TCNICAS DE TINCIN HISTOLGICAS DE

TEJIDO
Universidad de Guadalajara
Mayra Nayeli Murillo Arias

La histologa es el estudio de los tejidos. Los tejidos corresponden a un plano intermedio de organizacin
del cuerpo y se prestan particularmente bien para el estudio con el microscopio. Los tejidos son
asociaciones de clulas con diferenciacin semejante y sus derivados, las sustancias intercelulares (W.
Bargmann, 1957), que pueden clasificarse segn determinados criterios. [8]
Los pasos para realizar preparados histolgicos son los siguientes:
1. Fijacin
2. Inclusin
3. Realizacin de los cortes
4. Coloracin.
Coloracin
Un colorante se define como una sustancia capaz de dar color a clulas, tejidos, fibras, etctera. De
acuerdo con su origen, se pueden dividir en colorantes naturales, los cuales son extrados de plantas o
animales, y colorantes artificiales, que son aquellos de minerales procesados y manipulados en el
laboratorio. Los colorantes tienen las siguientes funciones: [5]
Permiten hacer visibles a los objetos microscpicos y transparentes.
Revelan su forma y tamao.
Muestran la presencia de estructuras internas y externas
Producen reacciones qumicas especficas.

TINCIONES

Azul de Coomasie Azul de metileno

Tincin supravital metacromtica.
Se utiliza cuando la cantidad de protenas es
alta. Se utiliza para teir clulas animales, para
hacer ms visibles sus ncleos. Es tambin
A travs de un medio cido se genera entre las
utilizado en citologa y como colorante vital en el
molculas del tinte azul de Coomassie y las
recuento de reticulocitos. Tie de azul oscuro
protenas gracias a los grupos de amino- una
restos de cidos nucleicos, y los proteoglicanos
atraccin generando un complejo. La unin
cidos en varios tonos de violeta. [4]
tinte-protena es reversible. [3]

Ilustracin 1. Tincin con Azul de Coomasie Ilustracin 2. Tincin con Azul de metileno
 Electrofisiologa Molecular I
Hematoxilina
Tincin histolgica general junto con eosina.
Tie especficamente ncleos, cidos nucleicos
(azul) y estructuras basoflicas: Retculo
endoplasmtico rugoso o ergastoplasma (azul) y
mitocondrias. [2,4]

Ilustracin 5. Hematoxilina-Eosina

Tincin HOPS
Los ncleos aparecen en azul (hematoxilina). La
elastina aparece en negro (orccena), la fibra
Ilustracin 3. Hematoxilina
muscular en rojo (filoxina) y tejido conectivo
(colgeno) en amarillo (safranina). [4]

Eosina
Tincin histolgica general junto con
hematoxilina.
Tie protenas y estructuras con afinidad por los
cidos en diferentes tonos de rojo: fibras
elsticas (rosa), fibras reticulares (rosa) [2,4]

Ilustracin 4. Eosina

Ilustracin 6. Tincin HOPS

Tincin de Hematoxilina-Eosina Tincin HPS

Tincin general histolgica. Los ncleos
aparecen en azul (hematoxilina), los cidos
nucleicos asociados a protena (ribosomas) en
violeta, fibra muscular en rojo y tejido conectivo
en rosado. [4]
Tincin Policromtica.
Los ncleos aparecen en azul (hematoxilina),
fibra muscular en rojo (filoxina) y tejido
conectivo en amarillo (safranina). [4]

1
 Electrofisiologa Molecular I
Tincin de Romanowsky
Tincin Pancromtica de Romanowsky. Se
utiliza en extendidos sanguneos [4]

Ilustracin 7. Tincin HPS

Tincin de Papanicolaou
Tincin Policromtica.
Permite ver la cromatina con mucha claridad. Se Ilustracin 9. Tincin de Romanowsky
utiliza para diferenciar clulas en muestras de
secreciones biolgicas (esputo, LCR, orina, etc.)
y en raspados y biopsias. Permite distinguir con
Tincin de Wright
relativa facilidad clulas con transformaciones
Tincin Policromtica.
neoplsicas, levaduras y bacterias.
Se usa con frecuencia para clulas de la sangre,
Los ncleos aparecen de color entre negro y azul.
tie especficamente grnulos de neutrfilos
Clulas con alto contenido de queratina en
(prpura/rosa), grnulos de eosinfilos (rojo
amarillo. Glucgeno en amarillo. Clulas
brillante/anaranjado), grnulos de basfilos
superficiales de naranja a rosado. Clulas
(prpura intenso/violeta), grnulos de plaquetas
intermedias y parabasales entre turquesa y
(rojo/prpura). [2,4,5]
azul. Clulas metaplsicas muestran
coloraciones mezcladas (entre verde, rosa). [4]

Ilustracin 8. Tincin de Papanicolaou

Ilustracin 10. Tincin de Wright

2
 Electrofisiologa Molecular I
Tincin tricrmica de Masson
Tincin tricrmica.
Se usa con frecuencia para tejido conjuntivo.
Tie especficamente cartlago, el colgeno y el
hueso (azul/verde) fibras musculares y keratina
(rojo), y los ncleos aparecen en marrn o negro.
[2,4]

Ilustracin 13. PAS (cido Perydico de Schiff)

Tincin de Movat
Tie de negro ncleos y fibras elsticas; el
Ilustracin 11. Tricrmica de Masson colgeno y fibras reticulares aparecen en tono
amarillo. Sustancia basal y mucina se tie de
azul, fibrina de rojo brillante, y msculo de rojo.
[4]
Tincin tricrmica de Gomori
Tincin tricrmica argntica.
Se usa con frecuencia para tejidos conjuntivo y
muscular, tie especficamente fibras
musculares (rojo). [2,4]

Ilustracin 14. Tincin de Movat

Tincin de Nissl
Permite diferenciar las reas cerebrales donde
aparecen distribuidos los somas de las clulas
Ilustracin 12. Tricrmica de Gomori
nerviosas o sus prolongaciones axnicas
mielinizadas.
Se utilizan colorantes acidfilos como el violeta
PAS (cido Perydico de Schiff) de cresilo, el azul de toluidina o el rojo neutro. El
Se usa con frecuencia para membrana basal, colorante utilizado en el mtodo de Nissl se une
deteccin de carbohidratos. Tie al ARN contenido en los ribosomas, por tanto,
especficamente glucgeno y otros carbohidratos tie el ncleo, el nuclolo y los ribosomas del
(magenta). [2] retculo endoplasmtico rugoso. De las clulas
gliales nicamente se tien los ncleos. Esta
3

tincin proporciona una panormica general y
exhaustiva de la distribucin, tamao y
morfologa de las neuronas en el tejido nervioso,
pero no da informacin alguna sobre las
ramificaciones de dichas neuronas. [1]
Ilustracin 15. Tincin de Nissl
Tincin de Luxol Fast Blue
Tincin para lpidos. Tie la mielina de color
azul celeste. Esta tcnica es comnmente usada
para detectar la desmielinizacin en el sistema
nervioso central, pero no puede discernir
mielinizacin en el sistema nervioso perifrico.
[4,6]
Ilustracin 16. Luxol Fast Blue
Tincin de Cristal violeta
La tincin de Gram (uso de colorante Cristal
violeta) se utiliza tanto para poder referirse a la
morfologa celular bacteriana, como para poder
realizar una primera aproximacin a la
diferenciacin bacteriana, considerndose
Electrofisiologa Molecular I
bacterias grampositivas a las que se visualizan
de color morado, y bacterias gramnegativas a las
que se visualizan de color rosa, rojo o grosella.
El cristal violeta (colorante catinico) penetra en
todas las clulas bacterianas (tanto Gram
positivas como Gram negativas) a travs de la
pared bacteriana. [9]
Ilustracin 17. Tincin de Gram (Cristal Violeta)
Tincin de Golgi
Tincin Argntica.
Permite diferenciar claramente, atendiendo a
diversos parmetros, los variados tipos celulares
que presenta el tejido nervioso, as como
diferentes tipos de clulas gliales.
Se puede diferenciar morfolgicamente cada una
de las clulas nerviosas y se pueden agrupar
segn sus caractersticas externas. Esta tcnica
tie selectivamente un porcentaje muy bajo de
clulas. Adems su tincin no se localiza en una
zona determinada de la clula, sino que se
realiza en toda su extensin. [1,4]
Ilustracin 18. Tincin de Golgi
4
 Electrofisiologa Molecular I
Tincin de Carmn marrn; se utiliza para revelar detalles
Tincin para carbohidratos. Tie el glicgeno de extremadamente finos. [4,7]
intenso color rojo [4]

Ilustracin 21. Tincin Argntica

Ilustracin 19. Carmn

Tincin Rojo Congo

Tincin Sudn Tincin para protenas. Se utiliza con
Sudn lipoflica. Diversos tipos de tincin con hematoxilina/eosina en patologa cuando se
Sudn: [4] busca amiloide. Tie el amiloide de un intenso
color rojo. [4]
Tincin con Sudan Black B: Tie gotas de
lpidos neutros de color negro azulado.
Tincin con Sudn II.
Tincin con Sudan III: Tie lpidos
neutros de color negro.
Tincin con Sudn IV.

Ilustracin 22. Rojo Congo

Ilustracin 20. Sudn Black B
Tincin argntica
Tincin para protenas. En funcin del fijado,
tie protenas y cidos en tonos de negro y
Fucsina cida
Puede ser utilizada para colorear colgeno,
msculo liso o mitocondrias. Forma parte de la
coloracin tricrmica de Mallory donde se utiliza
para colorear ncleo y citoplasma. En la tincin
de Van Gieson (picrofucsina), la fucsina es la
responsable de dar el color rojo a las fibras de
colgeno. Tambin es una coloracin tradicional
para colorear mitocondrias. [4]

5
 Electrofisiologa Molecular I
Lugol
Tincin para carbohidratos. Tie el almidn de
azul, el glucgeno de amarillo y el resto en tonos
de ocre. [4]

Ilustracin 23. Tincin con Fucsina base

Safranina
La safranina (o safranina O) es un colorante
nuclear. Colorea los ncleos celulares de rojo, y
se utiliza principalmente como contracoloracin.
Tambin puede ser utilizada para darle una
coloracin amarilla al colgeno. [4]
Ilustracin 25. Lugol en glucgeno

Tincin de Feulgen
Tincin para cidos nucleicos. Tie el ADN y los
cromosomas de color rojo violeta. [4]

Ilustracin 24. Safranina Ilustracin 26. Tincin de Feulgen

FLUORESCENTES

DAPI

Tincin para cidos nucleicos.

El DAPI es un marcador fluorescente que se une
fuertemente a regiones enriquecidas en Adenina
y Timina en secuencias de ADN. Tie ADN de
color azul celeste fluorescente. [4]

Ilustracin 27. DAPI

6
 Electrofisiologa Molecular I
Hoechst 33342
Hoechst es un compuesto derivado bis-
benzimidazol que se une al surco menor del
AND. Se utiliza con frecuencia en microscopa de
fluorescencia para colorear el ADN. Hoechst
tiene un color amarillo cuando se encuentra
disuelto con agua, y emite luz azul cuando recibe
luz ultravioleta. Hay dos tipos principales de
Hoechst: Hoechst 33258 y Hoechst 33342.
El Hoechst 33342 contiene un grupo etilo en
sustitucin del grupo hidroxilo en terminal (un
grupo etileter), lo que lo hace ms hidrofbico, y
con menor penetracin en la membrana
plasmtica. [4]
Ilustracin 29. Ioduro de propidio

Naranja de acridina
Tincin para cidos nucleicos. Tie ADN y
cromosomas de color verde fluorescente, ARN y
ribosomas en color rojo fluorescente. [4]

Ilustracin 28. Hoechst 33342

Ioduro de propidio
Yoduro de propidio (PI) es ampliamente
utilizado en conjuncin con la anexina V para Ilustracin 30. Naranja de Acridina
determinar si las clulas son viables, apoptosis o
necrosis a travs de diferencias en la integridad Rodamina
de la membrana de plasma y permeabilidad. Es una tincin fluorescente especfica para
protenas utilizada comnmente en microscopa
PI se utiliza con ms frecuencia que otras fluorescente [4]
manchas nuclear porque es econmico, estable y
un buen indicador de la viabilidad celular,
basado en su capacidad para excluir de colorante
en las clulas vivas. La capacidad de PI para
entrar en una clula depende de la
permeabilidad de la membrana; PI no mancha
las clulas apoptticas en vivo o temprano
debido a la presencia de una membrana
plasmtica intacta. [10]
Ilustracin 31. Rodamina

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REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
[1] Fundamentos de psicobiologa libro de prcticas I. (Consultado en:
books.google.com.mx/books?id=yigxY-itcboC&pg=PA54&dq=tincion+de+luxol+fast+blue&hl=es-
419&sa=X&redir_esc=y#v=onepage&q=tincion%20de%20luxol%20fast%20blue&f=false)
[2] Histologa, Texto y Atlas color con Biologa Celular y Molecular. Ross, Pawlina; 6 Edicin; Mdica
Panamericana.
[3] Fundamento de la tincin con Azul de Coomassie y con Plata (Consultado en:
academia.edu/12280062/Fundamento_de_la_tinci%C3%B3n_con_Azul_de_Coomassie_y_con_plata)
[4] Tincin (Consultado en: es.wikipedia.org/wiki/Tinci%C3%B3n)
[5] Las tinciones bsicas en el laboratorio de microbiologa. Lpez Jcome, Hernndez Durn, Coln
Catro, Ortega Pea, Cern Gonzlez, Franco Cendejas. Investigacin en Discapacidad, 2014,
Medigraphic. (Consultado en: medigraphic.com/pdfs/invdis/ir-2014/ir141b.pdf)
[6] Luxol Fast Blue Strain. (Consultado en: en.wikipedia.org/wiki/Luxol_fast_blue_stain)
[7] Tincin Argntica (Consultado en: es.wikipedia.org/wiki/Tinci%C3%B3n_arg%C3%A9ntica)
[8] Terminologa, microscopia y tcnica histolgica. (Consultado en: media.axon.es/pdf/69022.pdf)
[9] Tincin de Gram (Cosultado en: es.wikipedia.org/wiki/Tinci%C3%B3n_de_Gram)
[10] Modificado anexina V/Yoduro de propidio ensayo Apoptosis una evaluacin precisa de la muerte
celular. (Consultado en: jove.com/video/2597/modificado-anexina-v-yoduro-de-propidio-ensayo-
apoptosis-una?language=Spanish)