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INGENIERA AMBIENTAL
PROYECTO DE INVESTIGACIN
PRESENTADO POR:
Cubas Lozano, NILTON
Gonzales Prez, MIKI ARNOLD
Perales Domnguez, ERICKA NAYDA
Puerta Linarez, FERNANDO
Salas Pizango, CHERYL ROCIO
Vsquez Ros, ANA IRIS
PROFESOR RESPONSABLE:
Blgo. Mblgo. Jave Concepcin, HENRY GIOVANI
MORALES PER
2017
DEDICATORIA
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AGRADECIMIENTO
bien.
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INDICE GENERAL
DEDICATORIA .................................................................................................................................... ii
AGRADECIMIENTO .......................................................................................................................... iii
INDICE GENERAL ............................................................................................................................ iv
LISTA DE TABLAS ............................................................................................................................ v
RESUMEN............................................................................................................................................ 2
ABSTRAC ............................................................................................................................................ 3
INTRODUCCIN................................................................................................................................. 4
CAPITULO I: PROBLEMA ................................................................................................................ 5
1.1. Planteamiento del problema .......................................................................................... 5
1.2. Formulacin del problema .............................................................................................. 6
1.3. Objetivo: General y especficos .................................................................................... 6
1.3.1. Objetivo general ........................................................................................................ 6
1.3.2. Objetivos especficos............................................................................................... 6
1.4. Justificacin de la investigacin .................................................................................. 6
CAPITULO II: MARCO TEORICO ................................................................................................... 7
2.1. Antecedentes ..................................................................................................................... 7
2.2. Bases tericas ................................................................................................................... 7
2.2.1. Agua de coco.............................................................................................................. 7
2.2.2. Especie de coco ........................................................................................................ 8
2.2.3. Caracterizacin del agua de coco. ....................................................................... 9
2.2.4. Requisitos de proveedores .................................................................................... 9
2.2.5. ISOS Y OSHAS ......................................................................................................... 10
2.2.6. Definicin de trminos ........................................................................................... 12
A. Filtracin .................................................................................................................... 12
B. Medio Filtrante. ........................................................................................................ 12
C. Grados Brix. .............................................................................................................. 13
D. Embudo buchner ..................................................................................................... 13
E. Matraz kitasato ............................................................................................................. 14
F. Bomba al vaco. ........................................................................................................... 14
G. Salubridad ................................................................................................................. 15
H. Filtro de Celulosa .................................................................................................... 15
2.3. Hiptesis............................................................................................................................ 15
2.3.1. Hiptesis general .................................................................................................... 15
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2.3.2. Hiptesis especfica ............................................................................................... 15
2.4. Variables de estudio ....................................................................................................... 16
2.4.1. Variable Independiente .......................................................................................... 16
2.4.2. Variable Dependiente ............................................................................................. 16
2.4.3. Variables intermitentes o extraas ..................................................................... 16
CAPITULO III: METODOLOGA DE LA INVESTIGACION ....................................................... 18
3.2. Tipo de investigacin ..................................................................................................... 18
3.3. Nivel de investigacin .................................................................................................... 18
3.4. Mtodo de investigacin ............................................................................................... 18
3.4.1. Etapa de Gabinete Inicial ...................................................................................... 18
3.4.2. Etapa de campo-laboratorio ................................................................................. 18
3.4.3. Etapa de Gabinete Final ........................................................................................ 19
3.5. Diseo de la investigacin............................................................................................ 19
3.6. Poblacin muestra y muestreo .................................................................................. 19
3.6.1. Poblacin................................................................................................................... 19
3.6.2. Muestra ...................................................................................................................... 20
3.6.3. Muestreo .................................................................................................................... 20
3.7. Tcnicas e instrumentos de recoleccin de datos ................................................ 20
3.7.1. Tcnicas..................................................................................................................... 20
3.7.2. Instrumentos, equipos, materiales e insumos ................................................ 20
3.8. Tcnica de Procesamiento y Anlisis de datos ...................................................... 20
3.8.1. Mtodo de filtracin por membrana ................................................................... 20
3.8.2. Mtodo de nmero ms probable (NMP). ......................................................... 21
3.8.3. Mtodo de siembras en las placas con el agar sabouraud y PCA ............. 25
3.8.4. Mtodo de la Colecta de la Muestra ................................................................... 27
CAPITULO IV: RESULTADOS ...................................................................................................... 28
4.1. Presentacin de resultados .............................................................................................. 28
4.2. Discusin ............................................................................................................................... 28
CONCLUCIONES ............................................................................................................................. 32
RECOMENDACIONES .................................................................................................................... 33
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS.............................................................................................. 34
ANEXO 01 .......................................................................................................................................... 35
ANEXO 02 .......................................................................................................................................... 36
ANEXO 03 .......................................................................................................................................... 37
ANEXO 4 ............................................................................................................................................ 39
ANEXO 5 ............................................................................................................................................ 44
ANEXO 6 ............................................................................................................................................ 45
ANEXO 7 ............................................................................................................................................ 46
ANEXO 8 ............................................................................................................................................ 47
ANEXO 9 ............................................................................................................................................ 48
ANEXO 10 .......................................................................................................................................... 49
ANEXO 11 .......................................................................................................................................... 50
ANEXO 12 .......................................................................................................................................... 51
ANEXO 13 .......................................................................................................................................... 52
ANEXO 14 .......................................................................................................................................... 56
ANEXO 15 .......................................................................................................................................... 57
LISTA DE TABLAS
Tabla 1. Operacionalizacin de las variables. .............................................................................. 17
Tabla 2. NMP y lmites de confianza de 95% cuando se usan diversas combinaciones de
resultados positivos en series de 5 tubos. .................................................................................... 25
Tabla 3. Anlisis de placas.............................................................................................................. 26
Tabla 4. Parmetros microbiolgicos sin filtracin. ..................................................................... 28
Tabla 5. Parmetros microbiolgicos con filtracin. .................................................................... 28
Tabla 6. Real Decreto 314/2016, Espaa ..................................................................................... 29
Tabla 7. Norma General del CODEX para Zumos (jugos) y nctares de frutas ..................... 29
Tabla 8. Resolucin ministerial 591-2008/MINSA ....................................................................... 30
Tabla 9. Resolucin ministerial 591-2008/MINSA ....................................................................... 30
Tabla 10. Resolucin nmero 003929 2013- ministerio de salud y proteccin social -
Colombia ............................................................................................................................................. 31
Tabla 11. Mtodos de Anlisis Microbiolgico. Normas ISO ..................................................... 31
Tabla 12. Composicin Nutricional del coco ................................................................................ 35
Tabla 13. Caractersticas fsico-qumicas da agua de coco - BRASIL ..................................... 36
Tabla 14. Equipos utilizados. .......................................................................................................... 39
Tabla 15. Materiales utilizados. ...................................................................................................... 39
Tabla 16. Instrumentos utilizados................................................................................................... 40
Tabla 17. Caldos Utilizados............................................................................................................. 40
Tabla 18. Real Decreto 314/16, Espaa. ...................................................................................... 40
Tabla 19. Norma General del CODEX para Zumos (jugos) y nctares de frutas ................... 41
Tabla 20. Resolucin Ministerial 591-2008/ MINSA .................................................................... 41
Tabla 21. Resolucin Ministerial 591-2008/ MINSA .................................................................... 42
Tabla 22. Ministerio de Salud y Proteccin Social Resolucin N 003929-2013 Colombia. 42
Tabla 23. Mtodo de anlisis microbiolgico segn las normas ISOS. ................................... 43
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RESUMEN
El objetivo principal de la investigacin es ensayar a escala de laboratorio, el proceso
de filtracin al vaco con fines de obtener agua de coco apta para consumo humano,
adems de determinar su calidad sanitaria y proponer diseos prototipos para las
escalas de produccin de laboratorio e industrial.
La muestra ser el agua de coco que es consumida por las personas en el sector del
distrito de Morales, el tipo de investigacin es de laboratorio de nivel descriptivo y el
mtodo se divide en 3 fases, la primera consiste en recolectar informacin confiable,
determinar el diseo a evaluar, coordinar con las instituciones involucradas en el
proyecto, elaboracin de formatos, luego en la fase de campo se prepara los
materiales, equipos e instrumentos a utilizar, se obtienen y trasportan las muestras
al laboratorio en donde se determinara las pruebas bsicas como concentracin de
azcares, pruebas microbiolgicas, mohos y levaduras, luego se monta el equipo de
filtracin y se inicia el proceso, finalmente se vuelve a evaluar la muestra filtrada para
determinar la efectividad del proceso de filtracin, los datos son registrados en todo
momento en los formatos correspondientes, en la fase final los datos son ordenados
y sistematizados para su interpretacin segn as normativas vigentes, los mismos
que sern presentados y sustentados en un informe final.
Los resultados fueron 5.1 brix a 20 C, 5.4 ph; 2,9x104 aerobias mesofilos; 0,15/ml
NMP en coliformes; Escherichia coli (E-coli) <0.03; 4 x 102 Mohos; Pseudomonas
aeruginosa 2.9x104 ; Levaduras 400/ml.
Concluimos que el ensayo a escala de laboratorio, para el proceso de filtracin al
vaco del agua de coco, es apta para el consumo humano
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ABSTRAC
The main objective of the research is to test at laboratory scale the process of vacuum
filtration for the purpose of obtaining coconut water suitable for human consumption,
as well as to determine its sanitary quality and to propose prototype designs for
laboratory and industrial production scales .
The sample will be the coconut water that is consumed by the people in the district of
Morales, the type of research is laboratory descriptive level and the method is divided
into 3 phases, the first is to collect reliable information, determine the Design to
evaluate, coordinate with the institutions involved in the project, elaboration of
formats, then in the field phase prepares the materials, equipment and instruments to
be used, obtained and transported the samples to the laboratory where the basic tests
are determined as Concentration of sugars, microbiological tests, molds and yeasts,
then the filtration equipment is assembled and the process is started, finally the filtered
sample is reassessed to determine the effectiveness of the filtration process, the data
are recorded at all times in the Corresponding formats, in the final phase the data are
sorted and systematized for interpretation according to the regulations Valid, the same
that will be presented and supported in a final report.
The results were 5.1 brix at 20 C, 5.4 ph; 2.9x 10 ^ 4 mesophilic aerobes; 0.15
We conclude that the laboratory scale test for the vacuum filtration process of coconut
water is suitable for human consumption
INTRODUCCIN
En la cuidad de Tarapoto, debido a las altas temperaturas del clima, existe una
demanda elevada de consumo de diferentes productos rehidratantes, entonces
como oportunidad de negocio se desarrolla la venta de agua de coco, lo que
genera un ingreso extra a la poblacin que practican esta actividad.
La problemtica surge cuando se observa que el lquido es consumido
directamente sin ningn tratamiento o evaluacin. Ya que la aceptacin del
producto es elevada, se propone realizar un tratamiento mediante un mtodo de
filtracin al vaco y realizar anlisis microbiolgicos, mohos y levaduras, potencial
de hidrgeno, azucares, entre otros parmetros antes del tratamiento como
tambin despus del tratamiento para as obtener datos que puedan ser
contrastados con las normativas respectivas, nacionales e internacionales, y as
proponer un diseo a escala semi-industrial como industrial.
As las personas dedicadas a esta actividad puedan practicar este proceso y
obtener con los cuidados de inocuidad sugeridos por la industria alimentaria, y
obtener con seguridad un agua de coco micro filtrada para asegurar su calidad
sanitaria y mantener sus propiedades , las cuales permite hidratar el cuerpo,
drenar los riones, restablecer los minerales perdidos, desintoxica de los efectos
del cigarro y el alcohol, adems de haber cumplido con el objetivo principal que
es disminuir la carga microbiana en el producto.
CAPITULO I: PROBLEMA
1.1. Planteamiento del problema
Tarapoto es conocida como la ciudad de las palmeras, tambin
destacada por su alta produccin en coco y por su consumo directo de ella sin
un previo tratamiento y control, por lo que hoy en da es un problema
preocupante ya que consumir agua sin un tratamiento apropiado puede
provocar enfermedades que atentan contra la salud de los consumidores. La
proteccin de la salud pblica requiere agua de bebida segura.
2.1. Antecedentes
Segn estudios de los Estudiantes de la universidad industrial de
Santander (U.I.S), durante el 2003 - 2006. Identificaron que las actividades
acadmicas realizadas en los laboratorios, demandan la utilizacin de grandes
volmenes de agua potable durante los procesos de filtracin al vaco en
donde se utilizan aspiradores convencionales por medio de los cuales se
descarta agua al alcantarillado para poder generar la succin. Este trabajo
propone una solucin efectiva, rpida y econmica, para usar eficientemente
el agua en los laboratorios de qumica en la U.I.S. La propuesta incluye el
diseo y la construccin de un prototipo de filtracin al vaco que utiliza agua
para generar succin, pero no la descarta al alcantarillado, sino que la recircula
por medio de un circuito y la comparacin del mismo con los dos mtodos
utilizados en la escuela para realizar filtraciones al vaco (mtodo convencional
y bomba de vaco).
A. Filtracin
La filtracin es la operacin unitaria que se utiliza para separar
partculas slidas (insolubles) contenidas en fluidos (lquidos o gases),
mediante el paso del fluido a travs de una superficie con orificio de
determinado tamao. La separacin de los slidos se logra forzando al
fluido a pasar, mediante la aplicacin de una fuerza (presin, vaco, etc.) a
travs de una superficie porosa denominada medio filtrante que atrapa o
retiene las partculas slidas en su superficie.
B. Medio Filtrante.
C. Grados Brix.
E. Matraz kitasato
F. Bomba al vaco.
G. Salubridad
H. Filtro de Celulosa
2.3. Hiptesis
2.3.1. Hiptesis general
a) Concentracin de azcar.
b) Concentracin de solidos totales.
c) Temperatura
Permiten lograr el
Dependiente: Es el conjunto de grado de Ambiente adecuado
Calidad sanitaria del acciones adoptadas cumplimiento de las para el tratamiento y
- Ordinal
agua de coco (carga por la autoridad normas sanitarias, y condiciones Presencia de
microbiana. sanitaria competente garantizar la sanitarias para la microorganismos en
para evaluar el riesgo ausencia de riesgos a manipulacin del agua de coco.
que representa a la su salud. coco.
salud pblica.
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CAPITULO III: METODOLOGA DE LA INVESTIGACION
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b) Obtencin y transporte de la muestra al laboratorio donde se
llevara a cabo el proyecto.
c) Determinacin de las pruebas bsicas como la concentracin de
azucares, pruebas microbiolgicas (Coliformes totales, E.coli,
Coliformes fecales, pseudomoas aeruginosas), Mohos y levaduras.
d) Se montara el equipo de filtracin en condiciones estriles, se
medir el volumen de muestra para el ensayo y se pasara al
sistema de filtracin.
e) Se iniciar el proceso de filtracin hasta culminar con el volumen
segn la capacidad del equipo.
f) Posteriormente se realizar la evaluacin de los parmetros
anteriormente evaluados para confirmar la efectividad del sistema
a evaluar. Se tomarn datos, los mismos que sern registrados en
el formato correspondiente.
3.6.3. Muestreo
Para tomar la muestra de nuestra agua de coco lo primero
que se realiz fue: identificar los lugares ms concurridos por las
personas que consumen este fruto, esterilizar nuestros envases,
posteriormente nos dirigimos a realizar la compra del fruto para lograr
obtener su agua, esta agua se llev al laboratorio para realizar su
anlisis microbiolgicos y as obtener un resultado de carga
microbiana antes de su paso por nuestro filtro.
Coliformes
5 5 5 >1,600 .
totales
E.coli 3 3 4 2,400 .. ..
Coliformes
2 2 2 28 10 150
fecales
4.2. Discusin
Tabla 7. Norma General del CODEX para Zumos (jugos) y nctares de frutas
Nombre Botnico Nombre comn de Nivel mnimo de grados Brix para Resultados
la fruta zumo (jugo) de fruta reconstituido Resultados despus de
y pur reconstituido antes de la la filtracin
filtracin
(*) En caso de analizar por el mtodo del NMP =< 2,2 /100mL
Tabla 8. Resolucin ministerial 591-2008/MINSA
Agua mineral, Agua de mesa natural, hielo Resultados antes de la Resultados despus de la
filtracin filtracin
Agente microbiano Unidad de medida Limite
mximo
permisible
Numeracin aerobios
Mesfilos viables ( UFC/g) ISO 4833 2006 10 2.9 x 10^4
Numeracin de
Coliformes (NMP/g) ISO 4831 2006 <3 0.15
Numeracin de
Escherichia Coli (NMP/g) ISO 7251 2005 <3 < 0.03
Numeracin de
Mohos (UFC/g) ISO 7954 1987 1 4 x 10^2
Fuente: Laboratorio Referencial Regional de Salud Pblica de San Martin
CONCLUCIONES
ANEXO 01
ANEXO 02
Figura 03: Esterilizacin de los materiales. Figura 04: Pesado de los agares.
Figura 05: Calentamiento de los agares Figura 06: Agar Verde Brillante Bilis
Figura 07: Agar E.C. Medium Figura 08: Pipeteo de los agares hacia los tubos
Figura 13: Tubos en bao mara Figura 14: Tubos con presencia de gases
Figura 15:11:
Figura Placas cona presencia
Tubos de mohos
bao mara. Figura 16:
Figura Colocacin
12: delbrix.
Medicin de filtro de membrana
Figura 17: Medicin de los grados brix.
ANEXO 4
Tabla 19. Norma General del CODEX para Zumos (jugos) y nctares de frutas
Limite mximo
Agente permisible
Unidad de medida
microbiano
Bacterias
coliformes
termotolerantes UFC/100mL a 44,5C 0 (*)
o Escherichia
coli
(*) En caso de analizar por el mtodo del NMP =< 2,2 /100mL
Tabla 21. Resolucin Ministerial 591-2008/ MINSA
Bebidas no carbonatadas
Aerobios 2 3 5 2 10 102
mesfilos
Mohos 2 3 5 2 1 10
Levaduras 12 3 5 2 1 10
Coliformes 5 2 5 0 <3 .
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ANEXO 6
Figura 19: Punto de anlisis del agua de coco
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ANEXO 7
Figura 20: Ruta de la UPeU en el laboratorio referencial San Martin
ANEXO 8
OBSERVACIONES
RESULTADOS
ESTADANDAR DE CALIDAD
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ANEXO 9
Filtro de membrana
Embudo Buchner
Bomba al vaco
manual
Tapn
kitasato
ANEXO 11
120 ml de agua
destilada y 7,8 gr
de agar
SABOURAUD
Sembrar 0.5 ml
de agua de coco
para c/d placa
120 ml de agua
destilada y 2,7 gr
de agar PCA
Antibitico (oxitetra
ciclina)
0.012gr
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Gasa 5x5 Unidad 1 S/. 2.00 S/. 2.00
Plumon indeleble Unidad 1 S/. 2.00 S/. 2.00
Hilo pabilo Unidad 1 S/. 1.40 S/. 1.40
Matraz Unidad 5 S/. 20.00 S/. 100.00
Probeta Unidad 2 S/. 30.00 S/. 60.00
Pipeta Unidad 5 S/. 10.00 S/. 50.00
Pipeteador Unidad 5 S/. 22.00 S/. 110.00
Agitador Unidad 2 S/. 5.00 S/. 10.00
Guardapolvo Unidad 6 S/. 25.00 S/. 150.00
Balanza analitica Unidad 1 S/. 1,500.00 S/. 1,500.00
Estufa Unidad 1 S/. 4,000.00 S/. 4,000.00
Incubadora Unidad 1 S/. 3,000.00 S/. 3,000.00
Autoclave Unidad 1 S/. 10,000.00 S/. 10,000.00
S/.
SUB TOTAL S/
19,697.50
Analisis microbiologio (despues de la
filtracion)
Bienes y servicios
Materiales
Frasco muestreador Unidad 1 S/. 10.00 S/. 10.00
Analisis de parametros microbiologicos Unidad 1 S/. 80.00 S/. 80.00
S/.
SUB TOTAL S/
90.00
Medicion de grados Brix
Bienes y servicios
Materiales
Vaso precipitado Unidad 1 S/. 5.00 S/. 5.00
Termometro Unidad 1 S/. 40.00 S/. 40.00
Alquiler de Brixometro Unidad 1 S/. 80.00 S/. 80.00
S/.
SUB TOTAL S/
125.00
Filtracion
Materiales
Compra de bienes
Filtro al vacio Unidad 1 S/. 175.00 S/. 175.00
Membrana Unidad 3 S/. 20.00 S/. 60.00
Agua de coco Unidad 5 S/. 1.50 S/. 7.50
Pinza Unidad 1 S/. 3.00 S/. 3.00
Mechero Unidad 1 S/. 8.00 S/. 8.00
S/.
SUB TOTAL S/
253.50
Materiales y equipos de gabinete
Utiles de oficina
Laptop toshiba Unidad 1 S/. 3,000.00 S/. 3,000.00
Lapicero pilot Unidad 2 S/. 2.00 S/. 4.00
Tablero Unidad 1 S/. 5.00 S/. 5.00
Momoria USB kingston Unidad 1 S/. 30.00 S/. 30.00
Papel bon A4 Docena 2 S/. 1.00 S/. 2.00
Folder manila Unidad 3 S/. 1.00 S/. 3.00
S/.
SUB TOTAL S/
3,044.00
Gastos Generales
Anillado Unidad 1 S/. 3.00 S/. 3.00
GPS Unidad 1 S/. 1,500.00 S/. 1,500.00
Camara Unidad 1 S/. 400.00 S/. 400.00
Gasolina (90) Galones 1/2 S/. 14.00 S/. 7.00
S/.
SUB TOTAL
1,910.00
S/.
TOTAL S/
25,120.00
S/.
IMPREVISTOS 10 % DEL TOTAL
2,512.0
S/.
COSTO TOTAL DEL PROYECTO
27,632.0
ANEXO 14
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ANEXO 15
Figura 28: Boleta de pago por los anlisis (Laboratorio Referencial de San Martin).
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