TRICRMICO DE MASSON

Propsito Las manchas tricrmicas se utilizan frecuentemente para diferenciar entre el colgeno y el msculo liso de los
tumores e identificar aumentos en el tejido colgeno en enfermedades como la cirrosis del hgado.

Principio Los procedimientos tricrmicos se denominan as porque se utilizan 3 colorantes, que pueden incluir o no la
mancha nuclear. El mecanismo de la mancha no se entiende totalmente, y puede estar relacionado en parte con el
tamao de diferentes molculas de colorante. Las secciones se tien primero con un colorante cido tal como Biebrich
escarleth; Todos los elementos de tejido acidfilo, tales como citoplasma, msculo y colgeno, se unirn a los colorantes
cidos. Las secciones se tratan a continuacin con cido fosfotngstico y / o fosfomolbdico. Debido a que el citoplasma es
mucho menos permeable que el colgeno, los cidos fosfotngstico y fosfomolbico hacen que Biebrich escarlata se
difunda fuera del colgeno pero no fuera del citoplasma de las clulas. El cido fosfotngstico y el cido fosfomolbdico
tienen numerosos grupos cidos que muy probablemente actan como un enlace entre el colgeno descolorado y el azul
de anilina, el colorante de colgeno. Probablemente el pH de la solucin de cido fosfotngstico / cido fosfomolbdico
tambin aumenta la tincin selectiva de colgeno y ayuda en la difusin o eliminacin de escarlata de Biebrich.

Se prefiere la solucin fijadora de Bouin, pero se puede usar formalina con tampn neutro al 10%.

Equipos horno de 56 C a 58 C, frascos de Coplin, frascos Erlenmeyer, cilindros graduados, pipetas

Tcnica Corte de las secciones de parafina de 4 a 5 m.

Control de calidad Prcticamente todos los tejidos tienen un control interno, por lo que no se necesitan otras secciones
de control; Sin embargo, si se desea un control, el tero, el intestino delgado, el apndice o la trompa de Falopio
proporcionarn un buen material.

VAN GIESON

Propsito Aunque la tcnica de van Gieson puede considerarse una mancha de tejido conectivo primaria, rara vez se
utiliza como tal; Sin embargo, sirve como un excelente contraste para otros mtodos como la tcnica elstica de Verhoeff,
a la que se hace referencia en muchas instituciones como la mancha de Verhoeff-van Gieson (VVG). Otras instituciones se
refieren a ella como la mancha elstica-van Gieson (EVG).

Principio En una solucin fuertemente cida, el colgeno se tie selectivamente con fuchsina cida, un colorante anilina
cido. El cido picrico proporciona el pH cido necesario y tambin acta como una mancha para el msculo y el
citoplasma. El pH bajo es muy importante, ya que la tincin selectiva del colgeno no ocurrir a niveles de pH ms altos.
La adicin de 0,25 ml de cido clorhdrico a 100 ml de solucin van Gieson agudizar la diferenciacin entre el colgeno y
el msculo [Lillie 1976]. Las soluciones saturadas de cido pcrico son importantes en la preparacin de la mancha y de
nuevo en la tincin selectiva del colgeno. Si la solucin de cido pcrico no est saturada, el colgeno puede mancharse
de rosa plido a naranja plido, y el colgeno, el citoplasma y el msculo pueden manchar el mismo color.

Fijador Cualquier tejido bien fijado puede ser usado.

Equipo Agitador mecnico, frascos de Coplin, frascos Erlenmeyer, cilindros graduados, pipetas

Tcnica Corte de las secciones de parafina de 4 a 5 m.

Control de calidad Prcticamente todos los tejidos tienen un control interno, por lo que no se necesitan otras secciones
de control; Sin embargo, si se desea un control, el tero, el intestino delgado, el apndice o la trompa de Falopio
proporcionarn un buen material.
VERHOEFF TEJIDO ELSTICO [MALLORY 1942, SHEEHAN 1980)

Propsito Las tcnicas de fibra ptica se utilizan para la demostracin de cambios patolgicos en las fibras elsticas.
Estos incluyen la atrofia del tejido elstico, el adelgazamiento o la prdida que puede resultar de los cambios
arteriosclerticos, y la reduccin, las rupturas, o la divisin que puede resultar de otras enfermedades vasculares. Las
tcnicas tambin pueden usarse para demostrar el tejido elstico normal, como en la identificacin de venas y arterias, y
para determinar si los vasos sanguneos han sido invadidos o no por el tumor.

Principio El tejido se cubre con un lago soluble de hematoxilina-cloruro frrico-yodo. Tanto el cloruro frrico como el
yodo sirven como mordientes, pero tambin tienen una funcin oxidante que ayuda a convertir hematoxilina en
hematina. El mecanismo de la unin del colorante es probablemente por la formacin de acoplamientos del hidrgeno,
pero los grupos qumicos exactos que reaccionan con la hematoxilina no han sido identificados. Debido a que este
mtodo requiere que las secciones se sobrecargan y luego se diferencian, es un mtodo regresivo. La diferenciacin se
logra mediante el uso de exceso de mordiente, el cloruro frrico, para romper el complejo teido tejido-colorante. El
colorante se atrave por la mayor cantidad de mordiente en la solucin diferenciadora y se elimina del tejido. El tejido
elstico tiene la afinidad ms fuerte para el complejo de hierro-hematoxilina y retendr el tinte ms largo que los otros
elementos de tejido. Esto permite que otros elementos se decoloren y que las fibras elsticas queden manchadas. El
tiosulfato sdico se utiliza para eliminar el exceso de yodo. A pesar de la solucin de Gieson es el counterstain ms
comnmente usado, se puede usar otros counterstains.

Fijador Algn tejido bien fijado puede ser usado, pero se prefiere la solucin de la formalidad o de Zenker con el tampn
neutro.

Equipo Agitador mecnico, frascos de Coplin, frascos Erlenmeyer, cilindros graduados

Tcnica Corte de las secciones de parafina de 4 a 5 m.

Control de calidad La mayor parte de los laboratorios usan la seccin de aorta incrustada en el borde, pero yo prefiero
una seccin transversal de una arteria muscular.

GOMORI PARA FIBRAS RETICULARES

Propsito La demostracin de fibras reticulares en secciones de tejido puede ser importante en el diagnstico
diferencial de ciertos tipos de tumores. Un cambio del patrn de fibra reticular normal, como se observa en algunas
enfermedades hepticas, es tambin un hallazgo diagnstico importante.

Principio Los azcares de hexosa de la reticulina se demuestran por oxidacin a aldehdos. El permanganato de potasio
es el agente oxidante en este procedimiento, y el exceso se elimina con metabisulfito de potasio. El sulfato de amonio
frrico acta como sensibilizador y posteriormente se sustituye por plata de la solucin de diamina de plata. Despus de
la impregnacin, se utiliza formalina para reducir la plata a su forma metlica visible. Siga con tonificacin con cloruro de
oro y la eliminacin de plata sin reaccionar con tiosulfato de sodio. El paso final es contracolorir, si se desea.

Se prefiere la formalina fija con 10% de tampn neutro.

Equipo Pinzas no metlicas, cristaleras qumicamente limpias (frascos de Coplin, cilindros graduados, frascos
Erlenmeyer y pipetas), papel de filtro.
PARA GOMORI:

Agente Oxidante: Permanganato de potasio

Sensibilizador: Sulfato de amonio frrico
Solucin Impregnante: Plata amoniacal (nitrato de plata ms hidrxido de sodio) precipitacin se disuelve con
hidrxido de amonio.
Solucin Reductora: Formaldehido.

ORCENA??