PRACTICA N 09

ESTUDIO DE ORGANELAS CELULARES: MITOCONDRIAS, LISOSOMAS,

CLOROPLASTOS, PLSTIDOS Y VACUOLAS

I.INTRODUCCIN:
Mediante esta prctica reconoceremos las siguientes organelas celulares: Mitocondrias,
lisosomas, cloroplastos y plastidios para seguir conociendo la estructura de la clula
,teniendo un conocimiento terico previo a la prctica la cual nos ayuda a desenvolvernos
durante el procedimiento de la prctica .

Al final de la prctica lograremos cumplir los objetivos trazados para la prctica, finalmente
sacaremos las conclusiones de lo observado durante la prctcia.

II. OBJETIVO:
Mediante el empleo de la tcnica de coloracin vital se observarn las
mitocondrias presentes slo en el citoplasma de las clulas Eucariotas, que vienen
a constituir las centrales de energa porque producen y almacenan energa bajo
la forma de ATP.

Las clulas tienen vesculas membranosas que contienen enzimas hidrolticas que
permiten la digestin intracelular y que corresponden a los lisosomas los cuales
pueden pueden ser identificados en protozoarios con una tincin vital.

Con el uso de suero fisiolgico observar plastidos en las clulas vegetales eucariticas, los
que contienen pigmentos y pueden sintetizar y acumular diversas sustancias, como los
Leucoplastos que son plastidos incoloros, los Amiloplastos que acumulan almidn, los
Proteinoplastos que acumulan protenas, los Elaioplastos que acumulan grasas y aceites
esenciales. Los Cromoplastos son plastidos coloreados como el Caroteno que presenta un
pigmento de color naranja, el Licopeno de color rojo, la Xantofila de color amarillo y los
Cloroplastos que presentan un pigmento de color verde y cuya funcin principal es
realizar la fotosntesis.

III.MARCO TEORICO:
Siguiendo con el tema de aclarar algunos conceptos, en el idioma ingls una palabra se
puede traducir en 5 a 6 trminos diferentes al espaol, esto es lo que pasa con el concepto
de ORGANELA. Una ORGANELA ( ORGANELO o ELEMENTO CELULAR ), es un cuerpo
membranoso interno, rodeado por el CITOSOL, debe diferenciarse de los orgnulos (
o MICROCUERPOS ), pues estos ltimos no poseen membrana. Debe aclararse este asunto
de que no todo lo que se encuentra en el interior de una clula se
llama ORGANELA u ORGANELO. Las ORGANELAS son estructuras membranosas y hay otras
estructuras que no tienen membrana pero que se llaman MICROCUERPOS, adems muestran
una diferencia de tamao muy notable al compararla con las ORGANELAS.
 LISOSOMAS:

Los lisosomas son orgnulos relativamente grandes, formados por el retculo

endoplasmtico rugoso y luego empaquetadas por el complejo de Golgi, que
contienen enzimas hidrolticas y proteolticas que sirven para digerir los materiales de
origen externo (heterofagia) o interno (autofagia) que llegan a ellos. Es decir, se
encargan de la digestin celular.1 Son estructuras esfricas rodeadas de membrana
simple. Son bolsas de enzimas que si se liberasen, destruiran toda la clula. Esto implica
que la membrana lisosmica debe estar protegida de estas enzimas. El tamao de un
lisosoma vara entre 0,1-1,2 m.

Cuando se forman, los lisosomas se cargan con enzimas de funcin hidroltica; este ti
po de lisosoma, conocido como LISOSOMA PRIMARIO, puede ser el que tiene una
apariencia homognea en su interior (1). a partir de este, el lisosoma se encarga de degradar
la mayora de los tipos de molculas bioqumicas que hay en la clula.

Las otras formas (los LISOSOMAS SECUNDARIOS, como

el 2 y 3) son heterogneos y pueden recibir nombres variados como lisosomas con f
ormas mielnicas (4), cuerpos multivesiculares (5), o cuerpos residuales (6). estos tipos se
producen por efecto del almacenamiento en el lumen dellisosoma de sustancias que no
pueden degradarse ms o por la transformacin en lisosomas de otro tipo de orgnulos
como son losautofagosomas y los endosomas.

Sus funciones son: acumular agua aumentando el volumen de la clula sin

aumentar el tamao del citoplasma ni su salinidad; almacenar sustancias
energticas, txicas, venenos, sustancias de desecho, etc. Constituyen el medio de
transporte de sustancias entre orgnulos del sistema endomembranoso. En clulas
animales existen adems vacuolas fagocticas, pinnocticas y pulstiles.
Entre las inclusiones, las funciones ms importantes son almacenar resinas o ltex.
Enzimas ms importantes del lisosoma:
Lipasas, que digiere lpidos;
Glucosidasas, que digiere carbohidratos;
Proteasas, que digiere protenas;
Nucleasas, que digiere cidos nucleicos.
 LOS CLOROPLASTOS:

los cloroplastos, constituyen los organelos ms conspicuos de una clula vegetal. Los
cloroplstos estn rodeados por una doble membrana, con una estructura interna
constituida por un sistema de membranas, separadas por una matriz de naturaleza
proteica llamada estroma, poseen DNA con una estructura similar al encontrado en
clulas procariticas, as como ribosomas, embebidos en el estroma.

Su interior (estroma) est recorrido por membranas internas llamadas tilacoides. En

estas membranas se encuentran los pigmentos fotosintticos y los citocromos
transportadores de electrones para efectuar la fase luminosa de la fotosntesis; en el
estroma se realizan las reacciones del ciclo de Calvin para fijar el CO2 en la fase oscura
de la fotosntesis.

PLASTIDIOS

Son parte caracterstica de las clulas vegetales. Cada Plastidios est rodeado por una
membrana doble. Dentro de esa doble membrana tenemos el estroma que es la
substancia acuosa contenida en el Plastidios. Los Plastidios se clasifican de acuerdo al
tipo de pigmento que contengan.
Pigmentos que poseen los plastidios:
Por los pigmentos que poseen los plastidios, son de las siguientes clases:
-Cloroplastos: (cloros = verde) : plastidios de color verde, por llevar un pigmento verde
llamado clorofila.
-Cromoplastos: (cromo = color) plastillos, pigmentos colorantes como el
pigmento rojo (lecopeno) amarillo(xantofila) anaranjado (caroteno). Son los que dan
color a las flores y a las frutas de muchas plantas.
-Leucoplastos: (leucos = blancos) plastidios incoloros que sirven como centro de
almacenado de ciertos materiales de citoplasma como en el caso
del almidn (amiloplastos).
-Oleoplastos: Plastidios incoloros y almacenado de gotitas de aceitestales
como man, semillas de higuerilla, etc.

LAS MITOCONDRIAS

son uno de los orgnulos ms conspicuos del citoplasma y se encuentran en casi todas
las clulas eucariticas. Observadas al microscopio electrnico de transmisin (M.E.T.),
presentan una estructura caracterstica: la mitocondria tiene forma alargada u oval de
0,5 a 1 m de dimetro, y entre 1 m y varias micras de longitud y est envuelta por dos
membranas distintas, una externa y otra interna (la que presentan crestas
mitocondriales), muy replegada.
 Las mitocondrias son los orgnulos
celulares encargados de suministrar la
mayor parte de la energa necesaria para la
actividad celular, actan por tanto,
como centrales energticas de la clula y
sintetizan ATP a expensas de
los carburantes metablicos (glucosa,
cidos grasos y aminocidos). Sin
mitocondrias, los animales y hongos no
seran capaces de utilizar oxgeno para
extraer toda la energa de los alimentos y
mantener con ella el crecimiento y la
capacidad de reproducirse. Los organismos
llamados anaerobios viven en medios sin
Mitocondria vista con M.E.T. oxgeno, y todos ellos carecen de
mitocondrias.
La ultraestructura mitocondrial est en relacin con las funciones que desempea: en la
matriz se localizan los enzimas responsables de la oxidacin de los cidos grasos, los
aminocidos, el cido pirvico y el ciclo de krebs.
 IV- MATERIALES:

Clulas de epitelio bucal Hoja de Elodea (Cloroplastos) Aj amarillo (Xantofila)

Zanahoria (caroteno) Papa (Amiloplastos) Betarraga (Antocianina)

Solucin fisiolgica Lugol

Lamina cubre y porta objeto

Bistur Pinza en punta

V. PROCEDIMIENTO:

A) OBSERVACION DE MITOCONDRIA EN EPITELIO BUCAL:

1. Con una lmina limpia y mediante un raspado suave obtener una muestra de la mucosa
bucal,
2. Realizar un frotis extendiendo la muestra sobre otra lmina,
3. Dejar secar la lmina con la muestra al medio ambiente,
4. Cubrir la muestra con Verde Janus durante 5 minutos,
5. Eliminar el exceso de colorante y dejar secar al medio ambiente,
6. Observar al microscopio con objetivos de 10x y 40x

B) OBSERVACION DE LISOSOMAS en PROTOZOARIOS

1. Colocar en una lmina dos gotas cultivo de protozoarios y una gota del colorante rojo
neutro, mezclar dejar reposar 2 minutos..
2. Cubrir con una laminilla y observar el preparado a 10x y 40x . Visualizar en el interior de los
Paramecium a los lisosomas .

C).OBSERVACION DE PLASTIDOS EN VEGETALES:

CLOROPLASTOS: Se localizan en las hojas debajo de la epidermis superior.

1. Seleccionar una hoja joven de Elodea, colocarla sobre una gota de agua en una lamina
portaobjeto.
2. Cubrir la muestra con una laminilla.
3. Observar al microscopio con objetivo de menor y mayor aumento.

CROMOPLASTOS: Son organelas coloreados y presentan formas variadas (redondas,

elpticas, o aciculares).

1. Realizar cortes finos de zanahoria, aj amarillo, betarraga sobre una lmina portaobjetos
2. Colocar una gota de agua sobre el corte.
3. Cubrir con una laminilla.
4. Observar al microscopio con objetivos de menor y mayor aumento.

AMILOPLASTO: Son organelas que contienen almidn como sustancia de reserva.

1. Sobre una lmina portaobjetos colocar una gota de Lugol.

2. Agregar un corte transversal fino de papa .
3. Cubrir con una laminilla.
4. Observar al microscopio con objetivo de menor y mayor aumento.
VI. PROTOCOLO:

VIII. CUESTIONARIO:

1. Qu son las patologas mitocondriales?.

Las enfermedades mitocondriales son el resultado del fracaso en el funcionamiento de las

mitocondrias, a su vez, partes constitutivas de las clulas del organismo, cuya funcin es la
de generar la energa necesaria para mantener la vida y para el desarrollo y correcta
funcin de los rganos y sistemas. Cuando fallan, se genera cada vez menos energa en el
interior de la clula, produciendo lesin o muerte celular. Si este proceso se repite en todo
el cuerpo, los sistemas completos comienzan a fallar y la vida de la persona que lo sufre
est en grave riesgo. Esta enfermedad afecta principalmente a los nios, pero los brotes en
adultos se estn volviendo cada da ms frecuente. Las enfermedades de las mitocondrias
parecen ocasionar el mayor dao a las clulas del cerebro corazn, hgado, msculo, rin,
y a los sistemas endocrinos y respiratorios.
Miopata mitocondrial sin afectacin ocular
Oftalmopleja externa progresiva (OEP)
Encefalomiopatas mitocondriales
Sndrome de Kearns-Sayre (SKS)
Epilepsia mioclnica con fibras rojo rasgadas (MERRF)
Miopata mitocondrial con acidosis lctica y episodios similares a ictus (MELAS)
Neuropata con ataxia y retinitis pigmentosa (NARP)
Miopata con miocardiopata mitocondrial (MCM)
Enfermedad de Leber
Sndrome de Leigh
2. Qu relacin tiene los lisosomas y la autofagia?

Los Pre-lisosomas formados de novo en el citoplasma de una membrana en forma de copa

se llaman phagophore. Los bordes del phagophore se expanden cada vez ms hasta
alcanzar su forma ms esfrica, encerrando las piezas engullidas de citoplasma con lo que
pudiera encontrarse dentro, y dando lugar a una vescula de doble membrana. Farquhar
observ estas vesculas cerradas, que son conocidas como autofagosomas. Los
autofagosomas toman las molculas daadas u orgnulos y llevan esa carga a los
lisosomas. Cuando de Duve observ los autofagosomas, se dio cuenta de que las clulas
podran degradar sus propios componentes y nombr al proceso autofagia .Por lo tanto
podemos decir que la relacin que existe entre los ellos es que las dos van estar
involucradas en proceso de descomposicin, eliminacin, reparacin de las organelas .

3. Por qu las mitocondrias fijan el colorante verde de Janus?.

Para evidenciar mitocondrias es utilizado Verde Jano al 0,01%. Este producto al

reducirse vira del azul al verde brillante. Es un marcador especfico porque al colocarlo en
presencia de mitocondrias, emplea en su reduccin los electrones de la cadena respiratoria
que se encuentra emplazada en la membrana mitocondrial interna y las colorea de verde
brillante.
Las mitocondrias son teidas con el tinte Janus green B. Despus de la tincin, la
mitocondria tie azul-verdosa, la cual es el color del tinte en su forma oxidada; en su forma
reducida, el tinte es incoloro. ElJanus green se mantiene en estado oxidado por el sistema
de oxidasa citocromo de la mitocondria.
Esto sucede por la reaccin de oxidacin que sufre la mitocondria (especialmente su
sistema decitocromo oxidasa), al contacto con el verde de Janus, que se es un colorante
monoazoico que (en comparacin con el oxgeno del ambiente) tiende a oxidar
especialmente a las mitocondrias debido a la gran cantidad de electrones presentes en
ellas.

4.Qu funcin cumplen los plastidios en las clula?.

Los plastos, plstidos o plastidios son orgnulos celulares eucariticos, propios de las
plantas y algas. Su funcin principal es la produccin y almacenamiento de importantes
compuestos qumicos usados por la clula. Usualmente, contienen pigmentos utilizados en
la fotosntesis, aunque el tipo de pigmento presente puede variar, determinando el color
de la clula.
IX.BIBLIOGRAFIA
>http://misdeberes.es/tarea/121728

>http://respuestas.wikia.com/wiki/La_funcion_de_los_plastidios

>http://www.aepmi.org/publico/patologias.php

>https://cajalesygalileos.wordpress.com/2012/12/13/los-lisosomas-y-la-autofagia-
scitable/

>http://elprofedebiolo.blogspot.com/2010/02/organelas.html

>http://es.wikipedia.org/wiki/Lisosoma

>http://recursos.cnice.mec.es/biosfera/alumno/2bachillerato/La_celula/contenidos11.htm

>http://www.lookfordiagnosis.com/mesh_info.php?term=Lisosomas&lang=2

>http://es.slideshare.net/sathycrlovehandel/cloroplastos-y-otro-plastidios