PRODUCCIN DE BIOETANOL A PARTIR DE HIDRXIDO DE SODIO /

PERXIDO DE HIDRGENO EL JACINTO DE AGUA POR

SACARIFICACIN SIMULTNEA Y FERMENTACIN CON UN NUEVO
TERMOTOLERANTE AISLADO KLUYVEROMYCES CEPA MARXIANU

RESUMEN
En este estudio, se investig la produccin de bioetanol a partir de Jacinto de
agua pre tratado con NaOH / H2O2. El pre tratamiento de Jacinto de agua con
H2O2 al 1,5% (v / v) y NaOH al 3% (p / v) a 25C aument la produccin De
azcares reductores (223,53 mg / g secos) y disminuy la cristalinidad de la
celulosa (12,18%), Con 48,67 mg / g seco y 22,80% en la muestra no tratada,
respectivamente. El nuevo aislamiento Kluyveromyces marxianu K213 mostr
una mayor produccin de etanol a partir de glucosa (0,43 g / g de glucosa) al
45 C que la levadura Anglica Saccharomyces cerevisiae control. La
concentracin mxima de etanol (7,34 g / l) obtenido con K. marxianu K213 por
sacarificacin y fermentacin simultneas (SSF) de El Jacinto de agua
pretratado a 42C fue 1,78 veces mayor que el producido por la levadura de
ngel S. cerevisiae al 30 C. El presente trabajo demuestra que la produccin de
bioetanol obtenida a travs de SSF de El Jacinto de agua pretratado con NaOH
/ H2O2 con K. marxianu K213 es una estrategia prometedora para utilizar agua
Biomasa de Jacinto.

INTRODUCCION

El jacinto de agua (Eichhornia crassipes), como uno de los Especies acuticas

invasoras, comnmente cubre las superficies de los ros Y lagos y ha causado
una serie de problemas ambientales debidos A su rpido crecimiento y alta
reproducibilidad en agua clara Y aguas residuales. Estas caractersticas
tambin lo hacen til para el agua Tratamiento y la produccin de bioetanol
basada en su excelente capacidad Utilizar nitrgeno en aguas residuales y
abundante biomasa lignocelulsica Que es adecuado para la produccin de
azcares fermentables. En la actualidad, el cultivo a gran escala y la
recoleccin de jacinto de agua Utilizando islas flotantes de planta artificial
representa una estrategia prometedora.
Para el tratamiento de agua en la cuenca del lago Dianchi de Yunnan Provincia.
Se espera que esta medida gubernamental produzca una Cantidad de biomasa
de jacinto de agua lignocelulsica. Por lo tanto, una Ambientalmente amigable
para la utilizacin econmica De la biomasa lignocelulsica. Hasta la fecha,
muchos estudios han explorado formas de utilizar lignocelulsicos Biomasa y
han demostrado que el jacinto de agua puede usarse para Producen bioetanol
(Guragain et al., 2011, Bayrakci y Kocar, 2014), biogs (Cheng et al., 2010,
2015a, Gao et al., 2013), L-lactato (Akao et al., 2012) y cido levulnico
(Girisuta et al., 2008) a travs de la fermentacin. Entre estas aplicaciones, la
produccin de bioetanol De la biomasa del jacinto de agua ha atrado la mayor
1 Estos autores contribuyeron igualmente a este trabajo. Bioresource
Technology 193 (2015) 103-109 Listas de contenidos disponibles en
ScienceDirect Tecnologa Bioambiental Pgina principal del diario:
www.elsevier.com/locate/biortech Cantidad de atencin (Ma et al., 2010,
Bayrakci y Kocar, 2014). La estructura cristalina y la composicin qumica de
los materiales lignocelulsicos Materiales son dos de los principales factores
que afectan el rendimiento Bioetanol y mtodos de pretratamiento pueden
mejorarlo de manera efectiva.
Pretratamiento alcalino-oxidativo a travs de la adicin de NaOH-H2O2 o CaO2
se considera una posible estrategia de pretratamiento de Biomasa de jacinto de
agua hmeda para la produccin de azcar fermenta- Condiciones suaves
(Mishima et al., 2008, Cheng et al., 2015b). Un comparativo Estudio de varios
pretratamientos qumicos (incluyendo NaOH, HCl, H2SO4, cido peractico,
H2O2, NaOH / H _ {2} O _ {2} y oxidativo alcalino) Utilizado para el jacinto de
agua demostr que el Alcalino-oxidativo (el H2O2 agregado consecutivamente)
es La estrategia ms eficaz y econmica de pretratamiento a (Temperatura
ambiente durante 24 h) (Mishima et al., 2008). Sin embargo, el rendimiento de
azcares reductores logrado con NaOH / H2O2 Pretratamiento (H2O2 aadido
simultneamente) era slo la mitad de Obtenido con el pretratamiento oxidativo
alcalino e incluso menor Que el alcanzado con el pretratamiento de NaOH y el
pretratamiento con H2O2 Separadamente a concentraciones iguales. De
hecho, estudios previos Confirm que el co-tratamiento con NaOH / H2O2
solucin es un verde Y un pretratamiento eficaz para muchos tipos de biomasa
lignocelulsica, Incluyendo paja de trigo (Barakat et al., 2014), palma vaca
(Misson et al., 2009), restos de furfural (Ma et al., 2014) y bagazo de caa de
azcar (Cheng et al., 2008).

La biomasa lignocelulsica pretratada puede ser enzimticamente Hidrolizado y

fermentado en diferentes configuraciones de proceso, Dos de los cuales son
hidrlisis y fermentacin separadas (SHF) y Sacarificacin y fermentacin
simultneas (SSF) (Mukhopadhyay y Chatterjee, 2010). La estrategia SSF es
una Para la produccin de etanol lignocelulsico que ofrece Ventajas de
minimizar la inhibicin por celobiosa y glucosa Acumulacin y permitiendo
mayores cargas de sustrato (Kim et al., 2008). Sin embargo, la diferencia entre
la temperatura ptima De las enzimas celulolticas (alrededor de 50C) y la
fermentacin (Generalmente <37C para la mayora de las cepas de levadura)
es el mayor obstculo Aplicacin exitosa del proceso SSF (Bayrakci y Kocar,
2014). El uso de microorganismos termotolerantes tiene el potencial Para
superar este obstculo ofreciendo ventajas tales como la Menor tiempo
requerido de SSF, reduccin de costos de enfriamiento y mejor sacarificacin Y
los rendimientos de etanol (Abdel-Banat et al., 2010; Moreno Et al., 2013). Sin
embargo, hasta ahora, los microorganismos Fermentacin de bioetanol con
jacinto de agua lignocelulsico Cepas de Saccharomyces cerevisiae con una
fermentacin ptima Temperatura inferior a 37 C (Abraham y Kurup, 1996,
Mishima Et al., 2008; Mukhopadhyay y Chatterjee, 2010). UN La cepa S.
cerevisiae tolerante a la temperatura de Angel Yeast Co. Ltd, fue Probado por
Ma et al. (2010) para la fermentacin de bioetanol con agua Jacinto, pero
utilizando SHF, en lugar de SSF. T.
Los principales objetivos de este estudio fueron (i) pretratar el agua Jacinto con
NaOH / H _ {2} O _ {2} en condiciones suaves y (ii) seleccionar Las cepas de
levadura termotolerantes capaces de fermentar la Jacinto de agua pretratado
para producir bioetanol a 42 C a travs del SSF. proceso.

2. METODOS

2.1 MUESTRAS
El jacinto de agua fue cosechado del ro Laoyu en Kunming. Despus del
lavado manual con agua del grifo, hojas y tallos De jacinto de agua se
recogieron y se secaron a 60 C. Entonces, la biomasa seca Se moli
utilizando un micro-amoladora y se tamiz a travs de un disco Con malla 18-
40 para el experimento de pretratamiento.
Despus de ser secado hasta un peso constante a 80C, cada 20 g Se
suspendi una alcuota de biomasa vegetal en polvo (18-40 mallas) En un
matraz triangular de 1000 ml que contena 500 ml de pretratamiento Y se hace
reaccionar bajo las condiciones de pretratamiento correspondientes. Para el
pretratamiento con NaOH / H _ {2} O _ {2}, la solucin de pretratamiento
Contena 1,5% (v / v) de H _ {2} O _ {2} y 3% (p / v) de NaOH y la biomasa Se
incub a 25C, 30C, o 42C durante 12 h, 24 h, o 36 h a Una velocidad de
agitacin de 150 rpm. Las muestras pretratadas fueron Se recogi y se lav
con agua del grifo utilizando un tamiz de malla 40 hasta El valor de pH del agua
drenada alcanz neutro. Entonces el Las muestras se secaron a 60 C y se
utilizaron en los anlisis posteriores.

2.3. HIDRLISIS ENZIMTICA

Un tubo de ensayo de vidrio de 18 mm de 150 mm que contiene 5 ml de citrato-
fosfato (50 mM, pH 4,8), 0,1 g de la muestra pretratada y 300 lL de la solucin
de celulasa para obtener una concentracin final de 17,43 FP / ml, se incub a
50C durante 3 das a una velocidad de agitacin De 150 rpm. Se recogieron
alcuotas del lquido de hidrlisis enzimtica En diferentes puntos de tiempo y
se centrifugaron (12.000 rpm, 5 minutos). El sobrenadante (solucin
enzimtica) se utiliz entonces para Determinacin de azcares reductores
como se describe a continuacin. El valor De sacarificacin y conversin de
celulosa se calcul de acuerdo Al mtodo de Abdel-Fattah y Abdel-Naby (2012).
2.4. AISLAMIENTO E IDENTIFICACIN DE CEPAS DE LEVADURA
TERMOTOLERANTES PARA PRODUCCIN DE ETANOL
Dos muestras de la Bodega Zhanyi y Xishuangbanna Orchard de la provincia
de Yunnan se utilizaron para el aislamiento de termo tolerante Produccin de
etanol levaduras. El medio nutriente de aislamiento Fue extracto de levadura-
peptona-dextrosa (YPD) medio suplementado Con penicilina (50 mg / l) y
estreptomicina (25 mg / l). Despus Homogeneizacin mecnica en 10 ml del
nutriente de aislamiento Medio durante 1 h, se aadi cada muestra a 100 ml
de medio nutriente En un matraz Erlenmeyer de 250 ml y se cultiv durante 48
h a 42C En agitador rotatorio a 160 rpm. El caldo de enriquecimiento de cada
muestra Fue rayado en placas de agar que contenan YPD suplementado con
Antibiticos y cultivos de levaduras puras de la Obtenido colonias individuales.
Estos cultivos fueron nuevamente probados Para el crecimiento y la produccin
de etanol a 42C, 45C o 48C en un YPD suplementado con cloruro de trifenil
tetrazolio (TTC) (Ge et al., 2012). Las colonias de color rojo oscuro Se
seleccionaron temperaturas ms elevadas y se confirmaron adicionalmente en
YPD con 100 g / l de glucosa. Los sistemas industriales Cepa de Angel Yeast
Co. Ltd, denominada levadura de ngel de S. cerevisiae, Se utiliz como cepa
de control.

La cepa de levadura se identific en base a la secuencia 5.8S y ITS anlisis.

En resumen, el ADN genmico total se extrajo de clulas cultivadas Durante 2
das, y la regin 5,8S y ITS se amplific usando Los pares de cebadores: 50
-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-30 (adelante) y 50
TCCTCCGCTTATTGATATGC-30 (inversa). La amplificacin fue Realizado de la
siguiente manera: 1 ciclo de 94C durante 1 min; 30 s a 94C, 30 s a 55C y 30
s a 72C durante 26 ciclos; Seguido de una Extensin de 10 min a 72C.
Anlisis y construccin filogentica De un rbol sin raz se realizaron utilizando
el software MEGA versin 4.0.

2.5. FERMENTACIN CON ETANOL

La levadura de ngel de S. cerevisiae y Kluyveromyces marxianu K213 fueron
Cultivadas en medio YPD agar a 30 C y 42 C, respectivamente. Las colonias
individuales se seleccionaron y se suspendieron en 5 ml de lquido YPD Medio
durante 2 das a una velocidad de agitacin de 150 rpm en su 104 J. Yan et al. /
Bioresource Technology 193 (2015) 103-109 Temperatura ptima. Los cultivos
en suspensin de levaduras fueron Luego se transfiri a 100 ml de medio
lquido YPD y se cultiv. Cultivos con una absorbancia de aproximadamente
1,0 a una densidad ptica (DO) de 600 se utilizaron como inculos para SHF y
SSF.

2.5.1. LA HIDRLISIS Y LA FERMENTACIN SEPARADAS (SHF)

Un matraz triangular de 100 ml que contiene 20 ml de citrato-fosfato Tampn
(50 mM, pH 4,8), 1 g de muestra pretratada y celulosa Enzima a una
concentracin final de 52,29 FPU / g de sustrato, se incub A 50C durante 3
das a una velocidad de agitacin de 150 rpm segn Al mtodo de hidrlisis
enzimtica descrito anteriormente. Despus de la centrifugacin Y esterilizacin
por filtracin, se obtuvo el sobrenadante Y se utiliza como nica fuente de
carbono (C) en el medio de fermentacin, Que contena 5 g / l de KH _ {2} PO _
{4}, 2 g / L (NH _ {4}) _ MgSO _ {4} 7H _ {2} O, 1 g / l de peptona y 5 g / l de
extracto de levadura. Entonces el 5% (V / v) de la suspensin de levadura se
usaron como inculo y Se incubaron a su temperatura ptima durante 72 horas
a una agitacin Velocidad de 150 rpm. Se recogieron alcuotas del lquido de
fermentacin En diferentes puntos de tiempo por centrifugacin, y los
sobrenadantes Se utilizaron entonces para el anlisis del producto de
fermentacin como se describe abajo.

2.5.2. SACARIFICACIN Y FERMENTACIN SIMULTNEAS (SSF)

Para lograr las mismas condiciones que las utilizadas en el experimento SHF,
La mezcla de reaccin SSF contena 20 ml de fermentacin Medio, 52,29 FPU
de celulasa, alcuotas del 5% (v / v) de los inculos de levadura, Y 1 g de la
muestra pretratada. SSF se llev a cabo a 30C y 42 C para levadura de ngel
de S. cerevisiae y K. marxianus K213, respectivamente. El lquido de
fermentacin se recogi y analiz De acuerdo con los mtodos de SHF como
se ha descrito anteriormente. Todos los SHF y SSF experimentos se realizaron
por triplicado, y las muestras de control Tambin se ejecutan en paralelo y se
contienen con la misma cantidad de La muestra no tratada.

2.6. MTODOS ANALTICOS

Las composiciones de celulosa, hemicelulosa y lignina en la Las muestras se

determinaron usando el mtodo del detergente (Van Soest Y Wine, 1967). El
contenido de ceniza se determin mediante muestras de cenizas A 500C
durante 3 h. Se determin la cristalinidad de celulosa Por difraccin de rayos X
(XRD) utilizando un Rigaku DMAX 2500 de rayos X Difractmetro (Nelson y
O'Connor, 1964). La actividad celulasa Se estim en papel de filtro como
unidades de celulosa de papel de filtro (FPU) (Ghose, 1987). La cantidad de
azcares reductores se determin Utilizando el mtodo del cido
dinitrosaliclico (DNS) (Bailey et al., 1992). El etanol, los azcares y los
subproductos se midieron Cromatografa lquida de alta resolucin
(cromatografa lquida LC - 10AT; Shimadzu Corp., Japn) con una Aminexion
HPX - 87HM Columna de exclusin inica (300 7,8 mm, Bio-Rad Laboratories
Inc.,M ESTADOS UNIDOS). La fase mvil consisti en cido sulfrico 5 mM en
un flujo De 0,7 ml / min a 55C. Se realiz una deteccin de metabolito
Utilizando un detector de ndice de refraccin (RI).

3. RESULTADOS Y DISCUSIN

3.1. DETERMINACIN DE CARBOHIDRATOS ESTRUCTURALES Y

LIGNINA EN AGUA JACINTO
Los contenidos relativos medios de hemicelulosa, celulosa y Lignina en hojas y
tallos de jacinto de agua seca en este estudio Fueron 31,81%, 25,64% y
3,55%, respectivamente (Tabla 1). La hemicelulosa Y celulosa fueron
superiores a los reportados En estudios previos, mientras que las hojas y tallos
de agua seca Jacinto en este estudio mostr un contenido ligeramente superior
de lignina Que en el estudio de Ma et al. (2010), pero un contenido mucho
menor Que en otros estudios (Tabla 1). Estas diferencias Pueden originarse a
partir de diferencias en las fuentes, tejidos, crecimiento Estado del jacinto de
agua, y mtodos para analizar la biomasa (Ma Et al., 2010; Gao et al., 2013).

3.2. JACINTO DE AGUA PRETRATADO CON NAOH / H2O2

Estudios anteriores han demostrado que NaOH / H2O2 era un poderoso

Oxidante con muy selectivo hacia la estructura de la lignina, Y podra
obviamente disminuir el contenido de lignina y la cristalinidad De los materiales
lignocelulsicos (Cheng et al., 2008). Los cambios Del contenido de lignina y la
cristalinidad permite modificar la Las estructuras supramoleculares de
materiales lignocelulsicos, Aumentando su hidrlisis por accin enzimtica o
biolgica, y tambin Mejorar la produccin de azcares reductores y etanol
(Barakat Et al., 2014). Solucin de NaOH / H _ {2} O _ {2} que contena NaOH
al 3% (p / v) y H2O2 1,5% (v / v) se eligi sobre la base de la optimizacin de
factor nico En nuestro estudio y estudios anteriores (Cheng et al., 2008;
Misson et al., 2009; Barakat et al., 2014; Ma et al., 2014). El contenido relativo
de Hemicelulosa, celulosa y lignina; La eficiencia de deslignificacin; La
cristalinidad; El rendimiento en azcares reductores; Y la hidrlisis efi- En las
muestras pretratadas con NaOH / H2O2 a diferentes temperaturas (25C, 30C
y 42C) y tiempos (12 h, 24 h y 36 h) Se muestran en la Tabla 2.

El pretratamiento de NaOH / H2O2 podra reducir efectivamente el Contenido

de hemicelulosas, con el contenido ms bajo de 15,88% durante 24 h a 30 C,
en comparacin con el 31,81% y el 41,90% No tratados y tratados con agua de
jacinto de agua, respectivamente. El relativo Contenido de celulosa aument
aproximadamente un 10% despus NaOH / H _ {2} O _ {2}, y una temperatura
de pretratamiento ms baja (25 C y 30 C) condujo a la recuperacin de
celulosa (Tabla 2). Comparado con el de la muestra tratada con agua, el
contenido relativo De lignina se redujo en todas las muestras con NaOH / H2O2
pretratamiento, Y el contenido ms bajo de lignina (3,63%) se obtuvo a 42C
Durante 24 h con una eficiencia de deslignificacin del 57,77%. En general, el
Cambios en los contenidos relativos de hemicelulosa, celulosa y Lignina
estuvieron de acuerdo con los reportados por Cheng et al. (2008), pero se
observ una diferencia obvia entre el agua Jacinto y bagazo de caa de azcar
con un aumento en la celulosa El contenido relativo en aproximadamente el
11,4% y las disminuciones en los contenidos relativos De hemicelulosa y lignina
en aproximadamente 26,02% y 5,93%, respectivamente.

La estructura cristalina de la celulosa hace que la biomasa sea resistente

Hidrlisis enzimtica en condiciones suaves y un cambio en la La cristalinidad
es un parmetro importante para evaluar La eficiencia del pretratamiento
(Dagnino et al., 2013). El pretratamiento de NaOH / H _ {2} O _ {2} obviamente
disminuy la celulosa Cristalinidad con el ndice de cristalinidad de celulosa
ms bajo de 12,18% y 13,88%, en comparacin con el 22,80% y 38,12% en los
no tratados Y la muestra tratada con agua, respectivamente. Estos resultados
Que el pretratamiento de NaOH / H2O2 en este estudio fue capaz de
Disminucin de la ordenacin de las fibras celulsicas, un hallazgo que Con los
de Ma et al. (2014) y Sannigrahi et al. (2010). El ndice de cristalinidad de
celulosa aument a 38,12% en La muestra tratada con agua, y la posible razn
fue que los Componentes de la muestra, excepto los componentes de
lignocelulosa, Haba sido eliminado por agua (Tabla 2). Adems, las cantidades
De azcares reductores producidos por hidrlisis enzimtica de los Las
muestras fueron comparativamente mayores que las de los controles (Jacinto
de agua no tratado y tratado con agua), que est de acuerdo Con los
resultados de la determinacin de hidrlisis y cristalinidad (Tabla 2).

El mayor rendimiento de azcares reductores (223,53 mg / g seco) fue Logrado

con el jacinto de agua pretratado con 1,5% (v / v) de H2O2 y 3% (p / v) de
NaOH a 25C durante 24 h (Tabla 2), que es inferior a Los reportados por
Cheng et al. (2015b). Este estudio proporcion un nmero De ventajas
potenciales tales como un tiempo de procesamiento acortado, Menor
temperatura de procesamiento y mayor produccin de azcar reductora (Tabla
2), y se us para ulterior fermentacin con etanol.

3.3. AISLAMIENTO E IDENTIFICACIN DE CEPAS DE LEVADURA

TERMOTOLERANTES PARA PRODUCCIN DE ETANOL
Se obtuvieron cincuenta y nueve aislamientos de levadura despus del
enriquecimiento, y Estas cepas podran crecer normalmente a 42C. Quince de
estas cepas Podra incluso crecer a 45 C y 48 C. Su capacidad para fermentar
el etanol De glucosa a diferentes temperaturas (30-48C) se prob mediante
TTC, y los resultados mostraron que todas las cepas podran producir Etanol a
30 C, con dos cepas (cepa WXT3 y K213) mostrando Alta produccin de
etanol tanto a 42 C como 48 C. Para confirmar an ms la capacidad de las
cepas para crecer y producir Etanol a alta temperatura, las caractersticas de
fermentacin del etanol De la cepa K213 en el cultivo de YPD lquido con el
Adicin de 100 g / l de glucosa a 30C, 42C y 45C, utilizando S. cerevisiae
ngel como la cepa de control. ngel K213 y S. cerevisiae Ambas mostraron
alta produccin de etanol con un Conversi traduccin Rendimiento de
conversin de 0,43 g / g de glucosa a 24 h a 30C (Figura 1a). A 42 C, K213
mostr una mayor tasa de fermentacin que S. cerevisiae Levadura ngel con
eficiencia de conversin de etanol de 0,27 g / g de glucosa Y 0,14 g / g de
glucosa a las 12 h, respectivamente. Los rendimientos mximos de Etanol
obtenidos fueron de 42,71 g / l a las 24 h y de 44,30 g / l a 48 h para K213 y
levadura de ngel de S. cerevisiae, respectivamente (Figura 1a). Con un
Aument la temperatura de 45 C, K213 todava mantuvo el ms alto
Fermentacin con una eficiencia de conversin del etanol de 0,43 g / g de
glucosa a las 36 h, mientras que la levadura angelical de S. cerevisiae casi
Perdi su capacidad para producir etanol con 1,71 g / l de etanol a las 48 h
(Figura 1a).
Identificacin basada en el anlisis secuencial de la explosin 5.8S-ITS Las
bsquedas indicaron que la regin ITS1 del nuevo aislado Relacionados con
las secuencias homlogas de varios K. marxianu , Presentando 99% de
homologa. El rbol filogentico de NJ tambin con- La cepa aislada estaba
estrechamente relacionada con la especie K. Marxianu (figura 1b). La
produccin de etanol a temperatura elevada ha recibido Y algunas levaduras
termotolerantes y etanolgicamente Ha sido aislado y modificado para la
produccin de etanol (Hasunuma y Kondo, 2012). Las cepas de levadura
termotolerantes de Kluyveromyces, Saccharomyces, Hansenula, Pichia y
Fabospora Gneros a temperatura elevada (> 37 C) (Ryabova et al., 2003,
Kwon et al., 2011, Hasunuma y Kondo, 2012). Entre ellos, K. marxianus parece
ser particularmente Prometedores, y muchas cepas de K. marxianus crecen
bien a temperaturas Tan alto como 45-52 C y puede producir eficientemente
etanol en Temperaturas de 38 - 45C (Banat et al., 1998, Fonseca et al.,F
2008), lo cual est de acuerdo con los resultados de nuestro estudio. K.
marxianus K213 ofreca algunas ventajas sobre las Cepa de nima de S.
cerevisiae en este estudio, mostrando El potencial de esta cepa para ser
aplicado en la produccin de etanol en Una temperatura elevada. Sin embargo,
cabe sealar que estos Se obtuvieron ventajas a escala de laboratorio con una
baja concentracin De glucosa, y se necesitan ms estudios, incluyendo
Aquellos que investigan la produccin de etanol a una alta concentracin de
Glucosa, su capacidad para utilizar xilosa, la tolerancia a una concentracin
alta De etanol, y as sucesivamente.
3.4. PRODUCCIN DE ETANOL FRENTE A SHF Y SSF

Despus de 72 h de hidrlisis enzimtica, la enzima Hidrolizado contena 20,34

g / l de glucosa y concentraciones bajas De xilosa (1,16 g / l), celobiosa (1,12
g / l) y arabinosa (0,68 g / l), Lo que sugiere que una pequea cantidad de
hemicelulosa en la muestra Se degrad durante la etapa de hidrlisis
enzimtica. En la siguiente etapa de SHF, la levadura de ngel de S. cerevisiae
y K. marxianus K213 convirtieron la glucosa en etanol y la mxima Etanol
fueron 7,10 g / L y 6,41 g / L a las 12 h, respectivamente (Figuras 2a yb). Las
eficiencias de conversin fueron 0,35 g / g de glucosa Y 0,32 g / g de glucosa
para la levadura de ngel de S. cerevisiae y K. marxianus K213,
respectivamente. Adems, K. marxianus K213 produjo ms Actico que la
levadura ngel de S. cerevisiae con un rendimiento de 0,971 g / l Frente a
0,734 g / L a las 12 h, respectivamente (Figuras 2a y b). En el proceso SSF, la
produccin de etanol por K. marxianus K213 procedi Suavemente y termin
en 24 h con un etanol mximo Rendimiento de 7,34 g / l a las 24 h, mientras
que la levadura de ngel de S. cerevisiae mostr una Lento proceso de
fermentacin con rendimientos de etanol de 3,50 g / L y 4,45 g / l a las 12 h y
24 h, respectivamente (Fig. 2c y d). El mximo Se obtuvo rendimiento de etanol
(4,94 g / l) de levadura de ngel de S. cerevisiae a 36 h, lo que corresponde al
rendimiento de conversin de 0,09 g / g Biomasa seca. El procesamiento de K.
marxianusK213 por SSF podra Aumentar la eficiencia de conversin a 0,16 g /
g de biomasa seca, Fue 1,78 veces mayor que la levadura de ngel de S.
cerevisiae. El principal Subproductos de S. cerevisiae ngel levadura y K.
marxianus K213 en el SSF fueron la glicerina y el cido actico,
respectivamente (Fig. 2c y d), Que pueden deberse a diferencias en las vas
metablicas en estos Microorganismos.

La Tabla 3 muestra los rendimientos de etanol (g / g de biomasa seca)

producidos por diferentes Cepas de fermentacin de jacinto de agua
pretratadas con Los diferentes mtodos investigados en los experimentos
anteriores. Entre ellos, el mayor rendimiento en etanol se obtuvo Co-
fermentacin de S. cerevisiae MTCC 171 y Pachysolen tannophilus MTCC
1077 (0,21 g / g de biomasa seca) para utilizar glucosa y Xylose
(Mukhopadhyay y Chatterjee, 2010), seguido por Xilosa E. coli KO11 (0,17 g / g
de biomasa seca) (Mishima Et al., 2008). Otra causa para el alto rendimiento
de etanol alcanzado Co-fermentacin de S. cerevisiae y P. tannophilus fue El
caldo de cultivo de hongos entero se aadi en el proceso SSF, que Tambin
fue confirmado por Ma et al. (2010) que inform un alto contenido de etanol
Rendimiento de 0,192 g / g de jacinto de agua co-pretratado con pudricin
blanca Hongos En nuestro estudio, el rendimiento mximo de etanol de 0,16 g /
g de agua Jacinto con K. marxianus K213 va SSF a 42C Durante 24 h en
ausencia de caldo de cultivo de hongos o hongos de pudricin blanca. Adems,
el tiempo total utilizado para SSF con K. marxianus K213 Fue de 24 h, que fue
ms corta que la del control S. cerevisiae Levadura de ngel en este estudio y
tambin en los estudios previos, como En la Tabla 3.

4. CONCLUSIONES

En este estudio, el pretratamiento de jacinto de agua por H2O2 / NaOH a Se

encontr que las condiciones suaves eran eficaces con un alto rendimiento de
fermentable Azcares y bajo grado de cristalinidad en comparacin con
Muestra no tratada. El termotolerante recin aislado K. marxianu K213 mostr
mayor produccin de etanol a partir de glucosa por encima 42 C que que hizo
el control S. cerevisiae ngel levadura. Adicionalmente, el rendimiento y
concentracin mxima de etanol Desde el jacinto de agua pretratado
procesado por SSF a 42 C con K. marxianu K213 fueron mayores que los
alcanzados por SHF y Fueron 1,78 veces superiores a los de la S. cerevisiae
de control al 30 C

RESUMEN
El presente texto nos habla sobre el proceso que se le hace, al jacinto de agua
para poder producir etanol, para remplazar los combustibles fsiles,
aprovechando los contenidos azucarados fermentables,
Ya que el Jacinto te agua se produce tan fcil mente en las lagunas y embalses
siendo en algunas ocasiones invasores y difciles de controlar. Para poder dar
un tratamiento de transformacin para hacer etanol tenemos tres formas para
poder realizarlo que son fsicos, qumicos biolgicos y combinaciones de estas.
Como se puede observar el texto muestra un procedimiento para poder dar
transformacin del jacinto de agua a bioetanol.