Portada

UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
CARRERA DE LABORATORIO CLNICO E
HISTOPATOLGICO
Asignatura:

MICROBIOLOGA I

INFORME DE INVESTIGACIN BASADO EN LA PRCTICA DE

LABORATORIO
TEMA:

Comparacin en crecimiento en diferentes medios de cultivo de dos tipos de bacterias

ESTUDIANTE:

Orozco Coello Karla Lissete

CDIGO:

21

SEMESTRE:

TERCERO A

DOCENTE: Ing. Flix Falcon

Fecha de la prctica: 7/06/2017

Fecha de entrega: 14/06/2017

PERODO: ABRIL AGOSTO 2017

Riobamba Ecuador
Informe basado en la prctica de laboratorio Por: Orozco C. Karla
Comparacin en crecimiento en diferentes
medios de cultivo de dos tipos de bacterias

NDICE
Portada .......................................................................................................................................... 1
Resumen ........................................................................................................................................ 3
1. Introduccin .......................................................................................................................... 3
1.1. Objetivos ........................................................................................................................... 4
1.1.1. Objetivo General ....................................................................................................... 4
1.1.2. Objetivos Especficos ................................................................................................ 4
2. Fundamentacin Terica ....................................................................................................... 4
2.1. Medio de Cultivo........................................................................................................... 4
2.2. Agar ............................................................................................................................... 4
2.3. Procedimiento: .............................................................................................................. 5
2.4. Esterilizacin a la flama ................................................................................................ 5
2.5. Siembra bacteriana ........................................................................................................ 6
3. Materiales y Mtodos ............................................................................................................ 6
3.1. Preparacin de medios de cultivo .................................................................................. 6
3.2. Agares para cultivo........................................................................................................ 6
3.3. Condiciones del rea de trabajo. ................................................................................... 6
4. Resultados y discusiones ....................................................................................................... 7
5. Conclusiones ......................................................................................................................... 7

3ero Laboratorio Clnico e 2

Histopatolgico Microbiologa
Informe basado en la prctica de laboratorio Por: Orozco C. Karla
Comparacin en crecimiento en diferentes
medios de cultivo de dos tipos de bacterias

Resumen
El objetivo de esta prctica fue comparar el crecimiento entre Estafilococos aureus y
Escherichia coli en diferentes medios de cultivo. El procedimiento que se sigui para la
preparacin de los diferentes cultivos fue realizar los clculos necesarios para saber la
cantidad exacta de agar, tomar la cantidad de agar y pesamos la cantidad que se calcul
anteriormente, aadir el agua destilada, el magntico y el agar pesado en el matraz.
Homogenizar la mezcla obtenida y cubrir al matraz con papel aluminio. Ponemos el
marcador, lo calentamos en la plancha magntica y dejamos que est en su punto de
ebullicin por 1 minuto. Retiramos el matraz con una toalla en la parte superior haciendo
un poco de presin, as lo mantenemos tapado con la toalla. Notaremos que mejor la
transparencia de la solucin. Llevar la solucin a la autoclave y preparar la solucin Mac-
Farlan. Como resultado tuvimos un claro ejemplo de cmo realizar un cultivo slido, la
correcta manipulacin de los agares, y en si todos los procesos que se debe realizar para
obtener un buen cultivo. No todos los agares son adecuados para la siembra de bacterias
asi como microorganismos entricos con Agar MacConkey , los Vibrios en agar TCBS

1. Introduccin
Uno de los sistemas ms tiles empleados para la identificacin de microorganismos es
la observacin de su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales las cuales son
preparadas en el laboratorio, siendo as conocidas como Medios de Cultivo. Es importante
mencionar la existencia de diferentes medios de cultivo, slidos, lquidos, especiales,
generales, pero esto depender mucho del microorganismo con el que se est trabajando.
Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo, deben reunir una
serie de condiciones como son: temperatura, grado de humedad y presin de oxgeno
adecuadas, as como un grado correcto de acidez o alcalinidad. Gracias al Agar es posible
que los microorganismos se cultiven en medio slido, con la excepcin que no tiene efecto
sobre el crecimiento de las bacterias y no es atacado por aquellas que crecen en l.

El problema radica en que la preparacin de cultivos que se preparan corre un alto riesgo
de ser contaminados, ya sea con microorganismos o contaminacin contrada del
ambiente, microplasma, levaduras, etc. y lo ms probable en estos casos es que todo se
tenga que desechar, y adems de todos los recursos que se invierte en material, est el
trabajo y tiempo empeado.

3ero Laboratorio Clnico e 3

Histopatolgico Microbiologa
Informe basado en la prctica de laboratorio Por: Orozco C. Karla
Comparacin en crecimiento en diferentes
medios de cultivo de dos tipos de bacterias

La importancia para resolver este problema es la utilizacin de una incubadora para

asegurar las condiciones que mantendr vivas las clulas. La incubadora tiene como
objetivo principal el de simular las condiciones fisiolgicas, dentro de estos equipos son
ideales para la proliferacin de ciertos contaminantes biolgicos.

El propsito de esta prctica es fue comparar el crecimiento de dos tipos de bacterias en

diferentes medios de cultivo.

1.1. Objetivos
1.1.1. Objetivo General
Comparar el crecimiento de Estafilococos aureus y Escherichia coli en diferentes medios
de cultivo.

1.1.2. Objetivos Especficos

1.1.2.1. Preparar medios de cultivo como soporte y fuente de nutrientes para el
desarrollo de los microorganismos in vitro.
1.1.2.2. Conocer que tipos de bacterias son aptos para los diferentes agares que se
proponen.
1.1.2.3. Adquirir la idea de la importancia del trabajo en condiciones de
esterilidad y las tcnicas ms comunes para realizarlo.

2. Fundamentacin Terica
2.1. Medio de Cultivo

Son una mezcla de nutrientes que en concentraciones adecuadas y en condiciones fsicas

ptimas, permiten el crecimiento de los microorganismos. Son esenciales en
el Laboratorio de Microbiologa por lo que un control en su fabricacin, preparacin,
conservacin y uso, asegura la exactitud, confiabilidad y reproducibilidad de los
resultados obtenidos (1).

2.2. Agar
Sustancia que posee la misma propiedad de la gelatina. Este sirve como sustrato,
superficie en donde van a crecer las bacterias, contiene nutrientes que los
microorganismos necesitan (2).

3ero Laboratorio Clnico e 4

Histopatolgico Microbiologa
Informe basado en la prctica de laboratorio Por: Orozco C. Karla
Comparacin en crecimiento en diferentes
medios de cultivo de dos tipos de bacterias

2.3. Procedimiento:
1. Realizar los clculos necesarios para saber la cantidad exacta de agar.
2. Tomar la cantidad de agar y pesamos la cantidad que se calcul anteriormente.
3. Aadir el agua destilada, el magntico y el agar pesado en el matraz.
4. Homogenizar la mezcla obtenida.
5. Cubrir al matraz con papel aluminio.
6. Ponemos el marcador.
7. Lo calentamos en la plancha magntica y dejamos que est en su punto de
ebullicin por 1 minuto.
8. Retiramos el matraz con una toalla en la parte superior haciendo un poco de
presin.
9. Lo mantenemos tapado con la toalla.
10. Notaremos que mejor la transparencia de la solucin.
11. Llevar la solucin al autoclave y preparar la solucin Mac-Farlan.

Se tendr dos tubos:

1. Para la turbidez.
2. Para la muestra (placa).

2.4. Esterilizacin a la flama

La muestra biolgica que se desea analizar, es preparada para su inoculacin con el
objetivo de recuperar las bacterias. Las tcnicas de preparacin de la muestra varan
segn el tipo de muestra, en el caso de los tejidos, la esterilizacin a la flama es
importante, para una optima obtencin de microorganismos (3). A partir de una muestra
de tejido se realizan los siguientes pasos:

a) Se calienta a la flama (se mantienen remojados

en alcohol una esptula, una tijera y pinzas) la esptula
Grafico #1. Esterilizacion en la flama
sin que quede al rojo vivo y se pasa sobre la superficie del Fuente: practica de laboratorio

tejido afectado.

3ero Laboratorio Clnico e 5

Histopatolgico Microbiologa
Informe basado en la prctica de laboratorio Por: Orozco C. Karla
Comparacin en crecimiento en diferentes
medios de cultivo de dos tipos de bacterias

b) Posteriormente la preparacin es macerada

Grafico #2. Agares
y del producto generado se realiza la siembra en Fuente: practica de laboratorio
estras para el aislamiento puro del cultivo. La
preparacin se mete a incubacin junto con la caja de
petri sembrada, esto con el objetivo de realizar la
resiembra correspondiente, si se necesita(4).

2.5. Siembra bacteriana

a. Dividir la caja de petri imaginariamente en cuatro cuadrantes.
b. Inocular en el primer cuadrante con la muestra realizando estras muy juntas.
c. Esterilizar el asa y continuar con estras muy juntas en el segundo cuadrante partiendo de
las primeras estras (no se vuelve a tomar de la
muestra).
d. Continuar de la misma forma esterilizando el Grafico #3. Agar Caso, siembra de
asa entre cada cuadrante hasta que la placa Escherichia coli
Fuente: practica de laboratorio
entera se ha sembrado
e. Asegurarse de que haya contacto entre las estras
de cada cuadrante.
f. Incubar a 37C. por 24 horas

3. Materiales y Mtodos
3.1 Preparacin de medios de cultivo
Para la preparacin del cultivo se debe esterilizar el asa Grafico #4. Agar sangre, siembra de
Escherichia coli
y continuar con estras muy juntas en el segundo
Fuente: practica de laboratorio
cuadrante partiendo de las primeras estras (no se vuelve
a tomar de la muestra).

3.2 Agares para cultivo.

Para el cultivo de Estafilococos aureus y Escherichia coli se utiliz diferentes agares
como el Agar Caso, Salmonella, Mackonkey, TCBS, y agas ss.

3.3 Condiciones del rea de trabajo.

El rea de trabajo se debe desinfectar diariamente, en especial el rea en donde
permanecern los cultivos, el rea de incubacin es el rea libre de todo riesgo pero sin
embargo esto no quiere decir que no se deba dar una limpieza diaria al mismo.

3ero Laboratorio Clnico e 6

Histopatolgico Microbiologa
Informe basado en la prctica de laboratorio Por: Orozco C. Karla
Comparacin en crecimiento en diferentes
medios de cultivo de dos tipos de bacterias

4 Resultados y discusiones
4.2 Al momento de preparar los diferentes cultivos debemos tener en cuenta la manera de
colocar el asa, este debe estar anteriormente flameado y este a la vez para colocarla
en el cultivo se debe esperar mientras se enfurie y luego proceder a sembrar.
4.3 Los agares para el cultivo no tendrn el mismo resultado al momento de su siembra
bacteriana ya que existen agares ya designados con diferentes propiedades niutritivas
para cada cultivo.
4.4 Las condiciones del rea fueron las adecuadas ya que se lo mantuvo dentro de una
incubadora, libre de contaminacin y con un ambiente adecuado.

5 Conclusiones
5.2 Se concluye que si no se posee una asa en buen estado los cultivos pueden ser fallidos,
adems que no se debe presionar.
5.3 No todos los agares son adecuados para la siembra de bacterias asi como
microorganismos entricos con Agar MacConkey , los Vibrios en agar TCBS.
5.4 Al trabajar con una adecuada acepcia evitamos que nuestros cultivos se contaminaran
diversos virus, o en general otros microorganismos que puedan estar presentes en el
amiente, sabiendo que el medio correcto fue una incubadora que lo protege de todo
eso.

6 Bibliografa

1. Microbiologiageneral. Microbiologiageneral. [En lnea] 3 de Marzo de 2011. [Citado

el: 6 de Junio de 2017.] https://microbiologiageneraluvg.wordpress.com/2013/10/19/de-
donde-viene-el-agar/.

2. Slideshare. Slideshare. [En lnea] 31 de Enero de 2015. [Citado el: 6 de Junio de

2017.] https://es.slideshare.net/nataliaizurieta/laboratorio-no-4-recuento-bacteriano-
7723447.

3. Libros laboratorio. Libros laboratorio. [En lnea] 23 de Octubre de 2013. [Citado el:
6 de Junio de 2017.] https://libroslaboratorio.files.wordpress.com/2012/09/medios-de-
cultivo-en-un-laboratorio-de-microbiologc3ada.pdf.

3ero Laboratorio Clnico e 7

Histopatolgico Microbiologa