Practica

Objetivo:

Identificar los diferentes tamaos y formas celulares, de ciertas muestras, as

mismo aprender a hacer un uso adecuado del microscopio. Constatar las
diferentes arquitecturas de clulas de los tres dominios de la vida fortaleciendo las
habilidades en el manejo del microscopio ptico.

Introduccin:

En la naturaleza existe una sorprendente diversidad de tipos celulares que, a la

vez, tienen una notable similitud. Cada clula es capaz de llevar a cabo
esencialmente los mismos procesos: obtener y asimilar nutrientes, eliminar los
residuos, sintetizar nuevos materiales para la clula y, en muchos casos, moverse
y reproducirse.
Las clulas son las unidades bsicas de la estructura y funcin biolgicas pero
pueden diferir grandemente en su tamao y forma. El tamao de las clulas est
limitado por la relacin entre superficie y volumen; cuanto mayor es la superficie
de una clula en proporcin a su volumen, mayor ser la cantidad de materiales
que pueden entrar o salir de ella en un espacio de tiempo dado. El tamao celular
tambin est limitado por la capacidad del ncleo para regular las actividades
celulares. Las clulas metablicamente ms activas tienden a ser pequeas.
Las clulas tienen una compleja arquitectura interna que les permite realizar todas
sus funciones. En las clulas eucariotas existe una variedad de estructuras
internas, los organelos, que son similares o, en algunos casos, idnticos de una
clula a otra en una amplia gama de tipos celulares.
Debido a que la mayora de las clulas son demasiado pequeas para ser
observadas a simple vista, el estudio de las clulas ha dependido primordialmente
del uso del microscopio. Desde su descubrimiento en 1665 por Robert Hooke y el
desarrollo de la teora celular por Schleiden y Schwann en 1838, la clula
consigui su actual reconocimiento como la unidad fundamental de todos los
organismos vivos debido a las observaciones realizadas con el microscopio ptico.
El microscopio ptico sigue siendo un instrumento bsico para los bilogos
celulares, que con mejoras tcnicas permite la visualizacin de los detalles
aumentados de la estructura celular. Los microscopios pticos contemporneos
son capaces de aumentar los objetos hasta unas mil veces. Dado que la mayora
de las clulas se encuentran ente 1 y 100 m de dimetro, pueden ser observadas
en el microscopio ptico, como pueden ser tambin algunos de los orgnulos
subcelulares, como el ncleo, los cloroplastos y las mitocondrias.

Previamente se hizo una investigacin de las partes y funciones del microscopio,

para hacer un uso adecuado de este.

Microscopio ptico
(partes y funciones)

Sistema Sistema
ocular mecnico

Soporte: Mantiene la parte

Ocular: Lente situada cerca del ptica. Tiene dos partes: el pie
ojo del observador. Ampla la o base y el brazo.
imagen del objetivo.
Platina: Lugar donde se
Objetivo: Lente situada cerca de deposita la preparacin.
la preparacin. Ampla la imagen
de sta. Sus aumentos de menor a
mayor son 4x, 10x, 40x, 100x. Si Cabezal: Contiene los sistemas
se utiliza el aumento 100x es de lentes oculares. Puede ser
necesario agregar a la preparacin monocular, binocular.
aceite de inmersin, cuya funcin
es evitar la dispersin de los Revlver: Contiene los
rayos luminosos. sistemas de lentes objetivos.
Permite, al girar, cambiar los
Condensador: Lente que objetivos.
concentra los rayos luminosos
sobre la preparacin. Tornillos de enfoque: El
Tornillo Macromtrico que
Diafragma: Regula la cantidad de aproxima el enfoque y el
luz que entra en el condensador. Tornillo Micromtrico que
Foco: Dirige los rayos luminosos consigue el enfoque correcto
Materiales

5 Portaobjetos.
5 Cubreobjetos.
3 Pipeta Pasteur o gotero.
1 Cinta masking (para rotular).
1 Lpiz.
1 sobre de levadura
1 Cebolla
1 Papa
1 Bacteria
1 sobre de hisopos de algodn.
1 paquete de Algodn de 50 g.
50 ml de Etanol al 70%.
1 Bistur/navaja de afeitar/cutter.
1 jugo de manzana (no nctar)

Reactivos
 5 ml Solucin de azul de metileno al 1%.
5 ml Solucin de lugol.
Agua destilada

Metodologa:

Un da antes de la prctica se realiz el cultivo de levaduras, en condiciones

aspticas, se colocaron 0.05 g de levadura de pan en 250 ml de jugo de
manzana. Y se tap el frasco con un tapn de algodn y gasa.

Actividades a realizar durante la prctica:

- Antes de usar los portaobjetos, se limpiaron con una solucin de etanol al

70% y se dej secar al aire.

1. Preparacin temporal (Tincin simple) de epidermis de cebolla.

Realice una preparacin temporal de epidermis de cebolla de la siguiente
forma:
a) Separe la epidermis (capa transparente) de un trozo de cebolla y colquela
en un portaobjetos procurando que quede bien extendida.
b) Agregue una gota de azul de metileno al 1% y posteriormente coloque un
cubreobjetos, procurando que no queden burbujas de aire ni exceso de lquido.

2. Posicin y movimiento de la imagen

a) Conecte el microscopio a la corriente elctrica y verifique que el objetivo
(4X) est en posicin de enfoque.
b) Coloque la preparacin sobre la platina del microscopio, procurando centrar
el objeto a observar, posteriormente fjelo con las pinzas de la platina para
evitar que se mueva el portaobjetos.
c) Ubique el objetivo de menor aumento en posicin vertical, acercndolo lo
ms posible a la preparacin (sin tocarla) por medio del tornillo macromtrico;
verifique esta operacin lateralmente, nunca mirando por el ocular. Siempre
que cambie entre objetivos sujete el revlver, no los tubos del lente.
d) Observando por el ocular, aleje lentamente el objetivo de la preparacin
empleando el tornillo macromtrico hasta obtener una imagen; esto se hace
con un movimiento suave para que enfoque la imagen.
e) Una vez localizada la imagen, si sta carece de precisin, gire el tornillo
micromtrico hasta obtener el enfoque correcto. De ser necesario, la cantidad
de luz se regula abriendo o cerrando el diafragma y/o subiendo o bajando el
condensador.
f) Mueva la preparacin (platina) hacia adelante, atrs, a la derecha, a la
izquierda, comparando con lo que observas en el ocular y concluye respecto a
la posicin y movimiento de la imagen. Anota tus observaciones de las clulas
vegetales.

3. Tincin simple en muestra de papa.

Obtenga un corte delgado de la papa y colquelo en un portaobjetos limpio.
Agregue una gota de lugol y cubra con el cubreobjetos. Observe al microscopio
con el objetivo de 10X y 40X.

4. Tincin simple de clulas epiteliales de la mucosa bucal.

Con un hisopo de algodn limpio, frote suavemente la cara interna de la mejilla
(boca). Con un movimiento en forma de rodillo, deposite la muestra sobre un
portaobjetos limpio. Agregue una gota de azul de metileno (o lugol) y cubra con
el cubreobjetos. Observe con los objetivos 10X y 40X, registre sus
observaciones de las clulas epiteliales comparando con las de cebolla, papa,
levadura y bacterias.

5. Preparacin en fresco y tincin simple de cultivo de levaduras y bacterias.

Mezcle suavemente el cultivo de levaduras y bacterias preparado el da
anterior y coloque 1-2 gotas en un portaobjetos. Cubra con un cubreobjetos y
observe al microscopio con el objetivo de 10X y 40X, registrando sus
observaciones.

Resultados y discusin:

Epidermis de cebolla.
Fue fcil enfocar la muestra de epidermis de la cebolla con el objetivo 10x para
despus analizarlo de una mejor manera con el objetivo 40x. Logramos
observar dichas clulas con una forma hexadrica, alargadas y ordenadas, se
alcanza a distinguir en ellas el ncleo y la membrana y el citoplasma.

Muestra de papa.
Esta muestra al igual que la de epidermis de cebolla fue de enfoque rpido, y
logramos captar una distribucin no tan ordenada como el de la epidermis de
cebolla pero si algo similar.

Clulas epiteliales de la mucosa bucal.

Esta muestra fue muy complicada para enfocar en el microscopio, est ya no
presento la clulas en celdas, como la de epidermis de cebolla y muestra de
papa, era ms bien conglomeraciones de clulas, con el objetivo de 40
pudimos notar la presencia del ncleo.

Cultivo de levaduras y bacterias.

El cultivo de levaduras y bacterias fue el ms complicado de enfocar, adems
que no hubo demasiado desarrollo de estas, fue necesario realizar un fijar la
muestra con ayuda del mechero para posteriormente realizar la tincin, aun as
no logramos identificar las partes de las bacterias y levaduras.

Conclusin:

La diferencia en la dificultad para enfocar y observar las clulas de las

muestras, fue debido al tamao y tipo de clulas en el caso de la muestra de
papl.-a y de la epidermis de cebolla, que son de tipo vegetal, fue sencillo pues
son ms grandes y tienen una forma ms ordenada, al igual fue ms fcil
detectar las partes de la clula, en cambio en las muestras de clulas
epiteliales de la mucosa bucal y el cultivo de bacterias, du distribucin es
complicada y son bastantes pequeas. El uso del microscopio fue el adecuado,
el nico factor que intervino en el enfoque de las muestras de la prctica fue la
luz del laboratorio.

Bibliografa

BQ Cecilia Lpez Reyes EU. Eliana Escudero. (2004). GUA MICROSCOPIO.

2017, de DuocUC Sitio web:
http://biblioteca.duoc.cl/bdigital/Documentos_Digitales/600/610/39594.pdf
La clula: su estructura y funcin. 2017, de UNAM Sitio
web:http://www.facmed.unam.mx/publicaciones/libros/pdfs/histologica17-21.pdf