BIOLOGA

INMUNOENSAYO DE DETECCIN
CUALITATIVA DEL ANTGENO DE
SUPERFICIE DE LA HEPATITIS B
Objetivos:
Describir las indicaciones de
detencin rpida del antgeno
de superficie de la hepatitis B.
Describir la aplicacin de la
prueba de deteccin rpida.
Fundamento terico:
Es la irritacin e hinchazn
(inflamacin) del hgado debido a
infeccin con el virus de la hepatitis B
(VHB).
El mtodo ms prctico para detectar
la infeccin es la prueba rpida de
(VHB) que es un inmunoensayo
practico de un solo uso basado en
inmunocromatografa donde se
emplea reactivos nicos para la
deteccin rpida y confiable del
antgeno.
 Materiales requeridos no suministrados
Control positivo.
Control negativo.

Reactivos y materiales
suministrados
Bolsas de aluminio selladas que contiene:
a) Un dispositivo de casete.
b) Un desecante.
Goteros de plstico.
Diluyente de muestra (REF SB-R0042,
5ml/botella).
Un inserto (instrucciones de uso).

Muestra
Sangre capilar (dedo ndice).

Procedimiento
1. Lleve las muestras y componentes del ensayo a temperatura ambiente si es
refrigerada o congelada.
2. Cuando est preparado para realizar la prueba, abra el empaque y saque el
dispositivo. Colquela sobre una superficie limpia y plana.
3. Asegrese de marcar el dispositivo con la identificacin del paciente.
4. Llene la pipeta con la muestra.

En posicin vertical, agregue una gota de (40-50 l) de muestra a una gota

de sangre total (40-50 l) dentro del pozo de muestra (pozo S). Asegrese
de que no haya burbujas de aire.

Inmediatamente agregue 1 gota (aprox. 30-40 l) de diluyente de muestra

con la botella en posicin vertical.
 5. Contabilice el tiempo.
6. Los resultados deben ser ledos a los 15 minutos. Los resultados positivos o
reactivos se hacen visibles transcurriendo 1 minuto.

No lea los resultados despus de los 20 minutos. Para evitar

confusiones descarte el casete despus de leer el resultado.

Lectura de los resultados

1. Resultado negativo o no reactivo:
Solo se le visualiza la banda C coloreada, la prueba indica el HBsAg no se
detecta en la muestra. El resultado es Negativo o No-reactivo

2. Resultado positivo reactivo:

Ambas bandas C y T desarrollan color, la prueba indica que la muestra
contiene HBsAg. El resultado es positivo o reactivo.

Las pruebas con resultados positivos deben ser confirmadas con mtodos
alternativos tales como ELISA y con la sintomatologa clnica antes de tomar una
decisin diagnostica
 3. Resultado invlido:
Si la banda C no se colorea el ensayo se considera invlido a pesar de que
las otras bandas se tian. Se debe realizar nuevamente la prueba en otro
casete.

Interpretacin del resultado

Cuando es dispensado un volume adecuado de la muestra en el pozo de muestra
del casete, la muestra migra por accin capilar a travs del casete. El HBsAg si
est presente en la muestra se une con el HBsAg Ab. Este inmunocomplejo es
capturado en la membrana por el anticuerpo HBsAg no conjugado pre- recubierto,
formando una coloracin en la banda T, indicando un resultado positive para
HBsAg.
La ausencia de la banda T indica un resultado negativo. La prueba contiene un
control interno (banda C) la cual muestra una coloracin borgoa por la formacin
de un inmunocomplejo de anticuerpos de control, que se forma
independientemente de la banda T. El resultado de la prueba es invlido si la
banda C no se colorea y debe ser repetida en un nuevo casete de prueba.

I: Reaccin positiva en la banda T, presencia HBsAg.

I: Reaccin negativa en la banda T, ausencia HBsAg.

Nota: En el caso de la banda de control siempre debe salir positivo.
 Informe de laboratorio: DETECCIN CUALITATIVA DEL
ANTGENO DE SUPERFICIE DE LA HEPATITIS B
Apellidos y nombres:.
Rellenamos la siguiente tabla con el resultado obtenido de la prueba rpida de
deteccin de HBsAg.
LINEA 1 ANTI-Tp BANDA DE CONTROL

Observando la tabla se identifica que el resultado de la prueba es negativo porque

se observa solo la banda C coloreada eso quiere decir que el paciente no cuenta
con HBsAg.
CONCLUCIONES:
La prueba que acabamos de hacer es llamada tamizaje por inmunocromatografa
se basa en la migracin de una muestra a travs de una membrana de
nitrocelulosa.
Sus principales ventajas son la sencillez y rapidez del test y que no es necesario
reactivos ni instrumentacin adicional.
Su desventaja es que necesitan de otras pruebas para ser corroborada.
RECOMENDACIONES:
La cantidad de sangre y diluyente debe ser la indicada ya que se corre riesgo de
invalidar la prueba.
Es importante leer las pruebas en el tiempo establecido (dentro de 15 minutos)
debido a que la prueba puede falsear el resultado.