Microbiologia Clnica Profa.

Juliana Vital Brazil

DIAGNSTICO MICROBIOLGICO

DE INFECES DO TRATO GASTRINTESTINAL

 INTRODUO

Conceitos:
 Gastrenterites: infeces gastrintestinais caracterizadas por dores
abdominais, nuseas, vmitos e diarria.
 Diarria: descarga fecal mltipla, como resultado de uma infeco do
intestino delgado, envolvendo distrbio hidro-eletroltico (aumento da liberao
de lquidos com perda de eletrlitos).
 Disenteria: infeces gastrintestinais caracterizadas por fezes com
sangue, muco e pus acompanhada de distrbio hidro-eletroltico, dores
abdominais, febre, resultando de uma infeco do clon.
 Enterocolite: inflamao da mucosa do
intestino delgado ou do clon.
 INTRODUO

Tipos de infeces gastrintestinais:
 Processo invasivo: M.O. com capacidade de invaso celular, levando
destruio da mucosa: adeso s clulas epiteliais penetrao
multiplicao bacteriana sndrome disentrica.
 Processo txico: bactrias produtoras de toxinas consumo de toxina
pr-formada ou sntese da toxina aps adeso celular.

Toxina bacteriana
Invaso celular
 INTRODUO

Trato gastrintestinal (TGI):
 Esfago + estmago + intestino delgado
(duodeno+jejuno+leo) + intestino grosso (clon).
 Microbiota associada:
-Esfago: colonizao transitria por M.O. proveni-
entes de saliva, faringe e alimentos.
-Estmago: pouca quantidade de M.O. (microbiota
cido-tolerante) acidez do contedo gstrico
barreira fsica para entrada de M.O. invasores.
-Intestino delgado: pequeno nmero de M.O.
aumento medida que o pH torna-se menos cido.
-Intestino grosso: grande quantidade de bactrias
aerbios:>108/g fezes; anaerbios:>1011/g fezes.
 PRINCIPAIS PATGENOS ASSOCIADOS
1. Escherichia coli diarreiognicas

E. coli enteropatognica clssica (EPEC): principalmente gastrenterite
em crianas adeso ntima destruio microvilosidades diarria
no produz toxina/no tem capacidade invasiva.

E. coli enterotoxignica (ETEC): diarria em pases em desenvolvimento adeso e

produo de toxinas termolbeis (LT) e termoestveis (ST) diarria aquosa
produz toxina/no tem capacidade invasiva.

E. coli enteroagregativa (EAEC): diarria crnica adeso agregativa (AA ou

empilhamento de tijolos) produo de toxina (EAST) diarria produz toxina/no
tem capacidade invasiva.

E. coli enteroinvasora (EIEC): diarria do viajante adeso invaso de

entercitos multiplicao destruio epitelial disenteria (semelhante
shiegelose) no produz toxina/tem capacidade invasiva.

E. coli enterohemorrgica (EHEC): colite hemorrgica e sndrome hemoltica-urmica

adeso produo de toxina (shiga-like) morte celular diarria
sanguinolenta produz toxina/no tem capacidade invasiva.
 PRINCIPAIS PATGENOS ASSOCIADOS
2. Salmonella sp.

Principais espcies: S. enterica e S. bongori

diviso em sorotipos (cerca de 2500).

Transmisso pessoa-pessoa contaminao pelo consumo

de alimentos de granja e laticnios.

Principais doenas clnicas: gastrenterite, febre tifide (S. typhi e S.

parathyphi) ou colonizao assintomtica (casos crnicos).

Patogenia:adeso invaso multiplicao reao inflamatria +
destruio da mucosa = diarria (eliminao de 1 bilho de M.O./g de fezes)
auto-limitada (48h-7 dias) casos com disseminao sistmica.
 PRINCIPAIS PATGENOS ASSOCIADOS
3. Shigella sp.

S. dysenteriae, S. flexneri, S. boydii e S. sonnei todas so patognicas.

Transmisso pessoa-pessoa, gua e alimentos (mariscos, crustceos, frutas,

vegetais, frango e saladas) contaminados com fezes humanas homem
principal reservatrio.

Principal doena clnica: disenteria bacilar ou shigelose.

Patogenia:adeso invaso intensa multiplicao e liberao de Shiga-

toxina reao inflamatria intensa + destruio da mucosa = diarria
sanguinolenta e mucopurulenta.
 PRINCIPAIS PATGENOS ASSOCIADOS
4. Yersinia enterocolitica

Microbiota intestinal de muitos animais domsticos  transmisso por gua e

leite contaminados.

Capacidade de crescimento a 4oC.

Principal doena clnica: gastrenterite  diarria + dor abdominal intensa

(confundida com apendicite).

Patogenia: adeso  invaso (endocitose)  disseminao

por tecidos adjacentes.
 PRINCIPAIS PATGENOS ASSOCIADOS
5. Campylobacter sp.

C. jejuni: principal espcie associada gastrenterite  principal causa de

gastrenterite bacteriana transmitida por alimentos nos EUA.

Temperatura tima de crescimento: 42oC (30-47oC).

Principal doena clnica: campilobacteriose (gastrenterite).

Patogenia: adeso  multiplicao  produo de

enterotoxina termoestvel (CJT) e enzimas citotxicas
 diarria.

Sensibilidade ao pH cido do estmago: condies

que reduzam ou neutralizam a secreo gstrica
favorecem o estabelecimento da campilobacteriose.
 PRINCIPAIS PATGENOS ASSOCIADOS
6. Vibrio cholerae

Associao a guas doces, salgadas e animais encontrados nesses ambientes

 gua e alimentos (pescados) contaminados  transmisso fecal-oral.

Patogenia: adeso  multiplicao  produo de toxina colrica (CTX) 

destruio tecidual  intensa perda de fluidos e eletrlitos  diarria aquosa
(gua de arroz) sem pus ou sangue  excreo de M.O. nas fezes mesmo
aps trmino dos sintomas (portadores assintomticos).
 PRINCIPAIS PATGENOS ASSOCIADOS
7. Bacillus cereus: gastrenterite associada a alimentos.

8. Clostridium botulinum: gastrenterite associada ao consumo de esporos ou

toxina pr-formada no alimento.

9. Staphylococcus aureus: gastrenterite associada a intoxicao alimentar

(enterotoxina termorresistente).

10. Vrus - Rotavrus

S. aureus

Clostridium botulinum Bacillus cereus

Rotavrus
 COLETA E TRANSPORTE DE ESPCIMES CLNICOS

Amostras de fezes ou diarria: coleta em frascos de boca larga e com

tampa preferencialmente realizar antes da antibioticoterapia.

 Quantidade mnima de 1-2g de fezes.

 Enviar ao laboratrio temperatura ambiente: baixas temperaturas inibem

enterobactrias sensveis.

Alguns casos: coleta de swab retal  Vibrio cholerae.

 Utilizao de meios de transporte: glicerina tamponada, Cary-Blair, gua

peptonada alcalina (APA).
 PROCEDIMENTO LABORATORIAL

1. Meios para semeadura primria:

Caldo de enriquecimento (caldo selenito): inibe o crescimento de E. coli.

gar Mac-Conkey ou EMB: seletivo para BGN e indicador da fermentao de lactose.

Meio SS ou Hektoen-Enteric (HE): : seletivo para Salmonella sp. e Shigella sp.

Meio de Skirrow: Campylobacter sp.

Meio TCBS (gar tiossulfato, citrato, sais biliares e sacarose): Vibrio sp.

2. Bacterioscopia pelo mtodo de Gram:

Sem valor diagnstico, exceto quando h suspeita de infeco por
Campylobacter ou S. aureus.

3. Etapa inicial de enriquecimento:

Crioenriquecimento: suspeita de infeco por Yersinia enterocolitica.
 PROCEDIMENTO LABORATORIAL

Espcime Clnico

Mac- Agar SS Tetrationato ou Protocolos

Conkey Selenito especiais
Incubar por 35oC por
24/48h

Identificao + Sorologia + TSA Vibrio

Campylobacter
Yersinia
 IDENTIFICAO DOS PRINCIPAIS PATGENOS
1. Famlia Enterobacteriaceae:

Oxidase (-) + Fermentao de glicose (+)

Salmonella Shigella E. coli

Lactose(-)/Sacarose(-) Lactose(-)/Sacarose(-) Lactose(+/-)/Sacarose

Glicose(+)/Indol (-)/ Glicose(+)/Indol(+/-)/ (+/-)/Glicose(+)/Indol(+)/
Citrato(-)/Uria(-)/ Citrato(-)/Uria(-)/ Citrato(-)/Uria(-)/
Motilidade(+)/Gs(+)/ Motilidade(-)/Gs(-)/ Motilidade(+/-)/Gs(+)/
H2S(+) H2S(-) H2S(-)

Reaes Sorolgicas (sorogrupos e sorotipos)

 IDENTIFICAO DOS PRINCIPAIS PATGENOS
2. Yersinia enterocolitica: protocolo especial

Crioenriquecimento das amostras de fezes:incubao do cultivo a 4C/1-3
semanas.

Fezes em meio de transporte

Crioenriquecimento

5-7 dias/4C

Mac-Conkey
Lactose(-)/ Sacarose(+)/
Glicose(+)/ Indol (+/-)
Sorologia
Citrato(-)/ Uria(-)/
Motilidade(+)/Gs(-)/H2S(-)
 IDENTIFICAO DOS PRINCIPAIS PATGENOS
3. Campylobacter sp.: protocolo especial

Utilizao de meios seletivos + incubao em temperatura elevada (42C) +

ambiente de microaerofilia (5% O2; 10% CO2; 85% N2).
 Meio Skirrow: sangue (7%) + vancomicina + polimixina B + trimetropim.

 Campy-BAP: sangue (10%) + vancomicina + polimixina B + trimetropim + cefalotina

+ anfotericina B.

Meio Skirrow ou Campy-Bap

Microaerofilia/420C

Morfologia colonial/Hemlise/
Catalase(+)/Oxidase(+)/Colorao de Gram
(BGN)/Uria(+)/H2S(-)/ Hidrlise do hipurato (+)
 IDENTIFICAO DOS PRINCIPAIS PATGENOS
4. Vibrio cholerae: protocolo especial

Utilizao de meios seletivo TCBS: gar tiossulfato, citrato, sais biliares e

sacarose.

Meio TCBS

Morfologia colonial/Oxidase(+)/
Catalase(+)/Hidrlise da esculina(-)/
Motilidade(+)/Indol(+)/Lactose(-)/
Sacarose(+)/Lisina(+)/Ornitina (+)

Sorologia (determinao de biotipo)