Tfg

Artculo 3

Functional and Structural Characterization

of P[19] Rotavirus VP8* Interaction with
Histo-blood Group Antigens

se ha demostrado que otras cepas que infectan tpicamente a otros animales pueden infectar
tambin a humanos como es el caso de p 19 que suele infectar a cerdos.

P humano [19] es un raro genotipo P de origen porcino. Basado en el anlisis filogentico de

VP8 * secuencias, P [19] se clasific en el P [II] genogroup, junto con P [4], P [6], y P [8], que se
ha informado de interactuar con HBGAs en Una forma dependiente del genotipo. En este
estudio, se exploraron las caractersticas funcionales y estructurales de P [19] VP8 * interaccin
con HBGAs. P [19] VP8 * mostr vinculante A-B, y O-tipo de muestras de saliva, as como la
saliva de los no secretores. Esto implica que P [19] tiene el potencial de propagacin entre los
seres humanos con un amplio rango de unin. Debe prestarse mucha atencin a la evolucin y
la prevalencia de P [19] RVs. Adems, hemos resuelto la estructura de P [19] VP8 *. La
superposicin de la estructura indic que P [19] puede unirse a otros oligosacridos o ligandos
utilizando potenciales sitios de unin, lo que sugiere que la investigacin adicional de los
factores especficos de unin celular est garantizada.
VP4 puede ser escindido por proteasa para producir VP8 * N-terminal y VP5 * C-terminal (6).
VP8 * incluye la cabeza VP4 y se informa que se unen a la superficie celular de glicanos
esenciales para la invasin celular (7). La capacidad de un virus para invadir clulas husped es
crucial para su replicacin, tropismo del husped y patogenicidad. Particularmente, VP8 * es el
dominio ms variable. Se inform que las protenas VP8 * de las RVs sensibles a sialidasa
interaccionaban con cidos silicos (Sia) (8); Sin embargo, la mayora de RVs animales y casi
todos los RVs humanos eran insensibles a la sialidasa (9).

Se observ que muchas de las cepas de RVA insensibles a sialidasa interactan con Sia en sitios
subterminales de receptores de glicoprotenas (10). Recientemente, se ha informado que los
antgenos del histo-grupo sanguneo (HBGAs) son factores de unin para RVs humanos
interactuando con VP8 * (11, 12). Los HBGA son un grupo de carbohidratos presentes en las
superficies de glbulos rojos y epitelios mucosos y como oligosacridos libres en saliva, sangre
y leche (13). Los estudios previos realizados mediante ensayos de unin de oligosacridos y
saliva mostraron que P [4] y P [8] se unieron a Lewis b (Leb) y H1, mientras que P [6] slo
reconoci H1 (11, 14, 15). P [11] mostr obvia vinculante a tipo 1 / tipo 2 precursores (16, 17].
Adems, P [9], P [14] y P [25] todos vinculados a un tipo HBGA (A-HBGA) (18). Utilizando la
diferencia de transferencia de saturacin de resonancia magntica nuclear (STDNMR), DS-1 P
[4], RV-3 P [6], ST-3 P [6], y HAL1141 P [14] RVs
Se demostr que se unen a A-HBGA, mientras que WaP [8] no (19). Adems, la protena VP8 *
de Waalso tampoco mostr unin a H1 oLos rotavirus son la principal causa de gastroenteritis
aguda en nios pequeos y animales de todo el mundo

Anotacin sobre p 19 segn el artculo infecta a humanos los grupos de P2 pero al infectar
principalmente a cerdos tendra que estar en el grupo P3
DISCUSIN
P [19] RVs se han informado espordicamente en los seres humanos. Tras el informe de Mc323
y Mc345, un rotavirus humano G9P [19] aislado (RMC321) con caractersticas de rotavirus
porcino se inform despus de un brote de gastroenteritis infantil en la India (38]. Adems, se
detectaron RVs con nuevos linajes de G3, G5, G9 y G26 en nios con diarrea aguda en Asia (23,
39).

Adems, en Italia se identific una rara infeccin por G3P [19] RV en humanos que mostr una
alta identidad de secuencia con G3P [19] de Asia (40). En los cerdos, G3P [19], G4P [19], y G9P
[19] tambin se detectaron en Tailandia (4, 41), y G3P [19] tambin se encontr en China
(datos no publicados de nuestro laboratorio). El anlisis secuencial ha indicado que todos los P
[19] RV humanos son de origen porcino.

En este estudio, P humano [19] Mc345 mostr vinculante a la saliva muestras similares a la de
porcino P [19], lo que es coherente con un informe anterior que Mc345 era de origen porcino
(26). A partir de la alineacin de secuencias de fragmentos de ncleo VP8 *, las dos secuencias
mostraron una identidad del 95,6%, y slo 7 aminocidos eran diferentes, como se revel en la
estructura Mc845 VP8 * (datos no mostrados). Estos aminocidos no se localizaron en los
putativos sitios de unin al ligando, tambin consistentes con el ensayo de unin a la saliva. P
[19] RV se clasifica en P [II], junto con P [4], P [6], y P [8] RVs, que prevalecen en los seres
humanos y se inform de interactuar con HBGAs (13]. P [4] y P [8] RV VP8 * se unieron a los
tipos de saliva A, B y O de los secretores y no se unieron a la saliva de los no secretores.

Mientras tanto, P [6] tambin reconoci A, B, y O tipos de saliva de los secretores con
relativamente baja afinidad de unin. En este estudio, P [19] RV VP8 * unido a A, B y O tipo
saliva muestras independientemente de la secretor estado, lo que implica que P [19] puede
tener un amplio rango de unin. Dado que se ha demostrado que todos los P [19] RVs
humanos reportados son de origen porcino, se sugiere que P [19] puede infectar a los seres
humanos espordicamente y an no tener la capacidad de propagacin entre los seres
humanos.

Sin embargo, basndose en patrones de unin a la saliva ms amplios que los de otros
genotipos P (11, 18), si los P [19] RV adquirieron la capacidad de cruzar la barrera de las
especies e infectar plenamente a los humanos, podra causar una prevalencia generalizada. ]
RVs lo hizo. Recientemente, una nueva variante del norovirus GII.17 (NoV) caus un aumento
significativo de los brotes de gastroenteritis aguda en China y otras regiones de Asia durante
2014 y 2015 (42), lo que pone de manifiesto la nocin de que un raro genotipo NoV humano
tiene el potencial de emerger como un Patgeno epidemiolgicamente importante.

Los raros GII.17 NoVs tambin mostraron buena unin en el ensayo de unin a la saliva
Pero no se unieron a los oligosacridos probados (42, 43). Esto no indica la necesidad de vigilar
la prevalencia y la evolucin
De P [19] VR en humanos y cerdos.

En nuestro anlisis de HBGAligandos especficos de P [19] RV, el P [19] VP8 * protenas no

mostraron ninguna unin obvia a cualquier oligosacridos sintticos en el ensayo de unin de
oligosacridos, mientras que P [4] y P [8] VP8 * mostr vinculante a H1 Y Leb, y P [6] unido a
slo H1. Ms tipos de oligosacridos u otros ligandos an necesitan ser explorados para
caracterizar completamente la especificidad de unin al receptor de P [19] RV. P [19] VP8 *
mostr un tpico pliegue tipo galectina (36) que fue ms similar a la de P [8]. La alineacin de la
estructura de P [19] VP8 * con otras estructuras resueltas VP8 * se presenta en la Tabla 2
Con valores de RMSD. Los valores reflejan la similitud estructural relativa, con un valor menor
que indica mayor similitud.

P [19] VP8 * comparte la mayor similitud estructural con P [8] y P [4], con valores de RMSD de
0,422 y 0,520, respectivamente. Esto es coherente con el anlisis filogentico basado en la
secuencia VP8 *, que clasific P [19] con P [4], P [8] y P [6] en el genogrupo II (18). Las
estructuras VP8 * de P [4] y P [8] se han resuelto, aunque
Sin ligar el ligando, de modo que los detalles de los sitios de unin al ligando permanecen
desconocido. La superposicin de la estructura de P [19] VP8 * en las de P [3], P [11] y P [14]
con ligandos mostr una falta de interacciones o impedimento estrico con los ligandos, lo que
puede proporcionar una base estructural para el Falta de unin a los oligosacridos en
El inmunoensayo enzimtico (EIA).

Adems, la comparacin de la superficie del potencial electrosttico revel las similitudes y

diferencias entre los diferentes genotipos P, lo que puede explicar en cierta medida los diversos
patrones de unin observados en los ensayos funcionales (11,12,16-18,36). Sin embargo, para
el sitio de unin potencial de P [19], la presentacin superficial de P [3] y Sia, P [14] y A, P [11] y
LNnT, y P [19] demostr que haba de hecho una cavidad En el sitio de unin potencial en P
[19] VP8 * (Figura 7), lo que sugiere que P [19] VP8 * puede unirse a algunos otros
oligosacridos o ligandos en el sitio. Estudios adicionales son necesarios para explorar los
factores de unin celular especficos para P [19] RVs.