NORMA TCNICA NTC-ISO

COLOMBIANA 8981

1995-08-23

GRANOS Y CEREALES.
TRIGO. IDENTIFICACIN DE LAS VARIEDADES
POR ELECTROFORESIS

E: GRANS AND CEREALS. WHEAT. IDENTIFICATION OF

VARIETIES BY ELECTROPHORESIS

CORRESPONDENCIA: esta norma es idntica a la ISO 8981

DESCRIPTORES: trigo; cereal en grano; grano molido.

I.C.S.: 67.060.00

Editada por el Instituto Colombiano de Normas Tcnicas y Certificacin (ICONTEC)

Apartado 14237 Bogot, D.C. - Tel. 6078888 - Fax 2221435

Prohibida su reproduccin Editada 2002-09-16

 PRLOGO

El Instituto Colombiano de Normas Tcnicas y Certificacin, ICONTEC, es el organismo

nacional de normalizacin, segn el Decreto 2269 de 1993.

ICONTEC es una entidad de carcter privado, sin nimo de lucro, cuya Misin es fundamental
para brindar soporte y desarrollo al productor y proteccin al consumidor. Colabora con el
sector gubernamental y apoya al sector privado del pas, para lograr ventajas competitivas en
los mercados interno y externo.

La representacin de todos los sectores involucrados en el proceso de Normalizacin Tcnica

est garantizada por los Comits Tcnicos y el perodo de Consulta Pblica, este ltimo
caracterizado por la participacin del pblico en general.

La NTC-ISO 8981 fue ratificada por el Consejo Directivo de 1995-08-23.

Esta norma est sujeta a ser actualizada permanentemente con el objeto de que responda en
todo momento a las necesidades y exigencias actuales.

A continuacin se relacionan las empresas que colaboraron en el estudio de esta norma a travs
de su participacin en el Comit Tcnico 111001 Granos, cereales y legumbres secas.

ASOCIACIN NACIONAL DE INDUSTRIALES INDUSTRIAS QUMICAS DE COLOMBIA

BAVARIA S.A. LTDA.
CARULLA & CA. S.A. INSTITUTO DE MERCADEO
CERVECERA UNIN S.A. AGROPECUARIO
COMPAA COLOMBIANA DE PRODUCTOS J. MARBES CARRILLO LTDA.
LCTEOS S.A. KELLOGG DE COLOMBIA S.A.
COMPAA INDUSTRIAL DE CEREALES S.A. MALTERAS UNIDAS S.A.
COMPAA NACIONAL DE LEVADURAS MINISTERIO DE AGRICULTURA
LEVAPAN S.A. MINISTERIO DE SALUD PBLICA
COMPAA NACIONAL PETROQUMICA NESTL DE COLOMBIA S.A.
CONAPET POLITCNICOS COLOMBIANO JAIME
FEDERACIN NACIONAL DE ALGODONEROS ISAZA CADAVID
FEDERACIN NACIONAL DE ARROCEROS PRODUCTOS QUAKER S.A.
FEDERACIN NACIONAL DE CACAOTEROS SERVICIO NACIONAL DE APRENDIZAJE
FEDERACIN NACIONAL DE REGIONAL CRDOBA
CULTIVADORES DE CEREALES SGS COLOMBIA S.A.
FEDERACIN NACIONAL DE MOLINEROS SOCIEDAD HOTELERA CIEN
DE TRIGO INTERNACIONAL S.A.
FRUTERA COLOMBIANA S.A. UNIVERSIDAD DE ANTIOQUIA
INDUSTRIA LICORERA DE BOYAC UNIVERSIDAD DEL VALLE
INDUSTRIA NACIONAL DE CONSERVAS S.A. UNIVERSIDAD JORGE TADEO LOZANO
LA CONSTANCIA UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA
ICONTEC cuenta con un Centro de Informacin que pone a disposicin de los interesados
normas internacionales, regionales y nacionales.

DIRECCIN DE NORMALIZACIN
NORMA TCNICA COLOMBIANA NTC-ISO 8981

GRANOS Y CEREALES.
TRIGO. IDENTIFICACIN DE VARIEDADES
POR ELECTROFORESIS

1. OBJETO

Esta norma especifica un mtodo para la identificacin de la variedad de un lote de trigo blando o
duro en forma de granos molidos individuales, fcula o harina, mediante la separacin de
protenas de gliadina.

2. PRINCIPIO

Separacin de las protenas de gliadina del trigo por electroforesis del gel poliacrilamida (PAGE)
en tabletas que contienen lactato de aluminio, como regulador del pH a 3,1.

3. REACTIVOS

Se utilizan solamente reactivos de grado analtico reconocido, a menos que se especifique algo
diferente. Se deber utilizar agua desionizada con una resistencia mayor de 10 M.

3.1 SOLUCIN DE EXTRACCIN

Etanol, 70 % (V/V).

Se diluyen 700 ml de etanol (puro) con 300 ml de agua.

3.2 SOLUCIN REGULADORA

Lactato de aluminio, solucin de 2,5 g/l.

Se disuelven 15,0 g de lactato de aluminio en 5,5 L de agua. Se ajusta el pH a 3,1 con cido
lctico. Se llena hasta 6 L con agua y se filtra en vaco a travs de un filtro con tamao de poro
de 0,45 m.

Se almacena a 4 C.

Nota 1. La conductividad de la solucin debe ser de aproximadamente 950 S/m.

1
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3.3 REGULADOR PARA LA DILUCIN DE LA MUESTRA

Se disuelven 60,0 g de sacarosa en 50 ml de solucin reguladora (vase el numeral 3.2).

Se almacena a 4 C.

3.4 ACRILAMIDA, solucin de gel de 60,0 g/l

Advertencia. El monmero acrilamida es una sustancia neurotxica que se puede absorber a

travs de la piel. Se debe tener cuidado cuando se maneje ya sea el polvo cristalino o la
solucin gel.

En un recipiente volumtrico con capacidad de 100 ml se disuelven 6,0 g de acrilamida (grado

electroforesis), 0,300 g de bisacrilamida N,N-metileno (grado electroforesis) y 0,020 g de cido
ascrbico en la solucin reguladora (numeral 3.2).

Se completa hasta 100 ml con la solucin reguladora.

Se almacena a 4 C.

3.5 SOLUCIN INICIADORA

Sulfato de hierro (II) heptahidratado, solucin de 10 g/l.

En un recipiente volumtrico con capacidad de 10 ml, se disuelve en agua 0,1 g de sulfato de

hierro heptahidratado y se diluye hasta 10 ml con agua.

Esta solucin se prepara poco tiempo antes de su uso.

3.6 SOLUCIN CATALIZADORA

Perxido de hidrgeno, solucin 0,99 % (m/m).

En un recipiente volumtrico con capacidad de 10 ml se disuelven en agua 0,33 ml de perxido

de hidrgeno [30 % (m/m)].

Se diluye con agua hasta 10 ml.

Se prepara una solucin diariamente y se almacena a 4 C.

3.7 CIDO TRICLOROACTICO

Solucin 9,6 % (m/m).

En un recipiente volumtrico con capacidad de 1 000 ml se disuelven 96 g de tricloroactico en

agua.

Se diluye con agua hasta 1 000 ml.

3.8 AZUL BRILLANTE R250

Solucin referencia de 5,0 g/l

2
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Se disuelven 5,0 g de azul brillante en 1 L de etanol, se mezcla durante 1 h y luego se pasa a

travs de papel filtro (4.10) para retirar las sales inorgnicas que puedan estar presentes.

3.9 SOLUCIN DE TINCIN: AZUL BRILLANTE

Solucin 0,25 g/l

Se mezclan 5,0 ml de solucin referencia (vase el numeral 3.8) con 95 ml de solucin de cido
tricloroactico (vase el numeral 3.7).

3.10 MARCADOR O TINTA INDICADORA

Por ejemplo: Pironin G, verde de metilo.

4. APARATOS

Se utiliza el equipo usual de laboratorio, y en particular los siguientes:

4.1 Unidad de electroforesis vertical1)

4.2 Formadores de pozos (peinilla) apropiados para el equipo utilizado

4.3 Suministro de energa

Un suministro de d.c. que suministre tensiones estables y constantes hasta de 1 000 V y

corriente constante hasta de 300 mA (300 W mnimo).

4.4 Bao de enfriamiento termorregulado

Bao de agua circulante para mantener la unidad de electroforesis a 20 C 1 C.

4.5 Sistema de purificacin de agua

Un sistema para desionizacin que suministre agua de alta calidad con una resistencia mayor de
10 M.

4.6 Balanza analtica.

4.7 Medidor de ph, con una exactitud de 0,05 unidades de ph.

4.8 Medidor de conductividad (opcional).

4.9 Unidad de filtro de vaco.

Con filtros de nitrato de celulosa, tamao de poro 0,45 m.

1)
En el comercio se consiguen numerosas unidades para electroforesis vertical.

3
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4.10 Papel de filtro

Whatman No. 1, 15,0 cm.

4.11 Agitador magntico

Con barras de agitacin revestidas de (PTFE)2), de 2,5 cm y 5 cm de longitud.

4.12 Martillo y placa de acero

Para triturar los granos individuales.

4.13 Molino para muestras

Con capacidad para producir partculas de 500 m.

4.14 Tubos para muestras

Con tapa.

4.15 Micropipetas

Pipetas manuales con extremos desechables de 2,5 ml para entregar volmenes de 50 l a 250 l.
Micropipetas ajustables que entreguen 10 l a 100 l y 100 l a 1 000 l.

4.16 Microcentrfuga

Con una mnima fuerza centrfuga de 10 000 g.

4.17 Tubos para centrfuga

Con capacidad de 1,5 ml a 2,0 ml.

4.18 Agitador de vrtice

4.19 Microjeringas

Con capacidad de 25 l.

4.20 Recipientes de polietileno duro

De aproximadamente 6 cm x 17 cm x 17 cm.

4.21 Bandejas de vidrio refractario

De 33 cm x 23 cm x 5 cm, para lavado, observacin y toma de fotografas del gel.

4.22 Agitador de velocidad variable

Con velocidad de agitacin de aproximadamente 50 rpm.

2)
PTFE: Politetrafluoroetileno.

4
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4.23 Caja de luz

Equipada con una fuente de luz fluorescente y una superficie de observacin mnima de 30 cm x
60 cm para el examen del gel y la toma de fotografas.

4.24 Cmara

De 35 mm con un lente reflex, cargada con pelcula de grano fino, en color o en blanco y negro.

4.25 Soporte de la cmara

Cualquier soporte estable para tomar las fotografas con velocidades de obturador lentas.

5. MUESTREO

Es importante que el laboratorio reciba una muestra representativa, que no haya sufrido dao ni
cambios durante su transporte o almacenamiento.

El muestreo no forma parte del mtodo especifico de esta norma. Los mtodos recomendados se
presentan en las normas ISO 950, ISO 2170 e ISO 6644.

6. PROCEDIMIENTO

6.1 PREPARACIN DE LAS MUESTRAS DE ENSAYO Y EXTRACCIN

6.1.1 Muestras de granos individuales

Nota 2. El nmero de semillas individuales que necesita ser analizado depende de la exactitud requerida en la
determinacin. Los lmites de confianza basados en el examen de diversos nmeros de granos se presentan en el
Anexo A. El anlisis de submuestras ms grandes da estimados proporcionales de mayor precisin.

El grano se coloca entre papel doblado (5 cm x 5 cm) sobre una placa metlica y se pulveriza con
el martillo (vase el numeral 4.12). El material triturado se transfiere al tubo de muestreo (numeral
4.14) y se agregan 200 l de solucin de extraccin (numeral 3.1) con una pipeta (vase el 4.15).
Se mezcla el contenido con un mezclador de vrtice (vase el numeral 4.18) durante 10 s y se
deja reposar a temperatura ambiente (20 C) durante 1 h mnimo. Se agregan 100 l de
regulador de dilucin de la muestra (vase el numeral 3.3) y se mezcla nuevamente. Se deja
que la muestra se decante durante 10 min antes de realizar el muestreo para el anlisis.

Si el extracto del grano se va a mantener durante ms de 24 h, se transfiere a un tubo de centrfuga

(vase el numeral 4.17) y se coloca durante 3 min a 10 000 g en la microcentrfuga (vase
el numeral 4.16). Se decanta el sobrenadante en el tubo de muestreo y se coloca
nuevamente la tapa.

Se almacena a 4 C hasta por 10 d.

5
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Nota 3. Los volmenes usados son para un peso promedio de 30 mg. En general, la mayora de laboratorios no pesan
los granos individuales, pero si se desea, es posible pesar el grano y luego agregar volmenes equivalentes para un
total de 10 l por miligramo de trigo. Al usar el peso del grano da como resultado mejores electroforegramas pero se
incrementa el tiempo de preparacin de la muestra.

6.1.2 Muestras a granel

Se muele la muestra en el molino elctrico (vase el numeral 4.13). Se pesan 0,2 g de harina
molida en un tubo de centrfuga (numeral 4.17) y se agregan 600 l de solucin de extraccin. Se
mezclan los contenidos con el mezclador de vrtice (vase el numeral 4.18) durante 10 s y se
deja reposar a temperatura ambiente (20 C) mnimo durante 1 h. Se centrifuga a 10 000 g
durante 5 min. Se transfieren 200 l del sobrenadante a un tubo de muestreo que contiene 400 l
de la solucin reguladora de dilucin de la muestra (numeral 3.3) y se coloca nuevamente la
tapa.

Se almacena a 4 C hasta por 10 d.

6.2 PREPARACIN DEL EXTRACTO ESTNDAR

Se sigue el procedimiento descrito en el numeral 6.1 pero utilizando los granos de la variedad
con referencia pura (Neepawa)3).

6.3 PREPARACIN DE LOS GELES

Se montan las cajas para los geles con separadores de 1,5 mm de espesor, segn se describe
en las instrucciones del fabricante.

Nota 4. Para ayudar a vaciar la solucin de gel e insertar el formador de pozos en la caja, se pega un trozo de plstico
4)
con una cinta (por ejemplo: Plexiglas , 140 mm x 25 mm x 3 mm) hasta el borde superior de una de las placas de vidrio
de la caja.

Para preparar cada gel, se combinan 30 g de solucin de gel (vase el numeral 3.4) y 75 l de
solucin iniciadora (vase el numeral 3.5) en un recipiente de filtrado de 125 ml con asa lateral.
Se desgasifica la solucin en vaco de mnimo 50 mmHg durante 2 min, mezclando
constantemente. Se agregan 120 l de solucin catalizadora (numeral 3.6) y se mezcla la
solucin suave y manualmente durante 10 s, teniendo cuidado de no formar burbujas de aire. Se
vierte la solucin rpidamente en la caja, en un chorro continuo para minimizar la introduccin de
aire. Inmediatamente despus de llenar la caja, se introduce el formador de pozos (vase el
numeral 4.2). La polimerizacin est completa en un lapso de 5 min a 10 min.

Nota 5. Se ha considerado que una temperatura de fundicin de 20 C a 22 C da resultados satisfactorios.

3)
Los granos de la variedad con referencia pura (Neepawa) se pueden obtener en la Canadian Grain
Commission, Grain Research Commission, Grain Research Laboratory, 1404-303 Main Street, Winnipeg,
Manitoba, R3C 3G8 Canad.

4)
Esta informacin se presenta para conveniencia de los usuarios de esta norma y no constituye respaldo de
ISO al producto mencionado. Se pueden usar productos equivalentes si se puede probar que dan los mismos
resultados.
6
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6.4 CARGA DE LA MUESTRA

Se retira con cuidado el formador de pozos y se llenan las cavidades de la muestra con
solucin reguladora (numeral 3.2) para evitar la deshidratacin del gel. Con una microjeringa
(vase el numeral 4.19) se deposita el extracto de muestra (vense los numerales 6.1.1 6.1.2),
en el fondo de las cavidades. La cantidad de extracto de muestra depende del equipo utilizado.
(El extracto de muestra denso forma una capa debajo de la solucin reguladora en las
cavidades). Se coloca el extracto estndar (vase el numeral 6.2) en cualquier cavidad, con
excepcin de las dos ms exteriores.

Nota 6. A manera de gua, se deposita una muestra de 2 l en cada cavidad de un gel de 1,5 mm de espesor, de 30
cavidades.

6.5 ENSAMBLE DE LA UNIDAD DE ELECTROFORESIS

La cmara reguladora superior se ajusta a los extremos superiores de las cajas de gel. El
ensamble de los componentes de la cmara inferior se hace de acuerdo con las instrucciones del
fabricante. El ensamble de la cmara superior y de la caja de gel se coloca en la cmara inferior
que se ha llenado con la solucin reguladora (vase el numeral 3.2) (o suficiente regulador para
cubrir las cajas de gel). Se llena la cmara superior con solucin reguladora, se coloca la tapa de
seguridad a la unidad y se conectan los electrodos a la fuente de energa (vase el numeral 4.3).
Es necesario asegurarse de que el electrodo de la cmara superior es el nodo y que est
conectado al polo positivo (+) de la fuente de energa, mientras que el electrodo de la cmara
inferior es el ctodo y est conectado al polo negativo (-) de la fuente de energa.

6.6 ELECTROFORESIS

Se ajusta el bao (vase el numeral 4.4) para mantener la unidad de electroforesis a 20 C

durante la corrida. Se utiliza una corriente constante de 90 mA por gel para electroforesis. Se
utiliza un marcador o tinta indicadora (vase el numeral 3.10) para determinar el tiempo de
corrida ptimo para diferentes tipos de equipos y tamaos de geles. Cuando la corrida termina,
se apaga la fuente de energa, se desconecta la tapa de seguridad, se retira el montaje de la
cmara superior y se vaca la capa superior de regulador.

Advertencia. Las altas tensiones son potencialmente letales. Es necesario cerciorarse de que
los aparatos elctricos se usan con seguridad de acuerdo con las instrucciones del fabricante y
de que no hay fugas elctricas.

6.7 TINCIN

Se separan las cajas de gel de la unidad de electroforesis. Se abren las cajas, se sacan los
geles y se coloca cada uno de ellos en un recipiente plstico (vase el numeral 4.20) que
contiene 100 ml de solucin de tincin (vase el numeral 3.9). Se colocan los recipientes
tapados sobre el agitador (vase el numeral 4.22) y se agita el contenido suavemente,
aproximadamente a 50 rpm de 4 h a 18 h. No se requiere desteido, pero los geles se colocan
en bandejas de vidrio con agua y se frotan suavemente con una almohadilla de algodn para
retirar el tinte precipitado.

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7. FOTOGRAFA

Se monta la cmara (vase el numeral 4.24) sobre el soporte (vase el numeral 4.25) sobre la
caja de luz (vase el numeral 4.23). El gel limpio se coloca en una bandeja de vidrio (vase el
numeral 4.21) y se sita debajo de la cmara. Se fotografa el gel, utilizando solamente
iluminacin desde abajo.

8. INTERPRETACIN DE PATRONES

8.1 CARACTERIZACIN DE PATRONES

El patrn electrofortico de una variedad de trigo (vase la Figura 1) se puede caracterizar

visualmente por la movilidad relativa y los valores de intensidad de sus bandas, como se
describi en la referencia[4]. El patrn (o patrones, debido a los diferentes biotipos presentes)
obtenido del anlisis de 100 granos de cada variedad se registra de esta manera, al igual que
fotogrficamente, en el catlogo de patrn de variedad. Estos datos de caracterizacin de patrn
se utilizan para crear una clave de identificacin basada en la presencia o ausencia de bandas de
movilidades o intensidades relativas particulares.

8.2 IDENTIFICACIN DE VARIEDADES

El siguiente procedimiento se deber seguir para identificar una variedad desconocida de trigo
por su patrn electrofortico.

a) Se examina visualmente el gel o su fotografa y se registran su posicin y las

intensidades de sus bandas con relacin a bandas especficas en el patrn de
variedad de referencia que tambin se ha analizado.

b) Se consulta la clave preparada como se establece en el numeral 8.1 para

identificar la variedad.

c) Se verifica la identificacin comparando el patrn observado con el documentado

en el catlogo de patrn de variedad.

9.6 EXPRESIN DE LOS RESULTADOS

Las consideraciones estadsticas se debern tener en cuenta cuando se sacan conclusiones

acerca de la composicin de la variedad de una muestra, con base en el anlisis de granos
individuales. Los intervalos de confianza se dan en el Anexo A.

DOCUMENTO DE REFERENCIA

INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION. Wheat. Identification of

Varieties by Electrophoresis. Geneve, 1993. 8 p. (ISO 8981).

8
NORMA TCNICA COLOMBIANA NTC-ISO 8981

Figura 1. Patrones PAGE de gliadinas de trigos Neepawa (1 y 12),

Slejpner (2), Rektor (3), Prinqual (4), Mercia (5) Maris Huntsman
(6), Galahad (7), Champlein (8), Camp Remy (9)
Beauchamp (10) y Avalon (11) (R50 es una banda de referencia
utilizada para determinar las movilidades relativas)

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Anexo A (Normativo)

Intervalos de confianza

La Tabla A.1 presenta los intervalos de confianza para la proporcin de una variedad X en una
muestra, con base en el nmero de granos de X encontrados en diferentes submuestras (n), para
una probabilidad del 95 %.

Tabla A.1

Nmero de Intervalos de confianza, %

granos de X
encontrados n = 10 n = 20 n = 30 n = 40 n = 50 n = 70 n = 100

0 0,0 a 31 0,0 a 17 0,0 a 12 0,0 a 8,8 0,0 a 7,1 0,0 a 5,1 0,0 a 3,6
1 0,3 a 45 0,1 a 25 0,1 a 17 0,1 a 13 0,1 a 11 0,0 a 7,7 0,0 a 5,5
2 0,5 a 56 1,2 a 32 0,8 a 22 0,6 a 17 0,5 a 14 0,4 a 9,9 0,2 a 7,0
3 6,7 a 65 3,2 a 38 2,1 a 27 1,6 a 20 1,3 a 17 0,9 a 12 0,6 a 8,5
4 12 a 74 5,7 a 44 3,8 a 31 2,8 a 24 2,2 a 19 1,6 a 14 1,1 a 9,9
5 19 a 81 8,7 a 49 5,6 a 35 4,2 a 27 3,3 a 22 2,4 a 16 1,6 a 11
6 12 a 54 7,7 a 39 5,7 a 30 4,5 a 24 3,2 a 17 2,2 a 13
7 15 a 59 10 a 42 7,3 a 33 5,8 a 27 4,1 a 20 2,9 a 14
8 19 a 64 12 a 46 9,1 a 36 7,2 a 29 5,1 a 21 3,5 a 15
9 23 a 68 15 a 49 11 a 39 8,6 a 31 6,1 a 23 4,2 a 16
10 27 a 73 17 a 53 13 a 41 10 a 34 7,1 a 25 4,9 a 18
15 31 a 69 23 a 54 18 a 45 13 a 33 8,7 a 24
20 34 a 66 26 a 55 18 a 41 13 a 29
25 36 a 64 25 a 48 17 a 35
30 31 a 55 21 a 40
35 38 a 62 26 a 45
40 30 a 50
45 35 a 55
50 40 a 60
[5]
Nota. Los datos son tomados de la referencia

EJEMPLO 1

Si 3 granos (es decir, el 6 %) de trigo durum se encuentran en 50 granos de trigo spring,

entonces se puede reportar que la muestra de trigo del volumen original contiene entre 1,3 % y
17 % de trigo durum.

En la Tabla A.2 se presentan los lmites de confianza para la proporcin de variedad X en una
muestra, con base en el porcentaje encontrado en diferentes submuestras (n), para una
probabilidad del 95 %.

10
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Tabla A.2

Lmites de confianza, %
Porcentaje de X
encontrado n = 120 n = 200 n = 600 n = 1 000

0 0,0 a 3,0 0,0 a 1,8 0,0 a 0,6 00, a 0,4

1 0,1 a 4,8 0,1 a 3,6 0,4 a 2,2 0,5 a 1,8
2 0,3 a 6,4 0,6 a 5,0 1,0 a 3,5 1,2 a 3,1
3 0,8 a 7,8 1,1 a 6,5 1,8 a 4,7 2,0 a 4,3
4 1,3 a 9,3 1,7 a 7,8 2,6 a 5,9 2,9 a 5,4
5 1,8 a 11 2,4 a 9,0 3,4 a 7,1 3,7 a 6,5
6 2,5 a 12 3,1 a 10 4,2 a 8,2 4,6 a 7,7
7 3,1 a 13 3,9 a 11 5,1 a 9,4 5,5 a 8,8
8 3,8 a 14 4,6 a 13 6,0 a 10 6,4 a 9,9
9 4,5 a 16 5,4 a 14 6,9 a 12 7,3 a 11
10 5,3 a 17 6,2 a 15 7,7 a 13 8,2 a 12
15 9,2 a 23 10 a 21 12 a 18 13 a 17
20 13 a 28 15 a 26 17 a 23 18 a 23
25 18 a 34 19 a 32 22 a 29 22 a 28
30 22 a 39 24 a 37 26 a 34 27 a 33
35 27 a 44 28 a 42 31 a 39 32 a 38
40 31 a 49 33 a 47 36 a 44 37 a 43
45 36 a 54 38 a 52 41 a 49 42 a 48
50 41 a 59 43 a 57 46 a 54 47 a 53
[5]
Nota. Los datos son tomados de la referencia

EJEMPLO 2

Si un 3 % (es decir, 6 granos) de trigo durum se encuentran en 200 granos de trigo spring,
entonces se puede reportar que la muestra de trigo del volumen original contiene entre 1,1 % y
6,5 % de trigo durum.

11
NORMA TCNICA COLOMBIANA NTC-ISO 8981

Anexo B (Informativo)

Bibliografa

[1] ISO 950:1979, Cereals - Sampling (as grain).

[2] ISO 2170:1980, Cereals and Pulses - Sampling of Milled Products.

[3] ISO 6644:1981, Cereals and Milled Cereal Products - Automatic Sampling by
Mechanical Means.

[4] BUSHUK, W. and ZILLMAN, R.R. Wheat Cultivar Identification by Gliadin

Electrophoregrams. I. Apparatus, Method and Nomenclature. Can. J. Plant. Sci., 58,
1978, pp. 505-515.

[5] MEYER U. and STEINER, A.M. Statistical Evaluation of Electrophoresis Results in

Cultivar Verification and of Other Tests With Alternative Indicators in Seed Testing as
Germination, Tetrazolium, Health Excised-embryo and X-ray Tests. Verband Deutscher
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