Actividades citotxicas y antioxidantes de Macfadyena

unguis-cati L. Partes areas y aislamiento bioguido de

los componentes activos antitumorales.
Introduccin
Macfadyena unguis-cati (L.) A. Gentry, una planta perenne de hoja perenne,
tambin conocida como enredadera ua de gato, que pertenece a la familia
Bignoniaceae. Muchos representantes leosos de Bignoniaceae son conocidos
por su uso en la industria maderera o como ornamentales (Parker, 2008;
Gachet y Schhly, 2009). Las plantas de familia de Bignoniaceae son
ampliamente utilizadas en sistemas medicinales tradicionales en muchos
pases, donde los mdicos folclricos y tribales usan varias especies para el
tratamiento de diversas enfermedades (Lima et al., 2005, Rahmatullah et al,
2010). M. unguis-cati se us en la medicina popular para tratar mordeduras de
serpiente (Houghton y Osibogun, 1993; Mors et al., 2000), disentera e
hinchazn del estmago (Hilgert, 2001), as como enfermedad venrea y
reumatismo (Sanz-Biset et al. Al., 2009)
M. unguis-cati presenta un potencial considerable para el desarrollo de nuevos
frmacos frente a una amplia gama de enfermedades humanas. Por lo tanto, es
necesario realizar ms estudios cientficos y ensayos clnicos.
En los ltimos aos se han publicado estudios sistemticos sobre los
componentes y los efectos medicinales de M. unguis-cati. Se ha descubierto
que M. unguis-cati presenta actividad anticancergena (Abarc et al., 2008,
Duarte et al., 2000), actividad anti-inflamatoria (Duarte et al., 2000, Aboutabl
et al., 2008), actividad antioxidante (Hashem et al., 2007), la actividad anti-
insectos (Castillo et al., 2009), la actividad antiprotozoaria (Fournet, et al.,
1994), la actividad antipirtica y la actividad analgsica (Aboutabl et al.,
2007) . Aunque M. unguis-cati se ha utilizado como hierba medicinal para
numerosas enfermedades, sin embargo, hasta la dcada de 1980, los
investigadores comenzaron a explorar la relacin de los constituyentes
qumicos y la eficacia farmacolgica en M. unguis-cati. Los trabajos de
investigacin fueron realizados principalmente por las instituciones en Egipto e
Italia.
Hasta ahora la investigacin fitoqumica en esta planta dio como resultado el
descubrimiento de flavonoides (Aboutabl et al., 2008, Duarte et al., 2000),
saponinas (Ferrari et al., 1981; Duarte et al., 2000) y triterpenoid (Aboutabl et
al., 2007), adems, incluyendo cidos orgnicos (Duarte et al., 2000), cumarina
(Hashem et al., 2007), quinonas y esterol (Joshi et al., 1985). La parte area de
M. unguis-cati fue examinada por GC / MS y se identificaron 52 constituyentes
voltiles (Aboutabl et al., 2007.) En nuestra investigacin anterior, se aisl un
nuevo glicsido de flavonoides, a saber, la cirsimarina B del extracto de
nbutanol De M. unguis-cati junto con dos compuestos conocidos cirsimarin y
acteoside (Liu et al., 2015) En la actualidad, los compuestos aislados de M.
unguis-cati se muestran en la Fig. 1 (Aboutabl et al., 2008; , Et al., 2010,
Duarte et al., 2000, Ferrari et al., 1981, Hashem et al., 2007, Joshi et al., 1985).
Nuestros estudios preliminares mostraron que la deteccin biolgica de la
fraccin de cloroformo de M. unguis-cati exhibi actividad antitumoral (Zheng
et al., 2011). M. unguis-cati posee un efecto teraputico potencial sobre el
cncer, mientras que en la literatura se dispone de poca investigacin sobre la
actividad anticancergena de compuestos bioactivos de M. unguis-cati. El
fraccionamiento bioguido y el aislamiento de los componentes antitumor
activos de M. unguis-cati no han sido reportados. El objetivo del presente
estudio se realiz para verificar los componentes antitumorales de M.
unguiscati. As, se llev a cabo una investigacin fitoqumica detallada sobre M.
unguis-cati, que condujo al aislamiento de cinco compuestos mediante
fraccionamiento biolgico y cromatografa en columna. Varias fracciones y
compuestos aislados de M. unguis-cati. Se ensayaron para determinar la
actividad antitumoral en clulas de hepatoma humano, as como para su
actividad antioxidante.
Materiales y mtodos
Material vegetal y reactivo
La parte area fresca de Unguis-cati fue tomada del islote de Gulangyu en la
ciudad de Xiamen en la provincia china de Fujian. Se prepar un espcimen de
cupn (No.YZY100018) y se envi a taxonomistas para su identificacin. El
espcimen vale se deposita en el herbario del Departamento de Qumica de
Productos Naturales, Xiamen Overseas Chinese Subtropical Plant Introduccin
Jardn en China. Las partes de la planta se secaron en un horno de aire forzado
a 45 C durante 48 h. A continuacin, las partes de la planta secadas se
trituraron utilizando un molino para obtener un polvo fino. Los reactivos
analticos y los patrones utilizados fueron: 1,1-difenil-2-picrilhidracilo (DPPH),
bromuro de 3- (4,5-dimetiltiazol-2-il) -2,5-difeniltetrazolio (MTT), 2,6- 2-piridil)
-s-triazina (TPTZ) y cisplatino (CDDP, pureza & gt; 99,9%) se adquirieron de
Sigma-Aldrich (Saint Louis, MO, EE.UU.). Se obtuvieron el medio de 1600 de
Roswell Park Memorial Institute (RPMI) y el Eagle Media modificado por
Dulbecco (DMEM) de Gibco (Grand Island, NY, EE.UU.). Se obtuvieron tripsina,
suero bovino fetal (FBS) y solucin de penicilina / estreptomicina (200 ) en
Mediatech, Inc. (Herndon, VA, EE.UU.). Los disolventes utilizados fueron:
petrleo
Se obtuvieron ter (PE), cloroformo (CHCl _ {3}), acetato de etilo (EtoAc) n -
butanol (nBuoH), metanol (ME) y grado analtico absoluto de etanol (E) de
Sinopharm Chemical Regent Co. Ltd..

Preparacin de diversas fracciones de M. unguis-cati

Se extrajo tres veces la parte area no florizante en polvo secada al aire de M.
unguis-cati (6 kg) con etanol al 95% (24 l 24 h) a 60 C. Los extractos se
filtraron a travs de papel de filtro y se evaporaron a vaco hasta sequedad. El
residuo seco (780 g) se suspendi adicionalmente en agua y se extrajo con
ter de petrleo (PE), cloroformo (CHCl3), acetato de etilo (EtoAc) y n-butanol
(n-BuoH) a temperatura ambiente sucesivamente.
Cada extraccin se recogi por separado y se concentr mediante un
evaporador rotatorio para eliminar el disolvente para obtener la fraccin PE (Fr
I, 63,83 g), la fraccin CHCl3 (Fr II, 72,80 g), la fraccin EtoAc (Fr III, 36,18 g)
BuoH (Fr IV, 143.70 g) y un resto de la fraccin de H2O (Fr V, 216,22 g). Luego
se reservaron en la oscuridad a 4 C.

El fraccionamiento bioguido y el aislamiento de los compuestos activos

antitumorales de la fraccin CHCl3
La fraccin de CHCl _ {3} (72,80 g) se someti a cromatografa en columna RP
- 18 (50 x 10 cm), se eluy con agua, acetona al 25%, acetona al 50%, acetona
al 75% y acetona pura para proporcionar cinco fracciones: A (16,09 g), p. B
(12,17 g), p. C (4,7 g), P.f. D (7,3 g) y P. E (9,32 g). Fr. A (16,09 g) se separ por
cromatografa en columna de fase inversa (RP) 18 (180 g), se eluy con
acetona al 10% para obtener seis fracciones: A1 (3,27 g), A2 (3,6 g), A3 (2,3 g)
(0,76 g), A _ {5} (2,4 g) y A _ {6} (0,39 g). A1 (3,27 g) se someti a
cromatografa en columna de Sephadex LH-20 (100 cm x 3 cm) eluida con
metanol para proporcionar A1.2 (1,18 g). A1.2 se someti a cromatografa en
columna de VRP-18 (25 cm x 5 cm) usando mezclas de H2O-MeOH como
eluyente con un gradiente continuo para obtener A1.2.2 (70 mg) y A1.2.5
(425,8 mg). A1.2.2 se someti a cromatografa en columna de Sephadex LH-20
(150 cm x 2 cm) eluyendo con metanol para obtener A1.2.2.4 (26,8 mg), que
se purific mediante columna de gel de slice (200-300 mallas) (10 cm X 1 cm),
eluida con cloroformo y Metanol (6: 1) para obtener el compuesto ML - 1 (10
mg). A1.2.5 se someti a cromatografa en columna de Sephadex LH-20 (150
cm x 2 cm), se eluy con metanol para obtener el compuesto ML-2 (10 mg).
Fr. B (12,17 g) se someti a cromatografa en columna Sephadex LH-20 (100
cm x 3 cm) eluyendo con metanol para obtener B3 (0,7 g). B3 se separ
mediante cromatografa en columna RP-18 (35 g), eluyendo con metanol al
70% para obtener el compuesto precipitado ML-3 (5 mg) y el compuesto
cristalino amarillo ML-4 (4,1 mg).
Fr. D (7,3 g) a cromatografa en columna de RP-18 (180 g), eluyendo con
metanol al 90% para obtener D2 (0,32 g) y D3 (0,67 g). D2 se someti a
cromatografa en columna de Sephadex LH-20 (150 cm x 2 cm), se eluy con
metanol para obtener D2.2 (50 mg). D2.2 se someti a cromatografa en
columna de Sephadex LH-20 (150 cm x 2 cm), se eluy con una mezcla de
acetona / metanol (3: 1) para obtener D2.2.1 (20 mg), que se purific mediante
gel de slice (200- 300 malla) (10 cm x 1 cm), se eluy con una mezcla de ter
de petrleo / acetato de etilo (20: 1) para obtener el compuesto ML-6 (3 mg).
D3 se trat con carbn activado para obtener el compuesto ML - 5 (10 mg). El
procedimiento desde los extractos en bruto hasta el aislamiento de
compuestos puros se muestra en la Fig. 2

Estructura elucidacin de los compuestos aislados

La elucidacin de la estructura de los compuestos aislados se llev a cabo
utilizando tcnicas espectroscpicas 1H y RMN 13C, junto con los datos
publicados previamente para los compuestos. Los espectros de resonancia
magntica nuclear (RMN) se tomaron en el espectrmetro Bruker Avance II 400
MHz usando metanol como disolvente y tetrametilsilano (TMS) como referencia
interna.

Ensayo MTT
Las clulas se cultivaron en RPMI 1640 o DMEM suplementado con FBS al 10%,
penicilina (100 U mL-1) y estreptomicina (100 mg ml-1) en un incubador
humidificado aireado con 5% de CO2 y 95% de aire a 37C. Cuando las clulas
alcanzaron una confluencia del 70-80%, se tripsinizaron, se contaron y se
sembraron 5.000 clulas en cada placa de microtitulacin de 96 pocillos para
incubacin durante la noche y despus se trataron con la muestra en medio
celular completo durante 48 h. El grupo de control se trat con dimetilsulfxido
(DMSO) (0,1%, p / v) durante la misma duracin
La citotoxicidad de extractos o compuestos aislados se evalu mediante
ensayo MTT de acuerdo con el mtodo utilizado por Ming et al. (2013).
Brevemente, las clulas se sembraron durante 24 h y se retir el medio. Las
clulas se trataron con muestra 180 l disuelta en medio a concentracin
diferente o con DMSO (0,1%, p / v) como control durante 48 h. Despus de 48
h, se aadieron 20 \ mu L de MTT (5 mg mL-1) a cada pocillo, y las placas se
incubaron durante 4 h adicionales a 37C. Los sobrenadantes se reemplazaron
con 150 l de DMSO para disolver el formazn producido a partir del MTT por
clulas de metabolismo. La absorbancia a 492 nm fue proporcional al conteo
de clulas del metabolismo vivo y la supervivencia celular se expres como la
absorbancia de las clulas tratadas con MTT en relacin con la de los controles
tratados con DMSO. Cisplatino se utiliz como un control positivo.

Ensayo de barrido de radicales DPPH

Las actividades de barrido radical de las muestras en DPPH se estimaron de
acuerdo con el estudio anterior (Chen et al., 2012). En primer lugar se pusieron
en un tubo de ensayo, 1 mL de tampn de acetato a 100 mmol L -1 (pH 5,5),
1.80 mL de etanol y 0.1 mL de solucin etanolica de DPPH a 3 mmol L -1. A
continuacin, se aadieron 0,1 ml de la concentracin de la solucin de
muestra (disuelta en DMSO) al tubo y se incubaron a 25C durante 20 minutos.
Como control, se aadieron 0,1 ml de DMSO al tubo. La absorbancia de la
mezcla de reaccin se midi a 517 nm. Con el fin de lograr una buena
precisin, la prueba de la actividad de eliminacin de DPPH para todas las
soluciones de muestra y los controles se repiti tres veces. Se us la vitamina
C como compuesto de referencia. A partir de la disminucin de la absorbancia,
la actividad de barrido se calcul como.

Donde A0 = A517nm de DPPH sin muestra, A = A517nm de muestra y DPPH, y

Ab = A517nm de muestra sin DPPH.

Poder antioxidante de reduccin frrica (FRAP)

El poder reductor frrico de los extractos de plantas se determin usando una
versin modificada del ensayo FRAP descrito por Benzie y Strain (1996) y Wang
et al. (2016). El reactivo de FRAP activo se prepar diariamente mezclando 10
volmenes de tampn de acetato de 300 mmol L - 1 (pH 3,6), con 1 vol de 10
mmol L - 1 de TPTZ (2,4,6 - tri (2 - piridil) - -triazina) en 40 mmol L -1 de cido
clorhdrico y con 1 vol de cloruro frrico de 20 mmol L-1. Se prepar una curva
estndar utilizando diversas concentraciones de FeSO 4*7H2O (25 - 1500 \ mol
L - 1). Todas las soluciones se utilizaron el da de la preparacin. 20 l de
soluciones de muestra y 20 L de agua desionizada se mezclaron con 200 l de
reactivo FRAP recin preparado en una microplaca de 96 pocillos. La mezcla de
reaccin se incub durante 15 minutos a 37 C. A continuacin, se midi la
absorbancia de las muestras a 593 nm. Tambin se tom una muestra en
blanco usando tampn de acetato. La diferencia entre la absorbancia de la
muestra y la absorbancia en blanco se calcul y se utiliz para calcular el valor
de FRAP. Los datos de FRAP para los extractos se expresan como equivalentes
de FeSO4 (mol L - 1). Todas las mediciones se realizaron por triplicado.
Analisis estadstico
Todos los experimentos se realizaron por triplicado. Los datos se expresaron
como la media desviacin estndar (DE) (n = 3). Los anlisis estadsticos se
realizaron utilizando la prueba t de Student. Los resultados se consideraron
estadsticamente significativos a un P <0,05.

RESULTADOS Y DISCUSIN
Evaluacin de la actividad citotxica de las cinco facciones
Se extrajeron cinco fracciones, la fraccin PE (Fr I), el extracto soluble CHCl3 (Fr
II), la fraccin EtoAc (Fr III), la fraccin n-BuoH (Fr IV) y la fraccin H2O (Fr V)
Unguis-cati Las cantidades finales de Fr I-V fueron 63,83 g, 72,80 g, 36,18 g,
143,70 g y 216,22 g, respectivamente. Los rendimientos de extraccin de
diversos disolventes polares fueron muy diferentes.
Para evaluar la citotoxicidad de las fracciones (Fr I - V) de M. unguis-cati, se
evaluaron los efectos de cinco fracciones (0, 6,25, 12,5, 25, 50, 100 g mL-1)
sobre la proliferacin celular de dos cnceres hepticos humanos Se
examinaron las lneas celulares SMMC7721, Bel7402 y hepatocitos normales de
hgado de hgado. Los efectos inhibidores del crecimiento de cinco fracciones
frente a la clula HCC se muestran en la Tabla 1. Los resultados indicaron que
la fraccin de CHCl3 inhibe significativamente el crecimiento de la lnea celular
HCC humana de una manera dependiente de la concentracin y los valores de
IC50 en SMMC7721 y Bel7402 durante 48 h son 62,14 1,51 y 68,75 pm 2,3
g mL - 1 respectivamente. Por otra parte, la fraccin de CHCl3 tambin
mostr una actividad inhibitoria limitada para el hgado chang normal de
clulas con un valor de IC50 de 78.10 5.13 g mL-1, lo que sugiere que
necesita purificarse para eliminar impurezas. Adems, la fraccin de ter de
petrleo mostr una dbil influencia sobre la actividad inhibidora de la
proliferacin celular, mientras que otras no. De las cinco fracciones, la fraccin
de CHCl3 mostr la actividad inhibitoria ms alta contra clulas de carcinoma
de hgado in vitro. Los resultados ilustrados en la fraccin CHCl3 es la fraccin
antitumoral activa de M. unguis-cati.
Debido a que fue la investigacin orientada a la bioactividad; Nuestro principal
objetivo para parecerse a que la fraccin cruda fue bioactivo antes de ir al
fraccionamiento del extracto crudo. De las cinco fracciones, la fraccin de
CHCl3 mostr la mayor actividad de inhibicin de clulas de carcinoma de
hgado in vitro. Por lo que llama nuestra atencin a hacer el fraccionamiento
sucesivo de la fraccin de CHCl3 de M. unguis-cati exige en esta consideracin

Evaluacin de la actividad citotxica de las cinco subfracciones (Fr. A-Fr. E) a

partir de la fraccin CHCl3
Basndose en la evaluacin anterior de la actividad citotxica, la fraccin de
CHCl3 presente en los extractos de etanol es responsable de la actividad
anticancergena de M. unguis-cati. Como paso siguiente, la fraccin de CHCl3
de 72,80 g se fraccion adicionalmente por medio de cromatografa en
columna de RP - 18 para dar Fr. A (16,09 g), Fr B (12,17 g), Fr C (4,7 g), Fr D
(7,3 g) y Fr E (9,32 g). A continuacin, las fracciones se ensayaron nuevamente
utilizando el ensayo de citotoxicidad en clulas HCC SMMC7721, HepG2 y
hgado hepatocitario normal. Como se muestra en la Fig. 3, Fr A, Fr. B, y Fr. C
mostraron una citotoxicidad moderada hacia diferentes lneas celulares de
cncer. Fr. D se consider como la fraccin ms activa en comparacin con las
otras fracciones.

Identificacin de compuestos aislados de la fraccin CHCl3

Basndose en la evaluacin anterior de la actividad citotxica, la fraccin de
CHCl3 presente en los extractos de etanol es responsable de la actividad
anticancergena de M. unguis-cati. Con la fraccin bioguida y el aislamiento, los
seis compuestos se aislaron de la fraccin de CHCl3 de M. unguis-cati. Las
estructuras qumicas de los compuestos se han establecido mediante
espectroscopia de resonancia magntica nuclear. Cinco compuestos se
identificaron mediante la comparacin de sus datos espectroscpicos y
propiedades fsico-qumicas con los informados en la literatura. La estructura
del compuesto ML-6 no se aclar debido a la escasez de rendimiento para
enriquecer la seal de RMN. Los compuestos ML-1, ML-2 y ML-5 se aislaron en
primer lugar de M. unguis-cati. Ver compuestos en la imagen
Sobre la base de sus estructuras qumicas, los cinco compuestos aislados de M.
unguis-cati pueden clasificarse en varias subclases fitoqumicas incluyendo
glucsido (decaffeoylacteoside, lyoniresinol-3-O--D-glucopyranside),
flavonoide (cirsimarin, cirsimaritin) y Triterpenoide (cido urslico).

Actividades antitumorales de los compuestos

Se seleccionaron diferentes concentraciones de cinco compuestos aislados (0,
3.125, 6.25, 12.5, 25, 50, 100 g mL-1) por su actividad citotxica contra tres
lneas celulares HCC SMMC7721, HepG2, Bel7402 y hepatocitos normales, MTT.
En la Fig. 5, la curva de inhibicin de la proliferacin celular se presenta como
el promedio de 3 replicas. Los compuestos ML-1, ML-2 y ML-3 muestran una
actividad de inhibicin dbil con menos del 50% de inhibicin en el intervalo de
concentracin de 0-100 g mL-1. En comparacin, la cirsimaritina (ML-4)
mostr una actividad inhibidora del crecimiento in vitro moderada sobre la
lnea celular Bel7402 y el hgado chang con el valor IC50 de 234,55 23,98
y 226,88 35 M respectivamente, sin efecto en las lneas celulares
SMMC7721 y HepG2.
Entre los cinco compuestos aislados de la fraccin de CHCl3, el cido urslico
(ML-5) mostr una inhibicin significativa del crecimiento en la proliferacin
celular de SMMC7721, HepG2 y Bel7402 de una manera dependiente del
tiempo y la dosis con el valor IC50 de 65,06 5,91, 149,47 31,97 y 73,16
0,31 \ mu M, respectivamente. El cido urslico tambin muestra un pequeo
efecto sobre la proliferacin celular en hgado de hepatocitos normales con el
valor IC50 de 90.65 21.83 M. Los valores de CI50 de cinco compuestos
aislados de extractos de M. unguis-cati se mostraron en la Tabla 3. Los
resultados anteriores indican que el cido urslico es uno de los componentes
principales de la fraccin CHCl3 responsable de su citotoxicidad. Se ha
documentado previamente la citotoxicidad del cido urslico contra diversas
clulas cancerosas (Piyaviriyakul et al., 2014, Xiang et al., 2015, Yang et al.,
2016).
El fraccionamiento con guiado por bioensayo ha sido el mtodo ms avanzado
para identificar productos naturales bioactivos durante muchos aos. Este
enfoque implica fraccionamiento de escala preparativa repetitiva y evaluacin
de la actividad biolgica hasta el aislamiento de constituyentes puros con la
actividad biolgica seleccionada. En este estudio, la fraccin de CHCl3 inhibe
significativamente el crecimiento de lneas celulares HCC con fraccin
bioguada y aislamiento, lo que conduce al aislamiento de cido urslico con
actividad citotxica. As, el mtodo de la fraccin bioguida y el aislamiento se
asegurarn de que los componentes activos pueden ser ms fciles de separar,
los cuales han sido ampliamente aplicados en el campo del descubrimiento de
productos naturales (Sbai et al., 2016).

Actividad antioxidante de extractos de M. unguis-cati

Los radicales libres son omnipresentes en nuestro cuerpo y son generados por
procesos fisiolgicos normales. Los radicales libres pueden modular el
crecimiento celular y la promocin de tumores mediante la activacin de vas
de transduccin de seales, lo que da lugar a la induccin transcripcional de
proto-oncogenes. El efecto antioxidante es uno de la direccin de la prevencin
del cncer.
La actividad antioxidante se midi usando tanto DPPH como FRAP. Se midi el
potencial de eliminacin de radicales libres de DPPH de las fracciones (Fr I - V)
a diferentes concentraciones (0, 0,05, 0,1, 0,2, 0,4, 0,8, 1,6, 3,2 mg mL - 1).
Todas las fracciones eliminaron significativamente el radical DPPH de una
manera dependiente de la concentracin. La actividad de barrido aument con
concentraciones crecientes de 0,05 a 3,2 mg mL-1 como se muestra en la Fig.
6. Las actividades de eliminacin de radicales (DPPH) de las fracciones se
calcularon como la concentracin inhibidora del 50% (CI50) como se muestra
en la Tabla 2. Comparadas con la vitamina C antioxidante estndar, las
fracciones EtoAc (Fr III) y n-BuOH (Fr IV) Las fracciones posean una obvia
actividad de barrido radical. El valor de IC5} de EtoAc Y la fraccin n-BuOH fue
0,19 0,01 y 0,12 0,01 mg mL-1 respectivamente, mientras que otros
mostraron una inhibicin limitada frente a la actividad de liberacin de DPPH.

Conclusiones
Este estudio relata la investigacin fitoqumica en la parte area fresca no
florizante de M. unguis-cati, as como su actividad anticancergena y actividad
antioxidante. La fraccin de CHCl3 de M. unguis-cati present la mayor
actividad citotxica. Las fracciones de acetato de etilo y nbutanol mostraron
una fuerte actividad antioxidante sobre el ensayo de cavitacin de radical
DPPH y el poder reductor frrico. Con la fraccin bioguda y el aislamiento, se
obtuvieron seis compuestos e identificados a partir de la fraccin de CHCl3
activa antitumoral. Los compuestos ML-1, ML-2 y ML-5 se aislaron en primer
lugar de la planta. Entre los compuestos, el cido urslico es el nico
compuesto con potente actividad citotxica. As, el cido urslico es la
composicin antitumoral activa ms importante en M. unguis-cati. El presente
estudio contribuye al conocimiento actual de la composicin de M. unguis-cati.
Adems, el cido urslico es una especie de compuestos triterpnicos que
existen en la planta natural, ampliamente utilizado en medicina y materias
primas cosmticas. Por lo tanto, M. unguis-cati puede ser utilizado como fuente
de plantas para el desarrollo de frmacos cido urslico, una fuerte actividad
antioxidante de M. unguis-cati puede ser til para la industria farmacutica y
cosmtica.