BIOLOGA

INMUNOENSAYO DE DETECCIN Y
DIFERENCIACIN DE ANTI-HIV-1 Y
ANTI-HVI-2
Objetivos:
Describir las indicaciones de
detencin rpida del VIH.
Describir la aplicacin de la
prueba de deteccin rpida.
Fundamento terico:
El virus de inmunodeficiencia humana
VIH (1 y 2) es el VIH agente causante
del sndrome de inmunodeficiencia
adquirida (SIDA). El mtodo general
para detectar la infeccin es la
prueba rpida de HIV 1 y 2 que es un
inmunoensayo rpido de un solo uso
basado en inmunocromatografa
donde se emplea reactivos nicos
para la deteccin rpida y confiable
de anticuerpos al VIH-1 y VIH-2 en
sangre, suero y plasma humana, sin
instrumentacin.
 Materiales requeridos no suministrados
Control positivo
Control negativo
Reloj o cronometro
Dispositivo de puncin para la extraccin de
sangre

Reactivos y materiales
suministrados
Bolsas de aluminio selladas que contiene:
a) Un dispositivo de casete.
b) Un desecante.
Goteros de plstico.
Diluyente de muestra (REF SB-R0042,
5ml/botella).
Inserto (instrucciones de uso).

Muestra
Suero hemtico

Procedimiento
1. Lleve las muestras y componentes del ensayo a temperatura ambiente si es
refrigerada o congelada. Mezcle bien la muestra antes del ensayo una vez
congelada.
2. Cuando est preparado para realizar la prueba, abra el empaque y saque el
dispositivo. Colquela sobre una superficie limpia y plana.
3. Asegrese de marcar el dispositivo con la identificacin del paciente.
4. Llene la pipeta con la muestra.

En posicin vertical, agregue una gota de (30-45 l) de muestra a una gota

de sangre total (40-50 l) dentro del pozo de muestra. Asegrese de que no
haya burbujas de aire.

Inmediatamente agregue 1 gota (35-50 l) de diluyente de muestra con la

botella en posicin vertical.
5. Contabilice el tiempo.
6. Los resultados deben ser ledos a los 15 minutos. Los resultados positivos o
reactivos se hacen visibles transcurriendo 1 minuto.

No lea los resultados despus de los 20 minutos. Para evitar

confusiones descarte el casete despus de leer el resultado.

Lectura de los resultados

1. Resultado negativo o no reactivo:
Solo se le visualiza la banda C coloreada, y hay ausencia de color en las
bandas 1 y 2 indica que no hay presencia de anticuerpos anti-VIH en la
muestra. El resultado es no-reactivo.

2. Resultado positivo o reactivo:

2.1 Adicionalmente la presencia de la banda C se colorea la banda 1, la

prueba indica la presencia de anticuerpos anti-VIH en la muestra. El
resultado es No-reactivo
 2.2 Adicionalmente a la banda C se colorea la banda 2, la prueba indica
la presencia de anticuerpos anti VIH-2 en la muestra. El resultado en
VIH-2 reactivo.

2.3 Si adicionalmente la presencia de la banda C, se coloreara las bandas

1 y 2, los resultados indican VIH positivo o reactivo. Para diferenciacin
del tipo de infeccin por el virus VIH, diluya la muestra con diluyente de
muestra 1:50 o 1:100, y realice nuevamente la prueba en un nuevo
casete de prueba.

Las muestras con resultados reactivos deben ser confirmadas con

tcnicas alternativas tales como ELISA o PCR y segn los hallazgos
clnicos antes de hacer un diagnstico.

3. Resultado invalido:
Si la banda c no se colorea el ensayo se considera invlido a pesar de que
las otras bandas se tian. Se debe realizar nuevamente la prueba en otro
casete.
 Interpretacin del resultado
Cuando se dispensa un adecuado volumen de muestra en el pozo del casete de
prueba, la muestra migra por capilaridad a lo largo del casete, los anticuerpos VIH-
1 se encuentran en la muestra migran atravs de la almohadilla donde se unen a
los conjugados de VIH-1.El inmunocomplejo es capturado por la membrana que
est recubierta del antgeno VIH-1, formando una banda de color borgoa en la
banda 1, indicando as un resultado positivo o reactivo. La ausencia de esta banda
en esa regin sugiere un resultado negativo o no reactivo para anticuerpos anti-
VIH 1. La ausencia de cualquiera de la banda 1 sugiere un resultado negativo.
Los anticuerpos VIH-2, si estn presentes en la muestra migran atravs de la
membrana hasta unirse con el conjugado VIH-2. El inmunocomplejo es entonces
capturado por la membrana pre-recubierta de antgeno VIH-2, formando una
banda de color borgoa en la banda 2, indicando un resultado positivo o reactivo.
La ausencia de esta banda en esa regin sugiere un resultado negativo o no
reactivo para anticuerpos anti-VIH-2. La ausencia de cualquiera de la banda 2
sugiere un resultado negativo.
La prueba contiene un control interno (banda C) que debe exhibir una banda de
color borgoa por la formacin de un inmunocomplejo de anticuerpos de control
independiente de la presencia de cualquier banda coloreada. De presentarse el
resultado de la prueba no es vlido y la muestra debe ser analizada de nuevo con
otro dispositivo.

I: Reaccin positiva en la lnea 1, presencia de anticuerpos anti-VIH 1.

I: Reaccin positiva en la lnea 2, presencia de anticuerpos anti-VIH 2.

Si la reaccin es positiva en las dos lneas hay presencia de anticuerpo anti-VIH-1
y anti-VIH-2.

I: Reaccin negativa en la lnea 1, ausencia de anticuerpos anti-VIH 1.

I: Reaccin negativa en la lnea 2, ausencia de anticuerpos anti-VIH 2.

Nota: En el caso de la banda de control siempre debe salir positivo.
 Informe de laboratorio: DETECCIN Y DIFERENCIACIN DE
ANTI-HIV-1 Y ANTI-HIV-2
Apellidos y nombres:.
Rellenamos la siguiente tabla con el resultado obtenido de la prueba rpida de
deteccin de anticuerpos anti-VIH-1 y anti-VIH-2.
LINEA 1 ANTI-VIH-1 LINEA 2 ANTI-VIH-2 BANDA DE CONTROL

Observando la tabla se identifica que el resultado de la prueba es negativo porque

se observa solo la banda C coloreada eso quiere decir que el paciente no cuenta
con anticuerpos anti-VIH-1 y anti-VIH-2.
CONCLUCIONES:
La prueba que acabamos de hacer es llamada tamizaje por inmunocromatografa
se basa en la migracin de una muestra a travs de una membrana de
nitrocelulosa.
Sus principales ventajas son la sencillez y rapidez del test y que no es necesario
reactivos ni instrumentacin adicional.
Su desventaja es que necesitan de otras pruebas para ser corroborada.
RECOMENDACIONES:
La cantidad de sangre y diluyente debe ser la indicada ya que se corre riesgo de
invalidar la prueba.
Es importante leer las pruebas en el tiempo establecido (dentro de 15 minutos)
debido a que la prueba puede falsear el resultado.