UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL

FACULTAD DE CIENCIAS QUMICAS

LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA II

Asignatura: Microbiologa II
Nombre: Roxana Naomi Mina
Romero
Sexto semestre Grupo: 3-B Martes

Profesora: Q.F. Celeste Carrillo PRACTICA # 3

Tema: COLIFORMES

OBJETIVO GENERAL:

Comprender y realizar adecuadamente la determinacin de

coliformes totales en un alimento.
Interpretar los resultados obtenidos, de acuerdo con las normas
aplicables
Detectar bacterias coliformes totales y fecales.
Detectar si la muestra trada es apta para el consumo humano

MARCO TERICO:

La definicin generalmente aceptada para el trmino coliformes describe a

estos microorganismos como bacilos Gram negativos, no esporulados, aerobios
o anaerobios facultativos que fermentan la lactosa con produccin de cido y
gas, aunque algunos pueden ser fermentadores tardos o no fermentadores,
como Citrobacter y Serratia, respectivamente. La mayora de los coliformes
pueden encontrarse en la flora normal del tracto digestivo del hombre o
animales, por lo cual son expulsados especialmente en las heces, por ejemplo
Escherichia coli. Por esta razn, su presencia constante en la materia fecal, los
coliformes son el grupo ms ampliamente utilizado en la microbiologa de
alimentos como indicador de prcticas higinicas inadecuadas. Como los
coliformes tambin pueden vivir en otros ambientes, se distingue entre
coliformes totales y coliformes fecales. Esta prctica se refiere a coliformes
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totales. El uso de los coliformes como indicador sanitario puede aplicarse para:
La deteccin de prcticas sanitarias deficientes en el manejo y en la
fabricacin de los alimentos.

La evaluacin de la calidad microbiolgica de un producto, aunque su

presencia no necesariamente implica un riesgo sanitario, cuando los coliformes
son de origen no-fecal.

Evaluacin de la eficiencia de prcticas sanitarias e higinicas en el equipo.

La calidad sanitaria del hielo y los distintos tipos de agua utilizados en las
diferentes reas del procesamiento de alimentos. La demostracin y la cuenta
de microorganismos coliformes, puede realizarse mediante el empleo de medios
de cultivos lquidos o slidos con caractersticas selectivas o diferenciales. Para
la cuenta en placa se usa el agar-lactosa-bilis-rojo violeta (ABRV).

FUNDAMENTO

Los coliformes resisten la presencia de bilis en el medio de cultivo; cuando se

desarrollan en ABRV, el cido producido por la fermentacin de la lactosa,
ocasiona el vire del indicador rojo neutro y la precipitacin de las sales biliares
por lo que las colonias son color rojo oscuro y generalmente estn rodeadas de
un halo de sales biliares precipitadas, de color rojo claro o rosa. La posibilidad
de contar las colonias se fundamenta en su dispersin y separacin, como se
explic en la tcnica de preparacin de diluciones.

MATERIAL Y EQUIPO
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MATERIALES MEDIOS DE REACTIVOS EQUIPOS Muestra

CULTIVO/CEPA
S
Algodn Agua de peptona Alcohol Mechero Queso
Fsforos Incubadora
Esptula Bao de
maria
Balanza
fundas ziploc
Pipetas estriles

PROCEDIMIENTO
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CLCULOS / Y RESULTADOS

Diluciones

1: 10 1: 100 1:1000
tubos

1 + + -
2 + + -
3 + + +
total 3 3 1
CONCLUSIN UNA VEZ ENCUBADO Y PASADO LAS 24 HORAS DIERON 7 TUBOS POSITIVOS
Y 2 NEGATIVO TOTAL : 331

COLIFORMES COLIFORMES
MUESTRA LST TOTALES FECALES E. COLI INEN
(BRILLA) (EC)

QUESO NMP 460/g NMP 11/g NMP 7,47g <10

CRIOLLO

CONCLUSIN

En esta practica se logro cumplir con los objetivos planteados ya que se realiz la prueba de
identificacin de coliformes fecales en alimentos en una muestra de queso criollo .

Se realiz la lectura de los tubos con caldo lauril sulfato teniendo como resultado :

En los tubos 1:10 los tres presentan turbidez y presencia de CO2 , lo cual indica que es
positivo para coliformes totales
En los tubos 1:100 los tres presentan turbidez y presencia de CO2 , lo cual indica que
es positivo para coliformes totales
En los tubos 1:1000 , dos tubos no presenta turbidez ni CO2 , lo cual indica que es
negativo y 1 tubo presenta turbidez y presencia de CO2 que indicica positivo para
coliformes totales

Realizando la interpretacin de dichos tubos se puede concluir que :

Nmero de tubos positivos para cada dilucin es de : 3-3-1

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Con estos resultados nos determinara si el alimento es apto o no para el consumo humano

GRAFICOS

DIA 1 prueba presuntiva

DIA 2 prueba confirmativa

DIA 3
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BIBLIOGRAFA

Food and Drug Administration (2003) Bacteriological Analytical Manual. 9th

ed. Arlington, VA: AOAC.

Kornacki J.L. & Johnson J.L. (2001) Enterobacteriaceae, Coliforms, and

Escherichia coli as Quality and Safety Indicators. In: Compendium of Methods
for the Microbiological Examination of Foods. 4th ed. Downs F.P. & Ito K. (Eds.)
APHA. Washington. 69-82.