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Revista Colombiana de Materiales N 5. pp 56-63

Edicin Especial Artculos Cortos

Article March 2014

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4 authors, including:

Jose Mina Jos Pearanda Armbrecht

Universidad del Valle (Colombia) Georg-August-Universitt Gttingen
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 Revista Colombiana de Materiales N 5. pp 56- 63

Edicin Especial Artculos Cortos

DESARROLLO DE APSITOS DE QUITOSANO PARA SU POSIBLE APLICACIN

EN LA REGENERACIN DE TEJIDO EPITELIAL
Primera parte: Caracterizacin mecnica

Luisa Fernanda Surez 1*, Javier Tulande 1, Jos H. Mina2 , Jos Pearanda3
1: Estudiantes de Ingeniera de Materiales, Universidad del Valle, Cali, Colombia
2: Ingeniero de Materiales Ph.D, Universidad del Valle, Cali, Colombia
3: Qumico, Universidad del Valle, Cali, Colombia

*Contacto: luisasuarez3741@gmail.com

RESUMEN

En la actualidad una de las aplicaciones mdicas ms innovadoras del quitosano (CHT), es la de

apsitos que estimulen la regeneracin de la piel. La naturaleza adhesiva de este biopolmero,
junto con su carcter bactericida, antifngico y su permeabilidad al oxgeno son propiedades
muy importantes asociadas con el tratamiento de quemaduras. Sin embargo, la baja resistencia
mecnica y la variacin de algunas caractersticas, bajo condiciones hmedas limitan su uso en la
ingeniera de tejidos. Por lo anteriormente planteado, el propsito de esta investigacin es
mejorar las propiedades mecnicas de pelculas de CHT obtenidas por el mtodo de evaporacin
lenta, al plastificarlas con glicerina, y evaluar su comportamiento a una humedad relativa de 70
5 % usada para el acondicionamiento del material.

Palabras Clave: Apsitos, quitosano (CHT), biopolmero, quemaduras, regeneracin de tejidos

ABSTRACT

Currently one of the most innovative medical applications of chitosan (CHT) is the dressing that
stimulates skin regeneration. The adhesive characteristic, as well antibacterial, antifungal, oxygen
permeability properties of the biopolymer are important characteristics associated with the
treatment of human burns. However, the low strength and variation of some characteristics under
wet conditions limit their use in tissue engineering. The purpose of this research is improving the
mechanical properties of CHT films obtained by the slow evaporation method. The chitosan was
plasticized with glycerin and the behavior was evaluated at a relative humidity of 70 5% used
as conditioning ambient.

Keywords: Dressings, Chitosan (CHT), Biopolymer, Burns, Tissue regeneration

1. INTRODUCCIN

Durante la ltima dcada, en el rea de la ingeniera biomdica se han desarrollado diferentes

investigaciones a partir del creciente inters en el estudio de la ingeniera de tejidos por su gran
campo de aplicacin, entre ellos el desarrollo de pelculas polimricas en usos mdicos; en este
campo se encuentra la utilizacin de apsitos para la recuperacin de tejidos daados. As mismo,
se ha observado en el mundo, cientos de miles de pacientes requieren hospitalizacin por
quemaduras de superficiales. El tratamiento convencional ms utilizado es el uso de injertos de

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Desarrollo de apsitos de quitosano para su posible Luisa Fernanda Surez, Javier Tulande,
aplicacin en la regeneracin de tejido epitelial. Jos H. Mina Jos Pearanda.
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piel. Sin embargo, estos injertos tienen diferentes problemas, que han llevado a la investigacin
de una alternativa con mayor disponibilidad y con propiedades similares a la piel natural, dando
como resultado el uso de materiales biosintticos [1].

El CHT es un polmero natural que se obtiene a partir de la desacetilacin qumica o enzimtica

de la quitina que forma parte de la estructura de soporte de numerosos organismos vivos, es un
biopolmero lineal altamente insoluble en agua, tiene alto peso molecular y su estructura porosa
favorece la elevada absorcin de agua [2,]. Los apsitos a base de CHT son una alternativa de
solucin de gran inters, gracias a las propiedades nicas que presenta el CHT, como la
biodegradabilidad, no toxicidad, efecto antibacteriano y biocompatibilidad que al momento de su
aplicacin como apsitos permiten cubrir y proteger la herida manteniendo un nivel de humedad
adecuado[3]. Adems se puede moldear de diferentes formas, siendo una opcin econmica,
accesible, y fcil de preparar. Segn lo han reportado Ishihara et al. 2001 [4], sin embargo, la
baja resistencia mecnica y el cambio de algunas caractersticas y/o propiedades, bajo
condiciones hmedas, limitan su uso en la ingeniera de tejidos. Muchas de las propiedades de
estas pelcula dependen de varios parmetros tales como el peso molecular y grado de
desacetilacin, el cido orgnico utilizado y la posible presencia de plastificante [5], que es una
de las alternativas utilizadas para mejorar la flexibilidad y capacidad de procesamiento,
disminuyendo la resistencia a la tensin, dureza, etc., debido a que genera cambios en el volumen
libre que favorecen la movilidad de las cadenas polimricas. El glicerol o glicerina ha sido el
plastificante ms utilizado durante mucho tiempo para diferentes aplicaciones gracias a su buena
eficiencia, gran disponibilidad, la baja exudacin y por su poder humectante e hidratante ha sido
utilizado para la preservacin de injertos de piel, este plastificante en su informacin gentica,
adems de sus propiedades antivirales y antibacterianas, posee grandes caractersticas que
permiten la rpida y homognea regeneracin de piel sobre quemaduras superficiales [5,6].

El objetivo de este estudio es mejorar las propiedades mecnicas de pelculas de quitosano

obtenidas por el mtodo de evaporacin lenta, con el uso de glicerina como plastificante para
obtener la composicin que presente el mejor comportamiento mecnico al momento de su
aplicacin como apsitos que estimulen la regeneracin y/o recuperacin de la piel daada por
quemaduras superficiales.

2. METODOLOGA

2.1. Materiales

El Quitosano (Poly(D-glucosamine) Deacetylated chitin) empleado present un grado de

desacetilacion 75%, en forma de polvo blanco fue adquirido en Sigma-Aldrich, la Glicerina
utilizada como plastificante fue grado analtico con un 99,7% de pureza, de YEQUIM (Bogot
D.C. Colombia), el cido actico Glacial (CH3COOH) 100% anhidro de MERCK.

2.2. Diseo experimental

Se utiliz el modelo de superficies de respuesta para evaluar la influencia de la incorporacin de

CHT y glicerina en las propiedades mecnicas de las pelculas (esfuerzo mximo a la tensin,

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mdulo de elasticidad y porcentaje de elongacin a la rotura). El intervalo en el que se estudi

cada componente fue de 0.5 a 2% para el CHT y de 0 a 7% para la glicerina, estos valores fueron
elegidos tomando como base los resultados de investigaciones realizadas con anterioridad [7-9].
Con ayuda del paquete estadstico Minitab 16, se construy y analiz el modelo de superficie
de respuesta para las variables anteriormente definidas.

2.3. Obtencin de pelculas plastificadas con glicerina

2.3.1. Preparacin de la disolucin basada en CHT

Para la elaboracin de las pelculas se prepararon disoluciones de CHT en un intervalo de 0 2%

p/v en cido actico diluido al 1% v/v; agitando la mezcla durante 6 horas en una plancha de
agitacin magntica.

2.3.2. Preparacin de la disolucin de CHT plastificada

A partir de las disoluciones basadas en CHT previamente preparadas, se elaboraron nuevas

disoluciones agregando como aditivo plastificante glicerina (C3H8O3, Fisher, 99.7% de pureza)
en un intervalo de 0 -7% v/v y agitando nuevamente por un intervalo de tiempo de 3 horas.

2.3.3. Formacin de pelculas flexibles

Para la formacin de pelculas, se usaron moldes de tefln con cavidades que tenan dimensiones
de 25x100x5 mm, a cada cavidad se le incorporaron 12.7 mL de la disolucin de CHT y
glicerina; luego se dejaron 4 das secando a temperatura ambiente, dentro de una campana de
vidrio con el fin de protegerlas contra impurezas y/o elementos ajenos presentes en el ambiente
que pudieran entrar en contacto con la pelcula en estado lquido, y 3 das en el interior de un
horno a 40C para que se formaran las pelculas por evaporacin lenta del disolvente, finalmente
las pelculas conformadas fueron retiradas cuidadosamente de los moldes y acondicionadas a una
humedad relativa de 70 5% y una temperatura de 25C.

2.4. Espectroscopia de Infrarrojo con Transformada de Fourier (FTIR)

Los espectros de infrarrojo se obtuvieron en un espectrmetro de Infrarrojo con Transformada de

Fourier marca NICOLET 6700 FT-IR. La muestra de CHT comercial fue mezclada con KBr y
prensadas para formar una pastilla la cual fue analizada en modo de transmisin en el intervalo de
4000 450 cm-1, la glicerina en estado liquida fue analizada por medio de una celda para lquidos
y la pelcula de 0.189% de CHT y 1.25% de glicerina en modo de transmisin en el intervalo de
4000 450 cm-1.

2.5. Propiedades mecnicas

Se determinaron las propiedades mecnicas a tensin de las pelculas elaboradas; la

caracterizacin del material fue realizada cuando este se acondicion a una humedad relativa de
70% 5%. La prueba se llev a cabo en una mquina universal de ensayos mecnicos Tinius
Olsen modelo H50KS equipada con una celda de carga de 1000 N y operada a una rapidez de

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desplazamiento de mordazas de 5 mm/min hasta la fractura de la muestra y una distancia entre

mordazas fue de 50 mm de acuerdo con lo establecido en la norma ASTM D88212 [11]. Se
registraron datos de carga y deformacin. La resistencia a tensin se calcul como la carga
mxima dividida entre el rea transversal de la probeta, mientras que el mdulo de elasticidad a
tensin fue determinado como la pendiente en la zona elstica de la curva esfuerzo deformacin.

3. RESULTADOS Y DISCUSIN

3.1. Anlisis FT-IR

Figura 1. Espectros FT-IR de a) CHT b) Pelcula de 0.189CHT -1.25GLI y c) Glicerina.

Se realiz la caracterizacin de espectroscopia infrarrojo a las pelculas de quitosano

plastificadas, adems del quitosano puro y la glicerina con el fin de analizar el efecto de la
incorporacin de la glicerina como plastificante en las pelculas de quitosano, en la Figura 1 (a) y
(b) correspondiente al quitosano puro y la glicerina podemos observar la regin tpica de bandas
de sacridos entre aproximadamente 900 y 1200 cm-1 que se pueden atribuir a los modos de
vibracin de los enlaces C-O-C y C-C y el modo de flexin de los enlaces C-H [12], en el
espectro de infrarrojo del Quitosano puro (Figura 1(a)), podemos encontrar diferentes bandas
caractersticas del material, una banda entre 3200 y 3600 cm-1 que se atribuye a los enlaces NH
(3408,21 cm-1) y al estiramiento en tensin de los enlaces OH (3444,86 cm-1) con mayor
predominacin, la definicin de esta banda es aportada en cierta medida por el enlace de
hidrgeno de las molculas de quitosano [13] y las banda que se encuentra alrededor de los
2918,29 cm-1 y 2877,79 cm-1 son caractersticas del estiramiento de los enlaces C-H de forma
asimtrica y simtrica respectivamente, en la banda alrededor de 1647,2 cm-1 se observ la banda
correspondiente para el estiramiento en tensin del enlace C=O, otra de las bandas caractersticas
es la que se identifica alrededor 1587,41 cm-1 que se atribuye al estiramiento en tensin del
enlace C-C [12, 14]. En el espectro infrarrojo de la pelcula de quitosano plastificada con
glicerina (Figura 1(b)) se observa la banda caracterstica al grupo amina alrededor de 1600 cm-1,
adems observamos diferentes desplazamientos de las bandas caractersticas del quitosano debido
a que las molculas de glicerina desplazan las unidades quitosano y se introduce en el interior de
estas, aumentando la probabilidad de formacin de enlaces de hidrogeno entre molculas [15].

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3.2. Propiedades mecnicas

Las propiedades mecnicas de las pelculas de quitosano plastificadas y no plastificadas se

muestran en la Tabla 1. A partir de los resultados obtenidos se logra evidenciar que el quitosano
sin plastificar forma pelculas rgidas debido a que presenta alta resistencia a la deformacin,
como se evidencia en el grafico esfuerzo vs deformacin de las pelculas de CHT sin glicerina
(Figura 2(a)). En donde se puede apreciar que se requiere de grandes esfuerzos para lograr
deformar la probeta, lo cual da indicios de que el comportamiento mecnico de estas pelculas
corresponde a un material rgido y frgil; Adems, se puede apreciar que el valor de resistencia a
tensin aumenta con el incremento de la concentracin de quitosano. Por otro lado en la Figura
2(b) se observa la curva esfuerzo vs deformacin, para las pelculas de CHT mezclado con
glicerina; donde se observa como el esfuerzo a la ruptura disminuy considerablemente, mientras
que la deformacin aument notablemente. Todo ello indica que el material al estar plastificado
reduce su rigidez y aumenta su elasticidad, tal y como lo demuestra el comportamiento mecnico
obtenido, resultados similares a los reportados por [9, 13] esto se debe principalmente a que la
inclusin de plastificante interfiere en las interacciones entre cadenas favoreciendo su movilidad
permitiendo aumentar la elongacin de las pelculas y mejorando as su flexibilidad [15].

Tabla 1. Propiedades mecnicas (resistencia a la traccin, mdulo de elasticidad y el

alargamiento a la rotura) de las pelculas de quitosano sin plastificar y plastificadas con glicerina.
CORRIDA %CHT %Glicerina Mdulo de E. Resist. Tensin %Deformacin
(MPa) (MPa) (%)
1 0,2 3,5 0,723 0,379 48,07%
2 1,25 0,0 434,710 9,670 11,46%
3 2,0 0,0 366,628 12,482 17,95%
4 1,25 3,5 0,448 0,138 24,21%
5 1,25 3,5 0,672 0,127 15,44%
6 1,25 3,5 0,401 0,117 24,86%
7 0,5 0,0 27,222 1,958 12,03%
8 1,25 3,5 0,197 0,071 30,95%
9 2,3 3,5 3,381 0,564 18,69%
10 1,25 8,4 0,040 0,037 67,07%
11 1,25 3,5 0,153 0,062 31,93%
12 0,5 7,0 0,125 0,073 48,12%
13 2,0 7,0 0,434 0,086 19,11%

En las curvas de las Figuras 2(a) y 2(b) se evidencia una deformacin no lineal cuando las
pelculas son sometidas a una carga, esto se debe a que las cadenas polimricas comienzan a
desenroscarse hasta quedar extendidas. Posterior a esto, las pelculas continan con una
deformacin elstica hasta donde los enlaces empiezan a estirarse y ocurre un encuellamiento
donde el rea se disminuye, hasta la ruptura total de sus enlaces [8, 10].

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Figura 2. Grfica de esfuerzo vs deformacin para a) pelculas de quitosano sin plastificar y b)

pelculas de quitosano plastificadas con glicerina.

En la Figura 3 se muestran los grficos de superficies de respuesta y de contorno relacionados

con las propiedades mecnicas (resistencia a la tensin y deformacin) de las pelculas de CHT y
glicerina en estas es posible apreciar de mejor manera el comportamiento mecnico antes
descripto a partir de las curvas de esfuerzo vs deformacin. En el caso de la resistencia a la
tensin se observa una considerable disminucin de esta a medida que aumenta el porcentaje de
glicerina, sin embargo porcentajes de glicerina entre 1.75% y 6.1% generan los valores de
resistencia a la tensin ms bajos. Los mejores valores de resistencia a la tensin se obtienen con
un alto contenido de CHT y bajo contenido de glicerina. Caso contrario ocurre para la
deformacin donde se obtienen mayores valores de esta a medida que se disminuye el contenido
de CHT y se aumenta el contenido de Glicerina.

Figura 3. Superficies de respuesta y de contorno de las propiedades mecnicas de pelculas de CHT y

glicerina.

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4. CONCLUSIONES

Se obtuvieron pelculas transparentes, a partir del uso de las disoluciones de quitosano

plastificadas con glicerina; las cuales presentaron diferentes propiedades mecnicas que fueron
fuertemente dependientes del contenido de glicerina, encontrndose que en la medida que se
increment dicho porcentaje se mejoraron las propiedades de flexibilidad de las pelculas con
bajos mdulos de elasticidad y resistencias a tensin en el material. Esta deformacin alcanzada
por la pelcula es directamente proporcional a la alta concentracin de glicerina e inversamente
proporcional a la resistencia a la tensin, lo que se evidencio en la caracterizacin FTIR donde se
observ el efecto de la glicerina como plastificante al desplazar el cido actico promoviendo la
formacin de enlaces de hidrgeno con los grupos amina.

5. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

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