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DE BIOPROCESOS
GRUPO C-3
UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA
DEPARTAMENTO ACADEMICO DE AGROINDUSTRIA
ESCUELA DE INGENIERIA AGROINDUSTRIAL
NDICE
I.OBJETIVOS:.................................................................................................... 3
2
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3
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4
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= 2
5
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6
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7
2.1.4. Tabla 04: Nutrientes Para El Medio De Fermentacin
=8.25(teorico)
Tiempo de fermentacin: 12 horas
2.1.5. Tabla 05: Sales Para El Medio De Fermentacin
Fe Sulfato ferroso heptahidratado Fe2SO4.7H2O 278 0.255 21.70 85.01 0.024 0.036
Cu Sulfato de cobre pentahidratado Cu2SO4.5H2O 249 0.01 25.30 2530 0.008 0.012
Co Cloruro de Cobalto hexahidratado CoCl2.6H2O 237 0.01 24.89 2489 0.008 0.012
SOSTENER
Los Matraces
FLAMEAR
RETIRAR
FLAMEAR
FLAMEAR
MEZCLAR
FLAMEAR
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Para la preparacin del medio de mantencin, primero se pes las cantidades que nos indica
la tabla 01 en una balanza analtica. Luego, en un vaso precipitado se ech agua destilada
para diluir de esa manera los compuestos agregadis en el matraz, se agreg agua hasta llegar
a 50 ml. Se encendi el mechero bunsen, y se calent la mezcla diluida agitando
constantemente con una varilla por un minuto (aparicin de la primera burbuja). Se prepar
6 tubos de ensayos (con sus tapas respectivas) y con ayuda de una pipeta de 10ml, se agreg
7 ml de la mezcla en cada tubo de ensayo, finalmente taparlos. Se coloc los tubos de ensayo
en un vaso precipitado y se llev a una olla presin ( autoclave), as tambin aflojar las tapas
dentro de la olla de presin para que nos permita el intercambio de gases. Se calent hasta
que la temperatura alcance 121C, y se control 15 a 20 minutos. Finalmente se dej reposar
a Temperatura ambiente.
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Esquema 03
ESTERELIZAR
DISOLVER
ALISTAR
Sales minerales
AGREGAR
EL pH a 7
AJUSTAR
MEZCLAR
Procedimiento
Esquema 04
DISOLVER
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EXPERIMENTAL, ETC.
2.3.1. Resiembra celular (Solido - slido)
a. Materiales y equipos:
Aza bacteriolgica
Tubo de ensayo con medio slido donde se encuentra el M.O.
Mechero Bunsen, trpode y rejilla.
b. Procedimiento:
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Esquema 05
ESTERILIZAR
COLOCAR
SOMETER
ENFRIAR
EXTRAER
RESEMBRAR
REALIZAR
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LLEVAR A la Incubadora a 30C
durante 24 a 48 horas.
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a. Materiales y equipos:
Matraz de 125 ml.
Algodn
Gasa
Agua destilada
Aza bacteriolgica
Shaker
Mechero Bunsen, trpode y rejilla
b. Procedimiento:
Esquema 06
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TOMAR
INOCULAR
TAPAR
Al Shaker a
LLEVAR 240rpm, T = 30 C
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Esquema 07
INOCULAR
EXTRAER
MEDIR
EXTRAER
19
SEPARAR
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a. Materiales y equipos:
Espectrofotmetro.
Centrfuga.
Estufa.
b. Reactivos:
Muestra del medio.
Agua destilada.
c. Procedimiento:
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Esquema 07
TOMAR MUESTRA
RESUSPENSER
ELIMINAR
ELIMINAR 21
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REDISOLVER
SECAR Estufa: 80 C
hasta peso constante
a. Materiales y equipos:
Espectrofotmetro.
Agitador magntico.
Mechero bunsen.
Balanza analtica
Esptula.
Papel aluminio capachitos.
2 Vasos de precipitado de 1 litro
Matraz de aforo de 1 litro.
Pipeta.
Gradilla.
b. Reactivos:
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200 mL / L de NaOH 2N
300 g/L de tartrato de sodio y potasio tetrahidratado
Sacarosa Estndar
c. Procedimiento:
Para la preparacin de este reactivo, se disuelve el tartrato en
aproximadamente 500 o 600 ml de agua, paralelamente se
disuelve el cido DNS. Ambas soluciones se mezclan en un
matraz aforado de 1 litro y se agita hasta la completa disolucin
de todos los componentes, para posteriormente aforar hasta un
litro.
Se precisa realizar los siguientes pasos para el anlisis de la
muestra.
destilada.
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3 minutos.
este procedimiento.
Esquema 08
PREPARAR
AADIR
CALENTAR
ENFRIAR
AADIR
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REPOSAR
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Extracto de levadura:
Es un excelente estimulador del crecimiento de
bacterias, es utilizado en la preparacin de medios de
cultivo microbiolgicos. Extracto de Levadura es la
parte soluble en agua de autolisis levadura que es
cuidadosamente controlada para preservar la forma
natural de la referencia para el medio cultivo.
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2 matraces
Balanza analtica
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b. Reactivos y nutrientes:
Solucin de sales
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b. Reactivos y nutrientes:
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Solucin de sales
c. Equipos
EQUIPO DESCRIPCIN
BALANZA ANALTICA
Marca: Adventurer
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CENTRFUGA
Marca: P-Selecta
ESPECTROFOTMETRO
Marca: Sigma
Modelo: 2-16PK
Un espectrofotmetro es un instrumento usado
en el anlisis qumico que sirve para medir, en
funcin de la longitud de onda, la relacin entre
valores de una misma magnitud fotomtrica
relativos a dos haces de radiaciones y
la concentracin o reacciones qumicas que se
miden en una muestra. Tambin es utilizado en los
laboratorios de qumica para
la cuantificacin de sustancias y microorganismos
.
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PHMETRO
Marca: Inolab
AGITADOR MAGNTICO
Marca: Thermolyne
Modelo: Maxi-mix II
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Fermentador:
Marca: Sartoriustedin
Capacidad: 2 litros
Partes: software, CPU, reactor.
Shaker: El agitador orbital modelo SAROTIUS STEDIM est diseado para usos generales
en laboratorios de anlisis clnicos, industriales, de fsica, qumica y en todo tipo de
ensayos que requieran agitar, mezclar, disolver casi todo tipo de lquidos y soluciones
con distinto grado de viscosidad. Estn diseados ergonmicamente para ser
funcionales y confiables ahora y en el futuro. Su sistema microprocesado, permite un
control exacto de la velocidad de giro, independiente de la carga, puesto que supervisa
constantemente la velocidad corrigiendo automticamente cualquier variacin de la
misma. Posee adems un timer que permite controlar con precisin en el tiempo de la
experiencia a realizar. El dispositivo mecnico de agitacin est formado por una base
amplia, metlica, con fuertes nervaduras, y una plataforma mvil.
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AUTOCLAVE
Una autoclave es un recipiente de presin metlico de paredes
gruesas con un cierre hermtico que permite trabajar a alta
presin para realizar una reaccin industrial, una coccin o una
esterilizacin con vapor de agua. Su construccin debe ser tal
que resista la presin y temperatura desarrollada en su interior.
La presin elevada permite que el agua alcance temperaturas
superiores a los 100 C. La accin conjunta de la temperatura y
el vapor produce la coagulacin de las protenas de los
microorganismos, entre ellas las esenciales para la vida y la
reproduccin de stos, hecho que lleva a su destruccin.
MENU DE LLAVE DE
MANOMETRO
CONTROL SEGURIDAD
REFRIGERADORA DOMESTICA
MARCA: PHILLIPS
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ESTUFA ELECTRICA:
MARCA: P-SELECTA
MODELO: 209
INCUBADORA ELECTRICA
MARCA: P-SELECTA
MODELO: 206
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MEDIO NUTRIENTE
Extracto de levadura
Peptona
Solido de mantencin
Agar
(PGY- Agar)
Extracto de malta
Xilosa
Extracto de levadura
Activacin
Extracto de malta
Solucin de sales
Glucosa
Xilosa
(NH4)2SO4
Fermentacin KH2PO4
MgSO4.7H2O
Solucin de sales
Tampn citrato
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VI. ANEXOS:
% de Carbono en clula
25.77 100%
12
12 100
=
25.77
= . %
% de Nitrgeno en clula
25.77 100%
2.38
2.38 100
=
25.77
= . %
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0.1+0.5
% de Magnesio en clula: = 0.30%
2
0.01+0.24
% de Azufre en clula: = 0.13%
2
1.0+4.0
% de Potasio en clula: = 2.50%
2
0.8+2.6
% de Fsforo en clula: = 1.70%
2
0.01+0.5
% de Hierro en clula: = 0.255%
2
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Para los dems elementos, los cuales son: Cl, Zn, Cu, Co, B; se consider porcentaje del
elemento en clula de 0.01%.
% de carbono
150 100%
60
= %
Glucosa:
Frmula:
Peso molecular:
C: 12 6 = 72
H: 1 12 = 12
O: 16 6 = 96
/
180
% de carbono
180 100%
72
= %
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Sulfato de amonio
Frmula: (4 )2 4
Peso molecular:
C: 14 2 = 28
H: 1 8=8
S: 32 = 32
O: 16 4 = 64
132 /
% de nitrgeno
132 100%
28
= . %
% de azufre
132 100%
32
= . %
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Frmula: 2 4
Peso molecular:
K: 39 = 39 +
H: 1 2 = 2
P: 31 = 31
O: 16 4 = 64
136 /
% de potasio
136 100%
39
= . %
% de fsforo
136 100%
31
= . %
Frmula: 4 . 72
Peso molecular:
Mg: 24 = 24
S: 32 = 32
O: 16 11 = 176
H: 1 14 = 14
246 /
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% de magnesio
246 100%
24
= . %
% de azufre
246 100%
32
= . %
Sales:
Formula: CaCl2.2H2O
Peso molecular:
Mg: 40 1 = 40
Cl: 35 2 = 70
O: 16 2 = 32
H: 1 4=4
146 /
% de calcio
146 100%
40
= . %
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xido de zinc:
Formula: ZnO
Peso molecular:
Zn: 65 1 = 65
O: 16 1 = 16
81/
% de calcio
81 100%
65
= . %
Formula: FeSO4.7H2O
Peso molecular:
Fe: 56 1 = 56
S: 32 1 = 32
O: 16 11 = 176
H: 1 14 = 14
278 /
% de hierro
278 100%
56
= . %
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Formula: CuSO4.5H2O
Peso molecular:
Cu: 63 1 = 63
S: 32 1 = 32
O: 16 9 = 144
H: 1 10 = 10
249 /
% de cobre
249 100%
63
= . %
Co: 59 1 = 59
Cl: 35 2 = 70
O: 16 6 = 96
H: 1 12 = 12
237 /
% de cobalto
237 100%
59
= . %
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cido brico:
Formula:H3BO3
Peso molecular:
B: 11 1 = 11
O: 16 3 = 48
H: 1 3=3
62 /
% de boro
62 100%
11
= . %
cido clorhdrico:
Formula: HCl
Peso molecular:
O: 35 1 = 35
H: 1 1=1
36 /
% de cloro
36 100%
35
= . %
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%
/ =
%
Carbono: Xilosa
40
/ = 0.6 = .
46.57
Carbono: Glucosa
40
/ = 0.6 = .
46.57
Nitrgeno:
21.21
/ = = .
9.24
Azufre:
24.24
/ = = .
0.13
Potasio:
28.68
/ = = .
2.5
Fsforo:
22.79
/ = = .
1.7
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Magnesio:
9.76
/ = = .
0.3
Azufre:
13.01
/ = = .
0.13
Sales:
Calcio:
27.4
= =
0.2
Zinc:
80.25
= =
0.01
Hierro:
21.7
= = .
0.255
Cobre:
25.3
= =
0.01
Cobalto:
24.89
= =
0.01
Boro:
17.74
= =
0.01
Cloro:
97.22
= =
0.01
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0 y 0 0 ; = 2 /
Carbono: Xilosa
(2 0)
0 = 0 +
0.52
= .
Carbono: Glucosa
(2 0)
0 = 0 +
0.52
= .
Nitrgeno:
(2 0)
0 = 0 +
2.30
= .
Azufre:
(2 0)
0 = 0 +
186.46
= .
Potasio:
(2 0)
0 = 0 +
11.47
= .
Fsforo:
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(2 0)
0 = 0 +
13.41
= .
Magnesio:
(2 0)
0 = 0 +
32.53
= .
Azufre:
(2 0)
0 = 0 +
100.08
= .
0 = 0
Donde:
Carbono: Xilosa
0 = 3.85 1 = . /
Carbono: Glucosa
0 = 3.85 1 = . /
Nitrgeno:
0 = 0.87 1.5 = . /
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Azufre:
0 = 0.01 1.5 = . /
Potasio:
0 = 0.17 1.5 = . /
Fsforo:
0 = 0.15 1.5 = . /
Magnesio:
0 = 0.07 1.5 = . /
Azufre:
0 = 0.02 1.5 = . /
SALES:
Calcio:
(2 0)
0 = 0 +
137
= .
0 = 1.46 1.5 = . /
Zinc:
(2 0)
0 = 0 +
8025
= .
0 = 0.025 1.5 = . /
57
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Hierro:
(2 0)
0 = 0 +
85.01
= .
0 = 2.325 1.5 = . /
Cobre:
(2 0)
0 = 0 +
2530
= .
0 = 0.079 1.5 = . /
Cobalto:
(2 0)
0 = 0 +
2489
= .
0 = 0.08 1.5 = . /
Boro:
(2 0)
0 = 0 +
1774
= .
0 = 0.113 1.5 = . /
Cloro:
(2 0)
0 = 0 +
9722
= .
0 = 0.02 1.5 = . /
58
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X0= 10%(Xf)
X0=10%(2)
X0=0.2
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Ln ( ) = Max t
2
Ln ( ) = 0.28 t
0.2
= .
60