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Hongos asociados a la pudricin de la corona

en frutos de banano orgnico (Musa spp. L.)


en Piura, Per
Fungi associated with fruit crown rot in organic
banana (Musa spp. L.) in Piura, Peru
Fungos associados podrido-da-coroa em frutos
de banana orgnica (Musa spp. L.) em Piura, Peru

Ren Aguilar Anccota1, Raquel Briggit Garca Raymundo2,


Jos Antonio Dulanto Bejarano3 & Edgar Abraham Maldonado Duque 4
1
Ingeniero Agrnomo, Magister en Fitopatologa. 2Ingeniera Agrnoma, estudiante de maestra en
la Universidad Nacional Agraria La Molina. 3Ingeniero Agrnomo, Magister en Produccin Agrcola.
4
Ingeniero Agrnomo, estudiante del programa de maestra
en Ciencias Agronmicas en la Universidad Particular Antenor Orrego
1, 4
Profesor Asociado, Departamento de Sanidad Vegetal, Universidad Nacional de Piura, Per. 2Es-
cuela de Postgrado, Universidad Nacional Agraria La Molina. Lima, Per. 3Innovacin y Desarrollo,
Profesionales Asociados S.A.C- Representante TASTE-PERU.
Convenio de Investigacin Fundacin TASTE- Universidad Nacional de Piura, Per.

1
raanccota@hotmail.com, 2briggit27@hotmail.com,
3
jdulantob@master-srl.com, 4abrahammaldonado@hotmail.com

Resumen
El departamento de Piura es la principal zona pro- Thielaviopsis paradoxa, Lasiodiplodia theobro-
ductora de banano orgnico para la exportacin mae, Colletotrichum musae y Fusarium verticillioi-
en Per, participando con el 87% del volumen de des. Para demostrar la patogenecidad de las es-
las exportaciones. En esta zona una de las enfer- pecies aisladas, se realizaron inoculaciones sobre
medades ms importantes en postcosecha es la la zona de la corona en frutos sanos de banano.
pudricin de la corona del fruto, las prdidas eco- Todos estos hongos causaron sntomas de infec-
nmicas por esta enfermedad se han estimado cin en diferentes proporciones, concluyndose
entre el 25 y el 30% de la fruta exportada. El obje- que la pudricin de la corona es una enfermedad
tivo del presente estudio fue identificar los agentes de etiologa compleja.
causales asociados a esta enfermedad. Se eva-
luaron muestras de frutos de las zonas de Quere- Palabras clave: banano, pudricin de la corona,
cotillo, Salitral y Mallares empacados en cmaras agentes causales, patogenicidad, etiologa compleja.
de refrigeracin, posteriormente se seleccionaron
muestras con sntomas de pudricin de la corona, Abstract
realizndose siembras de tejido enfermo en medio The department of Piura is the principal banana-pro-
PDA+estreptomicina. Se aislaron e identificaron a ducing zone in Peru, sharing 87% of exportations.

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Revista de Investigacin Agraria y Ambiental Volumen 4 Nmero 1 enero-junio de 2013 ISSN 2145-6097

In this zone, one of the most important postharvest exportaes. Nesta rea, uma das mais importan-
diseases is crown rot. The economic loses attribu- tes doenas ps-colheita a podrido-da-coroa
ted to this disease are estimated to be between 25 do fruto, as perdas econmicas desta doena so
and 30% of organic bananas exported. The objec- estimadas entre 25 e 30% dos frutos exportados.
tive of this study was to identify the causal agents O objetivo deste estudo foi identificar os agentes
associated with this disease. Samples taken re- causadores associados a esta doena. Amostras
frigerated fruit from the areas of Querecotillo, Sa- de frutas foram avaliadas nas reas de Quereco-
litral and Mallares were taken and selected after tillo, Salitral e Mallares e embaladas em cmaras
the fact. Thielaviopsis paradoxa, Lasiodiplodia de refrigerao, posteriormente foram selecio-
theobromae, Colletotrichum musae and Fusarium nadas amostras com sintomas de podrido-da-
verticilloides. In order to demonstrate the patho- coroa, realizando plantios do tecido doentes em
genicity of the isolated species, inoculations were meio PDA+estreptomicina. Foram isolados e iden-
given in the area of the crown of the fruit on healthy tificados Thielaviopsis paradoxa, Lasiodiplodia
bananas. These fungi caused symptoms of infec- theobromae, Colletotrichum musae e Fusarium
tion in different proportions, concluding that crown verticillioides. Para demonstrar a patogenicida-
rot is a disease with a complex etiology. de das espcies isoladas, foram realizadas ino-
culaes na coroa de frutos de bananas saud-
Key-words: banana, crown rot, causal agents, veis. Todos estes fungos causaram sintomas da
pathogenicity, complex etiology. infeco em diferentes propores, concluindo-se
que a podrido-da-coroa uma doena de etiolo-
Resumo gia complexa.
O departamento de Piura a principal regio
produtora de banana orgnica para exportao Palavras-chave: banana, podrido-da-coroa, agen-
no Peru, participando com 87% do volume de tes causais, patogenicidade, etiologia complexa.

Introduccin

El banano es un cultivo que se desarrolla en la La pudricin de la corona se presenta en todo el


zona del valle del Chira, provincia de Sullana ubi- mundo durante la fase de postcosecha en frutos
cada al norte del Per, este cultivo beneficia a un de bananos y pltanos y se asocia a patgenos
gran nmero de pequeos productores que se in- como: Fusarium spp.; Acremonium spp.; Vertici-
sertan en la dinmica comercial de la exportacin llium sp.; Colletotrichum musae y Curvularia sp.
de banano orgnico y comercio justo, con una im- (Ploetz, et al. 1994).
portancia econmica significativa debido a la alta
rentabilidad, as como por la gran demanda en el La enfermedad presenta un serio problema para
mercado internacional. la exportacin ya que deteriora la calidad de la
fruta cosechada y limita su aceptacin por parte
La regin de Piura viene exportando frutos de banano del consumidor. Con base en esta problemtica
orgnico desde el ao 2002 y uno de los problemas el presente trabajo tuvo como objetivos: aislar e
ms severos que se presentan durante la postcose- identificar los hongos fitopatgenos asociados a
cha es la enfermedad conocida como pudricin de la la pudricin de la corona y demostrar su pato-
corona. Durante los meses de verano e invierno del genicidad de acuerdo a los postulados de Koch.
ao 2008 las prdidas econmicas ocasionadas por
esta enfermedad fluctuaron entre 20 y 25% de la pro-
duccin total (Dulanto, comunicacin personal).

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Hongos asociados a la pudricin de la corona en frutos de banano orgnico (Musa spp. L.) en Piura, Per

Metodologa

Seleccin de muestras travs de las claves propuestas por Ellis (1976) y


Sutton (1980).
Se colectaron racimos de 8 plantas de banano re-
cin cortadas, con un periodo de paricin de co- Ensayos de patogenicidad
secha de doce semanas, despus del enfunde, de
las zonas de Querecotillo, Salitral y Mallares, se Se tomaron coronas sanas y sobre el rea de cor-
llevaron a tinas de proceso que contienen alum- te se realizaron dos tipos de inoculacin: primero,
bre, cloro y se procedi al desmane y al closteo se coloc un disco de agar (0,8cm de dimetro)
con un tiempo de desleche de 15 minutos; pos- con micelio de los patgenos en estudio. En se-
teriormente se realiz un empaque de manos de gundo lugar se asperj una suspensin de coni-
manera individual en bolsas de plstico (Consu- dias de los hongos a una concentracin de 1 x
mer) tipo cluster bag y se empacaron en cajas, 10 conidias/ml, adicionalmente se asperj sobre
colocando la fruta en una cmara de refrigeracin la superficie de la cscara con la misma concen-
a una temperatura entre 13 a 15 C por 10 das, tracin de conidias de los hongos en estudio. En
para simular las condiciones del transporte mar- el tratamiento testigo se asperj solamente agua
timo. Posteriormente se seleccionaron las mues- estril sobre la corona.
tras con sntomas de pudricin en la zona de la
corona, pedicelo y pulpa de la fruta; para los an- Todos los frutos inoculados se incubaron en c-
lisis de laboratorio respectivo. mara hmeda a temperatura ambiente por un pe-
riodo de 7 a 10 das.
Aislamiento y purificacin

Las muestras con sntomas de pudricin se lleva- Resultados


ron al laboratorio de Fitopatologa de la Universi-
dad Nacional de Piura para ser analizadas. Con Aislamientos
un bistur estril se cortaron pequeos trozos de
la zona de avance de la pudricin de 0,5 x 0,5 cm Se obtuvieron cuatro aislamientos, se codificaron
de tejido, estos se desinfectaron en una solucin como: AB - 1, AB - 2, AB - 3 y AB - 4.
de hipoclorito de sodio al 1% durante 1 min, lue-
go se enjuagaron por dos veces con agua desti- Sintomatologa e identificacin
lada (French y Hebert, 1980), y se dejaron secar
por 10 min., posteriormente, una vez secas, los El tipo de sntoma, coloracin de la colonia y es-
trozos se colocaron en placas Petri con medio tructuras microscpicas se observan en las tablas
Papa Dextrosa Agar (PDA) enmendado con es- 1, 2 y 3.
treptomicina 50 mg y se incubaron a 28 C en
oscuridad durante 5 das. El aislamiento AB -1, se aisl de sntomas de pudri-
cin blanda y oscura en la zona de la corona, pe-
Identificacin de hongos dicelo y pulpa, que comnmente present un olor
a fruta fermentada. Segn Ploetz, et . al 1994, es
Se prepararon montajes de cada uno de los ais- debido al acetato de etilo y alcohol de etilo que pro-
lamientos obtenidos y se hicieron observaciones duce el hongo. El aislamiento tuvo un crecimiento
utilizando un microscopio compuesto para anali- rpido y superficial en medio de cultivo PDA, las
zar las caractersticas morfolgicas del patge- conidias fueron unicelulares pigmentadas de forma
no. La identificacin de los hongos se realiz a elipsoidal a ovoide con pared lisa, las conidias se

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formaron en cadena y promediaron de 7-14 m de Lasiodiplodia theobromae (Pat.) Griffon & Maubl.
largo x 3-6 m de ancho. Se encontraron fialides (syn. Botriodiplodia theobromae) (Figura 1. c y d).
de color gris, las cuales tuvieron una longitud de
200 m. Las caractersticas de los aislamientos se Un tercer aislado, AB 3, se aisl de manchas
ajustan a las descritas para Thielaviopsisi para- necrticas de la superficie de la cscara y pudri-
doxa (de Seynes) Hohnel, (Figura 1. A y b) segn cin en la corona y pedicelo. El aislado tuvo una
Ellis (1971). colonia algodonosa de color crema griscea de
crecimiento rpido, sobre la superficie del medio
Un segundo aislado, nombrado AB 2, se aisl de cultivo se observaron masas conidiales de co-
de una pudricin blanda en la zona de la corona, lor salmn anaranjado, con la clave propuesta por
pedicelo y pulpa; desarroll colonia algodonosa Sutton (1980). El aislamiento se identific como
de crecimiento rpido de coloracin gris oscuro. Colletotrichum musae (Fig 2. a y b).
A los 5 das de siembra se observ la formacin
de picnidios, estos tuvieron forma redondeada de Un cuarto aislado, denominado AB 4, se aisl de
200 m de dimetro; la pared del picnidio estu- pudriciones secas en la corona y pedicelo, en medio
vo formada por varias capas de clulas de color PDA desarroll una colonia algodonosa, de creci-
gris oscuro. Al interior del picnidio se observaron miento lento, y de una pigmentacin rojo violceo.
clulas conidigenas hialinas entremezcladas con Las microconidias fueron unicelulares, hialinas de
parafisas hialinas y filamentosas. Las conidias al forma ovalada a alargadas cuyo tamao fue de 6 x 3
inicio fueron unicelulares de pared gruesa, hiali- , las macroconidias fueron escasas, hialinas, finas,
nas de forma ovalada a elipsoide, y al madurar multicelulares con un promedio fue de 24 x 5 , y no
presentaron una septa en la parte media y estras se observ la formacin de clamidosporas, estas ca-
longitudinales sobre la superficie, estas tuvieron ractersticas coincidieron para la especie Fusarium
un tamao promedio 23 x 12 m. Segn la clave verticillioides segn la clave de Toussoun y Nelson,
propuesta por Sutton (1980), se identific como (1968) (Fig 2. c y d)

Tabla 1. Caractersticas morfolgicas y fisiolgicas de cuatro especies fngicas aisladas


de frutos de banano orgnico, procedentes del Valle del Chira, Piura 2010.

Aislados
Caractersticas
de la colonia Thielaviopsis Lasiodiplodia Colletotrichum Fusarium
paradoxa theobromae musae verticillioides
Color o g, o g, c, n g, v

Textura s a a a

Borde e e e e

Pigmentacin en medio - o - v

Velocidad de crecimiento 4.8 cm/da 7.38 cm/da 1.2 cm/da 1.6 cm/da

Color: o = oscura, c = cremoso, g = gris v = violceo n = naranja Textura: a = algodonoso, s = superficial


Borde: e = entero Pigmentacin: v = violcea

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Tabla 2. Tipo y caractersticas microscpicas de las estructuras reproductivas, de los cuatro aislados
de hongos obtenidos de frutos de banano procedente del valle del Chira, Piura - 2010.

Aislados de hongos
Caractersticas
Thielaviopsis Lasiodiplodia Colletotrichum Fusarium
paradoxa theobromae musae verticillioides
Cuerpo fructificante
Acrvulo
nf nf sf nf
Picnidio (dim.)
nf 350 nf nf

Conidiforo
Tipo
sf corto y simple corto y simple corto y simple
Longitud (m)
50 5-15 -- 20 30
Dimetro (m)
4-6 2.5 3 -- 23

Conidia
Largo (m)
10-25 20 30 12-17 M 20-24 x 3.5-4
Ancho (m)
8-16 10 15 4.5 5.5 m 5-12 x 1.5-2.5

Otras estructuras
Parafisas (m)
nf 50 nf nf
Apresorio (m)
nf nf 11 x 10.25 nf
Fialides (m)
200 nf nf 20-24 x 3.5-4

M = macroconidias m = microconidias sf = si forma nf = no forma

Figura 1. Hongo Thielaviopsis paradoxa a) Colonia Figura 2. Hongo Colletotrichum musae a) colonia de
oscura de crecimiento superficial en medio PDA crecimiento algodonoso de coloracin gris anaranjado
b) Conidias unicelulares oscuras en cadena de en medio de cultivo PDA b) conidias unicelulares de
forma elipsoidal a ovoide, pared lisa. 7-14 m x 3-6 forma cilndrica y alargada de 12-17 m x 4.5-5.5m
m; falide 200 m (Ellis, 1971). Hongo Lasiodiplo- (Sutton, 1980). Hongo Fusarium verticillioides
dia theobromae b) colonia algodonosa c) Colonia de crecimiento algodonoso con pigmenta-
griscea de crecimiento rpido en medio PDA c) cin rojo violceo d) abundante formacin de micro-
conidias inmaduras unicelulares y bicelulares (ma- conidias unicelulares de forma ovoide y alargado,
duras) 20-30 m x10-15 m (Sutton, 1980). poca formacin de macroconidias y clamidosporas
ausentes (Toussoun y Nelson, 1968).

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Ensayo de patogenicidad: a los 6 das despus De acuerdo a Lapeyre de Bellaire y Mourichon


de la inoculacin, los cuatro hongos aislados e (1997), C. musae es el agente causal de la an-
inoculados reprodujeron sntomas de pudricin tracnosis de los bananos y pltanos, C. musae
en la corona y nicamente el hongo Colletori- produce enzimas pectinolticas y celuloliticas que
chum musae; reprodujo manchas necrticas en degradan los componentes de la pared celular del
la superficie de la fruta. Segn los autores Prus- hospedante (Rodrguez et al., 2009).
ky, 1996 y Casarrubias et al. (2002) indican que
el hongo C. musae forma un tubo germinativo Segn Ploetz, et al., 2003, indica que los hongos
que penetra de manera directa la cutcula del que causan pudricin de la corona se encuentran
fruto inmaduro donde permanece latente, pero en campos de banano colonizando hojas muertas
se reactiva la invasin durante la maduracin e inflorescencias, las conidias son dispersadas
del fruto. por el viento, agua de riego, insectos y aves.

Tabla 3. Sintomatologa en frutos de Banano afectados por cuatro especies


fngicas procedentes del valle del Chira, Piura 2010.

Partes del fruto afectadas


Aislamientos
Corona Pedicelo Pulpa Epidermis

Thielaviopsis paradoxa Pb, F Pb, F Pb, F -

Lasiodiplodia theobromae Pb, F Pb, F Pb, F -

Colletotrichum musae Pb, f Pb, f - Mn, f

Fusarium verticillioides Ps, f Ps, f - -

Pb: Pudricin blanda. Mn: Manchas necrticas. Ps: Pudricin seca. F: Ftida. f: fragante.

Figura 5. Ensayo de patogenicidad, con inoculacin de los siguientes hongos: a) Fusarium verticillioides b)
Lasiodiplodia theobromae c) Colletotrichum musae d) Thielaviopsis paradoxa e) testigo sin inoculacin.

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Discusin y conclusiones

La sintomatologa de pudricin de la corona ob- colonia algodonosa de coloracin gris oscuro, con
servada en frutos de banano fue variable mos- abundante formacin de picnidios inmersos en el
trando pudricin blanda, pudricin seca, con una tejido infectado. En las condiciones de Piura se
coloracin marrn a negro afectando la zona de ha reportado a este patgeno afectando mango
corona y pedicelo, algunos con olor a fruta fermen- y palto (Rodriguez-Glvez, 2010). Asimismo, la
tada y vtrea segn Ploetz et al. (1994) reportan sintomatologa producida por F. verticillioides se
que es debido al acetato de etilo que produce el manifest con una pudricin seca en la corona y
hongo T. paradoxa. En algunos frutos aparecieron pedicelo. Cabe destacar que el dao producido
reas necrticas de forma ovalada que abarcaron por este hongo no fue tan severo como los da-
amplios sectores de la superficie del fruto, apre- os producidos por T. paradoxa y L. theobromae.
cindose la formacin de acrvulos con masas Resulta importante destacar que este complejo
conidiales de color salmn anaranjado, esta sin- de hongos de pudricin de corona se caracteriza
tomatologa coincide con la enfermedad causada porque se presenta durante todo el ao en Piura y
por C. musae descrito por Snowdon (1990). Segn en diferentes pocas inciden unos ms que otros;
Prusky (1996) sostiene que C. musae forma un algunos hongos como Thielaviopsis paradoxa se
tubo germinativo que penetra de manera directa la manifiestan durante los meses de mayo a octu-
cutcula del fruto inmaduro, donde permanece la- bre cuando baja la temperatura, mientras que Co-
tente, reactivndose la invasin durante la madu- lletotrichum musae, Lasiodiplodia theobromae y
racin del fruto. Al reactivar su actividad durante Fusarium verticillioides se presentan todo el ao,
la maduracin, la infeccin causa la formacin de con una mayor severidad durante los meses de
manchas tpicas de color marrn sobre las frutas noviembre a abril cuando se incrementa la tem-
maduras. Tambin puede desarrollarse y llegar a peratura en el valle, segn comunicacin personal
pudriciones destructivas de los dedos de las frutas de Dulanto quien realiz una investigacin, eva-
verdes durante el almacenamiento en fro de 12 a luacin y seguimiento durante dos aos entre el
14 C, las manchas en las frutas al principio son 2007 y 2009, determinando los factores que pre-
aguadas, usualmente de forma irregular y amari- disponen la pudricin de corona en poscosecha
llentas, se agrandan y pueden adquirir la forma de a nivel comercial. La prueba de patogenicidad en
lente o de huso y se tornan de color marrn oscuro frutos, permiti determinar que los agentes cau-
o negro con un margen amarillento aguado. Las sales de la pudricin de la corona en frutos de
masas de esporas de color naranja se desarrollan banano fueron: Thielaviopsis paradoxa, Lasiodi-
en el centro de las manchas en condiciones h- plodia theobromae, Colletotrichum musae y Fusa-
medas. La enfermedad prospera sobre la cscara rium verticillioides. Los hongos aislados causaron
lesionada y se agrava debido a las rozaduras y sntomas de infeccin en diferentes proporciones,
heridas provocadas durante la manipulacin en concluyndose que la pudricin de la corona es
post-cosecha. El almacenamiento durante largos una enfermedad de etiologa compleja.
periodos y las fluctuaciones de altas temperatu-
ras de almacenamiento favorecen el desarrollo de
la antracnosis (Meredith, 1971; Ploetz et al. 1994; Agradecimiento
Snowdon, 1990).
Los autores agradecen a Agrofair de Holanda
En cuanto a los sntomas producidos por L. theo- representado por el Grupo Hualtaco S.A.C en
bromae, se apreci pudricin blanda en la zona Per, a la Fundacin TASTE de Holanda, a Mas-
de la corona, pedicelo y pulpa presentndose una ter Profesionales Asociados S.A.C, a Copdeban

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7. Ploetz, R. C., Thomas, J. E., & Slabaugh, W. (2003).


Dole Per, por el apoyo financiero del presente Disease of banana and plantain. Pp. 73 134 in: R. C.
trabajo de investigacin en beneficio de los pro- Ploetz, ed. Diseases of Tropical Fruit Crops. London:
ductores de banano orgnico del Valle del Chi- Cabi International.

ra, Piura-Per. 8. Prusky, D. (1996). Pathogen quiensance in posthar-


vest diseases. Annual Review Phytopathology 34:
413-434
9. Rodrguez L.E., Gonzlez P.J. & Mayek P.N. (2009).
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St. Paul, MN.: APS Press. University Park.

Recibido: 17 de septiembre de 2012


Aceptado: 20 de noviembre de 2012

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