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Ps-graduao em

Cincias Forenses

BIOLOGIA FORENSE

Profa. Norma Bonaccorso


DNA

Qual a
importncia?
Biologia Molecular
rea que se ocupa do estudo das clulas em nvel
molecular
Aplica-se quase todas as reas de estudo de
seres vivos. Exemplos:

IDENTIFICAO HUMANA, ANIMAL e de PLANTAS


DIAGNSTICO de DOENAS INFECCIOSAS e GENTICAS
MELHORAMENTO GENTICO de ESPCIES (plantas e
animais)
SNTESE DE MEDICAMENTOS (insulina, p.ex.)
INMERAS OUTRAS APLICAES
Molcula de DNA

Desoxyribonuleic acid

Descrita em 1953 por James Watson e


Francis Crick artigo na Revista Nature
(25/04/1953)

Constitui o material gentico dos eucariotos


(seres vivos com uma ou mais clulas
nucleadas)
James Watson e Francis Crick em 1953, quando
propuseram o modelo da molcula de DNA
James Watson em 2007
GENTICA

Gametas: clulas haplides 23 cromossomos


Na fecundao: um espermatozide (23
cromossomos de origem paterna) une-se a um
vulo (23 cromossomos de origem materna)
Zigoto, j com 46 cromossomos, multiplica-se,
originando o novo indivduo
Todas as clulas do organismo originam-se
desta clula-ovo
Portanto, o material gentico o mesmo em
todas as clulas do organismo
ZIGOTO: 1. Clula
do embrio - 46
espermatozoide cromossomos
paterno: 23
Aps a 1.
cromossomos Diviso celular
do zigoto,
originam-se 2
*clulas
embrionrias*
iguais, cada
uma com 46
cromossomos

VULO materno: 23
cromossomos
No Ser Humano:

Ncleo de cada clula somtica


(no-sexual) contm 23 pares de
cromossomos (total de 46
cromossomos 44 autossmicos e
2 sexuais XX ou XY)
Caritipo humano feminino (XX) por
hibridrao com sondas (FISH)
Caritipo humano feminino
(XX) por Bandas-G
Caritipo humano masculino (XY) por
Bandas-G
Das Clulas ao DNA:

DNA no ncleo: altamente condensado,


organizado sob a forma de cromossomos
Como o DNA est
dentro das
clulas?

DNA se condensa
e se organiza em
cromossomos no
ncleo das
clulas:
Molcula de DNA

Constituda pela unio de muitas unidades bsicas


de nucleotdeos

Nucleotdeos se unem em estrutura do tipo fita


simples

Fitas simples se unem atravs de ligaes entre


suas bases nitrogenadas, formando a
fita dupla

Bases nitrogenadas: Adenina (A), Timina (T)


Citosina (C) e Guanina(G)
Ligao entre
os nucleotdeos
e pareamento
especfico das
bases
Fita dupla se
arranja
espacialmente
em estrutura de
Dupla-Hlice:
Modelos de representao da
dupla-hlice de DNA:
DNA Identificao Humana

Nos Eucariotos em geral:


sequncias de DNA no-repetitivo: regies
codificantes (genes)
sequncias de DNA moderadamente
repetitivo e altamente repetitivo: regies
no-codificantes
- Funo ainda no esclarecida
- Constituem a maior parte do genoma
Polimorfismos de DNA

Variaes ou diferenas da
molcula de DNA que ocorre entre
indivduos ou entre populaes
normais.

Polimorfismos de DNA permitem


individualizar organismos atravs de
anlises comparativas.
Polimorfismos de comprimento do DNA:

VNTRs
Variable Number
of Tandem Repeats

Minissatlites: Microssatlites:
Repeties de sequncias Repeties de sequncias
bsicas maiores que 8 pares bsicas compostas por
de bases 2 a 8 pares de bases
Long Tandem Repeats Short Tandem Repeats
LTRs STRs
MARCADORES UTILIZADOS

Marcadores do tipo microssatlites: STRs


Short Tandem Repeats

13 Loci de STRs padronizados


internacionalmente para identificao
humana - CODIS (Combined DNA Index
System Sistema de bancos de dados de
perfis genticos dos EUA 1997)
Marcadores estabelecidos
pelo CODIS em 1997

CSF1PO D7S820
FGA D8S1179
TH01 D13S317
TPOX D16S539
VWA D18S51
D3S1358 D21S11
D5S818
Diversas regies polimrficas em
diferentes cromossomos

TPOX

D3S1358

TH01 vWA
FGA
D2S1338 D8S1179
D5S818
CSF1PO D7S820

AMEL

Hapltipos X

Penta E Penta D
D18S51 AMEL
D13S317 D16S539 D19S433 D21S11 Hapltipos Y
EXEMPLO:
Regio do DNA (locus) do tipo STR
denominada D18S51: n repeties da
sequncia [AGAA]n

Se o indivduo possui os alelos 8 e 9 para o locus


D18S51, significa que ele recebeu de um dos pais um
alelo que, para aquela regio (D18S51), possui 8
repeties da sequncia AGAA o que se representa
como [AGAA]8 - e do outro um alelo que possui 9
repeties desta sequncia [AGAA]9
Breve Histrico da Aplicao

1985 Caso Enderby


(Queen x Pitchfork) UK
Desenvolvimento da metodologia de
extrao diferencial por Alec Jeffreys e
colaboradores
Aperfeioada pelo FBI
1985 Caso Enderby
(Queen x Pitchfork) UK

Enderby cidade da Inglaterra


Colin Pitchfork estuprou e matou
uma garota de 15 anos (Dawn Ashworth);
Tambm matou outra garota de 15 anos em
Narborough (Lynda Mann-1983);
Suspeito inicial de 17 anos foi inocentado pelo
exame de DNA;
Primeiro screening populacional da histria;
Pitchfork foi o 1 indivduo a ser preso e condenado
com base no resultado do exame de DNA.
1985 Caso Enderby (Queen x
Outraged relatives of
Pitchfork) UK Notcia Agosto 2009
murdered 15-year-old
Lynda Mann want Colin
Pitchfork - the first
person in the world to
be convicted of a
murder with DNA
evidence - to spend the
rest of his life in jail.
Pitchfork, now 48, was
jailed for life in 1988 for
the murders of the
teenager and 15-year-
old Dawn Ashworth in
Leicestershire. Both girls
were raped and
strangled.
The Court of Appeal is
now considering the
killer's bid to reduce his
minimum 30-year tariff.
Pitchfork claims 30
years is "manifestly"
excessive.
VANTAGENS DO DNA EM RELAO
S PROVAS SOROLGICAS

Alto poder discriminatrio (incluso)


Exame realizvel com qualquer material biolgico
Mais resistente s agresses ambientais (dificilmente se
desnatura)
Possibilidade de estudos evolutivos e de materiais
biolgicos extremamente degradados ou muito antigos
como mmias e fsseis atravs do DNA MITOCONTRIAL
Separao de DNA proveniente de espermatozoides em
crimes sexuais
Estudo do Cromossomo Y
TIPOS DE MATERIAIS BIOLGICOS
PASSVEIS DE ANLISE PELO DNA

sangue
fluidos (lquido seminal, saliva)
tecidos moles (msculos, pele)
tecidos rgidos (ossos, dentes)
pelos com bulbos
clulas descamativas (lquido amnitico)
FORMA DE APRESENTAO
DESTES MATERIAIS

material lquido
material seco
material fixado em diferentes
suportes
ANLISE DE DNA

Estritamente COMPARATIVA:

AMOSTRA QUESTIONADA
(fonte biolgica desconhecida)
x
AMOSTRA-REFERNCIA
(fonte biolgica conhecida)
Procedimentos para a Anlise
Forense de DNA

COLETA DE MATERIAIS
Extrao do DNA
Quantificao do DNA
Amplificao do DNA
Anlise Comparativa do DNA das
Amostras (PERFIS GENTICOS)

Clculos Estatsticos, quando cabveis


Laudo ou Relatrio de Anlise