Efek Anti-stres Teh Hijau dengan Menurunkan Kafein pada Manusia: Sebuah Studi Perintis

Keiko Unno1) 2), Hiroshi Yamada3), Kazuaki Iguchi1), Hitoshi Ishida4), Yasunori Iwao5), Akio
Morita6), Yoriyuki Nakamura2)

1) Departemen Neurofisiologi, Sekolah Ilmu Farmasi, Universitas Shizuoka 2) Pusat Ilmu Teh, Divisi
Pascasarjana Ilmu Gizi dan Lingkungan, Universitas Shizuoka 3) Divisi Evaluasi Obat & Informatika,
Sekolah Ilmu Farmasi, Universitas Shizuoka 4) Kimia Obat-obatan dari Produk Alami, Sekolah Ilmu
Farmasi, Universitas Shizuoka 5) Laboratorium Teknik Farmasi, Sekolah Ilmu Farmasi, Universitas
Shizuoka 6) Fisiologi Tanaman Fungsional, Fakultas Pertanian, Universitas Shizuoka
Dirilis pada J-STAGE 20170601

Abstrak

Theanine, asam amino dalam teh, memiliki efek anti-stres yang signifikan pada hewan dan manusia.
Namun, efek theanine terhambat oleh katekin tipe kafein dan gallate, yang merupakan komponen
utama dalam teh. Kami meneliti efek anti stres teh hijau dengan menurunkan kafein, teh hijau kafein
rendah, pada manusia. Desain penelitian adalah perbandingan kelompok buta tunggal dan peserta
(n = 20) secara acak ditugaskan ke kelompok teh rendah kafein atau plasebo. Teh ini (500 mL / d),
yang dielusi dengan air suhu kamar, diambil dari 1 minggu sebelum praktik farmasi dan dilanjutkan
selama 10 d pada periode praktek. Para peserta menelan theanine (sekitar 15 mg / d) pada teh hijau
kafein rendah. Untuk menilai kegelisahan peserta, uji kecemasan kecemasan negara digunakan
sebelum praktik farmasi. Tekanan subjektif siswa secara signifikan lebih rendah pada kelompok
kafein rendah daripada kelompok plasebo selama praktik farmasi. Tingkat aktivitas -amilase saliva,
penanda stres, meningkat secara signifikan setelah praktik apotek sehari-hari pada kelompok
plasebo namun tidak pada kelompok kafein rendah. Hasil ini menunjukkan bahwa konsumsi teh
hijau kafein rendah menekan respons stres berlebihan siswa. Penelitian ini didaftarkan di Jaringan
Informasi Medis Rumah Sakit Universitas (ID No. UMIN14942).
Halaman atas

Kehidupan modern menyebabkan stres pada banyak orang. Akumulasi stres dapat meningkatkan
risiko gangguan mood dan kecemasan.1) Intervensi perubahan akibat stres dengan suplemen
makanan dianggap bermanfaat untuk mencegah akumulasi stres, dan menjadi strategi terapeutik
potensial untuk kehidupan yang sehat. Teh hijau (Camellia sinensis (L.) KUNTZE) adalah minuman
paling populer di Jepang dan negara-negara Asia. Theanine (L-theanine), asam amino utama pada
daun teh dan komponen umami manis penting teh hijau, memiliki efek anti-stres yang signifikan
pada hewan dan manusia.2-5) Namun, efek anti-stres teh hijau adalah belum diketahui. Teh hijau
terutama terdiri dari katekin, kafein, dan asam amino. Katekin, terutama epigallocatechin gallate
(EGCG), memiliki aktivitas antioksidan dan antiinflamasi yang manjur yang memperkuat efek
menguntungkan teh hijau terhadap kesehatan.6-8) Kafein adalah antagonis non-selektif reseptor
adenosin. Sejumlah penelitian telah mengindikasikan bahwa asupan kafein harian sehari-hari
dikaitkan dengan tidur yang terganggu.9) Baru-baru ini kami menemukan bahwa kafein dan EGCG
menekan efek anti-stres dari theanine sementara epigallocatechin (EGC) dan arginine (Arg),
komponen lain dalam warna hijau Teh, mempertahankan efek ini.10) Hal ini menunjukkan bahwa
keseimbangan antara theanine, kafein, catechin dan Arg sangat penting bagi teh hijau untuk
mengekspresikan efek anti-stresnya. Oleh karena itu, kami menyiapkan teh hijau dengan kadar
kafein rendah, teh hijau kafein rendah. Kafein turun sampai 1/4-1 / 5 dari tingkat daun teh yang
tidak diobati.10) Selanjutnya, untuk mengurangi EGCG, kami menilai kinetika suhu-sensitif dari elusi
air masing-masing komponen teh. Kelarutan EGCG dan kafein rendah pada suhu kamar air (EGCG <5
mg / mL dan kafein 22 mg / mL, masing-masing), sedangkan pada theanine tinggi (370 mg / mL).
Ketika teh hijau dielusi dengan air suhu ruangan, komposisi eluate berubah dari yang dielusi dengan
air panas. 11,12) Konsumsi teh hijau rendah kafein yang direndam dalam air suhu kamar secara
signifikan menekan respons stres pada suhu liar. Jenis tikus.10)

Dalam penelitian ini, kami meneliti pengaruh teh hijau kafein rendah terhadap respons stres pada
mahasiswa tahun ke 5 di sekolah sains farmasi. Mereka ditugaskan untuk berlatih di luar universitas
seperti di rumah sakit atau apotek pengeluaran. Komitmen di lingkungan baru memberikan kondisi
stres bagi siswa muda. Aktivitas -amilase saliva (sAA), enzim rongga mulut, diukur sebagai penanda
stres.13) Dua sistem tubuh utama terlibat dalam respon stres, sistem saraf otonom (ANS) dan sumbu
hipotalamus-hipofisis-adrenal. Pengukuran sAA telah ditunjukkan sebagai alat yang berguna untuk
memantau reaktivitas ANS terhadap stres.13) Enzim ini meningkat dengan cepat sebagai respons
terhadap stres fisiologis dan psikososial.14-17) Kami sebelumnya telah menjelaskan bahwa konsumsi
theanine secara efektif menekan sAA dan tekanan subjektif selama Praktik farmasi.5) Dalam
penelitian ini, kami meneliti efek anti-stres dari teh hijau kafein rendah pada manusia untuk
mengklarifikasi fungsi teh hijau.
Halaman atas
MATERI DAN METODE
Persiapan Teh Hijau Kafein Rendah

Daun teh (Camellia sinensis (L.) KUNTZE) dikumpulkan di Shizuoka, Jepang. Daun teh segar diolah
dengan shower air panas pada suhu 95 C selama 180 s seperti yang dijelaskan sebelumnya.10)
Kemudian daun teh dikeringkan melalui proses pembuatan standar. Kami menyebut teh hijau
rendah kafein ini.

Satu kantong teh teh rendah kafein atau plasebo (jelai) (3 g teh di dalam tas) direndam dalam 500
mL air suhu kamar. Air ledeng digunakan dalam percobaan ini. Teh jelai tidak mengandung kafein
dan sangat sedikit katekin.18-20) Selain itu, theanine adalah asam amino unik yang terkandung
terutama di tanaman teh (Camellia sinensis) .21) Para peserta menyiapkan teh kafein atau plasebo
rendah setiap pagi dan menelannya sampai malam. Kue teh dibiarkan di air sampai malam hari.
Begitu juga, setelah berlatih apotek setiap hari, para peserta meminum teh ini.

Untuk pengukuran komponen teh dalam eluate, daun teh teh hijau rendah kafein (3 g) dididihkan
dalam 500 mL air suhu kamar selama 0,5 atau 5 jam dan kadang diaduk.
Pengukuran Komponen Teh dengan HPLC

Eluate teh hijau kafein rendah diukur dengan HPLC seperti yang dijelaskan sebelumnya.10)
Singkatnya, catechin dan kafein dalam eluates diukur dengan HPLC (SCL-10Avp, Shimadzu, Jepang;
kolom Develosil yang dikemas ODS-HG-5, 150 4,6 mm, Nomura Chemical Co., Ltd., Jepang) sesuai
dengan metode Horie et al.22) Katekin dan kafein diukur pada 280 nm. Asam amino bebas pada
daun teh diukur dengan HPLC seperti yang dijelaskan di atas dengan menggunakan homoserine
sebagai standar internal.23) Asam amino terdeteksi pada panjang gelombang eksitasi 340 nm dan
pada 450 nm panjang gelombang emisi (detektor UV RF-535, Shimadzu, Kyoto, Jepang). Standar
deviasi standar (RSD%) presisi dan pengulangan adalah <5,0%. Pemulihan katekin, kafein, dan asam
amino bebas masing-masing adalah 99 4, 98 4, dan 98 3%.

Peserta

Dua puluh siswa kelas 5 yang sehat di Universitas Shizuoka, yang berpartisipasi dalam eksperimen
tersebut, secara acak dibagi menjadi dua kelompok dengan jenis kelamin yang cocok: kafein rendah
(n = 10, 5 pria dan 5 wanita; usia rata-rata 23,2 0,6 y) dan Plasebo (n = 10, 5 pria dan 5 wanita; usia
rata-rata 22,4 0,2 y) melalui amplop tertutup untuk menerima kantung teh rendah kafein atau
plasebo. Para peserta ditugaskan untuk berlatih di luar universitas, di rumah sakit atau apotek
pengeluaran, selama 11 minggu. Program latihan 10 d pertama dianalisis, karena hari-hari ini
dianggap paling menegangkan. Tak satu pun dari peserta menunjukkan penyakit akut atau kronis,
asupan obat biasa, atau kebiasaan merokok. Mereka diinstruksikan untuk minum terutama teh uji,
dan untuk tidak mengkonsumsi minuman kayaan dan kafein seperti teh hijau, kopi, dan teh hitam
selama percobaan berlangsung. Mereka bisa minum air dengan bebas, tapi mereka tidak
mengonsumsi alkohol di malam hari. Penelitian ini dilakukan sesuai dengan Deklarasi Helsinki dan
Pedoman Etis untuk Penelitian Medis dan Kesehatan yang Melibatkan Subjek Manusia
(Pemberitahuan Publik Kementerian Pendidikan, Kebudayaan, Olahraga, Ilmu Pengetahuan dan
Teknologi dan Kementerian Kesehatan, Perburuhan dan Kesejahteraan, 2008) . Protokol penelitian
telah disetujui oleh Komite Etika Universitas Shizuoka (No. 26-8). Semua peserta menerima informasi
lisan dan tulisan tentang penelitian tersebut dan menandatangani sebuah formulir informed consent
sebelum memasuki studi. Penelitian ini didaftarkan di Jaringan Informasi Medis Rumah Sakit
Universitas (UMIN) (nomor registrasi No. UMIN14942). Periode penelitiannya adalah dari bulan
Agustus hingga September 2014.
Prosedur

Penelitian ini merupakan desain pembanding kelompok dan partisipan secara acak diberikan pada
kelompok teh rendah kafein atau plasebo. Para peserta tidak tahu apakah mereka mengkonsumsi
teh rendah kafein atau plasebo, karena mereka tidak memiliki informasi tentang teh hijau rendah
kafein seperti warna, aroma dan rasa. Asupan teh rendah kafein atau plasebo diambil dari 1 minggu
sebelum praktik farmasi dan dilanjutkan selama 10 minggu ke masa praktek, dengan total 17 d.
Untuk menilai kegelisahan peserta, tes kecemasan kewaspadaan negara (STAI) test (Japanese STAI
Form X-1, Sankyobo, Kyoto, Jepang) dilakukan sebelum praktik farmasi.

Kuesioner yang memasukkan umpan balik mengenai kondisi fisik, stres subjektif dan emosi prestasi
diberikan selama 10 hari setelah latihan setiap hari. Kondisi fisik peserta diberi skala ordinal (5,
sangat bagus; 4, bagus; 3, normal; 2, sedikit buruk; 1, buruk). Tegangan subjektif dievaluasi dengan
menggunakan skala analog visual (VAS: 0-10) dari sangat santai hingga sangat stres. Prestasi emosi
diberi skala ordinal (5, benar-benar; 4, lebih baik; 3, sedikit lebih baik; 2, sedikit lebih buruk; 1, jauh
lebih buruk) .5) Jam tidur juga tercatat.
Pengukuran sAA

Untuk menilai respons stres fisiologis, sAA diukur dengan menggunakan sistem kolorimetrik (Nipro
Co., Osaka, Jepang) .24) Secara singkat, substrat 2-kloro-4-nitrofenil-4-O--D-
galaktopiranosilmetalida terhidrogenasi oleh Amilase saliva dengan adanya maltosa, penghambat
kompetitif. Reaksi ini mengubah warna strip reagen dari putih menjadi kuning, dan perubahan
dihitung dengan menggunakan monitor amilase saliva. Satu unit aktivitas (U) per massa enzim
didefinisikan sebagai produksi 1 mol gula reduksi, maltosa, dalam 1 menit (NC-IUBMB, 1992).

Air liur dikumpulkan dua kali sehari, pagi hari setelah bangun tidur (pra-stres) dan di malam hari
setelah praktik farmasi (post-stress), selama 10 hari selama latihan. Untuk menetapkan garis dasar
sAA sebelum praktik farmasi, sAA peserta diukur setiap pagi dan sore hari selama 7 hari selama
kehidupan rutin di universitas. Pengukuran dilakukan sebelum praktik farmasi. Sebelum
pengambilan sampel, peserta mencuci mulut dengan air. Setelah air liur dikumpulkan selama 30
detik dengan menggunakan tip sampling, masing-masing peserta mengukur sAA mereka sendiri
setiap pagi dan sore hari selama 17 hari (termasuk hari-hari yang belum ditetapkan (yaitu akhir
pekan), yang pengukurannya tidak termasuk dalam analisis).
Analisis statistik

Semua hasil dinyatakan sebagai mean standard error mean (S.E.M.). Pengaruh stres terhadap sAA
dievaluasi dengan menggunakan ANOVA satu arah diikuti oleh uji post hoc Bonferroni untuk
beberapa perbandingan. ANOVA dan koefisien korelasi diperoleh dengan menggunakan program
analisis statistik (StatPlus, AnalystSoft Inc., versi online). Dalam setiap analisis, nilai p <0,05 dianggap
signifikan secara statistik.
Halaman atas
HASIL
Isi Theanine, Kafein dan Katekin di Teh Hijau Kafein Rendah

Kandungan kafein sangat rendah dalam eluate yang berasal dari teh hijau kafein rendah seutuhnya
0,5 dan 5,0 jam sedangkan kandungan katekin dan theanin tidak berbeda secara signifikan, atau
dipengaruhi oleh periode seduhan (Tabel 1). EGC adalah catechin yang paling melimpah dalam
eluate, diikuti oleh EGCG yang merupakan catechin tipe gallate. Katekin tipe non-gallate lainnya
seperti epicatechin (EC) dan catechin ((+) C) juga ditemukan dalam eluate. Jumlah teh di kafein
rendah kafein menyumbang setengah dari total asam amino, sekitar 21 mg / L, diikuti oleh Arg (5,0
mg / L). Para peserta menelan teh hijau kafein rendah (714 79 mL / d) atau teh plasebo (729 111
mL / d). Peserta yang mengkonsumsi teh hijau kafein rendah mengkonsumsi 15 mg of theinine dan
3,6 mg Arg per hari.

The Contents of Caffeine, Catechins and Amino Acids in the Eluate of Low-Caffeine Green
Tea 1. Table
Low-caffeine green tea Caffeine Catechins (mg/L)
(3g/500mL) (mg/L) EGCG EGC ECG EC CG (+)C Total
0.5h 0.43 13.1 210 0.06 6.1 0 5.8 235
5.0h 1.08 14.9 236 0.04 9.5 0 7.1 268
Low-caffeine green tea Caffeine Catechins (mg/L)
(3g/500mL) (mg/L) EGCG EGC ECG EC CG (+)C Total
Low-caffeine green tea Free amino acids (mg/L)
(3g/500mL) Theanine Glu Arg Asp Gln Ser Ala Asn GABA
0.5h 20 4.6 5.5 3 3.7 1.5 0.6 0.2 0.4
5.0h 22 4.5 4.5 3 5.3 1.3 0.6 0.3 0.5
Teh hijau kafein rendah (3 g) direndam dalam 500 mL air suhu kamar selama 0,5 atau 5,0
jam. EGCG, (-) - epigallocatechin gallate; EGC, (-) - epigallocatechin; EKG, (-) - epicatechin
gallate; EC, (-) - epicatechin; CG, (-) - catechin gallate; (+) C, (+) - catechin; Glu, asam
glutamat; Arg, arginin; Asp, asam aspartat; Gln, glutamin; Ser, serin; Ala, alanin; Asn,
asparagin; GABA, asam -aminobutyric.

Ara. 1. Aktivitas -Amilase saliva (sAA) Peserta Diberikan di Pagi hari setelah Waking Up (Pra-stres
sAA, Bar Putih) dan di Sore Malam (Pasca-stres sAA, Bar Hitam)

Para peserta mengkonsumsi teh rendah kafein atau plasebo (jelai) selama kehidupan sehari-hari di
universitas (a), dan selama praktik farmasi (b). Skor harian stres subjektif selama praktik farmasi
dibandingkan antara plasebo dan kelompok kafein rendah (c). Data dinyatakan sebagai mean
S.E.M. (* P <0,05; satu arah ANOVA).

Dengan mempertimbangkan variabilitas individu, nilai rata-rata sAA pra dan pasca stres dari masing-
masing peserta dianalisis. Peserta sAA pre-stress yang lebih tinggi menunjukkan sAA post-stress yang
lebih tinggi pada kelompok plasebo dibandingkan kelompok kafein rendah (plasebo, y = 1,35x + 2,45,
R = 0,900 dan p = 0,0004; rendah kafein, y = 1,09x + 6,86, R = 0,805 dan p = 0,009; Gambar 2a),
sedangkan distribusi sAA pra-stres tidak berbeda antara kelompok kafein rendah dan plasebo. Hal ini
menunjukkan bahwa konsumsi teh hijau kafein rendah menekan kenaikan sAA pasca stres. Korelasi
antara stress sAA pasca stres dan stres subyektif cenderung tinggi pada kelompok plasebo namun
tidak pada kelompok kafein rendah (Gambar 2b, plasebo, p = 0,085; rendah kafein, p = 0,908).
Tingkat penyerapan theanine diperkirakan dari volume minum teh hijau kafein rendah di setiap
peserta. Peserta yang menelan tingkat yang lebih tinggi dari theanine cenderung menunjukkan SAA
post-stress yang lebih rendah. Namun, tidak ada korelasi antara stres subjektif dan konsumsi asin
yang diamati (Gambar 2c).
Ara. 2. Korelasi antara Aktivitas sAA, Stres Subyektif dan Penyusupan Theanine pada kelompok
Placebo dan Low-Caffeine

(A), SAA pra-stres (sAA di pagi hari sebelum praktik farmasi sehari-hari) dan sAA pasca stres (sAA di
malam hari setelah praktik farmasi sehari-hari); (B), stress sAA pasca stres dan stres subyektif. (C)
Korelasi antara asupan asin yang diperkirakan dari volume konsumsi dan stress sAA post-stress atau
stres subyektif pada kelompok rendah kafein. Setiap titik sAA mewakili nilai rata-rata setiap peserta
yang dihitung dari sAA selama praktik farmasi. Data dinyatakan sebagai mean S.E.M

Nilai STAI, Prestasi Emosi dan Waktu Tidur

Rata-rata nilai STAI diperiksa untuk menilai kegelisahan berdasarkan standar penilaian.
Tidak ada perbedaan antara kedua kelompok (plasebo 42,0 3,2; rendah kafein 41,0 2,3).
Meskipun tingkat sAA sangat bervariasi di antara peserta di bawah tekanan, sAA pra dan
pasca-stres berkorelasi dengan nilai STAI (Gambar 3a, b). Peserta dengan nilai STAI yang
lebih tinggi menunjukkan sAA post-stress yang lebih tinggi pada plasebo dibandingkan pada
kelompok kafein rendah (plasebo, p = 0,064; rendah kafein, p = 0,489). Asupan asin tidak
berkorelasi dengan nilai STAI (Gambar 3c).

Nilai STAI, Prestasi Emosi dan Waktu Tidur

Rata-rata nilai STAI diperiksa untuk menilai kegelisahan berdasarkan standar penilaian.
Tidak ada perbedaan antara kedua kelompok (plasebo 42,0 3,2; rendah kafein 41,0 2,3).
Meskipun tingkat sAA sangat bervariasi di antara peserta di bawah tekanan, sAA pra dan
pasca-stres berkorelasi dengan nilai STAI (Gambar 3a, b). Peserta dengan nilai STAI yang
lebih tinggi menunjukkan sAA post-stress yang lebih tinggi pada plasebo dibandingkan pada
kelompok kafein rendah (plasebo, p = 0,064; rendah kafein, p = 0,489). Asupan asin tidak
berkorelasi dengan nilai STAI (Gambar 3c).
Emosi prestasi dievaluasi oleh peserta sebagai skala ordinal pada akhir latihan sehari-hari.
Tidak ada perbedaan antara rata-rata kedua kelompok (plasebo 3,53 0,20; rendah kafein
3,59 0,22). Namun, peserta dengan emosi berprestasi lebih rendah cenderung menunjukkan
sAA post-stress yang lebih tinggi pada kelompok plasebo (Gambar 3d), menunjukkan bahwa
emosi negatif juga mempengaruhi sAA. Rata-rata waktu tidur tidak berbeda antara kedua
kelompok (plasebo 6,45 0,14; rendah kafein 6,36 0,11) selama praktik farmasi.

Perbedaan praktik farmasi di rumah sakit atau apotek disperse tidak berpengaruh pada
parameter ini (data tidak ditunjukkan).

DISKUSI
Pengaruh Teh Hijau Rendah-Kafein pada Manusia

Penelitian ini dilakukan untuk mengeksplorasi efek anti stres teh hijau kafein rendah pada manusia
namun memiliki beberapa keterbatasan. Pertama, penelitian ini adalah perbandingan kelompok
buta tunggal dan memiliki ukuran peserta kecil (n = 20). Kedua, efek teh hijau rendah kafein hanya
dibandingkan dengan teh plasebo (barley). Ketiga, kami tidak mengukur komponen semua sampel
teh yang disiapkan setiap hari oleh peserta.

Teh jelai tidak mengandung kafein, katekin atau theanin, 18-21) sehingga merupakan plasebo yang
sesuai untuk perbandingan pengaruh teh hijau kafein rendah. Selain itu, semua peserta tidak
mengenal warna, rasa dan aroma teh hijau kafein rendah, dan tidak dapat menilai apakah teh yang
mereka minum teh teh rendah kafein atau teh plasebo (barley) rendah. Oleh karena itu, plasebo
mungkin memiliki sedikit efek pada data sAA yang diukur. Salah satu masalah yang mungkin terjadi
adalah konsentrasi komponen teh antar peserta mungkin berbeda. Namun, data eluate
menunjukkan bahwa katekin dan asam amino telah dielusi sepenuhnya dari daun teh pada 0,5 jam
(Tabel 1), menunjukkan bahwa kandungan komponen teh serupa dengan kondisi elusi yang sama,
termasuk volume daun teh dan air yang sama. , Dan suhu yang sama. Dengan demikian, kandungan
komponen teh yang diperkirakan dari volume yang tertelan oleh masing-masing peserta mungkin
mendekati nilai sebenarnya. Oleh karena itu, terlepas dari keterbatasan ini, efek anti-stres teh hijau
rendah kafein yang diperoleh dalam percobaan ini dianggap dapat diandalkan.

Kami sebelumnya melaporkan efek anti-stres dari theanine pada 200 mg, dua kali sehari pada
peserta selama praktik farmasi (400 mg / hari, 7-9 mg / kg / d) .5) Dosis ini telah diputuskan dari data
sebelumnya.3 , 26,27) Namun, dalam penelitian ini, kami menunjukkan bahwa efek anti-stres yang
signifikan diamati pada peserta yang tertelan ca. 15 mg / d (0,3 mg / kg / d) dari theanine dari teh
hijau kafein rendah. Pada tikus yang menelan theanine, hipertrofi adrenal, respons stres khas pada
organisme hidup, secara signifikan ditekan setidaknya pada 10 g / mouse / d (0,3 mg / kg) dalam
kondisi stres.4) Hasil ini menunjukkan bahwa dosis yang lebih rendah dari theanine , Setidaknya 0,3
mg / kg / hari, dapat menunjukkan efek anti-stres pada manusia dan tikus.

Karena Arg juga memiliki efek anti-stres yang tinggi pada tikus, 10) aksi kooperatif theanine dan Arg
dapat menyebabkan efek anti-stres pada dosis yang lebih rendah daripada tindakan tunggal
theanine. Arg dianggap sebagai pengatur penting dalam sistem saraf pusat melalui sintesis oksida
nitrat28) dan memiliki fungsi vital dalam tekanan fisik dan kecemasan.29) Efek vasokonstriksi kafein
dihilangkan bila dikombinasikan dengan theanine, 30) yang menunjukkan bahwa kedua Arg Dan
theanin secara kooperatif mempengaruhi aliran darah serebral.
Hubungan antara Theanine dan Komponen Teh Lainnya

Meskipun efek dari theanine antagonis oleh kafein, 31) theanine benar-benar dapat menekan efek
kafein karena kandungan theanine 20 kali lebih tinggi dari pada kafein dalam eluate teh hijau kafein
rendah (Tabel 1). Efek kafein secara signifikan ditekan oleh 10 kali lipat lebih tinggi dari theanine
pada tikus.10) Theanin yang dimasukkan ke dalam otak mengurangi pelepasan glutamat (Glu) dari
presynapse ke celah sinaptik dengan bekerja dengan transporter glutamin (Gln) Dan menghambat
penggabungan Gln ekstraselular ke dalam neuron, yang menekan konversi Gln to Glu oleh
glutaminase.32,33) Memang, di hippocampus tikus yang menelan theanine (6 mg / kg) dalam air
minum selama 2 minggu, tingkat Glu berkurang secara signifikan, dan sebaliknya, tingkat asam -
aminobutyric (GABA) meningkat.34) GABA adalah penghambat neurotransmiter utama dalam sistem
saraf pusat mamalia, oleh karena itu, theanine menggunakan efek anti-stres, sebagian, melalui
Modulasi antara GABA dan Glu, neurotransmiter eksitasi utama.

EGCG telah dilaporkan untuk menekan over-ekspresi jalur GABA pada model mouse Down
Syndrome35) dan untuk menghambat GABA36) dengan memodulasi reseptor GABAA.37) Namun,
kandungan EGC 16 kali lipat lebih tinggi daripada EGCG dalam eluat Dibuat dengan air suhu kamar
(Tabel 1). Efek EGCG pada respons stres ditekan oleh EGCG 20 kali lipat lebih banyak dan dua kali
lipat lebih banyak theanine, 10) menunjukkan bahwa efek EGCG terbatas saat para peserta
meminum teh hijau yang telah dielusi dengan air suhu kamar. Secara bersamaan, penting untuk
menilai efek anti-stres teh hijau, untuk mempertimbangkan bahwa kandungan theanine, Arg dan
EGC relatif lebih tinggi daripada kandungan kafein dan EGCG. Pekerjaan lebih lanjut yang membahas
mekanisme modulasi potensial komponen teh hijau dibenarkan.
Efek Tertelan Teh Hijau Kafein Rendah pada SAA dan Trait Anxiety

SAA pra dan pasca stres sangat bervariasi di antara peserta yang mengalami stres dan peserta
dengan sAA pre-stress yang lebih tinggi menunjukkan sAA post-stress yang lebih tinggi. Nilai STAI,
yaitu, sifat kecemasan masing-masing peserta, mempengaruhi tingkat sAA. Penelanan teh hijau
rendah kafein menekan sAA tapi tidak pada STAI, sehingga korelasi yang erat antara sAA dan STAI
diamati pada plasebo namun tidak pada kelompok kafein rendah. Respon sAA mungkin lebih sensitif
terhadap konsumsi teh hijau bertingkat rendah daripada respons psikologis seperti stres subjektif
dan emosi prestasi.

Aktivitas sAA meningkat sebagai respons terhadap stres dan kafein, 38) yang menunjukkan validitas
teh hijau kafein rendah. Hasil ini menunjukkan bahwa konsumsi teh hijau rendah kafein secara
efektif menekan respons stres yang berlebihan pada peserta sAA dan STAI dengan tekanan tinggi
yang sensitif terhadap stres. Pada orang yang rentan stres, intervensi dengan suplemen diet
mungkin merupakan strategi potensial untuk menekan stres yang berlebihan dan mempertahankan
kehidupan yang sehat. Uji coba klinis skala besar tambahan diperlukan untuk menentukan efek teh
hijau kafein rendah. Selain itu, karena setiap sensitivitas stres berbeda di antara individu, analisis
terperinci yang didasarkan pada perbedaan individual diperlukan.

KESIMPULAN
Kami memeriksa apakah konsumsi teh hijau rendah kafein mampu menekan respons stres pada
siswa. Tekanan subjektif siswa secara signifikan lebih rendah pada kelompok kafein rendah daripada
kelompok plasebo selama praktik farmasi. Tingkat sAA meningkat secara signifikan setelah praktik
apotek sehari-hari di kelompok plasebo namun tidak pada kelompok kafein rendah. Menelan teh
hijau dengan menurunkan kafein dapat menekan stres berlebihan pada siswa.

Ucapan Terima Kasih

Penulis mengucapkan terima kasih kepada semua peserta penelitian. Studi penelitian ini didukung
oleh Grant-in-Aid untuk Penelitian Ilmiah (KAKENHI 23617014) dan Grant untuk penelitian yang
dipromosikan secara khusus dari Universitas Shizuoka. Penulis sangat berterima kasih kepada Dr. M.
Hara di University of Chicago atas pembahasannya yang berharga.
Konflik kepentingan

Penulis menyatakan tidak ada benturan kepentingan.

REFERENCES
1) Aubry JM. CRF system and mood disorders. J. Chem. Neuroanat., 54, 2024 (2013).
2) Unno K, Fujitani K, Takamori N, Takabayashi F, Maeda K, Miyazaki H, Tanida N, Iguchi
K, Shimoi K, Hoshino M. Theanine intake improves the shortened lifespan, cognitive
dysfunction and behavioural depression that are induced by chronic psychosocial stress in
mice. Free Radic. Res., 45, 966974 (2011).
3) Kimura K, Ozeki M, Juneja LR, Ohira H. L-Theanine reduces psychological and
physiological stress responses. Biol. Psychol., 74, 3945 (2007).
4) Unno K, Iguchi K, Tanida N, Fujitani K, Takamori N, Yamamoto H, Ishii N, Nagano H,
Nagashima T, Hara A, Shimoi K, Hoshino M. Ingestion of theanine, an amino acid in tea,
suppresses psychosocial stress in mice. Exp. Physiol., 98, 290303 (2013a).
5) Unno K, Tanida N, Ishii N, Yamamoto H, Iguchi K, Hoshino M, Takeda A, Ozawa H,
Ohkubo T, Juneja LR, Yamada H. Anti-stress effect of theanine on students during pharmacy
practice: positive correlation among salivary -amylase activity, trait anxiety and subjective
stress. Pharmacol. Biochem. Behav., 111, 128135 (2013b).
6) Oliveira MR, Nabavi SF, Daglia M, Rastrelli L, Nabavi SM. Epigallocatechin gallate and
mitochondriaA story of life and death. Pharmacol. Res., 104, 7085 (2016).
7) Afzal M, Safer AM, Menon M. Green tea polyphenols and their potential role in health
and disease. Inflammopharmacology, 23, 151161 (2015).
8) Molino S, Dossena M, Buonocore D, Ferrari F, Venturini L, Ricevuti G, Verri M.
Polyphenols in dementia: From molecular basis to clinical trials. Life Sci., 161, 6977 (2016).
9) Clark I, Landolt HP. Coffee, caffeine, and sleep: A systematic review of epidemiological
studies and randomized controlled trials. Sleep Med. Rev., 31, 7078 (2017).
10) Unno K, Hara A, Nakagawa A, Iguchi K, Ohshio M, Morita A, Nakamura Y. Anti-stress
effects of drinking green tea with lowered caffeine and enriched theanine, epigallocatechin
and arginine on psychosocial stress induced adrenal hypertrophy in mice. Phytomedicine, 23,
13651374 (2016).
11) Shimotoku T, Ichikawa H, Anan T, Takayanagi H, Ikegaya K. Relation between amounts
of some ingredients extracted from green tea and brewing conditions. Tea Res. J. (Chagyo
Kenkyu Hokoku), 55, 4350 (1982).
12) Monobe M, Ema K, Tokuda Y, Maeda-Yamamoto M. Effect on the epigallocatechin
gallate/epigallocatechin ratio in a green tea (Camellia sinensis L.) extract of different
extraction temperatures and its effect on IgA production in mice. Biosci. Biotechnol.
Biochem., 74, 25012503 (2010).
13) Nater UM, Rohleder N. Salivary alpha-amylase as a non-invasive biomarker for the
sympathetic nervous system: current state of research. Psychoneuroendocrinology, 34, 486
496 (2009).
14) Almela M, Hidalgo V, Villada C, van der Meij L, Espn L, Gmez-Amor J, Salvador A.
Salivary alpha-amylase response to acute psychosocial stress: the impact of age. Biol.
Psychol., 87, 421429 (2011).
15) Nater UM, Rohleder N, Schlotz W, Ehlert U, Kirschbaum C. Determinants of the diurnal
course of salivary alpha-amylase. Psychoneuroendocrinology, 32, 392401 (2007).
16) Nater UM, La Marca R, Florin L, Moses A, Langhans W, Koller MM, Ehlert U. Stress-
induced changes in human salivary alpha-amylase activityassociations with adrenergic
activity. Psychoneuroendocrinology, 31, 4958 (2006).
17) Nater UM, Rohleder N, Gaab J, Berger S, Jud A, Kirschbaum C, Ehlert U. Human
salivary alpha-amylase reactivity in a psychosocial stress paradigm. Int. J. Psychophysiol.,
55, 333342 (2005).
18) Kuribara H. Caffeine intake in the daily life: Mechanism of action and safety assessment.
Bull. Tokyo Univ. Grad. Sch. Social Welfare, 6, 109125 (2016).
19) Kajimoto G, Onitake N, Okuda H, Murakami C. Antioxidant activity of barley tea and
their composition. Nippon Shokuhin Kagaku Kaishi, 46, 6774 (1999).
20) Kajimoto G. Chemical composition of barley tea. Nippon Shokuhin Kagaku Kaishi, 47,
916 (2000).
21) Isemura M. Structure and physiological activity of tea component. Health beneficial
functions and development of tea goods. (Isemura M. ed.). CMC Publishing Co., Ltd., Tokyo,
pp. 1619 (2006).
22) Horie H, Maeda-Yamamoto M, Ujihara T, Kohata K. Extraction of tea catechins for
chemical analysis. Tea Res. J. (Chagyo Kenkyu Hokoku), 94, 6064 (2002).
23) Goto T, Horie H, Mukai T. Analysis of major amino acids in green tea by high-
performance liquid chromatography coupled with OPA precolumn derivatization. Tea Res. J.
(Chagyo Kenkyu Hokoku), 77, 2933 (1993).
24) Yamaguchi M, Kanemori T, Kanemaru M, Takai N, Mizuno Y, Yoshida H. Performance
evaluation of salivary amylase activity monitor. Biosens. Bioelectron., 20, 491497 (2004).
25) Wingenfeld K, Schulz M, Damkroeger A, Philippsen C, Rose M, Driessen M. The
diurnal course of salivary alpha-amylase in nurses: an investigation of potential confounders
and associations with stress. Biol. Psychol., 85, 179181 (2010).
26) Lyon MR, Kapoor MP, Juneja LR. The effects of L-theanine (Suntheanine) on objective
sleep quality in boys with attention deficit hyperactivity disorder (ADHD): a randomized,
double-blind, placebo-controlled clinical trial. Altern. Med. Rev., 16, 348354 (2011).
27) Lu K, Gray MA, Oliver C, Liley DT, Harrison BJ, Bartholomeusz CF, Phan KL, Nathan
PJ. The acute effects of L-theanine in comparison with alprazolam on anticipatory anxiety in
humans. Hum. Psychopharmacol., 19, 457465 (2004).
28) Virarkar M, Alappat L, Bradford PG, Awad AB. L-Arginine and nitric oxide in CNS
function and neurodegenerative diseases. Crit. Rev. Food Sci. Nutr., 53, 11571167 (2013).
29) Gulati K, Ray A. Differential neuromodulatory role of NO in anxiety and seizures: an
experimental study. Nitric Oxide, 43, 5561 (2014).
30) Dodd FL, Kennedy DO, Riby LM, Haskell-Ramsay CF. A double-blind, placebo-
controlled study evaluating the effects of caffeine and L-theanine both alone and in
combination on cerebral blood flow, cognition and mood. Psychopharmacology (Berl.), 232,
25632576 (2015).
31) Kakuda T, Nozawa A, Unno T, Okamura N, Okai O. Inhibiting effects of theanine on
caffeine stimulation evaluated by EEG in the rat. Biosci. Biotechnol. Biochem., 64, 287293
(2000).
32) Kakuda T, Hinoi E, Abe A, Nozawa A, Ogura M, Yoneda Y. Theanine, an ingredient of
green tea, inhibits [3H] glutamine transport in neurons and astroglia in rat brain. J. Neurosci.
Res., 86, 18461856 (2008).
33) Kakuda T. Neuroprotective effects of theanine and its preventive effects on cognitive
dysfunction. Pharmacol. Res., 64, 162168 (2011).
34) Inoue K, Miyazaki Y, Unno K, Min JZ, Todoroki K, Toyooka T. Stable isotope dilution
HILIC-MS/MS method for accurate quantification of glutamic acid, glutamine, pyroglutamic
acid, GABA and theanine in mouse brain tissues. Biomed. Chromatogr., 30, 5561 (2016).
35) Souchet B, Guedj F, Penke-Verdier Z, Daubigney F, Duchon A, Herault Y, Bizot JC,
Janel N, Crau N, Delatour B, Delabar JM. Pharmacological correction of
excitation/inhibition imbalance in Down syndrome mouse models. Front. Behav. Neurosci.,
9, 267 (2015).
36) Whitelaw BS, Robinson MB. Inhibitors of glutamate dehydrogenase block sodium-
dependent glutamate uptake in rat brain membranes. Front. Endocrinol. (Lausanne), 4, 123
(2013).
37) Campbell EL, Chebib M, Johnston GA. The dietary flavonoids apigenin and ()-
epigallocatechin gallate enhance the positive modulation by diazepam of the activation by
GABA of recombinant GABA(A) receptors. Biochem. Pharmacol., 68, 16311638 (2004).
38) Klein LC, Bennett JM, Whetzel CA, Granger DA, Ritter FE. Caffeine and stress alter
salivary alpha-amylase activity in young men. Hum. Psychopharmacol., 25, 359367 (2010).