UNIVERSIDAD NORBERT WIENER

TEMA : TOMA DE MUESTRA Y ANLISIS

MICROBIOLGICO DEL AGUA CRITERIOS E
INTERPRETACIN DE RESULTADOS EN LA
INDUSTRIA FARMACUTICA.

ALUMNA : ROXANA MAGALY CHAVEZ PILLACA

DOCENTE : DOCENTE: MG. Q.F. MARIL JARAMILLO BRICEO
FACULTAD : FARMACIA Y BIOQUIMICA

2017
 MARCO TEORICO

El agua se usa ampliamente como materia prima, ingrediente y

disolvente en el procesamiento, formulacin y fabricacin de productos
farmacuticos, ingredientes farmacuticos activos (API), productos
intermedios, artculos farmacopeicos y reactivos analticos.
Para asegurar el cumplimiento de determinadas normas de calidad
microbiologica y qumica mnimas, el agua usada en la produccin de
frmacos o la que usa como fuente de alimentacin para la preparacin
de distintos tipos de aguas purificadas debe cumplir los requisitos de las
reglamentaciones bsicas relativas al agua potable (USP 38, CAP 1231).

CALIDAD DEL AGUA ( informacin laboratorios medifarma s.a )

Agua : es una sustancia esencial para la supervivencia de toda forma

viviente esta constituida por dos molculas de hidrogeno y una
molcula de oxigeno se encuentra presente en sus estado original
LIQUIDO pero tambin se puede presentar en su estado solido como
hielo o en sus estado gaseoso llamado vapor .

Agua purificada : debe cumplir con los requisitos de pureza qumica

,ionica y organica , siendo la fuente de alimentacin el AGUA POTABLE
. se emplea como excipiente , para la limpieza de determinados
equipos de preparaciones no parenterales .para la obtencin se utiliza
los siguientes mtodos :

Desionizacion
Destilacin
Intercambio inonico
Osmosis inversa
Filtracin
Otros procedimientos de purificacion adecuados

Agua para inyeccin : debe cumplir con los requisitos de agua purificada
y adems con el control de endotoxinas bacterianas ,siendo la fuente
de alimentacin el agua potable . se emplea como excipiente ,para
lalimpieza de determinados equipos de preparacin parenterales.
parmetro requerido : prueba de endotoxinas bacterianas
resultado : Agua esteril

Agua para hemodilisis : debe cumplir con los requisitos de

conductividad toc o sust. Oxidables ,limites microbianos y endotoxinas
bacterianas . se usa aplicaciones de hemodilisis , en diusolucion de
sol. Concentradas . debe usarse envases no reactivos .
Parmetro requerido: limite microbiano
Vapor puro o vapor limpio: se tiene como requisito asegurar que la
superficie de los productos no se contaminen con los residuos
contenidos en el vapor . se usa durante :

Preparacin
Esterilizacin
Limpieza

Agua purificada estril >agua purificada ,envasada y esterilizada (uso

=preparacin de diluyentes no parenterales )
Agua estril para inyeccin > agua estril ,envasada y esterilizada .
(uso = diluyente de solventes parenterales ).
Agua bacteriosttica para inyeccin > agua para inyeccin estril a la
cual se le agrego uno o mas conservantes antimicrobianos adecuados .
Agua para irrigacin > agua para inyeccin envasada y esterilizada en
envases mono dosis mayores a 1 L .

AGUA PROCESOS DE OBTENCION

Filtracin previa o filtracin inicial : el propsito es eliminar los

contaminantes solidos de hasta un tamao de 7 a 10 um
provenientes del suministro .
Filtros con carbn activado : son lechos que se absorben material
orgnico de debajo preso molecular y aditivos oxidantes ,ejemplo :

Compuestos que contengan cloro

Cloramina

Adems protege al acero inoxidable de ciertas reacciones

qumicas
La higienizacin es con agua caliente vapor y la medicion se
realiza con determinacion de TOC.

ADITIVOS : se utilizan para la siguiente.

controlara los microorganismos mediante uso de ozono y

compuestos clorados
Mejorar la eliminacin de solidos mediante agentes floculantes
Eliminar compuestos clorados
Evitar el deposito de sarro
Ajustar el pH
Ablandadores : pueden estar ubicados antes de o a continuacin de las
unidades de eliminacin de desinfectante. Usan resinas de
intercambio catinico en su forma sdica para eliminar los iones que
confieren la dureza del agua , ejemplo : Ca y Mg.

Deionizacin / electro deionizacin continua : son mtodos eficaces

para mejorar los atributos de calidad qumica del agua mediante la
eliminacin de cationes y aniones . las medidas de control varan pero
influyen .
Circuitos de recirculacin
Control antimicrobiano mediante luz uv
Seguimiento de la conductividad
Anlisis de resina
Filtracion micro porosa del aire mezclado seguimiento microbiano
Uso de las temperaturas elevadas

Osmosis inversa : la osmosis inversa consiste en separar un

componente de otro en una solucin , mediante las fuerzas ejercidas
sobre uan membrana semipermeable ,los cuales son grandes para las
molculas de H2O y pequeos para otro tipo de molculas , muchas
veces la selectividad se ve afectada por lo siguiente .
PH
Temperatura
Presin diferencial

Las corrientes de suministro estn conformadas por :

Agua de suministro
Agua de producto (permeado)
Agua residual

AGUA DE CALIDAD INYECTABLE -PROCESO DE OBTENCION

Ventajas de la osmosis inversa ante otros tratamientos de agua
convencionales
1.- tecnologa de primer nivel tratamiento limpio ya que casi hace
desaparecer el uso de qumicos en la operacin .
2.- reduce importantes costos de operacin y disposicin
3.- Produccin de sistemas automatizados ,mediciones mas controladas
y confiables espacios reducidos , flujos y calidades constantes
4.- lo mas importante es adaptable y apropiada para todo tipo de
aplicaciones : Agua residual ,para proceso ,pura, ultra pura , potable,
sanitaria, biolgica ,y otros usos .

COMPOSICIN DEL AGUA

El ciclo natural del agua tiene diferentes compuestos que se consideran
impurezas . Estas impurezas presentes en el agua se pueden clasificar
en tres grandes grupos:

Inicas Disueltas (inorgnicos)

No inicas Insolubles (orgnicos, microorganismos, pirgenos,
partculas)
Gaseosas

Principales impurezas en el agua

Inicas Disueltas No inicas Gaseosas

Cationes Aniones Insolubles
Ca2+ HCO3- Turbidez CO2
Mg2+ CO32- Color H2S
Na+ OH- Materia Orgnica NH3
K+ SO42- SiO2 coloidal CH4
NH4+ Cl- Microorganismos O2
Fe2+ NO3- Bacterias Cl2
Mn2+ PO43-
SiO4
Materia
Orgnica
Color

COMPETENCIAS

a. Reconoce la importancia y adquiere destreza en la

realizacin de controles microbiolgicos del agua.
b. Aplica y experimenta la metodologa existente para el
anlisis de agua en la industria farmacutica.
c. Distingue los requerimientos de los tipos de agua en la
industria farmacutica.
 MATERIALES Y EQUIPOS

Materiales

4 Frascos estriles x 500 mL con 0,5 mL de Tiosulfato de Sodio al 3%

4 Frascos x 500 mL con 300 mL de agua destilada estril
4 Mecheros Bunsen
4 Mecheros de alcohol
8 Pipetas bacteriolgicas de vidrio estriles x 10 mL con algodn
4 Equipos de filtracin estriles (embudo y porta membrana) dos para
agua potable y otro dos para agua purificada.
4 Bombas de vaco
4 Kitasatos estriles x 1 L
30 Membranas filtrantes de 0,45 m de dimetro con cuadrculas,
estriles
8 Pinzas estriles
10 Placas petri con agar recuento de placa (plate count) o agar de
recuento de placa
de mtodos estndar o TGYA.
4 Frascos con 100 mL de Agar Recuento de Placa (Plate Count) o Agar
de Recuento de Placa de Mtodos Estndar o TGYA licuado.
12 Pipetas estriles x 1 mL x 2 mL
24 Placas Petri estriles
4 Placas con Agar Mac Conckey.
4 Placas con Agar Cetrimide.

Medios de Cultivo

Agar de Recuento de Placa (plate count) o Agar de Recuento de Placa

de Mtodos
Estndar (TGYA): 4,125 g para 150 mL para 6 placas con medio
solidificado.
 Agar de Recuento de Placa (plate count) o Agar de Recuento de Placa
de Mtodos
Estndar (TGYA) 2,35 g por cada 100 mL de medio licuado.
Agar Mac Conckey, 8 g para 160 mL de medio.
Agar Cetrimide, 7,2 g para 160 mL de medio.

MICROBIOLOGIA ECM-006
DE LOS version
MEDICAMENTOS
-02
MUESTREO DE
AGUAS
punto de muestreo N08
tipo de muestreo diario
fecha de recoleccion 12/08/2012
cantidad 500ml
responsable R. chavez

PROCEDIMIENTO

Desinfectar el grifo o punto de salida del agua a recolectar

1. Toma de muestra: Desinfectar el grifo o punto de salida del agua,

flameando con mechero de alcohol Dejar correr 1 o 2 minutos el agua y
proceder a la toma de muestra de 300 mL a 500 mL.
2. Si se trata de aguas de cisterna o pozos, se sumergir el frasco sin tapa,
permitiendo el ingreso del agua.
3. Utilizar un frasco estril de boca ancha con tapa rosca para la toma de
muestra; si se trata de agua potable el frasco deber contener 1 mL de
tiosulfato de sodio por cada litro de agua muestreada (inactivando el
cloro presente en el agua potable).
4. La muestra debe tomarse con sumo cuidado evitando rozaduras y lo
mas estril como sea posible, en el caso de agua potable o de cisterna.
5. Procesar la muestra dentro de las dos primeras horas despus de
haber sido recolectada y si no fuera posible se deber mantener la
muestra en refrigeracin (2C a 8C durante mximo 12 horas).
6. Cerrar hermticamente el frasco y etiquetar.

Rotulo :
 MICROBIOLOGIA ECM-006
DE LOS version
MEDICAMENTOS
-02
MUESTREO DE
AGUAS
punto de muestreo N04
tipo de muestreo diario
fecha de recoleccion 12/08/2012
cantidad 500ml
responsable R. chavez
IDENTIFICACIN DE LAS MUESTRAS

Muest Punto de muestreo Descripci

ra n
Muestra del equipo de agua (tanque electrico)
M1 Agua delbebedero punto N8

M2 Agua potable Muestra del cao de los servicios higienicos

punto N4

Luego proceder a realizar elmetodo de filtracion por membrana

Fig. 3.1. Sistema de filtracin: Filtracin por Membrana

Mtodo de Vertido en Placa
ESQUEMA EXPERIMENTAL

Tomamos 1 ml de muestra (agua potable) y lo llevamos a filtrar

por el mtodo de filtracin por membrana . Concentracin
10 -1

Procedemois a adicionar una

cantidad de 100 ml a cada
mtodo de filtracin por

Muestra de
agua potable

Tomamos 1 ml de muestra (agua de bebedero ) y lo llevamos a

filtrar por el mtodo de filtracin por membrana . Concentracin
10 -1

Procedemois a adicionar una

cantidad de 100 ml a cada
mtodo de filtracin por

Muestra de
agua
bebedero
RECUENTO Concentracin
10 -2
Rotular el material a utilizar.

Volumen de muestra:
Vertido en Placa: 1,0 mL
Este mtodo se aplica para agua potable.
Filtracin por Membrana: 100 mL y 10 mL
Este mtodo se aplica para agua destilada y agua potable; en el caso de agua
destilada se filtran volmenes de 100 mL para cada medio a emplear (APC, MC,
AC) y en el caso de agua potable se filtran 10 mL tambin para cada medio
(APC, MC, AC).
Medio de cultivo: Agar Recuento de Placa de Mtodo Estndar o TGYA o Agar
Plate Count
Condiciones de Incubacin: 30C a 35C.
Tiempo de incubacin: 48
 Registrar e interpretar
los resultados
obtenidos.
Resultados
Cuestionario
- Defina:
Niveles de alerta
Niveles de accin.
Sustente el seguimiento microbiolgico que aplica a los diferentes
tipos de agua.
 BIBLIOGRAFA

Fuentes de informacin

- Farmacopea de los Estados Unidos de Amrica 32 Rev.

Formulario Nacional 27 Ed. (USP
32- NF 27).

- World Health Organization. WHO Technical Report Series, No.

929, Thirty-ninth report.

2005. Annex 3. WHO Good Manufacturing Practices: water for

pharmaceutical use.

4 Cultivos puros de Aspergillus niger en Agar Sabouraud (agar

inclinado), de por lo