MEDICIONES DE GLUCOSA

CONSIDERACIONES ACERCA DE LAS MUESTRAS

Las determinaciones de la glucosa son fundamentales en el diagnstico y tratamiento de

las enfermedades relacionadas con el metabolismo de los hidratos de carbono y se
realizan en sangre total, plasma, suero, LCR. Liquido pleural y orina.

La sangre venosa es la muestra de eleccin para el anlisis de glucosa. A temperatura

ambiente la glucosa se metaboliza a una velocidad de 7 mg/dl/h y a 4C. El ndice de
metabolizacin es mayor en presencia de contaminacin bacteriana o leucocitosis. Una
muestra de suero es vlida para el anlisis de glucosa si es separado de las clulas en un
plazo de 30 minutos; no obstante, para tiempos superiores, debe aadirse un
conservante como el fluoruro sdico para inhibir la glucolisis. En muestras de suero sin
bacterias contaminadas o leucocitos, un retraso superior a 90 minutos en la separacin
del suero aun puede proporcionar resultados clnicos aceptables. La glucolisis en sangre
total refrigerada puede retrasarse en un tiempo superior a 48 horas aadiendo 2mg de
fluoruro sdico por mililitro de sangre. En suero o plasma refrigerado, la glucosa
permanece estable durante un periodo de 48 horas; en muestras almacenadas durante
mas tiempo, aunque se encuentra a 20C los valores de glucosa disminuyen de maner
progresiva. Los aparatos caseros de monitorizacin de glucosa ayudan a los pacientes
diabticos a un mejor tratamiento de su enfermedad. Es fundamental un entrenamiento
adecuado de los pacientes en el manejo de estos lectores individuales para evitar los
errores inherentes al operador que segn un estudio pueden llegar a afectar al 12% de
los usuarios. Entre estos errores se incluyen la aplicacin de un volumen insuficiente de
muestra- el estrujamiento del dedo para adquirir sangre suficiente, el uso de tiras
reactivas caducadas, factores ambientales, la utilizacin de aparatos que no funcionen
correctamente, la presencia de un lector sucio y las determinaciones realizados fuera del
rango de hematocrito o temperatura. El anlisis tambin puede verse alterados por
contacto con el rea de reaccin. Estos aparatos deben tener una seria de caractersticas,
adems de las prpias de su funcionamiento como: facilidad de uso, requerir un pequeo
volumen de sangre, bajo mantenimiento, lectura fcilmente visible, rapidez alarmas
apropiadas, memoria de resultados y escasas sustancias que interfieren con la tcnica
MTODOS PARA LA DETERMINACIN DE GLUCOSA.

La mayora de mediciones de glucosa se basan en mtodos enzimticos.

Estos mtodos enzimticos tienen gran especificidad y pueden ser adaptados para
realizar determinaciones en los puntos de atencin mdica. Actualmente las
determinaciones de glucosa se realizan mediante tres sistemas enzimticos glucosa-
deshidrogenasa, glucosa-oxidasa y hexocinasa. En algunos mtodos la reaccin
produce una corriente elctrica proporcional a la concentracin inicial de glucosa, y en
otros se toma un producto, medido espectrofotomtricamente, que tambin es
proporcional a la cantidad de analito.

Otros mtodos se basan en el clculo de la variacin de velocidad inicial de reaccin,

que depende de la glucosa presente inicialmente, o bien puede tratarse de ensayos a
punto final.

GLUCOSA-DESHIDROGENASA

En el mtodo de la glucosa-deshidrogenasa, la glucosa es utilizada para reducir un

cromforo que permita ser medida espectrofotomtricamente o para generar una
corriente elctrica. Con el examen se mira la cantidad (actividad) de esta sustancia en
los glbulos rojos.

GLUCOSA-OXIDASA

La glucosa-oxidasa es una flavoenzima que cataliza las reacciones descritas a

continuacin. La reaccin de la peroxidasa puede medirse espectrofotomtricamente, y
se inhibe con concentraciones altas de cido rico, cido ascrbico, bilirrubina,
creatinina, dopamina, y cido ctrico. Este sistema depende de la presin parcial de
oxgeno, que compite con la reaccin y produce perxido de hidrogeno, por tanto,
cuanto mayor sea esta presin parcial de oxgeno, la glucosa medida elctricamente ser
ms baja. La glucosa oxidasa tambin puede utilizarse en otros sistemas elctricos.

HEXOCINASA

La prueba de la hexocinasa esta aceptada como el mtodo de referencia para la

determinacin de glucosa. La concentracin de glucosa es proporcional al ndice de
produccin de NAD (P) H, medido espectrofotomtricamente. Dependiendo de la fuente
de glucosa-6-fosfato-deshidrogenasa, la enzima puede ser especfica para el NAPD o
utilizar adems NAD. Las muestras hemolizadas pueden crear problemas, ya que el
contenido liberado de los eritrocitos puede interferir en la relacin estequiometria entre
la glucosa y la acumulacin de NAD (P) H.