CUESTIONARIO UNIDAD 4

CINETICA ENZIMATICA

1.- DEFINA QUE ES INHIBICION ENZIMATICA

Los inhibidores enzimticos son molculas que se unen a enzimas y disminuyen
su actividad. Puesto que el bloqueo de una enzima puede matar a un organismo
patgeno o corregir un desequilibrio metablico, muchos medicamentos actan
como inhibidores enzimticos. Tambin son usados como herbicidas y pesticidas.
Sin embargo, no todas las molculas que se unen a las enzimas son inhibidores;
los activadores enzimticos se unen a las enzimas e incrementan su actividad.La
unin de un inhibidor puede impedir la entrada del sustrato al sitio activo de la
enzima y/u obstaculizar que la enzima catalice su reaccin correspondiente.

2.- MENCIONE Y DESCRIBA CADA UNO DE LOS TIPOS DE INHIBICION ENZIMATICA

Inhibicin reversible: cuando el complejo enzima-inhibidor puede disociarse y volver a
actuar. Existes dos tipos de inhibidores reversibles que son:
inhibicin competitiva: el inhibidor compite con el sustrato por el centro activo, ya
que es una molcula parecida y el enzima no es capaz de distinguir entre uno y
otro
inhibicin no competitiva: el inhibidor no compite con el sustrato ya que no
interacciona con el centro activo, sino con otros grupos del enzima
inibicion irreversible: normalmente modifican una enzima covalentemente, con lo que la
inhibicin no puede ser invertida. Los inhibidores irreversibles suelen contener grupos
funcionales reactivos como mostazas nitrogenadas, aldehdos, haloalcanos o alquenos.
Los inhibidores irreversibles son generalmente especficos para un tipo de enzima
y no inactivan a todas las protenas.
No funcionan destruyendo la estructura protenica, sino alterando especficamente
la estructura tridimensional del sitio activo inhabilitndolo.
Por ejemplo, el pH y las temperaturas extremas causan la desnaturalizacin de
casi todas las protenas, pero este no es un efecto especfico.

1. CUALES SON LOS PRINCIPALES INCOVENIENTES EN EL PROCESOS DE

INMOVILIZACION DE ENZIMAS
Generalmente, se disminuye la actividad enzimtica al inmovilizar.
Si la preparacin enzimtica no es homognea, se dificulta la interpretacin
de los datos.
A veces, se pueden originar contactos protena-protena indeseados.
Generalmente, se disminuye la actividad enzimtica.
 Se aumentan los problemas difusionales. 93.- Se aumenta el costo del
proceso.
El intervalo de pH de trabajo puede ser distinto al del biocatalizador nativo.
2. DESCRIBA Y DEFINA LAS FUERZAS QUE ACTUAN EN UNA REACCION
CATALITICA
3. DESCRIBA Y DEFINA LAS VARIABLES DE LA ECUACION DE MICHAELLIS-
MENTEN
4. MENCIONE Y DESCRIBA LOS METODOS DE INMOVILIZACION DE ENZIMAS.
Son 2 metodos que son la retencin fsica y la retencin quimica
Retencin fsica
El proceso de inmovilizacin se lleva a cabo mediante la suspensin de la enzima en una
solucin del monmero. Seguidamente se inicia la polimerizacin por un cambio de
temperatura o mediante la adicin de un reactivo qumico. El atrapamiento puede ser en
geles o en fibras, que suelen ser ms resistentes que los geles. En el primer caso, la
enzima queda atrapada en el interior de un gel, mientras que en el segundo caso la
enzima se encuentra ocluida dentro de las microcavidades de una fibra sinttica. El
atrapamiento, de gran sencillez desde el punto de vista experimental, requiere poca
cantidad de enzima para obtener derivados activos.
a)Atrapamiento: en capas o en fibras
b)Inclusin en membranas:

Microencapsulamiento: las enzimas estn rodeadas de membranas

semipermeables que permiten el paso de molculas de sustrato y producto, pero
no de enzima. Estas membranas semipermeables pueden ser permanentes o no
permanentes. Las microcpsulas obtenidas son de forma esfrica, con tamaos
comprendidos entre 1 y 100 m de dimetro. Mediante este mtodo se pueden
encapsular simultneamente una gran variedad de enzimas, clulas o
biomolculas, permitiendo que se lleven a cabo determinadas reacciones que
suceden en mltiples pasos
Reactores de membrana: El desarrollo de reactores o sistemas que contengan
enzimas atrapadas ha despertado gran inters en la industria. Estos reactores
emplean membranas permeables al producto final, permeables o no al sustrato
inicial y obviamente impermeables a la enzima. Mediante una bomba se establece
un flujo lquido de sustrato que atraviesa el reactor

Retencin qumica:
Unin covalente: La unin covalente de una enzima a un soporte es quiz el mtodo de
inmovilizacin ms interesante desde el punto de vista industrial. La metodologa de la
unin covalente se basa en la activacin de grupos qumicos del soporte para que
reaccionen con nuclefilos de las protenas. De entre los 20 aminocidos diferentes que
se encuentran en la estructura de las enzimas, los ms empleados para la formacin de
enlaces con el soporte son principalmente la lisina, la cistena, la tirosina y la histidina, y
en menor medida la metionina, el triptfano, la arginina y el cido asprtico y glutmico. El
resto de aminocidos, debido a su carcter hidrfobo, no se encuentran expuestos hacia
el exterior de la superficie proteica, y no pueden intervenir en la unin covalente.
Adsorcin: En la adsorcin, la enzima se une a un soporte sin funcionalizar mediante
interacciones inicas, fuerzas de Van der Waals y por puentes de hidrgeno.Los
principales actores que influyen en la adsorcin son:

pH del medio
fuerza ionica
dimetro poroso
presencia de iones
reticulado: consiste en uso de reactivos bifuncionales que originan uniones
intermoleculares entre las molculas de enzima. Como reactivos bifuncionales se pueden
emplear dialdehdos, diiminosteres, diisocianatos, sales de bisdiazonio e, incluso,
diaminas si estn activadas con carbodiimida. El resultado del reticulado son enzimas con
enlaces intermoleculares irreversibles capaces de resistir condiciones extremas de pH y
temperatura.

7.- DESCRIBA LAS VENTAJAS DE USAR ENZIMAS INMOVILIZADORAS EN UN

PROCESO QUIMICO

Disminucin de problemas de autolisis (proteasas) o deagregacin, al estar

limitados los movimientos rotacionales y translacionales.
Se ralentizan los cambios conformacionales, por lo que se pueden estudiar las
relaciones estructura-funcin.
Se pueden simular reacciones in vivo.
Se pueden simular sistemas estructuralmente asimtricos (ej.estudios de
membranas).
En sistemas entrecruzados, se pueden fijar interacciones con fosfolpidos,
polisacridos... para simular orgnulos celulares.
La unin multipuntual a soportes deformables permite estudiar la deformacin de
protenas globulares
8.-DESCRIBA AMPLIAMENTE QUE ES UNA ENZIMA son molculas de
naturaleza proteica que catalizan reacciones qumicas, siempre que
sean termodinmicamenteposibles: una enzima hace que una reaccin qumica que es
energticamente posible (ver Energa libre de Gibbs), pero que transcurre a
una velocidad muy baja, sea cinticamente favorable, es decir, transcurra a mayor
velocidad que sin la presencia de la enzima.2 3 En estas reacciones, las enzimas actan
sobre unas molculas denominadas sustratos, las cuales se convierten en molculas
diferentes denominadas productos. Casi todos los procesos en las clulas necesitan
enzimas para que ocurran a unas tasas significativas. A las reacciones mediadas por
enzimas se las denomina reacciones enzimticas.
 5. MENCIONE Y DESCRIBA LA CLASIFICACION DE ENZIMAS

EC1 Oxidorreductasas: catalizan reacciones de oxidorreduccin o redox. Precisan la

colaboracin de las coenzimas de oxidorreduccin (NAD+, NADP+, FAD) que aceptan
o ceden loselectrones correspondientes. Tras la accin cataltica, estas coenzimas
quedan modificadas en su grado de oxidacin, por lo que deben ser recicladas antes
de volver a efectuar una nueva reaccin cataltica.
EC2 Transferasas: transfieren grupos activos (obtenidos de la ruptura de ciertas
molculas) a otras sustancias receptoras. Suelen actuar en procesos de
interconversin demonosacridos, aminocidos, etc.
EC3 Hidrolasas: catalizan reacciones de hidrlisis con la consiguiente obtencin
de monmeros a partir de polmeros. Actan en la digestin de los alimentos,
previamente a otras fases de su degradacin. La palabra hidrlisis se deriva
de hidro 'agua' y lisis 'disolucin'.
EC4 Liasas: catalizan reacciones en las que se eliminan grupos H2O, CO2 y
NH3 para formar un doble enlace o aadirse a un doble enlace. EC5 Isomerasas:
actan sobre determinadas molculas obteniendo o cambiando de ellas
sus ismeros funcionales o de posicin, es decir, catalizan la racemizacin y cambios
de posicin de un grupo en determinada molcula obteniendo formas isomricas.
Suelen actuar en procesos de interconversin.
EC6 Ligasas: catalizan la degradacin o sntesis de los enlaces denominados
"fuertes" mediante el acoplamiento a molculas de alto valor energtico como el ATP

MECIONE LAS PROPIEDADES DE LAS ENZIMAS

Estn presentes en pequeas cantidades.

No sufren alteraciones irreversibles en el curso de la reaccin y por lo tanto,
cada molcula deenzima puede participar en muchas reacciones individuales.
No tienen efecto sobre la termodinmica de la reaccin.4.Tiene gran poder
cataltico.5.Son catalizadores en las reacciones qumicas de los sistemas
biolgicos.
Poseen un elevado grado de especifidad de sustrato.
Funcionan en soluciones acuosas en condiciones suaves de pH y temperatura.
La mayora de las enzimas son protenas ;
La funcin depende de la integridad de la conformacin proteica nativa
10.- QUE SIGNIFICADOS IMPORTANTES TIENE LA KM
La Km nos da una idea la afinidad que tiene el enzima por su sustrato, cuanto mayor es
Km menor es la afinidad (predominan las formas E y S libres), cuanto menor es Km mayor
es la afinidad (predomina la forma ES).
LA Km es la velocidad media en la k las enzimas tardan en encontrarse con el sustrato.
Km es la constante de Michaelis Menten o constante de saturacion que indica el numero
de moleculas de sustrato.
11.- DESCRIBA EL EEFECTO DE LA CONCENTRACION DEL SUSTRATO SOBRE LA
VELOCIDAD DE LA REACCION ENZIMATICA
12.- DESCRIBA EL EFECTO DE LA TEMPERATURA SOBRE LA VELOCIDAD DE LA
REACCION ENZIMATICA
La velocidad de una reaccion enzimatica varia al aumentar la temperatura. La velocidad
de una reaccion enzimatica se incrementa al aumentar la temperatura dentro de un
determinado rango, alcanzando un valor maximo a la denominada temperatura optima. A
valores superiores la actividad disminuye debido a que el enzima, como cualquier otra
a, sufre procesos de desnaturalizacion y, por lo tanto, de inactivacion.
protein
13.- DESCRIBA EL EFECTO DEL PH SOBRE LA VELOCIDAD DE LA REACCION
ENZIMATICA
La actividad de un enzima se ve afectada por el pH al cual se lleva a cabo la reaccion. La
curva actividad-pH puede ser diferente para cada tipo de enzima. En el caso mas general
la curva tiene forma de campana. El valor de pH al cual la actividad es maxima se
denomina pH optimo; dicho pH no tiene porque coincidir con el pH intracelular. La relacion
entre el pH y la actividad depende del comportamiento acido-base del enzima y del propio
sustrato. Sustrato y enzima (centro activo) pueden contener grupos funcionales acidos y
basicos, siendo su grado de disociacion dependiente del pH, lo que determinara, entre
otros aspectos, la conformacion de la protein a, la capacidad de union del sustrato al
centro activo del enzima (Km) y la capacidad de transformacion del sustrato (kcat). Los
estudios cineticos a diferentes valores de pH nos proporcionan informacion sobre el
mecanismo catalit ico de los enzimas y la naturaleza de los aminoacidos mas directamente
implicados en la catalisis.
14.- DEFINA: a) ISOENZIMAS: proteinas con diferente estructura pero que catalizan la
misma reaccion pero que se desplazan de forma diferente en la electroforesis. Con
frecuencia, las isoenzimas son oligomeros de diferentes cadenas peptidicas, y
usualmente difieren en los mecanismos de regulacion y en las caracterisiticas cinticas.
b) HOLOENZIMAS: Una holoenzima es una enzima que est formada por una apoenzima
y un cofactor, que puede ser un ion o una molcula orgnica compleja unida (grupo
prosttico) o no (una coenzima). En resumidas ocasiones, es una enzima completa y
activada catalticamente.
c) APOENZIMAS: sirve de soporte al coenzima y esta exclusivamente formado por
secuencias de aminoacidos. Es el que determina la especificidad de la reaccion
enzimatica.
En el apoenzima se distinguen 4 tipos de aminoacidos segun la funcion que desempenen
en la actividad enzimatica:
No esenciales: No contribuyen ni directa ni indirectamente en el proceso catalit ico, por lo
que pueden ser eliminados de la cadena polipeptid ica sin que se pierda actividad
enzimatica.
Estructurales: Son los que mantienen la estructura terciaria de la protein a enzimatica. De
union o fijacion: Sujetan el apoenzima al sustrato. Catalit icos: Son los responsables
directos de la actividad enzimatica y forman el llamadositio catalit ico. Ademas, junto con
los de union, forman el centro activo del enzima que es una oquedad tridimensional cuya
forma depende de la estructura terciaria de la molecula proteica del apoenzima y que
ocupa una pequena parte de esta.
d) GRUPO PROSTETICO: es el componente no aminoacdico que forma parte de la
estructura de las heteroprotenas o protenas conjugadas, estando unido covalentemente
a la apoprotena. No debe confundirse con el cofactor que se une a la apoenzima de las
enzimas (ya sea una holoprotena o heteroprotena) por enlace no covalente.
e) COFACTOR: Un cofactor es un componente no proteico, termoestable y de baja masa
molecular, necesario para la accin de una enzima. El cofactor se une a una estructura
proteica, denominada apoenzima, y el complejo apoenzima-cofactor recibe el nombre de
holoenzima. Aquellos cofactores que estn covalentemente unidos a la apoenzima son
denominados grupos prostticos, ya sean orgnicos (coenzimas) o inorgnicos.

15.- DESCRIBA QUE ES INHIBICION