Ao de la consolidacin del Mar de Grau

15-04-16

ALUMNAS:
Bustinza Damiano, Roco
Gonzales Rosales, Brisayda
Huiza Acosta, Karen Briguit
Lzaro Mendoza, Carmen Janeth
Rocha Yupanqui, Ruth
DOCENTE:
Alexandra Muoz
MATERIA:
Microbiologa Ambiental
CICLO:
IV

LIMA, 2016
 I. OBJETIVOS

En el presente informe se tiene como principal objetivo el reconocimiento de

microorganismos; y como objetivos especficos los siguientes:

1. Aprender y conocer los tipos de medios de cultivo, identificando los pasos

a seguir durante cada preparacin.
2. A partir de la siembra obtener el crecimiento de microorganismos
3. Manipular con cuidado el microscopio para posteriormente observar los
resultados de la siembra.
4. Realizar la respectiva identificacin y/o reconocimiento de
microorganismos.
5. Interpretar y analizar los resultados obtenidos y/u observados durante el
procedimiento.

II. MATERIALES

Siembra de cultivos

Mechero Hisopos esterilizados

Gradilla Portaobjetos
Placa de Petri Agar papa dextrosa (PDA)
Asas de siembra Agar eosina azul de metileno
Tubos con medio lquido (EMB)

Coloracin Gram

Mechero Lugol
Gradilla Alcohol
Asas de siembra Cristal violeta
Pinza de madera Safranina
Portaobjetos
 Crecimiento Bacteriano

Placas de Petri con Beaker

Pseudonoma y salmonella Tubos de ensayo
Cubetas Agua destilada
Asas de siembra

III. METODOLOGA

1. En la primera prctica de laboratorio: Medios de cultivo

Preparamos medios de cultivo

Cultivo slido (Agar) Cultivo lquido (Caldo)

Trabajamos con 4 placas Petri. En una probeta medimos 100ml de agua destilada.

28g--------1L Pesamos el medio de cultivo segn Pesamos el medio de cultivo segn 13g--------1000mL
indicacin del frasco y colocamos en indicacin del frasco y colocamos
28g-------1000mL un vaso precipitado. en un vaso precipitado. 1,3g-------100mL

1,96g -------70mL

Luego agregamos agua destilada al Luego agregamos 100ml de agua Pesamos 1.3g de
vaso precipitado con medio de destilada al vaso precipitado con medio de cultivo en
Pesamos 1.96g de
cultivo, y mezclamos. medio de cultivo, y mezclamos. la balanza analtica.
medio de cultivo en
la balanza analtica.

Despus llevamos a microondas a Despus servimos el contenido a

esterilizar 4 veces por minuto. las botellas rotuladas y llevamos a
microondas a esterilizar 1 veces
por minuto y dejamos enfriar.
Luego se sirve el agar en placas Petri
rotuladas con mucho cuidado, esta
operacin se realiza en el flujo laminar al Realizamos la siembra
lado del mechero para evitar que se
El medio de cultivo lquido debe
contamine.
ser de 90mL al cual se le
adicionar 10mL de muestra
lquida o 10 g de muestra slida.
Distribuir rpidamente el medio
en las placas antes de que
comience a solidificar. Placa 1
Despus recogimos muestras de
Odo bacterias de odo y agua de cao
Placa 2 con hisopos.
Despus recogimos muestras de
bacterias de odo y agua de cao
con hisopos.
 Placa 3
Agua de Encendimos el mechero para crear
cao un ambiente esterilizado y cerca
Luego encendimos el mechero y Placa 4 untamos las muestras de odo y
con un asa metlica, flameada en pared bucal al medio de cultivo.
mechero para esterilizarla, y
despus de enfriarla se procede a
tomar la muestra a sembrar por Por ltimo, lo
el mtodo de estra. incubamos en la
nevera hasta la
siguiente clase.
Por ltimo, lo incubamos en la nevera
hasta la siguiente clase.

2. En la segunda prctica de laboratorio: Coloracin de Gram y Microscopia

Sembramos en medios selectivos y

diferenciales bacterias conocidas

E. Col EMB
Primero prendimos el Luego calentamos la varilla y la boca El proceso se
mechero para del tubo que contena E. Coli y repiti para las
tomamos una muestra de esta para Vibrio sp. TCBS
esterilizar el cinco placas, pero
ambiente. untarlo en la placa Petri que con diferentes
contena agar. bacterias. Cetrimide
Pseudonoma

AMS
S. Aureus

Por ltimo, lo rotulamos Salmonella SS

e incubamos.

Coloracin GRAM

Luego colocamos una gota de

Fijamos las muestras al Colocamos una gota de agua cristal violeta en el
fuego y con la varilla en el portaobjetos. Y portaobjetos con la muestra
recogemos bacterias. despus, untamos la por 1 minuto, y enjuagamos
muestra. con agua.

Por ltimo colocamos una Colocamos gotas de alcohol

Despus 1 gota de lugol,
gota de safranina y por 30 segundos y
por 1 minuto y enjuagamos.
enjuagamos. enjuagamos.

Dejamos secar antes de

enfocar en el
microscopio.
 En el microscopio. Enfocamos nuestra muestra en 10x-40x
hasta 100x.

3. En la tercera prctica de laboratorio: Crecimiento bacteriano

Realizamos la medicin del crecimiento bacteriano de la Pseudonoma y Salmonella

Pseudonoma
Despus, esterilizamos el Rotulamos los tubos en A y B.
Primero escogimos 2 especies.
ambiente encendiendo el
mechero, luego calentamos
Salmonella la varilla metlica y tomamos Tubo A:
dos muestras de Pseudonoma
Pseudonoma y las untamos Salmonella
en dos tubos con caldo. Tubo B:
Luego realizamos el mismo
Pseudonoma
proceso con la Salmonella.
Salmonella

Este proceso se realiz Por otro lado, los tubos B, fueron

despus del reposo de 30
minutos por 5 veces para
ambos casos.
Posteriormente los tubos A
llevados al microondas para ser
fueron llevados al
esterilizados por 15 segundos y luego
espectrofotmetro, para
recin entraron al espectrofotmetro.
medir la densidad ptica.

Tambin realizamos la lectura de nuestras muestras pasadas en el microscopio.

 V. RESULTADOS
VI. RESULTADO DE MEDIOS DE CULTIVOS SOLIDO (AGAR) Y LIQUIDO
(CALDO)
Muestras C,SOLIDO(AGAR) C.LIQUIDO RESULTADO DESPU
(CALDO) SEMANA
EN CADA UNO DE LOS
OIDO 1 X Sembrado en caldo En este caso a simpl
evidencio el crecimien
bacterianas, pero cabe
pudimos percibir un olor
hubo crecimiento de bac
OIDO2 Sembrado en agar X Se observ el crecimien
fusiformes, sobre el agar
convexa, de color blan
color del agar se mantu
principio cristalino.
AGUA POTABLE Sembrado en agar X No se observ crecimie
1 tipo de colonias microbia

AGUA POTABLE X Sembrado en caldo En este no pudimos obs

2 ni tampoco algn olor
del cultivo de la muestra

RESULTADOS TRAS LA REALIZACIN DE LA COLORACIN GRAM Y

MORFOLOGIA CELULAR (observacin en el microscopio)
Este resultado es de las 4 muestras sembradas una semana antes (odo
1.oido2,agua de cao 1y 2),ms las 5 muestras proporcionadas en el laboratorio que
anteriormente se encontraban en un medio de cultivo liquido.
MUESTRAS A EVALUAR MORFOLOGIA CELULAR GRAM
AGUA POTABLE 1 No se encontr microorganismo ninguno
alguno, solo se vea partculas de
agar.
AGUA POTABLE 2 Tampoco se hall ningn tipo de ninguno
microorganismo (bacteria)
OIDO 1 Bacilos, de forma alargada en gran negativo
cantidad muy poblada.
OIDO 2 Bacilos, dispersos de forma circular positivo
ovalada.
Estos resultados son 1 hora despus de haber realizado el sembro en agares
respectivos.
 MUESTRAS A EVALUAR MORFOLOGIA CELULAR GRAM
Salmonella Pudimos observar bacilos positivo
pero muy distanciados de
forma circular ovalada
Vibrio SP No se logr ver .
Escherichia coli Se observ bacilos de forma negativo
ms alargada
Pseudomonas Observamos conjunto de negativo
bacterias en forma de bacilos
de colores rojo grosella.
Tenan la forma circular
ovalada.
aureus Cocos, tenan forma circular positivo
muy definidos de color violeta,
pero se encontraban
dispersos.

RESULTADOS DE LA NUEVA SIEMBRA EN TOTAL DE LAS 7 TIPOS DE

BACTERIA
Cabe resaltar que escogimos dos muestras (oido2 y agua potable 1) estos sembramos
en agar cetremide y agar ss. Respectivamente.

BACTERIAS CARACTERIZACION DE COLONIAS MICROBIANAS VISTOS EN EL MICR

DOS 0 MUESTRAS
FORMAS
Escherichia coli En esta muestra evidenciamos colonias de forma No se pudo definir po
irregular, elevacin elevada de margen ondulado, de en el procedimiento
consistencia blanda de color negro.
Se observ un cambio de coloracin en la placa de rojo a
grisceo.
Vibrio SP No present ninguna forma de microorganismo, tampoco No pudimos llevar
se evidencio el cambio de color del agar en el cual se microscopio debido a
sembr.Mantubo su color inicial (verde) pudo reproducirse
agar.
DE Pseudomonas Las colonias estaban dispersas, de superficie rugosa .de La muestra en el porta
consistencia dura, de pigmento blanco opaco, con era abundante, vag
margen ondulado, borde irregular, de forma puntiforme., podamos ver la form
se observ el cambio de coloracin del medio de cultivo bacilos, su color e
de blanco a verde. grosella.
Aureus Se observ colonias distantes, de margen entero, Observamos en for
elevacin pulvinada circular de borde continuo, de cocos de color violeta
consistencia mucoide, a su vez en la parte donde se
sembr se not el cambio de color del medio de rosado
a amarillo.
 Salmonella Las colonias crecieron de manera dispersa, en forma Pudimos ver pe
circular con elevacin pulvinada, margen entero y formas ovaladas ala
ondulado, de consistencia mucoide, pigmentacin negro distantes de color fuc
de superficie liza. El medio en el que creci cambio de
color de rozado a rojo amrillento.
DE Odo 2 Las colonias presento una superficie liza, de consistencia Bacilos, se vean en
mucoide, color blanco opaco, de borde irregular de frijoles.
ondulado, de elevacin convexa. Cambio de color del
medio de cristal a amarillo verduoso.Evidenciando la
supuesta existencia de colonias de Pseudomonas.
Agua potable En este caso no creci ningn tipo de microorganismo. No se hall nada, pu
el medio en el que sembr tampoco presento cambios que no creci nada.
,manteniendo su color de agar (marrn).

RESULTADO PARA EL CASO DEL CRECIMIENTO DE SALMONELLA

TIEMPO MICROORGANISMOS ABSORBANCIA (A) ABSORBANCIA

(B)
0 Salmonella 0.19 0.268
30 Salmonella 0.392 0.384
60 Salmonella 0.439 0.4
90 Salmonella 0.465 0.386
120 Salmonella 0.315 0.45

Resultado de los dos especies de microorganismos sometidos a un estrs de temperatura

1: Pseudomonas A: Bacterias que no estn sometidas a esterilizacin.

2: Salmonella B: Bacterias sometidas a esterilizacin.

660nm*100cm/m=6.6ncm

1. Entre el tiempo 0 a los 30 minutos podemos observar el crecimiento bacteriana

 CRECIMIENTO DE LA SALMONELLA EN DOS
CONDICIONES
0,5 0,465 0,45
0,439
0,45 0,392
0,384 0,4 0,386
0,4
ABSORBANCIA

0,35 0,315
0,3 0,268
0,25 0,19
0,2
Series1
0,15
0,1 Series2
0,05
0
0 30 60 90 120

TIEMPO EN MINUTO

SERIE1: EN CONDICION(A)

SERIE2: EN CONDICIONES DE ESTERILIZACION (B)

RESULTADOS
EN CONDICIONES (A) SIN ESTERILIZAR
1. Se observa entre el tiempo o hasta el minuto 30 un crecimiento
exponencial.
2. A partir del minuto treinta hasta el minuto 60 el crecimiento
disminuye con respecto a los 30 minutos anteriores.
3. A partir del minuto 60 hasta los 90 minutos el crecimiento
disminuye con respecto a los 60 minutos anteriores, podemos
decir que para este caso se observa un crecimiento
semiestacionario.
4. Desde el minuto 30 hasta el minuto 90 el crecimiento es menor
en comparacin a los primeros 30 minutos.
5. Para los ltimos 30 minutos que comprende desde el minuto 90
hasta el minuto 120 observamos la reduccin mxima del
crecimiento, que evidencia la muerte de las salmonellas.
RESULTADOS
EN CONDICIONES (B) EN CONDICIONES DE ESTERILIZACION
1. Se observa entre el tiempo 0 hasta el minuto 30 un crecimiento
exponencial.
2. A partir del minuto treinta hasta el minuto 60 el crecimiento
disminuye con respecto a los 30 minutos anteriores de forma
similar al que estn en condiciones (A), con la diferencia de que
este crecimiento es menor a la condicin (A).
3. Desde el minuto 30 hasta el minuto 90 el crecimiento es menor
en comparacin a los primeros 30 minutos, resaltando que el nivel
de crecimiento es semi constantes entre estos minutos, mostrara
un estado de crecimiento estacionario ,pero en menor proporcin
que en condiciones (A) en el mismo tiempo.
4. Para los ltimos 30 minutos que comprende desde el minuto 90
hasta el minuto 120 observamos un crecimiento exponencial
similar a los primeros 30 minutos, para este caso podemos decir
que no hay muerte de microorganismos como en condiciones (A)
e el mismo tiempo.
 RESULTADO PARA EL CASO DE SCRECIMIENTO DE PSEUDOMONAS
TIEMPO MICROORGANISMOS ABSORBANCIA (A) ABSORBANCIA
(B)
0 Pseudomonas 0.1 0.107
30 Pseudomonas 0.235 0.136
60 Pseudomonas 0.275 0.107
90 Pseudomonas 0.26 0.112
120 Pseudomonas 0.099 0.114

SERIE1:EN
CRECIMIENTO DEL PSEUDOMONAS EN LOS
CONDICION(A)
CONDICIONES (A) Y (B) SERIE2: EN
0,275 CONDICIONES DE
0,3 0,26
0,235 ESTERILIZACION (B)
0,25
ABSORBANCIA

0,2
0,136
0,15 0,107
0,1 0,107 0,112 0,114
0,099
0,1
0,05
0
0 30 60 90 120
TIEMPO EN MINUTOS

Series1 Series2

RESULTADOS DE PSEUDOMONAS

EN CONDICIONES (A) SIN ESTERILIZAR

1. Se observa entre el tiempo o hasta el minuto 30 un
crecimiento exponencial.
2. A partir del minuto treinta hasta el minuto 60 el crecimiento
disminuye en comparacin a los 30 minutos anteriores.
3. A partir del minuto 60 hasta los 90 minutos el crecimiento
disminuye a un ms con respecto a los 60 minutos
anteriores, podemos decir que para este evidenciando la
muerte de las Pseudomonas.
4. Para los ltimos 30 minutos que comprende desde el minuto
90 hasta el minuto 120 observamos la reduccin del
crecimiento, que evidencia la muerte en las Pseudomonas.
RESULTADOS DE PSEUDOMONAS

EN CONDICIONES (B) EN CONDICIONES DE ESTERILIZACION

1. Se observa entre el tiempo 0 hasta el minuto 30 un
crecimiento exponencial mnimo en comparacin al caso de
condiciones (A).
2. A partir del minuto treinta hasta el minuto 60 el crecimiento
disminuye con respecto a los 30 minutos anteriores de
forma similar al que estn en condiciones (A), con la
diferencia de que este crecimiento es menor a la condicin
(A).
3. Para los ltimos 60 minutos que comprende desde el minuto
60 hasta el minuto 120 observamos que el crecimiento se
encuentra en condicin estacionario, puesto que no se
observa un crecimiento exponencial ni muerte de las
Pseudomonas.

VII. DISCUSIONES
DISCUCIONES DEL RESULTADO DE LOS MEDIOS DE CULTIVO SOLIDO
(AGAR) Y LIQUIDO (CALDO)
OIDO1 SEMBRADO EN EL CALDO
No se evidencio el crecimiento de colonias bacterianas en el microscopio
debido a que al momento de hacer la tintoracin gram, cometimos errores en
el procedimiento como lavar demasiado el portaobjetos, no secar lo
suficientemente para observar al microscopio, as como tambin puede ser que
el microscopio donde observamos la muestra haya tenido fallas tcnicas, sin
embargo en el agar si se pudo apreciar el crecimiento de bacterias.
OIDO2 SEMBRADO EN EL AGAR
Se observ el crecimiento de colonias de bacilos Gram negativo, debido a que
las muestras sembradas en el agar a diferencia de las sembradas en el caldo
se adhieren ms al portaobjeto y despus de hacer la tintoracion quedan
muchas bacterias para observar en el microscopio.
AGUA DE CAO 1 Y 2 SEMBRADOS EN EL AGAR Y EN EL CALDO
En ambos casos no se observ el crecimiento de colonias bacterianas debido a
que el agua potable esta previamente tratada para el consumo.

DISCUSIN DE LOS RESULTADOS DE LA MORFOLOGIA A NIVEL

CELULAR Y A NIVEL DE COLONIAS
AGUA DE CAO 1 Y 2
En el caso del agua no se observ el crecimiento de ninguna poblacin
bacteriana, ya que no se evidencio el cambio de coloracin del agar, adems en
la observacin en el microscopio solo se encontr agar y no la presencia de
alguna bacteria. Con ello comprobamos que el agua potable no contiene
microorganismos.
OIDO 1 Y 2
A nivel de colonias en la muestra del odo 1 se pudo observar el cambio de color
del agar de rozado a un color ms oscuro evidenciando la presencia de bacterias,
y en la muestra del odo 2 cambio` la coloracin del agar de blanco a amarillo
verdoso, dando una indicacin de que podra tratarse de la existencia de colonias
de pseudomonas. Sin embargo, en la observacin en el microscopio del odo
dos se encontraron una poblacin de bacilos Gram positivo, con esto pudimos
determinar que no se trataba de una colonia de pseudomonas porque ellas
siempre dan una coloracin de Gram negativa. Esto nos aclara que en el odo
encontramos una gran cantidad de bacterias de bacilos de tipo Gram positivo y
negativo.

MEDIOS DE CULTIVO

EOSINA AZUL DE METILENO( EMB)

Las colonias de esta bacteria varan segn el medio de cultivo donde crezcan,
en el caso del medio de cultivo de Agar Eosina Azul de Metileno abreviado
EMB, las colonias tienen en demasa una coloracin verde-metlico, lo cual es
caracterstico de E. coli, aunque hay otras bacterias que logran producir este
color es muy tenue y escaso. Se logran ver colonias aisladas, son colonias
medianas, circulares, convexas, moradas, contorno verde-metlico, bordes
redondeados.

AGAR MANITOL Y SAL ( AMS)

Es recomendado para el crecimiento de estafilococos, se trata de un medio
altamente selectivo debido a su alta concentracin de sal. Los estafilococos
coagulasa positiva hidrolizan el manitol acidificando el medio y las colonias de
bacterias por la alta concentracin de sal fermentan el manitol, producen cidos
, en lo que se modifica el pH cambiando el medio de un color rojo o rozado a
amarillo. los estafilococos coagulasa negativos, presentan colonias rodeadas
de una zona roja o purpura. En el medio de cultivo el rojo fenol es un indicador
de ph.

SALMONELLA SHIGELLA AGAR ( SS)

Medio de cultivo utilizado para el aislamiento de salmonella spp, y de algunas

especies de shigella spp. Es diferencial debido a la fermentacin de la lactosa,
y a la formacin de cido sulfhdrico a partir de tiosulfato de sodio.

Salmonella, chigella y otros microorganismos no fermentadores de lactosa,

crecen bien en el medio de cultivo, y producen colonias transparentes. La
produccin de cido sulfhdrico se evidencia como colonias con centro negro
debido a la formacin de sulfuro de hierro.

CENTRIMIDA AGAR

Medio utilizado para el aislamiento selectivo de pseudomonas aeruginosa y de

otras especies del genero. Este es un medio muy semejante al King A, en el
cual la peptona de gelatina aporta los nutrientes para el desarrollo microbiano.
La presencia de un color verde azulado corresponde a la produccin de
piocianina, mientras que un color verde corresponde a la produccin de
pioverdina y un color rosa claro, rojizo o marrn oscuro corresponde a la
produccin de piorrubina.

TIOSULFATO CITRATO BILIS SACAROSA (TCBS)

Medio selectivo y diferencial para el aislamiento y cultivo de Vibrio cholera e,

Vibrio parahemolyticus, Vibrio vulnifucus. La bilis de buey, el citrato de sodio y
el pH alcalino inhiben el desarrollo de flora acompaante, favoreciendo el
crecimiento de Vibrio spp.la sacarosa es el hidrato de carbono fermentable y el
azul de bromotimol y azul de timol son los indicadores de ph que en un
ambiente alcalino le otorgan al medio de cultivo el color verde azulado y viran
al color amarillo en un medio acido (por utilizacin de la sacarosa).

DISCUCION

ESCHERICHIA COLI
A nivel de colonias se observ un cambio de coloracin de rojo a gris, aunque
esta muestra debi presentar un cambio de coloracin a un verde metlico, ya
que esta es la coloracin que presentan las colonias de escherichia coli en un
medio de EMB .en el caso de nuestras muestras solo se hall una minima
coloracin de verde metalico, el cual fue indicador de que las bacterias no
tuvieron su reproduccin ptima.
VIBRIO SP
No se pudo observar a nivel de colonias ni a nivel celular, esto pudo haber sido
debido a que las muestras iniciales antes de ser sembrados en el agar estuvieron
esterilizadas o muertas, por ello no hubo reproduccin de bacterias.
PSEUDONOMAS
A nivel de colonias se observ el cambio de coloracin en el agar de blanco a
verde, hallndose a nivel celular bacilos Gram negativo. Dando una correcta
coloracin, ya que todos las pseudomonas dan una coloracin Gram negativa.
AUREUS
A nivel de colonias se observ un cambio de coloracin en el medio de rozado a
amarillo, indicndonos el crecimiento de colonias de aureus,ya que estas dan
este cambio de coloracin, esto se corroboro con la observacin en el
microscopio de cocos Gram positivo.
SALMONELLA
A nivel de colonias se observ un cambio de coloracin en el medio de rosado
a rojo opaco amarillento presentndose en el centro una pigmentacin negruzca,
indicador de que hubo acidez y se form el cido sulfhdrico y a nivel celular se
observ bacilos Gram positivo, sin embargo estas debieron dar una coloracin
Gram negativa, ya que es caracterstica de ellos. Este cambio se debe a que la
bacteria expulso sulfato hdrico.

EL CRECIMIENTO MICROBIANO

Es el aumento del nmero de microorganismos a lo largo del tiempo,

determinado por factores ambientales como temperatura, pH, actividad de agua,
presin osmtica, etc. Cada microorganismo tiene su medio ptimo para su
 crecimiento adecuado. En el caso del factor temperatura cuando hay una
temperatura muy alta ocurre una muerte de celular, debido a la desnaturalizacin
de protenas y a las alteraciones producidas en las membranas lipdicas a esas
temperaturas. En el caso de temperaturas bajas, el metabolismo celular se
enlentece y las clulas paran de crecer. Y si la temperatura baja es extrema
ocurre una muerte celular y las clulas no pueden recuperar su capacidad de
divisin.

DISCUSIN DEL RESULTADO PARA EL CASO DEL CRECIMIENTO DE

SALMONELLA

CRECIMIENTO DE LA SALMONELLA EN DOS

CONDICIONES 0,465 0,45
0,5 0,439
0,392
0,384 0,4 0,386
0,4 0,315
ABSORBANCIA

0,268
0,3
0,19
0,2
Series1
0,1
Series2
0
0 30 60 90 120
TIEMPO EN MINUTO

SERIE1: EN CONDICION(A)
SERIE2: EN CONDICIONES DE ESTERILIZACION (B)

CRECIMIENTO DEL PSEUDOMONAS EN LOS

CONDICIONES (A) Y (B)
0,275 0,26
0,3
0,235
0,25
ABSORBANCIA

0,2
0,136
0,15 0,107
0,1 0,107 0,112 0,114
0,099
0,1
0,05
0
0 30 60 90 120
TIEMPO EN MINUTOS

Series1 Series2
SERIE1:EN CONDICION(A)
SERIE2: EN CONDICIONES DE ESTERILIZACION (B)

En ambos casos se observa que en la condicin B las bacterias al principio

tienen un crecimiento exponencial, sin embargo debera ocurrir lo contrario ya
que estas fueron sometidas a una esterilizacin, por lo tanto no deberan
reproducirse. Este crecimiento se puede deber a diversos motivos tales como:
En la condicin B inoculamos una mayor cantidad de bacterias y estas
al ser esterilizadas murieron y como el espectrofotmetro mide la
absorbancia, osea la cantidad de sustratro( bacterias) el
espectrofotmetro tal ves ley la cantidad de bacterias muertas.
Ocurrio una mutagenesis ( cambio en el ADN)
Las bacterias sometidas a temperaturas altas pudieron tener una
resistencia de adaptacin y producir protenas que le facilitan la
adaptacin sin modificar su ADN.
La muestra se contamino con otras bacterias por no hacercarlo mas al
mechero al momento de inocular.
Pudo haber una falla tcnica en el microondas al momento de esterilizar
la muestra.
Por la comparticin de cubetas para la lectura de la absorbancia.
Por que se derramo la muestra en la cubeta y no nos lavamos las manos
para la siguiente lectura de absorbancia.
Para la condicin A se observa que en ambos casos tienen un crecimiento
lento, esto se puede deber a que inoculamos una menor cantidad de bacterias
en los tubos en comparacin con los tubos B.

VIII. RECOMENDACIONES
En la prctica nmero 1 de medios de cultivo, es necesario sembrar la
muestra en el portaobjeto cerca del mechero, para as evitar que se
contamine.
 Despus de utilizar la varilla metlica para realizar la siembra en el
portaobjeto esta debe ser esterilizada con el mechero hasta que alcance
el color rojo vivo, de lo contrario, las dems muestras se contaminaran, y
al momento de observarlas en el microscopio apareceran diferentes
microorganismos.
Al enfocar en el microscopio, se recomienda empezar con el objetivo 10x
para detectar la ubicacin de la bacteria o microorganismo a estudiar.
Al pasar del objetivo 40x al 100x es necesario usar el aceite inmersin,
para facilitar el enfoque.
Luego de sembrar la muestra en el portaobjeto, y colocarle una gota de
agua, debe ser secada cuidadosamente en el mechero sin que la muestra
se queme.
En la prctica nmero 2 la coloracin Gram, tambin es necesario
esterilizar la varilla metlica con el mechero antes y despus de utilizarlo.
Se debe seguir cuidadosamente la tincin de Gram con los colorantes
respectivos en el tiempo indicado, enjuagando con agua luego de cada
colorante, sin exponerlo nuevamente al mechero, para as evitar la quema
de la muestra.
En la prctica nmero 3, de crecimiento bacteriano.

BIBLIOGRAFIA

Holt-Harris, J.E., and O. Teague. 1916. A new culture medium for the isolation of Bacillus
typhosus from stools. J. Infect. Dis. 18:596-600.

Britania. (s.f.). google. Obtenido de

http://www.britanialab.com/productos/B23115%20REV%2001-
CETRIMIDA%20AGAR.pdf

slide share. (2 de noviembre de 2008). google. Obtenido de

http://es.slideshare.net/roberchavez/medios-de-cultivo-y-pruebas-bioquimica-
presentation.

Levine, M. 1918. Differentiation of B. coli and B. aerogenes on a simplified eosin-

methylene blue agar. J. Infect. Dis. 23:43-47.