contenga tirosina , fenilalanina o triptofano; en caso
contrario, el ensayo es negativo.

8.- REACCION DE MOLISH

MATERIALES REACTIVOS
Solucin de albmina Sol. Alcohlica de Naftol
Tubos de ensayo Ac. Sulfrico con.
Gradilla
Goteros

PROCEDIMIENTO:

Coloque en un tubo de ensayo 2 cc de solucin de Albmina.

Agregue 5 gotas de solucin alcohlica de Naftol.
Dejar escurrir por las paredes del tubo sin agitar 0,5 cc de H2SO4 concentrado.
Observar en reposo.
Que conclusiones deduce?

9.- ENSAYO DEL ANILLO DE HELLER PARA PROTEINAS

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MATERIALES REACTIVOS
Solucin de albmina Ac. Ntrico concentrado
Tubos de ensayo
Pipetas o goteros
Gradilla

PROCEDIMIENTO

Ponga 4 5 ml de solucin de clara de huevo en un tubo de ensayo de tamao

medio (de unos 13 x 150 mm).
Incline el tubo y utilizando un cuentagotas de unos 2 ml de capacidad ponga
debajo de la solucin de la clara de huevo una capa de cido ntrico
concentrado (D= 1,42).
Observe la precipitacin de la proteica en la interfase entre ambas capas.
Qu conclusiones deduce?

Nota:

Este procedimiento sirve como ensayo muy til para determinar si la orina contiene
albmina.

10.- REACCION XANTOPROTEICA DE LAS PROTEINAS

MATERIALES REACTIVOS
Solucin de albmina Ac. Ntrico concentrado
Tubos de ensayo Sol. de hidroxido de sodio al 20%
Lana
Gradilla

PROCEDIMIENTO
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Coloque en un tubo de ensayo 3 cc de solucin de Albmina.

Aada lentamente 1 cc de HNO3 concentrado.
Luego gota a gota solucin de NaOH al 20 %, hasta que el liquido quede
alcalino.
Deje reposar la mezcla y observe.
Repita la experiencia con un trozo de lana o de seda

Aada un trozo pequeo de lana o de seda a 1cc de acido ntrico concentrado

contenido en un tubo de ensayo y calintelo.
Observe el color del tejido.
Alcalinice la mezcla aadiendo solucin de hidroxido sodio y observe el cambio
de color.

Nota:
La reaccin Xantoproteica (del griego xanthos , amarillo) es positiva para aquellas
protenas cuyas molculas contengan unidades de tirosina o de triptfano. Puede que
en algn otro laboratorio de Qumica correspondiente a sus estudios anteriores le haya
salpicado a la mano una gota de cido ntrico; en ese caso habr observado que la
piel da la reaccin xantoproteica.

CUESTIONARIO

1. Resuma brevemente cada uno de los ensayos que ha realizado con las
protenas.

2. Cul es el fundamento qumico del ensayo de Milln?.

3. Describa el ensayo del anillo de Heller.

4. Qu es una protena conjugada?.

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5. Se sabe que la casina contiene fsforo adems de los elementos que se

encuentran comnmente en las protenas. Indica este hecho que la casena
es una protena conjugada?

6. Cul es el nmero total de isomeros posibles, incluyendo los isomeros

pticos, para un tripeptido que contenga como unidades alanita, fenilalanina y
triptfano?

7. La hemoglobina contiene un 0,335 por 100 de hierro. Cul es el peso

molecular mnimo de la hemoglobina?. El peso molecular real de la
hemoglobina es cuatro veces mayor. Que nos indica esto acerca de la
molcula de hemoglobina?.

8. Por qu produce el acido ntrico una coloracin amarilla cuando se pone en

contacto con la piel?

9. Por qu se utiliza frecuentemente la clara de huevo como antdoto contra

varios venenos?.

10. Por qu es menos soluble una protena en su punto isolelectrico?.

11. La aparicin de albmina en la orina es un sntoma de nefritis .Indique un

mtodo para detectar protenas en la orina.
BIBLIOGRAFIA

a) Vogel A.I.
A Textbook of Practical Organic Chemistry
Third Edition
Longmans
London, 1962.

b) Shriner R.L., Fuson, R.C.. y Curtin D.Y.

Identificacin Sistemtica de Compuestos Orgnicos
Limusa
Mxico, 1977.
Laboratorio de Qumica Orgnica I 2010
Docente: Lic. Esp. Ronald Hosse S.

c) Brewster R.Q., Vander Werf C.A. y Mc Ewen W.E.

Curso Prctico de Qumica Orgnica
2a. Edicin
Madrid, 1979.

d) Pavia D.L., Lampman, G.M. and Kriz G.S.

Introduction to Organic Laboratory Techniques
W.B. Saunders Co.
Phyladelphia, 1976.