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MEDIDAS DE VOLUME

1- Introduo

Chamamos de volume capacidade de um recipiente em conter um determinado


lquido ou um gs. Para medidas de volume, usamos como padro internacional o LITRO.
O litro a unidade fundamental que simbolizada pela letra L e dependendo da
capacidade a ser medida podemos utilizar os seus mltiplos e submltiplos conforme o
quadro a seguir:

Unidades de Capacidade Smbolos Equivalentes


Quilolitro kL 1000L
Mltiplos Hectolitro hL 100L
Decalitro daL 10L
Unidade Litro L 1L
Fundamental
Decilitro dL 0,1L
Submltiplos Centilitro cL 0,01L
Mililitro mL 0,001L

A transformao das unidades de capacidade feita multiplicando ou dividindo por


10, pois cada unidade de capacidade 10 vezes maior ou menor que a unidade
imediatamente inferior ou superior.
Nas tcnicas laboratoriais a medida de pequenos volumes frequentemente
utilizada. Sendo assim, as unidades de capacidade mais empregadas so o mililitro (mL) e
o microlitro (L).

1 mL = 1000 L

2- Materiais Utilizados para Medir Volumes

Para medidas de volume no laboratrio utilizamos pipetas graduadas, volumtricas


e automticas, balo volumtrico, bquer, proveta, erlenmeyer e repipetadores.
A escolha da vidraria a ser utilizada para a medio que se quer efetuar depende
do volume a ser medido e da preciso desejada.
As vidrarias utilizadas para medidas de volume possuem capacidades variadas. Em
algumas delas o fabricante certifica que a uma dada temperatura, geralmente 20 oC, as
graduaes correspondem ao volume especificado, com certa exatido. Isto significa que
a vidraria est calibrada conforme a indicao das linhas graduadas.

- PIPETAS
Existem quatro principais tipos de pipetas utilizadas no laboratrio que so:
1. Pipeta Graduada: usada para medir pequenos volumes inteiros ou fracionados
de lquidos. Pode ser encontrada de diversas capacidades.
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2. Pipeta Volumtrica: usada para medir pequenos volumes inteiros de lquidos.
Mede apenas o volume de sua capacidade total, ou seja, um volume fixo.
Tambm encontrada de diversas capacidades.
3. Pipeta automtica: usada para efetuar medidas de pequenos volumes de
amostras biolgicas e solues padro. A indicao da capacidade total em
microlitros (L).

ERLENMEYER: Utilizado para efetuar medidas aproximadas de volume, fazer


reaes, misturas, aquecimentos, filtraes, guardar reagentes, culturas de
microorganismos.

BEQUR: Utilizado para efetuar medidas aproximadas de volume, fazer reaes,


misturas, filtraes, aquecimentos e tambm para guardar solues.

BALO VOLUMTRICO: Utilizado par efetuar medidas exatas de volume, por isto
a vidraria de escolha para o preparo de solues. No pode ser submetido a
temperaturas mais altas como a da estufa, porque uma vidraria aferida.

PROVETA: Utilizado para fazer medidas exatas de lquidos.

REPIPETADORES: Frascos para acondicionar reagentes, com dispositivos


apropriados para medir e dispensar o lquido que contem.

3- Fundamentos Bsicos para Medidas de Volume

Quando se mede o volume de um lquido, compara-se o seu nvel com os traos


marcados na parede do recipiente de medida. necessrio que a leitura seja feita com a
vidraria na posio vertical altura dos olhos do observador.
Para lquidos incolores ou corados com transparncia, l-se o nvel do lquido na
superfcie curva que denominamos menisco inferior. Para lquidos coloridos sem
transparncia l-se o nvel do lquido na superfcie plana que denominamos menisco
superior.

4- Procedimentos Tcnicos para Medidas de Volume

Uso de Bquer e Erlenmeyer


Essas vidrarias trazem escrito o percentual de erro que se comete ao efetuar uma
medida com elas, geralmente cerca mais ou menos 5%. So vidrarias empregadas
quando no h necessidade de preciso na medida. No so utilizadas na rotina
laboratorial como vidrarias para medidas de volume.

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Uso de Proveta
A preciso das medidas efetuadas na proveta diminui com o aumento da sua
capacidade. Assim, devemos utilizar a menor proveta possvel para uma dada medida. Por
exemplo, para medir 45mL, devemos utilizar a proveta de 50mL e no a de 100mL.

Uso do Balo Volumtrico


O balo volumtrico utilizado no preparo das diversas solues de uso no
laboratrio. No deve ser submetido temperatura elevada, pois uma vidraria
volumtrica aferida.
Ao preparar solues utilizando o balo volumtrico, devemos ter o cuidado de
adicionar primeiramente as substncias slidas e os lquidos de menor quantidade. E s
ento completamos o volume com o lquido de maior quantidade. Antes de completar o
volume, porm, deve-se ter o cuidado de tornar homogneo o contedo do balo.

Uso de Pipetas Volumtricas


A pipeta volumtrica foi planejada para medir um volume fixo de lquido, e para
tanto possui na sua parte superior uma marca gravada. Estas pipetas so utilizadas para
medidas de amostras no viscosas.

Uso de Pipetas Graduadas


A pipeta graduada consiste em um tubo graduado uniformemente em seu
comprimento. As pipetas graduadas tm sua capacidade total dividida em dcimos,
centsimos ou milsimos. Se tivermos uma pipeta cuja capacidade total seja 1mL e a
diviso em dcimos (1mL in 1/10), podemos concluir que a maior medida que poderemos
efetuar nesta pipeta 1mL e a menor 0,1mL.

PIPETAS GRADUADAS FREQUENTEMENTE UTILIZADAS NO LABORATRIO


Capacidade Total Tipo de Graduao
10mL 1/10
5mL 1/10
2mL 1/10 e 1/100
1 mL 1/10 e 1/100
0,5 mL 1/100
0,2 mL 1/100 e 1/1000
0,1 mL 1/1000

A escala das pipetas graduadas indica o volume que est sendo transferido.
Na escolha da pipeta a ser usada, devemos observar:
1. Utilizar pipetas limpas, secas e com as extremidades perfeitas;
2. Utilizar pipetas com a capacidade total mais prxima do volume a ser medido.
Medidas decimais podem ser efetuadas em pipetas graduadas em dcimos e/ou
centsimos, mas medidas centesimais s podem ser efetuadas em pipetas
graduadas ao centsimo.

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Ao encher a pipeta deve-se ter o cuidado de manter a ponta da mesma sempre
abaixo do nvel da soluo; assim evitamos a formao de bolhas de ar.

Uso de Pipetas Automticas


Geralmente as pipetas automticas so utilizadas para efetuar medidas de
pequenos volumes de amostras biolgicas e solues padres. A indicao da capacidade
total quase sempre em microlitros. O uso de ponteiras apropriadas, a correta calibrao
das pipetas e o procedimento tcnico adequado so fatores importantes na preciso das
medidas, quando utilizamos estas pipetas.
Essas pipetas possuem dois estgios, o primeiro para aspirao da soluo e o
segundo para escoamento.
Logo aps o uso, as ponteiras so deixadas de molho e lavadas. Para secar, utilizar
estufa a 37oC.

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VIDRARIAS, MATERIAIS DIVERSOS E APARELHOS DO LABORATRIO

1- Introduo

Para a realizao dos diversos exames laboratoriais necessria a utilizao de


materiais apropriados e especficos para cada exame. Apresentaremos a seguir uma
relao de vidrarias e materiais diversos indispensveis para a execuo das provas
laboratoriais de rotina.

2- Descrio de Materiais

Esto descritos a seguir os principais materiais utilizados no laboratrio clnico:

MATERIAIS USADOS PARA MEDIDAS DE VOLUME:

PIPETAS
Existem quatro principais tipos de pipetas utilizadas no laboratrio que so:
Pipeta Graduada: usada para medir pequenos volumes inteiros ou fracionados
de lquidos. Pode ser encontrada de diversas capacidades.
Pipeta Volumtrica: usada para medir pequenos volumes inteiros de lquidos.
Mede apenas o volume de sua capacidade total, ou seja, um volume fixo.
Tambm encontrada de diversas capacidades.
Pipeta automtica: usada para efetuar medidas de pequenos volumes de
amostras biolgicas e solues padro. A indicao da capacidade total em
microlitros (L.

ERLENMEYER: Utilizado para efetuar medidas aproximadas de volume, fazer


reaes, misturas, aquecimentos, filtraes, guardar reagentes, culturas de
microorganismos.

BEQUR: Utilizado para efetuar medidas aproximadas de volume, fazer reaes,


misturas, filtraes, aquecimentos e tambm para guardar solues.

BALO VOLUMTRICO: Utilizado par efetuar medidas exatas de volume, por isto
a vidraria de escolha para o preparo de solues. No pode ser submetido a
temperaturas mais altas como a da estufa, porque uma vidraria aferida.

PROVETA: Utilizado para fazer medidas exatas de lquidos.

REPIPETADORES: Frascos para acondicionar reagentes, com dispositivos


apropriados para medir e dispensar o lquido que contem.

MATERIAIS USADOS NO SETOR DE COLETA:


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SERINGA: Utilizada na coleta de sangue venoso e arterial.

SWAB OU ZARAGATOA: Utilizado na coleta de secrees em geral. Devem ser


descartveis. Em alguns casos vm acondicionadas em tubos contendo um meio
de cultura (meio de transporte), para manter o material coletado em condies de
exame.

ESTILETE OU MICROLANCETA: Usado para realizar a puno digital para extrair


gotas de sangue que sero usadas em exames como a tipagem sangunea, a
dosagem de glicose e a dosagem de hemoglobina.

CANHO E TUBO VCUO: Utilizados na coleta de sangue venoso.


GARROTE: Usado durante a coleta de sangue para facilitar o encontro da veia e
sada de sangue.

MATERIAIS USADOS NO SETOR DE HEMATOLOGIA:

CMARA DE NEUBAUER: Utilizada para a contagem de clulas no hemograma


(hemcias, leuccitos e plaquetas) e no espermograma (espermatozides).

TUBO CAPILAR: Empregado no exame hematolgico denominado Hematcrito.

PIPETA DE WESTERGREEN: Utilizada apenas no setor de hematologia para a


realizao do exame de Velocidade de Hemossedimentao (VHS).

SUPORTE DE WESTERGREEN: Para a sustentao da pipeta de Westergreen no


exame de VHS.

MATERIAIS USADOS NO SETOR DE IMUNOLOGIA:

LMINA ESCAVADA: Utilizada no setor de Imunologia para a realizao do


VDRL, teste para o diagnstico de Sfilis.

PLACA DE E.L.I.S.A.: Usada para realizar reaes imunolgicas em que o


volume do reagente mnimo.
PLACAS DE AGLUTINAO: Usadas para visualizar reaes de aglutinao.
As pretas so utilizadas para as reaes cuja leitura macroscpica e as
transparentes para leituras microscpicas.

MATERIAIS USADOS NO SETOR DE MICROBIOLOGIA:

PLACA DE PETRI: utilizada no setor de microbiologia no acondicionamento de meios de


cultura para exames bacteriolgicos.

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BICO DE BUNSEN: Utilizado em bacteriologia para a esterilizao atravs do
mtodo de flambagem e tambm para realizar aquecimentos a temperaturas
elevadas como, por exemplo, na preparao de meios de cultura.

ALA DE PLATINA: Utilizadas para realizar o plantio de material biolgico em meio


apropriado atravs de estrias, diz-se tratar de um espraiamento.

AGULHA BACTERIOLGICA: Utilizadas tambm para o plantio de material


biolgico. E na captura de microrganismos e de colnias isoladas.

BALO DE FUNDO CHATO: Utilizado para guardar solues e reagentes. uma


vidraria muito utilizada no preparo de meios de cultura, uma vez que pode ser
submetida ao aquecimento.

MATERIAIS USADOS NO SETOR DE BIOQUMICA:

CUBETAS: Utilizadas para realizar as leituras espectrofotomtricas. Na cubeta


colocada a reao para se fazer a leitura de uma dosagem bioqumica.

TUBO DE ENSAIO: Utilizado no laboratrio para realizar reaes ou testes nas


dosagens bioqumicas. Tambm pode ser usado para cultura de bactrias e fungos.

MATERIAIS USADOS NO SETOR DE UROANLISE:

REFRATMETRO: Usado para medir a densidade urinria, que um dos


parmetros analisados no exame de urina rotina.

TIRA REAGENTE: uma fita que deve imergida na urina para se fazer a pesquisa
de elementos anormais, uma parte do exame de urina rotina.

TUBO CNICO OU TUBO DE CENTRFUGA: De modo geral so utilizados para


conter o material a ser centrifugado. Pode ser de vidro ou de plstico. utilizado
para se obter o sedimento urinrio ou de fezes.

MATERIAIS USADOS NO SETOR DE PARASITOLOGIA:

CLICE DE SEDIMENTAO: tambm chamado de clice de Hoffman e


utilizado no setor de Parasitologia na concentrao das fezes para o exame
parasitolgico (EPF).

MATERIAIS DE USO GERAL NO LABORATRIO:


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FUNIL DE VIDRO: Usado como suporte nas filtraes e para transferncia de


lquidos para frascos de gargalo estreito.

LMINAS: Utilizadas em microscopia para conter o material a ser analisado.


Existem lminas especficas para reaes como o teste de gravidez

LAMNULAS: Utilizadas para cobrir o material contido e preparado sobre a lmina


para evitar o ressecamento.

BASTO DE VIDRO: Auxilia na triturao de substncias e a transferncia de


lquidos para frascos de boca larga.

PIPETE: So adaptadores para pipetas graduadas e volumtricas. Eliminam a


possibilidade de contaminao pela aspirao oral das solues.

ESTANTES para sustentao dos tubos de ensaio durante a realizao das


dosagens;

SUPORTE PARA COLORAO de lminas como o mtodo de Gram para


identificar bactrias e a colorao de esfregaos sanguneos;

RELGIOS: Utilizados na marcao do tempo das diversas reaes. Podem ser de


dois tipos:
Simples: possibilita marcar o tempo para apenas uma reao;
Multitimer: possibilita marcar o tempo para vrias reaes diferentes e
simultaneamente.

CRONMETRO: Utilizado na marcao de tempos relativamente pequenos e


precisos. utilizado em tcnicas cujo resultado expresso em minutos ou
segundos.

PINA: Muito usada no laboratrio para retirar tubos da centrfuga e para segurar
tubos de ensaio durante o seu aquecimento direto na chama do bico de Bunsen.

TERMMETRO: Usado para medir temperaturas, garantindo assim a exata


temperatura do banho-maria, da estufa e das geladeiras durante a realizao de
exames e no armazenamento de reagentes.

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APARELHOS UTILIZADOS NO LABORATRIO

Os aparelhos so instrumentos indispensveis execuo da rotina laboratorial.


Atualmente, a automao das tcnicas laboratoriais sofre a cada dia modificaes devido
ao avano da tecnologia nesta rea. Cada laboratrio, de acordo com a sua rotina,
nmero de exames e outras condies, deve se adaptar modernidade, visando sempre
melhorar a qualidade do seu trabalho.

1- Lavador de Pipetas

um aparelho empregado na limpeza das pipetas de vidro. Possui recipiente


prprio para deixar as pipetas de molho e outro para o enxgue automtico das mesmas.
Consiste em um cesto cilndrico onde as pipetas so colocadas de ponta para cima. Aps
o molho, as pipetas devem ser enxaguadas por, no mnimo, 40 minutos.

2- Estufa de Pasteur

o aparelho destinado esterilizao e secagem das vidrarias. aquecida pelas


paredes laterais e inferiores e possuem um revestimento trmico adequado para evitar
uma grande perda de calor. regulada atravs de termostato. Quando utilizada para a
esterilizao devemos observar:
Os materiais so dispostos de modo que fique entre eles um espao para o ar quente
circular;
Esperar a temperatura desejada (170 oC) ser atingida para marcar o tempo de esterilizao
(2 horas). A temperatura deve ser controlada atravs de termmetro;
No abrir o aparelho durante o perodo de esterilizao.

3- Estufa Bacteriolgica

utilizada para incubao de culturas bacterianas a 37 oC que a temperatura ideal


para o crescimento da maioria das bactrias. A temperatura regulada atravs de
termostato e controlada atravs de termmetro.

4- Centrfuga

As centrfugas so utilizadas na rotina laboratorial para fracionamento do sangue


visando a obteno de soro e plasma, na obteno do sedimento urinrio, na
sedimentao das fezes, na lavagem de hemcias, etc.
No manuseio da centrfuga, devemos observar:
Utilizar sempre tubos do mesmo tamanho e dimetro, com o mesmo volume e
colocados sempre aos pares e em posies opostas;
Arrolhar os tubos contendo amostra biolgica;
Ligar e desligar o aparelho girando gradativamente o controle de rotaes;
Observar o nmero de rotaes e o tempo de centrifugao especficos para cada
tcnica;

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Manter o aparelho sempre fechado quando em funcionamento;
Esperar o aparelho parar espontaneamente;
Esperar alguns minutos antes de abrir o aparelho quando houver quebra de tubos;
Fazer a limpeza do aparelho sempre que necessrio com glutaraldedo.
Quando ocorrer quebra de tubos no interior da centrfuga, esperar 30 minutos antes
de abr-la e proceder a descontaminao com o glutaraldedo.

5- Destilador e deionizador

Basicamente existem dois tipos de tratamento para a gua utilizada no laboratrio


de anlises clnicas: a destilao e a deionizao.
Atravs da destilao, obtemos uma gua qumica e biologicamente pura. Seu
processo de purificao se baseia no ponto de ebulio da gua a 100 oC. Como apenas a
gua entra em ebulio a essa temperatura, ela torna-se vapor e posteriormente
recolhida sozinha.
A gua obtida atravs da deionizao uma gua somente quimicamente pura.
Seu princpio se baseia na retirada dos ons, com a utilizao de uma resina inica. Assim,
por exemplo, ons de Sdio (Na+) so trocados por H+ e ons de Cloro (Cl-) so trocados
por OH-. O H+ e o OH- se unem formando H2O, ou seja, gua.
A destilao, portanto, um processo mais eficiente que a deionizao. Atravs da
destilao podemos eliminar substncias orgnicas de alto ponto de ebulio, impurezas
inorgnicas e elementos microbiolgicos. Porm, a destilao no elimina amonaco, gs
carbnico, cloro e substncias orgnicas de baixo ponto de ebulio.
Entretanto, a maioria dos laboratrios trabalha com a gua deionizada, pois oferece
um custo muito mais baixo que a gua obtida por destilao.

6- Banho-maria

um aparelho regulado por termostato, sendo, portanto, necessrio o controle


dirio da temperatura atravs de termmetro mantido no aparelho em local apropriado.
Quando regulado a 37oc utilizado para manter reaes que se processam a esta
temperatura, simulando o corpo humano. E a 56 oc utilizado para a inativao de
substncias termossensveis presentes no sangue e que podem interferir em algumas
reaes imunolgicas.
No manuseio do banho-maria, devemos observar:
O volume de gua dever ser suficiente para cobrir a resistncia eltrica;
O volume de gua do banho dever ser sempre igual ou superior ao dos lquidos
dos tubos;
O controle de temperatura, atravs de termmetro, dever ser diariamente
registrado;
Os tubos somente podero ser incubados quando a temperatura desejada for
alcanada e estabilizada;
Fazer regularmente a limpeza do aparelho.

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7- Microscpio

Utilizado nos diversos setores do laboratrio para a identificao de estruturas,


clulas, microrganismos invisveis a olho nu. O aparelho ser estuda do em um captulo
parte.

8- Espectrofotmetro

o aparelho utilizado no setor de bioqumica para realizao das dosagens


bioqumicas, como a de glicose e a de colesterol. Atravs do aparelho podemos medir a
energia absorvida por uma soluo corada contendo a substncia que se quer dosar.

9- Contador eletrnico de clulas


o aparelho utilizado na hematologia para a contagem automatizada de clulas
sanguneas na realizao do hemograma.

10- Fotmetro de chama

o aparelho utilizado para dosagens de ons como o sdio e o potssio.

11- Geladeira

Utilizada no laboratrio com o objetivo de conservar reagentes e amostras


biolgicas.

12- Balana

Utilizada na pesagem de substncias diversas para o preparo de reagentes.

13- Autoclave

o aparelho destinado esterilizao de materiais como meios de cultura, placas


de petri e material contaminado, atravs do calor pelo vapor sob presso.

14- Microcentrfuga

uma centrfuga especial para a realizao do hematcrito, um dos parmetros


analisados no hemograma. A microcentrfuga serve especificamente para a centrifugao
dos tubos capilares utilizados no exame. Os cuidados para com o aparelho so os
mesmos para com a centrfuga convencional.

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