ESCUELA POLITCNICA DEL EJRCITO

DEPARTAAMENTO DE CIENCIAS DE LA VIDA

INFORME DE LABORATORIO
PRACTICA N 6

Nombre : Stephania Susana Almeida Aguilar

Nivel : I Semestre - 4942
Fecha : 15/06/2013

I. TTULO DE LA PRCTICA:
Identificacin morfolgica y clasificacin de bacterias por tincin Gram a partir de muestras
de flora normal y ambiente.

II. OBJETIVOS:
Identificar morfolgicamente y clasificar bacterias segn tincin diferencial: Gram, a
partir de muestras fciles de obtener (dientes, fosas nasales y superficies del
laboratorio).
Tomar correctamente un frotis con la muestra seleccionada.
Aplicar metodologa de fijacin bacteriana en el frotis con su respectiva muestra.
Emplear correctamente colorantes, reactivos y materiales para fijacin y tincin
bacteriana, respetando normas de bioseguridad y el medio ambiente.
Manipular correctamente el microscopio ptico de campo claro, respetando normas
universales.

III. INTRODUCCIN:
La bacterias son microorganismos unicelulares, procariotas, esto quiere decir que su
material gentico se encuentra disperso por el ncleo al contrario que los organismos
eucariotas cuyo material gentico se encuentra protegido por una capa lipdica que los asla
del citoplasma.
Las bacterias pasan por ser los organismos ms abundantes del planeta
encontrndose en todos los ecosistemas incluso en aquellos que no dependen de la energa
del Sol como las fumarolas submarinas. Tal es la adaptacin de las bacterias al medio que
las rodeas que se han encontrado bacterias hasta en los residuos nucleares.

Las bacterias fueron observadas por primera vez por Anton van Leeuwenhoek
utilizando el microscopio que el mismo diseo, pero fue Pasteur el primero en ver la
importancia de las bacterias en los procesos biolgicos, desechando as la teora errnea de
la generacin espontnea.

Las bacterias son organismos con una gran variedad de formas que van de las
esfricas hasta las espirilo (con forma de muelle). Adems las bacterias son capaces de
formar colonias. Segn su forma las bacterias las podemos clasificar como:

Coco, con forma esfrica.

Bacilo, con forma de bastn.
Vibrio, con forma coma.
Espirilo, con forma helicoidal.
 Espiroqueta, con forma de tirabuzn.

IV. HIPTESIS:
Las bacterias representan el tipo de organismo ms abundante de nuestro planeta.
Las bacterias segn su forma se clasifican en: cocos, bacilos, vibrios, espirilos,
Espiroquetas.

V. MATERIALES E INSUMOS:
Placa portaobjetos
Mecheros de alcohol
Pipetas desechables
Papel especial para limpieza de microscopio
Algodn
Papel toalla
Mascarillas
Guantes
Palillos de dientes
Hisopos de madera
Picetas con agua destilada

VI. REACTIVOS:
Reactivos para tincin Gram: (Cristal violeta, lugol-cetona y safranina)
Alcohol industrial
Aceite de inmersin
Agua destilada

VII. PROCEDIMIENTO:

Toma, frotis y fijacin de muestras

1. Con un palillo estril proceder a tomar una muestra de entre los dientes.
2. Con hisopo estril tomar muestras de las fosas nasales o de la faringe.
3. Con un hisopo estril tomar muestras de superficies como mesones, piso, ventanas,
zapatos, baos, lavabos (pasar varias veces el hisopo sobre la superficie seleccionada).
4. Hacer un frotis y expandir la muestra tomada sobre una placa portaobjetos, si es
necesario aadir una gota de agua destilada.
5. Fijar la muestra al calor, pasando la placa portaobjetos varias veces por la llama azul
del mechero, cuidando de no sobrecalentarla.

Tincin Gram

1. Depositar la placa con la muestra previamente fijada sobre la bandeja para tinciones.

2. Aplicar sobre la muestra, el primer reactivo de la tincin Gram: cristal violeta,

cubriendo la muestra por 1 minuto.
3. Lavar con piceta de agua destilada, para eliminar el exceso de Cristal violeta.
4. Aplicar el segundo reactivo de la tincin Gram: Lugol, cubriendo toda la muestra,
durante 1 minuto.
5. Lavar con piceta de agua destilada, para eliminar el exceso de lugol.
 6. Aplicar decolorante (alcohol-cetona), cubriendo la muestra durante unos segundos y
eliminarlo, repetir este proceso las veces que sean necesarias hasta que deje de salir el
color violeta.
7. Lavar con piceta de agua destilada.
8. Aplicar el colorante de constaste: Safranina, cubriendo la muestra, durante 30
segundos.
9. Enjuagar la muestra con piceta de agua destilada.
10. Secar la placa a la llama azul del mechero.
11. Observar la placa en el microscopio con el lente 100x.
12. Identificar la morfologa de las bacterias presentes y clasificarlas segn tincin Gram.

VIII. RESULTADOS:

Bacterias (cocos)
Lente 100x
Tincin Gram

Bacterias (bacilos)
Lente 100x
Tincin Gram
IX. DISCUSIN:

Se puede identificar en las muestras tomadas de entre los espacios dentales y de la

mucosa nasal la presencia de una gran variedad de cocos Gram positivos (color
violeta). De acuerdo a un estudio realizado y tomado por el Dr. Guillermo Raspall
para su libro, las bacterias del tipo coco Gram positivos son causantes en un 85% de
enfermedades ontognicas (Raspall, 2001), as mismo, varias infecciones de tipo
respiratorio a pesar que la flora bacteriana normal est compuesto por cocos Gram
positivos anaerobios (Restrepo, 2003).

Durante la observacin no se encontr cocos Gram negativos ya que estos se

encuentran presentes en enfermedades graves como lo afirma Ledermann (2007) Si
no se encuentra bacterias del tipo coco Gram negativo la razn es que estas bacterias
son altamente infecciosas produciendo enfermedades como gonorrea (gonococo) y
meningitis (meningococo).

X. CONCLUSIONES:

Las bacterias representan el tipo de organismo ms abundante de nuestro planeta.

Las bacterias segn su forma se clasifican en: cocos, bacilos, vibrios, espirilos,
Espiroquetas.
Las bacterias son perjudiciales al organismo de los seres vivos, adems son de suma
importancia en diversos campos biolgicos.
Las bacterias son organismos procariotas.
Las hiptesis planteadas son verdaderas, afirmadas y comprobadas.

XI. REFERENCIAS:

Jimnes, J. M. (200). Colegio Internacional Lope de Vega. Recuperado el 15 de Junio de

2013, de http://www.juanluismorales.es/wp-
content/uploads/downloads/2011/11/Pr%C3%A1ctica-2.-Bacterias.pdf
Curtis, H., Barnes, S., Schnek, A., & Massarini, A. (2008). Curtis Biologa. Argentina:
Editorial Medica Panamericana.
Ledermann, W. (2007). Una historia personal de las bacterias. Chile: RIL Editores.
R Raspall, G. (2001). Ciruga Maxilo-Facial. Espaa: Editorial Mdica Panamericana.
estrepo, A. (2003). Enfermedades Infecciosas. Colombia: Corporacin para Investigaciones
Biolgicas.
Solomon, E., Berg, L., & Martin, D. (2008). Biologa. China: Mc Graw-Hill.
Curtis, H., Barnes, S., Schnek, A., & Massarini, A. (2008). Curtis Biologa. Argentina:
Editorial Medica Panamericana.